PENGEMBANGAN INOKULUM UNTUK INDUSTRI FERMENTASI Pengembangan inokulum adalah proses yang - sangat mendasar sehingga culture yang

digunakan untuk inokulasi pada fermentasi harus memenuhi criteria berikut ini : 1. Inokulum harus sehat , aktif sehingga akan mengurangi lamanya waktu adaptasi pada proses fermentasi berikutnya. 2. Inokulum harus tersedia dalam jumlah volume yang besar agar menghasilkan inokulum dengan konsentrasi yang optimum. 3. Inokulum harus sesuai bentuk morpologi. 4. Inokulum harus bebas dari kontaminasi 5.Inokulum harus bisa bertahan untuk pembentukan produk. Untuk memenuhi kriteria inokulum yang disyaratkan maka yang sangat penting adalah pemilihan media kultur. Sesuai yang telah dibicarakan sebelumnya bahwa design untuk media produksi tidak ditentukan oleh kebutuhan nutrisi dari organism tetapi juga kebutuhan untuk pembentukan produk yang masing-masing. Pembentukan produk pada seed cultur (kultur pembenihan) bukan merupakan tujuan selama pengembangan inokulum sehingga media pembenihan mungkin berbeda dengan media produksi. Banyaknya inokulum biasanya 3 sampai 10% dari volume media, sehingga dimulai dari stock culture diulanjutkan dengan pembuatan inokulum dengan pengembangan secara bertingkat agar dapat menghasilkan biomasa yang cukup untuk diinokulasi pada fermentor produksi. Media inokulum biasanya nutrisinya lebih sedikit dari media fermentasi khususnya level karbonnya . Table : Design inoculums media for growth of lactic acid bacteria by different authors

Composition

Medium RMS (De Man,

Medium LC (Rogos, 1951) 10.00* 0.03 10.00 6.00* 2.00 20.00 1 25.00 0.58 0.15 15

Medium SY (Cejka, 1961) 20.00 2.50* 100.00* 15

Peptone/ Trypticase*(gr.) Meat extract /FeSO4 7H2O* Yeast extract K2HPO4/KH2PO4* Diammonium citrate Glucose/Sucrose* Tween 80 (mL) Na-acetat MgSO4.7H2O MnSO4.4H2O Agar

1960) 10.00 10.00 5.00 2.00 2.00 20.00 1 5.00 0.58 0.25 15

Table : Inoculums development media and production media Composition (%) Glutamic acid (corynebacterium glutamicum) Inoculum Producti N Paraffin (C12(%) 4 on 10 Erythromycin ( P. chrysogenum) Inoculu m Producti on

10

C14) (NH4)2SO4 1.5 Corn Steep Liquor 0.1% K2HPO4/KH2PO4* 0.25/0.1 MgSO4./MnSO4. 0.05/0.002 FeSO4./ZnSO4. 0.03/0.002 CoSO4 0.001 Glyserol 0.02 CaCO3 2 Glukosa Corn Extract

0.5 sama sama sama sama sama 1

0.3

0.6

0.5 0.5 0.3

0.5 4 1

1. Pengembangan Inokulum untuk Fermentasi Menggunakan Yeast. Industri fermentasi menggunakan yeast yang paling penting adalah produksi ethanol dan biomasa atau Baker yeast. Secara komersial produksi Baker yeast termasuk pengembangan inokulum melalui beberapa stage sbb:

Stage 1 2 3 4 5

Lama (Jam) 24 9 11 11 11

waktu Berat awal Sel Berat akhir Sel (Kg) 0.20 190 1000 5000 25000 (Kg) 190 1000 5000 25000 125000

2. Pengembangan Inokulum untuk Fermentasi Menggunakan Bakteri Tujuan pengembangan inokulum untuk fermentasi menggunakan bakteri adalah untuk menghasilkan inokulum yang aktif yang memberikan sependek mungkin masa adaptasi. Lamanya masa adaptasi tidak hanya menambah waktu proses fermentasi juga konsumsi media menjadi lebih banyak untuk menjaga agar sel tetap hidup. Inokulum bakteri harus dipindahkan pada masa pertumbuhan logaritmik karena sel masih aktif untuk metabolisme.

11

Pengembangan Stage 1 Lama (Jam) 18 24

inokulum

untuk

produksi

bacitracin

menggunakan Bacillus subtilis disajikan Tabel berikut: waktu Kondisi cultur Shake flask volume 4 l

diinokulasi dengan stock kultur 2 3 4 6 (agar slant/agar plate) 4 l inokulum diinokulasikan dalam fermentor 750 l 750 l inokulum diinokulasikan dalam fermentor 6000 l 6000 l inokulum diinokulasikan dalam 120.000 l Pengembangan inokulum untuk produksi aceton dan butanol menggunakan Clostridium Acetobutylicum disajikan Tabel berikut Stage 1 Media Potato broth 2 Sugar = Kondisi cultur dextro Spora dari agar diinkubasi 24 jam 4%, 25 cc miring fermentor produksi

dipindah dalam media dan inokulum

(NH4)2SO4 = 5%, diinokulasikan dalam 600 cc K2HPO4= dan 3 6%/ Sama 0.2% media dan diinkubasi selama = 20-24 jam. 90 cc cultur diinokulasikan pada 3000 cc media dalam 4 5 Sama Erlenmeyer volume 4000cc. tetapi 3 l inokulum diinokulasikan CaCO3

gula = 6% dalam fermentor 25.000 l Sama dengan 25.000 l inokulum ditambah amoniak diinokulasikan dalam fermentor 300.000 2.500.000

12

l (0.5 3% inokulum)

3. Pengembangan Inokulum untuk Fermentasi Menggunakan Jamur