KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites

)

JULIANA LEIWAKABESSY

Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Teknologi Hasil Perairan

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Dra. Purwantiningsih S,MS

Judul Tesis Nama NRP

: Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites) : Juliana Leiwakabessy : C351070051

Disetujui, Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Linawati Hardjito, M.Sc Ketua

Dr. Ir. Sri Purwaningsih, M.Si Anggota

Diketahui,

Ketua Program Studi Teknologi Hasil Perairan

Dekan Sekolah Pascasarjana

Dr. Tati Nurhayati, S.Pi, MSi NIP: 19700807 1996 032002

Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc. Agr NIP: 19650814 1990 021001

Tanggal Ujian: 28 September 2011

Tanggal Lulus:

KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites)

JULIANA LEIWAKABESSY

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul “ Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo

(Bactronophorus thoracitesi)” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini

Bogor, September 2011

Juliana Leiwakabessy NRP C351070051

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Ambon pada tanggal 24 November 1969 dari ayah Melkias Leiwakabessy dan Ibu Maria Tapilatu. Penulis merupakan putri keenam dari tujuh bersaudara. Tahun 1989 penulis lulus dari SMU Negeri 2 Ambon dan pada tahun 1997 penulis lulus dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Jurusan Pengolahan Hasil Perikanan Universitas Pattimura. Pada tahun 2007, penulis melanjutkan pendidikan sekolah Pascasarjana (S2) di Teknologi Hasil Perairan IPB dengan sponsor BPPS. Penulis bekerja sebagai staf dosen di Jurusan Perikanan, Fakultas Peternakan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Papua sejak tahun 2003 hingga sekarang.

Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulisan ini tanpa mencantumkan atau menyebut sumber.@ Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor Tahun 2011 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang 1. penyusunan laporan. b. . a. Dilarang mengumumkan atau memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB. 2. Pengutipan tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB. penelitian. penulisan karya ilmiah. penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah.

........................ 22 3.................................3..................................... 21 3.............................................................3.............................................. 39 4.....................3......3 Analisis asam amino (AOAC 1994) ...............2............. 27 3.................3.......................... 6 2.....................................4 Kandungan asam lemak tambelo ....1.........3 Kandungan asam amino tambelo .. 22 3.............................................................................3.... 34 3..... 1...............................................................1 Rendemen (Hustiany 2005) .... 17 3 METODOLOGI PENELITIAN ............ 1................ 35 3.................................. 39 4...3.......................................... 39 4.................................. 39 4...................4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) ................................ 1......... 7 2.3.................................4 Manfaat Penelitian .......... 5 2............................................3 Prosedur Penelitian ......................................... 32 3......5 Antioksidan dan Pengukurannya ........ 42 4....3......................................3 Mineral ...................1................ 35 3....................3......................... 47 viii ...........................2 Bahan dan Alat .3................................ 21 3.......................................DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL .......3 Komposisi Kimia ..................................................2........................................................3............. 11 2...........................................................................2........................................3..4 Komponen Bioakif dari Moluska ..........1 Asam amino ...... xiv 1 PENDAHULUAN .................1 Waktu dan Tempat Penelitian ............. 22 3..........2................. 13 2..................................................... 30 3............................................................................... 38 4 HASIL DAN PEMBAHASAN .............................. 23 3...........................................2 Kandungan proksimat tambelo ................2 Perumusan Masalah ..........................................................3................1 Ekstraksi bahan aktif ......................... 1988) ...................2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat .... 26 3.................2 Uji proksimat (AOAC 2005) ......................................... 16 2.........................3......1.............................3..............2............ 9 2...............................1 Latar Belakang ...................................3.......................5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al....................................3.............................1 Tambelo ...............2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995)....................... 23 3....................5 Analisis mineral ........ xiii DAFTAR LAMPIRAN ...................................................2 Asam lemak ..... 32 3..........................................................................4 Fraksinasi senyawa antioksidan ...............................................................................3................3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995).............................3 Tujuan Penelitian ......................................................................3................ 1 1 2 3 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA ....1............. xii DAFTAR GAMBAR .....1 Rendemen daging tambelo .1 Penelitian tahap pertama ............................ 1...................3...................5 Kerangka Pemikiran .................... 1........................................... 5 2........1 Penelitian Tahap Pertama ...............................................2 Penelitian tahap kedua ....................................................

..................2......................................2................4................................................................................... 56 4.........1...6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo ............... 64 LAMPIRAN ............... 71 ix .......................... 63 DAFTAR PUSTAKA ....4 Fraksi ekstrak terpilih ............5 Kandungan mineral tambelo ........2..............2 Penelitian Tahap Kedua ........................5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo .....................................2..2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo ..................................................2....................3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo .................................................................. 52 4...............................2...............2................ 57 4................................... 58 4............. 49 4............................................. 52 4..............1 Rendemen ekstrak tambelo .............. 60 5 SIMPULAN DAN SARAN .......7 Identifikasi senyawa fraksi terpilih ............................. 52 4.......................................................... 54 4........................

...........................................................DAFTAR TABEL Halaman 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh ........................................................................................... 47 6 Komposisi asam lemak ekstrak kasar tambelo ........................................................ 39 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia tambelo ... 50 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo .. 43 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo .................................... 52 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ................................................................. 11 2 Rendemen daging tambelo ...................................................... 55 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ............ 48 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo ...................... 39 3 Kandungan proksimat daging tambelo .......... 61 x ........................................................................................................

......... 42 12 Nilai IC50 dari ekstrak......................... 33 9 Diagram alir fraksinasi dengan menggunakan KLT ......... 21 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC ............... 28 8 Diagram alir ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al............................... BHT........... 59 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH .....................................65 xi ...................... 37 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo ................................................. 2008) ............................................ 36 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom ............................ 57 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-fraksi tambelo ..... 55 13 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) ........... 7 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990) .................. 3 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) ............. 63 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan mass 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid ............................................................. dan vitamin super ester C ..........................................DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Kerangka pemikiran ........................ 20 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan identifikasi senyawa antioksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites) ........ 18 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007) .................................................................................. 6 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo metah (Muller 2004) .......

................DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering ........................................ 87 10 Rendamen fraksi tambelo ... 88 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo ........................ 77 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC ............... 75 3 Kromatogram standar asam amino pada HPLC ............................................................................ 82 9 Profil pola pemisahan senyawa .. 75 2 Nilai rata-rata asam amino tambelo ..................................................................................................................... 81 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT. 78 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC ........................... 80 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH dari ekstrak tambelo ....................................................... 88 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS ..................................................................................................................... vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo ................. 89 xii ............................................................................... 76 4 Kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC ......................................................................................

Chemical Composition and Identification of Antioxidant Compounds from the Extracts of Tambelo (Bactronophorus thoracites).72±0. It contained calcium of 3532.31%. The second stage was the extraction of active materials by means of maceration.07±0.21±0. The protein of tambelo contained nine essential amino acids and eight non essensial amino acids. 9th fraction was similar to farnesic acid glyceride.77±2.45±2. and carbohydrate (by difference) 7.04%. Keywords: Activity antioxidants. fat 0. carbohydrate (by difference) 30. to conduct antioxidant and phytochemistry tests. amino acid and mineral. Supervised by LINAWATI HARDJITO and SRI PURWANINGSIH Tambelo (Teredinidae) is consumed freshly by local people in Papua without removing the digestive tracts. It had seven saturated fatty acids and eight unsaturated fatty acids. flavonoid. 60. This study aimed to investigate the chemical composition of fresh tambelo. protein 42. 8 and 10 ppm. ash 5.01%. fatty acid. sesquiterpenoic acid glyceride and labdane diterpenoid. and 80 ppm) with DPPH method applying BHT and vitamin super ester C as the standard with a concentration of 4.ABSTRACT JULIANA LEIWAKABESSY. the identification of fresh antioxidant compound was carried out using LC-MS.72±0. the extract underwent phytochemical and antioxidant tests (20. Phytochemical test. chemical. ash 2. Finally. The first stage involved the analyses of proximate. The research consisted of two stages. fat 14.28±0. The highest antioxidant activity obtained by column fractionation was the 9th fraction with IC50 of 8. The maceration result was evaporated and partitioned with a solvent of n-hexane and ethyl acetate.04%.27%. compound .63±0. shipworm. and to identify the compound of active antioxidant obtained from selected fractionated extract.22%. protein 7. steroid and triterpenoid.88±1. described the crude extract of tambelo contained a group of alkaloid. The composition of dried tambelo was moisture 6. The composition of fresh tambelo divided into moisture 82. MarinLit database (Blunt and Blunt 2008).83%.62%. The highest antioxidant activity was found in the crude extract of ethyl acetate with IC50 of 15 ppm. Teredinidae.27±0.46 ppm and phosfor of 2363. Next.87 ppm. 6.01%. 40.01%.06 ppm.

arakidat (C20:0) 0.74%.27±0. isoleusin 0.37%. etil asetat.72%. abu 2. valin 1. lemak 14.41%.63±0. protein 42.26%. sakit pinggang. leusin 1. arginin 1.01%. fosfor 2363.42 ppm. Di Papua masyarakat mengkonsumsi tambelo dalam keadaan mentah tanpa harus dibuang isi pencernaannya terlebih dahulu.34%.13%. Tambelo kering memiliki kadar air 6. metionin 0.63%. histidin 1. dan karbohidrat 30.45 ppm. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif tambelo dengan cara maserasi.66%. heptadekanoat (C17:0) 0. uji proksimat. Asam amino esensial yang terdapat pada tambelo. Cis-10Heptadekanoat (C17:1) 0. yaitu treonin 0. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan komposisi kimia tambelo segar. Kabupaten Manokwari memiliki kadar air 82.81%.04%. Asam amino non esensial pada tambelo.72±0.25%.28±0.62%.19%. Tambelo segar (Bactronophorus thoraites) yang berasal dari perairan Andai.07±0.01%.24%. glisin 1.41% dari berat protein. Dibimbing oleh LINAWATI HARDJITO dan SRI PURWANINGSIH.85%. lisin 1. rematik.72%. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak kasar tambelo mengandung senyawa alkaloid. pengujian aktivitas antioksidan.4 ppm. stearat (C18:0) 3. protein 7.31% lemak 0. analisis fitokimia. heneikosanoat acid (C21:0) 0. palmitat (C16:0) 13.56%. serta mengidentifikasi senyawa aktif antioksidan hasil fraksinasi ekstrak terpilih.46 ppm.77±2. flavonoid. dan mineral dalam tambelo.80%. malaria.04%. dan metanol).29% dari berat minyak.45±2. Penelitian ini terdiri dari dua tahap. natrium 435.27%. dan 8 asam lemak tidak jenuh yang terdiri dari miristoleat (C14:1) 0. yaitu asam aspartat 2. dan sistein 0. asam glutamat 3. Kandungan mineral pada tambelo yaitu kalsium 3532.88±1. kalium 626.01%.10%.06 ppm. dan diterpenoid labdan.RINGKASAN JULIANA LEIWAKABESSY. flu. pentadekanoat (C15:0) 0. Aktivitas antioksidan yang tertinggi hasil fraksinasi kolom terdapat pada fraksi 9 dengan IC50 sebesar 8. dan arakidonat (20:4ω6) 0. dan identifikasi senyawa antioksidan menggunakan LC-MS. serin 1. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 sebesar 15 ppm. Rendemen ekstrak kasar tambelo kering yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5. asam lemak. Tambelo mengandung 9 asam amino esensial dan 8 asam amino non esensial.69%. mendapatkan antioksidan dan fitokimia.55%. dan karbohidrat (by difference) 7. palmitoleat (C16:1) 14. alanin 1.22%. abu 5. Tahap pertama adalah analisis rendemen. meningkatkan air susu ibu.80% dari berat protein. tirosin 0.55%. steroid dan triterpenoid (n-heksana. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). asam gliserida sesquiterpenoid.04%.21±0.33%.87 ppm.80%.22%.83%.fraksi 9 menyerupai senyawa asam gliserida farnesik.72±0. asam amino. . EPA (C20:4ω3) 0.01%.29%. dan besi 1373. nafsu makan dan vitalitas pria. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. fenilalanin 1. Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites). Mereka percaya bahwa isi pencernaan tambelo berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit diantaranya. prolin 0. Tambelo memiliki 7 asam lemak jenuh (saturated fatty acid/SAFA) yang terdiri atas miristat (C14:0) 5.

Pemanfaatan organisme laut ini tidak hanya terbatas sebagai bahan makanan. Berdasarkan literatur. tambelo dikonsumsi oleh sebagian masyarakat Bangka yang disebut temilok brubus (Syaputra et al. cacing laut. flu. Di Papua. 2006). dan moluska. Di Papua. dan vitalitas pria (Hardinsyah et al. malaria. Salah satu moluska yang telah dimanfaatkan selain sebagai bahan pangan juga digunakan sebagai obat alami adalah tambelo. 2009). batuk. ordo Teredinidae. seperti di Brasil Utara ”turu” (Teredinidae) sangat populer digunakan dalam pengobatan penyakit menular (Trindade-Silva et al. Senyawa kimia dengan bioaktivitas ini diduga dapat dimanfaatkan manusia sebagai bahan obat alami. serta meningkatkan air susu ibu. Organisme laut yang sudah dimanfaatkan sebagai bahan obat alami diantaranya spons. suku Kamoro Kabupaten Mimika berpendapat bahwa tambelo berkhasiat menyembuhkan penyakit. antara lain: sakit pinggang. Tambelo (Teredinidae) merupakan salah satu jenis hewan penggerek kayu yang hidup di dalam batang kayu bakau yang sudah lapuk dan membusuk yang dikelompokkan ke dalam filum bivalvia. 2006). . dimana di dalamnya terdapat berbagai jenis organisme laut. 2007). rematik.1 PENDAHULUAN 1. 2000).1 Latar Belakang Indonesia sebagai negara kepulauan memiliki garis pantai lebih kurang 81000 km dan wilayah laut yang sangat luas. masyarakat menyebutnya tambelo ”koo” (Hardinsyah et al. Hal ini menjadikan perairan Indonesia memiliki potensi kekayaan alam laut yang besar dengan tingkat keragaman hayati yang tinggi. nafsu makan. 2008). tapi juga sebagai sumber bahan alami yang berpotensi sebagai bahan baku obat (Handayani et al. Tambelo dipercaya dapat menyembuhkan penyakit. teripang. Di Philipina masyarakat menyebutnya tamilok (Betia 2011). Beberapa organisme laut mampu memproduksi senyawa kimia tersebut untuk mempertahankan dirinya dari serangan predator. kelas Myoida. Hasil penelitian menunjukkan banyak dari senyawa kimia tersebut berpotensi menghambat pertumbuhan bakteri dan aktif menghambat pertumbuhan sel kanker serta bioaktivitas lainnya (Edrada et al. rumput laut.

. acara peminangan dan lain – lain. namun komposisi kimia dan senyawa antioksidan dari tambelo belum banyak diketahui. kanker (Muchtadi 2000). proses mengantar mas kawin. (1994) melaporkan bahwa enzim protease yang diisolasi dari bakteri yang terdapat dalam kelenjar dari tambelo Psiloteredo healdi (Teredinidae) bersifat sebagai deterjen pembersih lantai. Informasi mengenai aktivitas antioksidan pada tambelo sampai saat ini belum ada. (2009) menunjukkan bahwa bakteri yang diisolasi dari insang tambelo Neo teredo reynei (Teredinidae) dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif (Sphingomonas. Tambelo adalah salah satu obat tradisional yang telah lama digunakan oleh masyarakat Papua. Pada saat pesta adat dilaksanakan. Kenyataan bahwa tambelo mampu memberikan efek menyehatkan bila dikonsumsi. Stenotrophomonas maltophilia. Antioksidan adalah suatu zat yang dapat menangkal pengaruh radikal bebas yang bila masuk ke dalam tubuh dapat menyebabkan kerusakan. 1. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. sehingga perlu dilakukan penelitian senyawa antioksidan dari bahan tambelo (Bactronophorus thoracites). 2006). jantung koroner. Kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas di antaranya penuaan dini. Griffin et al.2 Perumusan Masalah Tambelo (Bactronophorus thoracites) termasuk di dalam famili Teredinidae dan kelas bivalvia. karena merupakan suatu kebiasaan yang sudah turun temurun dilakukan sejak nenek moyang mereka (Hardinsyah et al. Bacillus cereus dan Staphylococcus sciuri). tambelo disajikan sebagai makanan pembuka baik dalam keadaan mentah maupun dimasak/digoreng. piring maupun lensa kaca.2 Masyarakat Kamoro menggunakan tambelo diberbagai acara pesta adat misalnya acara pesta perkawinan. memberikan dugaan bahwa di dalam tubuh tambelo terdapat suatu komponen yang bersifat antioksidan. Informasi yang dapat diperoleh dari penelitian terdahulu seperti Trindade-Silva et al.

perumusan masalah dan tujuan penelitian maka kerangka pemikiran yang disajikan pada Gambar 1. analisis mineral Ekstraksi tambelo Uji fitokimia Uji aktivitas antioksidan Fraksinasi ekstrak terpilih Uji antioksidan hasil fraksinasi - Identifikasi senyawa dengan LC-MS Penelitian yg dilakukan oleh Hardinsyah et al. flu malaria. 2006 Penelitian yg dilakukan oleh Juliana Gambar 1 Kerangka pemikiran. analisis proksimat -. 1. Obat tradisional Analisis kimia : -. analisis asam amino -.5 Kerangka Pemikiran Berdasarkan latar belakang. . dan vitalis pria. Tambelo (Bactronophorus thoracites) Pesta Adat Dikonsumsi oleh masyarakat Papua dimasak Direbus Makan mentah Sakit pinggang/rematik. 1.4 Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kandungan kimia dan bahan aktif yang dikandung dalam tubuh tambelo sebagai senyawa antioksidan sehingga dapat dimanfaatkan dalam bidang pangan fungsional atau nutraceutical. nafsu makan.3 1. analisis asam lemak -. meningkatkan air susu ibu . serta mengidentifikasi fraksi aktif senyawa antioksidan.3 Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk memperoleh komposisi kimia tambelo segar dan kering. mendapatkan aktivitas antioksidan dan fitokimia ekstrak tambelo. batuk.

4 .

sehingga panjangnya akan beberapa sentimeter saja dan diameternya kurang lebih dari 0. 1988). Keberadaan dan sifat tambelo sangat dipengaruhi oleh tipe habitat. kemudian membelok sejajar dengan arah serat kayu. Lubang pada kayu biasanya dibuat tegak lurus terhadap serat kayu. Tambelo mampu menggali lubang sepanjang 18 cm hingga 2 m (Waterbury et al. 1983). 1988). perkembangan tubuhnya akan terbatas.2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tambelo Tambelo atau shipworm adalah hewan jenis moluska yang hidup di dalam pohon bakau yang telah membusuk.5 cm. Dinding lubang pada kayu tersebut dilapisi dengan suatu subtansi yang mengandung kapur. tergantung pada jenisnya. memanjang seperti cacing. Apabila populasinya terlalu tinggi. Bentuk morfologi tambelo disajikan pada Gambar 2.5 cm (Muslich et al. Kepadatan tambelo tertinggi pada bulan Januari sampai April dan kepadatannya rendah pada bulan Juli (Filho et al. kepalanya berbentuk bulan sabit yang dilengkapi dengan parut dan kikir yang berguna untuk membuat lubang. Tambelo berkembang normal di air dengan salinitas antara 10-30 ppm dan lebih banyak dijumpai di daerah tropis (Muslich et al. Klasifikasi tambelo (Turner 1971) adalah sebagai berikut : Filum : Mollusca kelas Ordo Family Genus Spesies : Bivalvia : Myoida : Teredinidae : Bactronophorus : Bactronophorus thoracites . Terbentuknya lapisan yang mengandung kapur dihasilkan dari mantel shipworm (Ginuk 1987). Panjang tubuh tambelo berkisar antara 30 hingga 100 cm dengan diameter antara 1 sampai 1. 2008). Ciri-ciri fisik tambelo adalah tubuhnya lunak. Tambelo dapat bertahan hidup antara satu hingga beberapa tahun.

Identifikasi tambelo didasarkan kepada bentuk cangkangnya yang berwarna putih (panjang ± 1 cm) digunakan untuk menutup mulut terowongan. Menurut Mayabubun (2003). Tambelo yang tumbuh di mangrove Sonneratia sp dan Bruguiera sp. Pada masyarakat Kamoro. Masyarakat Papua percaya bahwa sisa pencernaan dalam perut tambelo sangat berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit di antaranya sakit pinggang. sebab rasanya pahit dan tidak enak untuk dimakan. ada 4 spesies mangrove yang digunakan sebagai habitat dari tambelo yaitu 2 spesies dari genus Rhizophora. Pallet yang terletak pada bagian tubuh depan yang digunakan untuk memarut kayu. rematik flu.6 Gambar 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) Hewan ini memanfaatkan serbuk kayu makanan. Cara masyarakat Papua mengkonsumsikan tambelo yaitu setelah tambelo diambil dari pohon bakau yang sudah membusuk.2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat Tambelo yang dimakan mentah dipercaya oleh masyarakat Papua lebih berkhasiat daripada direbus atau digoreng. tidak dikonsumsi oleh masyarakat suku Kamoro. 2. cangkang dan giginya dilepas dan langsung dimakan tanpa dibersihkan isi pencernaannya terlebih dahulu. dan kejantanan bagi kaum lelaki. . seperti disajikan pada Gambar 3. meningkatkan air susu ibu. Bagian pertama adalah usus besar yang berfungsi untuk menampung serbuk kayu. batuk. 1983). 1 spesies genus Sonneratia dan 1 spesies termasuk dalam genus Bruguiera. malaria. nafsu makan. Bagian kedua adalah kelenjar pencernaan yang difungsikan untuk mencerna partikel-partikel kayu (Waterbury et al. Perut tambelo terdiri dari dua bagian usus. tambelo dijadikan sebagai makanan utama di berbagai acara pesta adat seperti pesta budaya Karapao Suku Kamoro.

Kandungan energi protein rata-rata 4 kkal/g atau setara dengan kandungan energi karbohidrat (Sudarmadji et al. dan air (Harper et al. Protein akan dipakai sebagai sumber energi. 1989). defisiensi energi protein (marasmus). dan pengendalian pertumbuhan (Winarno 1992). pertahanan tubuh atau imunisasi. tetapi juga oleh keadaan lingkungan. sanitasi dan higiene. bila organisme sedang kekurangan energi. media perambatan impuls syaraf. lemak. Keadaan tersebut tidak hanya dipengaruhi oleh asupan makanan. alat pengangkut dan alat penyimpanan.O. dan N.H. Protein memiliki peranan penting dalam pembentukkan biomolekul daripada sebagai sumber energi. . seperti pemukiman. berperan sebagai enzim.3 Komposisi Kimia Zat gizi dibagi menjadi 5 kelas utama. atau gabungan keduanya dapat mengakibatkan kegagalan pertumbuhan ringan sampai sindrom klinis berat yang spesifik. Kekurangan protein pada anak saat lahir (kwashiorkor). Protein berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. serta infeksi berulang yang pernah dialami tubuh (Effendi 2002). Fungsi protein bagi tubuh adalah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada. penunjang mekanis. Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsurunsur C. pengatur pergerakan. 1988).7 Gambar 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo mentah (Sumber: Muller 2004) 2. yaitu protein. mineral. karbohidrat.

serta 4-o-metil-glukoronat (Muir 1999). sedangkan serat pangan yang tidak larut akan memperbesar volume feses dan akan mengurangi waktu transitnya (bersifat laksatif lemah). pemecahan protein tubuh yang berlebihan. terhidrolisis. Kebanyakan jenis karbohidrat yang sampai ke kolon tanpa meliputi polisakarida yang bukan pati (non-starch polysacharides/NSP). xylosa. Serat pangan atau dietary fiber adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis (dicerna) oleh enzim pencernaan manusia. tekstur.8 Pembatasan konsumsi protein pada penderita hati dilakukan apabila pasien mengalami intoleransi protein. glukoronat. 1994). galakturonat. Gula yang membentuk serat pangan adalah glukosa. Karbohidrat merupakan sumber kalori yang murah. selain itu beberapa golongan karbohidrat menghasilkan serat (dietary fiber) yang berguna bagi pencernaan. Sayuran dan produk susu mengandung metionin. Kondisi ini biasanya ditemukan pada pasien Konsumsi sumber protein selain daging. kehilangan mineral. karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosisi. sangat dianjurkan. dan beguna untuk membantu metabolisme lemak dan protein (Winarno 2008). . Serat pangan yang larut sangat mudah difermentasikan dan mempengaruhi metabolisme karbohidrat serta lipida. Dalam tubuh. pati yang resisten (resisten starch/RS). rhamnosa. Serat pangan dapat diklasifikasikan berdasarkan struktur molekul dan kelarutannya. misalnya rasa. khususnya bagi penduduk negara yang sedang berkembang. mannose. seperti sayuran dan produk susu. dan asam amino aromatik (AAA) yang lebih rendah serta asam amino rantai cabang (BCAA) yang lebih tinggi dibandingkan dengan daging (Nelson et al. galaktosa. Monomer dari serat pangan adalah gula netral dan gula asam. dan gula asam seperti mannurinat. Karbohidrat merupakan sumber kalori utama bagi hampir seluruh penduduk dunia. warna. dan akan sampai di usus besar (kolon) dalam keadaan utuh sehigga akan menjadi subtrat untuk fermentasi bakteri yang hidup di kolon. koma hepatik. Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan makanan. dan karbohidrat rantai pendek (short chain carbohydrates/SC). arabinosa.

Perubahan-perubahan kimia atau penguraian lemak dan minyak dapat mempengaruhi bau dan rasa suatu bahan makanan.D. yaitu asam amino esensial dan nonesensial. Asam amino glutamat dan aspartat paling lambat terserap (Linder 2006). 1989). 2. Asam amino tersebut akan diabsorpsi melalui dinding usus.9 Minyak atau lemak berfungsi sebagai sumber energi dan pelarut vitamin A. Komponen mineral dalam suatu bahan sangat bervariasi baik macam dan jumlahnya (Sudarmadji et al. dan K serta merupakan sumber asam-asam lemak tak jenuh yang esensial. 1989). yaitu setiap asam mempunyai sedikitnya satu kelompok amino dan satu kelompok karboksil (Sudarmadji et al. Asam amino merupakan komponen utama penyusunan protein. leusin. Tingkat penyerapan relatif masing-masing asam amino adalah asam amino rantai cabang (valin. Susunan kimia asam amino bervariasi. Protein yang masuk dalam tubuh akan diubah menjadi asam amino. Asam amino esensial tidak dapat diproduksi dalam tubuh sehingga sering harus ditambahkan .3. isoleusin) dan metionin lebih mudah diserap dari asam amino esensial lainnya. Kandungan abu dan komponennya tergantung pada macam bahan dan cara pengabuannya. tetapi terdapat dua hal yang sama. 1989). Kerusakan lemak dan minyak menurunkan nilai gizi serta menyebabkan penyimpanan rasa dan bau yang bersangkutan.E. unsur organik akan menghilang dan bahan anorganik (abu) yang tersisa terdiri dari unsur-unsur mineral (Harper et al.1 Asam amino Protein merupakan molekul yang sangat besar. kemudian dilanjutkan sampai ke dalam pembuluh darah. Proses absorpsi asam diamino lebih lambat dari pada asam amino netral (Poedjadi dan Supriyanti 2006). baik yang menguntungkan maupun tidak. 1988). dan dibagi dalam dua kelompok. Abu adalah zat anorganik sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. yaitu linoleat dan linolenat (Sudarmadji et al. Mineral digolongkan sebagai zat gizi anorganik atau disebut sebagai abu dalam pangan karena ternyata jika bahan pangan dibakar. Asam amino esensial lebih mudah diserap dari asam amino non esensial. Kadar abu ada hubungannya dengan mineral suatu bahan. Pada umumnya penguraian lemak dan minyak menghasilkan zat-zat yang tidak dapat dimakan. terbentuk dari asam amino yang terikat bersama.

asam amino atau protein berfungsi sebagai zat pembangun. Protein bekerja sebagai pengatur semua proses yang berlangsung di dalam tubuh dan sebagai sumber energi jika karbohidrat dan lemak tidak dapat mencukupi keperluan tubuh. contohnya tirosin merupakan prekursor yang membentuk pigmen kulit dan rambut. sedangkan asam amino nonesensial dapat diproduksi dalam tubuh. fenilalanin. Asam amino umumnya berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air. metionin. Kebutuhan asam amino esensial bagi anak-anak relatif besar daripada orang dewasa (Poedjiadi dan Supriyanti 2006). namun tidak larut dalam pelarut organik nonpolar (Sitompul 2004). Kelengkapan komposisi asam amino esensial merupakan parameter penting penciri kualitas protein (Astawan 2007). triptofan.10 dalam bentuk makanan. arginin. Asam amino esensial merupakan pembangun protein tubuh yang harus berasal dari makanan atau tidak dapat dibentuk di dalam tubuh. Kebutuhan metionin dapat disubtitusi dengan tirosin atau gabungan sistin dan fenilalanin (Linder 2006). Metionin dan serin merupakan prekursor sintesis dan histidin yang diperlukan untuk sintesis histamin . Arginin terlibat dalam sintesis ureum dalam hati. Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh disajikan pada Tabel 1. isoleusin. di dalam tubuh. valin. Selain fungsi tersebut hampir semua asam amino memiliki fungsi khusus. Glutamin dan asparagin merupakan simpanan asam amino dalam tubuh. Asam amino merupakan unit pembangun protein. leusin. lisin. Asam amino esensial yang dibutuhkan oleh tubuh manusia ialah histidin. treonin. yaitu menyediakan bahanbahan yang sangat berperan dalam proses pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan tubuh.

Asam lemak tidak terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan. Asam lemak adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai 4-24atom. neurotransmiter α-aminobutirat (GABA). sumber NH3 Sebagai prekusor biosintesis purin dan neurotransmiteri Berfungsi untuk crosslinking protein (seperti dalam kolagen dan elastin) biosintesis karnitin merupakan donor grup metil untuk banyak proses sintetik Sebagai prekusor serotonin dan nikotinamid (vitamin B) Sebagai prekusor tirosin katekolamin. melanin dan tiroksin Berperan pada sintesis profirin dari hemoglobin dan juga merupakan konstituen asam glikolat Bagi manusia. arginin. histidin merupakan asam amino esesnsial bagi anak-anak.3. Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ujung hidrokarbon nonpolar yang panjang. . Berfungsi untuk biosintesis urea. dan serotoninmetionin donor gugus metil untuk sintesis beberapa senyawa seperti kolin dan kreatin Sebagai pemula tirosin dan keduanya membentuk tiroksin dan epinefrin. prekusor prolin. arginin. ornitin. melanin dan tiroksin. 2. poliamin. Fenilalanin Glisin Histidin Aspartat Glutamat Glisin Lisin Metionin Triptofan Tirosin Sumber: Poedjiadi dan Supriyanti (2006).11 Tabel 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh Jenis asam amino Triptofan Peranan Sebagai pemula vitamin niasin. sitrulin yang ikut berperan dalam sinstesis urea dalam hati serta berfungsi sebagai prekursor tirosin katekolamin.2 Asam lemak Asam lemak merupakan komponen unit pembangunan yang sifatnya khas untuk setiap lipid. tetapi terdapat dalam bentuk terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipid berbeda. yang dapat dibebaskan dari ikatan tersebut melalui hidrolisis kimia atau enzimatik. ornitin. sehingga hampir semua lipid bersifat tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak. prekursor glikogenik dan pirimidin Sebagai produk antara dalam reaksi interkonversi asam amino.

dan canola. yaitu asam lemak rantai pendek (6 atom karbon atau kurang). Titik cair asam lemak meningkat dengan bertambah panjangnya rantai karbon.12 Asam lemak dibedakan menurut jumlah karbon yang dikandungnya. Lemak yang tersusun oleh asam lemak tidak jenuh akan bersifat cair pada suhu kamar. Semua lemak bahan makanan hewani dan sebagian besar minyak nabati mengandung asam lemak rantai panjang. rantai sedang (8 hingga 12 karbon). Penelitian yang dilakukan Mensink (1987) menyatakan bahwa MUFA dapat menurunkan LDL. Asam lemak yang mengandung satu atau lebih ikatan rangkap di mana sebetulnya dapat diikat tambahan atom hidrogen dinamakan asam lemak tidak jenuh. lemak tak jenuh tunggal memiliki efek yang mengutungkan terhadap kolesterol dalam darah. Sementara itu. asam lemak tak jenuh (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi populer. sedangkan asam lemak tidak jenuh ganda mengandung dua atau lebih ikatan rangkap (polyunsaturated fatty acid=PUFA). Secara umum.dan meningkatkan K-HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. asam lemak rantai sangat panjang terdapat dalam minyak ikan. minyak kacang tanah. Asam lemak yang terdiri dari rantai karbon yang mengikat semua hidrogen yang dapat diikatnya dinamakan asam lemak jenuh. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. Asam lemak tidak jenuh tunggal mengandung satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya (monounsaturates fatty acid=MUFA). minyak kedelai. rantai panjang (14-18 karbon). minyak biji kapas. dan rantai sangat panjang (20 atom karbon atau lebih). terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. Salah satu jenis MUFA adalah omega-9 (oleat) yang memilki sifat lebih stabil dan lebih perannya dibandingkan PUFA. MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. Asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) tergolong dalam asam lemak rantai panjang. . sedangkan yang tersusun oleh lemak jenuh berbentuk padat (Almatsier 2009). yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. Polysaturated fatty acid (PUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein (LDL) dan juga menurunkan high density lipoprotein (HDL).

yaitu prostaglandin. klorin. jagung.13 Polyunsaturated fatty acid (PUFA) adalah asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan rangkap. dan leukotien. tetapi ketersediaan mineral harus tercukupi setiap harinya. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron serta menurunkan produksi trigliserida dan poliprotein β (beta) di dalam hati. fosfor. dan omega-3. Kelompok asam lemak yang termasuk dalam jenis ini adalah asam alfa linoleat (omega-6) dan asam alfa linolenat (omega-3). tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA) yang banyak ditemukan pada minyak nabati atau sayur dan minyak ikan. prostasiklin.3 Mineral Mineral termasuk ke dalam golongan nutrisi mikro dalam tubuh yang diperlukan dalam jumlah kecil. seperti bunga matahari.05% dari bobot tubuh dikenal sebagai makromineral. sedangkan tubuh tidak dapat mensintesisnya. Asam lemak esensial adalah asam lemak yang dibutuhkan oleh tubuh untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan.3. fungsi kekebalan. dan biji matahari. bersifat cair pada suhu kamar. Senyawa-senyawa ini mengatur tekanan darah. dan linolenat) antara lain berperan dalam transpor dan metabolisme lemak. Sumber alami PUFA yang penting bagi kesehatan adalah kacang-kacangan dan biji-bijian. Asam lemak esensial merupakan prekursor sekelompok senyawa eikosanoid yang mirip hormon. . linoleat. bahkan tetap cair pada suhu dingin karena titik lelehnya lebih rendah dibandingkan dengan MUFA. yaitu makromineral dan mikromineral. Berdasarkan jumlahnya dalam tubuh manusia dibedakan menjadi dua. 2. Selain peranannya dalam pencegahan penyakit jantung koroner dan artritis. kontraksi otot serta penyembuhan luka (Achadi 2010). denyut jantung. Turunan asam lemak arakidonat dari asam linoleat. sedikitnya 0. Makromineral terdiri dari kalsium. eikosapentaenoat (EPA). mempertahankan fungsi dan integritas membran sel. rangsangan sistem saraf. Contoh PUFA adalah asam linoleat (omega-6). Manfaat PUFA (asam lemak arakhidonat. fungsi imun. Asam lemak ini banyak ditemukan pada ikan dan bahan nabati. Mineral yang terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup banyak. tromboksan. dan dokosaheksaenoat (DHA) dari asam linolenat. asam lemak omega-3 penting untuk berfungsinya otak dan retina dengan baik. magnesium.

2) sebagai katalis untuk reaksi biologis.05% dari bobot tubuh disebut sebagai mikromineral. 1988. natrium. 5) transmisi impuls saraf. dan suksinildehidrogenase. kolinesterase. Sekitar 270 mg kalium berada di dalam sel yang . dan seng (Harper et al. Secara umum fungsi mineral bagi tubuh adalah sebagai berikut: 1) mempertahankan keseimbangan asam – basa dalam tubuh. Kalium adalah basa utama yang terdapat di dalam jaringan dan sel-sel darah yang memegang peranan penting dalam pengaturan keseimbangan asam basa tubuh. Kalsium merupakan salah satu faktor yang terpenting dalam pembekuan darah. yang terdiri dari kobalt. 6) mengatur kontraktilitas otot. a) Kalsium (Ca) Kalsium diperlukan untuk pembentukan dan perkembangan tulang dan gigi. Kalsium berfungsi untuk mengatur transpor ion-ion menembus membran seluler dan diperlukan untuk aktivitas aktomiosin dan miosin ATP-ase. serta mengaktifkan reaksi enzim dan sekresi hormon termasuk insulin oleh pankreas. 4) memelihara keseimbangan air dalam tubuh. 3) komponen senyawa tubuh yang esensial adalah hormon. pertumbuhan jaringan tubuh. iodin. Winarno 1992). Mineral yang diketahui dibutuhkan oleh tubuh dan terdapat dalam jumlah yang lebih sedikit dari 0. Kalsium bersama dengan natrium. b) Kalium (K) Hampir seluruh kegiatan di dalam tubuh dipengaruhi oleh perubahan kosentrasi kalium di dalam plasma. 1988. hemoglobin. Kalsium juga berperan dalam pembentukan tulang dan gigi. Kalium juga berperan dalam penyampaian impuls-impuls saraf ke serat-serat otot dan juga dalam kemampuan otot untuk berkontraksi (Fregly 1988). mangan. kalium. lipase.14 kalium. Kalsium diperlukan untuk memelihara otot dan syaraf dalam tubuh agar berfungsi normal dan membantu penyerapan vitamin B12 (Harper et al. flourin. enzim. besi. Sebanyak 98% kalium dalam tubuh berada di dalam intraseluler. dan magnesium berperan dalam transmisi impuls-impuls serta kontraksi dan relaksasi otot (Muchtadi 1989). tembaga. asam lambung. dan belerang. Gaman dan Sherrington 1992). dan 7).

terutama eritrosit diduga berperan dalam memusnahkan anion superoksida yang merusak. dan limpa sebagai senyawa kompleks dengan protein yang dikenal sebagai feritin (Harper et al. yaitu dalam fungsi sel T dan dalam pembentukan antibodi oleh sel B (Almatsier 2009). Sebagai bagian dari enzim-enzim pernafasan misalnya sitokrom oksidase. Enzim superoksida dismutase di dalam sitosol semua sel. besi tidak hilang dari tubuh. dan untuk proses pelepasan energi. f) Tembaga (Cu) Fungsi tembaga dalam tubuh antara lain mencegah terjadinya anemia. Bila sel-sel darah merah melepaskan besi. Beberapa besi juga disimpan di dalam tubuh seperti dalam sumsum tulang. c) Fosfor (P) Fosfor dan kalsium secara bersama-sama adalah penyusun tulang dan gigi yang sangat penting. Fosfor terdapat dalam kebanyakan makanan dan defisiensi fosfor dalam susunan makanan belum pernah terjadi (Gaman dan Sherrington 1992). sebagai bagian dari enzim atau sebagai kofaktor pada kegiatan lebih dari dua ratus enzim. d) Besi (Fe) Sebagian besar besi terdapat dalam hemoglobin (pigmen darah merah yang terdapat dalam sel darah merah). Gaman dan Sherrington 1992).15 merupakan cairan kation yang mendominasi di dalam intrseluler (Groff dan Gropper 1990). di dalam sumsum tulang. Bersama vitamin C dapat mempertahankan aktivitas enzim-enzim yang tersangkut dalam sintesis elastin (protein dinding . Seng juga 1988. tetapi digunakan lagi untuk membuat sel-sel darah merah yang baru. serta melepaskan Fe simpanan dari ferritin dan hati. Diperlukan untuk sintesis fosfolipida untuk pembentukan myelin yang menyelimuti serat syaraf. e) Seng (Zn) Seng memegang peranan esensial dalam banyak fungsi tubuh. menstimulir sintesis fraksi heme atau globin. berperan dalam pengembangan fungsi reproduksi laki-laki dan pembentukkan sperma serta berperan dalam fungsi kekebalan. dengan cara membantu penyerapan Fe. Fosfor juga terdapat dalam semua sel hidup dan diperlukan untuk pelepasan energi. hati.

sebagai bagian dari enzim tirosinase yang mengkatalisis konversi tirosin menjadi melanin. dan penuaan dini. mempunyai prospek sebagai zat aktif dalam obat . penyakit jantung. Tembaga bersifat toksik bila terdapat sebagai ion bebas.16 aorta) dan kolagen. menambah pamornya sebagai mineral yang bermanfaat besar untuk meningkatkan fungsi kekebalan tubuh manusia. yaitu 70 µg per berat badan setiap hari. Di dalam tubuh. dapat menyebabkan pusing dan muntah (Muchtadi 2009). Orang dewasa dianjurkan untuk mengkonsumsi sebanyak 55 µg per berat badan selenium setiap hari. selenium berfungsi mempertahankan elastisitas jaringan dan bila kadar selenium berkurang maka tubuh akan mengalami penuaan dini. seperti kanker. Kebutuhan tersebut akan meningkat saat seorang ibu harus menyusui. g) Selenium (Se) Selenium adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas. Konsumsi garam Cu dalam jumlah sepuluh kali lebih besar daripada yang terdapat dalam bahan pangan secara normal.4 Komponen Bioaktif dari Moluska Invertebrata laut merupakan produsen senyawa bioaktif terbesar di antara biota lainnya. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh invertebrata laut dan mikroorganisme simbion. yaitu kondisi sel yang rusak sebelum waktunya. Selenium diketahui memperbaiki sistem imunitas (kekebalan tubuh) dan fungsi kelenjar tiroid. namun perempuan dewasa yang sedang hamil dianjurkan meningkatkan asupan selenium menjadi 60 µg per berat badan setiap hari. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Bersama vitamin E. 2. Tubuh setiap orang memiliki kemampuan untuk melawan radikal bebas yang bisa menghancurkan sel dan menimbulkan berbagai penyakit kronis. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Hasil penelitian belakangan ini yang memastikan bahwa selenium dapat mencegah kanker (termasuk kanker kulit akibat paparan matahari). Sumber utama selenium adalah tumbuh-tumbuhan dan makanan laut (Conectique 2011). selenium bekerja sama dengan vitamin E sebagai zat antioksidan untuk memperlambat oksidasi asam lemak tak jenuh.

dan antikanker. (1996) melaporkan telah mengisolasi kahalaide F dari kerang jenis Elysia rubefescens yang memiliki aktivitas sebagai antikanker usus dan prostat. Ranney (1979) mengklasifikasikan antioksidan atas tiga golongan berdasarkan prinsip kerjanya dalam mencegah terjadinya proses oksidasi. (2008) diketahui bahwa ekstrak metanol kijing Taiwan yang berpotensi sebagai antioksidan. penyakit jantung. antivirus. keton. Pada tahap inisiasi terjadi pembentukan radikal bebas (R●) akibat reaksi antara asam lemak (RH) dengan beberapa katalisator. Tahap propagasi terjadi akibat reaksi antara radikal bebas (R●) yang terbentuk pada tahap inisiasi dengan oksigen menghasilkan radikal peroksida (ROO●). alkohol dan asam-asam dengan karakteristik dan cita rasa tengik (Winarno 1984). misalnya oksigen. Pertama adalah antioksidan yang mempunyai gugus fenol dan amina aromatik . Moluska merupakan salah satu dari invertebrata laut yang diketahui menghasilkan metabolit sekunder dan sekaligus mempunyai peranan penting dalam ekologinya sehingga menjadi target bagi sumber senyawa bioaktif yang bermanfaat dalam dunia farmasi bahari. Hamman et al. Mekanisme oksidasi asam lemak tidak jenuh menurut Hamilton (1983) dan Gordon (1990) terdiri dari 3 tahap. panas. neurologi (parkinson.5 Antioksidan dan Metode Pengukurannya Senyawa antioksidan secara umum didefinisikan oleh Schuler (1990) sebagai suatu senyawa kimia yang dapat menunda. yaitu nilai IC50 sebesar 201. dan cahaya. 2. b) propagasi dan c) terminasi. Radikal peroksida yang terbentuk akan mengikat ion hidrogen dari molekul lemak yang lain membentuk hidroperoksida (ROOH) dan radikal lemak lain (R1). Proses oksidasi tersebut biasanya terjadi dalam produk terutama yang berlemak dengan kandungan asam lemak tidak jenuh sehingga dapat menyebabkan kerusakan produk atau ketengikan. selanjutnya tahap terakhir adalah tahap terminasi ditandai dengan terbentuknya produk-produk non radikal seperti aldehida.17 untuk pengobatan penyakit. immunologi. Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak kijing Taiwan adalah kelompok alkaloid dan flavonoid.52 ppm. memperlambat atau mencegah terjadinya proses oksidasi. yaitu : a) inisiasi. ion logam. Penelitian mengenai metabolit sekunder dari moluska telah banyak dilakukan. anti-inflammatory. seperti infeksi. Hasil penelitian Salamah et al. alzheimer’s).

butylated hydroxyanisole (BHA). Penggolongan ini terdiri atas dua yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami. Molekul ini mengandung atom sulfur teroksidasi yang mampu bereaksi dengan molekul hidroperoksida berikutnya. Jika radikal antioksidan yang dihasilkan cukup stabil mencegah reaksi berikutnya. Kedua adalah antioksidan yang berfungsi dengan cara menghilangkan molekul-molekul hidroperoksida dari sistem. maka radikal antioksidan tersebut tidak akan berperan sebagai inisiator dari berikutnya. Ketiga adalah antioksidan yang dapat menginaktivasi logam yang bisa mempercepat terjadinya oksidasi. tetapi penggunaan antioksidan sintetik banyak menimbulkan kekuatiran akan efek sampingnya karena telah banyak . Antioksidan sintetik sangat efektif dalam menghambat reaksi oksidasi lemak akan. Kedua produk yang dihasilkan pada kenyataannya mungkin bereaksi dengan radikal bebas kedua dalam sistem Mekanisme reaksi oksidasi lemak dapat dilihat sebagai berikut : Tahap inisiasi : ROOH ROOH 2ROOH Tahap propagasi : R● + O2 ROO● + R1 H Tahap terminasi : ROO● + R1 OO● R● + RO● ROO● RO● RO● + H● + OH + OH ROO● R1● + ROOH ROOH1 + O2 ROR1 Gambar 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990). Jenis penggolongan antioksidan yang lain berdasarkan sumber diperolehnya senyawa tersebut. Contoh antioksidan ini adalah dilauril tiodipropionat (DLTP). Penggolongan ketiga ini sama dengan antioksidan sekunder menurut Winarno (1984) dan Gordon (1990). butylated hydroxytoluene (BHT).18 seperti butylated hydroxyanisole (BHA). Propil galat. metilen bisfenol dan difenilamin. tertiarybutyl hydroquinon (TBHQ) dan tokoferol (Buck 1991). tetapi tanpa melibatkan radikal bebas. Beberapa antioksidan sintetik yang sering digunakan dalam industri pangan antara lain butylated hydroxytoluene (BHT). Antioksidan-antioksidan tersebut bekerja dengan cara berinteraksi dengan radikal bebas yang terdapat di dalam sistem dan membentuk produk subtrat non radikal dan suatu radikal antioksidan.

Penggunaan bahan antioksidan baik alami maupun sintetik dalam bahan pangan. Ketika sebuah antioksidan mampu mendonorkan hidrogen yang beraksi dengan radikal DPPH. Antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstrak bahan alami. dan inkubasi pada suhu kamar dimaksudkan untuk mengoptimumkan aktivitas DPPH.1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). Antioksidan alami dalam bahan pangan diperoleh dari: a) antioksidan berupa senyawa endogen yang terdiri dari satu atau lebih senyawa yang terdapat dalam bahan pangan.1% dan e) tidak mahal serta selalu tersedia (Coppen 1983. c) larut sempurna dalam lemak dan minyak. c) antioksidan yang merupakan senyawa eksogen yaitu dengan penambahan antioksidan yang diisolasi dari sumber alami (Pratt 1992). b) tidak menimbulkan flavor yang tidak enak. Adapun antioksidan yang terdapat di dalam bahan alami meliputi golongan senyawa turunan fenolat. turunan senyawa hidroksinat. harus memenuhi persyaratan tertentu yaitu: a) tidak beracun dan tidak mempunyai efek fisiologis.33 (Molyneux 2004. Senyawa DPPH dalam metode ini digunakan sebagai model radikal bebas.19 penelitian tentang efek patologis yang ditimbulkannya. Suratmo 2009). Penurunan pada absorbsi dapat diukur secara spektrofotometrikal dan dibandingkan dengan sebuah kontrol etanol atau metanol untuk mengkakulasikan aktivitas scavenging radikal DPPH (Vattem dan Shetty 2006). b) antioksidan yang terbentuk akibat reaksi selama pengolahan. yang memiliki rumus molekul C18H12N5O6 dan Mr=394. tokoferol (Sidik 1997). d) efektif dalam jumlah yang relatif kecil menurut rekomendasi Food and Drug Administration dosis yang diizinkan dalam bahan pangan adalah 0. reaksi ini akan memberikan peningkatan kompleks non radikal dan menurunkan radikal DPPH yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning. Radial bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil pada suhu kamar dan larut dalam pelarut seperti metanol atau etanol (Molyneux 2004. . Vattem dan Shetty 2006). Ada beberapa metode pengukuran aktivitas antioksidan yang dapat digunakan salah satunya adalah metode 1. Pada uji ini metanol digunakan sebagai pelarut. Jika senyawa ini masuk dalam tubuh manusia dan tidak terkendalikan dapat menyebabkan kerusakan fungsi sel. kumarin.01-0. rasa dan warna pada lemak atau bahan pangan. Ketaren 1986).

20

Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen, maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH, jika semua elektron pada radikal bebas DPPH berpasangan, maka warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm akan hilang. Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH disajikan pada Gambar 5. DPPH* Free radical + AH antioksidan DPPH-H neutral + A* new radical

Puplish color

Yellowish color

Gambar 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007). Parameter yang digunakan untuk menginterpretasikan hasil pengujian dengan metode DPPH adalah EC50 (efficient concentration) atau biasa disebut IC50 (inhibition concentration). Inhibition concentration (IC50) dapat didefinisikan sebagai kosentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 0,05 mg/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 0,05-0,10 mg/mL, sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/mL, dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/mL (Blois 1958 diacu dalam Molyneux 2004).

21

3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Sampel diambil dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Provinsi Papua Barat. Ekstraksi dan uji aktivitas antioksidan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan Pusat

Laboratorium Kimia Analitik, FMIPA, Institut Pertanian Bogor,

Laboratorium Terpadu IPB-Bogor. Identifikasi senyawa antioksidan dilakukan di Balai Pengkajian Bioteknologi (Biotech Center-BPPT), Serpong. Penelitian dilaksanakan dari bulan Agustus 2010 – Maret 2011. Gambar 6 menunjukkan diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa antiokksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).
Tambelo kering Maserasi dengan MeOH Ekstraksi dengan MeOH Partisi dengan pelarut n-heksan, dan etil asetat Ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak metanol Uji Fitokima Uji antioksidan Ekstrak terplilih KLT Eluen terbaik Analisis kimia : - uji proksimat - uji asam amino - uji asam lemak - uji mineral

Kromatografi kolom

Uji Fitokima

Uji antioksidan Fraksi terpilih Identifikasi dengan LC-MC

Gambar 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).

antioksidan

22

3.2 Bahan dan Alat Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah tambelo yang berasal dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Propinsi Papua Barat. Tambelo diperoleh dari batang pohon mangrove Rhizopora yang sudah lapuk. Tambelo dibersihkan dengan melepaskan cangkang dan pallet kemudian dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. Tambelo kering selanjutnya digiling dengan menggunakan mortar dan disimpan pada suhu rendah (5-10 oC) sampai siap untuk dianalisis. Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi adalah n-heksana, etil asetat, metanol, dan kertas saring Whatman 40. Bahan kimia yang digunakan untuk uji antioksidan adalah DPPH (1,1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl), BHT dan vitamin super ester C sebagai standar. Bahan untuk uji fitokimia adalah H2SO4, akuades, kloroform p.a (pengenceran), anhidra asetat, asam sulfat pekat, HCl 2N, pereaksi Dregendorff, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, serbuk magnesium, alkohol, HCl 37%, etanol 70%, FeCl3 5%, pereaksi Molish, pereaksi benedict, pereaksi biuret, dan larutan ninhidrin 0,1%. Peralatan utama yang digunakan adalah kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom (KK), spektrofotometer UV-Vis JENWAY 6305,

kromatografi cair (LC-MS) AGILENT TECHNOLOGIES, vacum rotary evaporator Buchi Rotavapor R-205, dan Spektrofotometer serapan atom (SSA) Shimazu-7000. 3.3 Prosedur Penelitian Penelitian ini terbagi atas dua tahap, yaitu 1) analisis komponen kimia tambelo, dan 2) Ekstraksi bahan aktif tambelo. Penelitian tahap pertama meliputi analisis rendemen, uji proksimat, asam lemak, asam amino, dan mineral. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif dengan metode maserasi, partisi cair-cair, uji fitokimia, uji antioksidan dengan metode DPPH, dan identifikasi senyawa

antioksidan dari bahan aktif yang dihasilkan. 3.3.1 Penelitian tahap pertama Penelitian tahap pertama ini bertujuan untuk mendapatkan presentase bagian tubuh yang dapat dimanfaatkan dan memperoleh nilai kandungan gizi atau komposisi kimia dari tambelo. Analisis kandungan gizi terdiri dari analisis

1 Rendemen (Hustiany 2005) Tambelo dikeluarkan dari freezer. Cawan tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 102-105 oC selama 6 jam. 3. Kadar air ditentukan dengan rumus: Keterangan: A = berat cawan kosong (gram) B = berat sampel sebelum dioven (gram) C = berat cawan berisi sampel setelah dioven (gram) b) Analisis kadar abu (AOAC 2005) Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven.23 proksimat yang meliputi kadar air. dengan rumus : 3. uji kadar lemak menggunakan metode sokhlet. dan uji kadar protein menggunakan metode kjedahl. serta asam lemak.1. Cawan tersebut diletakkan dalam desikator (kurang lebih 30 menit) hingga dingin kemudian ditimbang hingga beratnya konstan (A). kadar lemak. Tambelo ditimbang sebanyak 1-2 g (B). Cawan tersebut kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang bobotnya (C). kadar abu. Prinsipnya adalah pembakaran atau pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi .2 Uji proksimat (AOAC 2005) Analisis proksimat yang dilakukan meliputi uji kadar air dan abu dengan metode oven. Daging tembelo yang sudah kering ditimbang kembali untuk mengetahui penurunan berat setelah dikeringkan.3. analisis asam amino. kadar protein.3.1. dicairkan kemudian ditimbang beratnya selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. dan karbohidrat. a) Analisis kadar air (AOAC 2005) Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 102-105 o C selama 30 menit. kemudian dimasukan kedalam cawan. Rendemen merupakan presentase perbandingan antara bagian yang digunakan dengan berat utuh tambelo segar.

suhu tungku pengabuan diturunkan hingga suhu 40 oC. Tahapan destruksi adalah sebagai berikut: sampel dilumatkan dengan blender hingga partikelnya dapat melewati saringan 20 mesh. Suhu pengabuan diturunkan sampai ± 40 oC lalu dipindahkan cawan abu porselin ke dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang bobotnya (C) segera setelah dingin. Kadar protein dihitung berdasarkan kesetimbangan reaksi kimia. Cawan abu porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit. Kadar abu dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: A = Berat cawan kosong (gram) B = Berat sampel sebelum pengabuan (gram) C = Berat cawan berisi sample setelah pengabuan (gram) c) Analisis kadar protein (AOAC 2005) Penentuan kadar protein dilakukan dengan metode total nitrogen yang didasarkan pada reaksi penetralan asam basa. Zat anorganik ini disebut abu. dan titrasi. setelah selesai.24 air (H2O) dan karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar. Abu dibasahi (dilembabkan) dengan akuades secara bertahap. destilasi. Prosedur analisis kadar abu dalam bahan pangan adalah sebagai berikut: cawan abu porselin yang kosong dimasukkan ke dalam oven. kemudian dikeringkan menggunakan hot plate dan diabukan kembali pada suhu 550-600 oC sampai diperoleh berat yang konstan. Sampel dimasukan dalam kantong plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari tiga tahap. kemudian cawan abu porselin kosong ditimbang untuk mengetahui bobot cawan kosong (A). kemudian masukan ke dalam oven bersuhu 550-600 oC selama 24 jam atau sampai pengabuan sempurna. Homogenat sampel ditimbang 2 gram pada kertas timbang. sehingga diperoleh abu berwarna putih. Cawan porselin dikeluarkan dengan menggunakan penjepit dan masukan ke dalam desikator selama 30 menit. kemudian dimasukan ke dalam labu . yaitu destruksi. Apabila abu belum putih benar harus dilakukan pengabuan kembali. Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang 2 gram dan dimasukan ke dalam cawan abu porselin ditimbang (B).

Analisis standar blanko dilakukan seperti tahapan sampel. Labu yang berisi hasil destruksi dipasang pada rangkaian alat destilasi uap. sehingga hasil lemak tertinggal dalam labu. Pelarut organik yang mengikat lemak selanjutnya dipisahkan dengan proses penguapan (evaporasi). Prinsip analisis kadar lemak diawali dengan melakukan pengekstrakan sampel dengan pelarut organik untuk mengeluarkan lemak dengan bantuan pemanasan pada suhu titik didih pelarut selama 8 jam. Destruksi dilakukan pada suhu 410 oC selama 2 jam atau sampai larutan jernih.2 N. Tahap kedua adalah distilasi. Sampel ditambahkan 15 mL asam sulfat pekat (95-97%) dan 3 mL hidrogen peroksida secara perlahan dan didiamkan 10 menit dalam ruang asam. kemudian ditambahkan 50-75 mL larutan natrium hidroksida dan natrium thiosulfat dan dilakukan destilasi.25 destruksi. Sampel tersebut selanjutnya ditambahkan dua tablet katalis serta beberapa butir batu didih. Sampel hasil destruksi didiamkan hingga mencapai suhu kamar dan tambahkan 50-75 mL akuades. Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukan ke dalam wadah plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. yang sudah dibakukan sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral. Tahap ketiga adalah titrasi hasil destilat dengan HCl 0. posedur tahapan ini sebagai berikut: sebanyak 25 mL larutan H3BO3 4% yang mengandung indikator sebagai penampung destilat dimasukan dalam erlenmeyer. Penetapan bobot lemak dihitung secara gravimetri. selanjutnya destilat ditampung ke dalam erlenmeyer tersebut hingga volume mencapai minimal 150 mL (hasil destilasi akan berubah menjadi kuning). Kadar protein dapat dihitung dengan persamaan berikut : Keterangan : KP = Kadar Protein Va = mL HCl untuk titrasi sampel Vb = mL HCl untuk titrasi blanko N = Normalitas HCl yang digunakan W = berat sampel c) Analisis kadar lemak (AOAC 2005). Apabila sampel tidak langsung .

( % air + % lemak + % protein + % abu ) 3.3.3 Analisis asam amino (AOAC 1994) Komposisi asam amino ditentukan dengan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Perhitungannya sebagai berikut: % Karbohidrat = 100 % . maka dilakukan pengadukan ulangan dengan blender sebelum dilakukan pengamatan. Prosedur analisis lemak adalah sebagai berikut : labu alas bulat ditimbang dalam keadaan kosong (A). Begitu pula dengan syringe yang akan digunakan juga harus dibilas dengan akuades. protein. dan pasang rangkaian sokhlet dipasang dengan benar. Prosedur analisis asam . Ekstraksi dilakukan pada suhu 60 oC selama 8 jam. selongsong lemak ke dalam ekstractor soxhlet. Labu dan lemak didinginkan dalam desikator selama 30 menit. Labu alas bulat yang berisi lemak dimasukan ke dalam oven bersuhu 105 oC selama ± 2 jam untuk menghilangkan sisa n-heksana dan air.1. batu didih dan lemak d) Analisis kadar karbohidrat (AOAC 2005) Perhitungan kadar karbohidrat dilakukan menggunakan metode by difference yaitu pengurangan 100 % dengan jumlah dari hasil empat komponen yaitu kadar air. Apabila terjadi pemisahan cairan dan sampel. maka disimpan dalam refrigerator sampai saatnya akan dianalisis. Homogenat sampel ditimbang sebanyak 2 gram (B) dan masukan ke dalam selongsong lemak (ekstraction timbles).26 dianalisis. lemak dan abu. Labu alas bulat yang berisi lemak ditimbang (C) sampai berat konstan. Sampel dikondisikan pada suhu ruang dan pastikan sampel masih homogen sebelum ditimbang. Berturut-turut dimasukan 150 mL n-heksana ke dalam labu alas bulat. Kadar lemak dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: KL = kadar lemak A = bobot contoh B = bobot labu lemak dan labu didih C = bobot labu lemak. Perangkat HPLC sebelum digunakan harus dibilas dengan eluen yang akan digunakan selama 2-3 jam. Campuran lemak dan heksana dalam labu alas bulat dievaporasi sampai kering.

9x150 μm Kecepatan alir eluen : 1 ml/menit Tekanan Fasa gerak : 3000 psi : .Buffer fosfat 0.3.1 M Detektor Panjang gelombang Derivatisasi Tipe injeksi Program : UV : 256 nm : derivatisasi pre-kolom : on column injection tanpa septum : isokratik (kecepatan aliran eluen konstan) Kandungan masing-masing asam amino pada bahan dapat dihitung dengan rumus: Keterangan : C = konsentrasi standar asam amino (2. kemudian ditransformasi menjadi bentuk esternya yang bersifat lebih mudah menguap.5 μg) FB = faktor pengenceran ( 133.4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) Kandungan asam lemak dapat ditentukan dengan metode gas kromatografi didasarkan pada partisi komponen-komponen dari suatu cairan di antara fasa gerak berupa gas dan fasa diam berupa zat padat atau cairan yang tidak mudah menguap yang melekat pada bahan pendukung inert.27 amino menggunakan HPLC disajikan Gambar 7. Komponen-komponen yang dipisahkan harus mudah menguap pada suhu pemisahan yang dilakukan. Tahapan analisis asam lemak diawali dengan menghidrolisis lemak/minyak dalam sampel menjadi asam lemak. Identifikasi tiap komponen dilakukan dengan . Metil ester asam lemak (FAME) ini dianalisis dengan alat kromatografi gas. sehingga suhu operasi biasanya lebih tinggi dari suhu kamar dan biasanya dilakukan derivatisasi untuk contoh yang sulit menguap.1 mL) BM = bobot molekul dari masing-masing asam amino (g/mol) 3. Kondisi alat HPLC saat berlangsungnya analisis asam amino: Temperatur Jenis kolom : 27 oC (suhu ruang) : pico tag 3.1.Asetoniril 60% . Transformasi dilakukan dengan cara metilasi sehingga diperoleh metil ester asam lemak (FAME).

28 membandingkan waktu retensinya dengan standar pada kondisi analisis yang sama. dan trietilamim dengan perbandingan 2:2:1) Pengeringan dengan gas N2 Hidrolisat protein kering Penambahan 30 μL larutan derivatisasi ( campuran antara metanol. Waktu retensi dihitung pada kertas rekorder sebagai jarak dari garis pada saat muncul puncak pelarut sampai ke tengah puncak komponen yang dipertimbangkan.45 mikron Injeksi ke alat HPLC Kromatogram Gambar 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC. dan trietilamin dengan perbandingan 3:3:4) Pengenceran dengan buffer asetat sebanyak 200 μL lalu dibiarkan selama 20 menit Penyaringan dengan milipore berukuran 0. Tambelo kering 0.75 g Penambahan 5-10 ml HCl 6N Pemanasan dalam oven pada suhu 100 oC selama 24 jam Hidrolisat Protein Penyaringan dengan milipore berukuran 45 mikron Filtrat hidrolisat Penambahan 30 μL larutan pengering (campuran antara metanol. . natrium asetat. pikoiotisianat.75 g 0.

29

a. Preparasi contohd (hidrolisis dan esterifikasi) Contoh lemak ditimbang sebanyak 20-30 mg, kemudia ditambahkan 1 mL larutan NaOH 0,5 N ke dalam metanol dan dipanaskan dalam penangas air selama 20 menit. Sebanyak 2 mL BF3 16% dan 5 mg/mL standar internal ditambahkan pada sampel tersebut, lalu dipanaskan lagi selama 20 menit dan selanjutnya didinginkan. Sampel kemudian ditambahkan 2 mL NaCl jenuh dan 1 mL n-heksana, lalu dikocok dengan baik. Lapisan heksana dipindahkan dengan

bantuan pipet tetes ke dalam tabung yang berisi 0,1 gram Na2SO4 anhidrat, dibiarkan 15 menit. kromatografi gas. b. Analisis komponen asam lemak dengan kromatografi gas Pelarut sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam kolom. Bila aliran gas pembawa dan sistem pemanasan sempurna, puncak pelarut akan nampak dalam kurang dari 1 menit. Sebanyak 5 µL campuran standar FAME diinjeksikan Fasa cair dipisahkan dan selanjutnya diinjeksikan ke

setelah pena kembali ke nol (baseline). Jika semua puncak sudah keluar, diinjeksikan 5 µL sampel yang telah dipreparasi (A). Waktu retensi dan puncak masing-masing komponen tersebut kemudian diukur. Jika rekorder dilengkapi dengan integrator, waktu retensi dan luas puncak langsung diperoleh dari integrator dan membandingkan waktu retensinya dengan standar untuk mendapatkan informasi mengenai jenis dari komponen-komponen dalam contoh. Jumlah dari masing-masing komponen dalam sampel dihitung menggunakan metode internal standar, dengan cara sebagai berikut :

Keterangan :
Cx Cs Ax As R = = = = = kosentrasi komponen x kosentrasi standar internal luas puncak komponen x luas puncak standar internal respon detektor terhadap komponen x relatif terhadap standar

30

Kondisi alat kromatografi gas pada saat dilakukan analisis : 1. Kolom 2. Dimensi kolom 3. Laju alir n2 4. Laju alir h2 5. Laju alir udara 6. Suhu injektor 7. Suhu detektor 8. Suhu kolom - Kolom temperatur : cyanopropil methylsil (kolom kapiler) : p=60m,ø dalam = 0.25 mm, 025 µm film tickness : 20 ml/menit : 30 ml/menit : 200 – 250 ml/menit : 200 oc : 230 oc : program temperatur : awal 190 oC diam 15 menit akhir 230 oC diam 20 menit 9. Ratio 10. Injeksi volum 11. Linier velocity 3.3.1.5 Analisis mineral Mineral yang dianalisis pada sampel tambelo meliputi mineral kalsium (Ca), kalium (K), magnesium (Mg), besi, (Fe), natrium (Na), mangan (Mn), klorida (Cl), seng (Zn), fospat, dan tembaga (Cu), dianalisis dengan metode spektrofotometer serapan atom (SSA). a. Analisis mineral kalsium (Ca), kalium (K), dan seng (Zn) (Yosida et al. 1972). Prinsip penentuan kadar kalsium, kalium dan seng adalah proses pelarutan sampel dengan asam klorida, kemudian absorbansinya diukur dengan : 1:8 : 1 µl : 20 cm.sec

menggunakan SSA. sebagai berikut:

Prosedur analisis mineral kalsium, kalium dan seng adalah

Sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram,

kemudian dihancurkan dan dimasukkan ke dalam gelas piala yang telah dibilas dengan HCl 1 N. Sampel ditambahkan dengan 25 mL HCl 1 N dan disimpan selama 24 jam. Setelah penyimpanan, sampel dikocok dengan shaker dan

disaring dengan kertas Whatman No.1. 1). Analisis mineral kalsium (Ca) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 1 mL, ditambahkan 2 mL larutan lantanum oksida dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 10 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL.

31

Larutan diukur absorbansi dengan SSA pada panjang gelombang 285,2 nm untuk magnesium dan 422,7 nm untuk kalsium. 2). Analisis mineral kalium (K) dan seng (Zn) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 2 mL dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 40 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL. Larutan diukur absorbansi dengan AAS pada panjang gelombang 766,5 nm untuk kalium dan 213,9 nm untuk seng. b. Analisis mineral besi (Fe) Prinsip penentuan kadar besi adalah proses pelarutan bahan dengan larutan asam campur yang terdiri dari asam nitrat, asam sulfat dan asam perklorat, kemudian dilanjutkan dengan proses pemanasan. Prosedur analisis mineral besi adalah sebagai berikut: sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram, kemudian dihancurkan. HNO3, H2SO4, Larutan asam campuran disiapkan yang dibuat dari Sampel yang telah

dan HClO4 dengan perbandingan 5:1:2.

hancur ditambah 10 mL larutan asam campur lalu dipanaskan di dalam ruang asam menggunakan api kecil selama 2 jam. Api dibesarkan sampai larutan

menjadi jernih. Kemudian didinginkan. Larutan ditambahkan akuades sampai volume 50 mL dan disaring dengan kertas saring pencucian asam Whatman No.1 (acid-washed filter paper whatman No.1). Sebanyak 10 mL ekstrak sampel ditambahkan 1 mL hidroquinon dan 1 mL orto-fenantrolin, kemudian ditambahkan sodium sitrat sampai pH menjadi 3,5. Larutan diencerkan dengan akuades sampai volume 50 mL dan dipanaskan dalam water bath selama 1 jam. Larutan deret standar diperlakukan dengan pereaksi yang sama dengan ekstrak sampel. Absorbansi diukur dengan SSA pada panjang gelombang 248,3 nm. c. Analisis mineral tembaga (Cu) dan mangan (Mn) (SNI 01-2362-1991) Prinsip dari penentuan kadar tembaga dan mangan adalah proses pengabuan dengan suhu 450 oC dengan penambahan asam nitrat (HNO3). Prosedur analisis sebagai berikut: sampel ditimbang sebanyak 25 gram dalam gelas piala 250 mL yang terdahulu dicuci dengan HNO3 6N. Sampel dikeringkan di dalam oven pengering pada suhu 110-125 oC selama 8-24 jam. Sample kering kemudian dipindahkan ke dalam tungku, dan atur suhu pada 250 oC. Suhu tunggu

uji fitokimia. Jika proses sampel abu belum putih sempurna. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya proses pembakaran secara cepat yang menyebabkan contoh dapat terhambur keluar. dan evaporasi. apabila tidak proses penambahan asam nitrat harus diulangi. Abu yang dihasilkan harus benar-benar putih. kemudian filtrat yang dihasilkan digabungkan dan dipekat dengan menggunakan rotary evaporator. uji aktivitas antioksidan. Tahapan proses ekstraksi tambelo meliputi penghancuran sampel. Setiap 1 x 24 jam dilakukan penyaringan. kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol (MeOH) sebanyak 2500 mL.32 dinaikkan secara bertahap hingga mencapai 350 oC selama periode 1-2 jam. serta uji fraksinasi dan identifikasi senyawa antioksidan.7 nm dan Mn 285. dan metanol (polar). 3. Abu dilarutkan ke dalam 2 mL HNO3 pekat.25-1 mL HNO3 pekat.1 Ekstraksi bahan aktif Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi tambelo yaitu tiga macam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya.3. Larutan disaring dengan kertas saring Whatman No. etil asetat (semi polar). Kenaikkan suhu kemudian dilanjutkan hingga 450 oC. yaitu heksana (non polar). Filtrat yang diperoleh kemudian diencerkan dengan akuades hingga 50 mL. Sampel kering ditimbang sebanyak 500 gram. Sampel tersebut kemudian ditambahkan 0. sampel dikeluarkan dari tungku dan dinginkan.2 Penelitian tahap kedua Penelitian yang dilakukan pada penelitian tahap kedua adalah ekstraksi bahan aktif. dan dibiarkan selama semalam (16-24 jam). Kondisi pada suhu ini dibiarkan sesaat untuk memberikan kesempatan sebagian besar lemak terbakar habis.3. Larutan standar.2. kemudian diencerkan dengan akuades hingga 25 mL dan didihkan di atas hot plate. blanko dan contoh dialirkan ke dalam SSA. Sampel diletakkan diatas hot plate untuk menguapkan HNO3. . partisi. perbandingan 1:5 pada suhu ruang selama 3x24 jam. Sampel kemudian dipanaskan kembali pada suhu 450 oC di dalam tungku selama 30-60 menit.2 nm. Absorbansi mineral Cu dan Mn masing-masing diukur dengan SSA pada panjang gelombang 324.42 yang sebelumnya telah dicuci dengan HNO3 10% dan akuades. Ekstrak MeOH pekat dipartisi dengan n-heksana menggunakan corong pisah diulang sebanyak 3 kali. 3. maserasi.

lalu dihitung Ekstrak metanol sisa partisi dipekatkan kembali dan dihitung Semua ekstrak diuji fitokimia dan uji antioksidan (Miyaoka et al. Fase etil asetat dikumpulkan dan dipekatkan. aktif tambelo disajikan pada Gambar 8. rendemen. Ebada et al. diulang sebanyak 3 kali. 2008). 1998.33 Fase n-heksana dikumpulkan dan dipekatkan dan dihitung rendemennya. 2008). Ekstrak MeOH setelah partisi n-heksana dipartisi kembali dengan etil asetat. rendemennya. Diagram alir proses ekstraksi bahan Sampel (500 g) Maserasi 3x24 jam dengan MeOH perbandingan 1:5 Penyaringan Filtrat Evaporasi Ekstrak MeOH Dipartisi dengan n-Heksana Residu Fase n-heksana Evaporasi Fase MeOH Dipartisi dengan etil asetat Fase etil asetat Ekstrak n-Heksana Evaporasi Fase MeOH Evaporasi Ekstrak etil asetat Ekstrak MeOH Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al. .

34 3. Fraksi asam diambil kemudian ditambahkan pereaksi Dragendrof. Meyer. Fraksi metanol dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2M. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5%. Filtratnya diuapkan kemudian ditambahkan eter.2. biru atau ungu. jika terbentuk warna hijau adalah steroid dan warna merah adalah triterpenoid. b) Uji saponin Sebanyak 50 mg sampel ditambah dietil eter.3. c) Uji steroid/Triterpenoid Sampel sebanyak 1 gram ditambahkan 25 mL etanol 30% dipanaskan (50 oC) dan disaring. adanya flavonoid ditunjukkan oleh terbentuknya warna merah akibat penambahan H2SO4. Terbentuknya warna hijau atau hijau biru menunjukkan adanya senyawa fenol dalam bahan. d) Uji Flavonoid Sebanyak 1 gram sampel ditambah metanol 30% sampai terendam kemudian dipanaskan. Filtratnya ditaruh ke dalam spot plate (papan uji) kemudian ditambahkan H2SO4 pekat. Lapisan eter yang terbentuk dipipet dan diletakkan papan uji (spot plate) dengan menambahkan pereaksi Liebermen Buchard (3 tetes asam asetat anhidrin dan 1 tetes H2SO4 pekat). f) Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl3) Sebanyak 1 g sampel diekstrak dengan 20 ml etanol 70%. . e) Uji Tanin Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan dalam 5 ml etanol ditambah dengan beberapa tetes pereaksi FeCl3 1 %. selanjutnya diamati warna yang terbentuk. Adanya tannin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau. dipisahkan dan ditambahkan 5 ml air kemudian dikocok sampai timbul busa yang stabil. dan Wagner.2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995) a) Uji alkaloid Sampel sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan 10 mL metanol dan beberapa tetes amoniak. Residu yang tidak larut dalam dietil eter diambil.

35 3. Prinsip kerjanya pada sampel (mengandung senyawa bersifat antioksidan) yang dapat meredam radikal bebas DPPH.4 Fraksinasi senyawa antioksidan Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (ekstrak terpilih). 3. Butylated hydroxytoluene (BHT) dan vitamin super ester C digunakan sebagai kontrol positif. dan untuk pembanding dengan masing-masing kosentrasi 4. Volume dicukupkan sampai 5 mL.3. 60. 40. Persamaan regresi yang diperoleh dalam bentuk y = bx + a.3. yaitu kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kolom (KK). Serapan sampel tersebut diukur pada panjang gelombang 515 nm.2. Pengujian ini dilakukan sebanyak tiga kali ulangan. Metode yang digunakan ada dua macam. pemilihan pelarut untuk fraksinasi dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada . a) Kromatografi lapis tipis (KLT) Pada penelitian ini. 6. dan 10 ppm. Ekstrak tersebut masing-masing ditambahkan 200 μl larutan DPPH 1mM dalam metanol. Nilai kosentrasi dan hambatan ekstrak diplotkan masing-masing pada sumbu x dan y. Hambatan dihitung dengan rumus. Ekstrak dilarutkan dalam metanol dan dibuat dalam berbagai konsentrasi ( 20.2. 8. Nilai absorbansi sampel diperoleh persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi. dan 80 ppm).3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995) Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode perendaman radikal bebas DPPH (1. Persamaan regresi diperoleh dari hubungan antara kosentrasi sampel dan persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit. Persamaan ini digunakan untuk mencari Inhibition Concentration 50 % (IC50) dengan memasukkan angka 50 sebagai y sehingga didapatkan nilai x sebagai IC50.1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl) (Yeh dan Cen 1995). Uji ini dilakukan terhadap ekstrak tambelo.

Ekstrak aktif KLT (silika gel) CHCl3:MeOH 9:1ml CHCl3:MeOH Heksan:EtOH 1:1ml 17:3 ml Heksan:EtOH 8:2ml Heksan :CHCl3 3:2 ml terbentuknya spot terbanyak Gambar 9 Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT. Kombinasi pelarut yang menghasilkan pengembangan spot terbaik digunakan sebagai eluen untuk memfraksinasi ekstrak terpilih dengan kromatografi lapis tipis maupun kromatografi kolom. pelarut heksan : etil asetat dengan perbandingan 1:1 mL dan pelarut kloroform : metanol dengan perbandingan 17:3 mL. pelarut heksan:etil asetat dengan perbandingan 8:2 dan n-heksana:kloroform (3:2). bagian atas kolom ditutup . Diagram alir fraksinasi dengan metode kromatografi kolom dapat dilihat pada Gambar 10. kloroform. Semua larutan silika gel masuk ke dalam kolom. Ekstrak terpilih sebanyak 0. Larutan ekstrak tersebut kemudian ditotolkan pada plat silika gel 60 F254 dengan panjang l0 cm. lalu dilakukan penjenuhan silika gel dalam kolom selama 30-60 menit.36 kromatografi lapis tipis (KLT). Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT dapat disajikan pada Gambar 9. Pada proses penjenuhan.5 mL pelarutnya. Pencucian kolom dilakukan dan pembuatan larutan silika gel (silika gel G40-63) yang akan dimasukkan ke dalam kolom sebelum ekstrak dimasukkan ke dalam kolom. Kolom diberi glasswool pada bagian bawahnya. Silika gel sebanyak 13-15 gram dilarutkan pada eluenn kloroform : metanol = 9:1 sehingga diperoleh larutan silika gel. etil asetat.02 gram dilarutkan dalam 0. b) Kromatografi kolom (KK) (Gritter et al. untuk memilih eluen terbaik dicoba dengan berbagai eluen n-heksana. dan metanol. l99l) Pelaksanaan kromatografi kolom dilakukan dengan memasang kolom pada statif secara tegak lurus. Kombinasi yang digunakan adalah pelarut kloroform:metanol dengan perbandingan 9:1 mL.

37 dengan aluminium foil untuk mencegah penguapan eluen yang terdapat dalam kolom sehingga silika gel tetap dalam kondisi basah. Ekstrak dibiarkan mengalir ke bagian penjerap kolom dan kolom terus diisi agar silika gel tidak kering. Larutan silica gel + eluen 1: 1 (w/v) Larutan silika gel dimasukkan ke dalam kolom Pembuatan larutan ekstrak terpilih 1 g ekstrak terpilih + 3 ml eluen Dijenuhkan selama 30-60 menit Eluen dikeluarkan (silica gel tidak boleh kering) Larutan ektrak terpilih dimasukkan ke dalam kolom Kran dibuka Kolom terus dialiri eluen Larutan ditampung pada tabung reaksi (±10 ml) Ekstrak aktif Gambar 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom. Larutan yang keluar dari kolom ditampung pada tabung reaksi dengan masing-masing tabung reaksi berisi ± 3 mL. Silika gel harus jenuh sebelum ekstrak dimasukkan dan setelah silika gel jenuh maka kran kolom dibagian bawah kolom dibuka kembali setelah semua ekstrak masuk ke dalam kolom. . Fraksi hasil kromatografi Kolom (KK) dilakukan pengujian KLT untuk penggabungan fraksi dengan mengacu pada kesamaan pola kromatogram. dihitung rendamennya. dan setiap fraksi penggabungan yang terbentuk dikeringkan dengan aerator di ruang asam. serta diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH (Yeh dan Cen 1995). Larutan dalam tabung reaksi kemudian dikeringkan untuk menghasilkan residu ekstrak. Ekstrak yang akan difraksinasi adalah ekstrak terpilih sebesar 1 gram dan dilarutkan pada pelarut asal sebanyak 3 mL.

2. Analisis yang dilakukan pada tahap identifikasi senyawa aktif.38 3.5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al.3. 1988) Fraksi terpilih dengan nilai aktivitas antioksidan yang tertinggi dilanjutkan dengan mengidentifikasi senyawa antioksidan menggunakan Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) Agilent Technologies dilakukan untuk mendapatkan bobot molekul dan rumus molekul yang sangat membantu dalam elusidasi struktur molekul. yaitu memilih senyawa yang memiliki puncak tinggi. kemudian dicocokkan dengan senyawa yang ada pada database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). .

88 30.29 4. Tabel 3 Kandungan proksimat daging tambelo Proksimat (%) Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Segar Tambelo 82. dan karbohidrat. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi nilai ekonomisnya sehingga lebih efektif. Tabel 2 Rendemen daging tambelo Sampel Tambelo utuh Daging tambelo Berat segar 2200 gram 40.1 Rendemen daging tambelo Hasil pengukuran rendemen daging tambelo pada Tabel 2 menunjukkan bahwa tambelo segar setelah preparasi 40.8 42.31 0.01 7.05 17.28±0.02 a Kering Tambelo Kerang mas ngur b 6.62 b Temilok 73. Kadar air .04 7.73%.73 % 4.27 7. Kandungan proksimat daging tambelo dapat dilihat pada Tabel 3.83 21 Sumber : a Syaputra (2007) .21±0. protein.04 2.2 Kandungan proksimat tambelo Hasil analisis proksimat dari daging segar tambelo dan serbuk kering tambelo. Waranmaselembun (2007) Kadar air merupakan jumlah air yang terkandung di dalam bahan pangan dan ikut menentukan kesegaran dan daya awet bahan pangan tersebut.60 1.95 5.27±0.77±2. air akan tersublimasi dan bahan yang tidak tersublimasi berubah menjadi padat atau kering.08 14.1 Penelitian Tahap Pertama 4.00 % Berat kering 22.01 7.22 5. Hal ini juga menunjukkan bahwa organisme perairan termasuk tambelo dan ikan ini memiliki kandungan air yang tinggi sehingga diperlukan penanganan yang bagus untuk mengurangi kerusakan pada bahan beku.63±0.45±2.4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4. meliputi kadar air. lemak.72±0. Jumlah rendemen setelah dikeringkan sebesar 22.00% dan setelah dikeringkan rendemen berubah menjadi semakin kecil yang disebabkan banyaknya kandungan air yang menguap.04 4.72±0. Penurunan rendemen tambelo disebabkan penguapan kandungan air akibat bahan mengalami tekanan vakum yang sangat tinggi setelah dibekukan.1.1.01 56. abu.07±0.88±1.

Kadar protein pada tambelo segar adalah 7. pembentukan senyawa esensial (hormon. Hal ini karena air yang terdapat pada tambelo segar tersublimasi akibat adanya tekanan vakum. Hasil analisis proksimat kadar air tambelo segar adalah 82.60%. bahan pengumpal darah).31%. mempertahankan netralitas tubuh. Fungsi utama protein bagi tubuh adalah untuk pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan. Kadar air tambelo kering pada hasil penelitian ini memiliki kadar air dibawah kadar air maksimum yang diisyaratkan untuk proses ekstraksi. Kadar air yang bahan untuk ekstraksi diisyaratkan sebesar 11%. Hal ini menunjukkan bahwa sampel kering memiliki kadar air yang cukup baik untuk dilakukan proses ekstraksi karena semakin rendah nilai kadar air bahan maka semakin memudahkan pelarut untuk mengekstrak komponen senyawa aktif yang diinginkan. karena selain sebagai sumber energi. dan transpor zat gizi dalam tubuh. Plankton diketahui sebagai sumber protein sekaligus simbion dalam sistem pencernaan pada tambelo. sehingga tambelo segar menjadi kering.63%. pembentukan antibodi dan proses detoksifikasi. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Syahputra (2007) yang menunjukkan bahwa kadar air temilok segar sebesar 73. kadar air tambelo kering menjadi 6. Hasil perhitungan nilai rata-rata proksimat dapat dilihat pada Lampiran 1. enzim.77%. setelah mengalami pengeringan dengan freeze dry. protein berfungsi sebagai zat pembangun tubuh dan zat pengatur di dalam tubuh. sedangkan kadar protein tambelo kering sebesar 42. Protein dalam plasma (serum) darah dapat juga berfungsi sebagai antioksidan (Mucthadi 2009).72%.40 yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri. hemoglobin.63%. Kandungan protein pada tambelo kering berasal dari plankton yang merupakan salah satu makanan bagi tambelo. Hal ini bertujuan agar proses ekstraksi dapat berjalan lancar (Setyowati 2009). . sedangkan kadar air tambelo setelah dikeringkan sebesar 6. kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada bahan pangan yang dapat mempercepat pembusukkan (Winarno 1997). regulasi keseimbangan air dalam tubuh. Protein merupakan zat gizi yang sangat penting bagi tubuh.

jika dibandingkan dengan literatur yang ada maka nilai hasil analisis memiliki nilai yang tidak jauh berbeda. Sebagian besar bahan makanan. Peranan lemak ikan dalam mencegah timbulnya penyakit jantung koroner telah dibuktikan. Peranan berbagai unsur mineral bagi manusia masih belum sepenuhnya diketahui (Winarno.29%). sedangkan kadar lemak pada tambelo kering sebesar 14.41 Hasil analisis kadar lemak dari tambelo segar adalah 0. Tabel 3 menunjukkan bahwa kandungan abu dalam tambelo segar 2. Pada proses pembakaran.88% lebih kecil dari kerang mas ngur 7. Peranan lemak dalam bahan pangan yang utama adalah sebagai sumber energi. Ikan menyimpan cadangan energi dalam bentuk lemak di dalam hatinya (lebih dari 50% berat hatinya). belum banyak penelitian sejenis dilakukan pada manusia. Unsur mineral juga dikenal sebagai zat organik atau kadar abu. sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. yang terkenal dengan sebutan asam lemak omega 3. Elemen-elemen mineral telah jelas diketahui fungsinya pada makanan ternak.88%. Hal ini terutama karena peranan asam lemak eikosapentaenoat (EPA) dan dokosaheksaenoat (DHA).26%.28%.05% dan kandungan abu pada tambelo kering 5. sisanya terdiri dari unsur. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Syahputra (2007). Berdasarkan hasil analisis proksimat pada tambelo kering memiliki karbohidrat yang relatif lebih tinggi . dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL (Muchtadi 2009). Lemak adalah bentuk energi berlebih yang disimpan oleh hewan sehingga jumlah lemak dalam hewan yang dijadikan bahan pangan ditentukan oleh keseimbangan energi hewan tersebut. Lemak merupakan sumber yang dapat menyediakan energi sekitar 2. Abu adalah zat anorganik.unsur mineral.1997). kadar lemak tambelo lebih rendah dibandingkan dengan kadar lemak temilok segar (4. karena itulah disebut abu. Karbohidrat merupakan bagian terbesar dari senyawa organik. bahan-bahan organik terbakar tetapi zat anorganiknya tidak. lebih kecil dari temilok 4.07%.25 kali lebih banyak daripada yang diberikan oleh karbohidrat atau protein. hal ini disebabkan karbohidrat merupakan bahan pembentukan tumbuh-tumbuhan dan juga terdapat pada hewan dalam jumlah tertentu. yaitu sekitar 96% terdiri dari bahan organik dan air.

00 2.00 3.56 1.72 1.3 Kandungan asam amino tambelo Mutu protein dinilai dari perbandingan asam-asam amino yang terkandung di dalam protein tersebut. sedangkan asam amino isoleusin yang terendah (0. Asam amino merupakan monomolekul dari protein yang memiliki fungsi penting bagi organisme hidup.29 1.00 3.19 0.44%.37 0.55%). .80 1.41 1. sebaliknya protein yang kurang satu atau lebih asam-asam amino esensial mempunyai mutu yang rendah (Winarno 2008). sedangkan kromatogram standar asam amino dapat dilihat pada Lampiran 3 dan kromatogram asam amino tambelo pada lampiran 4.34%).25 0.00 1.26 0. Hal ini diperkuat oleh Purchon (1968) yang mengatakan bahwa sistem pencernaan yang dimiliki oleh shipworm atau tambelo mampu mencerna selulosa 80% dan lignin 45 dan pada umumnya kerang-kerangan menyimpan hasil pencernaannya dalam bentuk glikogen (gula otot) dan lemak.1.50 0.63 1.50 3.01 Jenis Asam Amino Gambar 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo.42 30. Pada prinsipnya suatu protein yang dapat menyediakan asam amino esensial dalam suatu perbandingan yang dapat menyamai kebutuhan manusia dikatakan mempunyai mutu yang tinggi.81 1. Kadar Asam Amino (%) 4. Jenis asam amino yang tertinggi dalam tambelo adalah asam glutamat (3.34 0. 4.74 1.41 0. Hal ini diduga bahwa tambelo menyimpan hasil pencernaan dalam bentuk glikogen.85 1.00 0. Tambelo mengandung 17 jenis asam amino.50 1.50 2. karena sebagian besar juga makanan yang diperolehnya berasal dari kayu bakau sehingga sistem pencernaannya dapat memanfaatkan selulosa dan lignin pada kayu bakau.55 2. Kandungan asam amino dari tambelo disajikan dalam Gambar 10.

01 0.56 0.72 0.37 1.85 3. meningkatkan kesehatan mental dan meredam depresi (Linder 1992).55 3.63 1. AAS = Asam amino sulfur.44 8.58 6.19 1.01 1.80 1.29 0.56 0. dan asam amino hidrofobik.55 1.91 0.61 2.26 1. Kajian-kajian menggunakan isotop-isotop stabil menunjukkan bahwa usus mendapatkan sebagian besar energi .41 1.41 0.19 1. asam amino basa.19 5. asam amio netral.26 1.81 8. AAHi = asam amino hidrofilik.42 61.34 1.56 0.74 40.20 28. Asam glutamat bermanfaat untuk menahan konsumsi alkohol berlebih. dapat disajikan pada Tabel 4. AAA = asam amino asam.81 1.92 26. AAN = asam amino netral.74 1.85 2.80 1.74 1.85 2.62 9.52 66.19 1.74 1.56 1.97 13.01 1. Asam glutamat adalah asam amino non esensial yang dapat disintesis dari gugus amida pada molekul glutamin yang diubah menjadi karboksilat melalui proses hidrolisis asam atau basa.4 4. asam amino aromatik. asam amino non esensial. Tabel 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia dari tambelo Jenis asam amino Aspartat Glutamat Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein Histidin Treonin Ariginin Valin Metionin Isoleusin Leusin Fenilalanin Lisin TOTAL % dalam total asam amino Klasifikasi asam amino (% berat protein) AAE AANE AAA AAB AAN AAR AAS AAHi 2.55 3.56 14. asam amino hidrofilik.29 0.43 Kandungan asam amino yang terdapat di dalam tambelo diklasifikasikan menjadi sembilan jenis asam amino yang terdiri dari asam amino esensial.72 0.25 1.29 1.68 AANE = asam amino non esensial.63 1. Menurut the international glutamate information service (IGIS).84 20.80 1.72 0. AAR= asam amino aromatik. AAB = asam amino basa.25 1. asam amino asam. asam amino sulfur. mempercepat penyembuhan luka pada usus.81 1. glutamat yang berasal dari makanan merupakan sumber energi utama bagi usus.43 AAHb 1.82 43.26 1. AAE = asam amino esensial. AAHb = asam amino hidrofobik.63 0.72 0.64 1.25 1.

Glutamat yang berasal dari makanan diperlukan bersama dengan sistin dan glisin untuk produksi glutathion. Glutamat bersama dengan glutamin merupakan asam amino yang paling berlimpah dari 20 jenis asam amino yang mencapai 20 persen dari asam-asam amino pada usus (the international glutamate information service). Usus sangat membutuhkan glutamat. asam glutamat. dan membantu meningkatkan daya ingat. histidin. menginaktifkan radikal bebas. lisin. sistin. Usus merupakan garis pertahanan pertama tubuh karena dari semua organ pencernaan. alkohol dan unsur-unsur lain yang dapat membahayakan tubuh. dan telah diperlihatkan bahwa semua glutamat yang dimakan dari bahan makanan hanya 4 % yang keluar dari tubuh. sistin digunakan untuk memperoduksi hati dan mencegah atau meredakan penyakit yang berbahaya (Cat 2000). phenilalanin. Asam-asam amino hasil pemecahan protein sebelum ditransportasikan ke hati terlebih dahulu diabsorbsi melalui sel-sel mukosa usus dan selanjutnya di serap oleh vena untuk kemudian ditranspor ke hati. valin. asam aspartat. dan juga merupakan salah satu amino yang . suatu molekul antioksidan yang memainkan peranan penting dalam mekanisme daya tahan tubuh serta perbaikan kerusakan sel dan jaringan tubuh. glisin. Glutathion merupakan pelindung otak dan hati dari kerusakan akibat obat atau racun. leusin. baik secara langsung maupun tidak langsung di antaranya adalah metionin. Keterkaitan dengan pengunaan tambelo sebagai obat tradisional maka ditinjau dari komposisi asam amino yang diperoleh dapat dijelaskan bahwa umumnya asam-asam amino ini mempunyai kegunaan besar bagi kesehatan manusia. detoksifikasi dari tubuh (dalam kaitannya dengan sulfur) serta penghasil kolagen yang digunakan untuk kekenyalan kulit dan tekstur. usus mempunyai kontak terbesar dengan lingkungan eksternal dalam bentuk makanan. prolin. Beberapa asam amino ini secara umum mempunyai kegunaan besar untuk kesehatan manusia.44 dari metabolisme asam amino. isoleusin. Secara medis. Metionin juga merupakan prekusor sistin yang merupakan asam amino penghasil glutathion untuk detoksifikasi di hati. alanin. Metionin merupakan suatu antioksidan yang baik karena dapat mensuplai belerang. dan treonin. Sistin merupakan penghasil taurin yaitu suatu komponen gliutathion. Sistin juga diperlukan untuk kesehatan kulit.

Kekurangan metionin dapat menyebabkan akumulasi lemak di hati. memperkuat sistem kekebalan tubuh dengan memproduksi antibodi. menurunkan kadar gula darah. Valin merupakan salah satu dari tiga asam amino rantai cabang (yang lain adalah leusin dan isoleusin) yang meningkatkan energi. dan penyakit hati atau liver (Cat 2006). membuat pencernaan menjadi lebih baik. meningkatkan daya tahan tubuh. Histidin di dalam tubuh diperlukan untuk pertumbuhan dan perbaikan dari semua jenis jaringan. Secara medis. Histidin merupakan suatu prekusor asam amino non esensial. membantu dalam metabolisme gula dan asam organi. dan sebagai antioksidan. histidin digunakan dalam mengobati radang sendi dan ketulian saraf. luka mengkerut. otak dan sistem saraf pusat. Alanin merupakan sebuah sumber penting energi untuk jaringan otot. radang sendi. Valin bermanfaat dalam pertumbuhan dan perbaikan jaringan otot serta menjaga keseimbangan nitrogen dan mengatur penggunaan glukosa. dan edema. Leusin bermanfaat . tulang dan otot serta membantu dalam penyembuhan luka. dan membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). yang mana histidin akan membentuk sistem imun sebagai respon terhadap suatu reaksi alergi. mengatur energi. Leusin bermanfaat dalam pengaturan gula darah. Penambahan valin harus selalu dikombinasikan dengan isoleusin dan leusin pada rasio miligram (Bonderud 2011). Histidin berperan penting dalam pemeliharaan dan pembuatan glial sel saraf yang disebut oligo-dendrocytes (selendang atau pembungkus) dan mencegah kerusakan otak dan jaringan saraf dalam tulang punggung. mengatur gula darah. dan meningkatkan produksi hormon pertumbuhan. Metionin juga dapat berperan dalam menstabilkan lemak. lemah. dan membantu dalam pembentukan hemoglobin serta merupakan pertahanan utama tubuh untuk melawan infeksi akibat luka. pertumbuhan yang lambat. metionin digunakan untuk gangguan depresi. membantu proses pemulihan. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. memperbaiki jaringan otot. yaitu suatu campuran yang penting untuk menghasilkan energi dan pertumbuhan otot dan pergerakan tubuh. Secara medis. Isoleusin bermanfaat dalam mempercepat penyembuhan luka.45 diperlukan untuk pembuatan creatine monohydrate di dalam tubuh.

dan karbohidrat. Penderita gangguan hati. lemak. kehilangan energi. Apabila fungsi hati terganggu maka akan berdampak pada terganggunya proses metabolisme tersebut. membantu kerja hati dan fungsi lipotropiknya. Lisin juga bermanfaat dalam menjaga keseimbangan nitrogen serta membantu menjaga badan pada saat stress berat dan kondisi yang melelahkan. tidak berselera dan hilang kosentrasi (Cat 2006). dan manfaatnya untuk cardiovascular meliputi pemeliharaan kesehatan pembuluh darah. menghambat pertumbuhan sel tumor dan kanker serta membantu pelepasan hormon pertumbuhan (Supamas 2011). kolagen dan untuk memperbaiki jaringan yang rusak dan juga membantu dalam membangun protein otot yang baru. Treonin bermanfaat dalam mencegah penumpukan lemak di hati. Fenilalanin secara medis digunakan untuk perawatan radang sendi dan depresi. Arginin berperan dalam membantu detoksiifikasi hati pada sirosis hati dan fatty liver. Arginin penting untuk kesehatan reproduksi pria karena 80% cairan semen terdiri dari arginin. enzim. 2006). pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. seperti sakit liver membutuhkan makanan yang tinggi protein dan karbohidrat serta lemak dengan kadar yang sedang karena hal ini akan meringankan kerja hati untuk memperoleh energi yang besar untuk aktivitasnya (Carroli et al.46 dalam pengaturan gula darah. Kekurangan lisin akan menyebabkan kekacauan enzim. testosteron. lesu. mengatur energi serta membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). berat badan menurun. Lisin juga diperlukan dalam membentuk antibody. tulang dan otot . membantu dalam penyembuhan luka. meningkatkan sistem imun. Kekurangan phenilalanin akan menyebabkan tubuh lemah. Hati mempunyai fungsi untuk melakukan metabolisme protein. hormon insulin). Tabel 5 menunjukkan skor kimia asam amino esensial tambelo dengan cara melakukan perbandingan antara asam amino protein esensial tambelo dengan . Kekurangan treonin akan menyebabkan warna kulit menjadi tidak normal. Lisin digunakan di dalam tubuh kerusakan hati dan pertumbuhan terhambat. kerontokan rambut. hormone (GH. untuk penyerapan kalsium serta pembentukan tulang dan pertumbuhan otot seperti mobilisasi lemak untuk digunakan sebagai energi.

4 Kandungan asam lemak tambelo Asam lemak adalah asam organik yang terdapat sebagai ester trigliserida atau lemak.33 8. Kromatogram standar asam lemak disajikan pada Lampiran 5. Berdasarkan analisis kualitatif.65 30.63% sehingga diperoleh skor kimia protein tambelo sebesar 19. Jenis asam lemak yang banyak terkandung di dalam serbuk tambelo adalah asam palmitoleat (C16:1) (14.95 29. sedangkan kromatogram asam lemak daging tambelo disajikan pada Lampiran 6.22 21. Hal ini berarti bahwa protein yang terkadung dalam tambelo dapat dimanfaatkan oleh tubuh hanya sekitar 19. Tabel 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo Asam amino Kadar dalam tambelo (mg/g prot) 7.94 37.75 76.55 %).1. Analisis asam lemak dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas untuk mengetahui komposisi asam lemak yang terdapat pada tambelo.32 Isoleusin Leusin Lisin Metionin Fenilalanin + tirosin Treonin Valin Keterangan : tritofan bukan asam amino pembatas sehingga tidak dilakukan analisis 4. yang terdiri dari 7 jenis asam lemak jenuh (SFA). diketahui bahwa angka terendah ditunjukkan oleh asam amino isoleusin dan treonin masingmasing sebesar 19.41 37. sehingga asam amino esensial perlu difortifikasi untuk meningkatkan nilai gizi protein tambelo.47 referensi dari FAO/WHO (1991).87% dan 21. keragaman asam lemak pada serbuk tambelo dapat teridentifikasi 15 jenis asam lemak.63 60. Komposisi asam lemak dalam tambelo dapat dilihat pada Tabel 6. Asam palmitoleat adalah salah satu jenis .87 41.87%.23 42.09 22.87% dengan asam amino pembatas yang utama berada pada isoleusin. Berdasarkan hasil pengamatan. baik yang berasal dari hewan atau tumbuhan. 5 jenis asam lemak tidak jenuh tunggal atau monounsaturated fatty acid (MUFA) dan 3 jenis asam lemak jenuh ganda atau polyunsaturated fatty acid (PUFA).32 13.16 Referesi FAO (1991) (mg/g prot) 40 70 55 35 60 40 50 Skor kimia amino esensial (%) 19.

Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) memiliki .24 1.14-Eikosatrienoat (C20:3ω6) EPA (C20:4ω3) Arakidonat (20:4ω6) 5. meskipun PUFA dapat menurunkan kolesterol LDL. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh.10 0.11. Asam oleat memiliki sifat lebih stabil dan lebih baik perannya dibandingkan PUFA (PolyUnsaturated Fatty Acid).22 0.94%.33 14.04 0. minyak biji kapas. Tabel 6 Komposisi asam lemak dalam tambelo No Asam Lemak Jenuh 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Miristat (C14:0) Pentadekanoat (C15:0) Palmitat (C16:0) Heptadekanoat (C17:0) Stearat (C18:0) Arakidat (C20:0) Heneikosanoat acid (C21:0) Miristoleat (C14:1) Palmitoleat (C16:1) Cis-10-Heptadekanoat (C17:1) Oleat (C18:1ω9) Linolenat (C18:3ω3) Cis-8. minyak kedelai.10 13. Asam lemak tak jenuh tunggal secara umum memiliki efek yang menguntungkan terhadap kadar kolesterol dalam darah.94 0.69 0. minyak kacang tanah. Asam lemak ini tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA).80 0.55 0.66 3.80 0.29 Asam lemak Hasil (%berat minyak) Asam Lemak Tak Jenuh Asam oleat (omega-9) yang terkandung di dalam tambelo kering sebesar 1. dan canola.13 0. asam lemak tak jenuh tak tunggal (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi popular (Achadi 2010).48 asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) yang merupakan jenis asam lemak yang memiliki satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya.13 0. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah.

dan fluor hanya terdapat dalam tubuh dalam jumlah kecil saja. fungsi imun. seperti besi.49 kelemahan. tetapi karena perannya yang sangat penting untuk pembentukan tulang dan gigi terutama pada masa pertumbuhan dan ibu hamil. zink. Hasil penelitian yang dilakukan oleh Mensink (1987) diacu dalam Achadi (2010) menunjukkan bahwa MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. Unsur kalsium (Ca) juga dianalisis bukan karena sebagai antioksidan. yaitu asam linoleat (C18:3ω3). asam arakhidonat (C20:4 ω6). asam eikosatrienoat (C20:3ω6). tembaga.46 ppm. Di dalam tubuh unsur mineral berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo disajikan pada Tabel 7. Unsur mineral lain. sedangkan MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. dan integritas membran sel. Jenis-jenis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) yang terkandung dalam tambelu kering. mangan. kobalt. karena itu disebut trace element atau mineral mikro. Sampai sekarang telah diketahui ada empat belas unsur mineral yang berbeda jenisnya diperlukan manusia agar memiliki kesehatan dan pertumbuhan yang baik. mempertahankan fungsi. Asam lemak tak jenuh ganda berperan penting dalam transpor dan metabolisme lemak. 4. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein) serta dapat menurunkan produksi trigliserida dan apolipoprotein beta di dalam hati (Achadi 2010). iodium. yaitu dapat menurunkan HDL. Unsur-unsur ini terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup besar dan karenanya disebut unsur mineral makro. Sisanya terdiri dari unsur-unsur mineral.1. Kandungan mineral pada tambelo diuji karena peranannya sebagai antioksidan dalam sistem pertahanan tubuh terhadap reaksi oksidasi radikal bebas dan mineral ini tergabung dalam enzim antioksidan yang berperan melindungi membran sel dan komponen dalam sitosol. Kadar Kalsium dari tambelo adalah 3532.5 Kandungan mineral tambelo Sekitar 96% bahan makanan terdiri dari bahan organik dan air. Kekurangan Kalsium akan menyebabkan osteoporosis dan . dan asam eikosapentanoat/EPA (C20:4ω3).

30 ppm. dalam keadaan teroksidasi. Seng merupakan mineral penting pada berbagai sistem enzim dan hormon. Dalam keadaan tereduksi. 2000. Seng (Zn) Tembaga (Cu) Fosfor (P) Selenium (Se) Peranan zat besi (Fe) berhubungan dengan kemampuannya dalam reaksi oksidasi dan reduksi. Klorida (Cl Kalium (K) Magnesium (Mg) Mangan (Mn) Natrium (Na) 3532. Secara kimia.50 akan mempengaruhi mental dan juga menyebabkan osteomalasia. Almatsier 2006). 9. zat besi merupakan unsur yang sangat reaktif sehingga mampu berinteraksi dengan oksigen.05 <0.30 0. Penyerapan Ca akan dipermudah dengan adanya vitamin D (Muchtadi 2009). besi berperan dalam respirasi sel. Kandungan seng (Zn) pada tambelo segar adalah 12. Zat besi sebagian besar berada dalam hemoglobin.02 435.06 0.46 5. Sebagai . Tabel 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo No Parameter Hasil (ppm) Mineral Makro Kalsium (Ca) 1. 2. yaitu sebagai kofaktor bagi enzim-enzim yang terlibat dalam reaksi oksidasi reduksi (FAO/WHO 2001.40 3. 8.45 12. Winarsi 2007). Zat besi juga berperan dalam imunitas dalam pembentukkan sel-sel limfosit. Aktivitas superoksida dismutase (SOD) dan katalase tergantung pada zat besi. 5.42 1373.98 2363.41 626.18 Mineral Mikro Besi (Fe) 7. besi kehilangan dua elektron sehingga memiliki dua sisa muatan positif (Fe2+ /fero). 10. 4. 3. 6. 11. besi kehilangan tiga elektron sehingga memiliki tiga sisa muatan positif (Fe3+/feri) karena dapat berada dalam dua bentuk ion ini. Antioksidan enzimatis bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal baru (Marks et al.

dan hormon timulin 1. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Hasil penelitian Winarsi (2004) yang memberikan minuman susu skim yang diperkaya dengan isoflavon kedelai sebesar 100 mg dan 8 mg ZnSO4 yang diberikan setiap hari selama 2 bulan pada wanita premenopause diketahui dapat menurunkan sindrom premenopause. Selenium (Se) adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas dan merupakan bagian penting enzim glutation peroksidase. meningkatkan aktivitas enzim antioksidan. Mineral Cu berperan melalui aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD). proliferasi. Keadaan tubuh yang mengalami stres karena trauma. Khusus ibu hamil dan . Angka kecukupan Se per hari yang dianjurkan oleh Widya Nasional Pangan dan Gizi (2004) adalah 5-20 µg untuk bayi dan anak di bawah 10 tahun dan 20-30 µg untuk pria dan wanita berumur di atas 10 tahun sebesar. terkena polusi lingkungan. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. dan luka dapat menghabiskan suplai seng dalam tubuh (Wirahadikusumah 1985). kadar IgG antiTT. Enzim superoksida dismutase mempunyai substrat spesifik. Jika tubuh kekurangan tembaga maka akan terjadi peningkatan peroksida lipid (Harris diacu dalam Ridwan 1997).51 salah satu mineral imunitas yang berfungsi untuk maturasi. Peran tembaga sebagai kofaktor maupun sebagai pengatur enzim SOD cukup besar. diferensiasi. Mineral Zn sebagai komponen protein yang mempunyai gugus SH-(metallothionine) berperan sebagai pembersih radikal bebas. Hasil analisis diketahui bahwa kandungan tembaga (Cu) yang terdapat pada tambelo nilainya kecil.98 ppm. dan aktivasi sel T. yaitu ion superoksida. yaitu 0. Seng (Zn) berperan dalam sistem pertahanan tubuh dengan cara berkonjugasi dengan thiol sehingga menghambat pembentukan ion superoksida. Kemampuan tubuh seseorang untuk menyerap seng menurun sesuai dengan pertambahan usia sehingga penting untuk meningkatkan intake mineral seng ketika usia 40-an. yang dapat menghancurkan peroksida yang terbentuk dari hasil oksidasi lemak di dalam tubuh (Mucthadi D 2009). Mineral Zn juga merupakan komponen enzim yang berperan dalam perbaikan asam nukleat (Harris diacu dalam Ridwan 1997).

pelarut metanol memiliki nilai kostanta dielektrik tinggi jika dibandingkan dengan pelarut yang lain sehingga pelarut metanol dapat membuka dinding sel yang mengakibatkan hampir semua senyawa dapat tertarik keluar dari dalam sel.2 Penelitian Tahap Kedua 4. Selain itu.2. Kadar Selenium di dalam tambelo adalah 0.19% ) dan etil asetat (2. 4. Besarnya rendemen ekstrak metanol diduga berkaitan dengan sifat pelarut metanol yang memiliki kemampuan pemisahan komponen dari bahan yang lebih baik.72%. Penelitian ini dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi yang dilanjutkan dengan partisi cair-cair. Berdasarkan hasil rendemen ekstrak tambelo tersebut.86%).18 ppm. Tabel 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Uji Fitokimia Alkaloid Flavonoid Phenol Hidroquinon Steroid Triterpenoid Saponin Tanin n-Heksana + + + + + Jenis Pelarut Etil Asetat + + + + + Metanol + + + + + - . sedangkan ekstrak tambelo yang mengandung rendamen relatif kecil adalah ekstrak n-heksana (2. terbukti bahwa tambelo mengandung berbagai senyawa dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda. Kandungan fitokimia ekstrak tambelo dapat dilihat pada Tabel 8.1 Rendemen ekstrak tambelo Ekstraksi merupakan salah satu cara pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu bahan. masing-masing sebanyak 5 dan 10 µg/orang/hari (Winarno 2008). 4.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Analisis fitokimia adalah salah satu cara untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder pada suatu tanaman atau hewan.52 menyusui mendapat tambahan. Hal ini sesuai dengan pernyataan Heath dan Reineccius (1986) bahwa metanol mampu mengekstrak senyawa organik. sebagian lemak serta tanin yang menyebabkan hasil ekstraksi metanol cukup kuat. Rendemen ekstrak tambelo yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5.2.

katekin. komponen fenolik. Flavonoid merupakan golongan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 karbon sebagai kerangka dasarnya. Cos et al. aseton. gula. isoflavonoid (1’B-3C). dan air (Harborne 1987). turunan asam sinamat. yang memiliki aktivitas antioksidan meliputi flavon. flavonol. Khopkar (2003) berpendapat bahwa bahan dan senyawa kimia akan mudah larut pada pelarut yang relatif sama kepolarannya. saat ini diketahui sebanyak 5. Hal ini diduga senyawa alkaloid merupakan senyawa polar. Menurut Pratt dan Hudson (1990). tanin. Kemudian dilaporkan juga senyawa flavonoid dari stereospermum . isoflavon. polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid. asam amino. hewan. Pelarut yang bersifat polar mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener. Ekstrak etil asetat tambelo (Tabel 8) diketahui mengandung senyawa flavonoid yang tinggi.53 Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kasar tambelo. butanol. Kelima belas atom karbon tersebut membentuk dua cincin aromatik (C6) yang terikat pada rantai propana (C3) sehingga membentuk susunan C6-C3-C6. alkaloid bebas basa hanya larut dalam pelarut organic. bahwa ekstrak metanol memiliki senyawa alkaloid yang sangat tinggi. dan 1 neoflavonoid (1’B-4C).500 jenis alkaloid (Harborne 1987). karotenoid. Flavonoid merupakan senyawa polar yang mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol. metanol. dimetilformamida. karena senyawa yang terbawa pada proses ekstraksi adalah senyawa yang mempunyai polaritas sesuai dengan pelarutnya yaitu pelarut metanol. baik pada tanaman. yaitu flavonoid (1’B-2C). Hal ini karena pelarut etil asetat bersifat semi polar sehingga memiliki kemampuan melarutkan senyawa polar dan non polar. Pada umumnya. (1998) melaporkan bahwa beberapa senyawa flavonoid bersifat antioksidan dan dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase maupun reaksi superoksida. meskipun beberapa pseudoalkaloida dan protoalkaloida yang larut dalam air. dimetilsulfoksida. Garam alkaloida kuarterner sangat larut dalam air (Sastrohamidjojo 1996). Berdasarkan susunan ini dapat dihasilkan 3 jenis struktur. dan glikosida (Harborne 1987). ataupun jamur dan merupakan produk yang dihasilkan dari proses metabolisme sekunder. Alkaloid adalah senyawa alami amina. dan kalkon.

Berdasarkan hasil uji fitokimia. 2006). Secara teoritis. Vattem dan Shetty 2006). Besarnya daya peredaman radikal bebas DPPH maka dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Molyneux 2004. Perubahan warna pada ekstrak tambelo dapat dilihat pada Lampiran 7. semakin tinggi kosentrasi antioksidan yang ditambahkan pada larutan DPPH. Senyawa steroid dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat (Harbone 1987).54 personatum selain bersifat antioksidan.2. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana bersifat non polar. Senyawa DDPH adalah suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain membentuk senyawa yang lebih stabil dan dapat bereaksi dengan atom hidrogen membentuk DPPH tereduksi (diphenylpicrylhydrazine) yang stabil. Pengukuran absorbansi dilakukan pada setiap sampel antioksidan yang dibuat dengan berbagai konsentrasi.3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH (1. sapogenin. Suatu senyawa dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya ditandai dengan perubahan warna ungu menjadi kuning pucat (Molyneux 2004). maka nilai absorbansi akan semakin turun karena warna larutan bertambah kuning. . 2005). Ada beberapa steroid seperti. 4. fukosterol. senyawa tersebut juga dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase (Kumar et al. Peredaman (inhibisi) terhadap radikal bebas dinyatakan dalam persen. Steroid alami berasal dari berbagai transformasi kimia dua triterpena yaitu lanosterol dan sikloartenol. Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid yang dapat diklasifikasikan menjadi steroid dengan atom karbon tidak lebih dari 21 yaitu sterol. ekstrak n-heksana tambelo mengandung senyawa steroid yang tinggi. glikosida jantung dan vitamin D. Perubahan warna yang mengindikasikan adanya reaksi peredaman radikal bebas DPPH oleh senyawa antioksidan baik pada larutan ekstrak tambelo maupun pada larutan BHT dan vitamin super ester C. diisolasi dari sumber daya hayati laut bersifat non toksik dan mempunyai khasiat menurunkan kolesterol dalam darah dan mendorong aktivitas antidiabetes (Bhakuni et al.

sedangkan .21 262.16 10 ppm 94. Ekstrak metanol tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 85.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.35 0 BHT Vitamin n-heksana ester super C Sampel Etil asetat Metanol 8. BHT.77 29. BHT. Nilai IC50 dari ekstrak tambelo. Tabel 9 memperlihatkan bahwa nilai aktivitas antioksidan pada BHT dengan nilai IC50 3.78 81.35 8.27 ppm jauh leih ebih kecil dibandingkan dengan ketiga ekstrak kasar tambelo Tabel 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.00 ppm.86 ppm.27 Berdasarkan Gambar 12.27 15 3. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Molyneux 2004).01 4.44 63.53 Gambar 12 Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.56 15. dan vitamin super ester C disajikan pada Gambar 12. 300 Rata-rata IC50 (ppm) 250 200 150 100 50 3. dan vitamin super ester C.02 51. menunjukkan ekstrak etil asetat tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dari kedua ekstrak yang lainnya. dengan nilai rata-rata IC50 sebesar 15.83 84.35 ppm dan vitamin super ester C yaitu 8.19 IC50 (ppm) 3.55 dan aktivitas antioksidan dinyatakan dengan IC50 (Inhibition Concentration) yang menunjukkan kosentrasi sampel antioksidan yang dapat menghambat atau meredam aktivitas antioksidan yang semakin tinggi atau dengan kata lain IC50 sebagai kosentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH.51 27.

yaitu etil asetat. dilakukan pencarian eluen terlebih dahulu dengan menggunakan KLT.2. Hal ini menyebabkan komponen bioaktif yang bersifat non polar pada ekstrak n-heksana tidak terlarut sepenuhnya pada pelarut tersebut sehingga berpengaruh pada nilai IC50. Pengujian aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak kasar tambelo memiliki kekuatan penghambatan yang berbeda-berbeda antara yang satu dengan yang lainnya dan menghasilkan hubungan antara kosentrasi ekstrak kasar yang digunakan dengan persen inhibisinya. baik pada kosentrasi ekstrak maupun pada kosentrasi standar (BHT dan vitamin super ester C). etil asetat. Perhitungan persen inhibisi IC50 dan grafik regresi linear pada BHT. dan etanol. dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada kromatografi lapis tipis (KLT). kloroform. dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 150-210 ppm. Rendahnya aktivitas antioksidan ekstrak n- heksana diduga karena pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak nheksana tambelo dan kristal DPPH pada penelitian ini adalah metanol yang bersifat polar. . Eluen ini berfungsi sebagai fase gerak saat fraksinasi. metanol. 4. Sebelum dilakukan fraksinasi terhadap ekstrak kasar etil asetat.4 Fraksi ekstrak terpilih Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. Hanani et al. (2005) menyatakan bahwa presentase penghambatan (% inhibisi) terhadap aktivitas radikal bebas akan ikut meningkat seiring dengan meningkatnya kosentrasi. Eluen yang digunakan adalah n-heksana. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo dapat disajikan pada Lampiran 8. kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm. Eluen dengan pemisahan terbaik kemudian dikombinasikan satu dengan yang lainnya dengan berbagai perbandingan. Bois (1958) diacu dalam Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm. n-heksana : etil asetat (1:1). sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 100-150 ppm.56 ekstrak n-heksana tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 262.77 ppm. Kombinasi yang digunakan adalah yang terdiri dari pelarut kloroform : metanol (9:1).

48 Rf3 = 3. diduga terdapat sembilan jenis senyawa pada ekstrak etil asetat tambelo. Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan.3/8. Hal ini menunjukkan bahwa dalam fraksi tersebut mengandung senyawa yang . Data rendamen hasil kolom disajikan pada Lampiran 10.5 = 0.5 = 0.5 = 0.5/8.74 Rf5 = 5.5 = 0.5/8. steroid.65 Rf4 = 4.15748%) dan rendamen terkecil pada fraksi 6 (0. Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) disajikan pada Gambar 12.5 = 0.5 = 0. Kesepuluh fraksi tersebut kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dan uji fitokimia. dan n-heksana : etil asetat (8:2). Berdasarkan analisis dengan menggunakan KLT.1/8. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang kemudian dilakukan pengujian fitokimia. Rendamen fraksi terbesar terdapat pada fraksi 1 (0.00156%). diduga bahwa masing-masing fraksi telah menunjukkan adanya 1 spot dengan Rf yang berbeda.97 Rf8 = 7.1/8.5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Berdasarkan hasil fraksinasi kolom. Menurut Markam (1988).5 = 0.2.82 Rf6 = 6.25 Rf1 = 0. Profil pola pemisahan senyawa dengan eluen tersebut disajikan pada Lampiran 9a.4/8.5 = 0. alkaloid dan fenol hidrokuinon. penggunaan kloroform : metanol sebagai eluen pada perbandingan 15 : 1 sampai 3 : 1 dapat memisahkan senyawa flavonoid dengan baik. Berdasarkan hasil fraksinasi kolom.1/8. Berdasarkan hasil fraksinasi tersebut (Gambar 12).06 Gambar 12 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) 4.84 Rf7 = 7/8.4 Rf2 = 2. diketahui bahwa pada fraksi 9 dan fraksi 10 mengandung senyawa triterpenoid. diperoleh eluen terbaik yang terdiri dari campuran kloroform : metanol (9 : 1). Hasil pengecekan terhadap fraksi tersebut. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang disajikan pada Lampiran 9b.2/8.57 kloroform : metanol (17:3). Rf9 = 8. flavonoid.5 = 0.

91 ppm. . Perhitungan persen inhibisi dari hasil fraksinasi dapat lihat pada Lampiran 12.6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo disajikan pada Gambar 13. Berdasarkan hasil pengujian. Hal ini berkaitan dengan fungsi proses fraksinasi yang bertujuan untuk memperoleh pola pemisahan yang sempurna.2.87 ppm. diketahui bahwa aktivitas antioksidan fraksi kesembilan mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Gambar 14 memperlihatkan bahwa fraksi 9 memiliki daya inhibisi yang setara dengan vitamin super ester C. Hal ini memungkinkan adanya senyawa aktif dalam faksi 9 yang berpotensi sebagai obat antioksidan. fraksi yang didapat lebih murni senyawa aktif dan lebih banyak terisolasi. disusul dengan fraksi 10 dengan nilai IC50 28. Kandungan fitokimia fraksi tambelo disajikan pada Tabel 10. Tabel 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Kelompok Senyawa Nama Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Alkaloid + + + + + + + + + + Flavonoid + + + + + + + + + + Phenol Hidroquinon + + + + + + Steroid + + + + + + + + + + Triterpenoid + + + + + + + + + + Saponin + + + + + + + Tanin - 4. terbukti terjadi perubahan warna dari ungu menjadi kuning cerah dengan nilai IC50 8.58 memungkinkan dapat menghambat radikal bebas. Aktivitas antioksidan pada fraksi tambelo lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak tambelo.

Jika semua elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan.49 63. Pengujian dengan menggunakan DPPH merupakan salah satu metode yang sederhana.63 5.04 3.29 43.06 8. Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen. maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil.17 2.91 4.90 28.59 120 Rata-rata IC50 100 80 60 40 20 0 15 103.94 86.21 76.32 2.69 Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi etil 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 asetat Estrak kasar dan Hasil Fraksi Gambar 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo Sebuah senyawa dapat disebut sebagai antioksidan bila senyawa tersebut dapat mendonorkan atom hidrogennya dengan cepat sehingga dapat menghambat terjadinya pembentukan radikal bebas (Sauriasari 2006).87 1.43 2. akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH.51 4.87 74.40 58. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen.50 61.64 5. Mekanisme penghambatan radikal DPPH dapat dilihat pada Gambar 15. Gambar 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH’ Keterangan: RH = asam lemak tidak jenuh R = radikal bebas . Senyawa DPPH merupakan radikal bebas yang bersifat stabil sehingga dapat bereaksi dengan atom hidrogen yang berasal dari suatu senyawa antioksidan. Hasil reaksi tersebut berupa DPPH tereduksi (yang tidak reaktif lagi karena telah mendapatkan donor hidrogen (Molyneux 2004).68 4.

terdapat empat struktur senyawa yang terbagi atas tiga komponen. Berdasarkan analisis LC-MS sampel fraksi 9 dengan berat molekul 352. massa analyzer. instrumen kontrol dan proses data.2. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). Struktur senyawa tersebut disajikan pada Gambar 16. Ketiga komponen tersebut tergolong dalam kelompok senyawa terpenoid. Data spektrum sampel fraksi 9 dapat dilihat pada Lampiran 11. yaitu farnesic acid glyceride.7 Identifikasi senyawa fraksi teraktif Liquid chromatography mass spectrofotometer (LC-MS) merupakan metode analisis kuantitatif yang merupakan kombinasi antara kromatografi cair dengan spektroskopi massa. sesquiterpenoic acid glyceride. . detektor.60 4. tekanan permukaan. sumber ion.Analisis senyawa menggunakan LC-MS dilakukan pada fraksi terbaik (fraksi 9). Analisi LC/MS yang dilakukan secara electrospray ionisation. (a) Komponen 1 Farnesic acid glyceride (b) (c) Komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride (d) Komponen 3 Labdane diterpenoid Gambar 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan massa 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid. Instrumentasi LC-MS terdiri atas inlet-LC. dan labdane diterpenoid.

inhibitor tumor. Labdane merupakan diterpen bisiklik alami yang membentuk inti struktural untuk berbagai macam produk alami yang dikenal sebagai labdanes atau diterpenes labdane.3-dihydroxypropilfarnesate dan memiliki dua turunan monoasetoksi. Pendapat ini juga didukung oleh Marero et al. hormon. Terpenoid yang disebut juga isoprenoid. komponen 1 farnesic acid glyceride dan komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride termasuk di dalam kelompok senyawa seskuiterpenoid. di antaranya adalah sebagai antifeedant. Kedua komponen tersebut memiliki aktivitas sebagai antibiotik dan antifeedant. Senyawasenyawa tersebut memiliki aktivitas sitotoksik yang menghambat sel kanker usus besar pada manusia. antifeedant serangga. triterpen (C30). (2003) yang melaporkan bahwa hasil isolasi dari pulmonate Trimusculus peruvianus menghasilkan empat senyawa labdane diterpens melalui jalur oksidasi. yang dapat dikelompokkan menjadi monoterpen (C10). monocyclofarnesic acid glyceride. . tetraterpen (40). antimikroba. Secara umum senyawa seskuiterpenoid ini mempunyai bioaktifitas yang cukup besar. terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. seskuiterpen (C15). Andersen et al. drimane sesquiterpenoic acid glyceride. Senyawa-senyawa seskuiterpenoid tersebut diturunkan dari cis farnesil pirofosfat dan trans farnesil pirofosfat melalui reaksi siklisasi dan reaksi sekunder lainnya. dan politerpen (≥ 40) (Sirait 2007).61 Terpenoid adalah senyawa alam yang terbentuk dengan proses biosintetis. odheri menghasilkan senyawa 2. podolakton inhibitor pertumbuhan tanaman. Diterpenoid merupakan senyawa yang mempunyai 20 atom karbon dan dibangun oleh 4 unit isoprena. Beberapa publikasi tentang ketiga komponen seperti yang dilaporkan oleh Gustafson et al. (1980) juga melaporkan bahwa nudibranch jenis A. dan glyceryl ether. antibiotik dan toksin serta regulator pertumbuhan tanaman dan pemanis. Seskuiterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit isoprena yang terdiri dari kerangka asiklik dan bisiklik dengan kerangka dasar naftalen. (1983) bahwa di dalam ekstrak nudibranch Archidoris montereyensis mengandung senyawa-senyawa diterpenoic acid glyceride. Senyawa ini mempunyai bioaktivitas yang cukup luas yaitu sebagai hormon pertumbuhan tanaman. Berdasarkan pengelompokan dari senyawa terpenoid tersebut. diterpen (C20).

dan tetrasiklik. bisiklik. . Berdasarkan hasil analisis LC-MS. dan anti karsinogen. hal ini diduga bahwa senyawa flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak tambelo termasuk dalam kelompok senyawa volatil sehingga ada kemungkinan bahwa senyawa flavonoid yang berperan sebagai senyawa antioksidan di dalam ekstrak tambelo adalah kelompok senyawa volatil. Senyawa diterpenoid dapat berbentuk asiklik. trisiklik. tidak terdeteksi. antifouling. Tata nama yang digunakan lebih banyak adalah nama trivial (Sirait 2007).62 senyawa pemanis. senyawa flavonoid.

Pada ke tiga ekstrak (n-heksana. yaitu farnesic acid glyceride. flavonoid. lemak 0. Fraksi 9 menyerupai salah satu dari empat struktur senyawa yang dikelompokkan ke dalam tiga komponen. triterpenoid dan saponin. lemak 14.87 ppm yang setara dengan vitamin super ester C (8.21%.63 5 SIMPULAN DAN SARAN 5. sesquiterpenoic acid glyceride dan labdane diterpenoid.07%. Fraksi 9 dari ekstrak etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan sebesar 8. Daging tambelo mengandung 17 jenis asam amino dan 15 jenis asam lemak. dan karbohidrat 7.45%. abu 2.27%.28%. abu 5. . Rendemen tertinggi terdapat pada ekstrak metanol yaitu 5. protein 42.72%.63%.77%. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC 50 sebesar 15 ppm. dan karbohidrat 30. Komposisi kimia tambelo kering adalah kadar air 6.72%.88%. protein 7.71%. etil asetat.27ppm). 5.2 Saran Perlu dilakukan pemurnian lagi dengan menggunakan kromatografi kolom dan untuk memperoleh satu struktur senyawa aktif digunakan nuclear magnetik resonance (NMR). steroid.1 Simpulan Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kimia tambelo segar terdiri dari air 82. metanol) mengandung senyawa alkaloid.

berwarna. bersuara. Awat DS. Dilengkapi: 4 gambar foto berwarna 10 x 12 inci.wisegeek. produsen. Amino acid: What is Valine.DAFTAR PUSTAKA Achadi EL. Version # vpcl 13. Bioactive marine natural Product. J. [kaset audio]. Prinsip dasar ilmu Gizi. 1984. 1994. Palawan’s Kinilaw na Tamilok. 1 video kaset: 2:50 menit. 1980. USA. 2005. Sum FW. [02 Sept 2011].com/2011/01/palawans-kinilaw-na-tamilok/. Jakarta: PT. http://journeyingjames. Palawan. Journeyingjames. Hlm. hlm. Almatsier S. Ed ke-9. Official Methods of Analysis (18 Edn). New Delhi: Anamaya Publisher. Official Methods of Analysis (18 Edn). 2005. 2005. Bonderud D. Tetrahedron Lett. ____________. ____________. hlm. Vol 1. Ed. Mayland. 2011. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Gizi Indonesia. _________. 2008. 2002. Official Methods of Analysis of Association of official Analytical Chemical. Association of Official Analytical Chemist Inc. . Association of Official Analytical Chemist [AOAC]. Bhakuni DS. USA. http://www. Department of Chemistry-University of Caterbury. Gizi dan kesehatan Masyarakat. Pelayanan gizi rumah sakit dan perkembangan ilmu serta teknologi. Andersen RJ. hlm. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 17:97-104. 50-279.com [08 Maret 2011]. Virginia. USA :American Association of Cereal Chemist. 2011. 2009.5. Approved Methods of The American Association of Cereal Chemist. American Association of Cereal Chemist [AACC]. Association of Official Analytical Chemist Inc. Farnesic acid glycerides from the nudibranch Archidoris odhneri. 2006. MarinLit-Marine Literature Database. 21:797-800. 302-308 Blunt JW. Blunt DA. Rajagrafindo Persada. Associaton of Official Analytic Chemist Inc. 2010. Mayland. 20-319 Almatsier S. Betia J. Christchurch: Marine Chemistry Group. 14-104.

Structure activity relationship of bioactive metabolites from some Indo-Pasific marine invertebrates. Porto Alegre. Di dalam: Allen JC. 67-90. Filho CS. Roma: Food and Nutrition Division. Iheringia. Bangkok. Teredinidae) in mangrove driftwood from a northern Brazilian beach.65 Carroli C. 2006. Handayani D. Edrada RA. Pengantar gizi kesehatan. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Bobbitt JM. 1991. New York: Science Publishers. Penentuan Logam Berat. Bandung: ITB press. Coppen PP. Report of a joint FAO/WHO xpert consultation. Griffin et al. Seasonal abundance of the shipworm Neoteredo reynei (Bivalvia. Diktat. Cat B. Selenium untuk kekebalan tubuh. Conectique. 2008. Schupp P. Edrada RA. Editor. Protocols: methods for isolation. Paten 5 512 749. 21: 251. 2006. Nature 3-12. Proksch P. Chem. Zool.. [29 Sept 2011]. Ed ke-2. Metode Pengujian Kimia Produk Perikanan. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. Institut Pertanian Bogor. Human Vitamin and Mineral Requirement.254. US Paten. Pengantar Kromatografi. Effendi YH. Reduce-it weight management program Diet and Nutrition (2011). www. hlm. Beasley CR. Arthur. 2001. FAO/WHO. Thailand. 2000. E Schwarting. Balbin-Oliveros M. hlm. Amino acid protein suplemen.php?article_id=3160. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Wray V. Padmawinata K. 98:17-23. Industrial alkaline protease from shipworm bacterium. Arata D. Hamilton RJ. Proksch P. Dewan Standarisasi Nasional. 17 Mei 1994. .co/tipsoz_solution/diet_utrition/nutrition/article. Ebada SS. Lin W. The use of antioxidants. Penemu: The United States of America as represented by the Secretary of Agriculture. Dietary Amino Acids Benefits. 1995. Sér. 2008. newsletter@trulyhuge. penerjemah. Gritter JR. Material Medika Indonesia. Bogor: Fakultas Pertanian. SNI 01-2362-1991. 1983. Tagliaro CH. 27-36. Effect of threonine deficiency on changes in enzyme activity and liver fat deposition with time. Rancidity in Foods. Prod. 1991. 2002. http://www/conectique. Nat.com [06 Maret 2011]. J. Dena CC.Nutrition 1:502-506. [DSN]. purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrataes.

New York: Van Nostrand Reinhold Comp. Metode Fitokimia. 1988. Padmawinata K. Chem. 1983. The chemistry of ranciditry in food. Di dalam: Allen JC. Scheuer PJ. Terjemahan dari: Food Nutrition and Agriculture. http://lemlit. Andersen RJ 1985. Handayani D. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. 1987. Tiwari AK. Letsoin J. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. Driskel JA. HB. hlm. hlm 1-20. 1988. Ketaren S. Sayuti N. Apama P. Bandung: ITB. Rao RJ. Asal Sumatera Barat. Papua. Mun’im A. . Terjemahan dari Phytochemical method. 17-18 November 2008. dari Kepulauan Seribu. Org. Lampung. J. Hamilton RJ. Ed. Yasuhara TT. 1996. Sekarini R. Bull. Rao JM. Pharm. G. 1986. 2:127-133. 1986. editor. Kumar US. Heath. Kagawa H. Majalah Ilmu Kefarmasian. 30-69.id/file/arsip [12 April 2009]. Rancidity in Food. Harbone JB. Penuntun Cara Modern Menaganalisis Tumbuhan. Tetrahedron. Dunbar DC. Jakarta: Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Konsep Dasar Kimia Analitik. Otto CS. 61: 6594. Lemak dan Minyak Pangan. Kahalalides : bioactive peptides from marine mollusk Elysia rufescens and its algal diet Bryopsis sp.ac. Suhardjo. 2008.unila. * Khopkar SM. 2006. Free radical scavanging and xanthine oksidase inhibitory constituens from Stereospermum personatun. Two new flavonoids and other constituents in licorice roots: their relative astringency and radical scavenging effect. 2003. Dachriyanus. Gizi dan Pangan 1:1-12. Chem. penerjemah. Hatano TH. Jakarta: UI-Press. Chemical studies of British Colombia Nudibranchs. J Nat Prod 68:1611-1621. Flavor Chemistry and Technology. Deaton BJ. Ali AZ. Ke-2. siput dan kerang oleh penduduk di kawasan Muara Mimika. Reineccius. Jakarta: UI Press.66 Gustafson K. Sumule A. Hanani E. Reddy SV. Harper LJ. Pangan Gizi dan Pertanian. Hardinsyah. Jenis dan jumlah konsumsi tambelo. J. Isolasi dan karakteristik senyawa antibakteri epidioksi sterol dari spon laut Petroia Nigrans. Publ. 41:1101-1108. Soediro S. Hamilton RJ. 2005. Hamman MT. New York: Applied Science Publisher. 2006. Okuda. 36:3090-2097. penerjemah. J.

com/doc/isolation-seminternationalUGM/2558795 [ 02 Maret 2011]. 2009. Persepsi Masyarakat Suku Kamoro terhadap tambelo Bactronophorus thoracites di Kabupaten Mimika [skripsi].intiboga. Sci. . Kimura H. Yamada Y. 2003. 2006.org/gb/foto/muller/ecology/09/index. Shimomura M. Antimalarial activity of kalihinol a and realtive diterpenoids from the okinawan sponge. http://www. [12 April 2009] Muchtadi D. Gizi Anti Penuaan Dini. Saraswathy M. Yonge M. 1971. Linder MC.papuaweb. Jakarta: UI Press. Krisnawang H. Alfabeta. Advance in marne biology. penerjemah. Tetrahedron. 1998.com/omega9b. http://www. editor. Isolation and antioxidative assay of several marine macroalgae components within ethyl-acetate fraction. Linder MC. 1992. 2007. hlm 45-67. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Alfabet. Technol 2004. 2000. New York: Academic Press Inc. Jakarta: UI Press. 14-55 hlm. Ekologi Kamoro-Bab IX. J. Universitas Cenderawasih Jayapura. Vol ke-9. Editor. Parakkasi A. Jayapura: Fakultas Keguruan dan ilmu Pendidikan. 2004. Bandung: CV. Bandung: CV. 2009. Galeri-Galery. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity.htm.scribd. Muchtadi TRM. Acanthrlla sp. Asam Lemak Omega 9 dan Manfaatnya bagi Kesehatan. 335-344. Evaluasi Nilai Gizi Pangan. Linder CM. Tetrahedron 13467-13474 Molyneux P. 26:211-219. 1989. Labdane diterpenoid with a new oxidation pattern from the marine pulmonate Trimusculus peruvianus. The biology of wood-boring teredinid mollusca. Miyaoka H. Munifah I. 59:48-55 Muchtadi D. Songklanakarin J. editor. hlm. Nair NB. Biokimia nutrisi dan metabolisme. Biokimia nutrisi dan metabolisme dengan pemakaian secara klinis. Mayabubun 2003.20-56.html [16 Juli 2009]. Bogor: IPB Press. Cetakan I. 2004. http://www. Muchtadi D. penerjemah.67 Linder MC. Parakkasi A. Di dalam: Russell FS. Pengantar Ilmu Gizi. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Muller K. PapuaWeb. hlm. Morrero D et al.

London: Elsevier Applied Science. 1995. Philadelphia : Mosby. Park Ridge. Di dalam: Food Antioxidant. Pergamon Press. 230-429. Antioxidant Recent Development. Ranney MW. 11:119-132.chem-is-try. USA. editor. Cermin Dunia Kedokteran.com [07 Maret 2011]. Schuler P. Imran Z. hlm. 67-78 Nurjanah. Antioksidan Alami Asal Tumbuhan. The Biology of The Mollusca. Ridwan E. Purchon RD. 1979. Edisi ke-6. Unit Corn Mill. www. Kosasih Padmawinata. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah (Anadara granosa) yang diambil dari Kabupaten Boalemo. Purwaningsih S. Institut Teknologi Bandung 26-27 Juni 1997. Lee CY. Edisi revisi. 2009. Natural antioxidant exploited commercially. 1990. London and New York: Elsevier Applied Science. Bandung: ITB. Gorontalo. Terjemahan dari: The organic constiuteuns of higher plants. 2008. editor. 2006. 87-121. Gastineau CF. penerjemah. Tempe mampu menghambat proses ketuaan. Hudson BJF. Jakarta: UI Press. Jensen MD. Dasar-dasar biokimia. Natural antioxidant from plant material. Salamah E. Hudson BJF.68 Nelson JK. Mayor clinic diet manual : A Handbook of Nutrition Practices. 120(1):7-13. Makalah dalam Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. 1994. Di dalam: Huang MT. Sirait M. Food Antioxidant. 2011. 1968. Di dalam: Hudson BJF. Asam amino non esensial. Robinson T. 1997. 8-389 hlm Pratt DE. [7 Mei 2011] Sidik. Ayuningrat E. 191-246 hlm . Penuntun fitokimia dalam farmasi. Washington DC: American Society.supamas. Supriyanti FMT. Moxness KE. editor. hlm. Pratt DE. Ho CT. hlm. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Ed ke-7. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www.org. Phenolic Compound in Food and Their Effect on Health. Hungary.Supamas. 8(2):12-25. 2007. hlm. Natural antioxidant not exploited comercially. Suparni. 1992. Setyowati. 1990. Penapisan awal komponen bioaktif dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea) sebagai senyawa antioksidan. Buletin THP. Bandung: ITB. Noyes Data Co. 123-280. 2005. 1997. Poedjiadi A. Buletin TeknologiHasil Perikanan. Kustiariyah.

hlm. Science. Yparraguirre LA. 2007. Senra MVX. 12-34. 1984. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.69 Sitompul S. . Supamas. 57-158. Waranmaselembun C. Suharsono. Analisis asam amino dalam tepung ikan dan bungkil kedelai. 2008. Ibrahim B. Suhardi.brawijaya. Leoncini O and Amaro CSAG. Yogyakarta: Liberty. Poernomo D. Mol. 1983. hlm. Haryono B. 3-14 __________. __________.supamas. Institut Pertanian Bogor. Produk Fermentasi Ikan Dari Cacing Kapal Bactronophorus sp. 1:12-14. Komposisi kimia dan aktivitas inhibitor topoimerase I dari kerang mas ngur (Attactodea striata). [Tesis]. http://fisika.145-167. Kimia Pangan dan Gizi. Machado-Ferreira E.14-55. hlm.com [07 Maret 2011]. Sudarmadji S. Bogor: M-Brio Press. 2007. Genetics and Molecular Biology Online Ahead of Print. hlm. Kimia Pangan dan Gizi. Kimia Pangan dan Gizi. Suariasari R. Waterbury JB. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama. 221:1401-1403. Turner RD. Calloway CB. Mengenal dan menangkal http://www. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 2006. __________. Asam amino non esensial.pdf. Vizzon VF. Trindade-Silva E. 2009. Bogor: Program Pascasarjana. Buletin Teknik Pertanian. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. 9(1): 33-37. 2011. Segar.1997. Printed in Brazil. Suratmo. 92-128 Kimia Pangan. hlm. [3 februari 2011] Syaputra D. 2004. Winarno FG.com [ 8 Juni 2011] radikal bebas. Jakarta: Erlangga. Biokimia.ac. Physiological traits of the symbiotic bacterium Teredinibacter turnerae isolated from the mangrove shipworm Neoteredo reynei. Biol. Potensi ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) sebagai antioksidan. Jurnal Sumberdaya Perairan.beritaiptek. Sociedade Brasileira de Genética. 2009. 1989.id/bssub/PDF%20FILES/BSS_ 205_I. hlm. A cellulolytic nitrogen fixing bacterium cultured from the gland of deshayes in shipworms. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. 1970. 1992. Genet.

Prosiding Seminar Nasional PBBMI. Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity. 1995. hlm. 2004. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Efek Minuman Fungsional yang Disuplementasi Isoflavon Kedelai dan Zn terhadap Profil Lipiddan Produk MDA Plasma Wanita Premenopause. 43:27-32 . Jakarta: Kanisius. Dalam: Peran Biokimia dan Biologi Molekuler dalam Eksplorasi dan Pemanfaatan Sumberdaya Hayati Berkelanjutan. of Agricultural and Food Chemistry. 2007. Yen GC. Winarsi H.70 Winarsi H. 86-105. Chen HY. Yogyakarta . J.

71 .

72 LAMPIRAN .

73 .

290 .45 II 6.236 1.04 2.01 1.45 Rata-rata 6.195 1.72 Standar deviasi 0.27 7.055 0.72 7.25 1.729 0.285 1.518 0.81 1.349 1.821 1.26 1.62 b.74 1.62 28.22 1.01 2.28 II 82.387 0.45 Standar deviasi 0.007 0.28 2.29 0. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.74 Lampiran 1.28 0.761 2.418 0.293 1.662 1.006 0.15 32.77 14.015 22.011 0.423 0.26 1.337 0.287 0.27 5.20 14.596 0.04 0.008 0.179 1.99 0.88 8.11 6.403 0.56 0.72 0.80 2.21 0.651 1.402 22.989 Rata-rata 0.016 1.19 1.719 0.35 14.15 Rata-rata 82.55 1.63 42.618 0.88 30.19 0.85 3.63 0.011 0.83 Lampiran 2.839 1.055 0.63 41.854 2.41 0.71 7.663 3.251 1.841 3.62 44.42 5.72 6.019 0.399 21. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.009 0.820 1.008 0.43 0.163 0.005 1.018 0.360 1.004 0.31 0.31 2.432 1.01 0.02 0.34 1.023 0.112 0.243 1.37 1.795 1.41 Standar deviasi 0.035 0.07 7. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.

75 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

Kromatografi asam amino ulangan I .76 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a.

Kromatografi asam amino ulangan II .77 b.

78 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

79 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

80 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH .

6.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.40.60.40.8.60.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.40.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.8.6.81 Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.80 ppm) Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.40. vitamin super ester . 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.60.60.

0 70.0 0.0 10.0 20.56 15. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana .18.0 40. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.287x .82 C dan ekstrak kasar tambelo a.0 y = 6.993 % Inhibisi 60.0 50.0 90.27 100.0 80.608x + 27.02 51.19 IC50 (ppm) 3.78 81.0 30.44 63.35 8.16 10 ppm 94.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) b.87 R² = 0.51 27.54 R² = 0.

55 3.449 290.462 0.25 Pers.143 R² = 0.531 y=0.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.423 0.376 0.490 265.58 262.255x – 9.412 0.46 5.421 0.490 R² = 0.224x – 9.83 Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.63 7.407 0.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.201x – 8.449 0.01 12.93 y=0.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .454 0.224x .419 0.255x .regresi linear y=0.94 2.405 2 3 % inhibisi 0 -3.9.09 -0.08 4.434 0.77 29.96 -6.94 2.9.401 0.18 -5.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.79 6.

04 15.449 R² = 0.51 46.089 0.65 87. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.201x .84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.17 15.13 80.432 0.062 0.041 0.055 84.27 y=0.00 4.51 R² = 0.142 0.225 0.084 % inhibisi 52.604x + 43.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .51 10.75 1 y=0.205 0.45 79.123 0.53 85.64x + 37. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.660x + 40.73 19.604x + 43.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.119 0.8.231 0.211 2 0.56 Pers.55 72.92 71.72 47.066 0.40 90.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.53 67.

305 0.30 13. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.777 82.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.34 y=0.73 R² = 0.86 53.656x – 7.223 % inhib Pers.49 21.01 3.018 81.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.68 29.312 0.303 0.38 y=0.372 0.689x – 6.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.89 27.99 29.01 9.337 0.47 9.39 .371 0.40 53.986 88.12 19. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.78 48.392 0.04 R² = 0.203 0.201 0.391 0.347 0.30 84.64x + 37.829 y=0.660x + 40.641x + 2.432 0.

986 R² = 0.905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.6.018 R² = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.7.2.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.656x .689x .641x .777 R² = 0.

30 88.58 290.75 19. Kloroform : Metanol 4.39 Ratarata 788.01 252.87 e.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a.3 45.17 15.93 265. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.34 81.79 10. n-Heksana : Etil asetat 3.03 Standart devisiasi 29. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 . Kloroform : Metanol 5. n-Heksana : Etil asetat 2.53 4.21 3.09 82. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.

13 III 101.88 b.82 77.69 .68 5.46 63.61 7.43 2.00482 0.00506 0.37 73. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.46 76.85 Rata-rata 103.78 58.92 10.74 65.51 63.0152 0.49 174.29 2.80 43.47 80.14 83.82 25.15748 0.00732 0.03492 0.95 75.90 4.36 70.94 5.32 40.0028 0.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.06 1.76 60.86 73.97 8.21 3.63 2.27 62.5 26.04 74.56 54.00156 0.03 64.35 Standart deviasi 4.83 62.41 91.97 129.37 Ulangan II 100.07 57.50 61.00710 0.87 86.40 4.77 24.85 44.72 85.62 83. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.03 33.

64 8.073 0.164 0.099 0.00 81.277 0.647x + 34.89 b.246 0.049 0.82 y=0.136 0.76 82.85 y=0.29 10.17 33.82 61.187 0.255 0. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.62x + 43.23 24.086 0.086 0.41 40.59 81.13 27.108 0.94 79.37 y=0.78 y=0.23 7.18 80.082 0.00 70.149 0.71 88. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.76 93.536x + 46.77 Pers.87 y=0.82 57.53 76.59 64.90 4.651x + 33.193 0.078 0.689x + 27.179 0.65 76.71 42.03 8.112 0.148 0.497x + 45.028 0.41 73.079 % Inhibisi 0 54.155 0.41 y=0.425 0.12 74.88 65.65 34.102 0.47 56 68 79.127 0.17 25.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .12 63.

LAMPIRAN .

74 .

285 1.423 0.80 2.839 1.74 1.72 7.01 2.19 1.99 0.403 0.37 1.399 21.795 1.15 Rata-rata 82.72 Standar deviasi 0.63 0.432 1.15 32.009 0. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.22 1.290 .402 22.83 Lampiran 2.07 7.243 1.360 1.25 1.41 Standar deviasi 0.337 0.20 14.31 0.719 0.62 28.26 1.651 1.008 0.29 0.349 1.45 II 6.163 0.04 2.035 0.821 1.01 1.019 0.88 30.023 0.011 0.418 0.63 41.31 2.71 7.28 II 82.77 14. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.112 0.007 0.387 0.018 0.28 2.729 0.016 1.35 14.662 1.518 0.618 0.01 0.179 1.293 1.287 0. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.56 0.011 0.055 0.45 Rata-rata 6.27 5.596 0.62 b.820 1.81 1.251 1.72 6.11 6.88 8.04 0.008 0.006 0.21 0.195 1.41 0.841 3.28 0.005 1.015 22.761 2.27 7.42 5.62 44.55 1.34 1.63 42.26 1.19 0.43 0.663 3.75 Lampiran 1.004 0.02 0.85 3.72 0.055 0.854 2.236 1.989 Rata-rata 0. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.45 Standar deviasi 0.

76 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

77 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a. Kromatografi asam amino ulangan I .

78 b. Kromatografi asam amino ulangan II .

79 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

80 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

60.80 ppm) .60.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.40.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.6. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.81 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.40.6.60.40.8.8.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.40.

35 8.51 27.27 100.287x .16 10 ppm 94.993 % Inhibisi 60.44 63.19 IC50 (ppm) 3.0 70.0 50.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.0 y = 6.54 R² = 0.0 30.0 90.18.02 51.87 R² = 0.0 0.0 80.82 Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.608x + 27. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) .78 81.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.56 15.0 40.0 10.0 20. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo a.

96 -6.376 0.143 R² = 0.531 3 y=0.419 0.55 3.224x .224x – 9.83 b.449 0.93 2 y=0.423 0.01 12.201x – 8.412 0.255x – 9. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.454 0.94 2.490 R² = 0.94 2.18 -5.63 7.09 -0.regresi linear y=0.9.401 0.462 0.08 4.407 0.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.421 0.79 6.46 5.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .9.25 Pers.77 29.58 262.405 % inhibisi 0 -3.255x .449 290.490 265.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.434 0.

432 0.142 0.211 2 0.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.73 19.27 y=0.231 0.062 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.72 47.084 % inhibisi 52.066 0.8.225 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.53 67.041 0.56 Pers.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .119 0.51 R² = 0.604x + 43.92 71.089 0.604x + 43.123 0.449 R² = 0.201x .55 72.53 85.40 90.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.13 80.64x + 37.055 84.04 15.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.17 15.75 1 y=0.65 87.51 10.51 46.205 0.00 4.660x + 40.45 79.

47 9.12 19.986 88.312 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.689x – 6.04 R² = 0.73 R² = 0.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.018 81.39 .371 0.89 27.30 13.656x – 7.372 0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.432 0.347 0.660x + 40.01 3.01 9.30 84.203 0.99 29.392 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.641x + 2.829 y=0.34 y=0.86 53.49 21.68 29.201 0.78 48.777 82.64x + 37.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.391 0.40 53.305 0.38 y=0.337 0.303 0.223 % inhib Pers.

641x .946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.777 R² = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .6.689x .86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.018 R² = 0.905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.986 R² = 0.7.2.656x .

53 4.30 88.75 19.87 e.34 81.09 82.58 290.21 3.93 265. n-Heksana : Etil asetat 3.79 10.17 15. Kloroform : Metanol 5.39 Ratarata 788.03 Standart devisiasi 29. n-Heksana : Etil asetat 2. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 . Kloroform : Metanol 4.3 45. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.01 252.

86 73.92 10.76 60. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.69 .00156 0.46 63.15748 0.80 43.0152 0. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.77 24.03492 0.78 58.61 7.03 33.37 73.29 2.82 77.46 76.06 1.90 4.97 129.00710 0.00482 0.87 86.35 Standart deviasi 4.88 b.47 80.43 2.85 44.03 64.51 63.74 65.00506 0.85 Rata-rata 103.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.07 57.49 174.94 5.68 5.04 74.14 83.83 62.63 2.21 3.95 75.13 III 101.97 8.62 83.72 85.36 70.50 61.0028 0.5 26.32 40.56 54.41 91.37 Ulangan II 100.00732 0.82 25.40 4.27 62.

88 65.082 0.85 y=0.102 0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.59 64.073 0.536x + 46.18 80.149 0.47 56 68 79.71 88.079 % Inhibisi 0 54.136 0.127 0.53 76.65 76.164 0.29 10.049 0.277 0.82 57.255 0.028 0.155 0.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .086 0.246 0.76 82.82 y=0.41 40.086 0.03 8.90 4.78 y=0.87 y=0.497x + 45.193 0.12 74.13 27.64 8.689x + 27.651x + 33.148 0.62x + 43. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.76 93.112 0.12 63.82 61.187 0.77 Pers.00 70.179 0.37 y=0.425 0.108 0.23 24.00 81.41 y=0.89 b.59 81.17 25.099 0.41 73.17 33.65 34.23 7.647x + 34.94 79.71 42.078 0.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful