KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites

)

JULIANA LEIWAKABESSY

Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Teknologi Hasil Perairan

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Dra. Purwantiningsih S,MS

Judul Tesis Nama NRP

: Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites) : Juliana Leiwakabessy : C351070051

Disetujui, Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Linawati Hardjito, M.Sc Ketua

Dr. Ir. Sri Purwaningsih, M.Si Anggota

Diketahui,

Ketua Program Studi Teknologi Hasil Perairan

Dekan Sekolah Pascasarjana

Dr. Tati Nurhayati, S.Pi, MSi NIP: 19700807 1996 032002

Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc. Agr NIP: 19650814 1990 021001

Tanggal Ujian: 28 September 2011

Tanggal Lulus:

KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites)

JULIANA LEIWAKABESSY

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul “ Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo

(Bactronophorus thoracitesi)” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini

Bogor, September 2011

Juliana Leiwakabessy NRP C351070051

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Ambon pada tanggal 24 November 1969 dari ayah Melkias Leiwakabessy dan Ibu Maria Tapilatu. Penulis merupakan putri keenam dari tujuh bersaudara. Tahun 1989 penulis lulus dari SMU Negeri 2 Ambon dan pada tahun 1997 penulis lulus dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Jurusan Pengolahan Hasil Perikanan Universitas Pattimura. Pada tahun 2007, penulis melanjutkan pendidikan sekolah Pascasarjana (S2) di Teknologi Hasil Perairan IPB dengan sponsor BPPS. Penulis bekerja sebagai staf dosen di Jurusan Perikanan, Fakultas Peternakan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Papua sejak tahun 2003 hingga sekarang.

a. penyusunan laporan. Dilarang mengumumkan atau memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB. 2. b. penulisan karya ilmiah. penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulisan ini tanpa mencantumkan atau menyebut sumber. Pengutipan tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB.@ Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor Tahun 2011 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang 1. . penelitian.

........... 1..............................2..... 16 2.3....................................... 32 3..1 Rendemen daging tambelo ......1........5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al....2 Bahan dan Alat ..1 Tambelo ................................. 1............................................................................3.....................................DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL ............... 9 2...................3...................................................................... 7 2..............................................................5 Kerangka Pemikiran ...............5 Antioksidan dan Pengukurannya ............... xiii DAFTAR LAMPIRAN ........................3............ 5 2....... 11 2...........................3..........2 Penelitian tahap kedua .3 Analisis asam amino (AOAC 1994) ..................................... 1.................1 Latar Belakang ................................3.............. xiv 1 PENDAHULUAN .....5 Analisis mineral ............................... 35 3......................4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) ....1 Penelitian Tahap Pertama ..........3 Tujuan Penelitian ........................................ 39 4.......... 39 4.............. 26 3.............2....1 Penelitian tahap pertama ..............................3................. 32 3.................................................................................4 Kandungan asam lemak tambelo ................ 22 3................................................................................................................................ 34 3........... 30 3............ 1... 42 4.................................................3................................ 22 3...........................................1 Asam amino ......................2..................1..................................................4 Fraksinasi senyawa antioksidan ...................................................................... 47 viii ........................................................................3.... 1 1 2 3 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA ................1 Ekstraksi bahan aktif .................... 21 3.......................................... xii DAFTAR GAMBAR ........................ 38 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ......2 Asam lemak ...............................................................................................3 Kandungan asam amino tambelo ....... 5 2..........................3......... 22 3..........................3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995)...........................................................................................................3 Mineral .................... 39 4......................3 Prosedur Penelitian .............4 Komponen Bioakif dari Moluska ................................................2 Uji proksimat (AOAC 2005) ....... 13 2....................................... 17 3 METODOLOGI PENELITIAN ...............1 Rendemen (Hustiany 2005) ...............................................3.............3.......................................................................2 Perumusan Masalah ....................................1..3 Komposisi Kimia .......3..........3.............................3...................... 1........................................................1....................... 21 3.........2 Kandungan proksimat tambelo .2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995)........................................................................2......... 27 3..1 Waktu dan Tempat Penelitian .................3...........2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat .......3..3...3.................. 6 2.... 35 3....................................................................................2....... 23 3. 23 3.......4 Manfaat Penelitian .......................3.................. 1988) ................................................................ 39 4................................

............................6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo ............................ 56 4.................... 49 4....................... 57 4........1........... 52 4......................2.................................1 Rendemen ekstrak tambelo .........4 Fraksi ekstrak terpilih ....................................................................2.......4..3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ..............................................2.................................. 60 5 SIMPULAN DAN SARAN ........................................2................ 63 DAFTAR PUSTAKA ............................. 54 4..............................7 Identifikasi senyawa fraksi terpilih ..............2................................................................................................. 64 LAMPIRAN ...................5 Kandungan mineral tambelo .....................................2 Penelitian Tahap Kedua ......................................2................ 71 ix ...............2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo ..........2........ 52 4............. 52 4....................5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ............. 58 4.......

........................................................................................................ 43 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo .. 52 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ................. 47 6 Komposisi asam lemak ekstrak kasar tambelo ......... 48 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo ..................DAFTAR TABEL Halaman 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh ....................... 11 2 Rendemen daging tambelo ................................................. 39 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia tambelo ....................... 50 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo ......................................................................................................................... 39 3 Kandungan proksimat daging tambelo ............................. 55 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ......... 61 x ..............................................................................................................

........... 36 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom ................................................ 6 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo metah (Muller 2004) ..................................... 37 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo ........ 7 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990) ........................... 3 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) ........................ dan vitamin super ester C ..............65 xi ................... 42 12 Nilai IC50 dari ekstrak................. 28 8 Diagram alir ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al...................... 57 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-fraksi tambelo ............. 33 9 Diagram alir fraksinasi dengan menggunakan KLT ................ 21 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC ........................................ 18 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007) . 63 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan mass 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid ...................................................................... 20 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan identifikasi senyawa antioksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites) ................................................... 55 13 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) .................................................................................................... 59 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH .........DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Kerangka pemikiran ... BHT............... 2008) ......

......................................... 81 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.......................................... 80 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH dari ekstrak tambelo ..................... 77 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC ..... 88 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS ............................ 78 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC ................. 75 2 Nilai rata-rata asam amino tambelo ......................................................... 88 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo .................................................................................................................. 76 4 Kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC ......................................................... vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo ........... 89 xii ........................ 75 3 Kromatogram standar asam amino pada HPLC .................................................................................DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering ............... 82 9 Profil pola pemisahan senyawa ......................................................................................................................................................... 87 10 Rendamen fraksi tambelo .........

62%.72±0. steroid and triterpenoid.77±2. the identification of fresh antioxidant compound was carried out using LC-MS. 60. 6.04%. The maceration result was evaporated and partitioned with a solvent of n-hexane and ethyl acetate. and 80 ppm) with DPPH method applying BHT and vitamin super ester C as the standard with a concentration of 4.01%.72±0.28±0. amino acid and mineral. It had seven saturated fatty acids and eight unsaturated fatty acids.04%. MarinLit database (Blunt and Blunt 2008). fatty acid.01%. This study aimed to investigate the chemical composition of fresh tambelo. The composition of fresh tambelo divided into moisture 82. and to identify the compound of active antioxidant obtained from selected fractionated extract.21±0.27%. fat 14. The research consisted of two stages.63±0. ash 5.31%.88±1. Supervised by LINAWATI HARDJITO and SRI PURWANINGSIH Tambelo (Teredinidae) is consumed freshly by local people in Papua without removing the digestive tracts. Finally. fat 0. flavonoid.27±0. The highest antioxidant activity obtained by column fractionation was the 9th fraction with IC50 of 8.46 ppm and phosfor of 2363. 8 and 10 ppm.45±2.01%. sesquiterpenoic acid glyceride and labdane diterpenoid.06 ppm. protein 42. The highest antioxidant activity was found in the crude extract of ethyl acetate with IC50 of 15 ppm. The protein of tambelo contained nine essential amino acids and eight non essensial amino acids. It contained calcium of 3532. the extract underwent phytochemical and antioxidant tests (20. Chemical Composition and Identification of Antioxidant Compounds from the Extracts of Tambelo (Bactronophorus thoracites). Teredinidae. The first stage involved the analyses of proximate. ash 2. carbohydrate (by difference) 30.87 ppm.22%.ABSTRACT JULIANA LEIWAKABESSY. to conduct antioxidant and phytochemistry tests. and carbohydrate (by difference) 7. The composition of dried tambelo was moisture 6. described the crude extract of tambelo contained a group of alkaloid. Next. compound . Phytochemical test. 40. chemical. 9th fraction was similar to farnesic acid glyceride.07±0. shipworm.83%. protein 7. Keywords: Activity antioxidants. The second stage was the extraction of active materials by means of maceration.

pentadekanoat (C15:0) 0. protein 42.29%. dan identifikasi senyawa antioksidan menggunakan LC-MS. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya.13%. rematik. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). dan 8 asam lemak tidak jenuh yang terdiri dari miristoleat (C14:1) 0. valin 1. protein 7.45±2.69%.85%.74%. abu 5. arakidat (C20:0) 0. analisis fitokimia.88±1.04%.01%.80%.22%. Kabupaten Manokwari memiliki kadar air 82. Tambelo segar (Bactronophorus thoraites) yang berasal dari perairan Andai.72%. heneikosanoat acid (C21:0) 0.62%. abu 2. alanin 1. Rendemen ekstrak kasar tambelo kering yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan komposisi kimia tambelo segar. metionin 0. Cis-10Heptadekanoat (C17:1) 0. tirosin 0.01%.25%. . Di Papua masyarakat mengkonsumsi tambelo dalam keadaan mentah tanpa harus dibuang isi pencernaannya terlebih dahulu. malaria.28±0.66%. Dibimbing oleh LINAWATI HARDJITO dan SRI PURWANINGSIH. dan karbohidrat 30. kalium 626.77±2.81%. dan diterpenoid labdan.83%. asam glutamat 3. Aktivitas antioksidan yang tertinggi hasil fraksinasi kolom terdapat pada fraksi 9 dengan IC50 sebesar 8. Mereka percaya bahwa isi pencernaan tambelo berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit diantaranya.06 ppm.24%. palmitoleat (C16:1) 14.22%. Asam amino non esensial pada tambelo.63%.33%.07±0. flu. dan sistein 0. meningkatkan air susu ibu. dan besi 1373.27%.27±0. asam lemak.4 ppm. sakit pinggang. dan metanol). asam amino. fosfor 2363.10%.80%. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak kasar tambelo mengandung senyawa alkaloid.04%.01%. EPA (C20:4ω3) 0. prolin 0. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif tambelo dengan cara maserasi. palmitat (C16:0) 13.55%.34%.72±0. dan arakidonat (20:4ω6) 0.fraksi 9 menyerupai senyawa asam gliserida farnesik.87 ppm.19%. Tambelo kering memiliki kadar air 6. heptadekanoat (C17:0) 0.01%. Tahap pertama adalah analisis rendemen.56%.72%.RINGKASAN JULIANA LEIWAKABESSY. Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites).31% lemak 0. Penelitian ini terdiri dari dua tahap.21±0. lisin 1. Asam amino esensial yang terdapat pada tambelo. flavonoid. mendapatkan antioksidan dan fitokimia. glisin 1. Tambelo memiliki 7 asam lemak jenuh (saturated fatty acid/SAFA) yang terdiri atas miristat (C14:0) 5. etil asetat. steroid dan triterpenoid (n-heksana. dan karbohidrat (by difference) 7. leusin 1.42 ppm.63±0.45 ppm.46 ppm.55%. natrium 435. asam gliserida sesquiterpenoid. lemak 14. Tambelo mengandung 9 asam amino esensial dan 8 asam amino non esensial. yaitu asam aspartat 2. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 sebesar 15 ppm. stearat (C18:0) 3.41% dari berat protein. yaitu treonin 0.80% dari berat protein.41%. uji proksimat. arginin 1. Kandungan mineral pada tambelo yaitu kalsium 3532.29% dari berat minyak. fenilalanin 1.26%. nafsu makan dan vitalitas pria. isoleusin 0.72±0. pengujian aktivitas antioksidan. serta mengidentifikasi senyawa aktif antioksidan hasil fraksinasi ekstrak terpilih. dan mineral dalam tambelo. histidin 1.04%. serin 1.37%.

Hasil penelitian menunjukkan banyak dari senyawa kimia tersebut berpotensi menghambat pertumbuhan bakteri dan aktif menghambat pertumbuhan sel kanker serta bioaktivitas lainnya (Edrada et al. flu. Di Philipina masyarakat menyebutnya tamilok (Betia 2011). Salah satu moluska yang telah dimanfaatkan selain sebagai bahan pangan juga digunakan sebagai obat alami adalah tambelo. . Beberapa organisme laut mampu memproduksi senyawa kimia tersebut untuk mempertahankan dirinya dari serangan predator. nafsu makan. 2009). Tambelo (Teredinidae) merupakan salah satu jenis hewan penggerek kayu yang hidup di dalam batang kayu bakau yang sudah lapuk dan membusuk yang dikelompokkan ke dalam filum bivalvia. 2006). Berdasarkan literatur. Senyawa kimia dengan bioaktivitas ini diduga dapat dimanfaatkan manusia sebagai bahan obat alami. Hal ini menjadikan perairan Indonesia memiliki potensi kekayaan alam laut yang besar dengan tingkat keragaman hayati yang tinggi. Organisme laut yang sudah dimanfaatkan sebagai bahan obat alami diantaranya spons. batuk.1 PENDAHULUAN 1. suku Kamoro Kabupaten Mimika berpendapat bahwa tambelo berkhasiat menyembuhkan penyakit. kelas Myoida. rematik. malaria. tapi juga sebagai sumber bahan alami yang berpotensi sebagai bahan baku obat (Handayani et al. rumput laut. Di Papua. Pemanfaatan organisme laut ini tidak hanya terbatas sebagai bahan makanan. 2006). antara lain: sakit pinggang. serta meningkatkan air susu ibu. seperti di Brasil Utara ”turu” (Teredinidae) sangat populer digunakan dalam pengobatan penyakit menular (Trindade-Silva et al. 2000). Tambelo dipercaya dapat menyembuhkan penyakit. 2007). dan vitalitas pria (Hardinsyah et al. dimana di dalamnya terdapat berbagai jenis organisme laut. 2008). masyarakat menyebutnya tambelo ”koo” (Hardinsyah et al. dan moluska. ordo Teredinidae.1 Latar Belakang Indonesia sebagai negara kepulauan memiliki garis pantai lebih kurang 81000 km dan wilayah laut yang sangat luas. teripang. cacing laut. Di Papua. tambelo dikonsumsi oleh sebagian masyarakat Bangka yang disebut temilok brubus (Syaputra et al.

namun komposisi kimia dan senyawa antioksidan dari tambelo belum banyak diketahui.2 Masyarakat Kamoro menggunakan tambelo diberbagai acara pesta adat misalnya acara pesta perkawinan. (2009) menunjukkan bahwa bakteri yang diisolasi dari insang tambelo Neo teredo reynei (Teredinidae) dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif (Sphingomonas. acara peminangan dan lain – lain. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. Antioksidan adalah suatu zat yang dapat menangkal pengaruh radikal bebas yang bila masuk ke dalam tubuh dapat menyebabkan kerusakan. piring maupun lensa kaca. 2006). jantung koroner. Stenotrophomonas maltophilia. Pada saat pesta adat dilaksanakan.2 Perumusan Masalah Tambelo (Bactronophorus thoracites) termasuk di dalam famili Teredinidae dan kelas bivalvia. Informasi mengenai aktivitas antioksidan pada tambelo sampai saat ini belum ada. karena merupakan suatu kebiasaan yang sudah turun temurun dilakukan sejak nenek moyang mereka (Hardinsyah et al. tambelo disajikan sebagai makanan pembuka baik dalam keadaan mentah maupun dimasak/digoreng. . Bacillus cereus dan Staphylococcus sciuri). Kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas di antaranya penuaan dini. Tambelo adalah salah satu obat tradisional yang telah lama digunakan oleh masyarakat Papua. proses mengantar mas kawin. kanker (Muchtadi 2000). (1994) melaporkan bahwa enzim protease yang diisolasi dari bakteri yang terdapat dalam kelenjar dari tambelo Psiloteredo healdi (Teredinidae) bersifat sebagai deterjen pembersih lantai. Informasi yang dapat diperoleh dari penelitian terdahulu seperti Trindade-Silva et al. sehingga perlu dilakukan penelitian senyawa antioksidan dari bahan tambelo (Bactronophorus thoracites). Griffin et al. 1. memberikan dugaan bahwa di dalam tubuh tambelo terdapat suatu komponen yang bersifat antioksidan. Kenyataan bahwa tambelo mampu memberikan efek menyehatkan bila dikonsumsi.

mendapatkan aktivitas antioksidan dan fitokimia ekstrak tambelo. flu malaria. meningkatkan air susu ibu . Tambelo (Bactronophorus thoracites) Pesta Adat Dikonsumsi oleh masyarakat Papua dimasak Direbus Makan mentah Sakit pinggang/rematik. dan vitalis pria.4 Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kandungan kimia dan bahan aktif yang dikandung dalam tubuh tambelo sebagai senyawa antioksidan sehingga dapat dimanfaatkan dalam bidang pangan fungsional atau nutraceutical. analisis asam amino -.3 Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk memperoleh komposisi kimia tambelo segar dan kering. nafsu makan.5 Kerangka Pemikiran Berdasarkan latar belakang. batuk. analisis mineral Ekstraksi tambelo Uji fitokimia Uji aktivitas antioksidan Fraksinasi ekstrak terpilih Uji antioksidan hasil fraksinasi - Identifikasi senyawa dengan LC-MS Penelitian yg dilakukan oleh Hardinsyah et al. Obat tradisional Analisis kimia : -.3 1. 1. perumusan masalah dan tujuan penelitian maka kerangka pemikiran yang disajikan pada Gambar 1. 2006 Penelitian yg dilakukan oleh Juliana Gambar 1 Kerangka pemikiran. analisis asam lemak -. serta mengidentifikasi fraksi aktif senyawa antioksidan. . analisis proksimat -. 1.

4 .

kepalanya berbentuk bulan sabit yang dilengkapi dengan parut dan kikir yang berguna untuk membuat lubang.5 cm (Muslich et al.5 cm. Kepadatan tambelo tertinggi pada bulan Januari sampai April dan kepadatannya rendah pada bulan Juli (Filho et al. tergantung pada jenisnya. Tambelo mampu menggali lubang sepanjang 18 cm hingga 2 m (Waterbury et al. Tambelo dapat bertahan hidup antara satu hingga beberapa tahun. Terbentuknya lapisan yang mengandung kapur dihasilkan dari mantel shipworm (Ginuk 1987). Dinding lubang pada kayu tersebut dilapisi dengan suatu subtansi yang mengandung kapur. kemudian membelok sejajar dengan arah serat kayu. 2008). Lubang pada kayu biasanya dibuat tegak lurus terhadap serat kayu. perkembangan tubuhnya akan terbatas.1 Tambelo Tambelo atau shipworm adalah hewan jenis moluska yang hidup di dalam pohon bakau yang telah membusuk. 1988). 1983).2 TINJAUAN PUSTAKA 2. Ciri-ciri fisik tambelo adalah tubuhnya lunak. Tambelo berkembang normal di air dengan salinitas antara 10-30 ppm dan lebih banyak dijumpai di daerah tropis (Muslich et al. Apabila populasinya terlalu tinggi. sehingga panjangnya akan beberapa sentimeter saja dan diameternya kurang lebih dari 0. Bentuk morfologi tambelo disajikan pada Gambar 2. Klasifikasi tambelo (Turner 1971) adalah sebagai berikut : Filum : Mollusca kelas Ordo Family Genus Spesies : Bivalvia : Myoida : Teredinidae : Bactronophorus : Bactronophorus thoracites . Keberadaan dan sifat tambelo sangat dipengaruhi oleh tipe habitat. 1988). Panjang tubuh tambelo berkisar antara 30 hingga 100 cm dengan diameter antara 1 sampai 1. memanjang seperti cacing.

Bagian pertama adalah usus besar yang berfungsi untuk menampung serbuk kayu. dan kejantanan bagi kaum lelaki. Perut tambelo terdiri dari dua bagian usus. Pallet yang terletak pada bagian tubuh depan yang digunakan untuk memarut kayu. meningkatkan air susu ibu. cangkang dan giginya dilepas dan langsung dimakan tanpa dibersihkan isi pencernaannya terlebih dahulu. 1983). Tambelo yang tumbuh di mangrove Sonneratia sp dan Bruguiera sp. seperti disajikan pada Gambar 3. 2. Masyarakat Papua percaya bahwa sisa pencernaan dalam perut tambelo sangat berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit di antaranya sakit pinggang. sebab rasanya pahit dan tidak enak untuk dimakan. 1 spesies genus Sonneratia dan 1 spesies termasuk dalam genus Bruguiera. Menurut Mayabubun (2003). Identifikasi tambelo didasarkan kepada bentuk cangkangnya yang berwarna putih (panjang ± 1 cm) digunakan untuk menutup mulut terowongan.2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat Tambelo yang dimakan mentah dipercaya oleh masyarakat Papua lebih berkhasiat daripada direbus atau digoreng. nafsu makan. Pada masyarakat Kamoro. Bagian kedua adalah kelenjar pencernaan yang difungsikan untuk mencerna partikel-partikel kayu (Waterbury et al. batuk. . malaria. ada 4 spesies mangrove yang digunakan sebagai habitat dari tambelo yaitu 2 spesies dari genus Rhizophora. Cara masyarakat Papua mengkonsumsikan tambelo yaitu setelah tambelo diambil dari pohon bakau yang sudah membusuk. tidak dikonsumsi oleh masyarakat suku Kamoro.6 Gambar 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) Hewan ini memanfaatkan serbuk kayu makanan. rematik flu. tambelo dijadikan sebagai makanan utama di berbagai acara pesta adat seperti pesta budaya Karapao Suku Kamoro.

Keadaan tersebut tidak hanya dipengaruhi oleh asupan makanan. mineral. karbohidrat. pertahanan tubuh atau imunisasi. sanitasi dan higiene. dan pengendalian pertumbuhan (Winarno 1992). pengatur pergerakan.H. media perambatan impuls syaraf. atau gabungan keduanya dapat mengakibatkan kegagalan pertumbuhan ringan sampai sindrom klinis berat yang spesifik.O. lemak. Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsurunsur C.3 Komposisi Kimia Zat gizi dibagi menjadi 5 kelas utama. Kekurangan protein pada anak saat lahir (kwashiorkor). serta infeksi berulang yang pernah dialami tubuh (Effendi 2002). Kandungan energi protein rata-rata 4 kkal/g atau setara dengan kandungan energi karbohidrat (Sudarmadji et al. 1989). alat pengangkut dan alat penyimpanan. defisiensi energi protein (marasmus). Protein memiliki peranan penting dalam pembentukkan biomolekul daripada sebagai sumber energi. Fungsi protein bagi tubuh adalah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada. . seperti pemukiman.7 Gambar 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo mentah (Sumber: Muller 2004) 2. dan N. tetapi juga oleh keadaan lingkungan. 1988). berperan sebagai enzim. yaitu protein. Protein berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. dan air (Harper et al. Protein akan dipakai sebagai sumber energi. bila organisme sedang kekurangan energi. penunjang mekanis.

Karbohidrat merupakan sumber kalori utama bagi hampir seluruh penduduk dunia. Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan makanan. sangat dianjurkan. galakturonat. glukoronat. dan karbohidrat rantai pendek (short chain carbohydrates/SC). dan beguna untuk membantu metabolisme lemak dan protein (Winarno 2008). dan akan sampai di usus besar (kolon) dalam keadaan utuh sehigga akan menjadi subtrat untuk fermentasi bakteri yang hidup di kolon. Dalam tubuh. arabinosa. koma hepatik. Serat pangan yang larut sangat mudah difermentasikan dan mempengaruhi metabolisme karbohidrat serta lipida. Kondisi ini biasanya ditemukan pada pasien Konsumsi sumber protein selain daging. pati yang resisten (resisten starch/RS). Serat pangan atau dietary fiber adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis (dicerna) oleh enzim pencernaan manusia. Monomer dari serat pangan adalah gula netral dan gula asam. khususnya bagi penduduk negara yang sedang berkembang. warna. dan asam amino aromatik (AAA) yang lebih rendah serta asam amino rantai cabang (BCAA) yang lebih tinggi dibandingkan dengan daging (Nelson et al. misalnya rasa. . tekstur. karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosisi. mannose. dan gula asam seperti mannurinat. 1994). galaktosa. selain itu beberapa golongan karbohidrat menghasilkan serat (dietary fiber) yang berguna bagi pencernaan. seperti sayuran dan produk susu. xylosa. Serat pangan dapat diklasifikasikan berdasarkan struktur molekul dan kelarutannya. rhamnosa. Sayuran dan produk susu mengandung metionin.8 Pembatasan konsumsi protein pada penderita hati dilakukan apabila pasien mengalami intoleransi protein. Kebanyakan jenis karbohidrat yang sampai ke kolon tanpa meliputi polisakarida yang bukan pati (non-starch polysacharides/NSP). kehilangan mineral. Gula yang membentuk serat pangan adalah glukosa. serta 4-o-metil-glukoronat (Muir 1999). Karbohidrat merupakan sumber kalori yang murah. pemecahan protein tubuh yang berlebihan. sedangkan serat pangan yang tidak larut akan memperbesar volume feses dan akan mengurangi waktu transitnya (bersifat laksatif lemah). terhidrolisis.

Susunan kimia asam amino bervariasi. tetapi terdapat dua hal yang sama. Asam amino glutamat dan aspartat paling lambat terserap (Linder 2006). leusin.3. Pada umumnya penguraian lemak dan minyak menghasilkan zat-zat yang tidak dapat dimakan. 1989). dan dibagi dalam dua kelompok. yaitu asam amino esensial dan nonesensial. Kerusakan lemak dan minyak menurunkan nilai gizi serta menyebabkan penyimpanan rasa dan bau yang bersangkutan.D. yaitu linoleat dan linolenat (Sudarmadji et al. unsur organik akan menghilang dan bahan anorganik (abu) yang tersisa terdiri dari unsur-unsur mineral (Harper et al. 1988).9 Minyak atau lemak berfungsi sebagai sumber energi dan pelarut vitamin A. 1989). Asam amino merupakan komponen utama penyusunan protein. terbentuk dari asam amino yang terikat bersama. Tingkat penyerapan relatif masing-masing asam amino adalah asam amino rantai cabang (valin. Proses absorpsi asam diamino lebih lambat dari pada asam amino netral (Poedjadi dan Supriyanti 2006). Abu adalah zat anorganik sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. 2. baik yang menguntungkan maupun tidak. kemudian dilanjutkan sampai ke dalam pembuluh darah. Perubahan-perubahan kimia atau penguraian lemak dan minyak dapat mempengaruhi bau dan rasa suatu bahan makanan. Asam amino tersebut akan diabsorpsi melalui dinding usus. Kadar abu ada hubungannya dengan mineral suatu bahan. Kandungan abu dan komponennya tergantung pada macam bahan dan cara pengabuannya. Protein yang masuk dalam tubuh akan diubah menjadi asam amino. Asam amino esensial lebih mudah diserap dari asam amino non esensial. Mineral digolongkan sebagai zat gizi anorganik atau disebut sebagai abu dalam pangan karena ternyata jika bahan pangan dibakar.1 Asam amino Protein merupakan molekul yang sangat besar. 1989). isoleusin) dan metionin lebih mudah diserap dari asam amino esensial lainnya.E. yaitu setiap asam mempunyai sedikitnya satu kelompok amino dan satu kelompok karboksil (Sudarmadji et al. Asam amino esensial tidak dapat diproduksi dalam tubuh sehingga sering harus ditambahkan . dan K serta merupakan sumber asam-asam lemak tak jenuh yang esensial. Komponen mineral dalam suatu bahan sangat bervariasi baik macam dan jumlahnya (Sudarmadji et al.

Protein bekerja sebagai pengatur semua proses yang berlangsung di dalam tubuh dan sebagai sumber energi jika karbohidrat dan lemak tidak dapat mencukupi keperluan tubuh. yaitu menyediakan bahanbahan yang sangat berperan dalam proses pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan tubuh. metionin. Asam amino merupakan unit pembangun protein. valin. Glutamin dan asparagin merupakan simpanan asam amino dalam tubuh. isoleusin. di dalam tubuh. leusin. Kelengkapan komposisi asam amino esensial merupakan parameter penting penciri kualitas protein (Astawan 2007). fenilalanin.10 dalam bentuk makanan. Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh disajikan pada Tabel 1. Asam amino esensial merupakan pembangun protein tubuh yang harus berasal dari makanan atau tidak dapat dibentuk di dalam tubuh. Arginin terlibat dalam sintesis ureum dalam hati. Kebutuhan metionin dapat disubtitusi dengan tirosin atau gabungan sistin dan fenilalanin (Linder 2006). Kebutuhan asam amino esensial bagi anak-anak relatif besar daripada orang dewasa (Poedjiadi dan Supriyanti 2006). triptofan. Metionin dan serin merupakan prekursor sintesis dan histidin yang diperlukan untuk sintesis histamin . treonin. contohnya tirosin merupakan prekursor yang membentuk pigmen kulit dan rambut. Asam amino umumnya berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air. Asam amino esensial yang dibutuhkan oleh tubuh manusia ialah histidin. Selain fungsi tersebut hampir semua asam amino memiliki fungsi khusus. arginin. lisin. namun tidak larut dalam pelarut organik nonpolar (Sitompul 2004). sedangkan asam amino nonesensial dapat diproduksi dalam tubuh. asam amino atau protein berfungsi sebagai zat pembangun.

2 Asam lemak Asam lemak merupakan komponen unit pembangunan yang sifatnya khas untuk setiap lipid. sitrulin yang ikut berperan dalam sinstesis urea dalam hati serta berfungsi sebagai prekursor tirosin katekolamin. Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ujung hidrokarbon nonpolar yang panjang.3. Asam lemak adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai 4-24atom. sehingga hampir semua lipid bersifat tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak.11 Tabel 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh Jenis asam amino Triptofan Peranan Sebagai pemula vitamin niasin. arginin. neurotransmiter α-aminobutirat (GABA). arginin. melanin dan tiroksin Berperan pada sintesis profirin dari hemoglobin dan juga merupakan konstituen asam glikolat Bagi manusia. 2. ornitin. prekusor prolin. histidin merupakan asam amino esesnsial bagi anak-anak. tetapi terdapat dalam bentuk terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipid berbeda. yang dapat dibebaskan dari ikatan tersebut melalui hidrolisis kimia atau enzimatik. ornitin. Asam lemak tidak terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan. . Fenilalanin Glisin Histidin Aspartat Glutamat Glisin Lisin Metionin Triptofan Tirosin Sumber: Poedjiadi dan Supriyanti (2006). sumber NH3 Sebagai prekusor biosintesis purin dan neurotransmiteri Berfungsi untuk crosslinking protein (seperti dalam kolagen dan elastin) biosintesis karnitin merupakan donor grup metil untuk banyak proses sintetik Sebagai prekusor serotonin dan nikotinamid (vitamin B) Sebagai prekusor tirosin katekolamin. Berfungsi untuk biosintesis urea. poliamin. prekursor glikogenik dan pirimidin Sebagai produk antara dalam reaksi interkonversi asam amino. dan serotoninmetionin donor gugus metil untuk sintesis beberapa senyawa seperti kolin dan kreatin Sebagai pemula tirosin dan keduanya membentuk tiroksin dan epinefrin. melanin dan tiroksin.

Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. asam lemak rantai sangat panjang terdapat dalam minyak ikan. Titik cair asam lemak meningkat dengan bertambah panjangnya rantai karbon. sedangkan asam lemak tidak jenuh ganda mengandung dua atau lebih ikatan rangkap (polyunsaturated fatty acid=PUFA). Asam lemak yang mengandung satu atau lebih ikatan rangkap di mana sebetulnya dapat diikat tambahan atom hidrogen dinamakan asam lemak tidak jenuh. rantai panjang (14-18 karbon). asam lemak tak jenuh (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi populer. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. minyak biji kapas. Asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) tergolong dalam asam lemak rantai panjang. Salah satu jenis MUFA adalah omega-9 (oleat) yang memilki sifat lebih stabil dan lebih perannya dibandingkan PUFA. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. yaitu asam lemak rantai pendek (6 atom karbon atau kurang). Lemak yang tersusun oleh asam lemak tidak jenuh akan bersifat cair pada suhu kamar. Polysaturated fatty acid (PUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein (LDL) dan juga menurunkan high density lipoprotein (HDL). Secara umum. rantai sedang (8 hingga 12 karbon). minyak kacang tanah. Asam lemak tidak jenuh tunggal mengandung satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya (monounsaturates fatty acid=MUFA). dan rantai sangat panjang (20 atom karbon atau lebih). MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. lemak tak jenuh tunggal memiliki efek yang mengutungkan terhadap kolesterol dalam darah. Sementara itu. . sedangkan yang tersusun oleh lemak jenuh berbentuk padat (Almatsier 2009). dan canola. Semua lemak bahan makanan hewani dan sebagian besar minyak nabati mengandung asam lemak rantai panjang. minyak kedelai.12 Asam lemak dibedakan menurut jumlah karbon yang dikandungnya. Penelitian yang dilakukan Mensink (1987) menyatakan bahwa MUFA dapat menurunkan LDL. Asam lemak yang terdiri dari rantai karbon yang mengikat semua hidrogen yang dapat diikatnya dinamakan asam lemak jenuh.dan meningkatkan K-HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6.

asam lemak omega-3 penting untuk berfungsinya otak dan retina dengan baik. dan omega-3. dan leukotien. yaitu makromineral dan mikromineral. Asam lemak esensial merupakan prekursor sekelompok senyawa eikosanoid yang mirip hormon. kontraksi otot serta penyembuhan luka (Achadi 2010). 2. seperti bunga matahari. dan biji matahari. tetapi ketersediaan mineral harus tercukupi setiap harinya. fosfor.3. Sumber alami PUFA yang penting bagi kesehatan adalah kacang-kacangan dan biji-bijian. Makromineral terdiri dari kalsium. dan linolenat) antara lain berperan dalam transpor dan metabolisme lemak. prostasiklin. Asam lemak ini banyak ditemukan pada ikan dan bahan nabati. fungsi kekebalan. Contoh PUFA adalah asam linoleat (omega-6). bersifat cair pada suhu kamar.13 Polyunsaturated fatty acid (PUFA) adalah asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan rangkap. Asam lemak esensial adalah asam lemak yang dibutuhkan oleh tubuh untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan. eikosapentaenoat (EPA). denyut jantung. fungsi imun. sedangkan tubuh tidak dapat mensintesisnya. sedikitnya 0. mempertahankan fungsi dan integritas membran sel. Senyawa-senyawa ini mengatur tekanan darah.05% dari bobot tubuh dikenal sebagai makromineral. Kelompok asam lemak yang termasuk dalam jenis ini adalah asam alfa linoleat (omega-6) dan asam alfa linolenat (omega-3). dan dokosaheksaenoat (DHA) dari asam linolenat. bahkan tetap cair pada suhu dingin karena titik lelehnya lebih rendah dibandingkan dengan MUFA. Manfaat PUFA (asam lemak arakhidonat. tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA) yang banyak ditemukan pada minyak nabati atau sayur dan minyak ikan. Mineral yang terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup banyak. . jagung. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron serta menurunkan produksi trigliserida dan poliprotein β (beta) di dalam hati. Selain peranannya dalam pencegahan penyakit jantung koroner dan artritis. rangsangan sistem saraf. linoleat.3 Mineral Mineral termasuk ke dalam golongan nutrisi mikro dalam tubuh yang diperlukan dalam jumlah kecil. magnesium. Berdasarkan jumlahnya dalam tubuh manusia dibedakan menjadi dua. yaitu prostaglandin. tromboksan. Turunan asam lemak arakidonat dari asam linoleat. klorin.

6) mengatur kontraktilitas otot. Kalium adalah basa utama yang terdapat di dalam jaringan dan sel-sel darah yang memegang peranan penting dalam pengaturan keseimbangan asam basa tubuh. dan seng (Harper et al. lipase. kalium. Sekitar 270 mg kalium berada di dalam sel yang . b) Kalium (K) Hampir seluruh kegiatan di dalam tubuh dipengaruhi oleh perubahan kosentrasi kalium di dalam plasma. dan belerang. tembaga. yang terdiri dari kobalt. Kalsium diperlukan untuk memelihara otot dan syaraf dalam tubuh agar berfungsi normal dan membantu penyerapan vitamin B12 (Harper et al. enzim. Kalsium merupakan salah satu faktor yang terpenting dalam pembekuan darah. Mineral yang diketahui dibutuhkan oleh tubuh dan terdapat dalam jumlah yang lebih sedikit dari 0. Winarno 1992). 1988. Kalium juga berperan dalam penyampaian impuls-impuls saraf ke serat-serat otot dan juga dalam kemampuan otot untuk berkontraksi (Fregly 1988).05% dari bobot tubuh disebut sebagai mikromineral. 3) komponen senyawa tubuh yang esensial adalah hormon. Kalsium berfungsi untuk mengatur transpor ion-ion menembus membran seluler dan diperlukan untuk aktivitas aktomiosin dan miosin ATP-ase.14 kalium. pertumbuhan jaringan tubuh. 5) transmisi impuls saraf. asam lambung. 1988. dan magnesium berperan dalam transmisi impuls-impuls serta kontraksi dan relaksasi otot (Muchtadi 1989). dan 7). Sebanyak 98% kalium dalam tubuh berada di dalam intraseluler. serta mengaktifkan reaksi enzim dan sekresi hormon termasuk insulin oleh pankreas. dan suksinildehidrogenase. kolinesterase. flourin. hemoglobin. Gaman dan Sherrington 1992). 4) memelihara keseimbangan air dalam tubuh. natrium. besi. 2) sebagai katalis untuk reaksi biologis. Secara umum fungsi mineral bagi tubuh adalah sebagai berikut: 1) mempertahankan keseimbangan asam – basa dalam tubuh. Kalsium juga berperan dalam pembentukan tulang dan gigi. mangan. Kalsium bersama dengan natrium. iodin. a) Kalsium (Ca) Kalsium diperlukan untuk pembentukan dan perkembangan tulang dan gigi.

dengan cara membantu penyerapan Fe. tetapi digunakan lagi untuk membuat sel-sel darah merah yang baru. berperan dalam pengembangan fungsi reproduksi laki-laki dan pembentukkan sperma serta berperan dalam fungsi kekebalan. Seng juga 1988. Enzim superoksida dismutase di dalam sitosol semua sel. hati. f) Tembaga (Cu) Fungsi tembaga dalam tubuh antara lain mencegah terjadinya anemia. sebagai bagian dari enzim atau sebagai kofaktor pada kegiatan lebih dari dua ratus enzim. dan limpa sebagai senyawa kompleks dengan protein yang dikenal sebagai feritin (Harper et al. serta melepaskan Fe simpanan dari ferritin dan hati. di dalam sumsum tulang. terutama eritrosit diduga berperan dalam memusnahkan anion superoksida yang merusak. Bila sel-sel darah merah melepaskan besi. d) Besi (Fe) Sebagian besar besi terdapat dalam hemoglobin (pigmen darah merah yang terdapat dalam sel darah merah). Beberapa besi juga disimpan di dalam tubuh seperti dalam sumsum tulang. besi tidak hilang dari tubuh.15 merupakan cairan kation yang mendominasi di dalam intrseluler (Groff dan Gropper 1990). Diperlukan untuk sintesis fosfolipida untuk pembentukan myelin yang menyelimuti serat syaraf. c) Fosfor (P) Fosfor dan kalsium secara bersama-sama adalah penyusun tulang dan gigi yang sangat penting. Sebagai bagian dari enzim-enzim pernafasan misalnya sitokrom oksidase. yaitu dalam fungsi sel T dan dalam pembentukan antibodi oleh sel B (Almatsier 2009). e) Seng (Zn) Seng memegang peranan esensial dalam banyak fungsi tubuh. dan untuk proses pelepasan energi. Bersama vitamin C dapat mempertahankan aktivitas enzim-enzim yang tersangkut dalam sintesis elastin (protein dinding . Fosfor terdapat dalam kebanyakan makanan dan defisiensi fosfor dalam susunan makanan belum pernah terjadi (Gaman dan Sherrington 1992). menstimulir sintesis fraksi heme atau globin. Fosfor juga terdapat dalam semua sel hidup dan diperlukan untuk pelepasan energi. Gaman dan Sherrington 1992).

4 Komponen Bioaktif dari Moluska Invertebrata laut merupakan produsen senyawa bioaktif terbesar di antara biota lainnya. Kebutuhan tersebut akan meningkat saat seorang ibu harus menyusui. 2. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. mempunyai prospek sebagai zat aktif dalam obat . yaitu kondisi sel yang rusak sebelum waktunya. Hasil penelitian belakangan ini yang memastikan bahwa selenium dapat mencegah kanker (termasuk kanker kulit akibat paparan matahari). Selenium diketahui memperbaiki sistem imunitas (kekebalan tubuh) dan fungsi kelenjar tiroid. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh invertebrata laut dan mikroorganisme simbion. Bersama vitamin E. Tembaga bersifat toksik bila terdapat sebagai ion bebas. dan penuaan dini. seperti kanker. selenium bekerja sama dengan vitamin E sebagai zat antioksidan untuk memperlambat oksidasi asam lemak tak jenuh. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Di dalam tubuh. selenium berfungsi mempertahankan elastisitas jaringan dan bila kadar selenium berkurang maka tubuh akan mengalami penuaan dini. dapat menyebabkan pusing dan muntah (Muchtadi 2009). Konsumsi garam Cu dalam jumlah sepuluh kali lebih besar daripada yang terdapat dalam bahan pangan secara normal. penyakit jantung.16 aorta) dan kolagen. sebagai bagian dari enzim tirosinase yang mengkatalisis konversi tirosin menjadi melanin. Sumber utama selenium adalah tumbuh-tumbuhan dan makanan laut (Conectique 2011). menambah pamornya sebagai mineral yang bermanfaat besar untuk meningkatkan fungsi kekebalan tubuh manusia. yaitu 70 µg per berat badan setiap hari. Tubuh setiap orang memiliki kemampuan untuk melawan radikal bebas yang bisa menghancurkan sel dan menimbulkan berbagai penyakit kronis. namun perempuan dewasa yang sedang hamil dianjurkan meningkatkan asupan selenium menjadi 60 µg per berat badan setiap hari. g) Selenium (Se) Selenium adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas. Orang dewasa dianjurkan untuk mengkonsumsi sebanyak 55 µg per berat badan selenium setiap hari.

alkohol dan asam-asam dengan karakteristik dan cita rasa tengik (Winarno 1984). seperti infeksi. Moluska merupakan salah satu dari invertebrata laut yang diketahui menghasilkan metabolit sekunder dan sekaligus mempunyai peranan penting dalam ekologinya sehingga menjadi target bagi sumber senyawa bioaktif yang bermanfaat dalam dunia farmasi bahari. Mekanisme oksidasi asam lemak tidak jenuh menurut Hamilton (1983) dan Gordon (1990) terdiri dari 3 tahap. antivirus. dan cahaya. selanjutnya tahap terakhir adalah tahap terminasi ditandai dengan terbentuknya produk-produk non radikal seperti aldehida. Tahap propagasi terjadi akibat reaksi antara radikal bebas (R●) yang terbentuk pada tahap inisiasi dengan oksigen menghasilkan radikal peroksida (ROO●). misalnya oksigen. Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak kijing Taiwan adalah kelompok alkaloid dan flavonoid. Proses oksidasi tersebut biasanya terjadi dalam produk terutama yang berlemak dengan kandungan asam lemak tidak jenuh sehingga dapat menyebabkan kerusakan produk atau ketengikan. Ranney (1979) mengklasifikasikan antioksidan atas tiga golongan berdasarkan prinsip kerjanya dalam mencegah terjadinya proses oksidasi. ion logam.5 Antioksidan dan Metode Pengukurannya Senyawa antioksidan secara umum didefinisikan oleh Schuler (1990) sebagai suatu senyawa kimia yang dapat menunda. b) propagasi dan c) terminasi. Hasil penelitian Salamah et al. immunologi. 2. memperlambat atau mencegah terjadinya proses oksidasi. dan antikanker. yaitu : a) inisiasi. Radikal peroksida yang terbentuk akan mengikat ion hidrogen dari molekul lemak yang lain membentuk hidroperoksida (ROOH) dan radikal lemak lain (R1). neurologi (parkinson. yaitu nilai IC50 sebesar 201. alzheimer’s). Pertama adalah antioksidan yang mempunyai gugus fenol dan amina aromatik . (2008) diketahui bahwa ekstrak metanol kijing Taiwan yang berpotensi sebagai antioksidan. (1996) melaporkan telah mengisolasi kahalaide F dari kerang jenis Elysia rubefescens yang memiliki aktivitas sebagai antikanker usus dan prostat.17 untuk pengobatan penyakit.52 ppm. Penelitian mengenai metabolit sekunder dari moluska telah banyak dilakukan. penyakit jantung. Hamman et al. Pada tahap inisiasi terjadi pembentukan radikal bebas (R●) akibat reaksi antara asam lemak (RH) dengan beberapa katalisator. anti-inflammatory. keton. panas.

18 seperti butylated hydroxyanisole (BHA). metilen bisfenol dan difenilamin. Ketiga adalah antioksidan yang dapat menginaktivasi logam yang bisa mempercepat terjadinya oksidasi. Antioksidan-antioksidan tersebut bekerja dengan cara berinteraksi dengan radikal bebas yang terdapat di dalam sistem dan membentuk produk subtrat non radikal dan suatu radikal antioksidan. tetapi penggunaan antioksidan sintetik banyak menimbulkan kekuatiran akan efek sampingnya karena telah banyak . Penggolongan ini terdiri atas dua yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami. maka radikal antioksidan tersebut tidak akan berperan sebagai inisiator dari berikutnya. Jenis penggolongan antioksidan yang lain berdasarkan sumber diperolehnya senyawa tersebut. tertiarybutyl hydroquinon (TBHQ) dan tokoferol (Buck 1991). Antioksidan sintetik sangat efektif dalam menghambat reaksi oksidasi lemak akan. butylated hydroxyanisole (BHA). tetapi tanpa melibatkan radikal bebas. Penggolongan ketiga ini sama dengan antioksidan sekunder menurut Winarno (1984) dan Gordon (1990). Kedua produk yang dihasilkan pada kenyataannya mungkin bereaksi dengan radikal bebas kedua dalam sistem Mekanisme reaksi oksidasi lemak dapat dilihat sebagai berikut : Tahap inisiasi : ROOH ROOH 2ROOH Tahap propagasi : R● + O2 ROO● + R1 H Tahap terminasi : ROO● + R1 OO● R● + RO● ROO● RO● RO● + H● + OH + OH ROO● R1● + ROOH ROOH1 + O2 ROR1 Gambar 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990). Propil galat. butylated hydroxytoluene (BHT). Molekul ini mengandung atom sulfur teroksidasi yang mampu bereaksi dengan molekul hidroperoksida berikutnya. Beberapa antioksidan sintetik yang sering digunakan dalam industri pangan antara lain butylated hydroxytoluene (BHT). Contoh antioksidan ini adalah dilauril tiodipropionat (DLTP). Jika radikal antioksidan yang dihasilkan cukup stabil mencegah reaksi berikutnya. Kedua adalah antioksidan yang berfungsi dengan cara menghilangkan molekul-molekul hidroperoksida dari sistem.

rasa dan warna pada lemak atau bahan pangan. Ketika sebuah antioksidan mampu mendonorkan hidrogen yang beraksi dengan radikal DPPH. reaksi ini akan memberikan peningkatan kompleks non radikal dan menurunkan radikal DPPH yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning. b) antioksidan yang terbentuk akibat reaksi selama pengolahan. kumarin. . Penggunaan bahan antioksidan baik alami maupun sintetik dalam bahan pangan.1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH).01-0. Pada uji ini metanol digunakan sebagai pelarut. b) tidak menimbulkan flavor yang tidak enak. tokoferol (Sidik 1997). turunan senyawa hidroksinat. Ketaren 1986). Ada beberapa metode pengukuran aktivitas antioksidan yang dapat digunakan salah satunya adalah metode 1. Jika senyawa ini masuk dalam tubuh manusia dan tidak terkendalikan dapat menyebabkan kerusakan fungsi sel. yang memiliki rumus molekul C18H12N5O6 dan Mr=394. Antioksidan alami dalam bahan pangan diperoleh dari: a) antioksidan berupa senyawa endogen yang terdiri dari satu atau lebih senyawa yang terdapat dalam bahan pangan.19 penelitian tentang efek patologis yang ditimbulkannya. c) larut sempurna dalam lemak dan minyak. Vattem dan Shetty 2006). harus memenuhi persyaratan tertentu yaitu: a) tidak beracun dan tidak mempunyai efek fisiologis. Penurunan pada absorbsi dapat diukur secara spektrofotometrikal dan dibandingkan dengan sebuah kontrol etanol atau metanol untuk mengkakulasikan aktivitas scavenging radikal DPPH (Vattem dan Shetty 2006). Radial bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil pada suhu kamar dan larut dalam pelarut seperti metanol atau etanol (Molyneux 2004. d) efektif dalam jumlah yang relatif kecil menurut rekomendasi Food and Drug Administration dosis yang diizinkan dalam bahan pangan adalah 0. Suratmo 2009). Senyawa DPPH dalam metode ini digunakan sebagai model radikal bebas. Adapun antioksidan yang terdapat di dalam bahan alami meliputi golongan senyawa turunan fenolat.1% dan e) tidak mahal serta selalu tersedia (Coppen 1983. dan inkubasi pada suhu kamar dimaksudkan untuk mengoptimumkan aktivitas DPPH. c) antioksidan yang merupakan senyawa eksogen yaitu dengan penambahan antioksidan yang diisolasi dari sumber alami (Pratt 1992). Antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstrak bahan alami.33 (Molyneux 2004.

20

Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen, maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH, jika semua elektron pada radikal bebas DPPH berpasangan, maka warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm akan hilang. Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH disajikan pada Gambar 5. DPPH* Free radical + AH antioksidan DPPH-H neutral + A* new radical

Puplish color

Yellowish color

Gambar 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007). Parameter yang digunakan untuk menginterpretasikan hasil pengujian dengan metode DPPH adalah EC50 (efficient concentration) atau biasa disebut IC50 (inhibition concentration). Inhibition concentration (IC50) dapat didefinisikan sebagai kosentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 0,05 mg/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 0,05-0,10 mg/mL, sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/mL, dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/mL (Blois 1958 diacu dalam Molyneux 2004).

21

3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Sampel diambil dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Provinsi Papua Barat. Ekstraksi dan uji aktivitas antioksidan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan Pusat

Laboratorium Kimia Analitik, FMIPA, Institut Pertanian Bogor,

Laboratorium Terpadu IPB-Bogor. Identifikasi senyawa antioksidan dilakukan di Balai Pengkajian Bioteknologi (Biotech Center-BPPT), Serpong. Penelitian dilaksanakan dari bulan Agustus 2010 – Maret 2011. Gambar 6 menunjukkan diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa antiokksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).
Tambelo kering Maserasi dengan MeOH Ekstraksi dengan MeOH Partisi dengan pelarut n-heksan, dan etil asetat Ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak metanol Uji Fitokima Uji antioksidan Ekstrak terplilih KLT Eluen terbaik Analisis kimia : - uji proksimat - uji asam amino - uji asam lemak - uji mineral

Kromatografi kolom

Uji Fitokima

Uji antioksidan Fraksi terpilih Identifikasi dengan LC-MC

Gambar 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).

antioksidan

22

3.2 Bahan dan Alat Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah tambelo yang berasal dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Propinsi Papua Barat. Tambelo diperoleh dari batang pohon mangrove Rhizopora yang sudah lapuk. Tambelo dibersihkan dengan melepaskan cangkang dan pallet kemudian dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. Tambelo kering selanjutnya digiling dengan menggunakan mortar dan disimpan pada suhu rendah (5-10 oC) sampai siap untuk dianalisis. Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi adalah n-heksana, etil asetat, metanol, dan kertas saring Whatman 40. Bahan kimia yang digunakan untuk uji antioksidan adalah DPPH (1,1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl), BHT dan vitamin super ester C sebagai standar. Bahan untuk uji fitokimia adalah H2SO4, akuades, kloroform p.a (pengenceran), anhidra asetat, asam sulfat pekat, HCl 2N, pereaksi Dregendorff, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, serbuk magnesium, alkohol, HCl 37%, etanol 70%, FeCl3 5%, pereaksi Molish, pereaksi benedict, pereaksi biuret, dan larutan ninhidrin 0,1%. Peralatan utama yang digunakan adalah kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom (KK), spektrofotometer UV-Vis JENWAY 6305,

kromatografi cair (LC-MS) AGILENT TECHNOLOGIES, vacum rotary evaporator Buchi Rotavapor R-205, dan Spektrofotometer serapan atom (SSA) Shimazu-7000. 3.3 Prosedur Penelitian Penelitian ini terbagi atas dua tahap, yaitu 1) analisis komponen kimia tambelo, dan 2) Ekstraksi bahan aktif tambelo. Penelitian tahap pertama meliputi analisis rendemen, uji proksimat, asam lemak, asam amino, dan mineral. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif dengan metode maserasi, partisi cair-cair, uji fitokimia, uji antioksidan dengan metode DPPH, dan identifikasi senyawa

antioksidan dari bahan aktif yang dihasilkan. 3.3.1 Penelitian tahap pertama Penelitian tahap pertama ini bertujuan untuk mendapatkan presentase bagian tubuh yang dapat dimanfaatkan dan memperoleh nilai kandungan gizi atau komposisi kimia dari tambelo. Analisis kandungan gizi terdiri dari analisis

serta asam lemak.1 Rendemen (Hustiany 2005) Tambelo dikeluarkan dari freezer. kadar abu. dan uji kadar protein menggunakan metode kjedahl. uji kadar lemak menggunakan metode sokhlet. Cawan tersebut kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang bobotnya (C). Rendemen merupakan presentase perbandingan antara bagian yang digunakan dengan berat utuh tambelo segar. Kadar air ditentukan dengan rumus: Keterangan: A = berat cawan kosong (gram) B = berat sampel sebelum dioven (gram) C = berat cawan berisi sampel setelah dioven (gram) b) Analisis kadar abu (AOAC 2005) Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven.3. a) Analisis kadar air (AOAC 2005) Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 102-105 o C selama 30 menit. Tambelo ditimbang sebanyak 1-2 g (B). dan karbohidrat.2 Uji proksimat (AOAC 2005) Analisis proksimat yang dilakukan meliputi uji kadar air dan abu dengan metode oven. Cawan tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 102-105 oC selama 6 jam.23 proksimat yang meliputi kadar air. Daging tembelo yang sudah kering ditimbang kembali untuk mengetahui penurunan berat setelah dikeringkan.1. dicairkan kemudian ditimbang beratnya selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. analisis asam amino. 3. kemudian dimasukan kedalam cawan. Cawan tersebut diletakkan dalam desikator (kurang lebih 30 menit) hingga dingin kemudian ditimbang hingga beratnya konstan (A).1. kadar protein. Prinsipnya adalah pembakaran atau pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi . kadar lemak. dengan rumus : 3.3.

yaitu destruksi. Apabila abu belum putih benar harus dilakukan pengabuan kembali. Homogenat sampel ditimbang 2 gram pada kertas timbang. setelah selesai. Abu dibasahi (dilembabkan) dengan akuades secara bertahap. Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang 2 gram dan dimasukan ke dalam cawan abu porselin ditimbang (B). Kadar protein dihitung berdasarkan kesetimbangan reaksi kimia. Cawan porselin dikeluarkan dengan menggunakan penjepit dan masukan ke dalam desikator selama 30 menit. Kadar abu dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: A = Berat cawan kosong (gram) B = Berat sampel sebelum pengabuan (gram) C = Berat cawan berisi sample setelah pengabuan (gram) c) Analisis kadar protein (AOAC 2005) Penentuan kadar protein dilakukan dengan metode total nitrogen yang didasarkan pada reaksi penetralan asam basa. Suhu pengabuan diturunkan sampai ± 40 oC lalu dipindahkan cawan abu porselin ke dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang bobotnya (C) segera setelah dingin. Sampel dimasukan dalam kantong plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. kemudian cawan abu porselin kosong ditimbang untuk mengetahui bobot cawan kosong (A). Cawan abu porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit. kemudian dimasukan ke dalam labu . suhu tungku pengabuan diturunkan hingga suhu 40 oC. kemudian dikeringkan menggunakan hot plate dan diabukan kembali pada suhu 550-600 oC sampai diperoleh berat yang konstan. dan titrasi. Zat anorganik ini disebut abu.24 air (H2O) dan karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar. Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari tiga tahap. Tahapan destruksi adalah sebagai berikut: sampel dilumatkan dengan blender hingga partikelnya dapat melewati saringan 20 mesh. kemudian masukan ke dalam oven bersuhu 550-600 oC selama 24 jam atau sampai pengabuan sempurna. destilasi. sehingga diperoleh abu berwarna putih. Prosedur analisis kadar abu dalam bahan pangan adalah sebagai berikut: cawan abu porselin yang kosong dimasukkan ke dalam oven.

yang sudah dibakukan sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral. Penetapan bobot lemak dihitung secara gravimetri. Destruksi dilakukan pada suhu 410 oC selama 2 jam atau sampai larutan jernih.2 N. Tahap ketiga adalah titrasi hasil destilat dengan HCl 0. Tahap kedua adalah distilasi. Kadar protein dapat dihitung dengan persamaan berikut : Keterangan : KP = Kadar Protein Va = mL HCl untuk titrasi sampel Vb = mL HCl untuk titrasi blanko N = Normalitas HCl yang digunakan W = berat sampel c) Analisis kadar lemak (AOAC 2005). kemudian ditambahkan 50-75 mL larutan natrium hidroksida dan natrium thiosulfat dan dilakukan destilasi. Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukan ke dalam wadah plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Sampel ditambahkan 15 mL asam sulfat pekat (95-97%) dan 3 mL hidrogen peroksida secara perlahan dan didiamkan 10 menit dalam ruang asam. Prinsip analisis kadar lemak diawali dengan melakukan pengekstrakan sampel dengan pelarut organik untuk mengeluarkan lemak dengan bantuan pemanasan pada suhu titik didih pelarut selama 8 jam. Sampel tersebut selanjutnya ditambahkan dua tablet katalis serta beberapa butir batu didih.25 destruksi. Sampel hasil destruksi didiamkan hingga mencapai suhu kamar dan tambahkan 50-75 mL akuades. Labu yang berisi hasil destruksi dipasang pada rangkaian alat destilasi uap. Pelarut organik yang mengikat lemak selanjutnya dipisahkan dengan proses penguapan (evaporasi). selanjutnya destilat ditampung ke dalam erlenmeyer tersebut hingga volume mencapai minimal 150 mL (hasil destilasi akan berubah menjadi kuning). sehingga hasil lemak tertinggal dalam labu. posedur tahapan ini sebagai berikut: sebanyak 25 mL larutan H3BO3 4% yang mengandung indikator sebagai penampung destilat dimasukan dalam erlenmeyer. Analisis standar blanko dilakukan seperti tahapan sampel. Apabila sampel tidak langsung .

Perangkat HPLC sebelum digunakan harus dibilas dengan eluen yang akan digunakan selama 2-3 jam. Apabila terjadi pemisahan cairan dan sampel. protein.1. Homogenat sampel ditimbang sebanyak 2 gram (B) dan masukan ke dalam selongsong lemak (ekstraction timbles). Labu alas bulat yang berisi lemak dimasukan ke dalam oven bersuhu 105 oC selama ± 2 jam untuk menghilangkan sisa n-heksana dan air. Labu alas bulat yang berisi lemak ditimbang (C) sampai berat konstan. Labu dan lemak didinginkan dalam desikator selama 30 menit. Campuran lemak dan heksana dalam labu alas bulat dievaporasi sampai kering. Ekstraksi dilakukan pada suhu 60 oC selama 8 jam. Prosedur analisis lemak adalah sebagai berikut : labu alas bulat ditimbang dalam keadaan kosong (A). dan pasang rangkaian sokhlet dipasang dengan benar. Sampel dikondisikan pada suhu ruang dan pastikan sampel masih homogen sebelum ditimbang. Berturut-turut dimasukan 150 mL n-heksana ke dalam labu alas bulat.( % air + % lemak + % protein + % abu ) 3. selongsong lemak ke dalam ekstractor soxhlet.3 Analisis asam amino (AOAC 1994) Komposisi asam amino ditentukan dengan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Prosedur analisis asam .26 dianalisis. maka dilakukan pengadukan ulangan dengan blender sebelum dilakukan pengamatan. lemak dan abu. Perhitungannya sebagai berikut: % Karbohidrat = 100 % . Kadar lemak dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: KL = kadar lemak A = bobot contoh B = bobot labu lemak dan labu didih C = bobot labu lemak.3. maka disimpan dalam refrigerator sampai saatnya akan dianalisis. batu didih dan lemak d) Analisis kadar karbohidrat (AOAC 2005) Perhitungan kadar karbohidrat dilakukan menggunakan metode by difference yaitu pengurangan 100 % dengan jumlah dari hasil empat komponen yaitu kadar air. Begitu pula dengan syringe yang akan digunakan juga harus dibilas dengan akuades.

Asetoniril 60% .1. Komponen-komponen yang dipisahkan harus mudah menguap pada suhu pemisahan yang dilakukan.9x150 μm Kecepatan alir eluen : 1 ml/menit Tekanan Fasa gerak : 3000 psi : .5 μg) FB = faktor pengenceran ( 133. Identifikasi tiap komponen dilakukan dengan . sehingga suhu operasi biasanya lebih tinggi dari suhu kamar dan biasanya dilakukan derivatisasi untuk contoh yang sulit menguap.Buffer fosfat 0. Tahapan analisis asam lemak diawali dengan menghidrolisis lemak/minyak dalam sampel menjadi asam lemak. kemudian ditransformasi menjadi bentuk esternya yang bersifat lebih mudah menguap. Transformasi dilakukan dengan cara metilasi sehingga diperoleh metil ester asam lemak (FAME). Metil ester asam lemak (FAME) ini dianalisis dengan alat kromatografi gas. Kondisi alat HPLC saat berlangsungnya analisis asam amino: Temperatur Jenis kolom : 27 oC (suhu ruang) : pico tag 3.4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) Kandungan asam lemak dapat ditentukan dengan metode gas kromatografi didasarkan pada partisi komponen-komponen dari suatu cairan di antara fasa gerak berupa gas dan fasa diam berupa zat padat atau cairan yang tidak mudah menguap yang melekat pada bahan pendukung inert.3.27 amino menggunakan HPLC disajikan Gambar 7.1 M Detektor Panjang gelombang Derivatisasi Tipe injeksi Program : UV : 256 nm : derivatisasi pre-kolom : on column injection tanpa septum : isokratik (kecepatan aliran eluen konstan) Kandungan masing-masing asam amino pada bahan dapat dihitung dengan rumus: Keterangan : C = konsentrasi standar asam amino (2.1 mL) BM = bobot molekul dari masing-masing asam amino (g/mol) 3.

75 g Penambahan 5-10 ml HCl 6N Pemanasan dalam oven pada suhu 100 oC selama 24 jam Hidrolisat Protein Penyaringan dengan milipore berukuran 45 mikron Filtrat hidrolisat Penambahan 30 μL larutan pengering (campuran antara metanol. dan trietilamim dengan perbandingan 2:2:1) Pengeringan dengan gas N2 Hidrolisat protein kering Penambahan 30 μL larutan derivatisasi ( campuran antara metanol.75 g 0. natrium asetat. . Waktu retensi dihitung pada kertas rekorder sebagai jarak dari garis pada saat muncul puncak pelarut sampai ke tengah puncak komponen yang dipertimbangkan. pikoiotisianat. dan trietilamin dengan perbandingan 3:3:4) Pengenceran dengan buffer asetat sebanyak 200 μL lalu dibiarkan selama 20 menit Penyaringan dengan milipore berukuran 0. Tambelo kering 0.28 membandingkan waktu retensinya dengan standar pada kondisi analisis yang sama.45 mikron Injeksi ke alat HPLC Kromatogram Gambar 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC.

29

a. Preparasi contohd (hidrolisis dan esterifikasi) Contoh lemak ditimbang sebanyak 20-30 mg, kemudia ditambahkan 1 mL larutan NaOH 0,5 N ke dalam metanol dan dipanaskan dalam penangas air selama 20 menit. Sebanyak 2 mL BF3 16% dan 5 mg/mL standar internal ditambahkan pada sampel tersebut, lalu dipanaskan lagi selama 20 menit dan selanjutnya didinginkan. Sampel kemudian ditambahkan 2 mL NaCl jenuh dan 1 mL n-heksana, lalu dikocok dengan baik. Lapisan heksana dipindahkan dengan

bantuan pipet tetes ke dalam tabung yang berisi 0,1 gram Na2SO4 anhidrat, dibiarkan 15 menit. kromatografi gas. b. Analisis komponen asam lemak dengan kromatografi gas Pelarut sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam kolom. Bila aliran gas pembawa dan sistem pemanasan sempurna, puncak pelarut akan nampak dalam kurang dari 1 menit. Sebanyak 5 µL campuran standar FAME diinjeksikan Fasa cair dipisahkan dan selanjutnya diinjeksikan ke

setelah pena kembali ke nol (baseline). Jika semua puncak sudah keluar, diinjeksikan 5 µL sampel yang telah dipreparasi (A). Waktu retensi dan puncak masing-masing komponen tersebut kemudian diukur. Jika rekorder dilengkapi dengan integrator, waktu retensi dan luas puncak langsung diperoleh dari integrator dan membandingkan waktu retensinya dengan standar untuk mendapatkan informasi mengenai jenis dari komponen-komponen dalam contoh. Jumlah dari masing-masing komponen dalam sampel dihitung menggunakan metode internal standar, dengan cara sebagai berikut :

Keterangan :
Cx Cs Ax As R = = = = = kosentrasi komponen x kosentrasi standar internal luas puncak komponen x luas puncak standar internal respon detektor terhadap komponen x relatif terhadap standar

30

Kondisi alat kromatografi gas pada saat dilakukan analisis : 1. Kolom 2. Dimensi kolom 3. Laju alir n2 4. Laju alir h2 5. Laju alir udara 6. Suhu injektor 7. Suhu detektor 8. Suhu kolom - Kolom temperatur : cyanopropil methylsil (kolom kapiler) : p=60m,ø dalam = 0.25 mm, 025 µm film tickness : 20 ml/menit : 30 ml/menit : 200 – 250 ml/menit : 200 oc : 230 oc : program temperatur : awal 190 oC diam 15 menit akhir 230 oC diam 20 menit 9. Ratio 10. Injeksi volum 11. Linier velocity 3.3.1.5 Analisis mineral Mineral yang dianalisis pada sampel tambelo meliputi mineral kalsium (Ca), kalium (K), magnesium (Mg), besi, (Fe), natrium (Na), mangan (Mn), klorida (Cl), seng (Zn), fospat, dan tembaga (Cu), dianalisis dengan metode spektrofotometer serapan atom (SSA). a. Analisis mineral kalsium (Ca), kalium (K), dan seng (Zn) (Yosida et al. 1972). Prinsip penentuan kadar kalsium, kalium dan seng adalah proses pelarutan sampel dengan asam klorida, kemudian absorbansinya diukur dengan : 1:8 : 1 µl : 20 cm.sec

menggunakan SSA. sebagai berikut:

Prosedur analisis mineral kalsium, kalium dan seng adalah

Sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram,

kemudian dihancurkan dan dimasukkan ke dalam gelas piala yang telah dibilas dengan HCl 1 N. Sampel ditambahkan dengan 25 mL HCl 1 N dan disimpan selama 24 jam. Setelah penyimpanan, sampel dikocok dengan shaker dan

disaring dengan kertas Whatman No.1. 1). Analisis mineral kalsium (Ca) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 1 mL, ditambahkan 2 mL larutan lantanum oksida dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 10 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL.

31

Larutan diukur absorbansi dengan SSA pada panjang gelombang 285,2 nm untuk magnesium dan 422,7 nm untuk kalsium. 2). Analisis mineral kalium (K) dan seng (Zn) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 2 mL dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 40 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL. Larutan diukur absorbansi dengan AAS pada panjang gelombang 766,5 nm untuk kalium dan 213,9 nm untuk seng. b. Analisis mineral besi (Fe) Prinsip penentuan kadar besi adalah proses pelarutan bahan dengan larutan asam campur yang terdiri dari asam nitrat, asam sulfat dan asam perklorat, kemudian dilanjutkan dengan proses pemanasan. Prosedur analisis mineral besi adalah sebagai berikut: sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram, kemudian dihancurkan. HNO3, H2SO4, Larutan asam campuran disiapkan yang dibuat dari Sampel yang telah

dan HClO4 dengan perbandingan 5:1:2.

hancur ditambah 10 mL larutan asam campur lalu dipanaskan di dalam ruang asam menggunakan api kecil selama 2 jam. Api dibesarkan sampai larutan

menjadi jernih. Kemudian didinginkan. Larutan ditambahkan akuades sampai volume 50 mL dan disaring dengan kertas saring pencucian asam Whatman No.1 (acid-washed filter paper whatman No.1). Sebanyak 10 mL ekstrak sampel ditambahkan 1 mL hidroquinon dan 1 mL orto-fenantrolin, kemudian ditambahkan sodium sitrat sampai pH menjadi 3,5. Larutan diencerkan dengan akuades sampai volume 50 mL dan dipanaskan dalam water bath selama 1 jam. Larutan deret standar diperlakukan dengan pereaksi yang sama dengan ekstrak sampel. Absorbansi diukur dengan SSA pada panjang gelombang 248,3 nm. c. Analisis mineral tembaga (Cu) dan mangan (Mn) (SNI 01-2362-1991) Prinsip dari penentuan kadar tembaga dan mangan adalah proses pengabuan dengan suhu 450 oC dengan penambahan asam nitrat (HNO3). Prosedur analisis sebagai berikut: sampel ditimbang sebanyak 25 gram dalam gelas piala 250 mL yang terdahulu dicuci dengan HNO3 6N. Sampel dikeringkan di dalam oven pengering pada suhu 110-125 oC selama 8-24 jam. Sample kering kemudian dipindahkan ke dalam tungku, dan atur suhu pada 250 oC. Suhu tunggu

serta uji fraksinasi dan identifikasi senyawa antioksidan. dan metanol (polar).25-1 mL HNO3 pekat. Sampel tersebut kemudian ditambahkan 0. Sampel kering ditimbang sebanyak 500 gram. Absorbansi mineral Cu dan Mn masing-masing diukur dengan SSA pada panjang gelombang 324.7 nm dan Mn 285. kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol (MeOH) sebanyak 2500 mL. Kenaikkan suhu kemudian dilanjutkan hingga 450 oC. apabila tidak proses penambahan asam nitrat harus diulangi. blanko dan contoh dialirkan ke dalam SSA. Kondisi pada suhu ini dibiarkan sesaat untuk memberikan kesempatan sebagian besar lemak terbakar habis.3. Setiap 1 x 24 jam dilakukan penyaringan. dan dibiarkan selama semalam (16-24 jam).42 yang sebelumnya telah dicuci dengan HNO3 10% dan akuades. Abu dilarutkan ke dalam 2 mL HNO3 pekat. perbandingan 1:5 pada suhu ruang selama 3x24 jam. dan evaporasi.32 dinaikkan secara bertahap hingga mencapai 350 oC selama periode 1-2 jam. partisi. uji fitokimia. uji aktivitas antioksidan. Sampel diletakkan diatas hot plate untuk menguapkan HNO3.3.1 Ekstraksi bahan aktif Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi tambelo yaitu tiga macam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya. etil asetat (semi polar). Ekstrak MeOH pekat dipartisi dengan n-heksana menggunakan corong pisah diulang sebanyak 3 kali. 3. 3.2 nm. kemudian filtrat yang dihasilkan digabungkan dan dipekat dengan menggunakan rotary evaporator. yaitu heksana (non polar).2. Abu yang dihasilkan harus benar-benar putih. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya proses pembakaran secara cepat yang menyebabkan contoh dapat terhambur keluar.2 Penelitian tahap kedua Penelitian yang dilakukan pada penelitian tahap kedua adalah ekstraksi bahan aktif. sampel dikeluarkan dari tungku dan dinginkan. Jika proses sampel abu belum putih sempurna. Larutan standar. Tahapan proses ekstraksi tambelo meliputi penghancuran sampel. Larutan disaring dengan kertas saring Whatman No. maserasi. Sampel kemudian dipanaskan kembali pada suhu 450 oC di dalam tungku selama 30-60 menit. . Filtrat yang diperoleh kemudian diencerkan dengan akuades hingga 50 mL. kemudian diencerkan dengan akuades hingga 25 mL dan didihkan di atas hot plate.

aktif tambelo disajikan pada Gambar 8. . Fase etil asetat dikumpulkan dan dipekatkan. lalu dihitung Ekstrak metanol sisa partisi dipekatkan kembali dan dihitung Semua ekstrak diuji fitokimia dan uji antioksidan (Miyaoka et al. rendemen. Ekstrak MeOH setelah partisi n-heksana dipartisi kembali dengan etil asetat.33 Fase n-heksana dikumpulkan dan dipekatkan dan dihitung rendemennya. 1998. 2008). diulang sebanyak 3 kali. rendemennya. Ebada et al. Diagram alir proses ekstraksi bahan Sampel (500 g) Maserasi 3x24 jam dengan MeOH perbandingan 1:5 Penyaringan Filtrat Evaporasi Ekstrak MeOH Dipartisi dengan n-Heksana Residu Fase n-heksana Evaporasi Fase MeOH Dipartisi dengan etil asetat Fase etil asetat Ekstrak n-Heksana Evaporasi Fase MeOH Evaporasi Ekstrak etil asetat Ekstrak MeOH Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al. 2008).

d) Uji Flavonoid Sebanyak 1 gram sampel ditambah metanol 30% sampai terendam kemudian dipanaskan. dan Wagner. Terbentuknya warna hijau atau hijau biru menunjukkan adanya senyawa fenol dalam bahan.2.34 3. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5%. jika terbentuk warna hijau adalah steroid dan warna merah adalah triterpenoid. Lapisan eter yang terbentuk dipipet dan diletakkan papan uji (spot plate) dengan menambahkan pereaksi Liebermen Buchard (3 tetes asam asetat anhidrin dan 1 tetes H2SO4 pekat).3. biru atau ungu. b) Uji saponin Sebanyak 50 mg sampel ditambah dietil eter. Filtratnya ditaruh ke dalam spot plate (papan uji) kemudian ditambahkan H2SO4 pekat. Fraksi metanol dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2M. selanjutnya diamati warna yang terbentuk. Residu yang tidak larut dalam dietil eter diambil.2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995) a) Uji alkaloid Sampel sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan 10 mL metanol dan beberapa tetes amoniak. f) Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl3) Sebanyak 1 g sampel diekstrak dengan 20 ml etanol 70%. Filtratnya diuapkan kemudian ditambahkan eter. adanya flavonoid ditunjukkan oleh terbentuknya warna merah akibat penambahan H2SO4. e) Uji Tanin Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan dalam 5 ml etanol ditambah dengan beberapa tetes pereaksi FeCl3 1 %. Meyer. Fraksi asam diambil kemudian ditambahkan pereaksi Dragendrof. dipisahkan dan ditambahkan 5 ml air kemudian dikocok sampai timbul busa yang stabil. . c) Uji steroid/Triterpenoid Sampel sebanyak 1 gram ditambahkan 25 mL etanol 30% dipanaskan (50 oC) dan disaring. Adanya tannin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau.

40. Nilai absorbansi sampel diperoleh persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. 60.1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl) (Yeh dan Cen 1995). pemilihan pelarut untuk fraksinasi dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada . a) Kromatografi lapis tipis (KLT) Pada penelitian ini. Hambatan dihitung dengan rumus.3. Serapan sampel tersebut diukur pada panjang gelombang 515 nm. 3. kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi. 8. Prinsip kerjanya pada sampel (mengandung senyawa bersifat antioksidan) yang dapat meredam radikal bebas DPPH. Ekstrak tersebut masing-masing ditambahkan 200 μl larutan DPPH 1mM dalam metanol. Persamaan regresi yang diperoleh dalam bentuk y = bx + a. Butylated hydroxytoluene (BHT) dan vitamin super ester C digunakan sebagai kontrol positif.4 Fraksinasi senyawa antioksidan Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (ekstrak terpilih). Persamaan ini digunakan untuk mencari Inhibition Concentration 50 % (IC50) dengan memasukkan angka 50 sebagai y sehingga didapatkan nilai x sebagai IC50. 6. Ekstrak dilarutkan dalam metanol dan dibuat dalam berbagai konsentrasi ( 20. Volume dicukupkan sampai 5 mL.3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995) Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode perendaman radikal bebas DPPH (1. Nilai kosentrasi dan hambatan ekstrak diplotkan masing-masing pada sumbu x dan y. dan untuk pembanding dengan masing-masing kosentrasi 4. dan 80 ppm). Pengujian ini dilakukan sebanyak tiga kali ulangan.2. Uji ini dilakukan terhadap ekstrak tambelo.2. Metode yang digunakan ada dua macam. kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit. Persamaan regresi diperoleh dari hubungan antara kosentrasi sampel dan persentase penghambatan aktivitas radikal bebas.35 3. yaitu kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kolom (KK).3. dan 10 ppm.

pelarut heksan : etil asetat dengan perbandingan 1:1 mL dan pelarut kloroform : metanol dengan perbandingan 17:3 mL. bagian atas kolom ditutup .36 kromatografi lapis tipis (KLT).02 gram dilarutkan dalam 0. Ekstrak terpilih sebanyak 0. l99l) Pelaksanaan kromatografi kolom dilakukan dengan memasang kolom pada statif secara tegak lurus. Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT dapat disajikan pada Gambar 9. Kombinasi pelarut yang menghasilkan pengembangan spot terbaik digunakan sebagai eluen untuk memfraksinasi ekstrak terpilih dengan kromatografi lapis tipis maupun kromatografi kolom. Silika gel sebanyak 13-15 gram dilarutkan pada eluenn kloroform : metanol = 9:1 sehingga diperoleh larutan silika gel. etil asetat. Kombinasi yang digunakan adalah pelarut kloroform:metanol dengan perbandingan 9:1 mL. Pada proses penjenuhan. dan metanol. kloroform. Kolom diberi glasswool pada bagian bawahnya. lalu dilakukan penjenuhan silika gel dalam kolom selama 30-60 menit. Pencucian kolom dilakukan dan pembuatan larutan silika gel (silika gel G40-63) yang akan dimasukkan ke dalam kolom sebelum ekstrak dimasukkan ke dalam kolom. Semua larutan silika gel masuk ke dalam kolom. Larutan ekstrak tersebut kemudian ditotolkan pada plat silika gel 60 F254 dengan panjang l0 cm. b) Kromatografi kolom (KK) (Gritter et al.5 mL pelarutnya. Ekstrak aktif KLT (silika gel) CHCl3:MeOH 9:1ml CHCl3:MeOH Heksan:EtOH 1:1ml 17:3 ml Heksan:EtOH 8:2ml Heksan :CHCl3 3:2 ml terbentuknya spot terbanyak Gambar 9 Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT. pelarut heksan:etil asetat dengan perbandingan 8:2 dan n-heksana:kloroform (3:2). Diagram alir fraksinasi dengan metode kromatografi kolom dapat dilihat pada Gambar 10. untuk memilih eluen terbaik dicoba dengan berbagai eluen n-heksana.

Larutan silica gel + eluen 1: 1 (w/v) Larutan silika gel dimasukkan ke dalam kolom Pembuatan larutan ekstrak terpilih 1 g ekstrak terpilih + 3 ml eluen Dijenuhkan selama 30-60 menit Eluen dikeluarkan (silica gel tidak boleh kering) Larutan ektrak terpilih dimasukkan ke dalam kolom Kran dibuka Kolom terus dialiri eluen Larutan ditampung pada tabung reaksi (±10 ml) Ekstrak aktif Gambar 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom. Larutan yang keluar dari kolom ditampung pada tabung reaksi dengan masing-masing tabung reaksi berisi ± 3 mL. . dihitung rendamennya.37 dengan aluminium foil untuk mencegah penguapan eluen yang terdapat dalam kolom sehingga silika gel tetap dalam kondisi basah. dan setiap fraksi penggabungan yang terbentuk dikeringkan dengan aerator di ruang asam. Silika gel harus jenuh sebelum ekstrak dimasukkan dan setelah silika gel jenuh maka kran kolom dibagian bawah kolom dibuka kembali setelah semua ekstrak masuk ke dalam kolom. Fraksi hasil kromatografi Kolom (KK) dilakukan pengujian KLT untuk penggabungan fraksi dengan mengacu pada kesamaan pola kromatogram. Larutan dalam tabung reaksi kemudian dikeringkan untuk menghasilkan residu ekstrak. Ekstrak yang akan difraksinasi adalah ekstrak terpilih sebesar 1 gram dan dilarutkan pada pelarut asal sebanyak 3 mL. serta diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH (Yeh dan Cen 1995). Ekstrak dibiarkan mengalir ke bagian penjerap kolom dan kolom terus diisi agar silika gel tidak kering.

3. . 1988) Fraksi terpilih dengan nilai aktivitas antioksidan yang tertinggi dilanjutkan dengan mengidentifikasi senyawa antioksidan menggunakan Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) Agilent Technologies dilakukan untuk mendapatkan bobot molekul dan rumus molekul yang sangat membantu dalam elusidasi struktur molekul. yaitu memilih senyawa yang memiliki puncak tinggi. kemudian dicocokkan dengan senyawa yang ada pada database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).38 3. Analisis yang dilakukan pada tahap identifikasi senyawa aktif.2.5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al.

88 30.07±0.27 7.01 7.95 5. lemak.31 0.88±1.72±0. meliputi kadar air.04 4.28±0.73%.05 17.29 4.00 % Berat kering 22. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi nilai ekonomisnya sehingga lebih efektif.77±2.01 56. air akan tersublimasi dan bahan yang tidak tersublimasi berubah menjadi padat atau kering.22 5.62 b Temilok 73.73 % 4. dan karbohidrat. Kadar air .63±0.8 42.08 14.45±2.04 2. protein.04 7.2 Kandungan proksimat tambelo Hasil analisis proksimat dari daging segar tambelo dan serbuk kering tambelo.60 1. Penurunan rendemen tambelo disebabkan penguapan kandungan air akibat bahan mengalami tekanan vakum yang sangat tinggi setelah dibekukan.1 Penelitian Tahap Pertama 4.00% dan setelah dikeringkan rendemen berubah menjadi semakin kecil yang disebabkan banyaknya kandungan air yang menguap.02 a Kering Tambelo Kerang mas ngur b 6.1 Rendemen daging tambelo Hasil pengukuran rendemen daging tambelo pada Tabel 2 menunjukkan bahwa tambelo segar setelah preparasi 40.27±0.01 7.21±0.83 21 Sumber : a Syaputra (2007) .72±0.1. Tabel 2 Rendemen daging tambelo Sampel Tambelo utuh Daging tambelo Berat segar 2200 gram 40. Kandungan proksimat daging tambelo dapat dilihat pada Tabel 3. abu. Waranmaselembun (2007) Kadar air merupakan jumlah air yang terkandung di dalam bahan pangan dan ikut menentukan kesegaran dan daya awet bahan pangan tersebut. Jumlah rendemen setelah dikeringkan sebesar 22. Tabel 3 Kandungan proksimat daging tambelo Proksimat (%) Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Segar Tambelo 82.4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4. Hal ini juga menunjukkan bahwa organisme perairan termasuk tambelo dan ikan ini memiliki kandungan air yang tinggi sehingga diperlukan penanganan yang bagus untuk mengurangi kerusakan pada bahan beku.1.

sedangkan kadar protein tambelo kering sebesar 42.63%. mempertahankan netralitas tubuh.63%. Plankton diketahui sebagai sumber protein sekaligus simbion dalam sistem pencernaan pada tambelo. Kadar protein pada tambelo segar adalah 7. hemoglobin. Protein dalam plasma (serum) darah dapat juga berfungsi sebagai antioksidan (Mucthadi 2009). Fungsi utama protein bagi tubuh adalah untuk pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan. dan transpor zat gizi dalam tubuh. kadar air tambelo kering menjadi 6.72%. regulasi keseimbangan air dalam tubuh. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Syahputra (2007) yang menunjukkan bahwa kadar air temilok segar sebesar 73.60%. bahan pengumpal darah). protein berfungsi sebagai zat pembangun tubuh dan zat pengatur di dalam tubuh. pembentukan senyawa esensial (hormon. pembentukan antibodi dan proses detoksifikasi. Protein merupakan zat gizi yang sangat penting bagi tubuh. Hasil perhitungan nilai rata-rata proksimat dapat dilihat pada Lampiran 1. karena selain sebagai sumber energi. Hasil analisis proksimat kadar air tambelo segar adalah 82. sehingga tambelo segar menjadi kering. Kadar air tambelo kering pada hasil penelitian ini memiliki kadar air dibawah kadar air maksimum yang diisyaratkan untuk proses ekstraksi. kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada bahan pangan yang dapat mempercepat pembusukkan (Winarno 1997). Hal ini menunjukkan bahwa sampel kering memiliki kadar air yang cukup baik untuk dilakukan proses ekstraksi karena semakin rendah nilai kadar air bahan maka semakin memudahkan pelarut untuk mengekstrak komponen senyawa aktif yang diinginkan. enzim. setelah mengalami pengeringan dengan freeze dry. Hal ini karena air yang terdapat pada tambelo segar tersublimasi akibat adanya tekanan vakum.77%.40 yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri. Hal ini bertujuan agar proses ekstraksi dapat berjalan lancar (Setyowati 2009). Kadar air yang bahan untuk ekstraksi diisyaratkan sebesar 11%.31%. Kandungan protein pada tambelo kering berasal dari plankton yang merupakan salah satu makanan bagi tambelo. sedangkan kadar air tambelo setelah dikeringkan sebesar 6. .

yaitu sekitar 96% terdiri dari bahan organik dan air. Tabel 3 menunjukkan bahwa kandungan abu dalam tambelo segar 2. Berdasarkan hasil analisis proksimat pada tambelo kering memiliki karbohidrat yang relatif lebih tinggi . jika dibandingkan dengan literatur yang ada maka nilai hasil analisis memiliki nilai yang tidak jauh berbeda.29%).28%. Peranan berbagai unsur mineral bagi manusia masih belum sepenuhnya diketahui (Winarno.05% dan kandungan abu pada tambelo kering 5.26%. lebih kecil dari temilok 4. bahan-bahan organik terbakar tetapi zat anorganiknya tidak.07%. Elemen-elemen mineral telah jelas diketahui fungsinya pada makanan ternak. Lemak merupakan sumber yang dapat menyediakan energi sekitar 2.25 kali lebih banyak daripada yang diberikan oleh karbohidrat atau protein. Ikan menyimpan cadangan energi dalam bentuk lemak di dalam hatinya (lebih dari 50% berat hatinya).unsur mineral.88% lebih kecil dari kerang mas ngur 7. Peranan lemak dalam bahan pangan yang utama adalah sebagai sumber energi. Sebagian besar bahan makanan. Abu adalah zat anorganik. karena itulah disebut abu. sisanya terdiri dari unsur. hal ini disebabkan karbohidrat merupakan bahan pembentukan tumbuh-tumbuhan dan juga terdapat pada hewan dalam jumlah tertentu.88%.41 Hasil analisis kadar lemak dari tambelo segar adalah 0. sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Syahputra (2007). Hal ini terutama karena peranan asam lemak eikosapentaenoat (EPA) dan dokosaheksaenoat (DHA). Karbohidrat merupakan bagian terbesar dari senyawa organik. Lemak adalah bentuk energi berlebih yang disimpan oleh hewan sehingga jumlah lemak dalam hewan yang dijadikan bahan pangan ditentukan oleh keseimbangan energi hewan tersebut. yang terkenal dengan sebutan asam lemak omega 3.1997). belum banyak penelitian sejenis dilakukan pada manusia. Pada proses pembakaran. kadar lemak tambelo lebih rendah dibandingkan dengan kadar lemak temilok segar (4. dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL (Muchtadi 2009). Unsur mineral juga dikenal sebagai zat organik atau kadar abu. sedangkan kadar lemak pada tambelo kering sebesar 14. Peranan lemak ikan dalam mencegah timbulnya penyakit jantung koroner telah dibuktikan.

1.34 0. sebaliknya protein yang kurang satu atau lebih asam-asam amino esensial mempunyai mutu yang rendah (Winarno 2008).72 1. sedangkan asam amino isoleusin yang terendah (0.55%). 4. Asam amino merupakan monomolekul dari protein yang memiliki fungsi penting bagi organisme hidup.63 1.34%).44%. Kandungan asam amino dari tambelo disajikan dalam Gambar 10. Kadar Asam Amino (%) 4.41 0.56 1.37 0.01 Jenis Asam Amino Gambar 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo.50 2.80 1.29 1. Hal ini diduga bahwa tambelo menyimpan hasil pencernaan dalam bentuk glikogen.50 3. Pada prinsipnya suatu protein yang dapat menyediakan asam amino esensial dalam suatu perbandingan yang dapat menyamai kebutuhan manusia dikatakan mempunyai mutu yang tinggi.3 Kandungan asam amino tambelo Mutu protein dinilai dari perbandingan asam-asam amino yang terkandung di dalam protein tersebut.00 3. karena sebagian besar juga makanan yang diperolehnya berasal dari kayu bakau sehingga sistem pencernaannya dapat memanfaatkan selulosa dan lignin pada kayu bakau.41 1.55 2.50 1.00 1. Tambelo mengandung 17 jenis asam amino.50 0.81 1.00 0.42 30. sedangkan kromatogram standar asam amino dapat dilihat pada Lampiran 3 dan kromatogram asam amino tambelo pada lampiran 4.25 0.19 0.00 3. Jenis asam amino yang tertinggi dalam tambelo adalah asam glutamat (3.74 1.26 0.00 2.85 1. . Hal ini diperkuat oleh Purchon (1968) yang mengatakan bahwa sistem pencernaan yang dimiliki oleh shipworm atau tambelo mampu mencerna selulosa 80% dan lignin 45 dan pada umumnya kerang-kerangan menyimpan hasil pencernaannya dalam bentuk glikogen (gula otot) dan lemak.

80 1.72 0.85 3.58 6.92 26.43 Kandungan asam amino yang terdapat di dalam tambelo diklasifikasikan menjadi sembilan jenis asam amino yang terdiri dari asam amino esensial.81 8.74 1.01 0.41 1. AAA = asam amino asam.85 2. Asam glutamat bermanfaat untuk menahan konsumsi alkohol berlebih. asam amino hidrofilik. AAHb = asam amino hidrofobik. mempercepat penyembuhan luka pada usus.19 1.19 1. Kajian-kajian menggunakan isotop-isotop stabil menunjukkan bahwa usus mendapatkan sebagian besar energi .80 1. dapat disajikan pada Tabel 4.72 0.01 1.56 14.68 AANE = asam amino non esensial.55 3. meningkatkan kesehatan mental dan meredam depresi (Linder 1992).63 0. asam amino basa. Menurut the international glutamate information service (IGIS).81 1.97 13.26 1.61 2.64 1.52 66.80 1.25 1.29 0.56 1. asam amino aromatik.72 0.55 1.20 28. glutamat yang berasal dari makanan merupakan sumber energi utama bagi usus. Tabel 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia dari tambelo Jenis asam amino Aspartat Glutamat Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein Histidin Treonin Ariginin Valin Metionin Isoleusin Leusin Fenilalanin Lisin TOTAL % dalam total asam amino Klasifikasi asam amino (% berat protein) AAE AANE AAA AAB AAN AAR AAS AAHi 2.63 1.84 20. AAE = asam amino esensial. AAR= asam amino aromatik.29 0. asam amino sulfur.41 0. asam amio netral.55 3.85 2.82 43.26 1.26 1. AAN = asam amino netral.56 0.56 0.91 0.4 4. dan asam amino hidrofobik.43 AAHb 1. AAHi = asam amino hidrofilik.19 1.01 1.37 1.62 9. asam amino non esensial.72 0.44 8. AAB = asam amino basa.74 1.25 1.42 61.34 1. AAS = Asam amino sulfur.29 1. asam amino asam.63 1. Asam glutamat adalah asam amino non esensial yang dapat disintesis dari gugus amida pada molekul glutamin yang diubah menjadi karboksilat melalui proses hidrolisis asam atau basa.74 40.81 1.19 5.56 0.25 1.74 1.

Secara medis. dan telah diperlihatkan bahwa semua glutamat yang dimakan dari bahan makanan hanya 4 % yang keluar dari tubuh. Usus merupakan garis pertahanan pertama tubuh karena dari semua organ pencernaan. Sistin juga diperlukan untuk kesehatan kulit. Beberapa asam amino ini secara umum mempunyai kegunaan besar untuk kesehatan manusia. sistin digunakan untuk memperoduksi hati dan mencegah atau meredakan penyakit yang berbahaya (Cat 2000). lisin. Glutamat yang berasal dari makanan diperlukan bersama dengan sistin dan glisin untuk produksi glutathion. baik secara langsung maupun tidak langsung di antaranya adalah metionin. prolin. asam glutamat. leusin. Asam-asam amino hasil pemecahan protein sebelum ditransportasikan ke hati terlebih dahulu diabsorbsi melalui sel-sel mukosa usus dan selanjutnya di serap oleh vena untuk kemudian ditranspor ke hati. Metionin juga merupakan prekusor sistin yang merupakan asam amino penghasil glutathion untuk detoksifikasi di hati. histidin. Metionin merupakan suatu antioksidan yang baik karena dapat mensuplai belerang. alanin. phenilalanin. dan membantu meningkatkan daya ingat. Sistin merupakan penghasil taurin yaitu suatu komponen gliutathion. suatu molekul antioksidan yang memainkan peranan penting dalam mekanisme daya tahan tubuh serta perbaikan kerusakan sel dan jaringan tubuh. menginaktifkan radikal bebas. sistin. dan juga merupakan salah satu amino yang . Glutamat bersama dengan glutamin merupakan asam amino yang paling berlimpah dari 20 jenis asam amino yang mencapai 20 persen dari asam-asam amino pada usus (the international glutamate information service). usus mempunyai kontak terbesar dengan lingkungan eksternal dalam bentuk makanan. glisin. Keterkaitan dengan pengunaan tambelo sebagai obat tradisional maka ditinjau dari komposisi asam amino yang diperoleh dapat dijelaskan bahwa umumnya asam-asam amino ini mempunyai kegunaan besar bagi kesehatan manusia. isoleusin. detoksifikasi dari tubuh (dalam kaitannya dengan sulfur) serta penghasil kolagen yang digunakan untuk kekenyalan kulit dan tekstur. Glutathion merupakan pelindung otak dan hati dari kerusakan akibat obat atau racun. asam aspartat.44 dari metabolisme asam amino. valin. Usus sangat membutuhkan glutamat. alkohol dan unsur-unsur lain yang dapat membahayakan tubuh. dan treonin.

Valin bermanfaat dalam pertumbuhan dan perbaikan jaringan otot serta menjaga keseimbangan nitrogen dan mengatur penggunaan glukosa. Metionin juga dapat berperan dalam menstabilkan lemak. Valin merupakan salah satu dari tiga asam amino rantai cabang (yang lain adalah leusin dan isoleusin) yang meningkatkan energi. yang mana histidin akan membentuk sistem imun sebagai respon terhadap suatu reaksi alergi. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. metionin digunakan untuk gangguan depresi. dan membantu dalam pembentukan hemoglobin serta merupakan pertahanan utama tubuh untuk melawan infeksi akibat luka.45 diperlukan untuk pembuatan creatine monohydrate di dalam tubuh. memperbaiki jaringan otot. lemah. radang sendi. pertumbuhan yang lambat. yaitu suatu campuran yang penting untuk menghasilkan energi dan pertumbuhan otot dan pergerakan tubuh. Secara medis. Alanin merupakan sebuah sumber penting energi untuk jaringan otot. Histidin berperan penting dalam pemeliharaan dan pembuatan glial sel saraf yang disebut oligo-dendrocytes (selendang atau pembungkus) dan mencegah kerusakan otak dan jaringan saraf dalam tulang punggung. Histidin di dalam tubuh diperlukan untuk pertumbuhan dan perbaikan dari semua jenis jaringan. dan sebagai antioksidan. histidin digunakan dalam mengobati radang sendi dan ketulian saraf. meningkatkan daya tahan tubuh. mengatur gula darah. Kekurangan metionin dapat menyebabkan akumulasi lemak di hati. dan penyakit hati atau liver (Cat 2006). menurunkan kadar gula darah. membantu dalam metabolisme gula dan asam organi. dan edema. Isoleusin bermanfaat dalam mempercepat penyembuhan luka. Leusin bermanfaat . luka mengkerut. dan meningkatkan produksi hormon pertumbuhan. Histidin merupakan suatu prekusor asam amino non esensial. memperkuat sistem kekebalan tubuh dengan memproduksi antibodi. otak dan sistem saraf pusat. membuat pencernaan menjadi lebih baik. Leusin bermanfaat dalam pengaturan gula darah. membantu proses pemulihan. Secara medis. mengatur energi. Penambahan valin harus selalu dikombinasikan dengan isoleusin dan leusin pada rasio miligram (Bonderud 2011). dan membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). tulang dan otot serta membantu dalam penyembuhan luka.

Lisin juga bermanfaat dalam menjaga keseimbangan nitrogen serta membantu menjaga badan pada saat stress berat dan kondisi yang melelahkan. mengatur energi serta membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). Hati mempunyai fungsi untuk melakukan metabolisme protein. Penderita gangguan hati. tulang dan otot . Kekurangan lisin akan menyebabkan kekacauan enzim. kolagen dan untuk memperbaiki jaringan yang rusak dan juga membantu dalam membangun protein otot yang baru. hormone (GH. Tabel 5 menunjukkan skor kimia asam amino esensial tambelo dengan cara melakukan perbandingan antara asam amino protein esensial tambelo dengan . untuk penyerapan kalsium serta pembentukan tulang dan pertumbuhan otot seperti mobilisasi lemak untuk digunakan sebagai energi. Kekurangan phenilalanin akan menyebabkan tubuh lemah. enzim. Kekurangan treonin akan menyebabkan warna kulit menjadi tidak normal. kerontokan rambut. Lisin juga diperlukan dalam membentuk antibody.46 dalam pengaturan gula darah. testosteron. tidak berselera dan hilang kosentrasi (Cat 2006). 2006). Arginin penting untuk kesehatan reproduksi pria karena 80% cairan semen terdiri dari arginin. membantu dalam penyembuhan luka. hormon insulin). dan karbohidrat. seperti sakit liver membutuhkan makanan yang tinggi protein dan karbohidrat serta lemak dengan kadar yang sedang karena hal ini akan meringankan kerja hati untuk memperoleh energi yang besar untuk aktivitasnya (Carroli et al. membantu kerja hati dan fungsi lipotropiknya. lemak. Apabila fungsi hati terganggu maka akan berdampak pada terganggunya proses metabolisme tersebut. dan manfaatnya untuk cardiovascular meliputi pemeliharaan kesehatan pembuluh darah. Arginin berperan dalam membantu detoksiifikasi hati pada sirosis hati dan fatty liver. menghambat pertumbuhan sel tumor dan kanker serta membantu pelepasan hormon pertumbuhan (Supamas 2011). pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. meningkatkan sistem imun. kehilangan energi. lesu. Treonin bermanfaat dalam mencegah penumpukan lemak di hati. Lisin digunakan di dalam tubuh kerusakan hati dan pertumbuhan terhambat. Fenilalanin secara medis digunakan untuk perawatan radang sendi dan depresi. berat badan menurun.

4 Kandungan asam lemak tambelo Asam lemak adalah asam organik yang terdapat sebagai ester trigliserida atau lemak. Hal ini berarti bahwa protein yang terkadung dalam tambelo dapat dimanfaatkan oleh tubuh hanya sekitar 19.75 76.47 referensi dari FAO/WHO (1991). Berdasarkan analisis kualitatif.87%. diketahui bahwa angka terendah ditunjukkan oleh asam amino isoleusin dan treonin masingmasing sebesar 19. Analisis asam lemak dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas untuk mengetahui komposisi asam lemak yang terdapat pada tambelo. Tabel 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo Asam amino Kadar dalam tambelo (mg/g prot) 7.1.32 13.22 21. sehingga asam amino esensial perlu difortifikasi untuk meningkatkan nilai gizi protein tambelo.32 Isoleusin Leusin Lisin Metionin Fenilalanin + tirosin Treonin Valin Keterangan : tritofan bukan asam amino pembatas sehingga tidak dilakukan analisis 4.23 42.09 22.55 %).63% sehingga diperoleh skor kimia protein tambelo sebesar 19.65 30. 5 jenis asam lemak tidak jenuh tunggal atau monounsaturated fatty acid (MUFA) dan 3 jenis asam lemak jenuh ganda atau polyunsaturated fatty acid (PUFA). keragaman asam lemak pada serbuk tambelo dapat teridentifikasi 15 jenis asam lemak. Kromatogram standar asam lemak disajikan pada Lampiran 5.94 37. Komposisi asam lemak dalam tambelo dapat dilihat pada Tabel 6. sedangkan kromatogram asam lemak daging tambelo disajikan pada Lampiran 6.87% dengan asam amino pembatas yang utama berada pada isoleusin.63 60. Asam palmitoleat adalah salah satu jenis .87% dan 21.87 41.16 Referesi FAO (1991) (mg/g prot) 40 70 55 35 60 40 50 Skor kimia amino esensial (%) 19.95 29.41 37. Berdasarkan hasil pengamatan.33 8. baik yang berasal dari hewan atau tumbuhan. yang terdiri dari 7 jenis asam lemak jenuh (SFA). Jenis asam lemak yang banyak terkandung di dalam serbuk tambelo adalah asam palmitoleat (C16:1) (14.

Asam lemak ini tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA). terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. Asam lemak tak jenuh tunggal secara umum memiliki efek yang menguntungkan terhadap kadar kolesterol dalam darah.55 0. minyak kacang tanah.66 3.94%. Tabel 6 Komposisi asam lemak dalam tambelo No Asam Lemak Jenuh 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Miristat (C14:0) Pentadekanoat (C15:0) Palmitat (C16:0) Heptadekanoat (C17:0) Stearat (C18:0) Arakidat (C20:0) Heneikosanoat acid (C21:0) Miristoleat (C14:1) Palmitoleat (C16:1) Cis-10-Heptadekanoat (C17:1) Oleat (C18:1ω9) Linolenat (C18:3ω3) Cis-8.24 1.13 0.10 13. asam lemak tak jenuh tak tunggal (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi popular (Achadi 2010).80 0. meskipun PUFA dapat menurunkan kolesterol LDL. dan canola.94 0.33 14. minyak biji kapas. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah.04 0. Asam oleat memiliki sifat lebih stabil dan lebih baik perannya dibandingkan PUFA (PolyUnsaturated Fatty Acid).22 0. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun.14-Eikosatrienoat (C20:3ω6) EPA (C20:4ω3) Arakidonat (20:4ω6) 5.48 asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) yang merupakan jenis asam lemak yang memiliki satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya.29 Asam lemak Hasil (%berat minyak) Asam Lemak Tak Jenuh Asam oleat (omega-9) yang terkandung di dalam tambelo kering sebesar 1.10 0. Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) memiliki . minyak kedelai.11.69 0.13 0.80 0.

asam arakhidonat (C20:4 ω6). Sisanya terdiri dari unsur-unsur mineral. dan integritas membran sel. tembaga. karena itu disebut trace element atau mineral mikro. iodium. Kadar Kalsium dari tambelo adalah 3532. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein) serta dapat menurunkan produksi trigliserida dan apolipoprotein beta di dalam hati (Achadi 2010).1. Kekurangan Kalsium akan menyebabkan osteoporosis dan . mempertahankan fungsi. Asam lemak tak jenuh ganda berperan penting dalam transpor dan metabolisme lemak. asam eikosatrienoat (C20:3ω6). dan fluor hanya terdapat dalam tubuh dalam jumlah kecil saja. dan asam eikosapentanoat/EPA (C20:4ω3).46 ppm. zink. sedangkan MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. Unsur mineral lain. Sampai sekarang telah diketahui ada empat belas unsur mineral yang berbeda jenisnya diperlukan manusia agar memiliki kesehatan dan pertumbuhan yang baik. yaitu dapat menurunkan HDL.49 kelemahan. 4. Unsur-unsur ini terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup besar dan karenanya disebut unsur mineral makro. kobalt. Jenis-jenis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) yang terkandung dalam tambelu kering. tetapi karena perannya yang sangat penting untuk pembentukan tulang dan gigi terutama pada masa pertumbuhan dan ibu hamil. yaitu asam linoleat (C18:3ω3).5 Kandungan mineral tambelo Sekitar 96% bahan makanan terdiri dari bahan organik dan air. seperti besi. Di dalam tubuh unsur mineral berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. Hasil penelitian yang dilakukan oleh Mensink (1987) diacu dalam Achadi (2010) menunjukkan bahwa MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. mangan. Unsur kalsium (Ca) juga dianalisis bukan karena sebagai antioksidan. Kandungan mineral pada tambelo diuji karena peranannya sebagai antioksidan dalam sistem pertahanan tubuh terhadap reaksi oksidasi radikal bebas dan mineral ini tergabung dalam enzim antioksidan yang berperan melindungi membran sel dan komponen dalam sitosol. Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo disajikan pada Tabel 7. fungsi imun.

Tabel 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo No Parameter Hasil (ppm) Mineral Makro Kalsium (Ca) 1. Antioksidan enzimatis bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal baru (Marks et al. Seng (Zn) Tembaga (Cu) Fosfor (P) Selenium (Se) Peranan zat besi (Fe) berhubungan dengan kemampuannya dalam reaksi oksidasi dan reduksi. 4.41 626. Sebagai . besi kehilangan tiga elektron sehingga memiliki tiga sisa muatan positif (Fe3+/feri) karena dapat berada dalam dua bentuk ion ini. Aktivitas superoksida dismutase (SOD) dan katalase tergantung pada zat besi. 11. yaitu sebagai kofaktor bagi enzim-enzim yang terlibat dalam reaksi oksidasi reduksi (FAO/WHO 2001.50 akan mempengaruhi mental dan juga menyebabkan osteomalasia. Almatsier 2006). 9. 5.46 5. Winarsi 2007).42 1373. 2.30 ppm. Kandungan seng (Zn) pada tambelo segar adalah 12. besi berperan dalam respirasi sel. besi kehilangan dua elektron sehingga memiliki dua sisa muatan positif (Fe2+ /fero). Klorida (Cl Kalium (K) Magnesium (Mg) Mangan (Mn) Natrium (Na) 3532.45 12. Zat besi sebagian besar berada dalam hemoglobin. Dalam keadaan tereduksi.02 435. zat besi merupakan unsur yang sangat reaktif sehingga mampu berinteraksi dengan oksigen.18 Mineral Mikro Besi (Fe) 7.30 0.40 3. Zat besi juga berperan dalam imunitas dalam pembentukkan sel-sel limfosit. 2000. 8. 10. Penyerapan Ca akan dipermudah dengan adanya vitamin D (Muchtadi 2009). 3.06 0. dalam keadaan teroksidasi.98 2363.05 <0. 6. Secara kimia. Seng merupakan mineral penting pada berbagai sistem enzim dan hormon.

meningkatkan aktivitas enzim antioksidan.51 salah satu mineral imunitas yang berfungsi untuk maturasi. proliferasi. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Mineral Zn juga merupakan komponen enzim yang berperan dalam perbaikan asam nukleat (Harris diacu dalam Ridwan 1997). terkena polusi lingkungan. Kemampuan tubuh seseorang untuk menyerap seng menurun sesuai dengan pertambahan usia sehingga penting untuk meningkatkan intake mineral seng ketika usia 40-an. dan luka dapat menghabiskan suplai seng dalam tubuh (Wirahadikusumah 1985). Seng (Zn) berperan dalam sistem pertahanan tubuh dengan cara berkonjugasi dengan thiol sehingga menghambat pembentukan ion superoksida. diferensiasi. Hasil penelitian Winarsi (2004) yang memberikan minuman susu skim yang diperkaya dengan isoflavon kedelai sebesar 100 mg dan 8 mg ZnSO4 yang diberikan setiap hari selama 2 bulan pada wanita premenopause diketahui dapat menurunkan sindrom premenopause. Enzim superoksida dismutase mempunyai substrat spesifik. Selenium (Se) adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas dan merupakan bagian penting enzim glutation peroksidase. kadar IgG antiTT. yaitu 0. Angka kecukupan Se per hari yang dianjurkan oleh Widya Nasional Pangan dan Gizi (2004) adalah 5-20 µg untuk bayi dan anak di bawah 10 tahun dan 20-30 µg untuk pria dan wanita berumur di atas 10 tahun sebesar. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Khusus ibu hamil dan . Peran tembaga sebagai kofaktor maupun sebagai pengatur enzim SOD cukup besar.98 ppm. dan aktivasi sel T. Mineral Zn sebagai komponen protein yang mempunyai gugus SH-(metallothionine) berperan sebagai pembersih radikal bebas. dan hormon timulin 1. Hasil analisis diketahui bahwa kandungan tembaga (Cu) yang terdapat pada tambelo nilainya kecil. yaitu ion superoksida. yang dapat menghancurkan peroksida yang terbentuk dari hasil oksidasi lemak di dalam tubuh (Mucthadi D 2009). Jika tubuh kekurangan tembaga maka akan terjadi peningkatan peroksida lipid (Harris diacu dalam Ridwan 1997). Keadaan tubuh yang mengalami stres karena trauma. Mineral Cu berperan melalui aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD).

sebagian lemak serta tanin yang menyebabkan hasil ekstraksi metanol cukup kuat.2.2.72%. sedangkan ekstrak tambelo yang mengandung rendamen relatif kecil adalah ekstrak n-heksana (2. Kandungan fitokimia ekstrak tambelo dapat dilihat pada Tabel 8. 4. Hal ini sesuai dengan pernyataan Heath dan Reineccius (1986) bahwa metanol mampu mengekstrak senyawa organik.18 ppm.86%).52 menyusui mendapat tambahan.1 Rendemen ekstrak tambelo Ekstraksi merupakan salah satu cara pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu bahan.2 Penelitian Tahap Kedua 4. pelarut metanol memiliki nilai kostanta dielektrik tinggi jika dibandingkan dengan pelarut yang lain sehingga pelarut metanol dapat membuka dinding sel yang mengakibatkan hampir semua senyawa dapat tertarik keluar dari dalam sel. Selain itu. Tabel 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Uji Fitokimia Alkaloid Flavonoid Phenol Hidroquinon Steroid Triterpenoid Saponin Tanin n-Heksana + + + + + Jenis Pelarut Etil Asetat + + + + + Metanol + + + + + - . Berdasarkan hasil rendemen ekstrak tambelo tersebut. Penelitian ini dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi yang dilanjutkan dengan partisi cair-cair. Besarnya rendemen ekstrak metanol diduga berkaitan dengan sifat pelarut metanol yang memiliki kemampuan pemisahan komponen dari bahan yang lebih baik.19% ) dan etil asetat (2. terbukti bahwa tambelo mengandung berbagai senyawa dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda. masing-masing sebanyak 5 dan 10 µg/orang/hari (Winarno 2008). Kadar Selenium di dalam tambelo adalah 0. 4. Rendemen ekstrak tambelo yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Analisis fitokimia adalah salah satu cara untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder pada suatu tanaman atau hewan.

isoflavon.53 Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kasar tambelo. dan glikosida (Harborne 1987).500 jenis alkaloid (Harborne 1987). dimetilsulfoksida. flavonol. komponen fenolik. isoflavonoid (1’B-3C). (1998) melaporkan bahwa beberapa senyawa flavonoid bersifat antioksidan dan dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase maupun reaksi superoksida. Flavonoid merupakan golongan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 karbon sebagai kerangka dasarnya. dan kalkon. polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid. Hal ini karena pelarut etil asetat bersifat semi polar sehingga memiliki kemampuan melarutkan senyawa polar dan non polar. Berdasarkan susunan ini dapat dihasilkan 3 jenis struktur. katekin. hewan. Khopkar (2003) berpendapat bahwa bahan dan senyawa kimia akan mudah larut pada pelarut yang relatif sama kepolarannya. alkaloid bebas basa hanya larut dalam pelarut organic. karena senyawa yang terbawa pada proses ekstraksi adalah senyawa yang mempunyai polaritas sesuai dengan pelarutnya yaitu pelarut metanol. asam amino. Kelima belas atom karbon tersebut membentuk dua cincin aromatik (C6) yang terikat pada rantai propana (C3) sehingga membentuk susunan C6-C3-C6. Ekstrak etil asetat tambelo (Tabel 8) diketahui mengandung senyawa flavonoid yang tinggi. Kemudian dilaporkan juga senyawa flavonoid dari stereospermum . ataupun jamur dan merupakan produk yang dihasilkan dari proses metabolisme sekunder. Hal ini diduga senyawa alkaloid merupakan senyawa polar. butanol. yang memiliki aktivitas antioksidan meliputi flavon. turunan asam sinamat. Garam alkaloida kuarterner sangat larut dalam air (Sastrohamidjojo 1996). metanol. Alkaloid adalah senyawa alami amina. bahwa ekstrak metanol memiliki senyawa alkaloid yang sangat tinggi. Pada umumnya. Flavonoid merupakan senyawa polar yang mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol. aseton. dan 1 neoflavonoid (1’B-4C). gula. dan air (Harborne 1987). saat ini diketahui sebanyak 5. tanin. dimetilformamida. yaitu flavonoid (1’B-2C). meskipun beberapa pseudoalkaloida dan protoalkaloida yang larut dalam air. baik pada tanaman. Menurut Pratt dan Hudson (1990). Pelarut yang bersifat polar mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener. Cos et al. karotenoid.

Steroid alami berasal dari berbagai transformasi kimia dua triterpena yaitu lanosterol dan sikloartenol. sapogenin. fukosterol. maka nilai absorbansi akan semakin turun karena warna larutan bertambah kuning. .54 personatum selain bersifat antioksidan. glikosida jantung dan vitamin D. Suatu senyawa dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya ditandai dengan perubahan warna ungu menjadi kuning pucat (Molyneux 2004). Peredaman (inhibisi) terhadap radikal bebas dinyatakan dalam persen.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Molyneux 2004. 4. Pengukuran absorbansi dilakukan pada setiap sampel antioksidan yang dibuat dengan berbagai konsentrasi. Perubahan warna pada ekstrak tambelo dapat dilihat pada Lampiran 7. Senyawa steroid dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat (Harbone 1987). senyawa tersebut juga dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase (Kumar et al. Ada beberapa steroid seperti. Perubahan warna yang mengindikasikan adanya reaksi peredaman radikal bebas DPPH oleh senyawa antioksidan baik pada larutan ekstrak tambelo maupun pada larutan BHT dan vitamin super ester C. Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid yang dapat diklasifikasikan menjadi steroid dengan atom karbon tidak lebih dari 21 yaitu sterol. Senyawa DDPH adalah suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain membentuk senyawa yang lebih stabil dan dapat bereaksi dengan atom hidrogen membentuk DPPH tereduksi (diphenylpicrylhydrazine) yang stabil. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana bersifat non polar. diisolasi dari sumber daya hayati laut bersifat non toksik dan mempunyai khasiat menurunkan kolesterol dalam darah dan mendorong aktivitas antidiabetes (Bhakuni et al. semakin tinggi kosentrasi antioksidan yang ditambahkan pada larutan DPPH. Vattem dan Shetty 2006). 2006). Berdasarkan hasil uji fitokimia.2. Secara teoritis. ekstrak n-heksana tambelo mengandung senyawa steroid yang tinggi.3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH (1. 2005). Besarnya daya peredaman radikal bebas DPPH maka dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm.

27 15 3. sedangkan . dan vitamin super ester C disajikan pada Gambar 12.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.27 Berdasarkan Gambar 12.53 Gambar 12 Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.44 63.56 15. Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.16 10 ppm 94.00 ppm.86 ppm. dengan nilai rata-rata IC50 sebesar 15. BHT.02 51.27 ppm jauh leih ebih kecil dibandingkan dengan ketiga ekstrak kasar tambelo Tabel 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.01 4.21 262. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Molyneux 2004). Ekstrak metanol tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 85.77 29.78 81. Tabel 9 memperlihatkan bahwa nilai aktivitas antioksidan pada BHT dengan nilai IC50 3.35 8. BHT. menunjukkan ekstrak etil asetat tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dari kedua ekstrak yang lainnya.19 IC50 (ppm) 3. 300 Rata-rata IC50 (ppm) 250 200 150 100 50 3.51 27.83 84.35 0 BHT Vitamin n-heksana ester super C Sampel Etil asetat Metanol 8.35 ppm dan vitamin super ester C yaitu 8.55 dan aktivitas antioksidan dinyatakan dengan IC50 (Inhibition Concentration) yang menunjukkan kosentrasi sampel antioksidan yang dapat menghambat atau meredam aktivitas antioksidan yang semakin tinggi atau dengan kata lain IC50 sebagai kosentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH. dan vitamin super ester C.

metanol.56 ekstrak n-heksana tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 262.4 Fraksi ekstrak terpilih Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. Rendahnya aktivitas antioksidan ekstrak n- heksana diduga karena pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak nheksana tambelo dan kristal DPPH pada penelitian ini adalah metanol yang bersifat polar. yaitu etil asetat. n-heksana : etil asetat (1:1). (2005) menyatakan bahwa presentase penghambatan (% inhibisi) terhadap aktivitas radikal bebas akan ikut meningkat seiring dengan meningkatnya kosentrasi. Kombinasi yang digunakan adalah yang terdiri dari pelarut kloroform : metanol (9:1). baik pada kosentrasi ekstrak maupun pada kosentrasi standar (BHT dan vitamin super ester C). Perhitungan persen inhibisi IC50 dan grafik regresi linear pada BHT. Hanani et al. etil asetat. . vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo dapat disajikan pada Lampiran 8. Hal ini menyebabkan komponen bioaktif yang bersifat non polar pada ekstrak n-heksana tidak terlarut sepenuhnya pada pelarut tersebut sehingga berpengaruh pada nilai IC50. sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 100-150 ppm. 4. Sebelum dilakukan fraksinasi terhadap ekstrak kasar etil asetat. Eluen yang digunakan adalah n-heksana. Eluen ini berfungsi sebagai fase gerak saat fraksinasi. dilakukan pencarian eluen terlebih dahulu dengan menggunakan KLT.2. kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm. Bois (1958) diacu dalam Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm.77 ppm. dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 150-210 ppm. Eluen dengan pemisahan terbaik kemudian dikombinasikan satu dengan yang lainnya dengan berbagai perbandingan. dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada kromatografi lapis tipis (KLT). Pengujian aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak kasar tambelo memiliki kekuatan penghambatan yang berbeda-berbeda antara yang satu dengan yang lainnya dan menghasilkan hubungan antara kosentrasi ekstrak kasar yang digunakan dengan persen inhibisinya. kloroform. dan etanol.

5 = 0.5 = 0. Berdasarkan hasil fraksinasi tersebut (Gambar 12).57 kloroform : metanol (17:3). Hal ini menunjukkan bahwa dalam fraksi tersebut mengandung senyawa yang . alkaloid dan fenol hidrokuinon. penggunaan kloroform : metanol sebagai eluen pada perbandingan 15 : 1 sampai 3 : 1 dapat memisahkan senyawa flavonoid dengan baik. Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) disajikan pada Gambar 12.25 Rf1 = 0. Profil pola pemisahan senyawa dengan eluen tersebut disajikan pada Lampiran 9a.5 = 0.84 Rf7 = 7/8. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang kemudian dilakukan pengujian fitokimia. diduga terdapat sembilan jenis senyawa pada ekstrak etil asetat tambelo. diketahui bahwa pada fraksi 9 dan fraksi 10 mengandung senyawa triterpenoid. Hasil pengecekan terhadap fraksi tersebut. diperoleh eluen terbaik yang terdiri dari campuran kloroform : metanol (9 : 1).5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Berdasarkan hasil fraksinasi kolom.1/8. steroid.5/8.2/8. Rf9 = 8.48 Rf3 = 3. flavonoid. Berdasarkan analisis dengan menggunakan KLT.5 = 0.97 Rf8 = 7. dan n-heksana : etil asetat (8:2).4/8.1/8.1/8.5 = 0. Kesepuluh fraksi tersebut kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dan uji fitokimia.5 = 0.74 Rf5 = 5.5 = 0.5/8. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang disajikan pada Lampiran 9b. Menurut Markam (1988). diduga bahwa masing-masing fraksi telah menunjukkan adanya 1 spot dengan Rf yang berbeda. Rendamen fraksi terbesar terdapat pada fraksi 1 (0.65 Rf4 = 4.06 Gambar 12 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) 4.00156%).4 Rf2 = 2. Data rendamen hasil kolom disajikan pada Lampiran 10.2. Berdasarkan hasil fraksinasi kolom.15748%) dan rendamen terkecil pada fraksi 6 (0. Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan.5 = 0.82 Rf6 = 6.5 = 0.3/8.

. terbukti terjadi perubahan warna dari ungu menjadi kuning cerah dengan nilai IC50 8.87 ppm. Perhitungan persen inhibisi dari hasil fraksinasi dapat lihat pada Lampiran 12. fraksi yang didapat lebih murni senyawa aktif dan lebih banyak terisolasi.6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo disajikan pada Gambar 13. Hal ini berkaitan dengan fungsi proses fraksinasi yang bertujuan untuk memperoleh pola pemisahan yang sempurna. diketahui bahwa aktivitas antioksidan fraksi kesembilan mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Gambar 14 memperlihatkan bahwa fraksi 9 memiliki daya inhibisi yang setara dengan vitamin super ester C. Hal ini memungkinkan adanya senyawa aktif dalam faksi 9 yang berpotensi sebagai obat antioksidan. Tabel 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Kelompok Senyawa Nama Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Alkaloid + + + + + + + + + + Flavonoid + + + + + + + + + + Phenol Hidroquinon + + + + + + Steroid + + + + + + + + + + Triterpenoid + + + + + + + + + + Saponin + + + + + + + Tanin - 4. Aktivitas antioksidan pada fraksi tambelo lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak tambelo.58 memungkinkan dapat menghambat radikal bebas. Kandungan fitokimia fraksi tambelo disajikan pada Tabel 10. Berdasarkan hasil pengujian.2.91 ppm. disusul dengan fraksi 10 dengan nilai IC50 28.

94 86.68 4.90 28. Mekanisme penghambatan radikal DPPH dapat dilihat pada Gambar 15.21 76.29 43. maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen.32 2.64 5.04 3. Pengujian dengan menggunakan DPPH merupakan salah satu metode yang sederhana.40 58. Hasil reaksi tersebut berupa DPPH tereduksi (yang tidak reaktif lagi karena telah mendapatkan donor hidrogen (Molyneux 2004).49 63. Gambar 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH’ Keterangan: RH = asam lemak tidak jenuh R = radikal bebas . Senyawa DPPH merupakan radikal bebas yang bersifat stabil sehingga dapat bereaksi dengan atom hidrogen yang berasal dari suatu senyawa antioksidan.50 61.06 8.87 74.59 120 Rata-rata IC50 100 80 60 40 20 0 15 103. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen.87 1.63 5.17 2.91 4.43 2.69 Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi etil 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 asetat Estrak kasar dan Hasil Fraksi Gambar 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo Sebuah senyawa dapat disebut sebagai antioksidan bila senyawa tersebut dapat mendonorkan atom hidrogennya dengan cepat sehingga dapat menghambat terjadinya pembentukan radikal bebas (Sauriasari 2006). akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH.51 4. Jika semua elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan.

instrumen kontrol dan proses data. massa analyzer. yaitu farnesic acid glyceride.2. Instrumentasi LC-MS terdiri atas inlet-LC. (a) Komponen 1 Farnesic acid glyceride (b) (c) Komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride (d) Komponen 3 Labdane diterpenoid Gambar 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan massa 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid. detektor.Analisis senyawa menggunakan LC-MS dilakukan pada fraksi terbaik (fraksi 9). tekanan permukaan. Data spektrum sampel fraksi 9 dapat dilihat pada Lampiran 11.7 Identifikasi senyawa fraksi teraktif Liquid chromatography mass spectrofotometer (LC-MS) merupakan metode analisis kuantitatif yang merupakan kombinasi antara kromatografi cair dengan spektroskopi massa. dan labdane diterpenoid. sumber ion. Ketiga komponen tersebut tergolong dalam kelompok senyawa terpenoid. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). Berdasarkan analisis LC-MS sampel fraksi 9 dengan berat molekul 352. Struktur senyawa tersebut disajikan pada Gambar 16. . terdapat empat struktur senyawa yang terbagi atas tiga komponen.60 4. sesquiterpenoic acid glyceride. Analisi LC/MS yang dilakukan secara electrospray ionisation.

hormon. yang dapat dikelompokkan menjadi monoterpen (C10). Labdane merupakan diterpen bisiklik alami yang membentuk inti struktural untuk berbagai macam produk alami yang dikenal sebagai labdanes atau diterpenes labdane. podolakton inhibitor pertumbuhan tanaman. dan glyceryl ether. di antaranya adalah sebagai antifeedant. Terpenoid yang disebut juga isoprenoid. odheri menghasilkan senyawa 2. triterpen (C30). antifeedant serangga. inhibitor tumor. (2003) yang melaporkan bahwa hasil isolasi dari pulmonate Trimusculus peruvianus menghasilkan empat senyawa labdane diterpens melalui jalur oksidasi. Senyawa ini mempunyai bioaktivitas yang cukup luas yaitu sebagai hormon pertumbuhan tanaman. . seskuiterpen (C15). dan politerpen (≥ 40) (Sirait 2007). tetraterpen (40). (1980) juga melaporkan bahwa nudibranch jenis A. Kedua komponen tersebut memiliki aktivitas sebagai antibiotik dan antifeedant. Beberapa publikasi tentang ketiga komponen seperti yang dilaporkan oleh Gustafson et al. monocyclofarnesic acid glyceride. Berdasarkan pengelompokan dari senyawa terpenoid tersebut.3-dihydroxypropilfarnesate dan memiliki dua turunan monoasetoksi. Seskuiterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit isoprena yang terdiri dari kerangka asiklik dan bisiklik dengan kerangka dasar naftalen. komponen 1 farnesic acid glyceride dan komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride termasuk di dalam kelompok senyawa seskuiterpenoid. Diterpenoid merupakan senyawa yang mempunyai 20 atom karbon dan dibangun oleh 4 unit isoprena. antibiotik dan toksin serta regulator pertumbuhan tanaman dan pemanis. terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. Secara umum senyawa seskuiterpenoid ini mempunyai bioaktifitas yang cukup besar. antimikroba. Senyawa-senyawa seskuiterpenoid tersebut diturunkan dari cis farnesil pirofosfat dan trans farnesil pirofosfat melalui reaksi siklisasi dan reaksi sekunder lainnya. diterpen (C20).61 Terpenoid adalah senyawa alam yang terbentuk dengan proses biosintetis. Pendapat ini juga didukung oleh Marero et al. Senyawasenyawa tersebut memiliki aktivitas sitotoksik yang menghambat sel kanker usus besar pada manusia. (1983) bahwa di dalam ekstrak nudibranch Archidoris montereyensis mengandung senyawa-senyawa diterpenoic acid glyceride. Andersen et al. drimane sesquiterpenoic acid glyceride.

62 senyawa pemanis. Berdasarkan hasil analisis LC-MS. trisiklik. . Tata nama yang digunakan lebih banyak adalah nama trivial (Sirait 2007). Senyawa diterpenoid dapat berbentuk asiklik. hal ini diduga bahwa senyawa flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak tambelo termasuk dalam kelompok senyawa volatil sehingga ada kemungkinan bahwa senyawa flavonoid yang berperan sebagai senyawa antioksidan di dalam ekstrak tambelo adalah kelompok senyawa volatil. antifouling. dan tetrasiklik. dan anti karsinogen. senyawa flavonoid. tidak terdeteksi. bisiklik.

sesquiterpenoic acid glyceride dan labdane diterpenoid. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC 50 sebesar 15 ppm. flavonoid. lemak 0.27%. triterpenoid dan saponin. protein 7. Fraksi 9 menyerupai salah satu dari empat struktur senyawa yang dikelompokkan ke dalam tiga komponen.07%. protein 42.63%.2 Saran Perlu dilakukan pemurnian lagi dengan menggunakan kromatografi kolom dan untuk memperoleh satu struktur senyawa aktif digunakan nuclear magnetik resonance (NMR). dan karbohidrat 7.45%.72%.77%.72%. . dan karbohidrat 30. steroid. Fraksi 9 dari ekstrak etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan sebesar 8.71%.27ppm).28%. abu 2. yaitu farnesic acid glyceride. metanol) mengandung senyawa alkaloid. Komposisi kimia tambelo kering adalah kadar air 6.21%.1 Simpulan Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kimia tambelo segar terdiri dari air 82. Pada ke tiga ekstrak (n-heksana. abu 5. lemak 14. Rendemen tertinggi terdapat pada ekstrak metanol yaitu 5. Daging tambelo mengandung 17 jenis asam amino dan 15 jenis asam lemak.63 5 SIMPULAN DAN SARAN 5.88%. 5.87 ppm yang setara dengan vitamin super ester C (8. etil asetat.

1980. Palawan. 1 video kaset: 2:50 menit. J. Palawan’s Kinilaw na Tamilok. Virginia. .wisegeek. Official Methods of Analysis (18 Edn). [kaset audio]. 2005. berwarna. Official Methods of Analysis (18 Edn). hlm. Sum FW.5. 21:797-800.com [08 Maret 2011]. Ed ke-9. bersuara. Tetrahedron Lett. Christchurch: Marine Chemistry Group. 14-104. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Prinsip dasar ilmu Gizi. Jakarta: PT. Blunt DA. 2011.DAFTAR PUSTAKA Achadi EL. 1984. produsen. Gizi Indonesia. 1994. Farnesic acid glycerides from the nudibranch Archidoris odhneri. Version # vpcl 13. Andersen RJ. Official Methods of Analysis of Association of official Analytical Chemical. ____________. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. http://journeyingjames. 17:97-104. Awat DS. Department of Chemistry-University of Caterbury. 50-279. 2006. Mayland. USA. 2005.com/2011/01/palawans-kinilaw-na-tamilok/. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. MarinLit-Marine Literature Database. Journeyingjames. 2009. Bioactive marine natural Product. Rajagrafindo Persada. Hlm. Association of Official Analytical Chemist Inc. Dilengkapi: 4 gambar foto berwarna 10 x 12 inci. USA :American Association of Cereal Chemist. hlm. American Association of Cereal Chemist [AACC]. 20-319 Almatsier S. 2010. Approved Methods of The American Association of Cereal Chemist. Amino acid: What is Valine. Associaton of Official Analytic Chemist Inc. ____________. Bonderud D. 302-308 Blunt JW. Vol 1. Gizi dan kesehatan Masyarakat. [02 Sept 2011]. 2008. 2002. _________. Association of Official Analytical Chemist Inc. Mayland. New Delhi: Anamaya Publisher. USA. Betia J. Ed. 2005. 2011. Bhakuni DS. Association of Official Analytical Chemist [AOAC]. hlm. http://www. Almatsier S. Pelayanan gizi rumah sakit dan perkembangan ilmu serta teknologi.

com [06 Maret 2011]. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. 1995. Material Medika Indonesia. Pengantar gizi kesehatan. Hamilton RJ. 1991. 27-36. Iheringia. Seasonal abundance of the shipworm Neoteredo reynei (Bivalvia.co/tipsoz_solution/diet_utrition/nutrition/article. newsletter@trulyhuge. 98:17-23. Edrada RA. Industrial alkaline protease from shipworm bacterium. Report of a joint FAO/WHO xpert consultation. Balbin-Oliveros M. Chem. Proksch P. www. Human Vitamin and Mineral Requirement. Zool. Metode Pengujian Kimia Produk Perikanan. Paten 5 512 749.254. Penemu: The United States of America as represented by the Secretary of Agriculture. 21: 251. Porto Alegre. Gritter JR. Institut Pertanian Bogor. Effect of threonine deficiency on changes in enzyme activity and liver fat deposition with time. 17 Mei 1994. Nat. Filho CS. 2008. Coppen PP. FAO/WHO. penerjemah.65 Carroli C. Roma: Food and Nutrition Division. Bandung: ITB press. Arata D. Amino acid protein suplemen. Selenium untuk kekebalan tubuh. Editor. New York: Science Publishers. 2000. 2001. Edrada RA. 2006. 67-90. Nature 3-12. 2006. Arthur. Protocols: methods for isolation. Bangkok. E Schwarting. Diktat. US Paten. Thailand. Bobbitt JM.Nutrition 1:502-506. . Dietary Amino Acids Benefits. Handayani D. 2002. Griffin et al. Pengantar Kromatografi. Cat B. Schupp P. Structure activity relationship of bioactive metabolites from some Indo-Pasific marine invertebrates.. Prod. Di dalam: Allen JC. Conectique. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. [DSN]. Wray V. http://www/conectique. J. purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrataes. hlm. Reduce-it weight management program Diet and Nutrition (2011). 1991.php?article_id=3160. 2008. Teredinidae) in mangrove driftwood from a northern Brazilian beach. Tagliaro CH. SNI 01-2362-1991. Beasley CR. Dewan Standarisasi Nasional. Rancidity in Foods. Dena CC. [29 Sept 2011]. The use of antioxidants. hlm. Padmawinata K. Sér. 1983. Ebada SS. Ed ke-2. Lin W. Bogor: Fakultas Pertanian. Effendi YH. Penentuan Logam Berat. Proksch P.

Reddy SV. Hardinsyah. G. Chem. Ed. Publ. Jakarta: UI Press. Scheuer PJ. Rao RJ. penerjemah. Deaton BJ. 2006. Hamilton RJ. Letsoin J. Hamilton RJ. Papua. Kagawa H. Driskel JA. The chemistry of ranciditry in food. 2005. Kumar US. New York: Applied Science Publisher. Okuda. Isolasi dan karakteristik senyawa antibakteri epidioksi sterol dari spon laut Petroia Nigrans.id/file/arsip [12 April 2009]. Bandung: ITB. Sekarini R. editor. Mun’im A. Asal Sumatera Barat. 2:127-133. Suhardjo. Heath. siput dan kerang oleh penduduk di kawasan Muara Mimika. Tiwari AK. penerjemah. 1988. 2008.66 Gustafson K. Kahalalides : bioactive peptides from marine mollusk Elysia rufescens and its algal diet Bryopsis sp. Rancidity in Food.ac. Hanani E. 1987. Pangan Gizi dan Pertanian. Dachriyanus. http://lemlit. Sayuti N. Terjemahan dari Phytochemical method. Handayani D. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. Harbone JB. Majalah Ilmu Kefarmasian. Chemical studies of British Colombia Nudibranchs. 2003. Lampung. * Khopkar SM. 17-18 November 2008. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. . Soediro S. hlm 1-20. Free radical scavanging and xanthine oksidase inhibitory constituens from Stereospermum personatun. Terjemahan dari: Food Nutrition and Agriculture. Two new flavonoids and other constituents in licorice roots: their relative astringency and radical scavenging effect. Dunbar DC. Jakarta: UI-Press. Konsep Dasar Kimia Analitik. Hatano TH. Gizi dan Pangan 1:1-12. 1986. Jakarta: Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. 1986. 61: 6594. Yasuhara TT. Reineccius. Bull. Tetrahedron. Pharm.unila. 36:3090-2097. 2006. Apama P. 1983. Padmawinata K. Metode Fitokimia. J. Jenis dan jumlah konsumsi tambelo. Org. dari Kepulauan Seribu. New York: Van Nostrand Reinhold Comp. Penuntun Cara Modern Menaganalisis Tumbuhan. HB. Andersen RJ 1985. 30-69. Ke-2. hlm. 41:1101-1108. J. Chem. 1988. Harper LJ. J. Rao JM. Otto CS. Ketaren S. 1996. Di dalam: Allen JC. Lemak dan Minyak Pangan. Flavor Chemistry and Technology. Ali AZ. Sumule A. J Nat Prod 68:1611-1621. Hamman MT.

Jayapura: Fakultas Keguruan dan ilmu Pendidikan. J. Bandung: CV. The biology of wood-boring teredinid mollusca. PapuaWeb. New York: Academic Press Inc. 1989. 14-55 hlm. hlm. Miyaoka H. Biokimia nutrisi dan metabolisme dengan pemakaian secara klinis. [12 April 2009] Muchtadi D. Asam Lemak Omega 9 dan Manfaatnya bagi Kesehatan. penerjemah. Morrero D et al. Evaluasi Nilai Gizi Pangan. Jakarta: UI Press. 59:48-55 Muchtadi D.com/doc/isolation-seminternationalUGM/2558795 [ 02 Maret 2011]. hlm. Tetrahedron. Muller K. Persepsi Masyarakat Suku Kamoro terhadap tambelo Bactronophorus thoracites di Kabupaten Mimika [skripsi]. hlm 45-67. http://www. Parakkasi A. 2003. 2006. 335-344. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Yamada Y. Sci. 1998. Alfabeta. Nair NB. Linder MC.20-56. 2007. Parakkasi A. Linder MC. Cetakan I. Alfabet. Pengantar Ilmu Gizi. penerjemah. Biokimia nutrisi dan metabolisme. . Labdane diterpenoid with a new oxidation pattern from the marine pulmonate Trimusculus peruvianus. Gizi Anti Penuaan Dini. Munifah I. http://www. Muchtadi D. Bogor: IPB Press.org/gb/foto/muller/ecology/09/index. Di dalam: Russell FS. Bandung: CV. Editor. 1971. Galeri-Galery. Krisnawang H. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. 2009. Vol ke-9. Songklanakarin J.scribd. 2000. Acanthrlla sp.intiboga. Antimalarial activity of kalihinol a and realtive diterpenoids from the okinawan sponge. Ekologi Kamoro-Bab IX. 2004.htm. Tetrahedron 13467-13474 Molyneux P. Universitas Cenderawasih Jayapura. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Technol 2004.papuaweb.com/omega9b. http://www. editor. 2004. Shimomura M. Advance in marne biology. Isolation and antioxidative assay of several marine macroalgae components within ethyl-acetate fraction. Saraswathy M. Jakarta: UI Press. 1992. Muchtadi TRM. Linder CM.67 Linder MC. 2009. Kimura H. editor.html [16 Juli 2009]. 26:211-219. Mayabubun 2003. Yonge M.

Edisi revisi. Pratt DE. Bandung: ITB. 120(1):7-13. hlm. 123-280. 191-246 hlm .68 Nelson JK. Institut Teknologi Bandung 26-27 Juni 1997. Buletin TeknologiHasil Perikanan. Salamah E. Purchon RD. Sirait M. Pergamon Press. Moxness KE. Antioksidan Alami Asal Tumbuhan. Food Antioxidant. Edisi ke-6. Suparni. hlm. 1992. 2005. Hungary. Lee CY. Natural antioxidant from plant material. 1997. 1997. 67-78 Nurjanah. Cermin Dunia Kedokteran.Supamas.chem-is-try. Tempe mampu menghambat proses ketuaan. Kustiariyah. 1995. Kosasih Padmawinata. Purwaningsih S. hlm. Ayuningrat E. Hudson BJF. Ed ke-7. 2008. Antioxidant Recent Development. Robinson T. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah (Anadara granosa) yang diambil dari Kabupaten Boalemo. Di dalam: Hudson BJF. Mayor clinic diet manual : A Handbook of Nutrition Practices. 8(2):12-25. Dasar-dasar biokimia. Gorontalo. Poedjiadi A. editor. The Biology of The Mollusca. Unit Corn Mill.supamas. 2011. Setyowati. 230-429. [7 Mei 2011] Sidik. 2007. Di dalam: Huang MT. Makalah dalam Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. Philadelphia : Mosby. 11:119-132. Ho CT. London and New York: Elsevier Applied Science. Gastineau CF. 1990. Imran Z.com [07 Maret 2011]. www.org. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. 1994. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. hlm. 2006. Bandung: ITB. 87-121. Hudson BJF. Di dalam: Food Antioxidant. 1979. Washington DC: American Society. Penapisan awal komponen bioaktif dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea) sebagai senyawa antioksidan. Park Ridge. Penuntun fitokimia dalam farmasi. Supriyanti FMT. Jensen MD. Terjemahan dari: The organic constiuteuns of higher plants. USA. 8-389 hlm Pratt DE. 2009. Jakarta: UI Press. Phenolic Compound in Food and Their Effect on Health. 1968. Natural antioxidant not exploited comercially. London: Elsevier Applied Science. Buletin THP. Schuler P. Ranney MW. Asam amino non esensial. 1990. Natural antioxidant exploited commercially. Ridwan E. penerjemah. Noyes Data Co. editor. editor.

69 Sitompul S. Jakarta: Erlangga. Genetics and Molecular Biology Online Ahead of Print. Science. Physiological traits of the symbiotic bacterium Teredinibacter turnerae isolated from the mangrove shipworm Neoteredo reynei. Winarno FG. 3-14 __________. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.145-167. Kimia Pangan dan Gizi. Turner RD. hlm. Asam amino non esensial. 2007. 12-34. 1992.id/bssub/PDF%20FILES/BSS_ 205_I. 2009. hlm. Calloway CB. . Bogor: Program Pascasarjana. hlm.pdf.com [ 8 Juni 2011] radikal bebas. Bogor: M-Brio Press. Supamas. Kimia Pangan dan Gizi.beritaiptek. 2011. A cellulolytic nitrogen fixing bacterium cultured from the gland of deshayes in shipworms. Sociedade Brasileira de Genética. Suratmo. Printed in Brazil. 2008. Yparraguirre LA. Buletin Teknik Pertanian.brawijaya.14-55. 57-158. Machado-Ferreira E. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. 92-128 Kimia Pangan. Biol. Senra MVX. hlm. http://fisika. Biokimia.1997. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 1984. Mol. 1989. Leoncini O and Amaro CSAG. Yogyakarta: Liberty. 2007. 2009. Trindade-Silva E. Komposisi kimia dan aktivitas inhibitor topoimerase I dari kerang mas ngur (Attactodea striata). hlm. __________. Vizzon VF. Suhardi. Poernomo D. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Produk Fermentasi Ikan Dari Cacing Kapal Bactronophorus sp. [Tesis]. 1:12-14. Ibrahim B. Jurnal Sumberdaya Perairan. __________. 1970. [3 februari 2011] Syaputra D. Kimia Pangan dan Gizi. Genet. Mengenal dan menangkal http://www. Analisis asam amino dalam tepung ikan dan bungkil kedelai. 221:1401-1403. Waterbury JB. Suharsono. Potensi ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) sebagai antioksidan. Suariasari R. 1983.ac. hlm. 9(1): 33-37. Institut Pertanian Bogor.com [07 Maret 2011]. Segar.supamas. 2006. Waranmaselembun C. 2004. Sudarmadji S. Haryono B.

Yogyakarta . 1995. J. Winarsi H. hlm. 86-105. Efek Minuman Fungsional yang Disuplementasi Isoflavon Kedelai dan Zn terhadap Profil Lipiddan Produk MDA Plasma Wanita Premenopause. 43:27-32 . Yen GC. of Agricultural and Food Chemistry. Dalam: Peran Biokimia dan Biologi Molekuler dalam Eksplorasi dan Pemanfaatan Sumberdaya Hayati Berkelanjutan. Jakarta: Kanisius. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Prosiding Seminar Nasional PBBMI. Chen HY. 2004. 2007. Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity.70 Winarsi H.

71 .

72 LAMPIRAN .

73 .

63 0.62 28.72 0.80 2.37 1.989 Rata-rata 0.22 1.25 1.29 0.77 14.27 7.63 41.45 II 6.62 b.293 1.72 Standar deviasi 0.007 0.63 42.99 0.74 Lampiran 1.01 0.841 3.387 0.761 2.719 0.41 0.349 1.02 0.403 0.62 44.85 3.88 8.839 1.236 1.662 1. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.07 7.055 0.854 2.01 2.243 1.41 Standar deviasi 0.01 1.011 0.518 0.11 6.596 0.81 1.008 0.006 0.663 3.43 0.360 1.55 1.337 0.011 0.055 0.009 0.26 1. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.004 0.71 7.820 1.290 .74 1.04 0.56 0.285 1.399 21.251 1.035 0.19 0.15 Rata-rata 82.35 14.651 1.112 0.15 32.88 30.018 0.26 1.45 Rata-rata 6.72 6.402 22.287 0.72 7.31 2.821 1.21 0.016 1.019 0.45 Standar deviasi 0.42 5.27 5.005 1.179 1.423 0.729 0.34 1.04 2.432 1.163 0.83 Lampiran 2.015 22.618 0.20 14.28 II 82.195 1.31 0.28 2.19 1. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.795 1.023 0.418 0. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.28 0.008 0.

75 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

76 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a. Kromatografi asam amino ulangan I .

Kromatografi asam amino ulangan II .77 b.

78 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

79 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

80 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH .

8.81 Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20. vitamin super ester .6.60.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.40.80 ppm) Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.6.40.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.40.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.60.8.40.60.

0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana .87 R² = 0.27 100.0 20.0 10. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.18.44 63.19 IC50 (ppm) 3.54 R² = 0.0 0.82 C dan ekstrak kasar tambelo a.0 50.51 27.0 30.16 10 ppm 94.78 81.0 90.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) b.0 40.02 51.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.0 80.993 % Inhibisi 60.0 y = 6.287x .0 70.35 8.608x + 27.56 15.

9.94 2.401 0.224x .143 R² = 0.434 0.449 290.407 0.462 0.55 3.201x – 8.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.01 12.490 R² = 0.18 -5.449 0.423 0.9.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.376 0.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .09 -0.93 y=0.96 -6.454 0.63 7.421 0.regresi linear y=0.405 2 3 % inhibisi 0 -3.46 5.412 0.490 265.419 0.224x – 9.08 4.255x – 9.58 262.25 Pers.94 2.83 Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.255x .79 6.531 y=0.77 29.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.

8.205 0.64x + 37.660x + 40.055 84.119 0.56 Pers.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.00 4.51 46.65 87.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.432 0.40 90.225 0.51 R² = 0.55 72.17 15.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.53 85.062 0.53 67.201x .231 0.142 0.04 15.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .72 47.92 71.73 19.211 2 0.51 10.084 % inhibisi 52.066 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.123 0.089 0.041 0.604x + 43.75 1 y=0.27 y=0.604x + 43.45 79.449 R² = 0.13 80.

04 R² = 0.64x + 37.38 y=0.89 27.337 0.73 R² = 0.40 53.203 0.68 29.223 % inhib Pers.49 21.47 9.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.656x – 7.829 y=0.39 .12 19.78 48.305 0.689x – 6.371 0.392 0.86 53.347 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.660x + 40.312 0.432 0.986 88.303 0.34 y=0.372 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.777 82.30 13.30 84.391 0.01 9.018 81.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.01 3.99 29.641x + 2.201 0.

641x .7.656x .986 R² = 0.905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.018 R² = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .777 R² = 0.689x .946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.6.2.

09 82.30 88. n-Heksana : Etil asetat 3.58 290.17 15. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .39 Ratarata 788.93 265.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1. Kloroform : Metanol 5.75 19. n-Heksana : Etil asetat 2.01 252. Kloroform : Metanol 4.03 Standart devisiasi 29.3 45. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.34 81.79 10.87 e.53 4.21 3.

0152 0.51 63.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.85 Rata-rata 103.0028 0.72 85.92 10.82 25.94 5.50 61.13 III 101.88 b.97 8.29 2.47 80.68 5.69 .82 77.46 63. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.80 43.95 75.32 40.5 26.03492 0.21 3.14 83.63 2.00710 0.36 70.35 Standart deviasi 4.62 83. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.77 24.41 91.37 Ulangan II 100.04 74.00732 0.87 86.00156 0.03 64.90 4.46 76.00506 0.86 73.61 7.00482 0.78 58.27 62.85 44.03 33.49 174.83 62.76 60.07 57.15748 0.37 73.43 2.56 54.74 65.06 1.97 129.40 4.

00 70.78 y=0.246 0.102 0.086 0.82 57.88 65.59 64.18 80.41 73.23 7.187 0.71 88.155 0. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.112 0.108 0.13 27.028 0.90 4.47 56 68 79.127 0.082 0.76 82.87 y=0.94 79.073 0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.03 8.148 0.71 42.37 y=0.82 y=0.82 61.651x + 33.164 0.136 0.17 33.689x + 27.12 74.41 y=0.65 76.85 y=0.536x + 46.89 b.255 0.149 0.77 Pers.53 76.193 0.078 0.497x + 45.277 0.099 0.23 24.62x + 43.41 40.76 93.049 0.179 0.086 0.425 0.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .00 81.65 34.12 63.17 25.29 10.079 % Inhibisi 0 54.59 81.647x + 34.64 8.

LAMPIRAN .

74 .

009 0.80 2.008 0.662 1.63 42.663 3.43 0.35 14.37 1.42 5.31 2.243 1.008 0.04 0.596 0.518 0.55 1.11 6.28 II 82.399 21.01 1.27 5.22 1.72 Standar deviasi 0.01 0.841 3.821 1.839 1.77 14.02 0.99 0.41 Standar deviasi 0.19 0.820 1.71 7. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.287 0. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.01 2.055 0.418 0.62 28.04 2.15 Rata-rata 82.34 1.112 0.63 0.56 0.179 1.45 II 6.618 0.290 .19 1. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.989 Rata-rata 0.81 1.29 0.402 22.15 32.719 0.055 0.360 1.88 8.011 0.019 0.26 1.72 6.74 1.75 Lampiran 1.285 1.432 1.015 22.007 0.236 1.006 0.403 0.41 0.005 1.45 Rata-rata 6.85 3.63 41.21 0.387 0.004 0.62 b.651 1.729 0.195 1.349 1.337 0.795 1.018 0.72 0.26 1.28 0.31 0.854 2.023 0.251 1.016 1.20 14.035 0.83 Lampiran 2.72 7.45 Standar deviasi 0.88 30.07 7.28 2.011 0.423 0.761 2.62 44.27 7.163 0.25 1. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.293 1.

76 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

Kromatografi asam amino ulangan I .77 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a.

Kromatografi asam amino ulangan II .78 b.

79 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

80 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

8.60.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.40.81 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.6.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.60.40.40.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.8.80 ppm) .60.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.40.6.

0 40.19 IC50 (ppm) 3.0 80.82 Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.44 63.608x + 27.0 90.54 R² = 0.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.993 % Inhibisi 60.56 15.0 30.02 51.87 R² = 0. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.35 8.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.27 100.18.78 81.0 50.16 10 ppm 94.287x .0 y = 6.0 70.0 20.51 27.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) .0 10.0 0. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo a.

224x – 9.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.376 0.93 2 y=0.01 12.412 0.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.9.94 2.224x .46 5.255x . Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.143 R² = 0.9.255x – 9.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.434 0.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .regresi linear y=0.490 R² = 0.423 0.83 b.407 0.454 0.18 -5.63 7.401 0.08 4.449 290.25 Pers.462 0.55 3.58 262.94 2.449 0.79 6.419 0.531 3 y=0.421 0.77 29.405 % inhibisi 0 -3.09 -0.490 265.96 -6.201x – 8.

45 79.142 0.56 Pers.201x .119 0.40 90.51 10.53 67.64x + 37. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .75 1 y=0.73 19.604x + 43.231 0.449 R² = 0.089 0.51 R² = 0.123 0.53 85.055 84.225 0.92 71.51 46.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.17 15.04 15.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.72 47.604x + 43.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.65 87.13 80.432 0.55 72.211 2 0.00 4.066 0.041 0.660x + 40.8.062 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.27 y=0.084 % inhibisi 52.205 0.

878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.986 88.303 0.829 y=0.34 y=0.656x – 7.49 21.01 3.391 0.39 .30 13.312 0.01 9.203 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.78 48.347 0.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.432 0.04 R² = 0.777 82.392 0.305 0.12 19.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.68 29.64x + 37.86 53. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.73 R² = 0.40 53.371 0.337 0.89 27.641x + 2.201 0.38 y=0.99 29.47 9.660x + 40.30 84.372 0.689x – 6.223 % inhib Pers.018 81.

946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.656x .986 R² = 0.641x .930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .018 R² = 0.689x .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.7.2.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.777 R² = 0.6.

N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 . n-Heksana : Etil asetat 3.03 Standart devisiasi 29. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.17 15.75 19.01 252.53 4.30 88. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.09 82.87 e.79 10.93 265.39 Ratarata 788.21 3.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a. Kloroform : Metanol 4. Kloroform : Metanol 5. n-Heksana : Etil asetat 2.58 290.3 45.34 81.

00506 0.00732 0.74 65.78 58.00710 0.92 10.27 62.85 44.47 80.03492 0.41 91.85 Rata-rata 103.94 5.50 61.15748 0.68 5.0152 0.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.00156 0.97 129.46 76.49 174.36 70.80 43.03 33.76 60.87 86.77 24.97 8.07 57.86 73.88 b.56 54.37 Ulangan II 100. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.83 62.82 25.0028 0.29 2.13 III 101.61 7.72 85.63 2.06 1.21 3.04 74.5 26.37 73.03 64.00482 0.82 77.90 4.14 83.35 Standart deviasi 4.51 63.62 83.32 40.40 4.43 2. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.95 75.69 .46 63.

078 0.108 0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.41 y=0.255 0.62x + 43.099 0.246 0.59 81.89 b.85 y=0.71 88.00 70.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .086 0.112 0.136 0.193 0.82 57.71 42.03 8.00 81.53 76.76 93.647x + 34.148 0.102 0.17 33.155 0.23 7.497x + 45.127 0.64 8. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.82 61.425 0.651x + 33.76 82.082 0.13 27.65 34.87 y=0.12 63.41 40.41 73.073 0.90 4.47 56 68 79.65 76.187 0.82 y=0.23 24.049 0.88 65.17 25.37 y=0.78 y=0.18 80.164 0.536x + 46.086 0.29 10.277 0.59 64.689x + 27.12 74.94 79.149 0.079 % Inhibisi 0 54.77 Pers.028 0.179 0.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful