KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites

)

JULIANA LEIWAKABESSY

Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Teknologi Hasil Perairan

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Dra. Purwantiningsih S,MS

Judul Tesis Nama NRP

: Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites) : Juliana Leiwakabessy : C351070051

Disetujui, Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Linawati Hardjito, M.Sc Ketua

Dr. Ir. Sri Purwaningsih, M.Si Anggota

Diketahui,

Ketua Program Studi Teknologi Hasil Perairan

Dekan Sekolah Pascasarjana

Dr. Tati Nurhayati, S.Pi, MSi NIP: 19700807 1996 032002

Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc. Agr NIP: 19650814 1990 021001

Tanggal Ujian: 28 September 2011

Tanggal Lulus:

KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites)

JULIANA LEIWAKABESSY

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul “ Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo

(Bactronophorus thoracitesi)” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini

Bogor, September 2011

Juliana Leiwakabessy NRP C351070051

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Ambon pada tanggal 24 November 1969 dari ayah Melkias Leiwakabessy dan Ibu Maria Tapilatu. Penulis merupakan putri keenam dari tujuh bersaudara. Tahun 1989 penulis lulus dari SMU Negeri 2 Ambon dan pada tahun 1997 penulis lulus dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Jurusan Pengolahan Hasil Perikanan Universitas Pattimura. Pada tahun 2007, penulis melanjutkan pendidikan sekolah Pascasarjana (S2) di Teknologi Hasil Perairan IPB dengan sponsor BPPS. Penulis bekerja sebagai staf dosen di Jurusan Perikanan, Fakultas Peternakan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Papua sejak tahun 2003 hingga sekarang.

2. Pengutipan tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB. penyusunan laporan. a. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan. penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah. Dilarang mengumumkan atau memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB.@ Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor Tahun 2011 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang 1. penelitian. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulisan ini tanpa mencantumkan atau menyebut sumber. . penulisan karya ilmiah. b.

..............DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL ..................2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995).........3......................1 Waktu dan Tempat Penelitian .............. 6 2....... 13 2....3............................................................................. 11 2.... 22 3..........5 Antioksidan dan Pengukurannya ............................3.......... 1.............................3............................. 21 3......3..................................................................2 Kandungan proksimat tambelo ...1 Asam amino ........2 Asam lemak ......................... 1 1 2 3 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA .......................................................... 47 viii ................................................................... 39 4...................................................................................................................................................................1 Tambelo ........1...............3 Prosedur Penelitian ...3 Komposisi Kimia .........2 Penelitian tahap kedua ........3....5 Analisis mineral .........1 Penelitian Tahap Pertama .........4 Fraksinasi senyawa antioksidan ............................................................................3................... 27 3.............................................3 Tujuan Penelitian ....... 16 2.... 23 3....... 7 2................. 22 3.......................2 Bahan dan Alat .... 22 3..2 Perumusan Masalah ......4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) ..3.........1....2.............5 Kerangka Pemikiran ............................ 39 4.......... 38 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ................3.................................. 26 3...................................1 Rendemen (Hustiany 2005) .. 1.................2....................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ........ 21 3...................................................3 Mineral ..............................................................................1 Ekstraksi bahan aktif . xii DAFTAR GAMBAR ............3...................................................................................... 1988) ...................3.2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat .............................................................................................4 Komponen Bioakif dari Moluska ......... 5 2........3 Kandungan asam amino tambelo ............1 Penelitian tahap pertama ...........................................3.............1 Rendemen daging tambelo ............................ 1.............. 1...................................3.... 30 3.......................................2.....2.......5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al......................... 34 3............... 35 3....................3...........3... 42 4...........................................3.................2.....1 Latar Belakang ....... 9 2.................................................................................1..........................................................................................................................................................1......................2 Uji proksimat (AOAC 2005) ......... 39 4...................3.. 17 3 METODOLOGI PENELITIAN ........3......................................................... 32 3.......4 Manfaat Penelitian .............................................3.....3 Analisis asam amino (AOAC 1994) ..........................4 Kandungan asam lemak tambelo ................................................ 5 2....................................................3... 23 3.................................................................... 32 3.....3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995)...................................... 39 4.......................................................... 1.................. xiv 1 PENDAHULUAN .................................................. 35 3.................................................

........4............................................6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo ............2............................................................. 52 4............ 58 4........2............................. 54 4................2 Penelitian Tahap Kedua ..........7 Identifikasi senyawa fraksi terpilih ......... 52 4...........................................2...5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ................ 71 ix ........................2....................................................... 64 LAMPIRAN ...................... 49 4....... 56 4......................2................................................................................................................................................................ 57 4........... 52 4.............. 60 5 SIMPULAN DAN SARAN .............................................................2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo ............................5 Kandungan mineral tambelo ...............1....4 Fraksi ekstrak terpilih ...... 63 DAFTAR PUSTAKA ..................3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ......................1 Rendemen ekstrak tambelo ......2..2.............

..................... 39 3 Kandungan proksimat daging tambelo ....................................................................... 50 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo .............................................................................................. 47 6 Komposisi asam lemak ekstrak kasar tambelo ................................................................ 43 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo ......................... 55 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ....................................... 52 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo .........DAFTAR TABEL Halaman 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh ....................... 48 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo ........................................................................... 61 x ............................. 39 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia tambelo ................ 11 2 Rendemen daging tambelo ................................................

.. BHT.............DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Kerangka pemikiran ......... 7 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990) ........................... 3 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) ....................................................................................................... 57 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-fraksi tambelo ............... 28 8 Diagram alir ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al.................................... 33 9 Diagram alir fraksinasi dengan menggunakan KLT ................................. 55 13 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) .. 21 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC ................... 36 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom .. 18 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007) .......................................... 42 12 Nilai IC50 dari ekstrak....... 6 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo metah (Muller 2004) ................................................. dan vitamin super ester C ...............................................65 xi ....... 2008) .............................................. 20 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan identifikasi senyawa antioksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites) ...... 37 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo ....... 59 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH ....................................................................... 63 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan mass 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid ........

............................................................ 88 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo ..........................DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering ..... 82 9 Profil pola pemisahan senyawa ................................................................................................................................... 77 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC ........................................................................... 87 10 Rendamen fraksi tambelo ................................ 75 3 Kromatogram standar asam amino pada HPLC ... 76 4 Kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC ....................................... 80 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH dari ekstrak tambelo ....... 88 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS ................................................................................................................. 75 2 Nilai rata-rata asam amino tambelo ................................. 81 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT............................. 89 xii ............................................... vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo ........................................................................ 78 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC ...

It contained calcium of 3532. and to identify the compound of active antioxidant obtained from selected fractionated extract.31%. protein 7. Supervised by LINAWATI HARDJITO and SRI PURWANINGSIH Tambelo (Teredinidae) is consumed freshly by local people in Papua without removing the digestive tracts.72±0. The maceration result was evaporated and partitioned with a solvent of n-hexane and ethyl acetate.21±0. fat 14.06 ppm.45±2. protein 42.04%.77±2. ash 5. Finally. The highest antioxidant activity obtained by column fractionation was the 9th fraction with IC50 of 8. Chemical Composition and Identification of Antioxidant Compounds from the Extracts of Tambelo (Bactronophorus thoracites).83%. The composition of dried tambelo was moisture 6. It had seven saturated fatty acids and eight unsaturated fatty acids. The highest antioxidant activity was found in the crude extract of ethyl acetate with IC50 of 15 ppm.28±0.07±0. and 80 ppm) with DPPH method applying BHT and vitamin super ester C as the standard with a concentration of 4. flavonoid.63±0.87 ppm.ABSTRACT JULIANA LEIWAKABESSY.88±1. sesquiterpenoic acid glyceride and labdane diterpenoid. The first stage involved the analyses of proximate. The research consisted of two stages. fatty acid. carbohydrate (by difference) 30. The protein of tambelo contained nine essential amino acids and eight non essensial amino acids. Phytochemical test.01%. 60. the identification of fresh antioxidant compound was carried out using LC-MS. and carbohydrate (by difference) 7. the extract underwent phytochemical and antioxidant tests (20.27%. The composition of fresh tambelo divided into moisture 82. amino acid and mineral. fat 0. described the crude extract of tambelo contained a group of alkaloid. 8 and 10 ppm. Next.04%. shipworm. Keywords: Activity antioxidants. This study aimed to investigate the chemical composition of fresh tambelo.01%. 40. chemical. ash 2. steroid and triterpenoid.72±0. 9th fraction was similar to farnesic acid glyceride. 6.62%. compound . The second stage was the extraction of active materials by means of maceration. to conduct antioxidant and phytochemistry tests.01%.22%. Teredinidae. MarinLit database (Blunt and Blunt 2008).46 ppm and phosfor of 2363.27±0.

80%. pentadekanoat (C15:0) 0. Tambelo segar (Bactronophorus thoraites) yang berasal dari perairan Andai. dan besi 1373.29%. arginin 1. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan komposisi kimia tambelo segar.87 ppm.56%.01%.66%.28±0.04%. abu 2. stearat (C18:0) 3. palmitoleat (C16:1) 14. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 sebesar 15 ppm. Tahap pertama adalah analisis rendemen. Kandungan mineral pada tambelo yaitu kalsium 3532. glisin 1. dan identifikasi senyawa antioksidan menggunakan LC-MS. Aktivitas antioksidan yang tertinggi hasil fraksinasi kolom terdapat pada fraksi 9 dengan IC50 sebesar 8. dan sistein 0. Penelitian ini terdiri dari dua tahap.62%. alanin 1. Mereka percaya bahwa isi pencernaan tambelo berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit diantaranya. dan karbohidrat 30. Tambelo mengandung 9 asam amino esensial dan 8 asam amino non esensial.83%. flu. yaitu asam aspartat 2. heptadekanoat (C17:0) 0.72%.22%. mendapatkan antioksidan dan fitokimia.74%. isoleusin 0.10%.01%. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya.06 ppm.31% lemak 0.29% dari berat minyak.24%.RINGKASAN JULIANA LEIWAKABESSY. dan 8 asam lemak tidak jenuh yang terdiri dari miristoleat (C14:1) 0. valin 1. protein 42. dan karbohidrat (by difference) 7. pengujian aktivitas antioksidan. metionin 0. steroid dan triterpenoid (n-heksana. fosfor 2363.42 ppm.63±0. kalium 626. dan mineral dalam tambelo.21±0. .25%.33%.37%. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif tambelo dengan cara maserasi. Dibimbing oleh LINAWATI HARDJITO dan SRI PURWANINGSIH.22%.41%. etil asetat.72±0.80% dari berat protein. histidin 1. Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites). serin 1. arakidat (C20:0) 0. Tambelo memiliki 7 asam lemak jenuh (saturated fatty acid/SAFA) yang terdiri atas miristat (C14:0) 5. Asam amino non esensial pada tambelo. leusin 1.19%.27±0. Kabupaten Manokwari memiliki kadar air 82.69%. dan diterpenoid labdan. Rendemen ekstrak kasar tambelo kering yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5. fenilalanin 1.63%.07±0. Cis-10Heptadekanoat (C17:1) 0.85%.fraksi 9 menyerupai senyawa asam gliserida farnesik.72±0. asam glutamat 3.34%. flavonoid. Asam amino esensial yang terdapat pada tambelo. prolin 0. meningkatkan air susu ibu.13%.04%.81%.4 ppm. protein 7. analisis fitokimia.26%. nafsu makan dan vitalitas pria. heneikosanoat acid (C21:0) 0.01%. asam amino. tirosin 0.55%.80%. sakit pinggang. dan metanol). asam lemak.77±2. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). palmitat (C16:0) 13.88±1.45±2.72%. asam gliserida sesquiterpenoid. rematik.45 ppm. dan arakidonat (20:4ω6) 0. uji proksimat. serta mengidentifikasi senyawa aktif antioksidan hasil fraksinasi ekstrak terpilih. EPA (C20:4ω3) 0. abu 5. yaitu treonin 0.27%.46 ppm.01%. lisin 1. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak kasar tambelo mengandung senyawa alkaloid. Di Papua masyarakat mengkonsumsi tambelo dalam keadaan mentah tanpa harus dibuang isi pencernaannya terlebih dahulu. Tambelo kering memiliki kadar air 6. malaria.55%.04%. natrium 435. lemak 14.41% dari berat protein.

dan moluska. kelas Myoida. 2008). dimana di dalamnya terdapat berbagai jenis organisme laut. Tambelo (Teredinidae) merupakan salah satu jenis hewan penggerek kayu yang hidup di dalam batang kayu bakau yang sudah lapuk dan membusuk yang dikelompokkan ke dalam filum bivalvia. teripang. malaria. tapi juga sebagai sumber bahan alami yang berpotensi sebagai bahan baku obat (Handayani et al. Di Papua. Di Philipina masyarakat menyebutnya tamilok (Betia 2011). nafsu makan. Salah satu moluska yang telah dimanfaatkan selain sebagai bahan pangan juga digunakan sebagai obat alami adalah tambelo. seperti di Brasil Utara ”turu” (Teredinidae) sangat populer digunakan dalam pengobatan penyakit menular (Trindade-Silva et al. 2009). Hal ini menjadikan perairan Indonesia memiliki potensi kekayaan alam laut yang besar dengan tingkat keragaman hayati yang tinggi. Berdasarkan literatur. masyarakat menyebutnya tambelo ”koo” (Hardinsyah et al.1 Latar Belakang Indonesia sebagai negara kepulauan memiliki garis pantai lebih kurang 81000 km dan wilayah laut yang sangat luas. cacing laut. Di Papua. tambelo dikonsumsi oleh sebagian masyarakat Bangka yang disebut temilok brubus (Syaputra et al. suku Kamoro Kabupaten Mimika berpendapat bahwa tambelo berkhasiat menyembuhkan penyakit. Organisme laut yang sudah dimanfaatkan sebagai bahan obat alami diantaranya spons. 2006). 2000). batuk. rematik. serta meningkatkan air susu ibu. Tambelo dipercaya dapat menyembuhkan penyakit. ordo Teredinidae. 2007). Senyawa kimia dengan bioaktivitas ini diduga dapat dimanfaatkan manusia sebagai bahan obat alami. Pemanfaatan organisme laut ini tidak hanya terbatas sebagai bahan makanan. antara lain: sakit pinggang. Beberapa organisme laut mampu memproduksi senyawa kimia tersebut untuk mempertahankan dirinya dari serangan predator. rumput laut. . flu. Hasil penelitian menunjukkan banyak dari senyawa kimia tersebut berpotensi menghambat pertumbuhan bakteri dan aktif menghambat pertumbuhan sel kanker serta bioaktivitas lainnya (Edrada et al.1 PENDAHULUAN 1. 2006). dan vitalitas pria (Hardinsyah et al.

(1994) melaporkan bahwa enzim protease yang diisolasi dari bakteri yang terdapat dalam kelenjar dari tambelo Psiloteredo healdi (Teredinidae) bersifat sebagai deterjen pembersih lantai. Tambelo adalah salah satu obat tradisional yang telah lama digunakan oleh masyarakat Papua. piring maupun lensa kaca. acara peminangan dan lain – lain. kanker (Muchtadi 2000).2 Perumusan Masalah Tambelo (Bactronophorus thoracites) termasuk di dalam famili Teredinidae dan kelas bivalvia. Kenyataan bahwa tambelo mampu memberikan efek menyehatkan bila dikonsumsi. sehingga perlu dilakukan penelitian senyawa antioksidan dari bahan tambelo (Bactronophorus thoracites). 2006). jantung koroner. Stenotrophomonas maltophilia. tambelo disajikan sebagai makanan pembuka baik dalam keadaan mentah maupun dimasak/digoreng. namun komposisi kimia dan senyawa antioksidan dari tambelo belum banyak diketahui. Pada saat pesta adat dilaksanakan. Kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas di antaranya penuaan dini. memberikan dugaan bahwa di dalam tubuh tambelo terdapat suatu komponen yang bersifat antioksidan. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. karena merupakan suatu kebiasaan yang sudah turun temurun dilakukan sejak nenek moyang mereka (Hardinsyah et al. Bacillus cereus dan Staphylococcus sciuri). proses mengantar mas kawin. 1. Antioksidan adalah suatu zat yang dapat menangkal pengaruh radikal bebas yang bila masuk ke dalam tubuh dapat menyebabkan kerusakan. (2009) menunjukkan bahwa bakteri yang diisolasi dari insang tambelo Neo teredo reynei (Teredinidae) dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif (Sphingomonas.2 Masyarakat Kamoro menggunakan tambelo diberbagai acara pesta adat misalnya acara pesta perkawinan. . Griffin et al. Informasi mengenai aktivitas antioksidan pada tambelo sampai saat ini belum ada. Informasi yang dapat diperoleh dari penelitian terdahulu seperti Trindade-Silva et al.

. perumusan masalah dan tujuan penelitian maka kerangka pemikiran yang disajikan pada Gambar 1. 1. analisis asam lemak -. batuk.5 Kerangka Pemikiran Berdasarkan latar belakang. 1. 2006 Penelitian yg dilakukan oleh Juliana Gambar 1 Kerangka pemikiran. nafsu makan. Obat tradisional Analisis kimia : -. serta mengidentifikasi fraksi aktif senyawa antioksidan. mendapatkan aktivitas antioksidan dan fitokimia ekstrak tambelo.3 Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk memperoleh komposisi kimia tambelo segar dan kering. analisis asam amino -. Tambelo (Bactronophorus thoracites) Pesta Adat Dikonsumsi oleh masyarakat Papua dimasak Direbus Makan mentah Sakit pinggang/rematik. flu malaria. analisis mineral Ekstraksi tambelo Uji fitokimia Uji aktivitas antioksidan Fraksinasi ekstrak terpilih Uji antioksidan hasil fraksinasi - Identifikasi senyawa dengan LC-MS Penelitian yg dilakukan oleh Hardinsyah et al.4 Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kandungan kimia dan bahan aktif yang dikandung dalam tubuh tambelo sebagai senyawa antioksidan sehingga dapat dimanfaatkan dalam bidang pangan fungsional atau nutraceutical.3 1. analisis proksimat -. meningkatkan air susu ibu . dan vitalis pria.

4 .

Ciri-ciri fisik tambelo adalah tubuhnya lunak. perkembangan tubuhnya akan terbatas. Tambelo berkembang normal di air dengan salinitas antara 10-30 ppm dan lebih banyak dijumpai di daerah tropis (Muslich et al. 2008). Bentuk morfologi tambelo disajikan pada Gambar 2. 1988).5 cm. Kepadatan tambelo tertinggi pada bulan Januari sampai April dan kepadatannya rendah pada bulan Juli (Filho et al. Terbentuknya lapisan yang mengandung kapur dihasilkan dari mantel shipworm (Ginuk 1987).2 TINJAUAN PUSTAKA 2. Apabila populasinya terlalu tinggi. memanjang seperti cacing. Keberadaan dan sifat tambelo sangat dipengaruhi oleh tipe habitat. Lubang pada kayu biasanya dibuat tegak lurus terhadap serat kayu.5 cm (Muslich et al. 1983). Tambelo dapat bertahan hidup antara satu hingga beberapa tahun. Dinding lubang pada kayu tersebut dilapisi dengan suatu subtansi yang mengandung kapur. 1988).1 Tambelo Tambelo atau shipworm adalah hewan jenis moluska yang hidup di dalam pohon bakau yang telah membusuk. Tambelo mampu menggali lubang sepanjang 18 cm hingga 2 m (Waterbury et al. sehingga panjangnya akan beberapa sentimeter saja dan diameternya kurang lebih dari 0. kepalanya berbentuk bulan sabit yang dilengkapi dengan parut dan kikir yang berguna untuk membuat lubang. Panjang tubuh tambelo berkisar antara 30 hingga 100 cm dengan diameter antara 1 sampai 1. tergantung pada jenisnya. Klasifikasi tambelo (Turner 1971) adalah sebagai berikut : Filum : Mollusca kelas Ordo Family Genus Spesies : Bivalvia : Myoida : Teredinidae : Bactronophorus : Bactronophorus thoracites . kemudian membelok sejajar dengan arah serat kayu.

Pallet yang terletak pada bagian tubuh depan yang digunakan untuk memarut kayu. Pada masyarakat Kamoro. Cara masyarakat Papua mengkonsumsikan tambelo yaitu setelah tambelo diambil dari pohon bakau yang sudah membusuk. tidak dikonsumsi oleh masyarakat suku Kamoro. malaria. Tambelo yang tumbuh di mangrove Sonneratia sp dan Bruguiera sp. sebab rasanya pahit dan tidak enak untuk dimakan. dan kejantanan bagi kaum lelaki. seperti disajikan pada Gambar 3. ada 4 spesies mangrove yang digunakan sebagai habitat dari tambelo yaitu 2 spesies dari genus Rhizophora. Masyarakat Papua percaya bahwa sisa pencernaan dalam perut tambelo sangat berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit di antaranya sakit pinggang.6 Gambar 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) Hewan ini memanfaatkan serbuk kayu makanan. batuk. tambelo dijadikan sebagai makanan utama di berbagai acara pesta adat seperti pesta budaya Karapao Suku Kamoro. . rematik flu. Menurut Mayabubun (2003). nafsu makan. meningkatkan air susu ibu. 1 spesies genus Sonneratia dan 1 spesies termasuk dalam genus Bruguiera. Identifikasi tambelo didasarkan kepada bentuk cangkangnya yang berwarna putih (panjang ± 1 cm) digunakan untuk menutup mulut terowongan. Bagian pertama adalah usus besar yang berfungsi untuk menampung serbuk kayu. 1983). 2.2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat Tambelo yang dimakan mentah dipercaya oleh masyarakat Papua lebih berkhasiat daripada direbus atau digoreng. Perut tambelo terdiri dari dua bagian usus. cangkang dan giginya dilepas dan langsung dimakan tanpa dibersihkan isi pencernaannya terlebih dahulu. Bagian kedua adalah kelenjar pencernaan yang difungsikan untuk mencerna partikel-partikel kayu (Waterbury et al.

7 Gambar 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo mentah (Sumber: Muller 2004) 2. serta infeksi berulang yang pernah dialami tubuh (Effendi 2002).H. berperan sebagai enzim. atau gabungan keduanya dapat mengakibatkan kegagalan pertumbuhan ringan sampai sindrom klinis berat yang spesifik. tetapi juga oleh keadaan lingkungan.O. defisiensi energi protein (marasmus). dan air (Harper et al. yaitu protein. Keadaan tersebut tidak hanya dipengaruhi oleh asupan makanan. penunjang mekanis. dan N. karbohidrat. Fungsi protein bagi tubuh adalah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada. mineral. . 1989). lemak. alat pengangkut dan alat penyimpanan. Kekurangan protein pada anak saat lahir (kwashiorkor). dan pengendalian pertumbuhan (Winarno 1992). Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsurunsur C. Protein berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. 1988). bila organisme sedang kekurangan energi. pertahanan tubuh atau imunisasi. media perambatan impuls syaraf. sanitasi dan higiene. Protein akan dipakai sebagai sumber energi. pengatur pergerakan.3 Komposisi Kimia Zat gizi dibagi menjadi 5 kelas utama. seperti pemukiman. Kandungan energi protein rata-rata 4 kkal/g atau setara dengan kandungan energi karbohidrat (Sudarmadji et al. Protein memiliki peranan penting dalam pembentukkan biomolekul daripada sebagai sumber energi.

arabinosa. Kondisi ini biasanya ditemukan pada pasien Konsumsi sumber protein selain daging. xylosa. dan beguna untuk membantu metabolisme lemak dan protein (Winarno 2008). Serat pangan dapat diklasifikasikan berdasarkan struktur molekul dan kelarutannya. Karbohidrat merupakan sumber kalori utama bagi hampir seluruh penduduk dunia. dan akan sampai di usus besar (kolon) dalam keadaan utuh sehigga akan menjadi subtrat untuk fermentasi bakteri yang hidup di kolon. Sayuran dan produk susu mengandung metionin. galakturonat. pati yang resisten (resisten starch/RS). dan karbohidrat rantai pendek (short chain carbohydrates/SC). serta 4-o-metil-glukoronat (Muir 1999). Karbohidrat merupakan sumber kalori yang murah. sangat dianjurkan. terhidrolisis. rhamnosa. Gula yang membentuk serat pangan adalah glukosa. pemecahan protein tubuh yang berlebihan. Monomer dari serat pangan adalah gula netral dan gula asam. Serat pangan yang larut sangat mudah difermentasikan dan mempengaruhi metabolisme karbohidrat serta lipida. Dalam tubuh. glukoronat. seperti sayuran dan produk susu. 1994). koma hepatik. Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan makanan. Kebanyakan jenis karbohidrat yang sampai ke kolon tanpa meliputi polisakarida yang bukan pati (non-starch polysacharides/NSP).8 Pembatasan konsumsi protein pada penderita hati dilakukan apabila pasien mengalami intoleransi protein. . tekstur. sedangkan serat pangan yang tidak larut akan memperbesar volume feses dan akan mengurangi waktu transitnya (bersifat laksatif lemah). selain itu beberapa golongan karbohidrat menghasilkan serat (dietary fiber) yang berguna bagi pencernaan. dan gula asam seperti mannurinat. kehilangan mineral. galaktosa. karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosisi. misalnya rasa. khususnya bagi penduduk negara yang sedang berkembang. Serat pangan atau dietary fiber adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis (dicerna) oleh enzim pencernaan manusia. dan asam amino aromatik (AAA) yang lebih rendah serta asam amino rantai cabang (BCAA) yang lebih tinggi dibandingkan dengan daging (Nelson et al. warna. mannose.

leusin. Perubahan-perubahan kimia atau penguraian lemak dan minyak dapat mempengaruhi bau dan rasa suatu bahan makanan. dan dibagi dalam dua kelompok. dan K serta merupakan sumber asam-asam lemak tak jenuh yang esensial. Komponen mineral dalam suatu bahan sangat bervariasi baik macam dan jumlahnya (Sudarmadji et al. 2. Asam amino esensial lebih mudah diserap dari asam amino non esensial. tetapi terdapat dua hal yang sama. Kerusakan lemak dan minyak menurunkan nilai gizi serta menyebabkan penyimpanan rasa dan bau yang bersangkutan. unsur organik akan menghilang dan bahan anorganik (abu) yang tersisa terdiri dari unsur-unsur mineral (Harper et al. Asam amino glutamat dan aspartat paling lambat terserap (Linder 2006). Asam amino tersebut akan diabsorpsi melalui dinding usus. 1989). baik yang menguntungkan maupun tidak. 1988). Susunan kimia asam amino bervariasi. isoleusin) dan metionin lebih mudah diserap dari asam amino esensial lainnya. Mineral digolongkan sebagai zat gizi anorganik atau disebut sebagai abu dalam pangan karena ternyata jika bahan pangan dibakar. yaitu linoleat dan linolenat (Sudarmadji et al. Kadar abu ada hubungannya dengan mineral suatu bahan. kemudian dilanjutkan sampai ke dalam pembuluh darah. 1989). terbentuk dari asam amino yang terikat bersama. Protein yang masuk dalam tubuh akan diubah menjadi asam amino. Kandungan abu dan komponennya tergantung pada macam bahan dan cara pengabuannya. Asam amino esensial tidak dapat diproduksi dalam tubuh sehingga sering harus ditambahkan . yaitu setiap asam mempunyai sedikitnya satu kelompok amino dan satu kelompok karboksil (Sudarmadji et al.3.D. Tingkat penyerapan relatif masing-masing asam amino adalah asam amino rantai cabang (valin.9 Minyak atau lemak berfungsi sebagai sumber energi dan pelarut vitamin A. Pada umumnya penguraian lemak dan minyak menghasilkan zat-zat yang tidak dapat dimakan. 1989). Abu adalah zat anorganik sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. Asam amino merupakan komponen utama penyusunan protein. yaitu asam amino esensial dan nonesensial.E. Proses absorpsi asam diamino lebih lambat dari pada asam amino netral (Poedjadi dan Supriyanti 2006).1 Asam amino Protein merupakan molekul yang sangat besar.

Glutamin dan asparagin merupakan simpanan asam amino dalam tubuh. namun tidak larut dalam pelarut organik nonpolar (Sitompul 2004). leusin. Asam amino esensial merupakan pembangun protein tubuh yang harus berasal dari makanan atau tidak dapat dibentuk di dalam tubuh. metionin. di dalam tubuh. lisin. yaitu menyediakan bahanbahan yang sangat berperan dalam proses pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan tubuh.10 dalam bentuk makanan. sedangkan asam amino nonesensial dapat diproduksi dalam tubuh. Selain fungsi tersebut hampir semua asam amino memiliki fungsi khusus. isoleusin. Asam amino esensial yang dibutuhkan oleh tubuh manusia ialah histidin. treonin. Kebutuhan metionin dapat disubtitusi dengan tirosin atau gabungan sistin dan fenilalanin (Linder 2006). arginin. Protein bekerja sebagai pengatur semua proses yang berlangsung di dalam tubuh dan sebagai sumber energi jika karbohidrat dan lemak tidak dapat mencukupi keperluan tubuh. asam amino atau protein berfungsi sebagai zat pembangun. fenilalanin. Kebutuhan asam amino esensial bagi anak-anak relatif besar daripada orang dewasa (Poedjiadi dan Supriyanti 2006). Metionin dan serin merupakan prekursor sintesis dan histidin yang diperlukan untuk sintesis histamin . valin. Asam amino merupakan unit pembangun protein. Kelengkapan komposisi asam amino esensial merupakan parameter penting penciri kualitas protein (Astawan 2007). Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh disajikan pada Tabel 1. Asam amino umumnya berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air. triptofan. Arginin terlibat dalam sintesis ureum dalam hati. contohnya tirosin merupakan prekursor yang membentuk pigmen kulit dan rambut.

poliamin. histidin merupakan asam amino esesnsial bagi anak-anak. ornitin. melanin dan tiroksin Berperan pada sintesis profirin dari hemoglobin dan juga merupakan konstituen asam glikolat Bagi manusia. neurotransmiter α-aminobutirat (GABA). ornitin. Asam lemak tidak terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan. Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ujung hidrokarbon nonpolar yang panjang. prekursor glikogenik dan pirimidin Sebagai produk antara dalam reaksi interkonversi asam amino.11 Tabel 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh Jenis asam amino Triptofan Peranan Sebagai pemula vitamin niasin. arginin. Fenilalanin Glisin Histidin Aspartat Glutamat Glisin Lisin Metionin Triptofan Tirosin Sumber: Poedjiadi dan Supriyanti (2006).3. dan serotoninmetionin donor gugus metil untuk sintesis beberapa senyawa seperti kolin dan kreatin Sebagai pemula tirosin dan keduanya membentuk tiroksin dan epinefrin. arginin. tetapi terdapat dalam bentuk terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipid berbeda. Asam lemak adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai 4-24atom. sehingga hampir semua lipid bersifat tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak. melanin dan tiroksin. yang dapat dibebaskan dari ikatan tersebut melalui hidrolisis kimia atau enzimatik. prekusor prolin. . sitrulin yang ikut berperan dalam sinstesis urea dalam hati serta berfungsi sebagai prekursor tirosin katekolamin. sumber NH3 Sebagai prekusor biosintesis purin dan neurotransmiteri Berfungsi untuk crosslinking protein (seperti dalam kolagen dan elastin) biosintesis karnitin merupakan donor grup metil untuk banyak proses sintetik Sebagai prekusor serotonin dan nikotinamid (vitamin B) Sebagai prekusor tirosin katekolamin. Berfungsi untuk biosintesis urea. 2.2 Asam lemak Asam lemak merupakan komponen unit pembangunan yang sifatnya khas untuk setiap lipid.

Penelitian yang dilakukan Mensink (1987) menyatakan bahwa MUFA dapat menurunkan LDL. Lemak yang tersusun oleh asam lemak tidak jenuh akan bersifat cair pada suhu kamar. dan rantai sangat panjang (20 atom karbon atau lebih). Asam lemak yang mengandung satu atau lebih ikatan rangkap di mana sebetulnya dapat diikat tambahan atom hidrogen dinamakan asam lemak tidak jenuh. dan canola. Titik cair asam lemak meningkat dengan bertambah panjangnya rantai karbon. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. Asam lemak yang terdiri dari rantai karbon yang mengikat semua hidrogen yang dapat diikatnya dinamakan asam lemak jenuh. sedangkan asam lemak tidak jenuh ganda mengandung dua atau lebih ikatan rangkap (polyunsaturated fatty acid=PUFA). Semua lemak bahan makanan hewani dan sebagian besar minyak nabati mengandung asam lemak rantai panjang. Sementara itu.12 Asam lemak dibedakan menurut jumlah karbon yang dikandungnya. minyak kacang tanah. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. asam lemak tak jenuh (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi populer. minyak biji kapas. Secara umum. sedangkan yang tersusun oleh lemak jenuh berbentuk padat (Almatsier 2009). rantai sedang (8 hingga 12 karbon). Salah satu jenis MUFA adalah omega-9 (oleat) yang memilki sifat lebih stabil dan lebih perannya dibandingkan PUFA. . lemak tak jenuh tunggal memiliki efek yang mengutungkan terhadap kolesterol dalam darah.dan meningkatkan K-HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. yaitu asam lemak rantai pendek (6 atom karbon atau kurang). minyak kedelai. Polysaturated fatty acid (PUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein (LDL) dan juga menurunkan high density lipoprotein (HDL). MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. asam lemak rantai sangat panjang terdapat dalam minyak ikan. Asam lemak tidak jenuh tunggal mengandung satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya (monounsaturates fatty acid=MUFA). Asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) tergolong dalam asam lemak rantai panjang. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. rantai panjang (14-18 karbon).

Sumber alami PUFA yang penting bagi kesehatan adalah kacang-kacangan dan biji-bijian. Turunan asam lemak arakidonat dari asam linoleat. Asam lemak ini banyak ditemukan pada ikan dan bahan nabati. rangsangan sistem saraf. fungsi kekebalan. dan dokosaheksaenoat (DHA) dari asam linolenat. dan linolenat) antara lain berperan dalam transpor dan metabolisme lemak. kontraksi otot serta penyembuhan luka (Achadi 2010). yaitu prostaglandin. 2. jagung. Senyawa-senyawa ini mengatur tekanan darah. tetapi ketersediaan mineral harus tercukupi setiap harinya. linoleat. . tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA) yang banyak ditemukan pada minyak nabati atau sayur dan minyak ikan. denyut jantung. prostasiklin. Mineral yang terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup banyak. Selain peranannya dalam pencegahan penyakit jantung koroner dan artritis.13 Polyunsaturated fatty acid (PUFA) adalah asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan rangkap. yaitu makromineral dan mikromineral. sedikitnya 0. Asam lemak esensial merupakan prekursor sekelompok senyawa eikosanoid yang mirip hormon. magnesium. Makromineral terdiri dari kalsium. dan biji matahari. Contoh PUFA adalah asam linoleat (omega-6). Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron serta menurunkan produksi trigliserida dan poliprotein β (beta) di dalam hati. dan leukotien. mempertahankan fungsi dan integritas membran sel. Asam lemak esensial adalah asam lemak yang dibutuhkan oleh tubuh untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan.3.3 Mineral Mineral termasuk ke dalam golongan nutrisi mikro dalam tubuh yang diperlukan dalam jumlah kecil. asam lemak omega-3 penting untuk berfungsinya otak dan retina dengan baik. seperti bunga matahari. Kelompok asam lemak yang termasuk dalam jenis ini adalah asam alfa linoleat (omega-6) dan asam alfa linolenat (omega-3).05% dari bobot tubuh dikenal sebagai makromineral. sedangkan tubuh tidak dapat mensintesisnya. eikosapentaenoat (EPA). fosfor. klorin. Berdasarkan jumlahnya dalam tubuh manusia dibedakan menjadi dua. bahkan tetap cair pada suhu dingin karena titik lelehnya lebih rendah dibandingkan dengan MUFA. tromboksan. Manfaat PUFA (asam lemak arakhidonat. fungsi imun. dan omega-3. bersifat cair pada suhu kamar.

Kalsium berfungsi untuk mengatur transpor ion-ion menembus membran seluler dan diperlukan untuk aktivitas aktomiosin dan miosin ATP-ase. natrium. lipase. Secara umum fungsi mineral bagi tubuh adalah sebagai berikut: 1) mempertahankan keseimbangan asam – basa dalam tubuh. besi. 4) memelihara keseimbangan air dalam tubuh. serta mengaktifkan reaksi enzim dan sekresi hormon termasuk insulin oleh pankreas. 5) transmisi impuls saraf. dan suksinildehidrogenase. b) Kalium (K) Hampir seluruh kegiatan di dalam tubuh dipengaruhi oleh perubahan kosentrasi kalium di dalam plasma. Kalium adalah basa utama yang terdapat di dalam jaringan dan sel-sel darah yang memegang peranan penting dalam pengaturan keseimbangan asam basa tubuh. 1988. 3) komponen senyawa tubuh yang esensial adalah hormon. pertumbuhan jaringan tubuh. enzim. Kalsium juga berperan dalam pembentukan tulang dan gigi. Kalsium diperlukan untuk memelihara otot dan syaraf dalam tubuh agar berfungsi normal dan membantu penyerapan vitamin B12 (Harper et al. kalium. dan magnesium berperan dalam transmisi impuls-impuls serta kontraksi dan relaksasi otot (Muchtadi 1989). mangan. dan belerang. a) Kalsium (Ca) Kalsium diperlukan untuk pembentukan dan perkembangan tulang dan gigi. Mineral yang diketahui dibutuhkan oleh tubuh dan terdapat dalam jumlah yang lebih sedikit dari 0. dan 7). flourin. Kalsium merupakan salah satu faktor yang terpenting dalam pembekuan darah. asam lambung. iodin. 6) mengatur kontraktilitas otot. Kalsium bersama dengan natrium. yang terdiri dari kobalt.05% dari bobot tubuh disebut sebagai mikromineral. hemoglobin.14 kalium. Winarno 1992). tembaga. dan seng (Harper et al. Sebanyak 98% kalium dalam tubuh berada di dalam intraseluler. 1988. Gaman dan Sherrington 1992). 2) sebagai katalis untuk reaksi biologis. kolinesterase. Sekitar 270 mg kalium berada di dalam sel yang . Kalium juga berperan dalam penyampaian impuls-impuls saraf ke serat-serat otot dan juga dalam kemampuan otot untuk berkontraksi (Fregly 1988).

Bila sel-sel darah merah melepaskan besi. c) Fosfor (P) Fosfor dan kalsium secara bersama-sama adalah penyusun tulang dan gigi yang sangat penting. f) Tembaga (Cu) Fungsi tembaga dalam tubuh antara lain mencegah terjadinya anemia. tetapi digunakan lagi untuk membuat sel-sel darah merah yang baru. dan untuk proses pelepasan energi. Gaman dan Sherrington 1992). Fosfor juga terdapat dalam semua sel hidup dan diperlukan untuk pelepasan energi. e) Seng (Zn) Seng memegang peranan esensial dalam banyak fungsi tubuh. serta melepaskan Fe simpanan dari ferritin dan hati. Beberapa besi juga disimpan di dalam tubuh seperti dalam sumsum tulang. hati. d) Besi (Fe) Sebagian besar besi terdapat dalam hemoglobin (pigmen darah merah yang terdapat dalam sel darah merah).15 merupakan cairan kation yang mendominasi di dalam intrseluler (Groff dan Gropper 1990). terutama eritrosit diduga berperan dalam memusnahkan anion superoksida yang merusak. Diperlukan untuk sintesis fosfolipida untuk pembentukan myelin yang menyelimuti serat syaraf. berperan dalam pengembangan fungsi reproduksi laki-laki dan pembentukkan sperma serta berperan dalam fungsi kekebalan. Bersama vitamin C dapat mempertahankan aktivitas enzim-enzim yang tersangkut dalam sintesis elastin (protein dinding . Enzim superoksida dismutase di dalam sitosol semua sel. dengan cara membantu penyerapan Fe. menstimulir sintesis fraksi heme atau globin. di dalam sumsum tulang. besi tidak hilang dari tubuh. Sebagai bagian dari enzim-enzim pernafasan misalnya sitokrom oksidase. sebagai bagian dari enzim atau sebagai kofaktor pada kegiatan lebih dari dua ratus enzim. Seng juga 1988. dan limpa sebagai senyawa kompleks dengan protein yang dikenal sebagai feritin (Harper et al. Fosfor terdapat dalam kebanyakan makanan dan defisiensi fosfor dalam susunan makanan belum pernah terjadi (Gaman dan Sherrington 1992). yaitu dalam fungsi sel T dan dalam pembentukan antibodi oleh sel B (Almatsier 2009).

seperti kanker. dan penuaan dini. namun perempuan dewasa yang sedang hamil dianjurkan meningkatkan asupan selenium menjadi 60 µg per berat badan setiap hari. 2. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh invertebrata laut dan mikroorganisme simbion. Konsumsi garam Cu dalam jumlah sepuluh kali lebih besar daripada yang terdapat dalam bahan pangan secara normal. selenium bekerja sama dengan vitamin E sebagai zat antioksidan untuk memperlambat oksidasi asam lemak tak jenuh. Hasil penelitian belakangan ini yang memastikan bahwa selenium dapat mencegah kanker (termasuk kanker kulit akibat paparan matahari). Tubuh setiap orang memiliki kemampuan untuk melawan radikal bebas yang bisa menghancurkan sel dan menimbulkan berbagai penyakit kronis. yaitu 70 µg per berat badan setiap hari. Selenium diketahui memperbaiki sistem imunitas (kekebalan tubuh) dan fungsi kelenjar tiroid. yaitu kondisi sel yang rusak sebelum waktunya. Bersama vitamin E. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh.4 Komponen Bioaktif dari Moluska Invertebrata laut merupakan produsen senyawa bioaktif terbesar di antara biota lainnya. Orang dewasa dianjurkan untuk mengkonsumsi sebanyak 55 µg per berat badan selenium setiap hari. selenium berfungsi mempertahankan elastisitas jaringan dan bila kadar selenium berkurang maka tubuh akan mengalami penuaan dini. Kebutuhan tersebut akan meningkat saat seorang ibu harus menyusui. sebagai bagian dari enzim tirosinase yang mengkatalisis konversi tirosin menjadi melanin. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Sumber utama selenium adalah tumbuh-tumbuhan dan makanan laut (Conectique 2011).16 aorta) dan kolagen. g) Selenium (Se) Selenium adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas. Di dalam tubuh. Tembaga bersifat toksik bila terdapat sebagai ion bebas. dapat menyebabkan pusing dan muntah (Muchtadi 2009). menambah pamornya sebagai mineral yang bermanfaat besar untuk meningkatkan fungsi kekebalan tubuh manusia. penyakit jantung. mempunyai prospek sebagai zat aktif dalam obat .

Penelitian mengenai metabolit sekunder dari moluska telah banyak dilakukan. yaitu : a) inisiasi. (1996) melaporkan telah mengisolasi kahalaide F dari kerang jenis Elysia rubefescens yang memiliki aktivitas sebagai antikanker usus dan prostat. Pertama adalah antioksidan yang mempunyai gugus fenol dan amina aromatik . Hasil penelitian Salamah et al. dan antikanker. ion logam. Hamman et al. Ranney (1979) mengklasifikasikan antioksidan atas tiga golongan berdasarkan prinsip kerjanya dalam mencegah terjadinya proses oksidasi. misalnya oksigen. seperti infeksi. Proses oksidasi tersebut biasanya terjadi dalam produk terutama yang berlemak dengan kandungan asam lemak tidak jenuh sehingga dapat menyebabkan kerusakan produk atau ketengikan. neurologi (parkinson. selanjutnya tahap terakhir adalah tahap terminasi ditandai dengan terbentuknya produk-produk non radikal seperti aldehida. Radikal peroksida yang terbentuk akan mengikat ion hidrogen dari molekul lemak yang lain membentuk hidroperoksida (ROOH) dan radikal lemak lain (R1). Tahap propagasi terjadi akibat reaksi antara radikal bebas (R●) yang terbentuk pada tahap inisiasi dengan oksigen menghasilkan radikal peroksida (ROO●). Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak kijing Taiwan adalah kelompok alkaloid dan flavonoid. (2008) diketahui bahwa ekstrak metanol kijing Taiwan yang berpotensi sebagai antioksidan. b) propagasi dan c) terminasi. Mekanisme oksidasi asam lemak tidak jenuh menurut Hamilton (1983) dan Gordon (1990) terdiri dari 3 tahap. memperlambat atau mencegah terjadinya proses oksidasi. dan cahaya. penyakit jantung. yaitu nilai IC50 sebesar 201. 2. Moluska merupakan salah satu dari invertebrata laut yang diketahui menghasilkan metabolit sekunder dan sekaligus mempunyai peranan penting dalam ekologinya sehingga menjadi target bagi sumber senyawa bioaktif yang bermanfaat dalam dunia farmasi bahari. immunologi.52 ppm. anti-inflammatory. alzheimer’s). Pada tahap inisiasi terjadi pembentukan radikal bebas (R●) akibat reaksi antara asam lemak (RH) dengan beberapa katalisator. antivirus.17 untuk pengobatan penyakit. keton. alkohol dan asam-asam dengan karakteristik dan cita rasa tengik (Winarno 1984).5 Antioksidan dan Metode Pengukurannya Senyawa antioksidan secara umum didefinisikan oleh Schuler (1990) sebagai suatu senyawa kimia yang dapat menunda. panas.

Beberapa antioksidan sintetik yang sering digunakan dalam industri pangan antara lain butylated hydroxytoluene (BHT). butylated hydroxyanisole (BHA). metilen bisfenol dan difenilamin.18 seperti butylated hydroxyanisole (BHA). tertiarybutyl hydroquinon (TBHQ) dan tokoferol (Buck 1991). tetapi penggunaan antioksidan sintetik banyak menimbulkan kekuatiran akan efek sampingnya karena telah banyak . Contoh antioksidan ini adalah dilauril tiodipropionat (DLTP). Penggolongan ini terdiri atas dua yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami. Jika radikal antioksidan yang dihasilkan cukup stabil mencegah reaksi berikutnya. Kedua produk yang dihasilkan pada kenyataannya mungkin bereaksi dengan radikal bebas kedua dalam sistem Mekanisme reaksi oksidasi lemak dapat dilihat sebagai berikut : Tahap inisiasi : ROOH ROOH 2ROOH Tahap propagasi : R● + O2 ROO● + R1 H Tahap terminasi : ROO● + R1 OO● R● + RO● ROO● RO● RO● + H● + OH + OH ROO● R1● + ROOH ROOH1 + O2 ROR1 Gambar 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990). Molekul ini mengandung atom sulfur teroksidasi yang mampu bereaksi dengan molekul hidroperoksida berikutnya. Ketiga adalah antioksidan yang dapat menginaktivasi logam yang bisa mempercepat terjadinya oksidasi. butylated hydroxytoluene (BHT). maka radikal antioksidan tersebut tidak akan berperan sebagai inisiator dari berikutnya. Jenis penggolongan antioksidan yang lain berdasarkan sumber diperolehnya senyawa tersebut. Antioksidan sintetik sangat efektif dalam menghambat reaksi oksidasi lemak akan. Propil galat. tetapi tanpa melibatkan radikal bebas. Kedua adalah antioksidan yang berfungsi dengan cara menghilangkan molekul-molekul hidroperoksida dari sistem. Antioksidan-antioksidan tersebut bekerja dengan cara berinteraksi dengan radikal bebas yang terdapat di dalam sistem dan membentuk produk subtrat non radikal dan suatu radikal antioksidan. Penggolongan ketiga ini sama dengan antioksidan sekunder menurut Winarno (1984) dan Gordon (1990).

Jika senyawa ini masuk dalam tubuh manusia dan tidak terkendalikan dapat menyebabkan kerusakan fungsi sel. Ketaren 1986). kumarin. turunan senyawa hidroksinat. b) tidak menimbulkan flavor yang tidak enak. Radial bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil pada suhu kamar dan larut dalam pelarut seperti metanol atau etanol (Molyneux 2004. rasa dan warna pada lemak atau bahan pangan. Antioksidan alami dalam bahan pangan diperoleh dari: a) antioksidan berupa senyawa endogen yang terdiri dari satu atau lebih senyawa yang terdapat dalam bahan pangan.01-0. Suratmo 2009). yang memiliki rumus molekul C18H12N5O6 dan Mr=394.33 (Molyneux 2004. reaksi ini akan memberikan peningkatan kompleks non radikal dan menurunkan radikal DPPH yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning.19 penelitian tentang efek patologis yang ditimbulkannya.1% dan e) tidak mahal serta selalu tersedia (Coppen 1983. tokoferol (Sidik 1997). c) antioksidan yang merupakan senyawa eksogen yaitu dengan penambahan antioksidan yang diisolasi dari sumber alami (Pratt 1992). Adapun antioksidan yang terdapat di dalam bahan alami meliputi golongan senyawa turunan fenolat. Ada beberapa metode pengukuran aktivitas antioksidan yang dapat digunakan salah satunya adalah metode 1. Pada uji ini metanol digunakan sebagai pelarut. b) antioksidan yang terbentuk akibat reaksi selama pengolahan. Vattem dan Shetty 2006).1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). Ketika sebuah antioksidan mampu mendonorkan hidrogen yang beraksi dengan radikal DPPH. c) larut sempurna dalam lemak dan minyak. dan inkubasi pada suhu kamar dimaksudkan untuk mengoptimumkan aktivitas DPPH. Penggunaan bahan antioksidan baik alami maupun sintetik dalam bahan pangan. harus memenuhi persyaratan tertentu yaitu: a) tidak beracun dan tidak mempunyai efek fisiologis. Senyawa DPPH dalam metode ini digunakan sebagai model radikal bebas. . d) efektif dalam jumlah yang relatif kecil menurut rekomendasi Food and Drug Administration dosis yang diizinkan dalam bahan pangan adalah 0. Penurunan pada absorbsi dapat diukur secara spektrofotometrikal dan dibandingkan dengan sebuah kontrol etanol atau metanol untuk mengkakulasikan aktivitas scavenging radikal DPPH (Vattem dan Shetty 2006). Antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstrak bahan alami.

20

Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen, maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH, jika semua elektron pada radikal bebas DPPH berpasangan, maka warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm akan hilang. Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH disajikan pada Gambar 5. DPPH* Free radical + AH antioksidan DPPH-H neutral + A* new radical

Puplish color

Yellowish color

Gambar 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007). Parameter yang digunakan untuk menginterpretasikan hasil pengujian dengan metode DPPH adalah EC50 (efficient concentration) atau biasa disebut IC50 (inhibition concentration). Inhibition concentration (IC50) dapat didefinisikan sebagai kosentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 0,05 mg/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 0,05-0,10 mg/mL, sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/mL, dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/mL (Blois 1958 diacu dalam Molyneux 2004).

21

3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Sampel diambil dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Provinsi Papua Barat. Ekstraksi dan uji aktivitas antioksidan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan Pusat

Laboratorium Kimia Analitik, FMIPA, Institut Pertanian Bogor,

Laboratorium Terpadu IPB-Bogor. Identifikasi senyawa antioksidan dilakukan di Balai Pengkajian Bioteknologi (Biotech Center-BPPT), Serpong. Penelitian dilaksanakan dari bulan Agustus 2010 – Maret 2011. Gambar 6 menunjukkan diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa antiokksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).
Tambelo kering Maserasi dengan MeOH Ekstraksi dengan MeOH Partisi dengan pelarut n-heksan, dan etil asetat Ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak metanol Uji Fitokima Uji antioksidan Ekstrak terplilih KLT Eluen terbaik Analisis kimia : - uji proksimat - uji asam amino - uji asam lemak - uji mineral

Kromatografi kolom

Uji Fitokima

Uji antioksidan Fraksi terpilih Identifikasi dengan LC-MC

Gambar 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).

antioksidan

22

3.2 Bahan dan Alat Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah tambelo yang berasal dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Propinsi Papua Barat. Tambelo diperoleh dari batang pohon mangrove Rhizopora yang sudah lapuk. Tambelo dibersihkan dengan melepaskan cangkang dan pallet kemudian dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. Tambelo kering selanjutnya digiling dengan menggunakan mortar dan disimpan pada suhu rendah (5-10 oC) sampai siap untuk dianalisis. Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi adalah n-heksana, etil asetat, metanol, dan kertas saring Whatman 40. Bahan kimia yang digunakan untuk uji antioksidan adalah DPPH (1,1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl), BHT dan vitamin super ester C sebagai standar. Bahan untuk uji fitokimia adalah H2SO4, akuades, kloroform p.a (pengenceran), anhidra asetat, asam sulfat pekat, HCl 2N, pereaksi Dregendorff, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, serbuk magnesium, alkohol, HCl 37%, etanol 70%, FeCl3 5%, pereaksi Molish, pereaksi benedict, pereaksi biuret, dan larutan ninhidrin 0,1%. Peralatan utama yang digunakan adalah kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom (KK), spektrofotometer UV-Vis JENWAY 6305,

kromatografi cair (LC-MS) AGILENT TECHNOLOGIES, vacum rotary evaporator Buchi Rotavapor R-205, dan Spektrofotometer serapan atom (SSA) Shimazu-7000. 3.3 Prosedur Penelitian Penelitian ini terbagi atas dua tahap, yaitu 1) analisis komponen kimia tambelo, dan 2) Ekstraksi bahan aktif tambelo. Penelitian tahap pertama meliputi analisis rendemen, uji proksimat, asam lemak, asam amino, dan mineral. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif dengan metode maserasi, partisi cair-cair, uji fitokimia, uji antioksidan dengan metode DPPH, dan identifikasi senyawa

antioksidan dari bahan aktif yang dihasilkan. 3.3.1 Penelitian tahap pertama Penelitian tahap pertama ini bertujuan untuk mendapatkan presentase bagian tubuh yang dapat dimanfaatkan dan memperoleh nilai kandungan gizi atau komposisi kimia dari tambelo. Analisis kandungan gizi terdiri dari analisis

3.1 Rendemen (Hustiany 2005) Tambelo dikeluarkan dari freezer. Tambelo ditimbang sebanyak 1-2 g (B).3. dengan rumus : 3.1. dan uji kadar protein menggunakan metode kjedahl.2 Uji proksimat (AOAC 2005) Analisis proksimat yang dilakukan meliputi uji kadar air dan abu dengan metode oven. dicairkan kemudian ditimbang beratnya selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. analisis asam amino. Prinsipnya adalah pembakaran atau pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi . kadar abu. kadar lemak. Cawan tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 102-105 oC selama 6 jam.23 proksimat yang meliputi kadar air. Rendemen merupakan presentase perbandingan antara bagian yang digunakan dengan berat utuh tambelo segar. kadar protein. serta asam lemak. kemudian dimasukan kedalam cawan. Kadar air ditentukan dengan rumus: Keterangan: A = berat cawan kosong (gram) B = berat sampel sebelum dioven (gram) C = berat cawan berisi sampel setelah dioven (gram) b) Analisis kadar abu (AOAC 2005) Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven. dan karbohidrat. Cawan tersebut kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang bobotnya (C).1. 3. a) Analisis kadar air (AOAC 2005) Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 102-105 o C selama 30 menit. Daging tembelo yang sudah kering ditimbang kembali untuk mengetahui penurunan berat setelah dikeringkan. Cawan tersebut diletakkan dalam desikator (kurang lebih 30 menit) hingga dingin kemudian ditimbang hingga beratnya konstan (A). uji kadar lemak menggunakan metode sokhlet.

Abu dibasahi (dilembabkan) dengan akuades secara bertahap. Zat anorganik ini disebut abu. Sampel dimasukan dalam kantong plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Prosedur analisis kadar abu dalam bahan pangan adalah sebagai berikut: cawan abu porselin yang kosong dimasukkan ke dalam oven. Cawan abu porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit. kemudian dimasukan ke dalam labu . kemudian cawan abu porselin kosong ditimbang untuk mengetahui bobot cawan kosong (A). Homogenat sampel ditimbang 2 gram pada kertas timbang.24 air (H2O) dan karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar. Kadar abu dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: A = Berat cawan kosong (gram) B = Berat sampel sebelum pengabuan (gram) C = Berat cawan berisi sample setelah pengabuan (gram) c) Analisis kadar protein (AOAC 2005) Penentuan kadar protein dilakukan dengan metode total nitrogen yang didasarkan pada reaksi penetralan asam basa. Apabila abu belum putih benar harus dilakukan pengabuan kembali. suhu tungku pengabuan diturunkan hingga suhu 40 oC. yaitu destruksi. kemudian masukan ke dalam oven bersuhu 550-600 oC selama 24 jam atau sampai pengabuan sempurna. dan titrasi. Tahapan destruksi adalah sebagai berikut: sampel dilumatkan dengan blender hingga partikelnya dapat melewati saringan 20 mesh. Cawan porselin dikeluarkan dengan menggunakan penjepit dan masukan ke dalam desikator selama 30 menit. Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang 2 gram dan dimasukan ke dalam cawan abu porselin ditimbang (B). destilasi. Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari tiga tahap. sehingga diperoleh abu berwarna putih. kemudian dikeringkan menggunakan hot plate dan diabukan kembali pada suhu 550-600 oC sampai diperoleh berat yang konstan. setelah selesai. Suhu pengabuan diturunkan sampai ± 40 oC lalu dipindahkan cawan abu porselin ke dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang bobotnya (C) segera setelah dingin. Kadar protein dihitung berdasarkan kesetimbangan reaksi kimia.

kemudian ditambahkan 50-75 mL larutan natrium hidroksida dan natrium thiosulfat dan dilakukan destilasi. Sampel ditambahkan 15 mL asam sulfat pekat (95-97%) dan 3 mL hidrogen peroksida secara perlahan dan didiamkan 10 menit dalam ruang asam. selanjutnya destilat ditampung ke dalam erlenmeyer tersebut hingga volume mencapai minimal 150 mL (hasil destilasi akan berubah menjadi kuning). yang sudah dibakukan sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral. Sampel hasil destruksi didiamkan hingga mencapai suhu kamar dan tambahkan 50-75 mL akuades.2 N. Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukan ke dalam wadah plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Analisis standar blanko dilakukan seperti tahapan sampel. Pelarut organik yang mengikat lemak selanjutnya dipisahkan dengan proses penguapan (evaporasi). Labu yang berisi hasil destruksi dipasang pada rangkaian alat destilasi uap. Apabila sampel tidak langsung . sehingga hasil lemak tertinggal dalam labu. Destruksi dilakukan pada suhu 410 oC selama 2 jam atau sampai larutan jernih. Sampel tersebut selanjutnya ditambahkan dua tablet katalis serta beberapa butir batu didih.25 destruksi. Penetapan bobot lemak dihitung secara gravimetri. Kadar protein dapat dihitung dengan persamaan berikut : Keterangan : KP = Kadar Protein Va = mL HCl untuk titrasi sampel Vb = mL HCl untuk titrasi blanko N = Normalitas HCl yang digunakan W = berat sampel c) Analisis kadar lemak (AOAC 2005). Tahap kedua adalah distilasi. posedur tahapan ini sebagai berikut: sebanyak 25 mL larutan H3BO3 4% yang mengandung indikator sebagai penampung destilat dimasukan dalam erlenmeyer. Prinsip analisis kadar lemak diawali dengan melakukan pengekstrakan sampel dengan pelarut organik untuk mengeluarkan lemak dengan bantuan pemanasan pada suhu titik didih pelarut selama 8 jam. Tahap ketiga adalah titrasi hasil destilat dengan HCl 0.

Homogenat sampel ditimbang sebanyak 2 gram (B) dan masukan ke dalam selongsong lemak (ekstraction timbles). Perangkat HPLC sebelum digunakan harus dibilas dengan eluen yang akan digunakan selama 2-3 jam. Kadar lemak dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: KL = kadar lemak A = bobot contoh B = bobot labu lemak dan labu didih C = bobot labu lemak. Perhitungannya sebagai berikut: % Karbohidrat = 100 % . Apabila terjadi pemisahan cairan dan sampel. Prosedur analisis lemak adalah sebagai berikut : labu alas bulat ditimbang dalam keadaan kosong (A).3 Analisis asam amino (AOAC 1994) Komposisi asam amino ditentukan dengan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). selongsong lemak ke dalam ekstractor soxhlet.26 dianalisis. Labu dan lemak didinginkan dalam desikator selama 30 menit. protein. maka disimpan dalam refrigerator sampai saatnya akan dianalisis. Prosedur analisis asam .1. Labu alas bulat yang berisi lemak dimasukan ke dalam oven bersuhu 105 oC selama ± 2 jam untuk menghilangkan sisa n-heksana dan air. Ekstraksi dilakukan pada suhu 60 oC selama 8 jam.3. lemak dan abu. dan pasang rangkaian sokhlet dipasang dengan benar. Campuran lemak dan heksana dalam labu alas bulat dievaporasi sampai kering. Berturut-turut dimasukan 150 mL n-heksana ke dalam labu alas bulat. Sampel dikondisikan pada suhu ruang dan pastikan sampel masih homogen sebelum ditimbang. maka dilakukan pengadukan ulangan dengan blender sebelum dilakukan pengamatan.( % air + % lemak + % protein + % abu ) 3. batu didih dan lemak d) Analisis kadar karbohidrat (AOAC 2005) Perhitungan kadar karbohidrat dilakukan menggunakan metode by difference yaitu pengurangan 100 % dengan jumlah dari hasil empat komponen yaitu kadar air. Labu alas bulat yang berisi lemak ditimbang (C) sampai berat konstan. Begitu pula dengan syringe yang akan digunakan juga harus dibilas dengan akuades.

Asetoniril 60% .1 mL) BM = bobot molekul dari masing-masing asam amino (g/mol) 3. Transformasi dilakukan dengan cara metilasi sehingga diperoleh metil ester asam lemak (FAME).Buffer fosfat 0. Komponen-komponen yang dipisahkan harus mudah menguap pada suhu pemisahan yang dilakukan.27 amino menggunakan HPLC disajikan Gambar 7.9x150 μm Kecepatan alir eluen : 1 ml/menit Tekanan Fasa gerak : 3000 psi : . Identifikasi tiap komponen dilakukan dengan . kemudian ditransformasi menjadi bentuk esternya yang bersifat lebih mudah menguap.1 M Detektor Panjang gelombang Derivatisasi Tipe injeksi Program : UV : 256 nm : derivatisasi pre-kolom : on column injection tanpa septum : isokratik (kecepatan aliran eluen konstan) Kandungan masing-masing asam amino pada bahan dapat dihitung dengan rumus: Keterangan : C = konsentrasi standar asam amino (2.3. Kondisi alat HPLC saat berlangsungnya analisis asam amino: Temperatur Jenis kolom : 27 oC (suhu ruang) : pico tag 3. Metil ester asam lemak (FAME) ini dianalisis dengan alat kromatografi gas.1.5 μg) FB = faktor pengenceran ( 133.4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) Kandungan asam lemak dapat ditentukan dengan metode gas kromatografi didasarkan pada partisi komponen-komponen dari suatu cairan di antara fasa gerak berupa gas dan fasa diam berupa zat padat atau cairan yang tidak mudah menguap yang melekat pada bahan pendukung inert. sehingga suhu operasi biasanya lebih tinggi dari suhu kamar dan biasanya dilakukan derivatisasi untuk contoh yang sulit menguap. Tahapan analisis asam lemak diawali dengan menghidrolisis lemak/minyak dalam sampel menjadi asam lemak.

natrium asetat. dan trietilamin dengan perbandingan 3:3:4) Pengenceran dengan buffer asetat sebanyak 200 μL lalu dibiarkan selama 20 menit Penyaringan dengan milipore berukuran 0. pikoiotisianat.45 mikron Injeksi ke alat HPLC Kromatogram Gambar 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC. dan trietilamim dengan perbandingan 2:2:1) Pengeringan dengan gas N2 Hidrolisat protein kering Penambahan 30 μL larutan derivatisasi ( campuran antara metanol. Tambelo kering 0.28 membandingkan waktu retensinya dengan standar pada kondisi analisis yang sama.75 g Penambahan 5-10 ml HCl 6N Pemanasan dalam oven pada suhu 100 oC selama 24 jam Hidrolisat Protein Penyaringan dengan milipore berukuran 45 mikron Filtrat hidrolisat Penambahan 30 μL larutan pengering (campuran antara metanol. . Waktu retensi dihitung pada kertas rekorder sebagai jarak dari garis pada saat muncul puncak pelarut sampai ke tengah puncak komponen yang dipertimbangkan.75 g 0.

29

a. Preparasi contohd (hidrolisis dan esterifikasi) Contoh lemak ditimbang sebanyak 20-30 mg, kemudia ditambahkan 1 mL larutan NaOH 0,5 N ke dalam metanol dan dipanaskan dalam penangas air selama 20 menit. Sebanyak 2 mL BF3 16% dan 5 mg/mL standar internal ditambahkan pada sampel tersebut, lalu dipanaskan lagi selama 20 menit dan selanjutnya didinginkan. Sampel kemudian ditambahkan 2 mL NaCl jenuh dan 1 mL n-heksana, lalu dikocok dengan baik. Lapisan heksana dipindahkan dengan

bantuan pipet tetes ke dalam tabung yang berisi 0,1 gram Na2SO4 anhidrat, dibiarkan 15 menit. kromatografi gas. b. Analisis komponen asam lemak dengan kromatografi gas Pelarut sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam kolom. Bila aliran gas pembawa dan sistem pemanasan sempurna, puncak pelarut akan nampak dalam kurang dari 1 menit. Sebanyak 5 µL campuran standar FAME diinjeksikan Fasa cair dipisahkan dan selanjutnya diinjeksikan ke

setelah pena kembali ke nol (baseline). Jika semua puncak sudah keluar, diinjeksikan 5 µL sampel yang telah dipreparasi (A). Waktu retensi dan puncak masing-masing komponen tersebut kemudian diukur. Jika rekorder dilengkapi dengan integrator, waktu retensi dan luas puncak langsung diperoleh dari integrator dan membandingkan waktu retensinya dengan standar untuk mendapatkan informasi mengenai jenis dari komponen-komponen dalam contoh. Jumlah dari masing-masing komponen dalam sampel dihitung menggunakan metode internal standar, dengan cara sebagai berikut :

Keterangan :
Cx Cs Ax As R = = = = = kosentrasi komponen x kosentrasi standar internal luas puncak komponen x luas puncak standar internal respon detektor terhadap komponen x relatif terhadap standar

30

Kondisi alat kromatografi gas pada saat dilakukan analisis : 1. Kolom 2. Dimensi kolom 3. Laju alir n2 4. Laju alir h2 5. Laju alir udara 6. Suhu injektor 7. Suhu detektor 8. Suhu kolom - Kolom temperatur : cyanopropil methylsil (kolom kapiler) : p=60m,ø dalam = 0.25 mm, 025 µm film tickness : 20 ml/menit : 30 ml/menit : 200 – 250 ml/menit : 200 oc : 230 oc : program temperatur : awal 190 oC diam 15 menit akhir 230 oC diam 20 menit 9. Ratio 10. Injeksi volum 11. Linier velocity 3.3.1.5 Analisis mineral Mineral yang dianalisis pada sampel tambelo meliputi mineral kalsium (Ca), kalium (K), magnesium (Mg), besi, (Fe), natrium (Na), mangan (Mn), klorida (Cl), seng (Zn), fospat, dan tembaga (Cu), dianalisis dengan metode spektrofotometer serapan atom (SSA). a. Analisis mineral kalsium (Ca), kalium (K), dan seng (Zn) (Yosida et al. 1972). Prinsip penentuan kadar kalsium, kalium dan seng adalah proses pelarutan sampel dengan asam klorida, kemudian absorbansinya diukur dengan : 1:8 : 1 µl : 20 cm.sec

menggunakan SSA. sebagai berikut:

Prosedur analisis mineral kalsium, kalium dan seng adalah

Sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram,

kemudian dihancurkan dan dimasukkan ke dalam gelas piala yang telah dibilas dengan HCl 1 N. Sampel ditambahkan dengan 25 mL HCl 1 N dan disimpan selama 24 jam. Setelah penyimpanan, sampel dikocok dengan shaker dan

disaring dengan kertas Whatman No.1. 1). Analisis mineral kalsium (Ca) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 1 mL, ditambahkan 2 mL larutan lantanum oksida dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 10 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL.

31

Larutan diukur absorbansi dengan SSA pada panjang gelombang 285,2 nm untuk magnesium dan 422,7 nm untuk kalsium. 2). Analisis mineral kalium (K) dan seng (Zn) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 2 mL dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 40 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL. Larutan diukur absorbansi dengan AAS pada panjang gelombang 766,5 nm untuk kalium dan 213,9 nm untuk seng. b. Analisis mineral besi (Fe) Prinsip penentuan kadar besi adalah proses pelarutan bahan dengan larutan asam campur yang terdiri dari asam nitrat, asam sulfat dan asam perklorat, kemudian dilanjutkan dengan proses pemanasan. Prosedur analisis mineral besi adalah sebagai berikut: sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram, kemudian dihancurkan. HNO3, H2SO4, Larutan asam campuran disiapkan yang dibuat dari Sampel yang telah

dan HClO4 dengan perbandingan 5:1:2.

hancur ditambah 10 mL larutan asam campur lalu dipanaskan di dalam ruang asam menggunakan api kecil selama 2 jam. Api dibesarkan sampai larutan

menjadi jernih. Kemudian didinginkan. Larutan ditambahkan akuades sampai volume 50 mL dan disaring dengan kertas saring pencucian asam Whatman No.1 (acid-washed filter paper whatman No.1). Sebanyak 10 mL ekstrak sampel ditambahkan 1 mL hidroquinon dan 1 mL orto-fenantrolin, kemudian ditambahkan sodium sitrat sampai pH menjadi 3,5. Larutan diencerkan dengan akuades sampai volume 50 mL dan dipanaskan dalam water bath selama 1 jam. Larutan deret standar diperlakukan dengan pereaksi yang sama dengan ekstrak sampel. Absorbansi diukur dengan SSA pada panjang gelombang 248,3 nm. c. Analisis mineral tembaga (Cu) dan mangan (Mn) (SNI 01-2362-1991) Prinsip dari penentuan kadar tembaga dan mangan adalah proses pengabuan dengan suhu 450 oC dengan penambahan asam nitrat (HNO3). Prosedur analisis sebagai berikut: sampel ditimbang sebanyak 25 gram dalam gelas piala 250 mL yang terdahulu dicuci dengan HNO3 6N. Sampel dikeringkan di dalam oven pengering pada suhu 110-125 oC selama 8-24 jam. Sample kering kemudian dipindahkan ke dalam tungku, dan atur suhu pada 250 oC. Suhu tunggu

uji fitokimia. Tahapan proses ekstraksi tambelo meliputi penghancuran sampel. Sampel kering ditimbang sebanyak 500 gram. 3. sampel dikeluarkan dari tungku dan dinginkan. kemudian filtrat yang dihasilkan digabungkan dan dipekat dengan menggunakan rotary evaporator. Filtrat yang diperoleh kemudian diencerkan dengan akuades hingga 50 mL. 3. dan metanol (polar). blanko dan contoh dialirkan ke dalam SSA. dan dibiarkan selama semalam (16-24 jam).42 yang sebelumnya telah dicuci dengan HNO3 10% dan akuades. Sampel kemudian dipanaskan kembali pada suhu 450 oC di dalam tungku selama 30-60 menit. uji aktivitas antioksidan. yaitu heksana (non polar).3. Larutan disaring dengan kertas saring Whatman No. dan evaporasi. Absorbansi mineral Cu dan Mn masing-masing diukur dengan SSA pada panjang gelombang 324. Sampel diletakkan diatas hot plate untuk menguapkan HNO3. maserasi. Jika proses sampel abu belum putih sempurna. Kenaikkan suhu kemudian dilanjutkan hingga 450 oC. Larutan standar. Ekstrak MeOH pekat dipartisi dengan n-heksana menggunakan corong pisah diulang sebanyak 3 kali.2 Penelitian tahap kedua Penelitian yang dilakukan pada penelitian tahap kedua adalah ekstraksi bahan aktif.1 Ekstraksi bahan aktif Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi tambelo yaitu tiga macam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya.7 nm dan Mn 285. Abu dilarutkan ke dalam 2 mL HNO3 pekat. Sampel tersebut kemudian ditambahkan 0. kemudian diencerkan dengan akuades hingga 25 mL dan didihkan di atas hot plate. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya proses pembakaran secara cepat yang menyebabkan contoh dapat terhambur keluar. Setiap 1 x 24 jam dilakukan penyaringan. Abu yang dihasilkan harus benar-benar putih.2. apabila tidak proses penambahan asam nitrat harus diulangi. partisi.32 dinaikkan secara bertahap hingga mencapai 350 oC selama periode 1-2 jam. kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol (MeOH) sebanyak 2500 mL. serta uji fraksinasi dan identifikasi senyawa antioksidan. Kondisi pada suhu ini dibiarkan sesaat untuk memberikan kesempatan sebagian besar lemak terbakar habis. perbandingan 1:5 pada suhu ruang selama 3x24 jam. .25-1 mL HNO3 pekat.2 nm. etil asetat (semi polar).3.

33 Fase n-heksana dikumpulkan dan dipekatkan dan dihitung rendemennya. Fase etil asetat dikumpulkan dan dipekatkan. Ekstrak MeOH setelah partisi n-heksana dipartisi kembali dengan etil asetat. Ebada et al. lalu dihitung Ekstrak metanol sisa partisi dipekatkan kembali dan dihitung Semua ekstrak diuji fitokimia dan uji antioksidan (Miyaoka et al. 1998. aktif tambelo disajikan pada Gambar 8. 2008). Diagram alir proses ekstraksi bahan Sampel (500 g) Maserasi 3x24 jam dengan MeOH perbandingan 1:5 Penyaringan Filtrat Evaporasi Ekstrak MeOH Dipartisi dengan n-Heksana Residu Fase n-heksana Evaporasi Fase MeOH Dipartisi dengan etil asetat Fase etil asetat Ekstrak n-Heksana Evaporasi Fase MeOH Evaporasi Ekstrak etil asetat Ekstrak MeOH Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al. 2008). . rendemennya. rendemen. diulang sebanyak 3 kali.

dipisahkan dan ditambahkan 5 ml air kemudian dikocok sampai timbul busa yang stabil. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5%. adanya flavonoid ditunjukkan oleh terbentuknya warna merah akibat penambahan H2SO4. Lapisan eter yang terbentuk dipipet dan diletakkan papan uji (spot plate) dengan menambahkan pereaksi Liebermen Buchard (3 tetes asam asetat anhidrin dan 1 tetes H2SO4 pekat). Meyer. Fraksi asam diambil kemudian ditambahkan pereaksi Dragendrof.3. selanjutnya diamati warna yang terbentuk. Filtratnya diuapkan kemudian ditambahkan eter. . b) Uji saponin Sebanyak 50 mg sampel ditambah dietil eter. Adanya tannin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau. f) Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl3) Sebanyak 1 g sampel diekstrak dengan 20 ml etanol 70%. jika terbentuk warna hijau adalah steroid dan warna merah adalah triterpenoid.2. e) Uji Tanin Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan dalam 5 ml etanol ditambah dengan beberapa tetes pereaksi FeCl3 1 %.2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995) a) Uji alkaloid Sampel sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan 10 mL metanol dan beberapa tetes amoniak.34 3. Residu yang tidak larut dalam dietil eter diambil. biru atau ungu. Filtratnya ditaruh ke dalam spot plate (papan uji) kemudian ditambahkan H2SO4 pekat. c) Uji steroid/Triterpenoid Sampel sebanyak 1 gram ditambahkan 25 mL etanol 30% dipanaskan (50 oC) dan disaring. Terbentuknya warna hijau atau hijau biru menunjukkan adanya senyawa fenol dalam bahan. d) Uji Flavonoid Sebanyak 1 gram sampel ditambah metanol 30% sampai terendam kemudian dipanaskan. Fraksi metanol dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2M. dan Wagner.

Persamaan regresi diperoleh dari hubungan antara kosentrasi sampel dan persentase penghambatan aktivitas radikal bebas.4 Fraksinasi senyawa antioksidan Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (ekstrak terpilih). 3. yaitu kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kolom (KK).3. Prinsip kerjanya pada sampel (mengandung senyawa bersifat antioksidan) yang dapat meredam radikal bebas DPPH.1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl) (Yeh dan Cen 1995).3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995) Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode perendaman radikal bebas DPPH (1. Butylated hydroxytoluene (BHT) dan vitamin super ester C digunakan sebagai kontrol positif. 6. dan untuk pembanding dengan masing-masing kosentrasi 4. 40. Volume dicukupkan sampai 5 mL.3. Ekstrak tersebut masing-masing ditambahkan 200 μl larutan DPPH 1mM dalam metanol. Metode yang digunakan ada dua macam. Nilai kosentrasi dan hambatan ekstrak diplotkan masing-masing pada sumbu x dan y. Persamaan ini digunakan untuk mencari Inhibition Concentration 50 % (IC50) dengan memasukkan angka 50 sebagai y sehingga didapatkan nilai x sebagai IC50.2. Ekstrak dilarutkan dalam metanol dan dibuat dalam berbagai konsentrasi ( 20. dan 80 ppm). 60. kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit. Uji ini dilakukan terhadap ekstrak tambelo. Hambatan dihitung dengan rumus. a) Kromatografi lapis tipis (KLT) Pada penelitian ini. kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi.35 3. pemilihan pelarut untuk fraksinasi dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada . Serapan sampel tersebut diukur pada panjang gelombang 515 nm. Persamaan regresi yang diperoleh dalam bentuk y = bx + a. dan 10 ppm.2. Nilai absorbansi sampel diperoleh persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. 8. Pengujian ini dilakukan sebanyak tiga kali ulangan.

Kombinasi yang digunakan adalah pelarut kloroform:metanol dengan perbandingan 9:1 mL. Pencucian kolom dilakukan dan pembuatan larutan silika gel (silika gel G40-63) yang akan dimasukkan ke dalam kolom sebelum ekstrak dimasukkan ke dalam kolom. Ekstrak terpilih sebanyak 0. Ekstrak aktif KLT (silika gel) CHCl3:MeOH 9:1ml CHCl3:MeOH Heksan:EtOH 1:1ml 17:3 ml Heksan:EtOH 8:2ml Heksan :CHCl3 3:2 ml terbentuknya spot terbanyak Gambar 9 Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT.36 kromatografi lapis tipis (KLT). Semua larutan silika gel masuk ke dalam kolom. lalu dilakukan penjenuhan silika gel dalam kolom selama 30-60 menit. pelarut heksan:etil asetat dengan perbandingan 8:2 dan n-heksana:kloroform (3:2). b) Kromatografi kolom (KK) (Gritter et al. pelarut heksan : etil asetat dengan perbandingan 1:1 mL dan pelarut kloroform : metanol dengan perbandingan 17:3 mL. bagian atas kolom ditutup . Pada proses penjenuhan. Larutan ekstrak tersebut kemudian ditotolkan pada plat silika gel 60 F254 dengan panjang l0 cm. Kolom diberi glasswool pada bagian bawahnya. Kombinasi pelarut yang menghasilkan pengembangan spot terbaik digunakan sebagai eluen untuk memfraksinasi ekstrak terpilih dengan kromatografi lapis tipis maupun kromatografi kolom. untuk memilih eluen terbaik dicoba dengan berbagai eluen n-heksana. Diagram alir fraksinasi dengan metode kromatografi kolom dapat dilihat pada Gambar 10. dan metanol. Silika gel sebanyak 13-15 gram dilarutkan pada eluenn kloroform : metanol = 9:1 sehingga diperoleh larutan silika gel. Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT dapat disajikan pada Gambar 9. etil asetat. kloroform.02 gram dilarutkan dalam 0. l99l) Pelaksanaan kromatografi kolom dilakukan dengan memasang kolom pada statif secara tegak lurus.5 mL pelarutnya.

dihitung rendamennya. Larutan yang keluar dari kolom ditampung pada tabung reaksi dengan masing-masing tabung reaksi berisi ± 3 mL. Fraksi hasil kromatografi Kolom (KK) dilakukan pengujian KLT untuk penggabungan fraksi dengan mengacu pada kesamaan pola kromatogram. Silika gel harus jenuh sebelum ekstrak dimasukkan dan setelah silika gel jenuh maka kran kolom dibagian bawah kolom dibuka kembali setelah semua ekstrak masuk ke dalam kolom. Larutan silica gel + eluen 1: 1 (w/v) Larutan silika gel dimasukkan ke dalam kolom Pembuatan larutan ekstrak terpilih 1 g ekstrak terpilih + 3 ml eluen Dijenuhkan selama 30-60 menit Eluen dikeluarkan (silica gel tidak boleh kering) Larutan ektrak terpilih dimasukkan ke dalam kolom Kran dibuka Kolom terus dialiri eluen Larutan ditampung pada tabung reaksi (±10 ml) Ekstrak aktif Gambar 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom. Ekstrak yang akan difraksinasi adalah ekstrak terpilih sebesar 1 gram dan dilarutkan pada pelarut asal sebanyak 3 mL. Ekstrak dibiarkan mengalir ke bagian penjerap kolom dan kolom terus diisi agar silika gel tidak kering. serta diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH (Yeh dan Cen 1995). dan setiap fraksi penggabungan yang terbentuk dikeringkan dengan aerator di ruang asam. .37 dengan aluminium foil untuk mencegah penguapan eluen yang terdapat dalam kolom sehingga silika gel tetap dalam kondisi basah. Larutan dalam tabung reaksi kemudian dikeringkan untuk menghasilkan residu ekstrak.

1988) Fraksi terpilih dengan nilai aktivitas antioksidan yang tertinggi dilanjutkan dengan mengidentifikasi senyawa antioksidan menggunakan Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) Agilent Technologies dilakukan untuk mendapatkan bobot molekul dan rumus molekul yang sangat membantu dalam elusidasi struktur molekul.2. . kemudian dicocokkan dengan senyawa yang ada pada database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). yaitu memilih senyawa yang memiliki puncak tinggi.5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al.38 3.3. Analisis yang dilakukan pada tahap identifikasi senyawa aktif.

04 2.27 7.88±1. Hal ini juga menunjukkan bahwa organisme perairan termasuk tambelo dan ikan ini memiliki kandungan air yang tinggi sehingga diperlukan penanganan yang bagus untuk mengurangi kerusakan pada bahan beku.1.04 7.00% dan setelah dikeringkan rendemen berubah menjadi semakin kecil yang disebabkan banyaknya kandungan air yang menguap.72±0.05 17.01 7.1 Penelitian Tahap Pertama 4. Tabel 2 Rendemen daging tambelo Sampel Tambelo utuh Daging tambelo Berat segar 2200 gram 40.83 21 Sumber : a Syaputra (2007) . Tabel 3 Kandungan proksimat daging tambelo Proksimat (%) Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Segar Tambelo 82. Waranmaselembun (2007) Kadar air merupakan jumlah air yang terkandung di dalam bahan pangan dan ikut menentukan kesegaran dan daya awet bahan pangan tersebut.4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.8 42.95 5. lemak. abu.27±0. Kadar air . Penurunan rendemen tambelo disebabkan penguapan kandungan air akibat bahan mengalami tekanan vakum yang sangat tinggi setelah dibekukan. air akan tersublimasi dan bahan yang tidak tersublimasi berubah menjadi padat atau kering.01 7. Jumlah rendemen setelah dikeringkan sebesar 22.22 5.01 56.2 Kandungan proksimat tambelo Hasil analisis proksimat dari daging segar tambelo dan serbuk kering tambelo.00 % Berat kering 22.73%. dan karbohidrat.60 1.08 14. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi nilai ekonomisnya sehingga lebih efektif.62 b Temilok 73.21±0.02 a Kering Tambelo Kerang mas ngur b 6.45±2. Kandungan proksimat daging tambelo dapat dilihat pada Tabel 3. meliputi kadar air.07±0.04 4.28±0.1 Rendemen daging tambelo Hasil pengukuran rendemen daging tambelo pada Tabel 2 menunjukkan bahwa tambelo segar setelah preparasi 40.31 0.77±2.1.88 30.63±0.29 4.72±0. protein.73 % 4.

pembentukan senyawa esensial (hormon. karena selain sebagai sumber energi. Kadar air tambelo kering pada hasil penelitian ini memiliki kadar air dibawah kadar air maksimum yang diisyaratkan untuk proses ekstraksi. bahan pengumpal darah).31%. sedangkan kadar air tambelo setelah dikeringkan sebesar 6. protein berfungsi sebagai zat pembangun tubuh dan zat pengatur di dalam tubuh. Kadar protein pada tambelo segar adalah 7. sedangkan kadar protein tambelo kering sebesar 42. enzim.40 yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Syahputra (2007) yang menunjukkan bahwa kadar air temilok segar sebesar 73. Hasil perhitungan nilai rata-rata proksimat dapat dilihat pada Lampiran 1. Kandungan protein pada tambelo kering berasal dari plankton yang merupakan salah satu makanan bagi tambelo.77%. Kadar air yang bahan untuk ekstraksi diisyaratkan sebesar 11%. kadar air tambelo kering menjadi 6. kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada bahan pangan yang dapat mempercepat pembusukkan (Winarno 1997). pembentukan antibodi dan proses detoksifikasi. Fungsi utama protein bagi tubuh adalah untuk pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan. dan transpor zat gizi dalam tubuh. .63%.60%. Plankton diketahui sebagai sumber protein sekaligus simbion dalam sistem pencernaan pada tambelo. Hal ini karena air yang terdapat pada tambelo segar tersublimasi akibat adanya tekanan vakum. sehingga tambelo segar menjadi kering. Hal ini menunjukkan bahwa sampel kering memiliki kadar air yang cukup baik untuk dilakukan proses ekstraksi karena semakin rendah nilai kadar air bahan maka semakin memudahkan pelarut untuk mengekstrak komponen senyawa aktif yang diinginkan.63%. Hasil analisis proksimat kadar air tambelo segar adalah 82. Protein merupakan zat gizi yang sangat penting bagi tubuh. hemoglobin. setelah mengalami pengeringan dengan freeze dry. mempertahankan netralitas tubuh. regulasi keseimbangan air dalam tubuh. Hal ini bertujuan agar proses ekstraksi dapat berjalan lancar (Setyowati 2009).72%. Protein dalam plasma (serum) darah dapat juga berfungsi sebagai antioksidan (Mucthadi 2009).

Peranan berbagai unsur mineral bagi manusia masih belum sepenuhnya diketahui (Winarno. Hal ini terutama karena peranan asam lemak eikosapentaenoat (EPA) dan dokosaheksaenoat (DHA).29%). sedangkan kadar lemak pada tambelo kering sebesar 14.25 kali lebih banyak daripada yang diberikan oleh karbohidrat atau protein.1997). kadar lemak tambelo lebih rendah dibandingkan dengan kadar lemak temilok segar (4.26%.41 Hasil analisis kadar lemak dari tambelo segar adalah 0. Berdasarkan hasil analisis proksimat pada tambelo kering memiliki karbohidrat yang relatif lebih tinggi . Peranan lemak ikan dalam mencegah timbulnya penyakit jantung koroner telah dibuktikan. belum banyak penelitian sejenis dilakukan pada manusia.88% lebih kecil dari kerang mas ngur 7. jika dibandingkan dengan literatur yang ada maka nilai hasil analisis memiliki nilai yang tidak jauh berbeda. Unsur mineral juga dikenal sebagai zat organik atau kadar abu.unsur mineral. Karbohidrat merupakan bagian terbesar dari senyawa organik. Peranan lemak dalam bahan pangan yang utama adalah sebagai sumber energi. Abu adalah zat anorganik. Tabel 3 menunjukkan bahwa kandungan abu dalam tambelo segar 2. dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL (Muchtadi 2009). Pada proses pembakaran. sisanya terdiri dari unsur. lebih kecil dari temilok 4. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Syahputra (2007).88%. yaitu sekitar 96% terdiri dari bahan organik dan air. yang terkenal dengan sebutan asam lemak omega 3. bahan-bahan organik terbakar tetapi zat anorganiknya tidak. sisa hasil pembakaran suatu bahan organik.05% dan kandungan abu pada tambelo kering 5. Sebagian besar bahan makanan. hal ini disebabkan karbohidrat merupakan bahan pembentukan tumbuh-tumbuhan dan juga terdapat pada hewan dalam jumlah tertentu.28%. Lemak merupakan sumber yang dapat menyediakan energi sekitar 2.07%. Ikan menyimpan cadangan energi dalam bentuk lemak di dalam hatinya (lebih dari 50% berat hatinya). karena itulah disebut abu. Elemen-elemen mineral telah jelas diketahui fungsinya pada makanan ternak. Lemak adalah bentuk energi berlebih yang disimpan oleh hewan sehingga jumlah lemak dalam hewan yang dijadikan bahan pangan ditentukan oleh keseimbangan energi hewan tersebut.

41 0. Hal ini diperkuat oleh Purchon (1968) yang mengatakan bahwa sistem pencernaan yang dimiliki oleh shipworm atau tambelo mampu mencerna selulosa 80% dan lignin 45 dan pada umumnya kerang-kerangan menyimpan hasil pencernaannya dalam bentuk glikogen (gula otot) dan lemak. sebaliknya protein yang kurang satu atau lebih asam-asam amino esensial mempunyai mutu yang rendah (Winarno 2008). karena sebagian besar juga makanan yang diperolehnya berasal dari kayu bakau sehingga sistem pencernaannya dapat memanfaatkan selulosa dan lignin pada kayu bakau. Asam amino merupakan monomolekul dari protein yang memiliki fungsi penting bagi organisme hidup.41 1.50 1.25 0. Kadar Asam Amino (%) 4.81 1.55%).26 0.63 1.34 0.55 2.42 30. Hal ini diduga bahwa tambelo menyimpan hasil pencernaan dalam bentuk glikogen.80 1.44%.00 1.85 1.50 0.29 1.34%).01 Jenis Asam Amino Gambar 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo.3 Kandungan asam amino tambelo Mutu protein dinilai dari perbandingan asam-asam amino yang terkandung di dalam protein tersebut.50 3. Jenis asam amino yang tertinggi dalam tambelo adalah asam glutamat (3.72 1. 4. sedangkan kromatogram standar asam amino dapat dilihat pada Lampiran 3 dan kromatogram asam amino tambelo pada lampiran 4.00 3.1. Kandungan asam amino dari tambelo disajikan dalam Gambar 10. sedangkan asam amino isoleusin yang terendah (0.56 1.74 1. Tambelo mengandung 17 jenis asam amino.00 2. Pada prinsipnya suatu protein yang dapat menyediakan asam amino esensial dalam suatu perbandingan yang dapat menyamai kebutuhan manusia dikatakan mempunyai mutu yang tinggi. .50 2.37 0.00 0.00 3.19 0.

glutamat yang berasal dari makanan merupakan sumber energi utama bagi usus.4 4.72 0.25 1.25 1.72 0.55 1.80 1.01 1.19 1. asam amino basa.80 1.26 1.58 6.74 1.74 1.82 43.26 1.56 0.41 0. asam amino hidrofilik.85 2.52 66.92 26. AAHb = asam amino hidrofobik.61 2.63 1.56 0.55 3.68 AANE = asam amino non esensial.43 Kandungan asam amino yang terdapat di dalam tambelo diklasifikasikan menjadi sembilan jenis asam amino yang terdiri dari asam amino esensial.44 8.34 1. AAB = asam amino basa. AAA = asam amino asam.43 AAHb 1.85 2.81 1.62 9.41 1.55 3. AAR= asam amino aromatik. mempercepat penyembuhan luka pada usus.74 1.63 0. AAHi = asam amino hidrofilik. asam amio netral. dan asam amino hidrofobik.29 1.64 1. Asam glutamat adalah asam amino non esensial yang dapat disintesis dari gugus amida pada molekul glutamin yang diubah menjadi karboksilat melalui proses hidrolisis asam atau basa.19 1.19 5.37 1.63 1. meningkatkan kesehatan mental dan meredam depresi (Linder 1992). Tabel 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia dari tambelo Jenis asam amino Aspartat Glutamat Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein Histidin Treonin Ariginin Valin Metionin Isoleusin Leusin Fenilalanin Lisin TOTAL % dalam total asam amino Klasifikasi asam amino (% berat protein) AAE AANE AAA AAB AAN AAR AAS AAHi 2. asam amino asam. Menurut the international glutamate information service (IGIS).74 40.01 1.26 1. AAN = asam amino netral.29 0.72 0. dapat disajikan pada Tabel 4. Asam glutamat bermanfaat untuk menahan konsumsi alkohol berlebih.19 1.85 3.56 1. AAE = asam amino esensial.84 20.97 13.29 0.81 8.01 0.25 1.72 0.56 14. AAS = Asam amino sulfur. asam amino aromatik.80 1.20 28. asam amino non esensial.81 1.42 61. asam amino sulfur.56 0. Kajian-kajian menggunakan isotop-isotop stabil menunjukkan bahwa usus mendapatkan sebagian besar energi .91 0.

alanin. isoleusin. Asam-asam amino hasil pemecahan protein sebelum ditransportasikan ke hati terlebih dahulu diabsorbsi melalui sel-sel mukosa usus dan selanjutnya di serap oleh vena untuk kemudian ditranspor ke hati. usus mempunyai kontak terbesar dengan lingkungan eksternal dalam bentuk makanan. dan juga merupakan salah satu amino yang . detoksifikasi dari tubuh (dalam kaitannya dengan sulfur) serta penghasil kolagen yang digunakan untuk kekenyalan kulit dan tekstur. Glutathion merupakan pelindung otak dan hati dari kerusakan akibat obat atau racun. asam glutamat. histidin. glisin. Metionin merupakan suatu antioksidan yang baik karena dapat mensuplai belerang. Glutamat bersama dengan glutamin merupakan asam amino yang paling berlimpah dari 20 jenis asam amino yang mencapai 20 persen dari asam-asam amino pada usus (the international glutamate information service). Usus merupakan garis pertahanan pertama tubuh karena dari semua organ pencernaan. suatu molekul antioksidan yang memainkan peranan penting dalam mekanisme daya tahan tubuh serta perbaikan kerusakan sel dan jaringan tubuh. Sistin juga diperlukan untuk kesehatan kulit. baik secara langsung maupun tidak langsung di antaranya adalah metionin. dan telah diperlihatkan bahwa semua glutamat yang dimakan dari bahan makanan hanya 4 % yang keluar dari tubuh. Glutamat yang berasal dari makanan diperlukan bersama dengan sistin dan glisin untuk produksi glutathion. dan membantu meningkatkan daya ingat.44 dari metabolisme asam amino. Metionin juga merupakan prekusor sistin yang merupakan asam amino penghasil glutathion untuk detoksifikasi di hati. dan treonin. Secara medis. lisin. prolin. Beberapa asam amino ini secara umum mempunyai kegunaan besar untuk kesehatan manusia. sistin digunakan untuk memperoduksi hati dan mencegah atau meredakan penyakit yang berbahaya (Cat 2000). asam aspartat. valin. Sistin merupakan penghasil taurin yaitu suatu komponen gliutathion. Usus sangat membutuhkan glutamat. leusin. alkohol dan unsur-unsur lain yang dapat membahayakan tubuh. sistin. menginaktifkan radikal bebas. phenilalanin. Keterkaitan dengan pengunaan tambelo sebagai obat tradisional maka ditinjau dari komposisi asam amino yang diperoleh dapat dijelaskan bahwa umumnya asam-asam amino ini mempunyai kegunaan besar bagi kesehatan manusia.

45 diperlukan untuk pembuatan creatine monohydrate di dalam tubuh. Histidin berperan penting dalam pemeliharaan dan pembuatan glial sel saraf yang disebut oligo-dendrocytes (selendang atau pembungkus) dan mencegah kerusakan otak dan jaringan saraf dalam tulang punggung. Metionin juga dapat berperan dalam menstabilkan lemak. membuat pencernaan menjadi lebih baik. Histidin merupakan suatu prekusor asam amino non esensial. dan membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). Leusin bermanfaat . Penambahan valin harus selalu dikombinasikan dengan isoleusin dan leusin pada rasio miligram (Bonderud 2011). Kekurangan metionin dapat menyebabkan akumulasi lemak di hati. metionin digunakan untuk gangguan depresi. membantu dalam metabolisme gula dan asam organi. mengatur gula darah. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. memperkuat sistem kekebalan tubuh dengan memproduksi antibodi. Secara medis. lemah. yang mana histidin akan membentuk sistem imun sebagai respon terhadap suatu reaksi alergi. Isoleusin bermanfaat dalam mempercepat penyembuhan luka. dan meningkatkan produksi hormon pertumbuhan. dan sebagai antioksidan. mengatur energi. memperbaiki jaringan otot. menurunkan kadar gula darah. dan membantu dalam pembentukan hemoglobin serta merupakan pertahanan utama tubuh untuk melawan infeksi akibat luka. meningkatkan daya tahan tubuh. Secara medis. Leusin bermanfaat dalam pengaturan gula darah. Alanin merupakan sebuah sumber penting energi untuk jaringan otot. histidin digunakan dalam mengobati radang sendi dan ketulian saraf. otak dan sistem saraf pusat. membantu proses pemulihan. dan edema. pertumbuhan yang lambat. yaitu suatu campuran yang penting untuk menghasilkan energi dan pertumbuhan otot dan pergerakan tubuh. tulang dan otot serta membantu dalam penyembuhan luka. Valin merupakan salah satu dari tiga asam amino rantai cabang (yang lain adalah leusin dan isoleusin) yang meningkatkan energi. dan penyakit hati atau liver (Cat 2006). luka mengkerut. radang sendi. Valin bermanfaat dalam pertumbuhan dan perbaikan jaringan otot serta menjaga keseimbangan nitrogen dan mengatur penggunaan glukosa. Histidin di dalam tubuh diperlukan untuk pertumbuhan dan perbaikan dari semua jenis jaringan.

Arginin berperan dalam membantu detoksiifikasi hati pada sirosis hati dan fatty liver. menghambat pertumbuhan sel tumor dan kanker serta membantu pelepasan hormon pertumbuhan (Supamas 2011). kerontokan rambut. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. Tabel 5 menunjukkan skor kimia asam amino esensial tambelo dengan cara melakukan perbandingan antara asam amino protein esensial tambelo dengan . testosteron. untuk penyerapan kalsium serta pembentukan tulang dan pertumbuhan otot seperti mobilisasi lemak untuk digunakan sebagai energi. dan karbohidrat. hormon insulin). Kekurangan phenilalanin akan menyebabkan tubuh lemah. seperti sakit liver membutuhkan makanan yang tinggi protein dan karbohidrat serta lemak dengan kadar yang sedang karena hal ini akan meringankan kerja hati untuk memperoleh energi yang besar untuk aktivitasnya (Carroli et al. Apabila fungsi hati terganggu maka akan berdampak pada terganggunya proses metabolisme tersebut. lemak. membantu kerja hati dan fungsi lipotropiknya. mengatur energi serta membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). membantu dalam penyembuhan luka. Lisin juga bermanfaat dalam menjaga keseimbangan nitrogen serta membantu menjaga badan pada saat stress berat dan kondisi yang melelahkan. Arginin penting untuk kesehatan reproduksi pria karena 80% cairan semen terdiri dari arginin. tulang dan otot . Kekurangan treonin akan menyebabkan warna kulit menjadi tidak normal. Lisin digunakan di dalam tubuh kerusakan hati dan pertumbuhan terhambat. Fenilalanin secara medis digunakan untuk perawatan radang sendi dan depresi. 2006). tidak berselera dan hilang kosentrasi (Cat 2006). Kekurangan lisin akan menyebabkan kekacauan enzim. Treonin bermanfaat dalam mencegah penumpukan lemak di hati. enzim. hormone (GH. Penderita gangguan hati. Hati mempunyai fungsi untuk melakukan metabolisme protein. lesu. Lisin juga diperlukan dalam membentuk antibody. meningkatkan sistem imun. kolagen dan untuk memperbaiki jaringan yang rusak dan juga membantu dalam membangun protein otot yang baru. kehilangan energi. dan manfaatnya untuk cardiovascular meliputi pemeliharaan kesehatan pembuluh darah.46 dalam pengaturan gula darah. berat badan menurun.

75 76. Asam palmitoleat adalah salah satu jenis .87%.87% dan 21.65 30.32 13.94 37. sehingga asam amino esensial perlu difortifikasi untuk meningkatkan nilai gizi protein tambelo.63% sehingga diperoleh skor kimia protein tambelo sebesar 19. Analisis asam lemak dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas untuk mengetahui komposisi asam lemak yang terdapat pada tambelo.47 referensi dari FAO/WHO (1991).32 Isoleusin Leusin Lisin Metionin Fenilalanin + tirosin Treonin Valin Keterangan : tritofan bukan asam amino pembatas sehingga tidak dilakukan analisis 4. Berdasarkan analisis kualitatif.22 21. Hal ini berarti bahwa protein yang terkadung dalam tambelo dapat dimanfaatkan oleh tubuh hanya sekitar 19.63 60.4 Kandungan asam lemak tambelo Asam lemak adalah asam organik yang terdapat sebagai ester trigliserida atau lemak.95 29. Kromatogram standar asam lemak disajikan pada Lampiran 5. yang terdiri dari 7 jenis asam lemak jenuh (SFA). Komposisi asam lemak dalam tambelo dapat dilihat pada Tabel 6.41 37.16 Referesi FAO (1991) (mg/g prot) 40 70 55 35 60 40 50 Skor kimia amino esensial (%) 19. sedangkan kromatogram asam lemak daging tambelo disajikan pada Lampiran 6. Berdasarkan hasil pengamatan. Jenis asam lemak yang banyak terkandung di dalam serbuk tambelo adalah asam palmitoleat (C16:1) (14. 5 jenis asam lemak tidak jenuh tunggal atau monounsaturated fatty acid (MUFA) dan 3 jenis asam lemak jenuh ganda atau polyunsaturated fatty acid (PUFA). keragaman asam lemak pada serbuk tambelo dapat teridentifikasi 15 jenis asam lemak.55 %). diketahui bahwa angka terendah ditunjukkan oleh asam amino isoleusin dan treonin masingmasing sebesar 19. Tabel 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo Asam amino Kadar dalam tambelo (mg/g prot) 7.33 8.87% dengan asam amino pembatas yang utama berada pada isoleusin.1.87 41.23 42.09 22. baik yang berasal dari hewan atau tumbuhan.

Asam lemak tak jenuh tunggal secara umum memiliki efek yang menguntungkan terhadap kadar kolesterol dalam darah.11. Asam lemak ini tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA).10 0. minyak biji kapas.13 0.04 0.29 Asam lemak Hasil (%berat minyak) Asam Lemak Tak Jenuh Asam oleat (omega-9) yang terkandung di dalam tambelo kering sebesar 1. asam lemak tak jenuh tak tunggal (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi popular (Achadi 2010). terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh.14-Eikosatrienoat (C20:3ω6) EPA (C20:4ω3) Arakidonat (20:4ω6) 5. minyak kedelai.66 3.48 asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) yang merupakan jenis asam lemak yang memiliki satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya.94 0. Asam oleat memiliki sifat lebih stabil dan lebih baik perannya dibandingkan PUFA (PolyUnsaturated Fatty Acid).33 14. Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) memiliki .94%.13 0.24 1. dan canola. minyak kacang tanah.22 0. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. Tabel 6 Komposisi asam lemak dalam tambelo No Asam Lemak Jenuh 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Miristat (C14:0) Pentadekanoat (C15:0) Palmitat (C16:0) Heptadekanoat (C17:0) Stearat (C18:0) Arakidat (C20:0) Heneikosanoat acid (C21:0) Miristoleat (C14:1) Palmitoleat (C16:1) Cis-10-Heptadekanoat (C17:1) Oleat (C18:1ω9) Linolenat (C18:3ω3) Cis-8.80 0.10 13. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah.69 0.55 0. meskipun PUFA dapat menurunkan kolesterol LDL.80 0.

fungsi imun. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein) serta dapat menurunkan produksi trigliserida dan apolipoprotein beta di dalam hati (Achadi 2010). mangan. asam eikosatrienoat (C20:3ω6). zink. Unsur kalsium (Ca) juga dianalisis bukan karena sebagai antioksidan. sedangkan MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. Kandungan mineral pada tambelo diuji karena peranannya sebagai antioksidan dalam sistem pertahanan tubuh terhadap reaksi oksidasi radikal bebas dan mineral ini tergabung dalam enzim antioksidan yang berperan melindungi membran sel dan komponen dalam sitosol. dan fluor hanya terdapat dalam tubuh dalam jumlah kecil saja. dan integritas membran sel. iodium. asam arakhidonat (C20:4 ω6). Jenis-jenis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) yang terkandung dalam tambelu kering.5 Kandungan mineral tambelo Sekitar 96% bahan makanan terdiri dari bahan organik dan air. yaitu asam linoleat (C18:3ω3). Kekurangan Kalsium akan menyebabkan osteoporosis dan .46 ppm. mempertahankan fungsi. seperti besi. Unsur mineral lain.1. Unsur-unsur ini terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup besar dan karenanya disebut unsur mineral makro. Sampai sekarang telah diketahui ada empat belas unsur mineral yang berbeda jenisnya diperlukan manusia agar memiliki kesehatan dan pertumbuhan yang baik. Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo disajikan pada Tabel 7. Sisanya terdiri dari unsur-unsur mineral. dan asam eikosapentanoat/EPA (C20:4ω3). Hasil penelitian yang dilakukan oleh Mensink (1987) diacu dalam Achadi (2010) menunjukkan bahwa MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. kobalt. karena itu disebut trace element atau mineral mikro. tembaga. Di dalam tubuh unsur mineral berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. 4.49 kelemahan. Asam lemak tak jenuh ganda berperan penting dalam transpor dan metabolisme lemak. Kadar Kalsium dari tambelo adalah 3532. tetapi karena perannya yang sangat penting untuk pembentukan tulang dan gigi terutama pada masa pertumbuhan dan ibu hamil. yaitu dapat menurunkan HDL.

Secara kimia.40 3. 6. Kandungan seng (Zn) pada tambelo segar adalah 12. Almatsier 2006). 2.05 <0.41 626. 9. besi kehilangan tiga elektron sehingga memiliki tiga sisa muatan positif (Fe3+/feri) karena dapat berada dalam dua bentuk ion ini. Tabel 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo No Parameter Hasil (ppm) Mineral Makro Kalsium (Ca) 1.02 435. besi kehilangan dua elektron sehingga memiliki dua sisa muatan positif (Fe2+ /fero). 3. 10. Antioksidan enzimatis bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal baru (Marks et al. Zat besi juga berperan dalam imunitas dalam pembentukkan sel-sel limfosit. 11.06 0. Klorida (Cl Kalium (K) Magnesium (Mg) Mangan (Mn) Natrium (Na) 3532. Penyerapan Ca akan dipermudah dengan adanya vitamin D (Muchtadi 2009).45 12. 2000.98 2363. Seng (Zn) Tembaga (Cu) Fosfor (P) Selenium (Se) Peranan zat besi (Fe) berhubungan dengan kemampuannya dalam reaksi oksidasi dan reduksi. Winarsi 2007). Dalam keadaan tereduksi. Seng merupakan mineral penting pada berbagai sistem enzim dan hormon.50 akan mempengaruhi mental dan juga menyebabkan osteomalasia.30 ppm.30 0. Aktivitas superoksida dismutase (SOD) dan katalase tergantung pada zat besi.46 5. Sebagai . besi berperan dalam respirasi sel. zat besi merupakan unsur yang sangat reaktif sehingga mampu berinteraksi dengan oksigen. Zat besi sebagian besar berada dalam hemoglobin. 8. yaitu sebagai kofaktor bagi enzim-enzim yang terlibat dalam reaksi oksidasi reduksi (FAO/WHO 2001.18 Mineral Mikro Besi (Fe) 7. dalam keadaan teroksidasi.42 1373. 5. 4.

Mineral Zn juga merupakan komponen enzim yang berperan dalam perbaikan asam nukleat (Harris diacu dalam Ridwan 1997). yaitu 0. Kemampuan tubuh seseorang untuk menyerap seng menurun sesuai dengan pertambahan usia sehingga penting untuk meningkatkan intake mineral seng ketika usia 40-an. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Jika tubuh kekurangan tembaga maka akan terjadi peningkatan peroksida lipid (Harris diacu dalam Ridwan 1997). dan luka dapat menghabiskan suplai seng dalam tubuh (Wirahadikusumah 1985). meningkatkan aktivitas enzim antioksidan.98 ppm. proliferasi. Peran tembaga sebagai kofaktor maupun sebagai pengatur enzim SOD cukup besar. Keadaan tubuh yang mengalami stres karena trauma. Mineral Zn sebagai komponen protein yang mempunyai gugus SH-(metallothionine) berperan sebagai pembersih radikal bebas. yaitu ion superoksida. Selenium (Se) adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas dan merupakan bagian penting enzim glutation peroksidase. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. kadar IgG antiTT. Mineral Cu berperan melalui aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD). Angka kecukupan Se per hari yang dianjurkan oleh Widya Nasional Pangan dan Gizi (2004) adalah 5-20 µg untuk bayi dan anak di bawah 10 tahun dan 20-30 µg untuk pria dan wanita berumur di atas 10 tahun sebesar.51 salah satu mineral imunitas yang berfungsi untuk maturasi. Hasil penelitian Winarsi (2004) yang memberikan minuman susu skim yang diperkaya dengan isoflavon kedelai sebesar 100 mg dan 8 mg ZnSO4 yang diberikan setiap hari selama 2 bulan pada wanita premenopause diketahui dapat menurunkan sindrom premenopause. Hasil analisis diketahui bahwa kandungan tembaga (Cu) yang terdapat pada tambelo nilainya kecil. dan aktivasi sel T. Enzim superoksida dismutase mempunyai substrat spesifik. Khusus ibu hamil dan . Seng (Zn) berperan dalam sistem pertahanan tubuh dengan cara berkonjugasi dengan thiol sehingga menghambat pembentukan ion superoksida. yang dapat menghancurkan peroksida yang terbentuk dari hasil oksidasi lemak di dalam tubuh (Mucthadi D 2009). diferensiasi. dan hormon timulin 1. terkena polusi lingkungan.

Besarnya rendemen ekstrak metanol diduga berkaitan dengan sifat pelarut metanol yang memiliki kemampuan pemisahan komponen dari bahan yang lebih baik. sebagian lemak serta tanin yang menyebabkan hasil ekstraksi metanol cukup kuat. pelarut metanol memiliki nilai kostanta dielektrik tinggi jika dibandingkan dengan pelarut yang lain sehingga pelarut metanol dapat membuka dinding sel yang mengakibatkan hampir semua senyawa dapat tertarik keluar dari dalam sel. 4. Penelitian ini dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi yang dilanjutkan dengan partisi cair-cair. Selain itu. Tabel 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Uji Fitokimia Alkaloid Flavonoid Phenol Hidroquinon Steroid Triterpenoid Saponin Tanin n-Heksana + + + + + Jenis Pelarut Etil Asetat + + + + + Metanol + + + + + - . 4.19% ) dan etil asetat (2.18 ppm.86%). sedangkan ekstrak tambelo yang mengandung rendamen relatif kecil adalah ekstrak n-heksana (2.52 menyusui mendapat tambahan. Berdasarkan hasil rendemen ekstrak tambelo tersebut. Rendemen ekstrak tambelo yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5. terbukti bahwa tambelo mengandung berbagai senyawa dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda.1 Rendemen ekstrak tambelo Ekstraksi merupakan salah satu cara pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu bahan. Hal ini sesuai dengan pernyataan Heath dan Reineccius (1986) bahwa metanol mampu mengekstrak senyawa organik. Kandungan fitokimia ekstrak tambelo dapat dilihat pada Tabel 8.72%.2.2.2 Penelitian Tahap Kedua 4.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Analisis fitokimia adalah salah satu cara untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder pada suatu tanaman atau hewan. masing-masing sebanyak 5 dan 10 µg/orang/hari (Winarno 2008). Kadar Selenium di dalam tambelo adalah 0.

polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid. katekin. gula. meskipun beberapa pseudoalkaloida dan protoalkaloida yang larut dalam air. ataupun jamur dan merupakan produk yang dihasilkan dari proses metabolisme sekunder. hewan.500 jenis alkaloid (Harborne 1987). Pada umumnya. isoflavon. karotenoid. Berdasarkan susunan ini dapat dihasilkan 3 jenis struktur. alkaloid bebas basa hanya larut dalam pelarut organic. dan kalkon. tanin. turunan asam sinamat. Menurut Pratt dan Hudson (1990). dan glikosida (Harborne 1987). Kelima belas atom karbon tersebut membentuk dua cincin aromatik (C6) yang terikat pada rantai propana (C3) sehingga membentuk susunan C6-C3-C6. Ekstrak etil asetat tambelo (Tabel 8) diketahui mengandung senyawa flavonoid yang tinggi. dan air (Harborne 1987). Kemudian dilaporkan juga senyawa flavonoid dari stereospermum . saat ini diketahui sebanyak 5. Alkaloid adalah senyawa alami amina. Garam alkaloida kuarterner sangat larut dalam air (Sastrohamidjojo 1996). aseton. bahwa ekstrak metanol memiliki senyawa alkaloid yang sangat tinggi. Flavonoid merupakan senyawa polar yang mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol. Hal ini diduga senyawa alkaloid merupakan senyawa polar. Cos et al. baik pada tanaman. metanol. isoflavonoid (1’B-3C). yang memiliki aktivitas antioksidan meliputi flavon. dimetilformamida. asam amino. dimetilsulfoksida. Pelarut yang bersifat polar mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener. butanol. dan 1 neoflavonoid (1’B-4C). karena senyawa yang terbawa pada proses ekstraksi adalah senyawa yang mempunyai polaritas sesuai dengan pelarutnya yaitu pelarut metanol. komponen fenolik. Hal ini karena pelarut etil asetat bersifat semi polar sehingga memiliki kemampuan melarutkan senyawa polar dan non polar.53 Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kasar tambelo. (1998) melaporkan bahwa beberapa senyawa flavonoid bersifat antioksidan dan dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase maupun reaksi superoksida. Khopkar (2003) berpendapat bahwa bahan dan senyawa kimia akan mudah larut pada pelarut yang relatif sama kepolarannya. yaitu flavonoid (1’B-2C). Flavonoid merupakan golongan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 karbon sebagai kerangka dasarnya. flavonol.

Berdasarkan hasil uji fitokimia. Perubahan warna yang mengindikasikan adanya reaksi peredaman radikal bebas DPPH oleh senyawa antioksidan baik pada larutan ekstrak tambelo maupun pada larutan BHT dan vitamin super ester C. Pengukuran absorbansi dilakukan pada setiap sampel antioksidan yang dibuat dengan berbagai konsentrasi. . Peredaman (inhibisi) terhadap radikal bebas dinyatakan dalam persen. Vattem dan Shetty 2006).2. Senyawa DDPH adalah suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain membentuk senyawa yang lebih stabil dan dapat bereaksi dengan atom hidrogen membentuk DPPH tereduksi (diphenylpicrylhydrazine) yang stabil. Ada beberapa steroid seperti.54 personatum selain bersifat antioksidan. sapogenin. fukosterol. diisolasi dari sumber daya hayati laut bersifat non toksik dan mempunyai khasiat menurunkan kolesterol dalam darah dan mendorong aktivitas antidiabetes (Bhakuni et al. glikosida jantung dan vitamin D. Secara teoritis. semakin tinggi kosentrasi antioksidan yang ditambahkan pada larutan DPPH. ekstrak n-heksana tambelo mengandung senyawa steroid yang tinggi. Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid yang dapat diklasifikasikan menjadi steroid dengan atom karbon tidak lebih dari 21 yaitu sterol. Perubahan warna pada ekstrak tambelo dapat dilihat pada Lampiran 7. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana bersifat non polar. Besarnya daya peredaman radikal bebas DPPH maka dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm. 4. 2006).3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH (1. Suatu senyawa dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya ditandai dengan perubahan warna ungu menjadi kuning pucat (Molyneux 2004).1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Molyneux 2004. maka nilai absorbansi akan semakin turun karena warna larutan bertambah kuning. Steroid alami berasal dari berbagai transformasi kimia dua triterpena yaitu lanosterol dan sikloartenol. senyawa tersebut juga dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase (Kumar et al. Senyawa steroid dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat (Harbone 1987). 2005).

02 51. sedangkan .00 ppm.86 ppm.55 dan aktivitas antioksidan dinyatakan dengan IC50 (Inhibition Concentration) yang menunjukkan kosentrasi sampel antioksidan yang dapat menghambat atau meredam aktivitas antioksidan yang semakin tinggi atau dengan kata lain IC50 sebagai kosentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH. BHT.83 84.27 ppm jauh leih ebih kecil dibandingkan dengan ketiga ekstrak kasar tambelo Tabel 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55. dan vitamin super ester C disajikan pada Gambar 12.78 81.19 IC50 (ppm) 3.77 29.51 27. 300 Rata-rata IC50 (ppm) 250 200 150 100 50 3.53 Gambar 12 Nilai IC50 dari ekstrak tambelo. Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.21 262.27 15 3.44 63. dengan nilai rata-rata IC50 sebesar 15.16 10 ppm 94. dan vitamin super ester C.35 ppm dan vitamin super ester C yaitu 8. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Molyneux 2004).01 4.27 Berdasarkan Gambar 12. Ekstrak metanol tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 85.35 8. menunjukkan ekstrak etil asetat tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dari kedua ekstrak yang lainnya. Tabel 9 memperlihatkan bahwa nilai aktivitas antioksidan pada BHT dengan nilai IC50 3.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.56 15. BHT.35 0 BHT Vitamin n-heksana ester super C Sampel Etil asetat Metanol 8.

Hanani et al. Rendahnya aktivitas antioksidan ekstrak n- heksana diduga karena pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak nheksana tambelo dan kristal DPPH pada penelitian ini adalah metanol yang bersifat polar. . (2005) menyatakan bahwa presentase penghambatan (% inhibisi) terhadap aktivitas radikal bebas akan ikut meningkat seiring dengan meningkatnya kosentrasi. Kombinasi yang digunakan adalah yang terdiri dari pelarut kloroform : metanol (9:1). Sebelum dilakukan fraksinasi terhadap ekstrak kasar etil asetat. baik pada kosentrasi ekstrak maupun pada kosentrasi standar (BHT dan vitamin super ester C). 4. Eluen ini berfungsi sebagai fase gerak saat fraksinasi. yaitu etil asetat. Eluen yang digunakan adalah n-heksana. n-heksana : etil asetat (1:1).56 ekstrak n-heksana tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 262. dan etanol. etil asetat. Bois (1958) diacu dalam Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm. Perhitungan persen inhibisi IC50 dan grafik regresi linear pada BHT. metanol. kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm. sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 100-150 ppm.77 ppm.4 Fraksi ekstrak terpilih Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. dilakukan pencarian eluen terlebih dahulu dengan menggunakan KLT. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo dapat disajikan pada Lampiran 8. Hal ini menyebabkan komponen bioaktif yang bersifat non polar pada ekstrak n-heksana tidak terlarut sepenuhnya pada pelarut tersebut sehingga berpengaruh pada nilai IC50. dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 150-210 ppm. Eluen dengan pemisahan terbaik kemudian dikombinasikan satu dengan yang lainnya dengan berbagai perbandingan. Pengujian aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak kasar tambelo memiliki kekuatan penghambatan yang berbeda-berbeda antara yang satu dengan yang lainnya dan menghasilkan hubungan antara kosentrasi ekstrak kasar yang digunakan dengan persen inhibisinya. dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada kromatografi lapis tipis (KLT). kloroform.2.

flavonoid. alkaloid dan fenol hidrokuinon.97 Rf8 = 7. Berdasarkan hasil fraksinasi tersebut (Gambar 12).5 = 0.48 Rf3 = 3. diketahui bahwa pada fraksi 9 dan fraksi 10 mengandung senyawa triterpenoid.1/8. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang disajikan pada Lampiran 9b.3/8. penggunaan kloroform : metanol sebagai eluen pada perbandingan 15 : 1 sampai 3 : 1 dapat memisahkan senyawa flavonoid dengan baik.5 = 0.5 = 0. Menurut Markam (1988). Hasil pengecekan terhadap fraksi tersebut.1/8.4/8.5 = 0. diduga terdapat sembilan jenis senyawa pada ekstrak etil asetat tambelo. Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) disajikan pada Gambar 12. dan n-heksana : etil asetat (8:2).2.5 = 0.5 = 0. diperoleh eluen terbaik yang terdiri dari campuran kloroform : metanol (9 : 1). Kesepuluh fraksi tersebut kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dan uji fitokimia.5 = 0.5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Berdasarkan hasil fraksinasi kolom.4 Rf2 = 2.1/8. diduga bahwa masing-masing fraksi telah menunjukkan adanya 1 spot dengan Rf yang berbeda. Rf9 = 8. Rendamen fraksi terbesar terdapat pada fraksi 1 (0. Profil pola pemisahan senyawa dengan eluen tersebut disajikan pada Lampiran 9a. Data rendamen hasil kolom disajikan pada Lampiran 10.06 Gambar 12 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) 4. Hal ini menunjukkan bahwa dalam fraksi tersebut mengandung senyawa yang .57 kloroform : metanol (17:3).5/8. Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan.84 Rf7 = 7/8.65 Rf4 = 4.25 Rf1 = 0.74 Rf5 = 5. steroid. Berdasarkan hasil fraksinasi kolom.15748%) dan rendamen terkecil pada fraksi 6 (0. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang kemudian dilakukan pengujian fitokimia. Berdasarkan analisis dengan menggunakan KLT.2/8.5 = 0.00156%).82 Rf6 = 6.5/8.5 = 0.

Gambar 14 memperlihatkan bahwa fraksi 9 memiliki daya inhibisi yang setara dengan vitamin super ester C. Kandungan fitokimia fraksi tambelo disajikan pada Tabel 10. Tabel 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Kelompok Senyawa Nama Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Alkaloid + + + + + + + + + + Flavonoid + + + + + + + + + + Phenol Hidroquinon + + + + + + Steroid + + + + + + + + + + Triterpenoid + + + + + + + + + + Saponin + + + + + + + Tanin - 4. diketahui bahwa aktivitas antioksidan fraksi kesembilan mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Berdasarkan hasil pengujian. terbukti terjadi perubahan warna dari ungu menjadi kuning cerah dengan nilai IC50 8. disusul dengan fraksi 10 dengan nilai IC50 28. Hal ini memungkinkan adanya senyawa aktif dalam faksi 9 yang berpotensi sebagai obat antioksidan. Hal ini berkaitan dengan fungsi proses fraksinasi yang bertujuan untuk memperoleh pola pemisahan yang sempurna.91 ppm.6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo disajikan pada Gambar 13. Perhitungan persen inhibisi dari hasil fraksinasi dapat lihat pada Lampiran 12.58 memungkinkan dapat menghambat radikal bebas. fraksi yang didapat lebih murni senyawa aktif dan lebih banyak terisolasi.2. .87 ppm. Aktivitas antioksidan pada fraksi tambelo lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak tambelo.

32 2.59 120 Rata-rata IC50 100 80 60 40 20 0 15 103.49 63. Gambar 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH’ Keterangan: RH = asam lemak tidak jenuh R = radikal bebas .50 61. Hasil reaksi tersebut berupa DPPH tereduksi (yang tidak reaktif lagi karena telah mendapatkan donor hidrogen (Molyneux 2004).94 86. Senyawa DPPH merupakan radikal bebas yang bersifat stabil sehingga dapat bereaksi dengan atom hidrogen yang berasal dari suatu senyawa antioksidan.43 2.87 1. Jika semua elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan.51 4.29 43. Pengujian dengan menggunakan DPPH merupakan salah satu metode yang sederhana.68 4.40 58.06 8.63 5.90 28.69 Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi etil 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 asetat Estrak kasar dan Hasil Fraksi Gambar 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo Sebuah senyawa dapat disebut sebagai antioksidan bila senyawa tersebut dapat mendonorkan atom hidrogennya dengan cepat sehingga dapat menghambat terjadinya pembentukan radikal bebas (Sauriasari 2006). Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen. maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil.17 2. akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH.21 76. Mekanisme penghambatan radikal DPPH dapat dilihat pada Gambar 15.91 4.87 74.64 5.04 3. Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen.

Instrumentasi LC-MS terdiri atas inlet-LC. sesquiterpenoic acid glyceride. . Struktur senyawa tersebut disajikan pada Gambar 16.2. (a) Komponen 1 Farnesic acid glyceride (b) (c) Komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride (d) Komponen 3 Labdane diterpenoid Gambar 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan massa 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid. massa analyzer. Data spektrum sampel fraksi 9 dapat dilihat pada Lampiran 11. detektor. Ketiga komponen tersebut tergolong dalam kelompok senyawa terpenoid.Analisis senyawa menggunakan LC-MS dilakukan pada fraksi terbaik (fraksi 9). Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).60 4.7 Identifikasi senyawa fraksi teraktif Liquid chromatography mass spectrofotometer (LC-MS) merupakan metode analisis kuantitatif yang merupakan kombinasi antara kromatografi cair dengan spektroskopi massa. Berdasarkan analisis LC-MS sampel fraksi 9 dengan berat molekul 352. Analisi LC/MS yang dilakukan secara electrospray ionisation. sumber ion. dan labdane diterpenoid. instrumen kontrol dan proses data. terdapat empat struktur senyawa yang terbagi atas tiga komponen. yaitu farnesic acid glyceride. tekanan permukaan.

Kedua komponen tersebut memiliki aktivitas sebagai antibiotik dan antifeedant. terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. (1980) juga melaporkan bahwa nudibranch jenis A. Terpenoid yang disebut juga isoprenoid. Seskuiterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit isoprena yang terdiri dari kerangka asiklik dan bisiklik dengan kerangka dasar naftalen. yang dapat dikelompokkan menjadi monoterpen (C10). inhibitor tumor. dan politerpen (≥ 40) (Sirait 2007). dan glyceryl ether. Pendapat ini juga didukung oleh Marero et al. Senyawasenyawa tersebut memiliki aktivitas sitotoksik yang menghambat sel kanker usus besar pada manusia. antifeedant serangga. Labdane merupakan diterpen bisiklik alami yang membentuk inti struktural untuk berbagai macam produk alami yang dikenal sebagai labdanes atau diterpenes labdane. Senyawa-senyawa seskuiterpenoid tersebut diturunkan dari cis farnesil pirofosfat dan trans farnesil pirofosfat melalui reaksi siklisasi dan reaksi sekunder lainnya. Diterpenoid merupakan senyawa yang mempunyai 20 atom karbon dan dibangun oleh 4 unit isoprena. podolakton inhibitor pertumbuhan tanaman. seskuiterpen (C15).61 Terpenoid adalah senyawa alam yang terbentuk dengan proses biosintetis.3-dihydroxypropilfarnesate dan memiliki dua turunan monoasetoksi. antibiotik dan toksin serta regulator pertumbuhan tanaman dan pemanis. komponen 1 farnesic acid glyceride dan komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride termasuk di dalam kelompok senyawa seskuiterpenoid. antimikroba. Senyawa ini mempunyai bioaktivitas yang cukup luas yaitu sebagai hormon pertumbuhan tanaman. Andersen et al. hormon. Berdasarkan pengelompokan dari senyawa terpenoid tersebut. (2003) yang melaporkan bahwa hasil isolasi dari pulmonate Trimusculus peruvianus menghasilkan empat senyawa labdane diterpens melalui jalur oksidasi. monocyclofarnesic acid glyceride. tetraterpen (40). diterpen (C20). di antaranya adalah sebagai antifeedant. Beberapa publikasi tentang ketiga komponen seperti yang dilaporkan oleh Gustafson et al. (1983) bahwa di dalam ekstrak nudibranch Archidoris montereyensis mengandung senyawa-senyawa diterpenoic acid glyceride. Secara umum senyawa seskuiterpenoid ini mempunyai bioaktifitas yang cukup besar. triterpen (C30). odheri menghasilkan senyawa 2. . drimane sesquiterpenoic acid glyceride.

tidak terdeteksi. trisiklik. Senyawa diterpenoid dapat berbentuk asiklik. senyawa flavonoid. antifouling. dan tetrasiklik.62 senyawa pemanis. dan anti karsinogen. . Berdasarkan hasil analisis LC-MS. bisiklik. Tata nama yang digunakan lebih banyak adalah nama trivial (Sirait 2007). hal ini diduga bahwa senyawa flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak tambelo termasuk dalam kelompok senyawa volatil sehingga ada kemungkinan bahwa senyawa flavonoid yang berperan sebagai senyawa antioksidan di dalam ekstrak tambelo adalah kelompok senyawa volatil.

abu 2. Daging tambelo mengandung 17 jenis asam amino dan 15 jenis asam lemak.63 5 SIMPULAN DAN SARAN 5. triterpenoid dan saponin.2 Saran Perlu dilakukan pemurnian lagi dengan menggunakan kromatografi kolom dan untuk memperoleh satu struktur senyawa aktif digunakan nuclear magnetik resonance (NMR).77%. lemak 0.88%.71%. Komposisi kimia tambelo kering adalah kadar air 6. Fraksi 9 menyerupai salah satu dari empat struktur senyawa yang dikelompokkan ke dalam tiga komponen. steroid. Fraksi 9 dari ekstrak etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan sebesar 8. lemak 14. .72%. flavonoid. protein 7. dan karbohidrat 30.45%.27%. 5.63%.1 Simpulan Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kimia tambelo segar terdiri dari air 82. Pada ke tiga ekstrak (n-heksana.07%. Rendemen tertinggi terdapat pada ekstrak metanol yaitu 5. yaitu farnesic acid glyceride. metanol) mengandung senyawa alkaloid. etil asetat. protein 42.27ppm). abu 5.87 ppm yang setara dengan vitamin super ester C (8. dan karbohidrat 7. sesquiterpenoic acid glyceride dan labdane diterpenoid. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC 50 sebesar 15 ppm.28%.21%.72%.

Associaton of Official Analytic Chemist Inc. Virginia. Awat DS. Ed. 2010. Christchurch: Marine Chemistry Group. USA. . hlm. Bhakuni DS.DAFTAR PUSTAKA Achadi EL. 17:97-104. berwarna. American Association of Cereal Chemist [AACC]. ____________. Gizi Indonesia. Amino acid: What is Valine. MarinLit-Marine Literature Database. 2008. Approved Methods of The American Association of Cereal Chemist. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 2005. ____________. Pelayanan gizi rumah sakit dan perkembangan ilmu serta teknologi. Dilengkapi: 4 gambar foto berwarna 10 x 12 inci. J. http://journeyingjames. 2011. produsen. http://www. 21:797-800. 2005. bersuara.com [08 Maret 2011]. Tetrahedron Lett. Prinsip dasar ilmu Gizi. 1984. 2011. Mayland. hlm. Betia J. [02 Sept 2011]. 302-308 Blunt JW. Hlm. Official Methods of Analysis (18 Edn). _________. Sum FW. Gizi dan kesehatan Masyarakat. Official Methods of Analysis of Association of official Analytical Chemical. USA. Almatsier S. Mayland. Department of Chemistry-University of Caterbury. Blunt DA. Vol 1. Farnesic acid glycerides from the nudibranch Archidoris odhneri. 14-104. Andersen RJ. Bioactive marine natural Product. 1994. USA :American Association of Cereal Chemist. New Delhi: Anamaya Publisher. [kaset audio]. Palawan’s Kinilaw na Tamilok. 2002.com/2011/01/palawans-kinilaw-na-tamilok/. Jakarta: PT. 1 video kaset: 2:50 menit. Version # vpcl 13. 1980. Palawan. hlm. Association of Official Analytical Chemist [AOAC]. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Ed ke-9. Rajagrafindo Persada. Journeyingjames. Association of Official Analytical Chemist Inc.5.wisegeek. 2005. 2009. Association of Official Analytical Chemist Inc. Official Methods of Analysis (18 Edn). 2006. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. 50-279. 20-319 Almatsier S. Bonderud D.

Reduce-it weight management program Diet and Nutrition (2011). Bangkok. Pengantar gizi kesehatan. Chem. Wray V. . 2008. 2008. Proksch P.co/tipsoz_solution/diet_utrition/nutrition/article. Porto Alegre. 2006. Handayani D. Ed ke-2. Arata D. http://www/conectique. Institut Pertanian Bogor. Schupp P. Effendi YH. Bandung: ITB press. purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrataes. www. 2006. [DSN]. Penentuan Logam Berat. Material Medika Indonesia. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Cat B. 67-90. Dewan Standarisasi Nasional.com [06 Maret 2011]. Di dalam: Allen JC. Arthur. Diktat. Iheringia. 2000. Human Vitamin and Mineral Requirement. 98:17-23. Nature 3-12. Zool. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. hlm. Editor. FAO/WHO. [29 Sept 2011]. Metode Pengujian Kimia Produk Perikanan. Edrada RA. Beasley CR. New York: Science Publishers. 1991. hlm. Tagliaro CH. Structure activity relationship of bioactive metabolites from some Indo-Pasific marine invertebrates. Bobbitt JM. Nat. newsletter@trulyhuge. Rancidity in Foods. Ebada SS. Coppen PP. 27-36. Gritter JR. Hamilton RJ. Effect of threonine deficiency on changes in enzyme activity and liver fat deposition with time.Nutrition 1:502-506. Filho CS. 1991. Penemu: The United States of America as represented by the Secretary of Agriculture. Griffin et al. Proksch P. Seasonal abundance of the shipworm Neoteredo reynei (Bivalvia.65 Carroli C. E Schwarting. Thailand. SNI 01-2362-1991. 17 Mei 1994. Dietary Amino Acids Benefits. Report of a joint FAO/WHO xpert consultation. 1983. Pengantar Kromatografi. Sér. 21: 251.254. Amino acid protein suplemen. Bogor: Fakultas Pertanian. Balbin-Oliveros M. 2001. Padmawinata K. The use of antioxidants. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. Dena CC.php?article_id=3160. Selenium untuk kekebalan tubuh. Industrial alkaline protease from shipworm bacterium. Roma: Food and Nutrition Division. 2002. Paten 5 512 749. Conectique. penerjemah. Protocols: methods for isolation. J. 1995. US Paten. Edrada RA. Teredinidae) in mangrove driftwood from a northern Brazilian beach. Prod.. Lin W.

Jenis dan jumlah konsumsi tambelo. J. Jakarta: UI Press. Soediro S. Lemak dan Minyak Pangan. 36:3090-2097. Penuntun Cara Modern Menaganalisis Tumbuhan. Deaton BJ. dari Kepulauan Seribu. 1996. 2006. 2003. 2005. hlm. Di dalam: Allen JC.unila. Scheuer PJ. Chemical studies of British Colombia Nudibranchs. Terjemahan dari Phytochemical method. Pharm. Gizi dan Pangan 1:1-12. Driskel JA. 41:1101-1108. Andersen RJ 1985. Pangan Gizi dan Pertanian. Okuda. hlm 1-20. Handayani D. HB. Ketaren S. Chem. 17-18 November 2008. Apama P. Free radical scavanging and xanthine oksidase inhibitory constituens from Stereospermum personatun. Hardinsyah. 2008. J Nat Prod 68:1611-1621. Harper LJ. Hamman MT. Sumule A. Lampung. Dunbar DC. Org. penerjemah. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. Hamilton RJ. J. Publ. Dachriyanus. Papua. Hanani E. editor. . Flavor Chemistry and Technology. Ali AZ. 1987. http://lemlit. Majalah Ilmu Kefarmasian. J. Reineccius. Kumar US. G. 1986. Bandung: ITB. Ed. Jakarta: UI-Press. 61: 6594. 2:127-133. Heath. * Khopkar SM. Hamilton RJ. Tetrahedron. New York: Van Nostrand Reinhold Comp. siput dan kerang oleh penduduk di kawasan Muara Mimika. 30-69. Kagawa H. Kahalalides : bioactive peptides from marine mollusk Elysia rufescens and its algal diet Bryopsis sp. Rao JM. Metode Fitokimia.66 Gustafson K. Terjemahan dari: Food Nutrition and Agriculture. Mun’im A. Two new flavonoids and other constituents in licorice roots: their relative astringency and radical scavenging effect. Rao RJ. Jakarta: Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. 1988. 1988. Konsep Dasar Kimia Analitik. Bull. Padmawinata K. Isolasi dan karakteristik senyawa antibakteri epidioksi sterol dari spon laut Petroia Nigrans. 2006. Rancidity in Food.ac. Otto CS. Letsoin J. Sekarini R. Harbone JB.id/file/arsip [12 April 2009]. 1986. The chemistry of ranciditry in food. 1983. Hatano TH. Reddy SV. Asal Sumatera Barat. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. Chem. Suhardjo. Ke-2. penerjemah. Sayuti N. New York: Applied Science Publisher. Tiwari AK. Yasuhara TT.

Gizi Anti Penuaan Dini. Labdane diterpenoid with a new oxidation pattern from the marine pulmonate Trimusculus peruvianus. 1989.html [16 Juli 2009]. Cetakan I. The biology of wood-boring teredinid mollusca.67 Linder MC. Miyaoka H. Galeri-Galery. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. PapuaWeb. Advance in marne biology. Songklanakarin J. Biokimia nutrisi dan metabolisme.papuaweb. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Asam Lemak Omega 9 dan Manfaatnya bagi Kesehatan. Yonge M. http://www. hlm 45-67. Isolation and antioxidative assay of several marine macroalgae components within ethyl-acetate fraction. 26:211-219. 59:48-55 Muchtadi D. J. editor. 2007. penerjemah. Linder MC. Bandung: CV. Linder CM. Tetrahedron. Linder MC. Muchtadi TRM. Jakarta: UI Press. Sci. 2009. Kimura H. Vol ke-9. 1971. penerjemah. Alfabet. Jayapura: Fakultas Keguruan dan ilmu Pendidikan. Bogor: IPB Press. Parakkasi A. 14-55 hlm. 2003. New York: Academic Press Inc. Antimalarial activity of kalihinol a and realtive diterpenoids from the okinawan sponge. Shimomura M. [12 April 2009] Muchtadi D. Muchtadi D. Ekologi Kamoro-Bab IX. 1992. 2004. 2006. Nair NB. . 2004. Muller K. 1998.intiboga. Krisnawang H. http://www. Editor.20-56. editor. hlm. Mayabubun 2003. Persepsi Masyarakat Suku Kamoro terhadap tambelo Bactronophorus thoracites di Kabupaten Mimika [skripsi]. http://www. Di dalam: Russell FS. Evaluasi Nilai Gizi Pangan.htm.com/doc/isolation-seminternationalUGM/2558795 [ 02 Maret 2011]. Saraswathy M. Bandung: CV. Pengantar Ilmu Gizi. Munifah I. Jakarta: UI Press. Parakkasi A. Biokimia nutrisi dan metabolisme dengan pemakaian secara klinis. Technol 2004. Acanthrlla sp. Morrero D et al. Universitas Cenderawasih Jayapura.scribd. 2009. Alfabeta.com/omega9b.org/gb/foto/muller/ecology/09/index. Yamada Y. Tetrahedron 13467-13474 Molyneux P. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. 2000. hlm. 335-344.

Kustiariyah. 123-280. hlm. Antioxidant Recent Development. London: Elsevier Applied Science. Noyes Data Co. 1992. 2008. Food Antioxidant. Penapisan awal komponen bioaktif dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea) sebagai senyawa antioksidan. Hungary. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah (Anadara granosa) yang diambil dari Kabupaten Boalemo.chem-is-try. 2006. Hudson BJF. 1968. London and New York: Elsevier Applied Science. Bandung: ITB. hlm. editor. 1994. 191-246 hlm . 230-429. Salamah E. Purchon RD. 2007. Natural antioxidant exploited commercially. Gastineau CF.68 Nelson JK. Washington DC: American Society. 1990.org. Di dalam: Huang MT. 1979. Antioksidan Alami Asal Tumbuhan. 8-389 hlm Pratt DE. 120(1):7-13. Ranney MW. Unit Corn Mill. Mayor clinic diet manual : A Handbook of Nutrition Practices. Moxness KE. Hudson BJF. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. Robinson T. Lee CY. Natural antioxidant from plant material. Edisi revisi. Cermin Dunia Kedokteran. Buletin THP. Jakarta: UI Press. Imran Z. 2011. Edisi ke-6. 67-78 Nurjanah. 2005. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Asam amino non esensial. Pratt DE. Jensen MD. Ayuningrat E. Pergamon Press. Ridwan E. 1995. Kosasih Padmawinata. 8(2):12-25.supamas. 87-121. hlm. 11:119-132. Gorontalo. USA. Buletin TeknologiHasil Perikanan. Supriyanti FMT. The Biology of The Mollusca. Bandung: ITB. 1997.Supamas. editor. Park Ridge. editor. penerjemah. Schuler P. 2009. Philadelphia : Mosby. Makalah dalam Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. 1990. Suparni. hlm. 1997. Di dalam: Hudson BJF. Setyowati. Natural antioxidant not exploited comercially. Ho CT. Purwaningsih S. Di dalam: Food Antioxidant. Institut Teknologi Bandung 26-27 Juni 1997. [7 Mei 2011] Sidik.com [07 Maret 2011]. Ed ke-7. www. Terjemahan dari: The organic constiuteuns of higher plants. Penuntun fitokimia dalam farmasi. Poedjiadi A. Sirait M. Dasar-dasar biokimia. Tempe mampu menghambat proses ketuaan. Phenolic Compound in Food and Their Effect on Health.

Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. hlm. hlm.beritaiptek. Komposisi kimia dan aktivitas inhibitor topoimerase I dari kerang mas ngur (Attactodea striata). Haryono B. 2009. Jakarta: Erlangga. 1992. Machado-Ferreira E. . Yparraguirre LA. Ibrahim B. Jurnal Sumberdaya Perairan. [Tesis].com [ 8 Juni 2011] radikal bebas. Leoncini O and Amaro CSAG. Buletin Teknik Pertanian. Kimia Pangan dan Gizi. Bogor: M-Brio Press. hlm. Kimia Pangan dan Gizi. 1984. Analisis asam amino dalam tepung ikan dan bungkil kedelai. 2007. 2004. Mengenal dan menangkal http://www. 2011. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. A cellulolytic nitrogen fixing bacterium cultured from the gland of deshayes in shipworms. 2007.com [07 Maret 2011].145-167. Supamas. Asam amino non esensial. 221:1401-1403.id/bssub/PDF%20FILES/BSS_ 205_I. Waranmaselembun C. Segar. [3 februari 2011] Syaputra D. Biol. Genet. __________. Science.brawijaya. 2008.supamas. 1983. Poernomo D. 1:12-14. 2009.ac. 92-128 Kimia Pangan. 1970. Yogyakarta: Liberty. http://fisika. hlm. 2006. Sudarmadji S. Calloway CB. 9(1): 33-37. Potensi ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) sebagai antioksidan. hlm.14-55. Vizzon VF. Kimia Pangan dan Gizi. 3-14 __________.69 Sitompul S. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. Winarno FG. Suariasari R. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Waterbury JB. 57-158. 1989. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama. Suharsono. 12-34.pdf. Institut Pertanian Bogor. Senra MVX. hlm. Bogor: Program Pascasarjana. Sociedade Brasileira de Genética. Suhardi. Turner RD. Printed in Brazil.1997. Trindade-Silva E. Genetics and Molecular Biology Online Ahead of Print. __________. Produk Fermentasi Ikan Dari Cacing Kapal Bactronophorus sp. Biokimia. Mol. Suratmo. Physiological traits of the symbiotic bacterium Teredinibacter turnerae isolated from the mangrove shipworm Neoteredo reynei.

70 Winarsi H. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity. Winarsi H. Prosiding Seminar Nasional PBBMI. 86-105. Jakarta: Kanisius. 2004. Efek Minuman Fungsional yang Disuplementasi Isoflavon Kedelai dan Zn terhadap Profil Lipiddan Produk MDA Plasma Wanita Premenopause. Chen HY. hlm. 43:27-32 . Yogyakarta . of Agricultural and Food Chemistry. J. Yen GC. 1995. 2007. Dalam: Peran Biokimia dan Biologi Molekuler dalam Eksplorasi dan Pemanfaatan Sumberdaya Hayati Berkelanjutan.

71 .

72 LAMPIRAN .

73 .

80 2.29 0. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.28 II 82.035 0.63 42.19 1.761 2.77 14. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.423 0.63 41.85 3.62 28.287 0.518 0.45 II 6.62 b.596 0.387 0.663 3.112 0.719 0.63 0.71 7.402 22.662 1.99 0.841 3.21 0.055 0.74 1.31 2.26 1.72 7.19 0. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.618 0.27 5.07 7.35 14.290 .432 1.34 1.004 0.195 1.15 Rata-rata 82.01 2.989 Rata-rata 0.31 0.45 Standar deviasi 0.72 Standar deviasi 0.20 14.399 21.236 1.55 1.26 1.251 1.008 0.015 22.01 0.43 0.418 0.56 0.41 0. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.22 1.018 0.15 32.839 1.006 0.163 0.011 0.72 6.83 Lampiran 2.88 8.88 30.349 1.74 Lampiran 1.011 0.04 0.27 7.005 1.293 1.009 0.016 1.37 1.337 0.02 0.403 0.41 Standar deviasi 0.11 6.023 0.854 2.179 1.008 0.28 0.62 44.821 1.72 0.42 5.243 1.651 1.25 1.795 1.729 0.820 1.81 1.45 Rata-rata 6.055 0.007 0.360 1.04 2.28 2.01 1.285 1.019 0.

75 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

76 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a. Kromatografi asam amino ulangan I .

Kromatografi asam amino ulangan II .77 b.

78 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

79 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

80 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH .

60.40.6.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20. vitamin super ester .8.6.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.60.81 Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.40. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.8.60.40.40.80 ppm) Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.

87 R² = 0.0 y = 6.287x .0 80.0 0.51 27. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana .16 10 ppm 94.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) b.35 8.82 C dan ekstrak kasar tambelo a.56 15.02 51.993 % Inhibisi 60.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.0 70.27 100.44 63.0 20.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.0 30.78 81.19 IC50 (ppm) 3.0 40.54 R² = 0.0 90.0 10.0 50.608x + 27.18.

419 0.255x – 9.407 0.454 0.143 R² = 0.531 y=0.01 12.401 0.490 265.224x .09 -0.77 29.421 0.94 2.423 0.201x – 8.462 0.58 262.93 y=0.9.94 2.regresi linear y=0.96 -6.405 2 3 % inhibisi 0 -3.25 Pers.434 0.255x .224x – 9.18 -5.46 5.412 0.376 0.449 290.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.490 R² = 0.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.63 7.83 Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.79 6.08 4.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.55 3.449 0.9.

055 84.56 Pers.604x + 43.00 4. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.51 46.119 0.142 0.432 0.51 R² = 0.604x + 43.53 67.205 0.72 47.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.201x .660x + 40.041 0.73 19. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.51 10.17 15.45 79.04 15.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.65 87.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.53 85.92 71.231 0.084 % inhibisi 52.066 0.75 1 y=0.8.64x + 37.123 0.211 2 0.089 0.062 0.55 72.225 0.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .13 80.40 90.449 R² = 0.27 y=0.

49 21.660x + 40.986 88.018 81.203 0.39 .34 y=0.38 y=0.40 53.303 0.223 % inhib Pers.64x + 37.99 29. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.12 19.01 3.78 48.89 27.201 0.829 y=0.68 29.305 0.656x – 7.04 R² = 0.337 0.312 0.689x – 6.347 0.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.371 0.777 82.391 0.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.432 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.01 9.86 53.30 13.30 84.73 R² = 0.372 0.47 9.641x + 2.392 0.

7.6.2.018 R² = 0.641x .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.689x .656x .946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.777 R² = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .986 R² = 0.

30 88. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .79 10.58 290.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a.75 19.03 Standart devisiasi 29.17 15. Kloroform : Metanol 4. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231. Kloroform : Metanol 5.87 e.21 3. n-Heksana : Etil asetat 3.09 82.34 81.01 252.39 Ratarata 788.53 4. n-Heksana : Etil asetat 2.3 45. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.93 265.

72 85.47 80.0152 0.00710 0.85 44.36 70.14 83.82 77.69 .68 5. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.13 III 101.00156 0.35 Standart deviasi 4.51 63.87 86.21 3.95 75.62 83.32 40.03 33.46 76.94 5.37 Ulangan II 100.00482 0.50 61.04 74.07 57.85 Rata-rata 103.03 64.43 2.29 2.41 91. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.77 24.82 25.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.37 73.97 8.40 4.63 2.46 63.15748 0.90 4.76 60.97 129.00506 0.03492 0.61 7.00732 0.27 62.06 1.74 65.83 62.80 43.56 54.5 26.86 73.88 b.92 10.78 58.49 174.0028 0.

Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.17 33.23 7.59 64.255 0.112 0.00 81.149 0.179 0.65 76.87 y=0.47 56 68 79.028 0.77 Pers.108 0.85 y=0.41 40.079 % Inhibisi 0 54.41 73.18 80.59 81.71 42.164 0.148 0.193 0.89 b.76 93.88 65.82 61.03 8.127 0.29 10.90 4.78 y=0.00 70.64 8.651x + 33.155 0.277 0.086 0.94 79.37 y=0.078 0.71 88.12 74.425 0.246 0.62x + 43.12 63.53 76.049 0.102 0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.086 0.13 27.65 34.136 0.41 y=0.536x + 46.647x + 34.76 82.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .082 0.099 0.17 25.073 0.23 24.82 57.689x + 27.82 y=0.187 0.497x + 45.

LAMPIRAN .

74 .

795 1.015 22.055 0.005 1.31 0.15 Rata-rata 82.63 42.04 0.006 0.02 0.19 0.019 0. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.72 0.854 2.432 1.83 Lampiran 2.80 2.41 0.56 0.518 0.290 .63 41.45 II 6.112 0.21 0.26 1.99 0.035 0.243 1.418 0.62 28.287 0.41 Standar deviasi 0.45 Rata-rata 6.841 3.285 1.07 7. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.31 2.19 1.337 0.618 0.29 0.81 1.42 5.71 7.989 Rata-rata 0.72 Standar deviasi 0.27 5.15 32.423 0.399 21.25 1.729 0.007 0.72 6.88 30.011 0.28 2.018 0.839 1.651 1.403 0.179 1.35 14.195 1.402 22.821 1.34 1.01 1.28 II 82.236 1.293 1.27 7.008 0.62 b.04 2.85 3.20 14.008 0.349 1.055 0.88 8.662 1.360 1.63 0.663 3.016 1.761 2.45 Standar deviasi 0.009 0.011 0.37 1.387 0.43 0.719 0.596 0.023 0.77 14.72 7.55 1.004 0.74 1. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.62 44.01 0. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.11 6.26 1.28 0.163 0.22 1.01 2.820 1.75 Lampiran 1.251 1.

76 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

Kromatografi asam amino ulangan I .77 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a.

78 b. Kromatografi asam amino ulangan II .

79 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

80 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

40.40.40.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.40.60.6. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.8.80 ppm) .80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.60.6.60.60.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.8.81 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.

0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.0 50. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo a. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.82 Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.0 40.287x .0 80.87 R² = 0.0 30.0 90.44 63.78 81.0 y = 6.35 8.18.56 15.993 % Inhibisi 60.51 27.0 70.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) .02 51.19 IC50 (ppm) 3.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.27 100.0 20.54 R² = 0.608x + 27.0 0.0 10.16 10 ppm 94.

77 29.94 2.79 6.490 R² = 0.401 0.224x .143 R² = 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.255x – 9.449 290.421 0.490 265.255x .412 0.405 % inhibisi 0 -3.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.423 0.454 0.08 4.46 5.434 0.83 b.93 2 y=0.9.55 3.462 0.94 2.376 0.96 -6.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .58 262.63 7.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.18 -5.449 0.407 0.regresi linear y=0.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.201x – 8.09 -0.224x – 9.531 3 y=0.9.25 Pers.419 0.01 12.

604x + 43.72 47.53 85.142 0.432 0.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.449 R² = 0.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.45 79.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.084 % inhibisi 52.041 0.51 10.119 0.73 19.27 y=0.13 80.089 0.201x .53 67.00 4.205 0.04 15.56 Pers.64x + 37.211 2 0.055 84.062 0.231 0.40 90.660x + 40.92 71.8.51 R² = 0.17 15. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .066 0.75 1 y=0.55 72.123 0.604x + 43.225 0.51 46.65 87. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.

371 0.12 19.99 29.73 R² = 0.392 0.656x – 7.39 .40 53.391 0.312 0.829 y=0.64x + 37.203 0.018 81.305 0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.78 48.303 0.660x + 40.04 R² = 0.38 y=0.89 27.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.01 3.689x – 6.986 88.372 0.432 0.641x + 2.201 0.01 9.30 13.86 53.777 82.223 % inhib Pers.68 29.30 84. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.34 y=0.47 9.347 0.49 21.337 0.

689x .018 R² = 0.7.946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.641x .930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .986 R² = 0.656x .777 R² = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.6.2.

N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .53 4.58 290.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231. n-Heksana : Etil asetat 3.3 45.34 81.30 88.79 10. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.39 Ratarata 788.09 82. Kloroform : Metanol 5.17 15.21 3.75 19.93 265.03 Standart devisiasi 29.01 252. n-Heksana : Etil asetat 2.87 e. Kloroform : Metanol 4.

78 58.46 76.87 86.06 1.00710 0.51 63. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.94 5.00482 0.0028 0.97 129.63 2.37 73.50 61. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.85 44.00156 0.07 57.49 174.41 91.77 24.35 Standart deviasi 4.32 40.80 43.29 2.76 60.68 5.46 63.97 8.21 3.5 26.36 70.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.88 b.47 80.04 74.40 4.03492 0.90 4.00732 0.86 73.00506 0.37 Ulangan II 100.92 10.74 65.14 83.72 85.85 Rata-rata 103.56 54.62 83.82 77.43 2.0152 0.69 .03 33.82 25.27 62.95 75.61 7.15748 0.83 62.03 64.13 III 101.

64 8.88 65.086 0.086 0.647x + 34.82 57.23 24.17 25.23 7.85 y=0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.71 88.53 76.29 10.59 81.65 76.102 0.12 74.82 y=0.71 42. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.00 70.246 0.028 0.94 79.18 80.41 73.17 33.127 0.13 27.112 0.90 4.099 0.497x + 45.277 0.255 0.136 0.89 b.03 8.47 56 68 79.78 y=0.082 0.82 61.689x + 27.079 % Inhibisi 0 54.078 0.59 64.87 y=0.164 0.00 81.108 0.651x + 33.179 0.193 0.536x + 46.12 63.049 0.65 34.148 0.76 82.76 93.41 40.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .073 0.149 0.155 0.37 y=0.425 0.41 y=0.62x + 43.187 0.77 Pers.