KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites

)

JULIANA LEIWAKABESSY

Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Teknologi Hasil Perairan

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Dra. Purwantiningsih S,MS

Judul Tesis Nama NRP

: Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites) : Juliana Leiwakabessy : C351070051

Disetujui, Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Linawati Hardjito, M.Sc Ketua

Dr. Ir. Sri Purwaningsih, M.Si Anggota

Diketahui,

Ketua Program Studi Teknologi Hasil Perairan

Dekan Sekolah Pascasarjana

Dr. Tati Nurhayati, S.Pi, MSi NIP: 19700807 1996 032002

Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc. Agr NIP: 19650814 1990 021001

Tanggal Ujian: 28 September 2011

Tanggal Lulus:

KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites)

JULIANA LEIWAKABESSY

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul “ Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo

(Bactronophorus thoracitesi)” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini

Bogor, September 2011

Juliana Leiwakabessy NRP C351070051

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Ambon pada tanggal 24 November 1969 dari ayah Melkias Leiwakabessy dan Ibu Maria Tapilatu. Penulis merupakan putri keenam dari tujuh bersaudara. Tahun 1989 penulis lulus dari SMU Negeri 2 Ambon dan pada tahun 1997 penulis lulus dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Jurusan Pengolahan Hasil Perikanan Universitas Pattimura. Pada tahun 2007, penulis melanjutkan pendidikan sekolah Pascasarjana (S2) di Teknologi Hasil Perairan IPB dengan sponsor BPPS. Penulis bekerja sebagai staf dosen di Jurusan Perikanan, Fakultas Peternakan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Papua sejak tahun 2003 hingga sekarang.

2. b. . penyusunan laporan. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan.@ Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor Tahun 2011 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang 1. penulisan karya ilmiah. penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulisan ini tanpa mencantumkan atau menyebut sumber. a. penelitian. Pengutipan tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB. Dilarang mengumumkan atau memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB.

. 11 2.......................................................... 1.......................1 Penelitian Tahap Pertama .3....... 1.................................................1 Waktu dan Tempat Penelitian ...........................................................3...........4 Kandungan asam lemak tambelo ..2.........................................3............ 35 3.............4 Komponen Bioakif dari Moluska ......................................................................... 39 4....... 1 1 2 3 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA .3.......... 26 3.................................................................................3................. 23 3....................3 Prosedur Penelitian ..................... 16 2..... 17 3 METODOLOGI PENELITIAN .3........................................................................... 38 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ...........................................5 Kerangka Pemikiran ................................................................................................................2 Penelitian tahap kedua ........................................................................3............ 1..............2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat ..............1 Rendemen daging tambelo .................................3.............................3 Kandungan asam amino tambelo .................................................. 21 3................. 7 2.. 30 3......................................................................4 Manfaat Penelitian ... 27 3... 1................3..................3 Analisis asam amino (AOAC 1994) .........................................................................................................2..................................2..........3............................................ 39 4......................................................2 Bahan dan Alat .................3 Tujuan Penelitian ................................................................................3.... 13 2..................1 Latar Belakang .............3............................................... 35 3................................................2...........................3....................................3............................... 39 4.......4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) ............ 32 3..............................................2 Kandungan proksimat tambelo .......... xiv 1 PENDAHULUAN ................................... 9 2....................................... 1988) ............................5 Analisis mineral ...................................................5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al........... 5 2................................... 21 3...................1 Penelitian tahap pertama .........................3.............1....... 34 3..............................1 Rendemen (Hustiany 2005) ................................................................. 5 2...... 22 3...............................................................2 Perumusan Masalah .............. 32 3.............3........................3 Komposisi Kimia .........4 Fraksinasi senyawa antioksidan .............................................................................2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995)............2 Uji proksimat (AOAC 2005) .............. 1..... 42 4. xii DAFTAR GAMBAR ....1 Asam amino .... 6 2..........5 Antioksidan dan Pengukurannya .......2 Asam lemak ...DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL ...... 22 3....1 Ekstraksi bahan aktif ............. xiii DAFTAR LAMPIRAN .......................3 Mineral .3.................................... 23 3.......3....................2...........................................1. 47 viii ..... 39 4.... 22 3.......3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995)........................3.1 Tambelo ..........3......................................1...............1......................................................................

................ 52 4......................................................................................................................................................................6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo ..1. 58 4.5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo .....5 Kandungan mineral tambelo ..............2................ 63 DAFTAR PUSTAKA .......................................................... 49 4................................................................ 57 4...............1 Rendemen ekstrak tambelo ..............................2.......................2........... 52 4.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo ........................... 56 4.. 71 ix ...... 54 4....2.................................................... 60 5 SIMPULAN DAN SARAN ................................................2..........7 Identifikasi senyawa fraksi terpilih .2 Penelitian Tahap Kedua .........2............................................................................4...........................................................4 Fraksi ekstrak terpilih ........3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ...2............... 64 LAMPIRAN ............ 52 4......

........... 48 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo ......................................................................... 61 x .............................. 55 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo .............. 39 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia tambelo ........................................................................ 52 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo .....................DAFTAR TABEL Halaman 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh ................................................ 11 2 Rendemen daging tambelo .............. 43 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo ......... 47 6 Komposisi asam lemak ekstrak kasar tambelo ................................................................................................................................................... 50 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo .................................................. 39 3 Kandungan proksimat daging tambelo .........................

........ 57 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-fraksi tambelo ............ 21 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC .............................. 33 9 Diagram alir fraksinasi dengan menggunakan KLT ....... 3 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) .... 6 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo metah (Muller 2004) ............65 xi ....... 18 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007) ................................................DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Kerangka pemikiran ....... 20 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan identifikasi senyawa antioksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites) ........................................... 37 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo . 59 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH ......................................................... 36 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom .............................................................. 63 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan mass 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid ............................ 55 13 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) ................. BHT... dan vitamin super ester C ............................................................................................................................................... 2008) ... 7 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990) .. 42 12 Nilai IC50 dari ekstrak............ 28 8 Diagram alir ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al.............................................

................... 78 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC ...... 77 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC ............................................................................................................DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering .............. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo ................................. 75 3 Kromatogram standar asam amino pada HPLC .................................... 75 2 Nilai rata-rata asam amino tambelo ................................. 89 xii .................................. 82 9 Profil pola pemisahan senyawa ................................................... 81 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT................................................................... 80 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH dari ekstrak tambelo ...... 88 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS ..................................................... 76 4 Kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC ........ 88 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo ............................................... 87 10 Rendamen fraksi tambelo ................................................................................................................................................................

The first stage involved the analyses of proximate. This study aimed to investigate the chemical composition of fresh tambelo.46 ppm and phosfor of 2363. fatty acid.72±0.72±0. chemical. the extract underwent phytochemical and antioxidant tests (20. 9th fraction was similar to farnesic acid glyceride.31%. The protein of tambelo contained nine essential amino acids and eight non essensial amino acids.06 ppm. carbohydrate (by difference) 30. 6.01%. Chemical Composition and Identification of Antioxidant Compounds from the Extracts of Tambelo (Bactronophorus thoracites).04%. It contained calcium of 3532. to conduct antioxidant and phytochemistry tests. sesquiterpenoic acid glyceride and labdane diterpenoid.01%. flavonoid.77±2.28±0. It had seven saturated fatty acids and eight unsaturated fatty acids. 40. described the crude extract of tambelo contained a group of alkaloid.27%. The composition of dried tambelo was moisture 6. fat 0.ABSTRACT JULIANA LEIWAKABESSY.04%. fat 14.01%. The second stage was the extraction of active materials by means of maceration.07±0. amino acid and mineral. and 80 ppm) with DPPH method applying BHT and vitamin super ester C as the standard with a concentration of 4.63±0. shipworm.87 ppm.45±2. 8 and 10 ppm. Next. Finally. and carbohydrate (by difference) 7. ash 5. protein 7. compound . the identification of fresh antioxidant compound was carried out using LC-MS. Teredinidae. Keywords: Activity antioxidants.62%.88±1. The research consisted of two stages. Phytochemical test.83%. MarinLit database (Blunt and Blunt 2008). steroid and triterpenoid. and to identify the compound of active antioxidant obtained from selected fractionated extract. The highest antioxidant activity was found in the crude extract of ethyl acetate with IC50 of 15 ppm. The maceration result was evaporated and partitioned with a solvent of n-hexane and ethyl acetate.21±0. ash 2. The highest antioxidant activity obtained by column fractionation was the 9th fraction with IC50 of 8. 60. The composition of fresh tambelo divided into moisture 82.27±0. protein 42. Supervised by LINAWATI HARDJITO and SRI PURWANINGSIH Tambelo (Teredinidae) is consumed freshly by local people in Papua without removing the digestive tracts.22%.

56%.72%.24%.04%. glisin 1.37%.83%.41%. EPA (C20:4ω3) 0.RINGKASAN JULIANA LEIWAKABESSY. protein 42. rematik. heneikosanoat acid (C21:0) 0.63%.27±0. natrium 435.85%.29% dari berat minyak.26%. stearat (C18:0) 3. asam lemak. asam gliserida sesquiterpenoid. dan besi 1373.81%.13%. dan diterpenoid labdan. Di Papua masyarakat mengkonsumsi tambelo dalam keadaan mentah tanpa harus dibuang isi pencernaannya terlebih dahulu.31% lemak 0.80%. steroid dan triterpenoid (n-heksana. Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites).01%. .87 ppm.07±0. metionin 0.04%. dan 8 asam lemak tidak jenuh yang terdiri dari miristoleat (C14:1) 0. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak kasar tambelo mengandung senyawa alkaloid. dan karbohidrat (by difference) 7. Cis-10Heptadekanoat (C17:1) 0. nafsu makan dan vitalitas pria. uji proksimat.22%. prolin 0. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan komposisi kimia tambelo segar.72±0. heptadekanoat (C17:0) 0.42 ppm.41% dari berat protein. asam glutamat 3.01%. fosfor 2363.01%.45 ppm. Tahap pertama adalah analisis rendemen. Asam amino esensial yang terdapat pada tambelo. fenilalanin 1. mendapatkan antioksidan dan fitokimia. flavonoid.45±2.29%. arakidat (C20:0) 0. lisin 1. malaria. dan arakidonat (20:4ω6) 0.72%. flu. palmitoleat (C16:1) 14.34%. yaitu treonin 0.72±0. Tambelo mengandung 9 asam amino esensial dan 8 asam amino non esensial. histidin 1. arginin 1.77±2.04%.10%. sakit pinggang.4 ppm.06 ppm. Penelitian ini terdiri dari dua tahap. dan sistein 0. alanin 1. valin 1. dan identifikasi senyawa antioksidan menggunakan LC-MS. dan karbohidrat 30. abu 5. analisis fitokimia. asam amino. pentadekanoat (C15:0) 0.33%. Aktivitas antioksidan yang tertinggi hasil fraksinasi kolom terdapat pada fraksi 9 dengan IC50 sebesar 8.22%. serin 1. yaitu asam aspartat 2.28±0.55%.62%.25%.80%. etil asetat. dan mineral dalam tambelo. protein 7. dan metanol). Asam amino non esensial pada tambelo. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 sebesar 15 ppm.69%. Mereka percaya bahwa isi pencernaan tambelo berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit diantaranya. leusin 1. Kandungan mineral pada tambelo yaitu kalsium 3532.66%. abu 2.63±0. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya.fraksi 9 menyerupai senyawa asam gliserida farnesik.01%. isoleusin 0. palmitat (C16:0) 13. tirosin 0. Tambelo kering memiliki kadar air 6. lemak 14. Dibimbing oleh LINAWATI HARDJITO dan SRI PURWANINGSIH. Kabupaten Manokwari memiliki kadar air 82. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif tambelo dengan cara maserasi. serta mengidentifikasi senyawa aktif antioksidan hasil fraksinasi ekstrak terpilih.21±0. meningkatkan air susu ibu.74%.88±1. Tambelo segar (Bactronophorus thoraites) yang berasal dari perairan Andai.80% dari berat protein. Rendemen ekstrak kasar tambelo kering yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5. pengujian aktivitas antioksidan. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).19%.46 ppm.55%. Tambelo memiliki 7 asam lemak jenuh (saturated fatty acid/SAFA) yang terdiri atas miristat (C14:0) 5.27%. kalium 626.

2006). 2007). rematik. Berdasarkan literatur. kelas Myoida. cacing laut. dimana di dalamnya terdapat berbagai jenis organisme laut. malaria. rumput laut. dan vitalitas pria (Hardinsyah et al. Organisme laut yang sudah dimanfaatkan sebagai bahan obat alami diantaranya spons. Beberapa organisme laut mampu memproduksi senyawa kimia tersebut untuk mempertahankan dirinya dari serangan predator. suku Kamoro Kabupaten Mimika berpendapat bahwa tambelo berkhasiat menyembuhkan penyakit. 2000). Hasil penelitian menunjukkan banyak dari senyawa kimia tersebut berpotensi menghambat pertumbuhan bakteri dan aktif menghambat pertumbuhan sel kanker serta bioaktivitas lainnya (Edrada et al. nafsu makan. flu. Pemanfaatan organisme laut ini tidak hanya terbatas sebagai bahan makanan. tambelo dikonsumsi oleh sebagian masyarakat Bangka yang disebut temilok brubus (Syaputra et al. Salah satu moluska yang telah dimanfaatkan selain sebagai bahan pangan juga digunakan sebagai obat alami adalah tambelo. Senyawa kimia dengan bioaktivitas ini diduga dapat dimanfaatkan manusia sebagai bahan obat alami. Hal ini menjadikan perairan Indonesia memiliki potensi kekayaan alam laut yang besar dengan tingkat keragaman hayati yang tinggi. teripang. seperti di Brasil Utara ”turu” (Teredinidae) sangat populer digunakan dalam pengobatan penyakit menular (Trindade-Silva et al. Di Papua. 2009). antara lain: sakit pinggang. .1 Latar Belakang Indonesia sebagai negara kepulauan memiliki garis pantai lebih kurang 81000 km dan wilayah laut yang sangat luas. tapi juga sebagai sumber bahan alami yang berpotensi sebagai bahan baku obat (Handayani et al. serta meningkatkan air susu ibu. dan moluska. 2006). 2008).1 PENDAHULUAN 1. Tambelo (Teredinidae) merupakan salah satu jenis hewan penggerek kayu yang hidup di dalam batang kayu bakau yang sudah lapuk dan membusuk yang dikelompokkan ke dalam filum bivalvia. masyarakat menyebutnya tambelo ”koo” (Hardinsyah et al. batuk. ordo Teredinidae. Tambelo dipercaya dapat menyembuhkan penyakit. Di Papua. Di Philipina masyarakat menyebutnya tamilok (Betia 2011).

2006). tambelo disajikan sebagai makanan pembuka baik dalam keadaan mentah maupun dimasak/digoreng. Pada saat pesta adat dilaksanakan. Informasi mengenai aktivitas antioksidan pada tambelo sampai saat ini belum ada. Griffin et al.2 Perumusan Masalah Tambelo (Bactronophorus thoracites) termasuk di dalam famili Teredinidae dan kelas bivalvia. namun komposisi kimia dan senyawa antioksidan dari tambelo belum banyak diketahui. (2009) menunjukkan bahwa bakteri yang diisolasi dari insang tambelo Neo teredo reynei (Teredinidae) dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif (Sphingomonas. sehingga perlu dilakukan penelitian senyawa antioksidan dari bahan tambelo (Bactronophorus thoracites). proses mengantar mas kawin. Kenyataan bahwa tambelo mampu memberikan efek menyehatkan bila dikonsumsi. Informasi yang dapat diperoleh dari penelitian terdahulu seperti Trindade-Silva et al. piring maupun lensa kaca. Tambelo adalah salah satu obat tradisional yang telah lama digunakan oleh masyarakat Papua. kanker (Muchtadi 2000). Antioksidan adalah suatu zat yang dapat menangkal pengaruh radikal bebas yang bila masuk ke dalam tubuh dapat menyebabkan kerusakan. acara peminangan dan lain – lain. memberikan dugaan bahwa di dalam tubuh tambelo terdapat suatu komponen yang bersifat antioksidan. Kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas di antaranya penuaan dini. karena merupakan suatu kebiasaan yang sudah turun temurun dilakukan sejak nenek moyang mereka (Hardinsyah et al. Bacillus cereus dan Staphylococcus sciuri). Stenotrophomonas maltophilia. 1. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya.2 Masyarakat Kamoro menggunakan tambelo diberbagai acara pesta adat misalnya acara pesta perkawinan. jantung koroner. . (1994) melaporkan bahwa enzim protease yang diisolasi dari bakteri yang terdapat dalam kelenjar dari tambelo Psiloteredo healdi (Teredinidae) bersifat sebagai deterjen pembersih lantai.

flu malaria. 1. perumusan masalah dan tujuan penelitian maka kerangka pemikiran yang disajikan pada Gambar 1. mendapatkan aktivitas antioksidan dan fitokimia ekstrak tambelo. 1. . dan vitalis pria. analisis mineral Ekstraksi tambelo Uji fitokimia Uji aktivitas antioksidan Fraksinasi ekstrak terpilih Uji antioksidan hasil fraksinasi - Identifikasi senyawa dengan LC-MS Penelitian yg dilakukan oleh Hardinsyah et al.4 Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kandungan kimia dan bahan aktif yang dikandung dalam tubuh tambelo sebagai senyawa antioksidan sehingga dapat dimanfaatkan dalam bidang pangan fungsional atau nutraceutical. Tambelo (Bactronophorus thoracites) Pesta Adat Dikonsumsi oleh masyarakat Papua dimasak Direbus Makan mentah Sakit pinggang/rematik.5 Kerangka Pemikiran Berdasarkan latar belakang. batuk. analisis asam lemak -.3 Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk memperoleh komposisi kimia tambelo segar dan kering. serta mengidentifikasi fraksi aktif senyawa antioksidan. analisis asam amino -. Obat tradisional Analisis kimia : -.3 1. nafsu makan. meningkatkan air susu ibu . analisis proksimat -. 2006 Penelitian yg dilakukan oleh Juliana Gambar 1 Kerangka pemikiran.

4 .

perkembangan tubuhnya akan terbatas. Bentuk morfologi tambelo disajikan pada Gambar 2. Tambelo mampu menggali lubang sepanjang 18 cm hingga 2 m (Waterbury et al. Dinding lubang pada kayu tersebut dilapisi dengan suatu subtansi yang mengandung kapur. Lubang pada kayu biasanya dibuat tegak lurus terhadap serat kayu. 1988). kepalanya berbentuk bulan sabit yang dilengkapi dengan parut dan kikir yang berguna untuk membuat lubang. memanjang seperti cacing. kemudian membelok sejajar dengan arah serat kayu. sehingga panjangnya akan beberapa sentimeter saja dan diameternya kurang lebih dari 0. 1983). Kepadatan tambelo tertinggi pada bulan Januari sampai April dan kepadatannya rendah pada bulan Juli (Filho et al.2 TINJAUAN PUSTAKA 2. Panjang tubuh tambelo berkisar antara 30 hingga 100 cm dengan diameter antara 1 sampai 1. Ciri-ciri fisik tambelo adalah tubuhnya lunak. Tambelo dapat bertahan hidup antara satu hingga beberapa tahun.1 Tambelo Tambelo atau shipworm adalah hewan jenis moluska yang hidup di dalam pohon bakau yang telah membusuk. 1988). Klasifikasi tambelo (Turner 1971) adalah sebagai berikut : Filum : Mollusca kelas Ordo Family Genus Spesies : Bivalvia : Myoida : Teredinidae : Bactronophorus : Bactronophorus thoracites . tergantung pada jenisnya.5 cm (Muslich et al. Apabila populasinya terlalu tinggi. Keberadaan dan sifat tambelo sangat dipengaruhi oleh tipe habitat.5 cm. 2008). Tambelo berkembang normal di air dengan salinitas antara 10-30 ppm dan lebih banyak dijumpai di daerah tropis (Muslich et al. Terbentuknya lapisan yang mengandung kapur dihasilkan dari mantel shipworm (Ginuk 1987).

Pallet yang terletak pada bagian tubuh depan yang digunakan untuk memarut kayu. Bagian kedua adalah kelenjar pencernaan yang difungsikan untuk mencerna partikel-partikel kayu (Waterbury et al. Perut tambelo terdiri dari dua bagian usus. 1 spesies genus Sonneratia dan 1 spesies termasuk dalam genus Bruguiera. tidak dikonsumsi oleh masyarakat suku Kamoro. Menurut Mayabubun (2003).2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat Tambelo yang dimakan mentah dipercaya oleh masyarakat Papua lebih berkhasiat daripada direbus atau digoreng. batuk. 2. . Cara masyarakat Papua mengkonsumsikan tambelo yaitu setelah tambelo diambil dari pohon bakau yang sudah membusuk. tambelo dijadikan sebagai makanan utama di berbagai acara pesta adat seperti pesta budaya Karapao Suku Kamoro. ada 4 spesies mangrove yang digunakan sebagai habitat dari tambelo yaitu 2 spesies dari genus Rhizophora. nafsu makan. meningkatkan air susu ibu. Pada masyarakat Kamoro. cangkang dan giginya dilepas dan langsung dimakan tanpa dibersihkan isi pencernaannya terlebih dahulu. dan kejantanan bagi kaum lelaki. Tambelo yang tumbuh di mangrove Sonneratia sp dan Bruguiera sp.6 Gambar 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) Hewan ini memanfaatkan serbuk kayu makanan. seperti disajikan pada Gambar 3. Masyarakat Papua percaya bahwa sisa pencernaan dalam perut tambelo sangat berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit di antaranya sakit pinggang. Bagian pertama adalah usus besar yang berfungsi untuk menampung serbuk kayu. 1983). Identifikasi tambelo didasarkan kepada bentuk cangkangnya yang berwarna putih (panjang ± 1 cm) digunakan untuk menutup mulut terowongan. sebab rasanya pahit dan tidak enak untuk dimakan. rematik flu. malaria.

. Protein akan dipakai sebagai sumber energi. tetapi juga oleh keadaan lingkungan. Kandungan energi protein rata-rata 4 kkal/g atau setara dengan kandungan energi karbohidrat (Sudarmadji et al. penunjang mekanis. defisiensi energi protein (marasmus). Fungsi protein bagi tubuh adalah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada.O. 1988). 1989). seperti pemukiman. Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsurunsur C. pengatur pergerakan. Protein memiliki peranan penting dalam pembentukkan biomolekul daripada sebagai sumber energi. Keadaan tersebut tidak hanya dipengaruhi oleh asupan makanan. berperan sebagai enzim. bila organisme sedang kekurangan energi. dan air (Harper et al. alat pengangkut dan alat penyimpanan. media perambatan impuls syaraf.H. karbohidrat.3 Komposisi Kimia Zat gizi dibagi menjadi 5 kelas utama. yaitu protein. mineral. sanitasi dan higiene. Kekurangan protein pada anak saat lahir (kwashiorkor). atau gabungan keduanya dapat mengakibatkan kegagalan pertumbuhan ringan sampai sindrom klinis berat yang spesifik. lemak. Protein berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. serta infeksi berulang yang pernah dialami tubuh (Effendi 2002).7 Gambar 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo mentah (Sumber: Muller 2004) 2. pertahanan tubuh atau imunisasi. dan N. dan pengendalian pertumbuhan (Winarno 1992).

tekstur. Dalam tubuh. glukoronat. koma hepatik. karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosisi. dan akan sampai di usus besar (kolon) dalam keadaan utuh sehigga akan menjadi subtrat untuk fermentasi bakteri yang hidup di kolon. dan beguna untuk membantu metabolisme lemak dan protein (Winarno 2008). Karbohidrat merupakan sumber kalori yang murah. sangat dianjurkan. Kebanyakan jenis karbohidrat yang sampai ke kolon tanpa meliputi polisakarida yang bukan pati (non-starch polysacharides/NSP). selain itu beberapa golongan karbohidrat menghasilkan serat (dietary fiber) yang berguna bagi pencernaan. Serat pangan yang larut sangat mudah difermentasikan dan mempengaruhi metabolisme karbohidrat serta lipida. mannose. khususnya bagi penduduk negara yang sedang berkembang. terhidrolisis.8 Pembatasan konsumsi protein pada penderita hati dilakukan apabila pasien mengalami intoleransi protein. galakturonat. rhamnosa. galaktosa. . arabinosa. misalnya rasa. Monomer dari serat pangan adalah gula netral dan gula asam. 1994). serta 4-o-metil-glukoronat (Muir 1999). Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan makanan. pemecahan protein tubuh yang berlebihan. xylosa. Gula yang membentuk serat pangan adalah glukosa. Karbohidrat merupakan sumber kalori utama bagi hampir seluruh penduduk dunia. dan gula asam seperti mannurinat. kehilangan mineral. sedangkan serat pangan yang tidak larut akan memperbesar volume feses dan akan mengurangi waktu transitnya (bersifat laksatif lemah). Serat pangan dapat diklasifikasikan berdasarkan struktur molekul dan kelarutannya. pati yang resisten (resisten starch/RS). Kondisi ini biasanya ditemukan pada pasien Konsumsi sumber protein selain daging. Serat pangan atau dietary fiber adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis (dicerna) oleh enzim pencernaan manusia. dan asam amino aromatik (AAA) yang lebih rendah serta asam amino rantai cabang (BCAA) yang lebih tinggi dibandingkan dengan daging (Nelson et al. Sayuran dan produk susu mengandung metionin. warna. dan karbohidrat rantai pendek (short chain carbohydrates/SC). seperti sayuran dan produk susu.

Tingkat penyerapan relatif masing-masing asam amino adalah asam amino rantai cabang (valin. Perubahan-perubahan kimia atau penguraian lemak dan minyak dapat mempengaruhi bau dan rasa suatu bahan makanan.9 Minyak atau lemak berfungsi sebagai sumber energi dan pelarut vitamin A.D. yaitu asam amino esensial dan nonesensial. Asam amino glutamat dan aspartat paling lambat terserap (Linder 2006). Mineral digolongkan sebagai zat gizi anorganik atau disebut sebagai abu dalam pangan karena ternyata jika bahan pangan dibakar. unsur organik akan menghilang dan bahan anorganik (abu) yang tersisa terdiri dari unsur-unsur mineral (Harper et al.E. dan dibagi dalam dua kelompok. Pada umumnya penguraian lemak dan minyak menghasilkan zat-zat yang tidak dapat dimakan. 1989). Asam amino esensial tidak dapat diproduksi dalam tubuh sehingga sering harus ditambahkan . Kadar abu ada hubungannya dengan mineral suatu bahan. terbentuk dari asam amino yang terikat bersama. 1989). 1989). Susunan kimia asam amino bervariasi. dan K serta merupakan sumber asam-asam lemak tak jenuh yang esensial.3. isoleusin) dan metionin lebih mudah diserap dari asam amino esensial lainnya. 2. Asam amino esensial lebih mudah diserap dari asam amino non esensial. yaitu linoleat dan linolenat (Sudarmadji et al. Kandungan abu dan komponennya tergantung pada macam bahan dan cara pengabuannya. Komponen mineral dalam suatu bahan sangat bervariasi baik macam dan jumlahnya (Sudarmadji et al. tetapi terdapat dua hal yang sama. 1988). Protein yang masuk dalam tubuh akan diubah menjadi asam amino. Kerusakan lemak dan minyak menurunkan nilai gizi serta menyebabkan penyimpanan rasa dan bau yang bersangkutan. Asam amino tersebut akan diabsorpsi melalui dinding usus. baik yang menguntungkan maupun tidak. leusin. Abu adalah zat anorganik sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. kemudian dilanjutkan sampai ke dalam pembuluh darah.1 Asam amino Protein merupakan molekul yang sangat besar. yaitu setiap asam mempunyai sedikitnya satu kelompok amino dan satu kelompok karboksil (Sudarmadji et al. Proses absorpsi asam diamino lebih lambat dari pada asam amino netral (Poedjadi dan Supriyanti 2006). Asam amino merupakan komponen utama penyusunan protein.

Kelengkapan komposisi asam amino esensial merupakan parameter penting penciri kualitas protein (Astawan 2007). Asam amino esensial yang dibutuhkan oleh tubuh manusia ialah histidin. Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh disajikan pada Tabel 1. triptofan. asam amino atau protein berfungsi sebagai zat pembangun. Asam amino umumnya berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air. leusin. yaitu menyediakan bahanbahan yang sangat berperan dalam proses pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan tubuh. Asam amino merupakan unit pembangun protein. arginin. metionin. Kebutuhan asam amino esensial bagi anak-anak relatif besar daripada orang dewasa (Poedjiadi dan Supriyanti 2006). lisin. Protein bekerja sebagai pengatur semua proses yang berlangsung di dalam tubuh dan sebagai sumber energi jika karbohidrat dan lemak tidak dapat mencukupi keperluan tubuh. Arginin terlibat dalam sintesis ureum dalam hati. valin. Asam amino esensial merupakan pembangun protein tubuh yang harus berasal dari makanan atau tidak dapat dibentuk di dalam tubuh.10 dalam bentuk makanan. Selain fungsi tersebut hampir semua asam amino memiliki fungsi khusus. Glutamin dan asparagin merupakan simpanan asam amino dalam tubuh. Metionin dan serin merupakan prekursor sintesis dan histidin yang diperlukan untuk sintesis histamin . Kebutuhan metionin dapat disubtitusi dengan tirosin atau gabungan sistin dan fenilalanin (Linder 2006). di dalam tubuh. namun tidak larut dalam pelarut organik nonpolar (Sitompul 2004). treonin. sedangkan asam amino nonesensial dapat diproduksi dalam tubuh. isoleusin. contohnya tirosin merupakan prekursor yang membentuk pigmen kulit dan rambut. fenilalanin.

histidin merupakan asam amino esesnsial bagi anak-anak. arginin. sitrulin yang ikut berperan dalam sinstesis urea dalam hati serta berfungsi sebagai prekursor tirosin katekolamin. arginin.3. poliamin. prekursor glikogenik dan pirimidin Sebagai produk antara dalam reaksi interkonversi asam amino. prekusor prolin. Asam lemak tidak terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan. sehingga hampir semua lipid bersifat tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak. . Asam lemak adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai 4-24atom. Berfungsi untuk biosintesis urea. ornitin. Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ujung hidrokarbon nonpolar yang panjang. dan serotoninmetionin donor gugus metil untuk sintesis beberapa senyawa seperti kolin dan kreatin Sebagai pemula tirosin dan keduanya membentuk tiroksin dan epinefrin. melanin dan tiroksin. ornitin. neurotransmiter α-aminobutirat (GABA). Fenilalanin Glisin Histidin Aspartat Glutamat Glisin Lisin Metionin Triptofan Tirosin Sumber: Poedjiadi dan Supriyanti (2006). yang dapat dibebaskan dari ikatan tersebut melalui hidrolisis kimia atau enzimatik. tetapi terdapat dalam bentuk terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipid berbeda. sumber NH3 Sebagai prekusor biosintesis purin dan neurotransmiteri Berfungsi untuk crosslinking protein (seperti dalam kolagen dan elastin) biosintesis karnitin merupakan donor grup metil untuk banyak proses sintetik Sebagai prekusor serotonin dan nikotinamid (vitamin B) Sebagai prekusor tirosin katekolamin. 2.2 Asam lemak Asam lemak merupakan komponen unit pembangunan yang sifatnya khas untuk setiap lipid. melanin dan tiroksin Berperan pada sintesis profirin dari hemoglobin dan juga merupakan konstituen asam glikolat Bagi manusia.11 Tabel 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh Jenis asam amino Triptofan Peranan Sebagai pemula vitamin niasin.

Titik cair asam lemak meningkat dengan bertambah panjangnya rantai karbon. Lemak yang tersusun oleh asam lemak tidak jenuh akan bersifat cair pada suhu kamar. Penelitian yang dilakukan Mensink (1987) menyatakan bahwa MUFA dapat menurunkan LDL. asam lemak tak jenuh (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi populer. rantai panjang (14-18 karbon). yaitu asam lemak rantai pendek (6 atom karbon atau kurang).12 Asam lemak dibedakan menurut jumlah karbon yang dikandungnya. lemak tak jenuh tunggal memiliki efek yang mengutungkan terhadap kolesterol dalam darah. sedangkan asam lemak tidak jenuh ganda mengandung dua atau lebih ikatan rangkap (polyunsaturated fatty acid=PUFA). Asam lemak tidak jenuh tunggal mengandung satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya (monounsaturates fatty acid=MUFA). minyak kacang tanah. Sementara itu.dan meningkatkan K-HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. Salah satu jenis MUFA adalah omega-9 (oleat) yang memilki sifat lebih stabil dan lebih perannya dibandingkan PUFA. dan rantai sangat panjang (20 atom karbon atau lebih). Semua lemak bahan makanan hewani dan sebagian besar minyak nabati mengandung asam lemak rantai panjang. dan canola. asam lemak rantai sangat panjang terdapat dalam minyak ikan. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. sedangkan yang tersusun oleh lemak jenuh berbentuk padat (Almatsier 2009). Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. Asam lemak yang terdiri dari rantai karbon yang mengikat semua hidrogen yang dapat diikatnya dinamakan asam lemak jenuh. Asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) tergolong dalam asam lemak rantai panjang. minyak kedelai. minyak biji kapas. rantai sedang (8 hingga 12 karbon). Asam lemak yang mengandung satu atau lebih ikatan rangkap di mana sebetulnya dapat diikat tambahan atom hidrogen dinamakan asam lemak tidak jenuh. MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. Secara umum. . Polysaturated fatty acid (PUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein (LDL) dan juga menurunkan high density lipoprotein (HDL).

fungsi kekebalan. 2. kontraksi otot serta penyembuhan luka (Achadi 2010). bersifat cair pada suhu kamar. Mineral yang terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup banyak. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron serta menurunkan produksi trigliserida dan poliprotein β (beta) di dalam hati.3. Asam lemak ini banyak ditemukan pada ikan dan bahan nabati.3 Mineral Mineral termasuk ke dalam golongan nutrisi mikro dalam tubuh yang diperlukan dalam jumlah kecil. Asam lemak esensial merupakan prekursor sekelompok senyawa eikosanoid yang mirip hormon.13 Polyunsaturated fatty acid (PUFA) adalah asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan rangkap. yaitu makromineral dan mikromineral. fosfor. mempertahankan fungsi dan integritas membran sel. klorin. tetapi ketersediaan mineral harus tercukupi setiap harinya. dan linolenat) antara lain berperan dalam transpor dan metabolisme lemak. denyut jantung. Makromineral terdiri dari kalsium. dan biji matahari. Sumber alami PUFA yang penting bagi kesehatan adalah kacang-kacangan dan biji-bijian. dan dokosaheksaenoat (DHA) dari asam linolenat. eikosapentaenoat (EPA). jagung. Asam lemak esensial adalah asam lemak yang dibutuhkan oleh tubuh untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan. tromboksan. tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA) yang banyak ditemukan pada minyak nabati atau sayur dan minyak ikan. yaitu prostaglandin. prostasiklin. magnesium. sedangkan tubuh tidak dapat mensintesisnya. Senyawa-senyawa ini mengatur tekanan darah. sedikitnya 0. Berdasarkan jumlahnya dalam tubuh manusia dibedakan menjadi dua. rangsangan sistem saraf. dan leukotien. Turunan asam lemak arakidonat dari asam linoleat.05% dari bobot tubuh dikenal sebagai makromineral. dan omega-3. Contoh PUFA adalah asam linoleat (omega-6). Manfaat PUFA (asam lemak arakhidonat. fungsi imun. linoleat. seperti bunga matahari. asam lemak omega-3 penting untuk berfungsinya otak dan retina dengan baik. . Kelompok asam lemak yang termasuk dalam jenis ini adalah asam alfa linoleat (omega-6) dan asam alfa linolenat (omega-3). Selain peranannya dalam pencegahan penyakit jantung koroner dan artritis. bahkan tetap cair pada suhu dingin karena titik lelehnya lebih rendah dibandingkan dengan MUFA.

14 kalium. 5) transmisi impuls saraf. dan 7). Kalsium bersama dengan natrium. besi. Kalium juga berperan dalam penyampaian impuls-impuls saraf ke serat-serat otot dan juga dalam kemampuan otot untuk berkontraksi (Fregly 1988). flourin. Sekitar 270 mg kalium berada di dalam sel yang . Kalsium diperlukan untuk memelihara otot dan syaraf dalam tubuh agar berfungsi normal dan membantu penyerapan vitamin B12 (Harper et al. 4) memelihara keseimbangan air dalam tubuh. Kalsium berfungsi untuk mengatur transpor ion-ion menembus membran seluler dan diperlukan untuk aktivitas aktomiosin dan miosin ATP-ase. mangan. Kalsium merupakan salah satu faktor yang terpenting dalam pembekuan darah. Gaman dan Sherrington 1992). 6) mengatur kontraktilitas otot. dan belerang. 3) komponen senyawa tubuh yang esensial adalah hormon. serta mengaktifkan reaksi enzim dan sekresi hormon termasuk insulin oleh pankreas. b) Kalium (K) Hampir seluruh kegiatan di dalam tubuh dipengaruhi oleh perubahan kosentrasi kalium di dalam plasma. dan suksinildehidrogenase. 1988. yang terdiri dari kobalt. tembaga. Secara umum fungsi mineral bagi tubuh adalah sebagai berikut: 1) mempertahankan keseimbangan asam – basa dalam tubuh. lipase. Sebanyak 98% kalium dalam tubuh berada di dalam intraseluler. asam lambung. natrium. 2) sebagai katalis untuk reaksi biologis. hemoglobin. Winarno 1992). enzim. Kalium adalah basa utama yang terdapat di dalam jaringan dan sel-sel darah yang memegang peranan penting dalam pengaturan keseimbangan asam basa tubuh. a) Kalsium (Ca) Kalsium diperlukan untuk pembentukan dan perkembangan tulang dan gigi. Mineral yang diketahui dibutuhkan oleh tubuh dan terdapat dalam jumlah yang lebih sedikit dari 0.05% dari bobot tubuh disebut sebagai mikromineral. pertumbuhan jaringan tubuh. kalium. 1988. iodin. dan seng (Harper et al. Kalsium juga berperan dalam pembentukan tulang dan gigi. dan magnesium berperan dalam transmisi impuls-impuls serta kontraksi dan relaksasi otot (Muchtadi 1989). kolinesterase.

sebagai bagian dari enzim atau sebagai kofaktor pada kegiatan lebih dari dua ratus enzim. Gaman dan Sherrington 1992). Enzim superoksida dismutase di dalam sitosol semua sel. Bila sel-sel darah merah melepaskan besi.15 merupakan cairan kation yang mendominasi di dalam intrseluler (Groff dan Gropper 1990). Sebagai bagian dari enzim-enzim pernafasan misalnya sitokrom oksidase. Beberapa besi juga disimpan di dalam tubuh seperti dalam sumsum tulang. e) Seng (Zn) Seng memegang peranan esensial dalam banyak fungsi tubuh. serta melepaskan Fe simpanan dari ferritin dan hati. c) Fosfor (P) Fosfor dan kalsium secara bersama-sama adalah penyusun tulang dan gigi yang sangat penting. di dalam sumsum tulang. besi tidak hilang dari tubuh. Fosfor juga terdapat dalam semua sel hidup dan diperlukan untuk pelepasan energi. menstimulir sintesis fraksi heme atau globin. f) Tembaga (Cu) Fungsi tembaga dalam tubuh antara lain mencegah terjadinya anemia. yaitu dalam fungsi sel T dan dalam pembentukan antibodi oleh sel B (Almatsier 2009). dengan cara membantu penyerapan Fe. tetapi digunakan lagi untuk membuat sel-sel darah merah yang baru. Fosfor terdapat dalam kebanyakan makanan dan defisiensi fosfor dalam susunan makanan belum pernah terjadi (Gaman dan Sherrington 1992). dan untuk proses pelepasan energi. berperan dalam pengembangan fungsi reproduksi laki-laki dan pembentukkan sperma serta berperan dalam fungsi kekebalan. Diperlukan untuk sintesis fosfolipida untuk pembentukan myelin yang menyelimuti serat syaraf. dan limpa sebagai senyawa kompleks dengan protein yang dikenal sebagai feritin (Harper et al. terutama eritrosit diduga berperan dalam memusnahkan anion superoksida yang merusak. Seng juga 1988. Bersama vitamin C dapat mempertahankan aktivitas enzim-enzim yang tersangkut dalam sintesis elastin (protein dinding . d) Besi (Fe) Sebagian besar besi terdapat dalam hemoglobin (pigmen darah merah yang terdapat dalam sel darah merah). hati.

Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. mempunyai prospek sebagai zat aktif dalam obat . Bersama vitamin E. Hasil penelitian belakangan ini yang memastikan bahwa selenium dapat mencegah kanker (termasuk kanker kulit akibat paparan matahari). Tembaga bersifat toksik bila terdapat sebagai ion bebas. Sumber utama selenium adalah tumbuh-tumbuhan dan makanan laut (Conectique 2011). Di dalam tubuh. 2. dan penuaan dini. seperti kanker. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh invertebrata laut dan mikroorganisme simbion. Orang dewasa dianjurkan untuk mengkonsumsi sebanyak 55 µg per berat badan selenium setiap hari. g) Selenium (Se) Selenium adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas. penyakit jantung. menambah pamornya sebagai mineral yang bermanfaat besar untuk meningkatkan fungsi kekebalan tubuh manusia.4 Komponen Bioaktif dari Moluska Invertebrata laut merupakan produsen senyawa bioaktif terbesar di antara biota lainnya. Tubuh setiap orang memiliki kemampuan untuk melawan radikal bebas yang bisa menghancurkan sel dan menimbulkan berbagai penyakit kronis. Kebutuhan tersebut akan meningkat saat seorang ibu harus menyusui. yaitu kondisi sel yang rusak sebelum waktunya. selenium berfungsi mempertahankan elastisitas jaringan dan bila kadar selenium berkurang maka tubuh akan mengalami penuaan dini. dapat menyebabkan pusing dan muntah (Muchtadi 2009). namun perempuan dewasa yang sedang hamil dianjurkan meningkatkan asupan selenium menjadi 60 µg per berat badan setiap hari. selenium bekerja sama dengan vitamin E sebagai zat antioksidan untuk memperlambat oksidasi asam lemak tak jenuh. Konsumsi garam Cu dalam jumlah sepuluh kali lebih besar daripada yang terdapat dalam bahan pangan secara normal. sebagai bagian dari enzim tirosinase yang mengkatalisis konversi tirosin menjadi melanin. Selenium diketahui memperbaiki sistem imunitas (kekebalan tubuh) dan fungsi kelenjar tiroid.16 aorta) dan kolagen. yaitu 70 µg per berat badan setiap hari. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari.

panas. keton. alzheimer’s). seperti infeksi. penyakit jantung. yaitu : a) inisiasi. immunologi. Tahap propagasi terjadi akibat reaksi antara radikal bebas (R●) yang terbentuk pada tahap inisiasi dengan oksigen menghasilkan radikal peroksida (ROO●). Pada tahap inisiasi terjadi pembentukan radikal bebas (R●) akibat reaksi antara asam lemak (RH) dengan beberapa katalisator. Penelitian mengenai metabolit sekunder dari moluska telah banyak dilakukan. (2008) diketahui bahwa ekstrak metanol kijing Taiwan yang berpotensi sebagai antioksidan. 2. anti-inflammatory. alkohol dan asam-asam dengan karakteristik dan cita rasa tengik (Winarno 1984). antivirus. selanjutnya tahap terakhir adalah tahap terminasi ditandai dengan terbentuknya produk-produk non radikal seperti aldehida. Hamman et al. (1996) melaporkan telah mengisolasi kahalaide F dari kerang jenis Elysia rubefescens yang memiliki aktivitas sebagai antikanker usus dan prostat. neurologi (parkinson.52 ppm. memperlambat atau mencegah terjadinya proses oksidasi. dan cahaya. Mekanisme oksidasi asam lemak tidak jenuh menurut Hamilton (1983) dan Gordon (1990) terdiri dari 3 tahap. Moluska merupakan salah satu dari invertebrata laut yang diketahui menghasilkan metabolit sekunder dan sekaligus mempunyai peranan penting dalam ekologinya sehingga menjadi target bagi sumber senyawa bioaktif yang bermanfaat dalam dunia farmasi bahari. Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak kijing Taiwan adalah kelompok alkaloid dan flavonoid. yaitu nilai IC50 sebesar 201. Ranney (1979) mengklasifikasikan antioksidan atas tiga golongan berdasarkan prinsip kerjanya dalam mencegah terjadinya proses oksidasi. Pertama adalah antioksidan yang mempunyai gugus fenol dan amina aromatik . dan antikanker. b) propagasi dan c) terminasi. misalnya oksigen.5 Antioksidan dan Metode Pengukurannya Senyawa antioksidan secara umum didefinisikan oleh Schuler (1990) sebagai suatu senyawa kimia yang dapat menunda. Radikal peroksida yang terbentuk akan mengikat ion hidrogen dari molekul lemak yang lain membentuk hidroperoksida (ROOH) dan radikal lemak lain (R1).17 untuk pengobatan penyakit. Hasil penelitian Salamah et al. Proses oksidasi tersebut biasanya terjadi dalam produk terutama yang berlemak dengan kandungan asam lemak tidak jenuh sehingga dapat menyebabkan kerusakan produk atau ketengikan. ion logam.

butylated hydroxyanisole (BHA). Contoh antioksidan ini adalah dilauril tiodipropionat (DLTP). maka radikal antioksidan tersebut tidak akan berperan sebagai inisiator dari berikutnya. tertiarybutyl hydroquinon (TBHQ) dan tokoferol (Buck 1991). Antioksidan sintetik sangat efektif dalam menghambat reaksi oksidasi lemak akan. metilen bisfenol dan difenilamin. Propil galat. Molekul ini mengandung atom sulfur teroksidasi yang mampu bereaksi dengan molekul hidroperoksida berikutnya. tetapi penggunaan antioksidan sintetik banyak menimbulkan kekuatiran akan efek sampingnya karena telah banyak . tetapi tanpa melibatkan radikal bebas. Penggolongan ini terdiri atas dua yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami. butylated hydroxytoluene (BHT). Kedua produk yang dihasilkan pada kenyataannya mungkin bereaksi dengan radikal bebas kedua dalam sistem Mekanisme reaksi oksidasi lemak dapat dilihat sebagai berikut : Tahap inisiasi : ROOH ROOH 2ROOH Tahap propagasi : R● + O2 ROO● + R1 H Tahap terminasi : ROO● + R1 OO● R● + RO● ROO● RO● RO● + H● + OH + OH ROO● R1● + ROOH ROOH1 + O2 ROR1 Gambar 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990). Jika radikal antioksidan yang dihasilkan cukup stabil mencegah reaksi berikutnya. Jenis penggolongan antioksidan yang lain berdasarkan sumber diperolehnya senyawa tersebut.18 seperti butylated hydroxyanisole (BHA). Kedua adalah antioksidan yang berfungsi dengan cara menghilangkan molekul-molekul hidroperoksida dari sistem. Beberapa antioksidan sintetik yang sering digunakan dalam industri pangan antara lain butylated hydroxytoluene (BHT). Penggolongan ketiga ini sama dengan antioksidan sekunder menurut Winarno (1984) dan Gordon (1990). Antioksidan-antioksidan tersebut bekerja dengan cara berinteraksi dengan radikal bebas yang terdapat di dalam sistem dan membentuk produk subtrat non radikal dan suatu radikal antioksidan. Ketiga adalah antioksidan yang dapat menginaktivasi logam yang bisa mempercepat terjadinya oksidasi.

Antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstrak bahan alami. Ketika sebuah antioksidan mampu mendonorkan hidrogen yang beraksi dengan radikal DPPH. Suratmo 2009). yang memiliki rumus molekul C18H12N5O6 dan Mr=394.1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). .19 penelitian tentang efek patologis yang ditimbulkannya. b) tidak menimbulkan flavor yang tidak enak. b) antioksidan yang terbentuk akibat reaksi selama pengolahan. tokoferol (Sidik 1997). Jika senyawa ini masuk dalam tubuh manusia dan tidak terkendalikan dapat menyebabkan kerusakan fungsi sel. Antioksidan alami dalam bahan pangan diperoleh dari: a) antioksidan berupa senyawa endogen yang terdiri dari satu atau lebih senyawa yang terdapat dalam bahan pangan. turunan senyawa hidroksinat. Vattem dan Shetty 2006). dan inkubasi pada suhu kamar dimaksudkan untuk mengoptimumkan aktivitas DPPH. c) larut sempurna dalam lemak dan minyak. Adapun antioksidan yang terdapat di dalam bahan alami meliputi golongan senyawa turunan fenolat. Ketaren 1986). Radial bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil pada suhu kamar dan larut dalam pelarut seperti metanol atau etanol (Molyneux 2004. Penggunaan bahan antioksidan baik alami maupun sintetik dalam bahan pangan. Penurunan pada absorbsi dapat diukur secara spektrofotometrikal dan dibandingkan dengan sebuah kontrol etanol atau metanol untuk mengkakulasikan aktivitas scavenging radikal DPPH (Vattem dan Shetty 2006). d) efektif dalam jumlah yang relatif kecil menurut rekomendasi Food and Drug Administration dosis yang diizinkan dalam bahan pangan adalah 0. Ada beberapa metode pengukuran aktivitas antioksidan yang dapat digunakan salah satunya adalah metode 1.01-0. c) antioksidan yang merupakan senyawa eksogen yaitu dengan penambahan antioksidan yang diisolasi dari sumber alami (Pratt 1992). reaksi ini akan memberikan peningkatan kompleks non radikal dan menurunkan radikal DPPH yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning. harus memenuhi persyaratan tertentu yaitu: a) tidak beracun dan tidak mempunyai efek fisiologis. Pada uji ini metanol digunakan sebagai pelarut.33 (Molyneux 2004. Senyawa DPPH dalam metode ini digunakan sebagai model radikal bebas.1% dan e) tidak mahal serta selalu tersedia (Coppen 1983. rasa dan warna pada lemak atau bahan pangan. kumarin.

20

Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen, maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH, jika semua elektron pada radikal bebas DPPH berpasangan, maka warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm akan hilang. Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH disajikan pada Gambar 5. DPPH* Free radical + AH antioksidan DPPH-H neutral + A* new radical

Puplish color

Yellowish color

Gambar 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007). Parameter yang digunakan untuk menginterpretasikan hasil pengujian dengan metode DPPH adalah EC50 (efficient concentration) atau biasa disebut IC50 (inhibition concentration). Inhibition concentration (IC50) dapat didefinisikan sebagai kosentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 0,05 mg/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 0,05-0,10 mg/mL, sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/mL, dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/mL (Blois 1958 diacu dalam Molyneux 2004).

21

3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Sampel diambil dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Provinsi Papua Barat. Ekstraksi dan uji aktivitas antioksidan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan Pusat

Laboratorium Kimia Analitik, FMIPA, Institut Pertanian Bogor,

Laboratorium Terpadu IPB-Bogor. Identifikasi senyawa antioksidan dilakukan di Balai Pengkajian Bioteknologi (Biotech Center-BPPT), Serpong. Penelitian dilaksanakan dari bulan Agustus 2010 – Maret 2011. Gambar 6 menunjukkan diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa antiokksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).
Tambelo kering Maserasi dengan MeOH Ekstraksi dengan MeOH Partisi dengan pelarut n-heksan, dan etil asetat Ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak metanol Uji Fitokima Uji antioksidan Ekstrak terplilih KLT Eluen terbaik Analisis kimia : - uji proksimat - uji asam amino - uji asam lemak - uji mineral

Kromatografi kolom

Uji Fitokima

Uji antioksidan Fraksi terpilih Identifikasi dengan LC-MC

Gambar 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).

antioksidan

22

3.2 Bahan dan Alat Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah tambelo yang berasal dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Propinsi Papua Barat. Tambelo diperoleh dari batang pohon mangrove Rhizopora yang sudah lapuk. Tambelo dibersihkan dengan melepaskan cangkang dan pallet kemudian dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. Tambelo kering selanjutnya digiling dengan menggunakan mortar dan disimpan pada suhu rendah (5-10 oC) sampai siap untuk dianalisis. Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi adalah n-heksana, etil asetat, metanol, dan kertas saring Whatman 40. Bahan kimia yang digunakan untuk uji antioksidan adalah DPPH (1,1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl), BHT dan vitamin super ester C sebagai standar. Bahan untuk uji fitokimia adalah H2SO4, akuades, kloroform p.a (pengenceran), anhidra asetat, asam sulfat pekat, HCl 2N, pereaksi Dregendorff, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, serbuk magnesium, alkohol, HCl 37%, etanol 70%, FeCl3 5%, pereaksi Molish, pereaksi benedict, pereaksi biuret, dan larutan ninhidrin 0,1%. Peralatan utama yang digunakan adalah kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom (KK), spektrofotometer UV-Vis JENWAY 6305,

kromatografi cair (LC-MS) AGILENT TECHNOLOGIES, vacum rotary evaporator Buchi Rotavapor R-205, dan Spektrofotometer serapan atom (SSA) Shimazu-7000. 3.3 Prosedur Penelitian Penelitian ini terbagi atas dua tahap, yaitu 1) analisis komponen kimia tambelo, dan 2) Ekstraksi bahan aktif tambelo. Penelitian tahap pertama meliputi analisis rendemen, uji proksimat, asam lemak, asam amino, dan mineral. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif dengan metode maserasi, partisi cair-cair, uji fitokimia, uji antioksidan dengan metode DPPH, dan identifikasi senyawa

antioksidan dari bahan aktif yang dihasilkan. 3.3.1 Penelitian tahap pertama Penelitian tahap pertama ini bertujuan untuk mendapatkan presentase bagian tubuh yang dapat dimanfaatkan dan memperoleh nilai kandungan gizi atau komposisi kimia dari tambelo. Analisis kandungan gizi terdiri dari analisis

3. Prinsipnya adalah pembakaran atau pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi . dan uji kadar protein menggunakan metode kjedahl. a) Analisis kadar air (AOAC 2005) Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 102-105 o C selama 30 menit.23 proksimat yang meliputi kadar air. kemudian dimasukan kedalam cawan. dengan rumus : 3. kadar abu.1. Cawan tersebut diletakkan dalam desikator (kurang lebih 30 menit) hingga dingin kemudian ditimbang hingga beratnya konstan (A).2 Uji proksimat (AOAC 2005) Analisis proksimat yang dilakukan meliputi uji kadar air dan abu dengan metode oven. Cawan tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 102-105 oC selama 6 jam.3.3. Cawan tersebut kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang bobotnya (C). dan karbohidrat. kadar protein. uji kadar lemak menggunakan metode sokhlet. Tambelo ditimbang sebanyak 1-2 g (B).1 Rendemen (Hustiany 2005) Tambelo dikeluarkan dari freezer. Rendemen merupakan presentase perbandingan antara bagian yang digunakan dengan berat utuh tambelo segar. serta asam lemak. Daging tembelo yang sudah kering ditimbang kembali untuk mengetahui penurunan berat setelah dikeringkan. Kadar air ditentukan dengan rumus: Keterangan: A = berat cawan kosong (gram) B = berat sampel sebelum dioven (gram) C = berat cawan berisi sampel setelah dioven (gram) b) Analisis kadar abu (AOAC 2005) Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven.1. dicairkan kemudian ditimbang beratnya selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. analisis asam amino. kadar lemak.

Apabila abu belum putih benar harus dilakukan pengabuan kembali. Abu dibasahi (dilembabkan) dengan akuades secara bertahap. dan titrasi. kemudian cawan abu porselin kosong ditimbang untuk mengetahui bobot cawan kosong (A). Homogenat sampel ditimbang 2 gram pada kertas timbang. yaitu destruksi. Kadar protein dihitung berdasarkan kesetimbangan reaksi kimia. suhu tungku pengabuan diturunkan hingga suhu 40 oC. Cawan porselin dikeluarkan dengan menggunakan penjepit dan masukan ke dalam desikator selama 30 menit. sehingga diperoleh abu berwarna putih. Tahapan destruksi adalah sebagai berikut: sampel dilumatkan dengan blender hingga partikelnya dapat melewati saringan 20 mesh. kemudian dikeringkan menggunakan hot plate dan diabukan kembali pada suhu 550-600 oC sampai diperoleh berat yang konstan. Cawan abu porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit. Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari tiga tahap. kemudian masukan ke dalam oven bersuhu 550-600 oC selama 24 jam atau sampai pengabuan sempurna. Sampel dimasukan dalam kantong plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Kadar abu dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: A = Berat cawan kosong (gram) B = Berat sampel sebelum pengabuan (gram) C = Berat cawan berisi sample setelah pengabuan (gram) c) Analisis kadar protein (AOAC 2005) Penentuan kadar protein dilakukan dengan metode total nitrogen yang didasarkan pada reaksi penetralan asam basa. Suhu pengabuan diturunkan sampai ± 40 oC lalu dipindahkan cawan abu porselin ke dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang bobotnya (C) segera setelah dingin. destilasi. kemudian dimasukan ke dalam labu . Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang 2 gram dan dimasukan ke dalam cawan abu porselin ditimbang (B). Prosedur analisis kadar abu dalam bahan pangan adalah sebagai berikut: cawan abu porselin yang kosong dimasukkan ke dalam oven. Zat anorganik ini disebut abu. setelah selesai.24 air (H2O) dan karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar.

Kadar protein dapat dihitung dengan persamaan berikut : Keterangan : KP = Kadar Protein Va = mL HCl untuk titrasi sampel Vb = mL HCl untuk titrasi blanko N = Normalitas HCl yang digunakan W = berat sampel c) Analisis kadar lemak (AOAC 2005). Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukan ke dalam wadah plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Sampel hasil destruksi didiamkan hingga mencapai suhu kamar dan tambahkan 50-75 mL akuades. Destruksi dilakukan pada suhu 410 oC selama 2 jam atau sampai larutan jernih. Sampel tersebut selanjutnya ditambahkan dua tablet katalis serta beberapa butir batu didih. sehingga hasil lemak tertinggal dalam labu. Tahap ketiga adalah titrasi hasil destilat dengan HCl 0. posedur tahapan ini sebagai berikut: sebanyak 25 mL larutan H3BO3 4% yang mengandung indikator sebagai penampung destilat dimasukan dalam erlenmeyer. Sampel ditambahkan 15 mL asam sulfat pekat (95-97%) dan 3 mL hidrogen peroksida secara perlahan dan didiamkan 10 menit dalam ruang asam. Penetapan bobot lemak dihitung secara gravimetri. Labu yang berisi hasil destruksi dipasang pada rangkaian alat destilasi uap.25 destruksi. selanjutnya destilat ditampung ke dalam erlenmeyer tersebut hingga volume mencapai minimal 150 mL (hasil destilasi akan berubah menjadi kuning).2 N. Pelarut organik yang mengikat lemak selanjutnya dipisahkan dengan proses penguapan (evaporasi). Analisis standar blanko dilakukan seperti tahapan sampel. Tahap kedua adalah distilasi. Prinsip analisis kadar lemak diawali dengan melakukan pengekstrakan sampel dengan pelarut organik untuk mengeluarkan lemak dengan bantuan pemanasan pada suhu titik didih pelarut selama 8 jam. yang sudah dibakukan sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral. kemudian ditambahkan 50-75 mL larutan natrium hidroksida dan natrium thiosulfat dan dilakukan destilasi. Apabila sampel tidak langsung .

protein. Prosedur analisis asam . Sampel dikondisikan pada suhu ruang dan pastikan sampel masih homogen sebelum ditimbang. Prosedur analisis lemak adalah sebagai berikut : labu alas bulat ditimbang dalam keadaan kosong (A). dan pasang rangkaian sokhlet dipasang dengan benar.3 Analisis asam amino (AOAC 1994) Komposisi asam amino ditentukan dengan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). maka disimpan dalam refrigerator sampai saatnya akan dianalisis. Labu alas bulat yang berisi lemak ditimbang (C) sampai berat konstan. Kadar lemak dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: KL = kadar lemak A = bobot contoh B = bobot labu lemak dan labu didih C = bobot labu lemak.26 dianalisis.( % air + % lemak + % protein + % abu ) 3. Berturut-turut dimasukan 150 mL n-heksana ke dalam labu alas bulat. Begitu pula dengan syringe yang akan digunakan juga harus dibilas dengan akuades. Perhitungannya sebagai berikut: % Karbohidrat = 100 % . Campuran lemak dan heksana dalam labu alas bulat dievaporasi sampai kering. Perangkat HPLC sebelum digunakan harus dibilas dengan eluen yang akan digunakan selama 2-3 jam. selongsong lemak ke dalam ekstractor soxhlet. Apabila terjadi pemisahan cairan dan sampel. lemak dan abu. batu didih dan lemak d) Analisis kadar karbohidrat (AOAC 2005) Perhitungan kadar karbohidrat dilakukan menggunakan metode by difference yaitu pengurangan 100 % dengan jumlah dari hasil empat komponen yaitu kadar air. Labu dan lemak didinginkan dalam desikator selama 30 menit. Ekstraksi dilakukan pada suhu 60 oC selama 8 jam.1. Labu alas bulat yang berisi lemak dimasukan ke dalam oven bersuhu 105 oC selama ± 2 jam untuk menghilangkan sisa n-heksana dan air. maka dilakukan pengadukan ulangan dengan blender sebelum dilakukan pengamatan. Homogenat sampel ditimbang sebanyak 2 gram (B) dan masukan ke dalam selongsong lemak (ekstraction timbles).3.

9x150 μm Kecepatan alir eluen : 1 ml/menit Tekanan Fasa gerak : 3000 psi : . Kondisi alat HPLC saat berlangsungnya analisis asam amino: Temperatur Jenis kolom : 27 oC (suhu ruang) : pico tag 3.Buffer fosfat 0. Metil ester asam lemak (FAME) ini dianalisis dengan alat kromatografi gas.1 M Detektor Panjang gelombang Derivatisasi Tipe injeksi Program : UV : 256 nm : derivatisasi pre-kolom : on column injection tanpa septum : isokratik (kecepatan aliran eluen konstan) Kandungan masing-masing asam amino pada bahan dapat dihitung dengan rumus: Keterangan : C = konsentrasi standar asam amino (2.27 amino menggunakan HPLC disajikan Gambar 7.1. sehingga suhu operasi biasanya lebih tinggi dari suhu kamar dan biasanya dilakukan derivatisasi untuk contoh yang sulit menguap. Komponen-komponen yang dipisahkan harus mudah menguap pada suhu pemisahan yang dilakukan.5 μg) FB = faktor pengenceran ( 133. Identifikasi tiap komponen dilakukan dengan .4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) Kandungan asam lemak dapat ditentukan dengan metode gas kromatografi didasarkan pada partisi komponen-komponen dari suatu cairan di antara fasa gerak berupa gas dan fasa diam berupa zat padat atau cairan yang tidak mudah menguap yang melekat pada bahan pendukung inert. kemudian ditransformasi menjadi bentuk esternya yang bersifat lebih mudah menguap.Asetoniril 60% .3.1 mL) BM = bobot molekul dari masing-masing asam amino (g/mol) 3. Transformasi dilakukan dengan cara metilasi sehingga diperoleh metil ester asam lemak (FAME). Tahapan analisis asam lemak diawali dengan menghidrolisis lemak/minyak dalam sampel menjadi asam lemak.

natrium asetat. dan trietilamim dengan perbandingan 2:2:1) Pengeringan dengan gas N2 Hidrolisat protein kering Penambahan 30 μL larutan derivatisasi ( campuran antara metanol. Tambelo kering 0. Waktu retensi dihitung pada kertas rekorder sebagai jarak dari garis pada saat muncul puncak pelarut sampai ke tengah puncak komponen yang dipertimbangkan.45 mikron Injeksi ke alat HPLC Kromatogram Gambar 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC. .75 g Penambahan 5-10 ml HCl 6N Pemanasan dalam oven pada suhu 100 oC selama 24 jam Hidrolisat Protein Penyaringan dengan milipore berukuran 45 mikron Filtrat hidrolisat Penambahan 30 μL larutan pengering (campuran antara metanol.75 g 0. pikoiotisianat. dan trietilamin dengan perbandingan 3:3:4) Pengenceran dengan buffer asetat sebanyak 200 μL lalu dibiarkan selama 20 menit Penyaringan dengan milipore berukuran 0.28 membandingkan waktu retensinya dengan standar pada kondisi analisis yang sama.

29

a. Preparasi contohd (hidrolisis dan esterifikasi) Contoh lemak ditimbang sebanyak 20-30 mg, kemudia ditambahkan 1 mL larutan NaOH 0,5 N ke dalam metanol dan dipanaskan dalam penangas air selama 20 menit. Sebanyak 2 mL BF3 16% dan 5 mg/mL standar internal ditambahkan pada sampel tersebut, lalu dipanaskan lagi selama 20 menit dan selanjutnya didinginkan. Sampel kemudian ditambahkan 2 mL NaCl jenuh dan 1 mL n-heksana, lalu dikocok dengan baik. Lapisan heksana dipindahkan dengan

bantuan pipet tetes ke dalam tabung yang berisi 0,1 gram Na2SO4 anhidrat, dibiarkan 15 menit. kromatografi gas. b. Analisis komponen asam lemak dengan kromatografi gas Pelarut sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam kolom. Bila aliran gas pembawa dan sistem pemanasan sempurna, puncak pelarut akan nampak dalam kurang dari 1 menit. Sebanyak 5 µL campuran standar FAME diinjeksikan Fasa cair dipisahkan dan selanjutnya diinjeksikan ke

setelah pena kembali ke nol (baseline). Jika semua puncak sudah keluar, diinjeksikan 5 µL sampel yang telah dipreparasi (A). Waktu retensi dan puncak masing-masing komponen tersebut kemudian diukur. Jika rekorder dilengkapi dengan integrator, waktu retensi dan luas puncak langsung diperoleh dari integrator dan membandingkan waktu retensinya dengan standar untuk mendapatkan informasi mengenai jenis dari komponen-komponen dalam contoh. Jumlah dari masing-masing komponen dalam sampel dihitung menggunakan metode internal standar, dengan cara sebagai berikut :

Keterangan :
Cx Cs Ax As R = = = = = kosentrasi komponen x kosentrasi standar internal luas puncak komponen x luas puncak standar internal respon detektor terhadap komponen x relatif terhadap standar

30

Kondisi alat kromatografi gas pada saat dilakukan analisis : 1. Kolom 2. Dimensi kolom 3. Laju alir n2 4. Laju alir h2 5. Laju alir udara 6. Suhu injektor 7. Suhu detektor 8. Suhu kolom - Kolom temperatur : cyanopropil methylsil (kolom kapiler) : p=60m,ø dalam = 0.25 mm, 025 µm film tickness : 20 ml/menit : 30 ml/menit : 200 – 250 ml/menit : 200 oc : 230 oc : program temperatur : awal 190 oC diam 15 menit akhir 230 oC diam 20 menit 9. Ratio 10. Injeksi volum 11. Linier velocity 3.3.1.5 Analisis mineral Mineral yang dianalisis pada sampel tambelo meliputi mineral kalsium (Ca), kalium (K), magnesium (Mg), besi, (Fe), natrium (Na), mangan (Mn), klorida (Cl), seng (Zn), fospat, dan tembaga (Cu), dianalisis dengan metode spektrofotometer serapan atom (SSA). a. Analisis mineral kalsium (Ca), kalium (K), dan seng (Zn) (Yosida et al. 1972). Prinsip penentuan kadar kalsium, kalium dan seng adalah proses pelarutan sampel dengan asam klorida, kemudian absorbansinya diukur dengan : 1:8 : 1 µl : 20 cm.sec

menggunakan SSA. sebagai berikut:

Prosedur analisis mineral kalsium, kalium dan seng adalah

Sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram,

kemudian dihancurkan dan dimasukkan ke dalam gelas piala yang telah dibilas dengan HCl 1 N. Sampel ditambahkan dengan 25 mL HCl 1 N dan disimpan selama 24 jam. Setelah penyimpanan, sampel dikocok dengan shaker dan

disaring dengan kertas Whatman No.1. 1). Analisis mineral kalsium (Ca) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 1 mL, ditambahkan 2 mL larutan lantanum oksida dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 10 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL.

31

Larutan diukur absorbansi dengan SSA pada panjang gelombang 285,2 nm untuk magnesium dan 422,7 nm untuk kalsium. 2). Analisis mineral kalium (K) dan seng (Zn) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 2 mL dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 40 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL. Larutan diukur absorbansi dengan AAS pada panjang gelombang 766,5 nm untuk kalium dan 213,9 nm untuk seng. b. Analisis mineral besi (Fe) Prinsip penentuan kadar besi adalah proses pelarutan bahan dengan larutan asam campur yang terdiri dari asam nitrat, asam sulfat dan asam perklorat, kemudian dilanjutkan dengan proses pemanasan. Prosedur analisis mineral besi adalah sebagai berikut: sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram, kemudian dihancurkan. HNO3, H2SO4, Larutan asam campuran disiapkan yang dibuat dari Sampel yang telah

dan HClO4 dengan perbandingan 5:1:2.

hancur ditambah 10 mL larutan asam campur lalu dipanaskan di dalam ruang asam menggunakan api kecil selama 2 jam. Api dibesarkan sampai larutan

menjadi jernih. Kemudian didinginkan. Larutan ditambahkan akuades sampai volume 50 mL dan disaring dengan kertas saring pencucian asam Whatman No.1 (acid-washed filter paper whatman No.1). Sebanyak 10 mL ekstrak sampel ditambahkan 1 mL hidroquinon dan 1 mL orto-fenantrolin, kemudian ditambahkan sodium sitrat sampai pH menjadi 3,5. Larutan diencerkan dengan akuades sampai volume 50 mL dan dipanaskan dalam water bath selama 1 jam. Larutan deret standar diperlakukan dengan pereaksi yang sama dengan ekstrak sampel. Absorbansi diukur dengan SSA pada panjang gelombang 248,3 nm. c. Analisis mineral tembaga (Cu) dan mangan (Mn) (SNI 01-2362-1991) Prinsip dari penentuan kadar tembaga dan mangan adalah proses pengabuan dengan suhu 450 oC dengan penambahan asam nitrat (HNO3). Prosedur analisis sebagai berikut: sampel ditimbang sebanyak 25 gram dalam gelas piala 250 mL yang terdahulu dicuci dengan HNO3 6N. Sampel dikeringkan di dalam oven pengering pada suhu 110-125 oC selama 8-24 jam. Sample kering kemudian dipindahkan ke dalam tungku, dan atur suhu pada 250 oC. Suhu tunggu

Abu dilarutkan ke dalam 2 mL HNO3 pekat. Sampel diletakkan diatas hot plate untuk menguapkan HNO3. 3. kemudian filtrat yang dihasilkan digabungkan dan dipekat dengan menggunakan rotary evaporator. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya proses pembakaran secara cepat yang menyebabkan contoh dapat terhambur keluar. Tahapan proses ekstraksi tambelo meliputi penghancuran sampel. blanko dan contoh dialirkan ke dalam SSA.42 yang sebelumnya telah dicuci dengan HNO3 10% dan akuades. Sampel tersebut kemudian ditambahkan 0. Larutan standar. Jika proses sampel abu belum putih sempurna. sampel dikeluarkan dari tungku dan dinginkan.1 Ekstraksi bahan aktif Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi tambelo yaitu tiga macam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya. Setiap 1 x 24 jam dilakukan penyaringan.3. Kondisi pada suhu ini dibiarkan sesaat untuk memberikan kesempatan sebagian besar lemak terbakar habis. 3. Sampel kering ditimbang sebanyak 500 gram. apabila tidak proses penambahan asam nitrat harus diulangi.25-1 mL HNO3 pekat. uji aktivitas antioksidan. Kenaikkan suhu kemudian dilanjutkan hingga 450 oC. Filtrat yang diperoleh kemudian diencerkan dengan akuades hingga 50 mL. Absorbansi mineral Cu dan Mn masing-masing diukur dengan SSA pada panjang gelombang 324.3. serta uji fraksinasi dan identifikasi senyawa antioksidan. Sampel kemudian dipanaskan kembali pada suhu 450 oC di dalam tungku selama 30-60 menit.2 Penelitian tahap kedua Penelitian yang dilakukan pada penelitian tahap kedua adalah ekstraksi bahan aktif. dan metanol (polar). Abu yang dihasilkan harus benar-benar putih. yaitu heksana (non polar). Larutan disaring dengan kertas saring Whatman No. partisi. kemudian diencerkan dengan akuades hingga 25 mL dan didihkan di atas hot plate. kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol (MeOH) sebanyak 2500 mL. etil asetat (semi polar).7 nm dan Mn 285. . perbandingan 1:5 pada suhu ruang selama 3x24 jam.2 nm. Ekstrak MeOH pekat dipartisi dengan n-heksana menggunakan corong pisah diulang sebanyak 3 kali. uji fitokimia.32 dinaikkan secara bertahap hingga mencapai 350 oC selama periode 1-2 jam.2. dan evaporasi. dan dibiarkan selama semalam (16-24 jam). maserasi.

Ekstrak MeOH setelah partisi n-heksana dipartisi kembali dengan etil asetat. diulang sebanyak 3 kali. lalu dihitung Ekstrak metanol sisa partisi dipekatkan kembali dan dihitung Semua ekstrak diuji fitokimia dan uji antioksidan (Miyaoka et al.33 Fase n-heksana dikumpulkan dan dipekatkan dan dihitung rendemennya. . 2008). 1998. Fase etil asetat dikumpulkan dan dipekatkan. rendemennya. Diagram alir proses ekstraksi bahan Sampel (500 g) Maserasi 3x24 jam dengan MeOH perbandingan 1:5 Penyaringan Filtrat Evaporasi Ekstrak MeOH Dipartisi dengan n-Heksana Residu Fase n-heksana Evaporasi Fase MeOH Dipartisi dengan etil asetat Fase etil asetat Ekstrak n-Heksana Evaporasi Fase MeOH Evaporasi Ekstrak etil asetat Ekstrak MeOH Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al. 2008). aktif tambelo disajikan pada Gambar 8. rendemen. Ebada et al.

e) Uji Tanin Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan dalam 5 ml etanol ditambah dengan beberapa tetes pereaksi FeCl3 1 %. Terbentuknya warna hijau atau hijau biru menunjukkan adanya senyawa fenol dalam bahan. c) Uji steroid/Triterpenoid Sampel sebanyak 1 gram ditambahkan 25 mL etanol 30% dipanaskan (50 oC) dan disaring. dipisahkan dan ditambahkan 5 ml air kemudian dikocok sampai timbul busa yang stabil. selanjutnya diamati warna yang terbentuk. Fraksi asam diambil kemudian ditambahkan pereaksi Dragendrof. d) Uji Flavonoid Sebanyak 1 gram sampel ditambah metanol 30% sampai terendam kemudian dipanaskan. Filtratnya ditaruh ke dalam spot plate (papan uji) kemudian ditambahkan H2SO4 pekat. Filtratnya diuapkan kemudian ditambahkan eter. f) Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl3) Sebanyak 1 g sampel diekstrak dengan 20 ml etanol 70%.2. Meyer. . dan Wagner. Fraksi metanol dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2M. Lapisan eter yang terbentuk dipipet dan diletakkan papan uji (spot plate) dengan menambahkan pereaksi Liebermen Buchard (3 tetes asam asetat anhidrin dan 1 tetes H2SO4 pekat).34 3. Adanya tannin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau. jika terbentuk warna hijau adalah steroid dan warna merah adalah triterpenoid. Residu yang tidak larut dalam dietil eter diambil. adanya flavonoid ditunjukkan oleh terbentuknya warna merah akibat penambahan H2SO4. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5%. biru atau ungu.3.2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995) a) Uji alkaloid Sampel sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan 10 mL metanol dan beberapa tetes amoniak. b) Uji saponin Sebanyak 50 mg sampel ditambah dietil eter.

Prinsip kerjanya pada sampel (mengandung senyawa bersifat antioksidan) yang dapat meredam radikal bebas DPPH. Persamaan regresi diperoleh dari hubungan antara kosentrasi sampel dan persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. yaitu kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kolom (KK).3.35 3. 40. Ekstrak tersebut masing-masing ditambahkan 200 μl larutan DPPH 1mM dalam metanol.3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995) Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode perendaman radikal bebas DPPH (1. Persamaan regresi yang diperoleh dalam bentuk y = bx + a.3. Ekstrak dilarutkan dalam metanol dan dibuat dalam berbagai konsentrasi ( 20. pemilihan pelarut untuk fraksinasi dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada . dan 10 ppm. Butylated hydroxytoluene (BHT) dan vitamin super ester C digunakan sebagai kontrol positif. Nilai absorbansi sampel diperoleh persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. 6. 3.1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl) (Yeh dan Cen 1995). 8. a) Kromatografi lapis tipis (KLT) Pada penelitian ini. Metode yang digunakan ada dua macam. dan 80 ppm). Volume dicukupkan sampai 5 mL. kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Serapan sampel tersebut diukur pada panjang gelombang 515 nm. Hambatan dihitung dengan rumus. Pengujian ini dilakukan sebanyak tiga kali ulangan.4 Fraksinasi senyawa antioksidan Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (ekstrak terpilih). kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit.2. 60. Persamaan ini digunakan untuk mencari Inhibition Concentration 50 % (IC50) dengan memasukkan angka 50 sebagai y sehingga didapatkan nilai x sebagai IC50. Nilai kosentrasi dan hambatan ekstrak diplotkan masing-masing pada sumbu x dan y. Uji ini dilakukan terhadap ekstrak tambelo.2. dan untuk pembanding dengan masing-masing kosentrasi 4.

Kombinasi pelarut yang menghasilkan pengembangan spot terbaik digunakan sebagai eluen untuk memfraksinasi ekstrak terpilih dengan kromatografi lapis tipis maupun kromatografi kolom. b) Kromatografi kolom (KK) (Gritter et al.36 kromatografi lapis tipis (KLT). Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT dapat disajikan pada Gambar 9. untuk memilih eluen terbaik dicoba dengan berbagai eluen n-heksana. lalu dilakukan penjenuhan silika gel dalam kolom selama 30-60 menit. pelarut heksan : etil asetat dengan perbandingan 1:1 mL dan pelarut kloroform : metanol dengan perbandingan 17:3 mL. etil asetat. Pada proses penjenuhan. pelarut heksan:etil asetat dengan perbandingan 8:2 dan n-heksana:kloroform (3:2). Ekstrak terpilih sebanyak 0. Semua larutan silika gel masuk ke dalam kolom. Ekstrak aktif KLT (silika gel) CHCl3:MeOH 9:1ml CHCl3:MeOH Heksan:EtOH 1:1ml 17:3 ml Heksan:EtOH 8:2ml Heksan :CHCl3 3:2 ml terbentuknya spot terbanyak Gambar 9 Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT. Kombinasi yang digunakan adalah pelarut kloroform:metanol dengan perbandingan 9:1 mL.02 gram dilarutkan dalam 0. l99l) Pelaksanaan kromatografi kolom dilakukan dengan memasang kolom pada statif secara tegak lurus.5 mL pelarutnya. Kolom diberi glasswool pada bagian bawahnya. kloroform. Pencucian kolom dilakukan dan pembuatan larutan silika gel (silika gel G40-63) yang akan dimasukkan ke dalam kolom sebelum ekstrak dimasukkan ke dalam kolom. Larutan ekstrak tersebut kemudian ditotolkan pada plat silika gel 60 F254 dengan panjang l0 cm. dan metanol. Diagram alir fraksinasi dengan metode kromatografi kolom dapat dilihat pada Gambar 10. bagian atas kolom ditutup . Silika gel sebanyak 13-15 gram dilarutkan pada eluenn kloroform : metanol = 9:1 sehingga diperoleh larutan silika gel.

Larutan dalam tabung reaksi kemudian dikeringkan untuk menghasilkan residu ekstrak. Ekstrak dibiarkan mengalir ke bagian penjerap kolom dan kolom terus diisi agar silika gel tidak kering. . Silika gel harus jenuh sebelum ekstrak dimasukkan dan setelah silika gel jenuh maka kran kolom dibagian bawah kolom dibuka kembali setelah semua ekstrak masuk ke dalam kolom. serta diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH (Yeh dan Cen 1995). Larutan yang keluar dari kolom ditampung pada tabung reaksi dengan masing-masing tabung reaksi berisi ± 3 mL. dihitung rendamennya. Larutan silica gel + eluen 1: 1 (w/v) Larutan silika gel dimasukkan ke dalam kolom Pembuatan larutan ekstrak terpilih 1 g ekstrak terpilih + 3 ml eluen Dijenuhkan selama 30-60 menit Eluen dikeluarkan (silica gel tidak boleh kering) Larutan ektrak terpilih dimasukkan ke dalam kolom Kran dibuka Kolom terus dialiri eluen Larutan ditampung pada tabung reaksi (±10 ml) Ekstrak aktif Gambar 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom. dan setiap fraksi penggabungan yang terbentuk dikeringkan dengan aerator di ruang asam.37 dengan aluminium foil untuk mencegah penguapan eluen yang terdapat dalam kolom sehingga silika gel tetap dalam kondisi basah. Ekstrak yang akan difraksinasi adalah ekstrak terpilih sebesar 1 gram dan dilarutkan pada pelarut asal sebanyak 3 mL. Fraksi hasil kromatografi Kolom (KK) dilakukan pengujian KLT untuk penggabungan fraksi dengan mengacu pada kesamaan pola kromatogram.

. yaitu memilih senyawa yang memiliki puncak tinggi. 1988) Fraksi terpilih dengan nilai aktivitas antioksidan yang tertinggi dilanjutkan dengan mengidentifikasi senyawa antioksidan menggunakan Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) Agilent Technologies dilakukan untuk mendapatkan bobot molekul dan rumus molekul yang sangat membantu dalam elusidasi struktur molekul.2.5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al. kemudian dicocokkan dengan senyawa yang ada pada database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). Analisis yang dilakukan pada tahap identifikasi senyawa aktif.38 3.3.

04 7.29 4. meliputi kadar air.73%.4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.27±0.95 5.01 7. air akan tersublimasi dan bahan yang tidak tersublimasi berubah menjadi padat atau kering. protein.1 Rendemen daging tambelo Hasil pengukuran rendemen daging tambelo pada Tabel 2 menunjukkan bahwa tambelo segar setelah preparasi 40. Waranmaselembun (2007) Kadar air merupakan jumlah air yang terkandung di dalam bahan pangan dan ikut menentukan kesegaran dan daya awet bahan pangan tersebut.07±0.1.00 % Berat kering 22.88±1. abu.08 14. Penurunan rendemen tambelo disebabkan penguapan kandungan air akibat bahan mengalami tekanan vakum yang sangat tinggi setelah dibekukan. dan karbohidrat.88 30.2 Kandungan proksimat tambelo Hasil analisis proksimat dari daging segar tambelo dan serbuk kering tambelo.77±2. Jumlah rendemen setelah dikeringkan sebesar 22.45±2. Hal ini juga menunjukkan bahwa organisme perairan termasuk tambelo dan ikan ini memiliki kandungan air yang tinggi sehingga diperlukan penanganan yang bagus untuk mengurangi kerusakan pada bahan beku.01 56.27 7. lemak.01 7. Kadar air .1.28±0.04 2.02 a Kering Tambelo Kerang mas ngur b 6. Tabel 3 Kandungan proksimat daging tambelo Proksimat (%) Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Segar Tambelo 82.22 5.21±0.31 0. Kandungan proksimat daging tambelo dapat dilihat pada Tabel 3.00% dan setelah dikeringkan rendemen berubah menjadi semakin kecil yang disebabkan banyaknya kandungan air yang menguap.05 17.73 % 4.72±0. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi nilai ekonomisnya sehingga lebih efektif.72±0.83 21 Sumber : a Syaputra (2007) .8 42.60 1.1 Penelitian Tahap Pertama 4.63±0.62 b Temilok 73. Tabel 2 Rendemen daging tambelo Sampel Tambelo utuh Daging tambelo Berat segar 2200 gram 40.04 4.

pembentukan senyawa esensial (hormon. kadar air tambelo kering menjadi 6. sedangkan kadar protein tambelo kering sebesar 42. setelah mengalami pengeringan dengan freeze dry. kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada bahan pangan yang dapat mempercepat pembusukkan (Winarno 1997).31%. Kandungan protein pada tambelo kering berasal dari plankton yang merupakan salah satu makanan bagi tambelo. Protein dalam plasma (serum) darah dapat juga berfungsi sebagai antioksidan (Mucthadi 2009). Kadar protein pada tambelo segar adalah 7. Fungsi utama protein bagi tubuh adalah untuk pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan. Hasil perhitungan nilai rata-rata proksimat dapat dilihat pada Lampiran 1.60%. Plankton diketahui sebagai sumber protein sekaligus simbion dalam sistem pencernaan pada tambelo. . Hasil analisis proksimat kadar air tambelo segar adalah 82. Hal ini bertujuan agar proses ekstraksi dapat berjalan lancar (Setyowati 2009). sedangkan kadar air tambelo setelah dikeringkan sebesar 6. Hal ini menunjukkan bahwa sampel kering memiliki kadar air yang cukup baik untuk dilakukan proses ekstraksi karena semakin rendah nilai kadar air bahan maka semakin memudahkan pelarut untuk mengekstrak komponen senyawa aktif yang diinginkan.63%. Protein merupakan zat gizi yang sangat penting bagi tubuh. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Syahputra (2007) yang menunjukkan bahwa kadar air temilok segar sebesar 73.72%.77%. protein berfungsi sebagai zat pembangun tubuh dan zat pengatur di dalam tubuh.40 yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri. enzim. dan transpor zat gizi dalam tubuh. bahan pengumpal darah). Kadar air yang bahan untuk ekstraksi diisyaratkan sebesar 11%. mempertahankan netralitas tubuh. pembentukan antibodi dan proses detoksifikasi. regulasi keseimbangan air dalam tubuh. karena selain sebagai sumber energi. hemoglobin. Hal ini karena air yang terdapat pada tambelo segar tersublimasi akibat adanya tekanan vakum. Kadar air tambelo kering pada hasil penelitian ini memiliki kadar air dibawah kadar air maksimum yang diisyaratkan untuk proses ekstraksi.63%. sehingga tambelo segar menjadi kering.

07%.88%.1997).88% lebih kecil dari kerang mas ngur 7.29%). yaitu sekitar 96% terdiri dari bahan organik dan air.05% dan kandungan abu pada tambelo kering 5. karena itulah disebut abu. Abu adalah zat anorganik. Lemak adalah bentuk energi berlebih yang disimpan oleh hewan sehingga jumlah lemak dalam hewan yang dijadikan bahan pangan ditentukan oleh keseimbangan energi hewan tersebut. Peranan berbagai unsur mineral bagi manusia masih belum sepenuhnya diketahui (Winarno. Hal ini terutama karena peranan asam lemak eikosapentaenoat (EPA) dan dokosaheksaenoat (DHA). sedangkan kadar lemak pada tambelo kering sebesar 14. sisanya terdiri dari unsur. sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. Elemen-elemen mineral telah jelas diketahui fungsinya pada makanan ternak. bahan-bahan organik terbakar tetapi zat anorganiknya tidak.25 kali lebih banyak daripada yang diberikan oleh karbohidrat atau protein.28%.41 Hasil analisis kadar lemak dari tambelo segar adalah 0. dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL (Muchtadi 2009). Jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Syahputra (2007). belum banyak penelitian sejenis dilakukan pada manusia. Sebagian besar bahan makanan. Tabel 3 menunjukkan bahwa kandungan abu dalam tambelo segar 2. kadar lemak tambelo lebih rendah dibandingkan dengan kadar lemak temilok segar (4. Peranan lemak ikan dalam mencegah timbulnya penyakit jantung koroner telah dibuktikan. Peranan lemak dalam bahan pangan yang utama adalah sebagai sumber energi. lebih kecil dari temilok 4. hal ini disebabkan karbohidrat merupakan bahan pembentukan tumbuh-tumbuhan dan juga terdapat pada hewan dalam jumlah tertentu. Pada proses pembakaran. Berdasarkan hasil analisis proksimat pada tambelo kering memiliki karbohidrat yang relatif lebih tinggi . jika dibandingkan dengan literatur yang ada maka nilai hasil analisis memiliki nilai yang tidak jauh berbeda. Ikan menyimpan cadangan energi dalam bentuk lemak di dalam hatinya (lebih dari 50% berat hatinya). Karbohidrat merupakan bagian terbesar dari senyawa organik.unsur mineral. yang terkenal dengan sebutan asam lemak omega 3. Lemak merupakan sumber yang dapat menyediakan energi sekitar 2. Unsur mineral juga dikenal sebagai zat organik atau kadar abu.26%.

29 1.41 0.01 Jenis Asam Amino Gambar 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo.85 1.34%). karena sebagian besar juga makanan yang diperolehnya berasal dari kayu bakau sehingga sistem pencernaannya dapat memanfaatkan selulosa dan lignin pada kayu bakau.00 0.26 0. Tambelo mengandung 17 jenis asam amino. sedangkan kromatogram standar asam amino dapat dilihat pada Lampiran 3 dan kromatogram asam amino tambelo pada lampiran 4. . Hal ini diperkuat oleh Purchon (1968) yang mengatakan bahwa sistem pencernaan yang dimiliki oleh shipworm atau tambelo mampu mencerna selulosa 80% dan lignin 45 dan pada umumnya kerang-kerangan menyimpan hasil pencernaannya dalam bentuk glikogen (gula otot) dan lemak. Jenis asam amino yang tertinggi dalam tambelo adalah asam glutamat (3.1.44%.55 2.00 1.37 0. 4.41 1. sebaliknya protein yang kurang satu atau lebih asam-asam amino esensial mempunyai mutu yang rendah (Winarno 2008). Asam amino merupakan monomolekul dari protein yang memiliki fungsi penting bagi organisme hidup.72 1. Hal ini diduga bahwa tambelo menyimpan hasil pencernaan dalam bentuk glikogen.00 2.00 3.34 0.00 3.50 3.74 1.25 0. Pada prinsipnya suatu protein yang dapat menyediakan asam amino esensial dalam suatu perbandingan yang dapat menyamai kebutuhan manusia dikatakan mempunyai mutu yang tinggi.50 2.63 1. Kadar Asam Amino (%) 4.80 1.81 1.3 Kandungan asam amino tambelo Mutu protein dinilai dari perbandingan asam-asam amino yang terkandung di dalam protein tersebut.50 0.50 1.19 0. sedangkan asam amino isoleusin yang terendah (0.55%). Kandungan asam amino dari tambelo disajikan dalam Gambar 10.56 1.42 30.

Tabel 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia dari tambelo Jenis asam amino Aspartat Glutamat Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein Histidin Treonin Ariginin Valin Metionin Isoleusin Leusin Fenilalanin Lisin TOTAL % dalam total asam amino Klasifikasi asam amino (% berat protein) AAE AANE AAA AAB AAN AAR AAS AAHi 2.29 0.97 13.81 1.41 0.26 1. AAHb = asam amino hidrofobik.19 1. Menurut the international glutamate information service (IGIS).61 2. dapat disajikan pada Tabel 4.56 1.01 1. dan asam amino hidrofobik.42 61.91 0.34 1.85 2.55 3.85 2. AAHi = asam amino hidrofilik.56 14.25 1.68 AANE = asam amino non esensial.25 1.74 1.74 1. AAE = asam amino esensial.4 4.72 0.80 1. asam amino hidrofilik.62 9.29 1. meningkatkan kesehatan mental dan meredam depresi (Linder 1992).74 40. asam amino basa.37 1.56 0. glutamat yang berasal dari makanan merupakan sumber energi utama bagi usus.19 1.63 1.81 1.41 1. Kajian-kajian menggunakan isotop-isotop stabil menunjukkan bahwa usus mendapatkan sebagian besar energi . asam amino sulfur. AAR= asam amino aromatik.80 1.19 5.55 1.26 1.55 3.63 1.58 6. asam amino asam. mempercepat penyembuhan luka pada usus.01 1.82 43.20 28.44 8. asam amino aromatik.19 1.72 0.29 0.63 0. AAS = Asam amino sulfur.43 AAHb 1.72 0. Asam glutamat bermanfaat untuk menahan konsumsi alkohol berlebih. AAA = asam amino asam.56 0. AAN = asam amino netral.92 26. asam amio netral.52 66.64 1.43 Kandungan asam amino yang terdapat di dalam tambelo diklasifikasikan menjadi sembilan jenis asam amino yang terdiri dari asam amino esensial.26 1.81 8.80 1.01 0. AAB = asam amino basa.74 1.56 0.84 20.25 1. Asam glutamat adalah asam amino non esensial yang dapat disintesis dari gugus amida pada molekul glutamin yang diubah menjadi karboksilat melalui proses hidrolisis asam atau basa.72 0.85 3. asam amino non esensial.

sistin. histidin. dan membantu meningkatkan daya ingat. Beberapa asam amino ini secara umum mempunyai kegunaan besar untuk kesehatan manusia. isoleusin. detoksifikasi dari tubuh (dalam kaitannya dengan sulfur) serta penghasil kolagen yang digunakan untuk kekenyalan kulit dan tekstur. asam aspartat. Glutathion merupakan pelindung otak dan hati dari kerusakan akibat obat atau racun. Secara medis. suatu molekul antioksidan yang memainkan peranan penting dalam mekanisme daya tahan tubuh serta perbaikan kerusakan sel dan jaringan tubuh. alanin. dan juga merupakan salah satu amino yang .44 dari metabolisme asam amino. leusin. menginaktifkan radikal bebas. prolin. usus mempunyai kontak terbesar dengan lingkungan eksternal dalam bentuk makanan. Glutamat yang berasal dari makanan diperlukan bersama dengan sistin dan glisin untuk produksi glutathion. Glutamat bersama dengan glutamin merupakan asam amino yang paling berlimpah dari 20 jenis asam amino yang mencapai 20 persen dari asam-asam amino pada usus (the international glutamate information service). Metionin juga merupakan prekusor sistin yang merupakan asam amino penghasil glutathion untuk detoksifikasi di hati. valin. dan treonin. Usus merupakan garis pertahanan pertama tubuh karena dari semua organ pencernaan. Sistin merupakan penghasil taurin yaitu suatu komponen gliutathion. baik secara langsung maupun tidak langsung di antaranya adalah metionin. glisin. Usus sangat membutuhkan glutamat. sistin digunakan untuk memperoduksi hati dan mencegah atau meredakan penyakit yang berbahaya (Cat 2000). Sistin juga diperlukan untuk kesehatan kulit. Keterkaitan dengan pengunaan tambelo sebagai obat tradisional maka ditinjau dari komposisi asam amino yang diperoleh dapat dijelaskan bahwa umumnya asam-asam amino ini mempunyai kegunaan besar bagi kesehatan manusia. lisin. phenilalanin. Asam-asam amino hasil pemecahan protein sebelum ditransportasikan ke hati terlebih dahulu diabsorbsi melalui sel-sel mukosa usus dan selanjutnya di serap oleh vena untuk kemudian ditranspor ke hati. asam glutamat. Metionin merupakan suatu antioksidan yang baik karena dapat mensuplai belerang. dan telah diperlihatkan bahwa semua glutamat yang dimakan dari bahan makanan hanya 4 % yang keluar dari tubuh. alkohol dan unsur-unsur lain yang dapat membahayakan tubuh.

dan meningkatkan produksi hormon pertumbuhan. meningkatkan daya tahan tubuh. membantu proses pemulihan. histidin digunakan dalam mengobati radang sendi dan ketulian saraf. Kekurangan metionin dapat menyebabkan akumulasi lemak di hati. Histidin merupakan suatu prekusor asam amino non esensial. dan penyakit hati atau liver (Cat 2006). Valin merupakan salah satu dari tiga asam amino rantai cabang (yang lain adalah leusin dan isoleusin) yang meningkatkan energi. otak dan sistem saraf pusat. pertumbuhan yang lambat. dan edema. memperbaiki jaringan otot. menurunkan kadar gula darah. memperkuat sistem kekebalan tubuh dengan memproduksi antibodi. membantu dalam metabolisme gula dan asam organi. Histidin di dalam tubuh diperlukan untuk pertumbuhan dan perbaikan dari semua jenis jaringan. metionin digunakan untuk gangguan depresi. mengatur gula darah. lemah. mengatur energi. luka mengkerut. Histidin berperan penting dalam pemeliharaan dan pembuatan glial sel saraf yang disebut oligo-dendrocytes (selendang atau pembungkus) dan mencegah kerusakan otak dan jaringan saraf dalam tulang punggung. Isoleusin bermanfaat dalam mempercepat penyembuhan luka. membuat pencernaan menjadi lebih baik. Leusin bermanfaat . Penambahan valin harus selalu dikombinasikan dengan isoleusin dan leusin pada rasio miligram (Bonderud 2011). Secara medis. Valin bermanfaat dalam pertumbuhan dan perbaikan jaringan otot serta menjaga keseimbangan nitrogen dan mengatur penggunaan glukosa. yang mana histidin akan membentuk sistem imun sebagai respon terhadap suatu reaksi alergi. Secara medis. Leusin bermanfaat dalam pengaturan gula darah.45 diperlukan untuk pembuatan creatine monohydrate di dalam tubuh. yaitu suatu campuran yang penting untuk menghasilkan energi dan pertumbuhan otot dan pergerakan tubuh. Metionin juga dapat berperan dalam menstabilkan lemak. Alanin merupakan sebuah sumber penting energi untuk jaringan otot. radang sendi. dan sebagai antioksidan. tulang dan otot serta membantu dalam penyembuhan luka. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. dan membantu dalam pembentukan hemoglobin serta merupakan pertahanan utama tubuh untuk melawan infeksi akibat luka. dan membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006).

Penderita gangguan hati. lemak. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. Kekurangan lisin akan menyebabkan kekacauan enzim. enzim. dan karbohidrat. membantu dalam penyembuhan luka. tidak berselera dan hilang kosentrasi (Cat 2006). Arginin penting untuk kesehatan reproduksi pria karena 80% cairan semen terdiri dari arginin. kerontokan rambut. Kekurangan treonin akan menyebabkan warna kulit menjadi tidak normal. hormone (GH. mengatur energi serta membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). kehilangan energi. lesu. membantu kerja hati dan fungsi lipotropiknya. Hati mempunyai fungsi untuk melakukan metabolisme protein. berat badan menurun. seperti sakit liver membutuhkan makanan yang tinggi protein dan karbohidrat serta lemak dengan kadar yang sedang karena hal ini akan meringankan kerja hati untuk memperoleh energi yang besar untuk aktivitasnya (Carroli et al. kolagen dan untuk memperbaiki jaringan yang rusak dan juga membantu dalam membangun protein otot yang baru. Fenilalanin secara medis digunakan untuk perawatan radang sendi dan depresi.46 dalam pengaturan gula darah. Tabel 5 menunjukkan skor kimia asam amino esensial tambelo dengan cara melakukan perbandingan antara asam amino protein esensial tambelo dengan . untuk penyerapan kalsium serta pembentukan tulang dan pertumbuhan otot seperti mobilisasi lemak untuk digunakan sebagai energi. dan manfaatnya untuk cardiovascular meliputi pemeliharaan kesehatan pembuluh darah. 2006). Lisin digunakan di dalam tubuh kerusakan hati dan pertumbuhan terhambat. Apabila fungsi hati terganggu maka akan berdampak pada terganggunya proses metabolisme tersebut. Lisin juga bermanfaat dalam menjaga keseimbangan nitrogen serta membantu menjaga badan pada saat stress berat dan kondisi yang melelahkan. Treonin bermanfaat dalam mencegah penumpukan lemak di hati. testosteron. meningkatkan sistem imun. Lisin juga diperlukan dalam membentuk antibody. menghambat pertumbuhan sel tumor dan kanker serta membantu pelepasan hormon pertumbuhan (Supamas 2011). Kekurangan phenilalanin akan menyebabkan tubuh lemah. tulang dan otot . hormon insulin). Arginin berperan dalam membantu detoksiifikasi hati pada sirosis hati dan fatty liver.

sehingga asam amino esensial perlu difortifikasi untuk meningkatkan nilai gizi protein tambelo. Komposisi asam lemak dalam tambelo dapat dilihat pada Tabel 6.75 76.63 60. Hal ini berarti bahwa protein yang terkadung dalam tambelo dapat dimanfaatkan oleh tubuh hanya sekitar 19. Berdasarkan analisis kualitatif.47 referensi dari FAO/WHO (1991).16 Referesi FAO (1991) (mg/g prot) 40 70 55 35 60 40 50 Skor kimia amino esensial (%) 19.1. sedangkan kromatogram asam lemak daging tambelo disajikan pada Lampiran 6. baik yang berasal dari hewan atau tumbuhan.87%.87% dan 21.23 42.41 37. keragaman asam lemak pada serbuk tambelo dapat teridentifikasi 15 jenis asam lemak. yang terdiri dari 7 jenis asam lemak jenuh (SFA). Tabel 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo Asam amino Kadar dalam tambelo (mg/g prot) 7.32 Isoleusin Leusin Lisin Metionin Fenilalanin + tirosin Treonin Valin Keterangan : tritofan bukan asam amino pembatas sehingga tidak dilakukan analisis 4.65 30.63% sehingga diperoleh skor kimia protein tambelo sebesar 19. Asam palmitoleat adalah salah satu jenis .32 13. Jenis asam lemak yang banyak terkandung di dalam serbuk tambelo adalah asam palmitoleat (C16:1) (14.55 %). Kromatogram standar asam lemak disajikan pada Lampiran 5.95 29.4 Kandungan asam lemak tambelo Asam lemak adalah asam organik yang terdapat sebagai ester trigliserida atau lemak. 5 jenis asam lemak tidak jenuh tunggal atau monounsaturated fatty acid (MUFA) dan 3 jenis asam lemak jenuh ganda atau polyunsaturated fatty acid (PUFA). Berdasarkan hasil pengamatan.22 21. diketahui bahwa angka terendah ditunjukkan oleh asam amino isoleusin dan treonin masingmasing sebesar 19. Analisis asam lemak dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas untuk mengetahui komposisi asam lemak yang terdapat pada tambelo.87% dengan asam amino pembatas yang utama berada pada isoleusin.33 8.87 41.09 22.94 37.

Asam oleat memiliki sifat lebih stabil dan lebih baik perannya dibandingkan PUFA (PolyUnsaturated Fatty Acid). Asam lemak tak jenuh tunggal secara umum memiliki efek yang menguntungkan terhadap kadar kolesterol dalam darah.94%.04 0.14-Eikosatrienoat (C20:3ω6) EPA (C20:4ω3) Arakidonat (20:4ω6) 5. asam lemak tak jenuh tak tunggal (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi popular (Achadi 2010).24 1.10 13. Asam lemak ini tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA).13 0. Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) memiliki .33 14.66 3.55 0.80 0. meskipun PUFA dapat menurunkan kolesterol LDL.10 0. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. minyak kedelai. Tabel 6 Komposisi asam lemak dalam tambelo No Asam Lemak Jenuh 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Miristat (C14:0) Pentadekanoat (C15:0) Palmitat (C16:0) Heptadekanoat (C17:0) Stearat (C18:0) Arakidat (C20:0) Heneikosanoat acid (C21:0) Miristoleat (C14:1) Palmitoleat (C16:1) Cis-10-Heptadekanoat (C17:1) Oleat (C18:1ω9) Linolenat (C18:3ω3) Cis-8.80 0.22 0. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. minyak biji kapas.11. dan canola.94 0. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah.29 Asam lemak Hasil (%berat minyak) Asam Lemak Tak Jenuh Asam oleat (omega-9) yang terkandung di dalam tambelo kering sebesar 1. minyak kacang tanah.13 0.48 asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) yang merupakan jenis asam lemak yang memiliki satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya.69 0.

sedangkan MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. dan fluor hanya terdapat dalam tubuh dalam jumlah kecil saja. yaitu asam linoleat (C18:3ω3). fungsi imun. Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo disajikan pada Tabel 7. Hasil penelitian yang dilakukan oleh Mensink (1987) diacu dalam Achadi (2010) menunjukkan bahwa MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. Kandungan mineral pada tambelo diuji karena peranannya sebagai antioksidan dalam sistem pertahanan tubuh terhadap reaksi oksidasi radikal bebas dan mineral ini tergabung dalam enzim antioksidan yang berperan melindungi membran sel dan komponen dalam sitosol. Unsur-unsur ini terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup besar dan karenanya disebut unsur mineral makro.46 ppm. karena itu disebut trace element atau mineral mikro. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein) serta dapat menurunkan produksi trigliserida dan apolipoprotein beta di dalam hati (Achadi 2010). asam arakhidonat (C20:4 ω6). Kekurangan Kalsium akan menyebabkan osteoporosis dan . yaitu dapat menurunkan HDL. Di dalam tubuh unsur mineral berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. tembaga. tetapi karena perannya yang sangat penting untuk pembentukan tulang dan gigi terutama pada masa pertumbuhan dan ibu hamil. dan integritas membran sel. mangan. Kadar Kalsium dari tambelo adalah 3532. Unsur mineral lain. 4.5 Kandungan mineral tambelo Sekitar 96% bahan makanan terdiri dari bahan organik dan air. Unsur kalsium (Ca) juga dianalisis bukan karena sebagai antioksidan. Sampai sekarang telah diketahui ada empat belas unsur mineral yang berbeda jenisnya diperlukan manusia agar memiliki kesehatan dan pertumbuhan yang baik. asam eikosatrienoat (C20:3ω6).49 kelemahan. dan asam eikosapentanoat/EPA (C20:4ω3). Sisanya terdiri dari unsur-unsur mineral. seperti besi. kobalt. Asam lemak tak jenuh ganda berperan penting dalam transpor dan metabolisme lemak. Jenis-jenis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) yang terkandung dalam tambelu kering.1. zink. iodium. mempertahankan fungsi.

zat besi merupakan unsur yang sangat reaktif sehingga mampu berinteraksi dengan oksigen.02 435. 4. dalam keadaan teroksidasi. Penyerapan Ca akan dipermudah dengan adanya vitamin D (Muchtadi 2009). Seng merupakan mineral penting pada berbagai sistem enzim dan hormon. 2000. 8. Almatsier 2006). besi kehilangan dua elektron sehingga memiliki dua sisa muatan positif (Fe2+ /fero). besi kehilangan tiga elektron sehingga memiliki tiga sisa muatan positif (Fe3+/feri) karena dapat berada dalam dua bentuk ion ini. Tabel 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo No Parameter Hasil (ppm) Mineral Makro Kalsium (Ca) 1. 10.98 2363. 6. Kandungan seng (Zn) pada tambelo segar adalah 12. besi berperan dalam respirasi sel.42 1373. yaitu sebagai kofaktor bagi enzim-enzim yang terlibat dalam reaksi oksidasi reduksi (FAO/WHO 2001. Zat besi sebagian besar berada dalam hemoglobin. 9. 2. 5. Seng (Zn) Tembaga (Cu) Fosfor (P) Selenium (Se) Peranan zat besi (Fe) berhubungan dengan kemampuannya dalam reaksi oksidasi dan reduksi.05 <0. Antioksidan enzimatis bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal baru (Marks et al.40 3. Sebagai .46 5. 3.30 ppm. Dalam keadaan tereduksi. Klorida (Cl Kalium (K) Magnesium (Mg) Mangan (Mn) Natrium (Na) 3532. Aktivitas superoksida dismutase (SOD) dan katalase tergantung pada zat besi.06 0.45 12.50 akan mempengaruhi mental dan juga menyebabkan osteomalasia. Zat besi juga berperan dalam imunitas dalam pembentukkan sel-sel limfosit.41 626.18 Mineral Mikro Besi (Fe) 7. Secara kimia. Winarsi 2007).30 0. 11.

Hasil analisis diketahui bahwa kandungan tembaga (Cu) yang terdapat pada tambelo nilainya kecil. dan hormon timulin 1.98 ppm. dan luka dapat menghabiskan suplai seng dalam tubuh (Wirahadikusumah 1985). Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. diferensiasi. yaitu 0. dan aktivasi sel T. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Angka kecukupan Se per hari yang dianjurkan oleh Widya Nasional Pangan dan Gizi (2004) adalah 5-20 µg untuk bayi dan anak di bawah 10 tahun dan 20-30 µg untuk pria dan wanita berumur di atas 10 tahun sebesar. Peran tembaga sebagai kofaktor maupun sebagai pengatur enzim SOD cukup besar. yang dapat menghancurkan peroksida yang terbentuk dari hasil oksidasi lemak di dalam tubuh (Mucthadi D 2009). Enzim superoksida dismutase mempunyai substrat spesifik. Jika tubuh kekurangan tembaga maka akan terjadi peningkatan peroksida lipid (Harris diacu dalam Ridwan 1997). Khusus ibu hamil dan .51 salah satu mineral imunitas yang berfungsi untuk maturasi. Kemampuan tubuh seseorang untuk menyerap seng menurun sesuai dengan pertambahan usia sehingga penting untuk meningkatkan intake mineral seng ketika usia 40-an. Mineral Zn juga merupakan komponen enzim yang berperan dalam perbaikan asam nukleat (Harris diacu dalam Ridwan 1997). meningkatkan aktivitas enzim antioksidan. Hasil penelitian Winarsi (2004) yang memberikan minuman susu skim yang diperkaya dengan isoflavon kedelai sebesar 100 mg dan 8 mg ZnSO4 yang diberikan setiap hari selama 2 bulan pada wanita premenopause diketahui dapat menurunkan sindrom premenopause. proliferasi. Keadaan tubuh yang mengalami stres karena trauma. terkena polusi lingkungan. Seng (Zn) berperan dalam sistem pertahanan tubuh dengan cara berkonjugasi dengan thiol sehingga menghambat pembentukan ion superoksida. Selenium (Se) adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas dan merupakan bagian penting enzim glutation peroksidase. Mineral Cu berperan melalui aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD). yaitu ion superoksida. kadar IgG antiTT. Mineral Zn sebagai komponen protein yang mempunyai gugus SH-(metallothionine) berperan sebagai pembersih radikal bebas.

1 Rendemen ekstrak tambelo Ekstraksi merupakan salah satu cara pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu bahan. Selain itu. sebagian lemak serta tanin yang menyebabkan hasil ekstraksi metanol cukup kuat. Berdasarkan hasil rendemen ekstrak tambelo tersebut. 4. masing-masing sebanyak 5 dan 10 µg/orang/hari (Winarno 2008).2. Hal ini sesuai dengan pernyataan Heath dan Reineccius (1986) bahwa metanol mampu mengekstrak senyawa organik. sedangkan ekstrak tambelo yang mengandung rendamen relatif kecil adalah ekstrak n-heksana (2.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Analisis fitokimia adalah salah satu cara untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder pada suatu tanaman atau hewan. Kadar Selenium di dalam tambelo adalah 0. Besarnya rendemen ekstrak metanol diduga berkaitan dengan sifat pelarut metanol yang memiliki kemampuan pemisahan komponen dari bahan yang lebih baik. Rendemen ekstrak tambelo yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5.52 menyusui mendapat tambahan.72%.86%).19% ) dan etil asetat (2.2 Penelitian Tahap Kedua 4. Kandungan fitokimia ekstrak tambelo dapat dilihat pada Tabel 8. Tabel 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Uji Fitokimia Alkaloid Flavonoid Phenol Hidroquinon Steroid Triterpenoid Saponin Tanin n-Heksana + + + + + Jenis Pelarut Etil Asetat + + + + + Metanol + + + + + - . terbukti bahwa tambelo mengandung berbagai senyawa dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda. pelarut metanol memiliki nilai kostanta dielektrik tinggi jika dibandingkan dengan pelarut yang lain sehingga pelarut metanol dapat membuka dinding sel yang mengakibatkan hampir semua senyawa dapat tertarik keluar dari dalam sel. Penelitian ini dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi yang dilanjutkan dengan partisi cair-cair.18 ppm. 4.2.

saat ini diketahui sebanyak 5. yang memiliki aktivitas antioksidan meliputi flavon. dimetilformamida. Flavonoid merupakan senyawa polar yang mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol. isoflavon. aseton. Hal ini karena pelarut etil asetat bersifat semi polar sehingga memiliki kemampuan melarutkan senyawa polar dan non polar. isoflavonoid (1’B-3C). Cos et al. Garam alkaloida kuarterner sangat larut dalam air (Sastrohamidjojo 1996). polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid. Khopkar (2003) berpendapat bahwa bahan dan senyawa kimia akan mudah larut pada pelarut yang relatif sama kepolarannya. Hal ini diduga senyawa alkaloid merupakan senyawa polar. Menurut Pratt dan Hudson (1990). butanol. baik pada tanaman. Berdasarkan susunan ini dapat dihasilkan 3 jenis struktur. gula. Kelima belas atom karbon tersebut membentuk dua cincin aromatik (C6) yang terikat pada rantai propana (C3) sehingga membentuk susunan C6-C3-C6. alkaloid bebas basa hanya larut dalam pelarut organic. katekin. dan glikosida (Harborne 1987). Ekstrak etil asetat tambelo (Tabel 8) diketahui mengandung senyawa flavonoid yang tinggi. komponen fenolik. Flavonoid merupakan golongan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 karbon sebagai kerangka dasarnya. metanol. Kemudian dilaporkan juga senyawa flavonoid dari stereospermum . Alkaloid adalah senyawa alami amina. ataupun jamur dan merupakan produk yang dihasilkan dari proses metabolisme sekunder. Pada umumnya. dan 1 neoflavonoid (1’B-4C). Pelarut yang bersifat polar mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener. bahwa ekstrak metanol memiliki senyawa alkaloid yang sangat tinggi.500 jenis alkaloid (Harborne 1987).53 Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kasar tambelo. yaitu flavonoid (1’B-2C). dimetilsulfoksida. turunan asam sinamat. (1998) melaporkan bahwa beberapa senyawa flavonoid bersifat antioksidan dan dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase maupun reaksi superoksida. meskipun beberapa pseudoalkaloida dan protoalkaloida yang larut dalam air. flavonol. asam amino. karotenoid. karena senyawa yang terbawa pada proses ekstraksi adalah senyawa yang mempunyai polaritas sesuai dengan pelarutnya yaitu pelarut metanol. tanin. hewan. dan air (Harborne 1987). dan kalkon.

Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid yang dapat diklasifikasikan menjadi steroid dengan atom karbon tidak lebih dari 21 yaitu sterol.2. Senyawa steroid dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat (Harbone 1987). senyawa tersebut juga dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase (Kumar et al. glikosida jantung dan vitamin D.3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH (1. Peredaman (inhibisi) terhadap radikal bebas dinyatakan dalam persen. Pengukuran absorbansi dilakukan pada setiap sampel antioksidan yang dibuat dengan berbagai konsentrasi. diisolasi dari sumber daya hayati laut bersifat non toksik dan mempunyai khasiat menurunkan kolesterol dalam darah dan mendorong aktivitas antidiabetes (Bhakuni et al. Berdasarkan hasil uji fitokimia. maka nilai absorbansi akan semakin turun karena warna larutan bertambah kuning. ekstrak n-heksana tambelo mengandung senyawa steroid yang tinggi. Besarnya daya peredaman radikal bebas DPPH maka dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm. Steroid alami berasal dari berbagai transformasi kimia dua triterpena yaitu lanosterol dan sikloartenol.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Molyneux 2004. Perubahan warna pada ekstrak tambelo dapat dilihat pada Lampiran 7. Secara teoritis. Suatu senyawa dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya ditandai dengan perubahan warna ungu menjadi kuning pucat (Molyneux 2004).54 personatum selain bersifat antioksidan. sapogenin. . Perubahan warna yang mengindikasikan adanya reaksi peredaman radikal bebas DPPH oleh senyawa antioksidan baik pada larutan ekstrak tambelo maupun pada larutan BHT dan vitamin super ester C. 4. Ada beberapa steroid seperti. fukosterol. 2006). semakin tinggi kosentrasi antioksidan yang ditambahkan pada larutan DPPH. 2005). Vattem dan Shetty 2006). Senyawa DDPH adalah suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain membentuk senyawa yang lebih stabil dan dapat bereaksi dengan atom hidrogen membentuk DPPH tereduksi (diphenylpicrylhydrazine) yang stabil. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana bersifat non polar.

sedangkan .74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.00 ppm. dan vitamin super ester C disajikan pada Gambar 12. BHT. Nilai IC50 dari ekstrak tambelo. dengan nilai rata-rata IC50 sebesar 15. 300 Rata-rata IC50 (ppm) 250 200 150 100 50 3.01 4.77 29.44 63.51 27.27 ppm jauh leih ebih kecil dibandingkan dengan ketiga ekstrak kasar tambelo Tabel 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.86 ppm. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Molyneux 2004).78 81.55 dan aktivitas antioksidan dinyatakan dengan IC50 (Inhibition Concentration) yang menunjukkan kosentrasi sampel antioksidan yang dapat menghambat atau meredam aktivitas antioksidan yang semakin tinggi atau dengan kata lain IC50 sebagai kosentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH.35 0 BHT Vitamin n-heksana ester super C Sampel Etil asetat Metanol 8.21 262.02 51.56 15.27 Berdasarkan Gambar 12. BHT.16 10 ppm 94.19 IC50 (ppm) 3.83 84. menunjukkan ekstrak etil asetat tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dari kedua ekstrak yang lainnya.35 8.35 ppm dan vitamin super ester C yaitu 8. Ekstrak metanol tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 85.53 Gambar 12 Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.27 15 3. Tabel 9 memperlihatkan bahwa nilai aktivitas antioksidan pada BHT dengan nilai IC50 3. dan vitamin super ester C.

Kombinasi yang digunakan adalah yang terdiri dari pelarut kloroform : metanol (9:1). Perhitungan persen inhibisi IC50 dan grafik regresi linear pada BHT. Eluen dengan pemisahan terbaik kemudian dikombinasikan satu dengan yang lainnya dengan berbagai perbandingan. kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm. (2005) menyatakan bahwa presentase penghambatan (% inhibisi) terhadap aktivitas radikal bebas akan ikut meningkat seiring dengan meningkatnya kosentrasi. dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 150-210 ppm. dilakukan pencarian eluen terlebih dahulu dengan menggunakan KLT. dan etanol. sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 100-150 ppm. dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada kromatografi lapis tipis (KLT). baik pada kosentrasi ekstrak maupun pada kosentrasi standar (BHT dan vitamin super ester C).77 ppm. metanol. Pengujian aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak kasar tambelo memiliki kekuatan penghambatan yang berbeda-berbeda antara yang satu dengan yang lainnya dan menghasilkan hubungan antara kosentrasi ekstrak kasar yang digunakan dengan persen inhibisinya. Eluen ini berfungsi sebagai fase gerak saat fraksinasi. n-heksana : etil asetat (1:1). vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo dapat disajikan pada Lampiran 8. Hanani et al. Hal ini menyebabkan komponen bioaktif yang bersifat non polar pada ekstrak n-heksana tidak terlarut sepenuhnya pada pelarut tersebut sehingga berpengaruh pada nilai IC50. Rendahnya aktivitas antioksidan ekstrak n- heksana diduga karena pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak nheksana tambelo dan kristal DPPH pada penelitian ini adalah metanol yang bersifat polar. 4. yaitu etil asetat.56 ekstrak n-heksana tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 262. kloroform.4 Fraksi ekstrak terpilih Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. Sebelum dilakukan fraksinasi terhadap ekstrak kasar etil asetat. etil asetat. Eluen yang digunakan adalah n-heksana. Bois (1958) diacu dalam Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm. .2.

Berdasarkan hasil fraksinasi kolom. steroid.82 Rf6 = 6.06 Gambar 12 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) 4. diduga bahwa masing-masing fraksi telah menunjukkan adanya 1 spot dengan Rf yang berbeda.2.65 Rf4 = 4. Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) disajikan pada Gambar 12. Rf9 = 8. Berdasarkan analisis dengan menggunakan KLT.3/8. diduga terdapat sembilan jenis senyawa pada ekstrak etil asetat tambelo.84 Rf7 = 7/8.97 Rf8 = 7. Kesepuluh fraksi tersebut kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dan uji fitokimia. dan n-heksana : etil asetat (8:2). diketahui bahwa pada fraksi 9 dan fraksi 10 mengandung senyawa triterpenoid.5 = 0.5 = 0.57 kloroform : metanol (17:3). Data rendamen hasil kolom disajikan pada Lampiran 10. Berdasarkan hasil fraksinasi tersebut (Gambar 12). Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan.4 Rf2 = 2.5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Berdasarkan hasil fraksinasi kolom. Menurut Markam (1988).5 = 0. Hal ini menunjukkan bahwa dalam fraksi tersebut mengandung senyawa yang .5 = 0. Profil pola pemisahan senyawa dengan eluen tersebut disajikan pada Lampiran 9a.5/8. diperoleh eluen terbaik yang terdiri dari campuran kloroform : metanol (9 : 1).5 = 0. Hasil pengecekan terhadap fraksi tersebut. penggunaan kloroform : metanol sebagai eluen pada perbandingan 15 : 1 sampai 3 : 1 dapat memisahkan senyawa flavonoid dengan baik.5 = 0.1/8.5/8.4/8.1/8.74 Rf5 = 5. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang kemudian dilakukan pengujian fitokimia.15748%) dan rendamen terkecil pada fraksi 6 (0.5 = 0. Rendamen fraksi terbesar terdapat pada fraksi 1 (0.00156%).2/8.5 = 0. flavonoid.1/8.25 Rf1 = 0. alkaloid dan fenol hidrokuinon.5 = 0. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang disajikan pada Lampiran 9b.48 Rf3 = 3.

87 ppm. . fraksi yang didapat lebih murni senyawa aktif dan lebih banyak terisolasi. disusul dengan fraksi 10 dengan nilai IC50 28. Gambar 14 memperlihatkan bahwa fraksi 9 memiliki daya inhibisi yang setara dengan vitamin super ester C. Aktivitas antioksidan pada fraksi tambelo lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak tambelo. Hal ini berkaitan dengan fungsi proses fraksinasi yang bertujuan untuk memperoleh pola pemisahan yang sempurna. Tabel 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Kelompok Senyawa Nama Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Alkaloid + + + + + + + + + + Flavonoid + + + + + + + + + + Phenol Hidroquinon + + + + + + Steroid + + + + + + + + + + Triterpenoid + + + + + + + + + + Saponin + + + + + + + Tanin - 4. diketahui bahwa aktivitas antioksidan fraksi kesembilan mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat.58 memungkinkan dapat menghambat radikal bebas.91 ppm. Perhitungan persen inhibisi dari hasil fraksinasi dapat lihat pada Lampiran 12. terbukti terjadi perubahan warna dari ungu menjadi kuning cerah dengan nilai IC50 8. Kandungan fitokimia fraksi tambelo disajikan pada Tabel 10.2.6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo disajikan pada Gambar 13. Berdasarkan hasil pengujian. Hal ini memungkinkan adanya senyawa aktif dalam faksi 9 yang berpotensi sebagai obat antioksidan.

Mekanisme penghambatan radikal DPPH dapat dilihat pada Gambar 15. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen.87 74.59 120 Rata-rata IC50 100 80 60 40 20 0 15 103.06 8.29 43.32 2.51 4. Pengujian dengan menggunakan DPPH merupakan salah satu metode yang sederhana. Senyawa DPPH merupakan radikal bebas yang bersifat stabil sehingga dapat bereaksi dengan atom hidrogen yang berasal dari suatu senyawa antioksidan.50 61.17 2.87 1.04 3.90 28. maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil.64 5. Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen. Jika semua elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan.91 4.43 2.68 4. akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH. Hasil reaksi tersebut berupa DPPH tereduksi (yang tidak reaktif lagi karena telah mendapatkan donor hidrogen (Molyneux 2004).49 63.40 58. Gambar 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH’ Keterangan: RH = asam lemak tidak jenuh R = radikal bebas .94 86.21 76.63 5.69 Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi etil 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 asetat Estrak kasar dan Hasil Fraksi Gambar 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo Sebuah senyawa dapat disebut sebagai antioksidan bila senyawa tersebut dapat mendonorkan atom hidrogennya dengan cepat sehingga dapat menghambat terjadinya pembentukan radikal bebas (Sauriasari 2006).

sesquiterpenoic acid glyceride.2. tekanan permukaan. instrumen kontrol dan proses data. . Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).Analisis senyawa menggunakan LC-MS dilakukan pada fraksi terbaik (fraksi 9). Ketiga komponen tersebut tergolong dalam kelompok senyawa terpenoid. detektor.7 Identifikasi senyawa fraksi teraktif Liquid chromatography mass spectrofotometer (LC-MS) merupakan metode analisis kuantitatif yang merupakan kombinasi antara kromatografi cair dengan spektroskopi massa. terdapat empat struktur senyawa yang terbagi atas tiga komponen. dan labdane diterpenoid. Instrumentasi LC-MS terdiri atas inlet-LC. (a) Komponen 1 Farnesic acid glyceride (b) (c) Komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride (d) Komponen 3 Labdane diterpenoid Gambar 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan massa 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid. Struktur senyawa tersebut disajikan pada Gambar 16. Data spektrum sampel fraksi 9 dapat dilihat pada Lampiran 11. yaitu farnesic acid glyceride. massa analyzer. sumber ion.60 4. Analisi LC/MS yang dilakukan secara electrospray ionisation. Berdasarkan analisis LC-MS sampel fraksi 9 dengan berat molekul 352.

triterpen (C30). yang dapat dikelompokkan menjadi monoterpen (C10). di antaranya adalah sebagai antifeedant. odheri menghasilkan senyawa 2. monocyclofarnesic acid glyceride. (1983) bahwa di dalam ekstrak nudibranch Archidoris montereyensis mengandung senyawa-senyawa diterpenoic acid glyceride. Labdane merupakan diterpen bisiklik alami yang membentuk inti struktural untuk berbagai macam produk alami yang dikenal sebagai labdanes atau diterpenes labdane. inhibitor tumor. terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. dan politerpen (≥ 40) (Sirait 2007). tetraterpen (40). podolakton inhibitor pertumbuhan tanaman. Seskuiterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit isoprena yang terdiri dari kerangka asiklik dan bisiklik dengan kerangka dasar naftalen. (2003) yang melaporkan bahwa hasil isolasi dari pulmonate Trimusculus peruvianus menghasilkan empat senyawa labdane diterpens melalui jalur oksidasi. antibiotik dan toksin serta regulator pertumbuhan tanaman dan pemanis. (1980) juga melaporkan bahwa nudibranch jenis A. komponen 1 farnesic acid glyceride dan komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride termasuk di dalam kelompok senyawa seskuiterpenoid. diterpen (C20). Senyawa-senyawa seskuiterpenoid tersebut diturunkan dari cis farnesil pirofosfat dan trans farnesil pirofosfat melalui reaksi siklisasi dan reaksi sekunder lainnya. antimikroba. . dan glyceryl ether. Secara umum senyawa seskuiterpenoid ini mempunyai bioaktifitas yang cukup besar. drimane sesquiterpenoic acid glyceride. Andersen et al. Kedua komponen tersebut memiliki aktivitas sebagai antibiotik dan antifeedant.61 Terpenoid adalah senyawa alam yang terbentuk dengan proses biosintetis. hormon. Diterpenoid merupakan senyawa yang mempunyai 20 atom karbon dan dibangun oleh 4 unit isoprena. Senyawa ini mempunyai bioaktivitas yang cukup luas yaitu sebagai hormon pertumbuhan tanaman. antifeedant serangga.3-dihydroxypropilfarnesate dan memiliki dua turunan monoasetoksi. Beberapa publikasi tentang ketiga komponen seperti yang dilaporkan oleh Gustafson et al. Berdasarkan pengelompokan dari senyawa terpenoid tersebut. seskuiterpen (C15). Terpenoid yang disebut juga isoprenoid. Pendapat ini juga didukung oleh Marero et al. Senyawasenyawa tersebut memiliki aktivitas sitotoksik yang menghambat sel kanker usus besar pada manusia.

Tata nama yang digunakan lebih banyak adalah nama trivial (Sirait 2007). dan anti karsinogen.62 senyawa pemanis. . hal ini diduga bahwa senyawa flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak tambelo termasuk dalam kelompok senyawa volatil sehingga ada kemungkinan bahwa senyawa flavonoid yang berperan sebagai senyawa antioksidan di dalam ekstrak tambelo adalah kelompok senyawa volatil. Senyawa diterpenoid dapat berbentuk asiklik. dan tetrasiklik. antifouling. bisiklik. Berdasarkan hasil analisis LC-MS. trisiklik. tidak terdeteksi. senyawa flavonoid.

metanol) mengandung senyawa alkaloid.71%.2 Saran Perlu dilakukan pemurnian lagi dengan menggunakan kromatografi kolom dan untuk memperoleh satu struktur senyawa aktif digunakan nuclear magnetik resonance (NMR). dan karbohidrat 7.88%. Daging tambelo mengandung 17 jenis asam amino dan 15 jenis asam lemak.77%. Rendemen tertinggi terdapat pada ekstrak metanol yaitu 5.72%.28%.27ppm).21%. dan karbohidrat 30. lemak 14. triterpenoid dan saponin. Komposisi kimia tambelo kering adalah kadar air 6.27%. sesquiterpenoic acid glyceride dan labdane diterpenoid. Pada ke tiga ekstrak (n-heksana.87 ppm yang setara dengan vitamin super ester C (8.63%. 5.07%.45%. Fraksi 9 dari ekstrak etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan sebesar 8.72%. protein 42. yaitu farnesic acid glyceride. Fraksi 9 menyerupai salah satu dari empat struktur senyawa yang dikelompokkan ke dalam tiga komponen. lemak 0.1 Simpulan Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kimia tambelo segar terdiri dari air 82. abu 5.63 5 SIMPULAN DAN SARAN 5. steroid. etil asetat. protein 7. flavonoid. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC 50 sebesar 15 ppm. abu 2. .

Blunt DA. Version # vpcl 13. 1994. [02 Sept 2011]. USA. American Association of Cereal Chemist [AACC]. Tetrahedron Lett. hlm.DAFTAR PUSTAKA Achadi EL. produsen. Mayland. Association of Official Analytical Chemist [AOAC]. 2002. Palawan. 2011. Betia J. Association of Official Analytical Chemist Inc. 2005. Pelayanan gizi rumah sakit dan perkembangan ilmu serta teknologi. Associaton of Official Analytic Chemist Inc. Jakarta: PT. Almatsier S. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Approved Methods of The American Association of Cereal Chemist. 2009. Sum FW. 2011. Association of Official Analytical Chemist Inc. 2005. Ed. Christchurch: Marine Chemistry Group. 2006. Gizi dan kesehatan Masyarakat. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.com/2011/01/palawans-kinilaw-na-tamilok/. 2005. 1980. Hlm. 2010. 1 video kaset: 2:50 menit. MarinLit-Marine Literature Database. Bioactive marine natural Product.com [08 Maret 2011]. 21:797-800. 2008. Rajagrafindo Persada. Bhakuni DS. USA. Farnesic acid glycerides from the nudibranch Archidoris odhneri. berwarna. 302-308 Blunt JW. Ed ke-9. Official Methods of Analysis (18 Edn). ____________. 14-104. Official Methods of Analysis of Association of official Analytical Chemical. Mayland. hlm.wisegeek. Gizi Indonesia. USA :American Association of Cereal Chemist. New Delhi: Anamaya Publisher. Prinsip dasar ilmu Gizi. [kaset audio]. hlm.5. Journeyingjames. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. http://journeyingjames. Palawan’s Kinilaw na Tamilok. Vol 1. ____________. 50-279. 1984. bersuara. Bonderud D. J. _________. Department of Chemistry-University of Caterbury. . 17:97-104. Andersen RJ. http://www. Awat DS. Amino acid: What is Valine. 20-319 Almatsier S. Official Methods of Analysis (18 Edn). Dilengkapi: 4 gambar foto berwarna 10 x 12 inci. Virginia.

2006. Structure activity relationship of bioactive metabolites from some Indo-Pasific marine invertebrates.com [06 Maret 2011].Nutrition 1:502-506. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. Conectique. Reduce-it weight management program Diet and Nutrition (2011). Effect of threonine deficiency on changes in enzyme activity and liver fat deposition with time. Bogor: Fakultas Pertanian. Beasley CR. Thailand. Dena CC. Material Medika Indonesia. Hamilton RJ. Prod. hlm. 1991. Di dalam: Allen JC. Bangkok. Editor. Diktat. Proksch P. www.php?article_id=3160. Arata D. Bandung: ITB press. 2001.co/tipsoz_solution/diet_utrition/nutrition/article. . Pengantar gizi kesehatan. Teredinidae) in mangrove driftwood from a northern Brazilian beach. Handayani D. Dietary Amino Acids Benefits. Zool. SNI 01-2362-1991. Industrial alkaline protease from shipworm bacterium. FAO/WHO. Arthur. http://www/conectique. Bobbitt JM. Paten 5 512 749. Metode Pengujian Kimia Produk Perikanan. 2000. Amino acid protein suplemen. US Paten. 27-36. J. 2008. Seasonal abundance of the shipworm Neoteredo reynei (Bivalvia. 67-90. Report of a joint FAO/WHO xpert consultation. Wray V. 98:17-23. Ed ke-2.254. Edrada RA. 1991. penerjemah. 1995. Padmawinata K. newsletter@trulyhuge. Balbin-Oliveros M. Selenium untuk kekebalan tubuh. Edrada RA. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Protocols: methods for isolation. Proksch P. Penemu: The United States of America as represented by the Secretary of Agriculture. [29 Sept 2011]. Rancidity in Foods. Ebada SS. E Schwarting. Human Vitamin and Mineral Requirement. Filho CS.. Coppen PP. Tagliaro CH. 2006. 2008. 2002. 17 Mei 1994. Chem. Dewan Standarisasi Nasional. Lin W. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Sér. Roma: Food and Nutrition Division.65 Carroli C. Cat B. Penentuan Logam Berat. The use of antioxidants. Nature 3-12. 21: 251. Iheringia. [DSN]. purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrataes. hlm. Schupp P. Nat. Gritter JR. Griffin et al. Effendi YH. New York: Science Publishers. Pengantar Kromatografi. Porto Alegre. Institut Pertanian Bogor. 1983.

Papua. 17-18 November 2008. 61: 6594. Majalah Ilmu Kefarmasian. . Ali AZ. HB.66 Gustafson K. Isolasi dan karakteristik senyawa antibakteri epidioksi sterol dari spon laut Petroia Nigrans. Hamman MT. * Khopkar SM. J. Pangan Gizi dan Pertanian. siput dan kerang oleh penduduk di kawasan Muara Mimika. Lampung.ac. Free radical scavanging and xanthine oksidase inhibitory constituens from Stereospermum personatun. Hamilton RJ. 2006. Di dalam: Allen JC. 1983. Ketaren S. Konsep Dasar Kimia Analitik. Reddy SV. Hamilton RJ. Handayani D. 2005. Harbone JB. Soediro S. G. New York: Van Nostrand Reinhold Comp. Hardinsyah. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. Terjemahan dari: Food Nutrition and Agriculture. Andersen RJ 1985. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. Sayuti N. Chem. Sumule A. Hanani E. Tetrahedron. J Nat Prod 68:1611-1621. editor. 2:127-133. penerjemah. http://lemlit. Jakarta: UI-Press. Letsoin J. J. Hatano TH. penerjemah. Driskel JA. Reineccius. Rancidity in Food. 2003. Apama P. Gizi dan Pangan 1:1-12. 1996. 1986. Asal Sumatera Barat. Okuda. Bull. Jakarta: Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Tiwari AK. Kagawa H. J. 2008. 1988. Two new flavonoids and other constituents in licorice roots: their relative astringency and radical scavenging effect. Rao JM. Padmawinata K. Suhardjo. Harper LJ. 30-69.unila. Org. Flavor Chemistry and Technology. Pharm. The chemistry of ranciditry in food. 41:1101-1108. New York: Applied Science Publisher. Deaton BJ. Kahalalides : bioactive peptides from marine mollusk Elysia rufescens and its algal diet Bryopsis sp. Chem. Terjemahan dari Phytochemical method. Publ. Chemical studies of British Colombia Nudibranchs. Dunbar DC. Jenis dan jumlah konsumsi tambelo. Metode Fitokimia. Penuntun Cara Modern Menaganalisis Tumbuhan. Yasuhara TT. hlm. dari Kepulauan Seribu. Lemak dan Minyak Pangan. Bandung: ITB. Sekarini R. 36:3090-2097. Rao RJ. Dachriyanus. Heath. 1988. Ke-2. Scheuer PJ. hlm 1-20. Jakarta: UI Press. Mun’im A.id/file/arsip [12 April 2009]. 1986. Kumar US. Otto CS. 1987. Ed. 2006.

penerjemah. Linder CM. Tetrahedron 13467-13474 Molyneux P. Alfabeta. Universitas Cenderawasih Jayapura. 1992. Jayapura: Fakultas Keguruan dan ilmu Pendidikan. Muchtadi TRM. Persepsi Masyarakat Suku Kamoro terhadap tambelo Bactronophorus thoracites di Kabupaten Mimika [skripsi]. Morrero D et al.html [16 Juli 2009]. 2000. Saraswathy M. Yamada Y. Linder MC. Labdane diterpenoid with a new oxidation pattern from the marine pulmonate Trimusculus peruvianus. Evaluasi Nilai Gizi Pangan. Acanthrlla sp. Jakarta: UI Press. . Parakkasi A. Advance in marne biology. Jakarta: UI Press. Editor. Bogor: IPB Press. Biokimia nutrisi dan metabolisme. Alfabet. Parakkasi A. Muchtadi D. Nair NB. 2007. penerjemah. Gizi Anti Penuaan Dini. The biology of wood-boring teredinid mollusca. http://www. Munifah I. Bandung: CV. editor. 59:48-55 Muchtadi D.htm. 2003. Songklanakarin J. Biokimia nutrisi dan metabolisme dengan pemakaian secara klinis. 26:211-219. 2004. Vol ke-9. 2006. Pengantar Ilmu Gizi. Tetrahedron. 2004. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. hlm. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Miyaoka H. Ekologi Kamoro-Bab IX. Galeri-Galery.com/omega9b.67 Linder MC. Kimura H. Shimomura M. Yonge M. J. New York: Academic Press Inc.com/doc/isolation-seminternationalUGM/2558795 [ 02 Maret 2011].20-56. Sci. Technol 2004. Isolation and antioxidative assay of several marine macroalgae components within ethyl-acetate fraction. 1989. Di dalam: Russell FS. hlm 45-67. 2009. Muller K.org/gb/foto/muller/ecology/09/index. Cetakan I. 2009. http://www.intiboga. [12 April 2009] Muchtadi D. 1998. 1971. 335-344. Linder MC.scribd. Bandung: CV. http://www. PapuaWeb. hlm. Asam Lemak Omega 9 dan Manfaatnya bagi Kesehatan. Krisnawang H. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. 14-55 hlm. editor. Mayabubun 2003. Antimalarial activity of kalihinol a and realtive diterpenoids from the okinawan sponge.papuaweb.

Penapisan awal komponen bioaktif dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea) sebagai senyawa antioksidan. hlm. Salamah E. 8-389 hlm Pratt DE.68 Nelson JK. Park Ridge. Pratt DE. Poedjiadi A. The Biology of The Mollusca. Natural antioxidant from plant material. Phenolic Compound in Food and Their Effect on Health.Supamas. Purchon RD. 1992. Cermin Dunia Kedokteran. Di dalam: Huang MT. hlm. www. Purwaningsih S. Kustiariyah. Imran Z. Natural antioxidant not exploited comercially. editor. 230-429. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. Supriyanti FMT. Food Antioxidant. Buletin TeknologiHasil Perikanan. Makalah dalam Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. 123-280. Ayuningrat E. hlm. Asam amino non esensial. 8(2):12-25. 2007. Lee CY. 1995. London and New York: Elsevier Applied Science.chem-is-try. 120(1):7-13. Gastineau CF. 87-121. Edisi ke-6. [7 Mei 2011] Sidik. Setyowati. hlm. Mayor clinic diet manual : A Handbook of Nutrition Practices. 1990. Antioxidant Recent Development. Unit Corn Mill. 1997. Penuntun fitokimia dalam farmasi. Pergamon Press. Ranney MW. Terjemahan dari: The organic constiuteuns of higher plants. Schuler P. Hungary. Jakarta: UI Press. 191-246 hlm . Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. 2009. 1990. 67-78 Nurjanah. Gorontalo. USA. 1979. 2008. Moxness KE. Dasar-dasar biokimia. Hudson BJF. Di dalam: Food Antioxidant. 1994. editor. Washington DC: American Society. penerjemah. Institut Teknologi Bandung 26-27 Juni 1997. Jensen MD. 2011. 2006. London: Elsevier Applied Science. 1968. Ho CT. 1997. Antioksidan Alami Asal Tumbuhan. editor.supamas. Tempe mampu menghambat proses ketuaan. 2005. Sirait M. Ed ke-7. Noyes Data Co. Natural antioxidant exploited commercially. 11:119-132. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah (Anadara granosa) yang diambil dari Kabupaten Boalemo. Philadelphia : Mosby. Bandung: ITB. Buletin THP. Robinson T. Di dalam: Hudson BJF.org.com [07 Maret 2011]. Bandung: ITB. Kosasih Padmawinata. Ridwan E. Hudson BJF. Edisi revisi. Suparni.

hlm. 9(1): 33-37. Sudarmadji S.1997. Suratmo. Komposisi kimia dan aktivitas inhibitor topoimerase I dari kerang mas ngur (Attactodea striata). __________. Supamas. Yparraguirre LA. Suariasari R. 2011. Printed in Brazil. 57-158.ac. 1970. 2007. Machado-Ferreira E. 1984. . 221:1401-1403. Buletin Teknik Pertanian. 1989.com [07 Maret 2011]. Genetics and Molecular Biology Online Ahead of Print. Kimia Pangan dan Gizi. Senra MVX. Kimia Pangan dan Gizi. hlm. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. hlm. http://fisika. 2008. Analisis asam amino dalam tepung ikan dan bungkil kedelai.supamas. Genet.145-167. hlm. Jurnal Sumberdaya Perairan. Ibrahim B. Trindade-Silva E. A cellulolytic nitrogen fixing bacterium cultured from the gland of deshayes in shipworms. 2009. Winarno FG. Mengenal dan menangkal http://www.pdf. Segar. 3-14 __________. 2006. Poernomo D. Institut Pertanian Bogor. Asam amino non esensial. Vizzon VF. Waranmaselembun C. Calloway CB. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama. Bogor: Program Pascasarjana. Biol. Science. Haryono B.69 Sitompul S. Kimia Pangan dan Gizi. 12-34. Mol. 92-128 Kimia Pangan. Sociedade Brasileira de Genética. Produk Fermentasi Ikan Dari Cacing Kapal Bactronophorus sp. Bogor: M-Brio Press.id/bssub/PDF%20FILES/BSS_ 205_I.14-55. 1992. Yogyakarta: Liberty. Suhardi. Leoncini O and Amaro CSAG. 2004. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. Physiological traits of the symbiotic bacterium Teredinibacter turnerae isolated from the mangrove shipworm Neoteredo reynei.com [ 8 Juni 2011] radikal bebas. 1:12-14. Biokimia. Potensi ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) sebagai antioksidan. Jakarta: Erlangga. __________. 1983. 2007. hlm. Suharsono. [Tesis]. Turner RD. hlm.beritaiptek. 2009.brawijaya. Waterbury JB. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. [3 februari 2011] Syaputra D.

Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta .70 Winarsi H. 43:27-32 . J. of Agricultural and Food Chemistry. Dalam: Peran Biokimia dan Biologi Molekuler dalam Eksplorasi dan Pemanfaatan Sumberdaya Hayati Berkelanjutan. 2007. hlm. Prosiding Seminar Nasional PBBMI. Efek Minuman Fungsional yang Disuplementasi Isoflavon Kedelai dan Zn terhadap Profil Lipiddan Produk MDA Plasma Wanita Premenopause. 1995. 2004. Yen GC. 86-105. Jakarta: Kanisius. Chen HY. Winarsi H.

71 .

72 LAMPIRAN .

73 .

403 0.74 1.41 0.795 1.402 22.662 1.99 0.418 0.02 0.243 1.04 0.596 0.195 1.15 32.387 0.72 Standar deviasi 0.290 .055 0. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.287 0.01 0.62 b.293 1.719 0.25 1.63 41.729 0.432 1.839 1.008 0.43 0.72 6.989 Rata-rata 0.29 0.45 Rata-rata 6.236 1.019 0.663 3.07 7.011 0.19 0.81 1.62 28.45 II 6.88 30.841 3.163 0.251 1.01 1.423 0.26 1.26 1.04 2.360 1. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.007 0.112 0.31 0.63 42.820 1.011 0.015 22.21 0.008 0.56 0.821 1.761 2.006 0.19 1.80 2.72 0.023 0.35 14.337 0.63 0.85 3.009 0.018 0.45 Standar deviasi 0.518 0.854 2.74 Lampiran 1.005 1.004 0.27 7.41 Standar deviasi 0.71 7.349 1.83 Lampiran 2.11 6.035 0. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.28 II 82.42 5.179 1.285 1.618 0.28 2.20 14.15 Rata-rata 82.01 2.77 14.28 0.62 44. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.72 7.34 1.399 21.22 1.55 1.88 8.016 1.31 2.37 1.27 5.651 1.055 0.

75 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

Kromatografi asam amino ulangan I .76 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a.

Kromatografi asam amino ulangan II .77 b.

78 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

79 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

80 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH .

6. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.8.60.60.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.8.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.40.40.40.6. vitamin super ester .81 Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.40.60.60.80 ppm) Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.

Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana .0 20. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.18.87 R² = 0.0 0.51 27.78 81.19 IC50 (ppm) 3.16 10 ppm 94.35 8.0 10.0 30.0 50.993 % Inhibisi 60.82 C dan ekstrak kasar tambelo a.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.608x + 27.56 15.0 70.0 40.02 51.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) b.0 90.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.54 R² = 0.0 y = 6.287x .44 63.27 100.0 80.

412 0.01 12.9.201x – 8.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.08 4.434 0.25 Pers.79 6.55 3.09 -0.96 -6.423 0.94 2.224x – 9.77 29.regresi linear y=0.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .490 R² = 0.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.9.376 0.449 0.94 2.401 0.255x – 9.58 262.224x .449 290.93 y=0.63 7.143 R² = 0.490 265.255x .421 0.83 Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.419 0.46 5.405 2 3 % inhibisi 0 -3.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.531 y=0.462 0.18 -5.454 0.407 0.

055 84.660x + 40.231 0.205 0.123 0.142 0.53 67.211 2 0.432 0.51 R² = 0.65 87.066 0.92 71.56 Pers.604x + 43.73 19.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.27 y=0.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.04 15.17 15.8. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.225 0.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .40 90.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.089 0.119 0.72 47.041 0.75 1 y=0.062 0.084 % inhibisi 52.64x + 37.51 10.53 85.00 4.51 46.13 80.201x . Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.449 R² = 0.45 79.55 72.604x + 43.

99 29.39 .689x – 6.04 R² = 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.829 y=0.391 0.34 y=0.305 0.986 88.01 3.432 0.371 0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.89 27.30 84.40 53.30 13.312 0.47 9.73 R² = 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.12 19.392 0.86 53.337 0.49 21.38 y=0.01 9.78 48.223 % inhib Pers.777 82.347 0.203 0.372 0.660x + 40.018 81.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.68 29.303 0.64x + 37.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.641x + 2.201 0.656x – 7.

777 R² = 0.7.2.018 R² = 0.6.656x .641x .946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .986 R² = 0.689x .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.

01 252.30 88.34 81. Kloroform : Metanol 4.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a.09 82.58 290.75 19.87 e. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.93 265.53 4.79 10. n-Heksana : Etil asetat 2. n-Heksana : Etil asetat 3.03 Standart devisiasi 29. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 . Kloroform : Metanol 5.21 3.3 45.17 15.39 Ratarata 788.

69 .47 80.46 63.32 40.00732 0.35 Standart deviasi 4.04 74.83 62.5 26.86 73.85 Rata-rata 103. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.21 3.56 54.62 83.00482 0.92 10.37 73.97 129.87 86.51 63.0152 0.00710 0.00506 0.07 57.94 5.00156 0.0028 0.37 Ulangan II 100.63 2.49 174.82 77.14 83.15748 0.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.29 2.95 75.43 2.76 60.27 62.41 91.03 64.97 8.36 70.77 24.03492 0.03 33.74 65.06 1. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.50 61.82 25.90 4.40 4.85 44.46 76.72 85.88 b.80 43.68 5.78 58.13 III 101.61 7.

689x + 27.53 76.099 0.88 65.47 56 68 79.37 y=0.12 63.71 88.193 0.073 0.028 0.086 0.65 34.536x + 46.71 42.23 24.85 y=0.187 0.23 7.277 0.497x + 45.049 0.164 0.647x + 34.29 10.89 b.41 y=0.086 0.12 74.17 25.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .078 0.82 y=0.59 64.65 76.127 0.17 33.079 % Inhibisi 0 54.112 0.149 0.651x + 33.13 27. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.108 0. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.082 0.76 82.76 93.41 73.246 0.425 0.94 79.64 8.00 81.136 0.82 57.179 0.90 4.00 70.18 80.41 40.78 y=0.102 0.77 Pers.148 0.62x + 43.87 y=0.59 81.82 61.255 0.03 8.155 0.

LAMPIRAN .

74 .

77 14.337 0.29 0.62 44.179 1.27 7.015 22.07 7.01 0.989 Rata-rata 0.31 0.423 0.729 0.719 0.42 5.005 1.15 32.85 3.80 2.518 0.26 1.31 2.27 5.285 1.25 1.820 1.72 6.02 0.112 0.62 28.663 3.360 1.008 0.651 1.854 2.008 0.662 1.22 1.34 1.45 Standar deviasi 0.403 0.795 1.006 0. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.63 41.251 1.11 6.15 Rata-rata 82.432 1.75 Lampiran 1.04 0.011 0.88 30.016 1.293 1.45 II 6.19 0.28 2.55 1.45 Rata-rata 6. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.035 0.63 42.99 0.62 b.018 0.402 22.019 0.21 0.243 1.81 1.349 1.01 1.01 2.004 0.618 0.163 0. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.72 0.387 0.287 0.055 0.83 Lampiran 2.007 0.821 1.88 8.841 3.399 21.055 0.41 0.72 7.418 0.41 Standar deviasi 0.63 0.761 2.26 1.023 0.74 1.28 II 82.011 0.236 1.04 2.596 0.20 14.43 0. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.56 0.71 7.72 Standar deviasi 0.37 1.19 1.839 1.290 .28 0.195 1.009 0.35 14.

76 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

Kromatografi asam amino ulangan I .77 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a.

78 b. Kromatografi asam amino ulangan II .

79 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

80 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

40.8.40.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.6.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.40.60.60. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.80 ppm) .81 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.8.40.60.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.6.

Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.0 40.0 10.19 IC50 (ppm) 3.35 8.18. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo a.993 % Inhibisi 60.0 20.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.0 80.0 30.287x .0 y = 6.16 10 ppm 94.78 81.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) .608x + 27.0 50.0 0.0 70.54 R² = 0.87 R² = 0.0 90.02 51.82 Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.27 100.56 15.44 63.51 27.

490 265.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.421 0.423 0.46 5.419 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.412 0.405 % inhibisi 0 -3.regresi linear y=0.376 0.09 -0.08 4.434 0.224x – 9.77 29.79 6.96 -6.255x – 9.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.143 R² = 0.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.401 0.449 290.224x .9.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .63 7.01 12.83 b.94 2.201x – 8.58 262.18 -5.255x .531 3 y=0.94 2.25 Pers.449 0.454 0.9.490 R² = 0.55 3.93 2 y=0.407 0.462 0.

84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.04 15.660x + 40.73 19.041 0.142 0.00 4.65 87.56 Pers.8.92 71. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.062 0.201x .53 85.225 0.45 79.13 80.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.084 % inhibisi 52.231 0.27 y=0.51 R² = 0.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.75 1 y=0.64x + 37.211 2 0.51 10.449 R² = 0.40 90.72 47.123 0.066 0.17 15.51 46.53 67.055 84.119 0.205 0.55 72.089 0.604x + 43.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .432 0.604x + 43.

777 82.372 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.223 % inhib Pers.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.49 21.86 53.04 R² = 0.201 0.40 53.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.392 0.641x + 2.018 81.656x – 7.47 9.01 3.689x – 6.203 0.30 84.391 0.829 y=0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.660x + 40.99 29.337 0.30 13.68 29.38 y=0.303 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.347 0.312 0.371 0.12 19.64x + 37.34 y=0.01 9.39 .89 27.986 88.305 0.78 48.432 0.73 R² = 0.

86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.6.946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.777 R² = 0.689x .656x .986 R² = 0.2.018 R² = 0.641x .7.

Kloroform : Metanol 4.3 45.58 290. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .17 15. Kloroform : Metanol 5.21 3.79 10.34 81.53 4. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a. n-Heksana : Etil asetat 2.01 252.03 Standart devisiasi 29.30 88.09 82.93 265.39 Ratarata 788. n-Heksana : Etil asetat 3.75 19.87 e.

40 4.78 58.83 62.03 64.97 8.06 1.74 65.32 40.00732 0.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.94 5.41 91.14 83.47 80.61 7.68 5.50 61.92 10.90 4.46 63.69 .43 2.51 63. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.82 77.88 b.00156 0.13 III 101.03 33. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.0028 0.29 2.82 25.86 73.76 60.97 129.04 74.5 26.07 57.87 86.85 44.80 43.36 70.03492 0.85 Rata-rata 103.49 174.00710 0.63 2.77 24.37 Ulangan II 100.00506 0.95 75.21 3.27 62.15748 0.46 76.72 85.62 83.35 Standart deviasi 4.00482 0.37 73.0152 0.56 54.

536x + 46.41 40.00 81.079 % Inhibisi 0 54.164 0.127 0.647x + 34.87 y=0.53 76.29 10. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.099 0.76 93.049 0.689x + 27.12 63.148 0.65 34.086 0.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .71 42.17 33.90 4.62x + 43.71 88.41 73.255 0.94 79.082 0.00 70.64 8.277 0.078 0.85 y=0.37 y=0. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.179 0.82 61.17 25.149 0.193 0.03 8.497x + 45.65 76.47 56 68 79.23 24.108 0.246 0.82 y=0.78 y=0.073 0.76 82.155 0.651x + 33.136 0.12 74.59 81.102 0.23 7.13 27.028 0.77 Pers.59 64.112 0.187 0.086 0.82 57.18 80.41 y=0.88 65.425 0.89 b.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful