KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites

)

JULIANA LEIWAKABESSY

Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Teknologi Hasil Perairan

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Dra. Purwantiningsih S,MS

Judul Tesis Nama NRP

: Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites) : Juliana Leiwakabessy : C351070051

Disetujui, Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Linawati Hardjito, M.Sc Ketua

Dr. Ir. Sri Purwaningsih, M.Si Anggota

Diketahui,

Ketua Program Studi Teknologi Hasil Perairan

Dekan Sekolah Pascasarjana

Dr. Tati Nurhayati, S.Pi, MSi NIP: 19700807 1996 032002

Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc. Agr NIP: 19650814 1990 021001

Tanggal Ujian: 28 September 2011

Tanggal Lulus:

KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites)

JULIANA LEIWAKABESSY

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul “ Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo

(Bactronophorus thoracitesi)” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini

Bogor, September 2011

Juliana Leiwakabessy NRP C351070051

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Ambon pada tanggal 24 November 1969 dari ayah Melkias Leiwakabessy dan Ibu Maria Tapilatu. Penulis merupakan putri keenam dari tujuh bersaudara. Tahun 1989 penulis lulus dari SMU Negeri 2 Ambon dan pada tahun 1997 penulis lulus dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Jurusan Pengolahan Hasil Perikanan Universitas Pattimura. Pada tahun 2007, penulis melanjutkan pendidikan sekolah Pascasarjana (S2) di Teknologi Hasil Perairan IPB dengan sponsor BPPS. Penulis bekerja sebagai staf dosen di Jurusan Perikanan, Fakultas Peternakan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Papua sejak tahun 2003 hingga sekarang.

Dilarang mengumumkan atau memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB.@ Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor Tahun 2011 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang 1. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulisan ini tanpa mencantumkan atau menyebut sumber. a. penyusunan laporan. 2. b. penulisan karya ilmiah. . Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan. penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah. penelitian. Pengutipan tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB.

32 3........................ 39 4. 13 2............................3...................2 Asam lemak ..................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ............................................ 1...................2...................5 Antioksidan dan Pengukurannya .............................4 Komponen Bioakif dari Moluska ............................................................3...................................................... 27 3...................... 21 3.......5 Analisis mineral ..................... 26 3.. 39 4................................................................................................................................................................4 Kandungan asam lemak tambelo .....3.............. 1988) ..........2 Kandungan proksimat tambelo ....3...5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al..2 Penelitian tahap kedua .................... 39 4..........................3.........1 Rendemen daging tambelo .........................2 Perumusan Masalah .........1 Tambelo ...................................................... 47 viii ............... 5 2.........3 Komposisi Kimia ...... 30 3..................................1 Rendemen (Hustiany 2005) ................................2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995)............ 1 1 2 3 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA .........3...........................................................................1 Penelitian Tahap Pertama ..................................1 Asam amino ......3........................................................................................................................................................ 1.................................4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) .........................................2........................DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL .............................................4 Manfaat Penelitian ............3................................. xii DAFTAR GAMBAR ..............................................3 Tujuan Penelitian .............................................3.......................... 11 2............................................................. 5 2.................................. 22 3.1. 21 3......................................3...2......... 32 3........ 42 4..........1 Ekstraksi bahan aktif ..3 Kandungan asam amino tambelo ................................1......................................1 Waktu dan Tempat Penelitian ......................................... 38 4 HASIL DAN PEMBAHASAN .....3.................... 34 3.....................................3 Analisis asam amino (AOAC 1994) ..1.......................................................................................... 1....... 9 2....................................................................................................................................... xiv 1 PENDAHULUAN ..2........ 35 3......................................................... 1................................................. 22 3.........3..3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995)....3...............................................3......................... 6 2......3 Prosedur Penelitian ..................................... 17 3 METODOLOGI PENELITIAN .................3...1....................... 39 4........... 35 3....3 Mineral ...............3..... 23 3...4 Fraksinasi senyawa antioksidan ......................................................5 Kerangka Pemikiran .......................................2......... 7 2.........2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat ............ 16 2......................... 23 3.3..............3.................................................................................1 Latar Belakang .....2 Bahan dan Alat ............... 22 3..............................................3................... 1.2 Uji proksimat (AOAC 2005) ...............3.1 Penelitian tahap pertama ............................................

...1..2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo .................................................. 52 4....................................................2...2... 58 4..............................................5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo .......................7 Identifikasi senyawa fraksi terpilih ...................................................................4 Fraksi ekstrak terpilih . 71 ix ....................................................................................................................................2....................... 63 DAFTAR PUSTAKA .... 52 4...................... 54 4.........2 Penelitian Tahap Kedua ..5 Kandungan mineral tambelo .....................3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo .........................2............................. 57 4.................. 52 4...........2........................................ 64 LAMPIRAN ..................... 60 5 SIMPULAN DAN SARAN ...........................................4.............2......................2. 49 4.......................1 Rendemen ekstrak tambelo ........................ 56 4.................6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo ...........

...................................................... 39 3 Kandungan proksimat daging tambelo ................................................... 48 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo ......................................... 61 x ..................................... 39 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia tambelo ............. 52 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ............................................................ 50 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo .............................................................................................................. 47 6 Komposisi asam lemak ekstrak kasar tambelo ......DAFTAR TABEL Halaman 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh .. 55 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ........... 11 2 Rendemen daging tambelo ............................... 43 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo ..................................................................................................

...................... 59 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH ................................ 18 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007) .................................................. 55 13 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) .................... 6 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo metah (Muller 2004) ............ dan vitamin super ester C ............................ 3 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) ................. 7 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990) ........................ 57 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-fraksi tambelo ..... BHT................................................. 42 12 Nilai IC50 dari ekstrak.............. 33 9 Diagram alir fraksinasi dengan menggunakan KLT ...................................................................... 20 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan identifikasi senyawa antioksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites) .........65 xi ........ 28 8 Diagram alir ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al....... 21 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC ... 2008) ..........................DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Kerangka pemikiran ........................... 63 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan mass 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid ........ 36 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom ............................................................................................................... 37 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo .........

76 4 Kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC ....................................................... vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo ............................................ 75 2 Nilai rata-rata asam amino tambelo ...............DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering .. 87 10 Rendamen fraksi tambelo ............................................. 81 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT... 89 xii .................................................................................. 78 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC ......................................................................................................................................................... 80 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH dari ekstrak tambelo .......................... 82 9 Profil pola pemisahan senyawa ..... 77 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC ............................................ 88 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS ................................................................................................................ 88 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo ....... 75 3 Kromatogram standar asam amino pada HPLC ..................................................................................

amino acid and mineral. 60.62%. protein 7. 9th fraction was similar to farnesic acid glyceride.72±0.46 ppm and phosfor of 2363.04%. and to identify the compound of active antioxidant obtained from selected fractionated extract. MarinLit database (Blunt and Blunt 2008). The maceration result was evaporated and partitioned with a solvent of n-hexane and ethyl acetate. sesquiterpenoic acid glyceride and labdane diterpenoid. The highest antioxidant activity was found in the crude extract of ethyl acetate with IC50 of 15 ppm.45±2.04%. Keywords: Activity antioxidants.63±0.87 ppm.27±0.77±2. The protein of tambelo contained nine essential amino acids and eight non essensial amino acids.88±1. described the crude extract of tambelo contained a group of alkaloid. protein 42. It contained calcium of 3532. The first stage involved the analyses of proximate. The composition of dried tambelo was moisture 6. fatty acid. The highest antioxidant activity obtained by column fractionation was the 9th fraction with IC50 of 8. 6. flavonoid. the identification of fresh antioxidant compound was carried out using LC-MS. to conduct antioxidant and phytochemistry tests.01%. compound . ash 2.01%. shipworm.31%.07±0.06 ppm. chemical. ash 5.27%. Supervised by LINAWATI HARDJITO and SRI PURWANINGSIH Tambelo (Teredinidae) is consumed freshly by local people in Papua without removing the digestive tracts. Finally.ABSTRACT JULIANA LEIWAKABESSY. This study aimed to investigate the chemical composition of fresh tambelo.01%.83%. 40. Chemical Composition and Identification of Antioxidant Compounds from the Extracts of Tambelo (Bactronophorus thoracites).22%. Phytochemical test. and 80 ppm) with DPPH method applying BHT and vitamin super ester C as the standard with a concentration of 4. fat 0.72±0. steroid and triterpenoid. fat 14. The composition of fresh tambelo divided into moisture 82. carbohydrate (by difference) 30. The second stage was the extraction of active materials by means of maceration.21±0. Next. The research consisted of two stages. 8 and 10 ppm.28±0. It had seven saturated fatty acids and eight unsaturated fatty acids. Teredinidae. and carbohydrate (by difference) 7. the extract underwent phytochemical and antioxidant tests (20.

04%. Mereka percaya bahwa isi pencernaan tambelo berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit diantaranya.10%. fosfor 2363.13%. lemak 14. valin 1. Di Papua masyarakat mengkonsumsi tambelo dalam keadaan mentah tanpa harus dibuang isi pencernaannya terlebih dahulu. isoleusin 0. Kabupaten Manokwari memiliki kadar air 82.45 ppm.07±0.42 ppm. Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites).fraksi 9 menyerupai senyawa asam gliserida farnesik.63%. natrium 435. arakidat (C20:0) 0. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak kasar tambelo mengandung senyawa alkaloid.66%. asam glutamat 3.62%. Aktivitas antioksidan yang tertinggi hasil fraksinasi kolom terdapat pada fraksi 9 dengan IC50 sebesar 8.26%. arginin 1. asam lemak. leusin 1. prolin 0. abu 2.55%. Asam amino non esensial pada tambelo.21±0. uji proksimat. alanin 1. dan karbohidrat (by difference) 7.56%.85%. glisin 1.29% dari berat minyak. nafsu makan dan vitalitas pria.37%. palmitoleat (C16:1) 14.27%. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan komposisi kimia tambelo segar.19%. Tambelo mengandung 9 asam amino esensial dan 8 asam amino non esensial. etil asetat.80%.4 ppm.01%. Tahap pertama adalah analisis rendemen. Tambelo memiliki 7 asam lemak jenuh (saturated fatty acid/SAFA) yang terdiri atas miristat (C14:0) 5. asam amino.69%.41% dari berat protein. histidin 1. Cis-10Heptadekanoat (C17:1) 0.25%.34%. heptadekanoat (C17:0) 0. flavonoid.83%. dan diterpenoid labdan. dan arakidonat (20:4ω6) 0. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). heneikosanoat acid (C21:0) 0. Dibimbing oleh LINAWATI HARDJITO dan SRI PURWANINGSIH.04%. tirosin 0. mendapatkan antioksidan dan fitokimia.04%.72%. Asam amino esensial yang terdapat pada tambelo.72±0. rematik.01%. flu. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif tambelo dengan cara maserasi. steroid dan triterpenoid (n-heksana. Tambelo kering memiliki kadar air 6.72±0. . stearat (C18:0) 3.72%.45±2. dan metanol).22%. serta mengidentifikasi senyawa aktif antioksidan hasil fraksinasi ekstrak terpilih.01%. malaria.88±1. dan 8 asam lemak tidak jenuh yang terdiri dari miristoleat (C14:1) 0.31% lemak 0.27±0. asam gliserida sesquiterpenoid.41%. lisin 1. pengujian aktivitas antioksidan.24%. Penelitian ini terdiri dari dua tahap. sakit pinggang.22%. protein 42. dan identifikasi senyawa antioksidan menggunakan LC-MS. dan sistein 0. dan karbohidrat 30. dan mineral dalam tambelo.80% dari berat protein.81%.01%. EPA (C20:4ω3) 0. Kandungan mineral pada tambelo yaitu kalsium 3532. dan besi 1373. kalium 626. pentadekanoat (C15:0) 0. meningkatkan air susu ibu.28±0.06 ppm.33%. abu 5. protein 7.77±2. Tambelo segar (Bactronophorus thoraites) yang berasal dari perairan Andai. fenilalanin 1. metionin 0.74%.87 ppm.63±0. yaitu treonin 0. analisis fitokimia. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 sebesar 15 ppm.RINGKASAN JULIANA LEIWAKABESSY.55%. Rendemen ekstrak kasar tambelo kering yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5.29%.46 ppm. serin 1. yaitu asam aspartat 2. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. palmitat (C16:0) 13.80%.

nafsu makan. 2006). Di Philipina masyarakat menyebutnya tamilok (Betia 2011). Di Papua. masyarakat menyebutnya tambelo ”koo” (Hardinsyah et al. Organisme laut yang sudah dimanfaatkan sebagai bahan obat alami diantaranya spons. serta meningkatkan air susu ibu. batuk. kelas Myoida. dan vitalitas pria (Hardinsyah et al. rematik. 2006). tapi juga sebagai sumber bahan alami yang berpotensi sebagai bahan baku obat (Handayani et al. Senyawa kimia dengan bioaktivitas ini diduga dapat dimanfaatkan manusia sebagai bahan obat alami. cacing laut. dan moluska. tambelo dikonsumsi oleh sebagian masyarakat Bangka yang disebut temilok brubus (Syaputra et al.1 PENDAHULUAN 1. Pemanfaatan organisme laut ini tidak hanya terbatas sebagai bahan makanan. Tambelo dipercaya dapat menyembuhkan penyakit. Hal ini menjadikan perairan Indonesia memiliki potensi kekayaan alam laut yang besar dengan tingkat keragaman hayati yang tinggi. 2008). teripang. Beberapa organisme laut mampu memproduksi senyawa kimia tersebut untuk mempertahankan dirinya dari serangan predator. malaria.1 Latar Belakang Indonesia sebagai negara kepulauan memiliki garis pantai lebih kurang 81000 km dan wilayah laut yang sangat luas. antara lain: sakit pinggang. ordo Teredinidae. Hasil penelitian menunjukkan banyak dari senyawa kimia tersebut berpotensi menghambat pertumbuhan bakteri dan aktif menghambat pertumbuhan sel kanker serta bioaktivitas lainnya (Edrada et al. 2007). Salah satu moluska yang telah dimanfaatkan selain sebagai bahan pangan juga digunakan sebagai obat alami adalah tambelo. 2009). 2000). dimana di dalamnya terdapat berbagai jenis organisme laut. Berdasarkan literatur. rumput laut. suku Kamoro Kabupaten Mimika berpendapat bahwa tambelo berkhasiat menyembuhkan penyakit. . seperti di Brasil Utara ”turu” (Teredinidae) sangat populer digunakan dalam pengobatan penyakit menular (Trindade-Silva et al. Tambelo (Teredinidae) merupakan salah satu jenis hewan penggerek kayu yang hidup di dalam batang kayu bakau yang sudah lapuk dan membusuk yang dikelompokkan ke dalam filum bivalvia. flu. Di Papua.

Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. proses mengantar mas kawin. karena merupakan suatu kebiasaan yang sudah turun temurun dilakukan sejak nenek moyang mereka (Hardinsyah et al. tambelo disajikan sebagai makanan pembuka baik dalam keadaan mentah maupun dimasak/digoreng. Stenotrophomonas maltophilia. Griffin et al. jantung koroner. namun komposisi kimia dan senyawa antioksidan dari tambelo belum banyak diketahui. Antioksidan adalah suatu zat yang dapat menangkal pengaruh radikal bebas yang bila masuk ke dalam tubuh dapat menyebabkan kerusakan. Pada saat pesta adat dilaksanakan. Kenyataan bahwa tambelo mampu memberikan efek menyehatkan bila dikonsumsi. acara peminangan dan lain – lain.2 Perumusan Masalah Tambelo (Bactronophorus thoracites) termasuk di dalam famili Teredinidae dan kelas bivalvia. sehingga perlu dilakukan penelitian senyawa antioksidan dari bahan tambelo (Bactronophorus thoracites). kanker (Muchtadi 2000). Informasi mengenai aktivitas antioksidan pada tambelo sampai saat ini belum ada. memberikan dugaan bahwa di dalam tubuh tambelo terdapat suatu komponen yang bersifat antioksidan. 1. Informasi yang dapat diperoleh dari penelitian terdahulu seperti Trindade-Silva et al. 2006). piring maupun lensa kaca. Kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas di antaranya penuaan dini. Tambelo adalah salah satu obat tradisional yang telah lama digunakan oleh masyarakat Papua. (2009) menunjukkan bahwa bakteri yang diisolasi dari insang tambelo Neo teredo reynei (Teredinidae) dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif (Sphingomonas. (1994) melaporkan bahwa enzim protease yang diisolasi dari bakteri yang terdapat dalam kelenjar dari tambelo Psiloteredo healdi (Teredinidae) bersifat sebagai deterjen pembersih lantai. . Bacillus cereus dan Staphylococcus sciuri).2 Masyarakat Kamoro menggunakan tambelo diberbagai acara pesta adat misalnya acara pesta perkawinan.

3 1. 1. mendapatkan aktivitas antioksidan dan fitokimia ekstrak tambelo. meningkatkan air susu ibu . Obat tradisional Analisis kimia : -. analisis proksimat -. Tambelo (Bactronophorus thoracites) Pesta Adat Dikonsumsi oleh masyarakat Papua dimasak Direbus Makan mentah Sakit pinggang/rematik. batuk. analisis asam amino -.3 Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk memperoleh komposisi kimia tambelo segar dan kering.4 Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kandungan kimia dan bahan aktif yang dikandung dalam tubuh tambelo sebagai senyawa antioksidan sehingga dapat dimanfaatkan dalam bidang pangan fungsional atau nutraceutical. . 2006 Penelitian yg dilakukan oleh Juliana Gambar 1 Kerangka pemikiran. dan vitalis pria. analisis asam lemak -. nafsu makan.5 Kerangka Pemikiran Berdasarkan latar belakang. flu malaria. analisis mineral Ekstraksi tambelo Uji fitokimia Uji aktivitas antioksidan Fraksinasi ekstrak terpilih Uji antioksidan hasil fraksinasi - Identifikasi senyawa dengan LC-MS Penelitian yg dilakukan oleh Hardinsyah et al. 1. perumusan masalah dan tujuan penelitian maka kerangka pemikiran yang disajikan pada Gambar 1. serta mengidentifikasi fraksi aktif senyawa antioksidan.

4 .

Ciri-ciri fisik tambelo adalah tubuhnya lunak. Dinding lubang pada kayu tersebut dilapisi dengan suatu subtansi yang mengandung kapur.2 TINJAUAN PUSTAKA 2. Apabila populasinya terlalu tinggi. Bentuk morfologi tambelo disajikan pada Gambar 2.5 cm. Tambelo dapat bertahan hidup antara satu hingga beberapa tahun. tergantung pada jenisnya. kepalanya berbentuk bulan sabit yang dilengkapi dengan parut dan kikir yang berguna untuk membuat lubang. sehingga panjangnya akan beberapa sentimeter saja dan diameternya kurang lebih dari 0. Klasifikasi tambelo (Turner 1971) adalah sebagai berikut : Filum : Mollusca kelas Ordo Family Genus Spesies : Bivalvia : Myoida : Teredinidae : Bactronophorus : Bactronophorus thoracites .1 Tambelo Tambelo atau shipworm adalah hewan jenis moluska yang hidup di dalam pohon bakau yang telah membusuk. Lubang pada kayu biasanya dibuat tegak lurus terhadap serat kayu. Keberadaan dan sifat tambelo sangat dipengaruhi oleh tipe habitat. 2008). Kepadatan tambelo tertinggi pada bulan Januari sampai April dan kepadatannya rendah pada bulan Juli (Filho et al. Tambelo berkembang normal di air dengan salinitas antara 10-30 ppm dan lebih banyak dijumpai di daerah tropis (Muslich et al. memanjang seperti cacing. 1983). Tambelo mampu menggali lubang sepanjang 18 cm hingga 2 m (Waterbury et al. perkembangan tubuhnya akan terbatas. Terbentuknya lapisan yang mengandung kapur dihasilkan dari mantel shipworm (Ginuk 1987). 1988). kemudian membelok sejajar dengan arah serat kayu. Panjang tubuh tambelo berkisar antara 30 hingga 100 cm dengan diameter antara 1 sampai 1. 1988).5 cm (Muslich et al.

1983). meningkatkan air susu ibu. ada 4 spesies mangrove yang digunakan sebagai habitat dari tambelo yaitu 2 spesies dari genus Rhizophora. tidak dikonsumsi oleh masyarakat suku Kamoro. Tambelo yang tumbuh di mangrove Sonneratia sp dan Bruguiera sp. seperti disajikan pada Gambar 3. Identifikasi tambelo didasarkan kepada bentuk cangkangnya yang berwarna putih (panjang ± 1 cm) digunakan untuk menutup mulut terowongan. Pada masyarakat Kamoro. Pallet yang terletak pada bagian tubuh depan yang digunakan untuk memarut kayu. 2. cangkang dan giginya dilepas dan langsung dimakan tanpa dibersihkan isi pencernaannya terlebih dahulu. batuk. . Menurut Mayabubun (2003). sebab rasanya pahit dan tidak enak untuk dimakan. nafsu makan. tambelo dijadikan sebagai makanan utama di berbagai acara pesta adat seperti pesta budaya Karapao Suku Kamoro.6 Gambar 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) Hewan ini memanfaatkan serbuk kayu makanan. Perut tambelo terdiri dari dua bagian usus. 1 spesies genus Sonneratia dan 1 spesies termasuk dalam genus Bruguiera. rematik flu. dan kejantanan bagi kaum lelaki. malaria. Cara masyarakat Papua mengkonsumsikan tambelo yaitu setelah tambelo diambil dari pohon bakau yang sudah membusuk. Bagian kedua adalah kelenjar pencernaan yang difungsikan untuk mencerna partikel-partikel kayu (Waterbury et al.2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat Tambelo yang dimakan mentah dipercaya oleh masyarakat Papua lebih berkhasiat daripada direbus atau digoreng. Bagian pertama adalah usus besar yang berfungsi untuk menampung serbuk kayu. Masyarakat Papua percaya bahwa sisa pencernaan dalam perut tambelo sangat berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit di antaranya sakit pinggang.

sanitasi dan higiene. Protein memiliki peranan penting dalam pembentukkan biomolekul daripada sebagai sumber energi. Kekurangan protein pada anak saat lahir (kwashiorkor). dan pengendalian pertumbuhan (Winarno 1992). Keadaan tersebut tidak hanya dipengaruhi oleh asupan makanan. dan N. dan air (Harper et al. bila organisme sedang kekurangan energi. . Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsurunsur C.3 Komposisi Kimia Zat gizi dibagi menjadi 5 kelas utama. defisiensi energi protein (marasmus).O. atau gabungan keduanya dapat mengakibatkan kegagalan pertumbuhan ringan sampai sindrom klinis berat yang spesifik. berperan sebagai enzim. tetapi juga oleh keadaan lingkungan. seperti pemukiman. pertahanan tubuh atau imunisasi. 1988). Protein akan dipakai sebagai sumber energi. Protein berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. Kandungan energi protein rata-rata 4 kkal/g atau setara dengan kandungan energi karbohidrat (Sudarmadji et al. mineral.H.7 Gambar 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo mentah (Sumber: Muller 2004) 2. karbohidrat. media perambatan impuls syaraf. serta infeksi berulang yang pernah dialami tubuh (Effendi 2002). penunjang mekanis. yaitu protein. pengatur pergerakan. lemak. 1989). Fungsi protein bagi tubuh adalah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada. alat pengangkut dan alat penyimpanan.

Serat pangan dapat diklasifikasikan berdasarkan struktur molekul dan kelarutannya. dan karbohidrat rantai pendek (short chain carbohydrates/SC). warna. sedangkan serat pangan yang tidak larut akan memperbesar volume feses dan akan mengurangi waktu transitnya (bersifat laksatif lemah). seperti sayuran dan produk susu. xylosa. Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan makanan. 1994). khususnya bagi penduduk negara yang sedang berkembang. Gula yang membentuk serat pangan adalah glukosa. Serat pangan yang larut sangat mudah difermentasikan dan mempengaruhi metabolisme karbohidrat serta lipida. terhidrolisis. Sayuran dan produk susu mengandung metionin. tekstur. dan gula asam seperti mannurinat. mannose. galakturonat. dan asam amino aromatik (AAA) yang lebih rendah serta asam amino rantai cabang (BCAA) yang lebih tinggi dibandingkan dengan daging (Nelson et al. rhamnosa. Serat pangan atau dietary fiber adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis (dicerna) oleh enzim pencernaan manusia. pati yang resisten (resisten starch/RS). kehilangan mineral. Dalam tubuh. Kebanyakan jenis karbohidrat yang sampai ke kolon tanpa meliputi polisakarida yang bukan pati (non-starch polysacharides/NSP). dan akan sampai di usus besar (kolon) dalam keadaan utuh sehigga akan menjadi subtrat untuk fermentasi bakteri yang hidup di kolon. Kondisi ini biasanya ditemukan pada pasien Konsumsi sumber protein selain daging. misalnya rasa. koma hepatik. Karbohidrat merupakan sumber kalori yang murah. glukoronat. sangat dianjurkan. . dan beguna untuk membantu metabolisme lemak dan protein (Winarno 2008). Monomer dari serat pangan adalah gula netral dan gula asam. selain itu beberapa golongan karbohidrat menghasilkan serat (dietary fiber) yang berguna bagi pencernaan. galaktosa. Karbohidrat merupakan sumber kalori utama bagi hampir seluruh penduduk dunia.8 Pembatasan konsumsi protein pada penderita hati dilakukan apabila pasien mengalami intoleransi protein. arabinosa. pemecahan protein tubuh yang berlebihan. karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosisi. serta 4-o-metil-glukoronat (Muir 1999).

yaitu linoleat dan linolenat (Sudarmadji et al. 1989). Asam amino merupakan komponen utama penyusunan protein.E. Pada umumnya penguraian lemak dan minyak menghasilkan zat-zat yang tidak dapat dimakan. Asam amino esensial tidak dapat diproduksi dalam tubuh sehingga sering harus ditambahkan . Protein yang masuk dalam tubuh akan diubah menjadi asam amino. Proses absorpsi asam diamino lebih lambat dari pada asam amino netral (Poedjadi dan Supriyanti 2006). Asam amino glutamat dan aspartat paling lambat terserap (Linder 2006). yaitu setiap asam mempunyai sedikitnya satu kelompok amino dan satu kelompok karboksil (Sudarmadji et al. Komponen mineral dalam suatu bahan sangat bervariasi baik macam dan jumlahnya (Sudarmadji et al.D. Mineral digolongkan sebagai zat gizi anorganik atau disebut sebagai abu dalam pangan karena ternyata jika bahan pangan dibakar. Abu adalah zat anorganik sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. Tingkat penyerapan relatif masing-masing asam amino adalah asam amino rantai cabang (valin. Asam amino tersebut akan diabsorpsi melalui dinding usus. kemudian dilanjutkan sampai ke dalam pembuluh darah. 1988). dan dibagi dalam dua kelompok. tetapi terdapat dua hal yang sama.1 Asam amino Protein merupakan molekul yang sangat besar. Susunan kimia asam amino bervariasi. Asam amino esensial lebih mudah diserap dari asam amino non esensial. 1989). terbentuk dari asam amino yang terikat bersama. baik yang menguntungkan maupun tidak. 1989). leusin.9 Minyak atau lemak berfungsi sebagai sumber energi dan pelarut vitamin A. Kerusakan lemak dan minyak menurunkan nilai gizi serta menyebabkan penyimpanan rasa dan bau yang bersangkutan. Perubahan-perubahan kimia atau penguraian lemak dan minyak dapat mempengaruhi bau dan rasa suatu bahan makanan. yaitu asam amino esensial dan nonesensial. Kadar abu ada hubungannya dengan mineral suatu bahan.3. dan K serta merupakan sumber asam-asam lemak tak jenuh yang esensial. isoleusin) dan metionin lebih mudah diserap dari asam amino esensial lainnya. Kandungan abu dan komponennya tergantung pada macam bahan dan cara pengabuannya. 2. unsur organik akan menghilang dan bahan anorganik (abu) yang tersisa terdiri dari unsur-unsur mineral (Harper et al.

Asam amino esensial yang dibutuhkan oleh tubuh manusia ialah histidin. contohnya tirosin merupakan prekursor yang membentuk pigmen kulit dan rambut. Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh disajikan pada Tabel 1. namun tidak larut dalam pelarut organik nonpolar (Sitompul 2004). lisin. fenilalanin. sedangkan asam amino nonesensial dapat diproduksi dalam tubuh. Glutamin dan asparagin merupakan simpanan asam amino dalam tubuh. Metionin dan serin merupakan prekursor sintesis dan histidin yang diperlukan untuk sintesis histamin . Asam amino umumnya berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air. Asam amino esensial merupakan pembangun protein tubuh yang harus berasal dari makanan atau tidak dapat dibentuk di dalam tubuh. yaitu menyediakan bahanbahan yang sangat berperan dalam proses pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan tubuh. Arginin terlibat dalam sintesis ureum dalam hati. treonin. Kebutuhan metionin dapat disubtitusi dengan tirosin atau gabungan sistin dan fenilalanin (Linder 2006). Kebutuhan asam amino esensial bagi anak-anak relatif besar daripada orang dewasa (Poedjiadi dan Supriyanti 2006). Selain fungsi tersebut hampir semua asam amino memiliki fungsi khusus. triptofan.10 dalam bentuk makanan. arginin. Protein bekerja sebagai pengatur semua proses yang berlangsung di dalam tubuh dan sebagai sumber energi jika karbohidrat dan lemak tidak dapat mencukupi keperluan tubuh. valin. Asam amino merupakan unit pembangun protein. di dalam tubuh. asam amino atau protein berfungsi sebagai zat pembangun. Kelengkapan komposisi asam amino esensial merupakan parameter penting penciri kualitas protein (Astawan 2007). leusin. metionin. isoleusin.

melanin dan tiroksin. neurotransmiter α-aminobutirat (GABA). yang dapat dibebaskan dari ikatan tersebut melalui hidrolisis kimia atau enzimatik. . sumber NH3 Sebagai prekusor biosintesis purin dan neurotransmiteri Berfungsi untuk crosslinking protein (seperti dalam kolagen dan elastin) biosintesis karnitin merupakan donor grup metil untuk banyak proses sintetik Sebagai prekusor serotonin dan nikotinamid (vitamin B) Sebagai prekusor tirosin katekolamin. 2. Asam lemak tidak terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan. poliamin. Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ujung hidrokarbon nonpolar yang panjang. sehingga hampir semua lipid bersifat tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak. ornitin. dan serotoninmetionin donor gugus metil untuk sintesis beberapa senyawa seperti kolin dan kreatin Sebagai pemula tirosin dan keduanya membentuk tiroksin dan epinefrin. arginin. melanin dan tiroksin Berperan pada sintesis profirin dari hemoglobin dan juga merupakan konstituen asam glikolat Bagi manusia. Fenilalanin Glisin Histidin Aspartat Glutamat Glisin Lisin Metionin Triptofan Tirosin Sumber: Poedjiadi dan Supriyanti (2006).2 Asam lemak Asam lemak merupakan komponen unit pembangunan yang sifatnya khas untuk setiap lipid. Berfungsi untuk biosintesis urea. histidin merupakan asam amino esesnsial bagi anak-anak.3. tetapi terdapat dalam bentuk terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipid berbeda. sitrulin yang ikut berperan dalam sinstesis urea dalam hati serta berfungsi sebagai prekursor tirosin katekolamin. Asam lemak adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai 4-24atom. prekusor prolin. ornitin. arginin. prekursor glikogenik dan pirimidin Sebagai produk antara dalam reaksi interkonversi asam amino.11 Tabel 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh Jenis asam amino Triptofan Peranan Sebagai pemula vitamin niasin.

Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. minyak kedelai. sedangkan asam lemak tidak jenuh ganda mengandung dua atau lebih ikatan rangkap (polyunsaturated fatty acid=PUFA). Semua lemak bahan makanan hewani dan sebagian besar minyak nabati mengandung asam lemak rantai panjang. lemak tak jenuh tunggal memiliki efek yang mengutungkan terhadap kolesterol dalam darah. minyak kacang tanah. dan rantai sangat panjang (20 atom karbon atau lebih). . Asam lemak tidak jenuh tunggal mengandung satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya (monounsaturates fatty acid=MUFA). dan canola. Asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) tergolong dalam asam lemak rantai panjang. sedangkan yang tersusun oleh lemak jenuh berbentuk padat (Almatsier 2009). Secara umum.dan meningkatkan K-HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. Salah satu jenis MUFA adalah omega-9 (oleat) yang memilki sifat lebih stabil dan lebih perannya dibandingkan PUFA. Asam lemak yang mengandung satu atau lebih ikatan rangkap di mana sebetulnya dapat diikat tambahan atom hidrogen dinamakan asam lemak tidak jenuh. MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. rantai panjang (14-18 karbon). Penelitian yang dilakukan Mensink (1987) menyatakan bahwa MUFA dapat menurunkan LDL. asam lemak rantai sangat panjang terdapat dalam minyak ikan. Polysaturated fatty acid (PUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein (LDL) dan juga menurunkan high density lipoprotein (HDL). Sementara itu. rantai sedang (8 hingga 12 karbon). Titik cair asam lemak meningkat dengan bertambah panjangnya rantai karbon.12 Asam lemak dibedakan menurut jumlah karbon yang dikandungnya. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. yaitu asam lemak rantai pendek (6 atom karbon atau kurang). Lemak yang tersusun oleh asam lemak tidak jenuh akan bersifat cair pada suhu kamar. asam lemak tak jenuh (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi populer. minyak biji kapas. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. Asam lemak yang terdiri dari rantai karbon yang mengikat semua hidrogen yang dapat diikatnya dinamakan asam lemak jenuh.

kontraksi otot serta penyembuhan luka (Achadi 2010). . dan dokosaheksaenoat (DHA) dari asam linolenat. klorin. prostasiklin. magnesium. tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA) yang banyak ditemukan pada minyak nabati atau sayur dan minyak ikan. yaitu makromineral dan mikromineral. bersifat cair pada suhu kamar. rangsangan sistem saraf. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron serta menurunkan produksi trigliserida dan poliprotein β (beta) di dalam hati.3. dan leukotien. fungsi imun. Sumber alami PUFA yang penting bagi kesehatan adalah kacang-kacangan dan biji-bijian. Mineral yang terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup banyak.05% dari bobot tubuh dikenal sebagai makromineral. Manfaat PUFA (asam lemak arakhidonat. Asam lemak ini banyak ditemukan pada ikan dan bahan nabati. 2. sedangkan tubuh tidak dapat mensintesisnya. jagung. tetapi ketersediaan mineral harus tercukupi setiap harinya. Asam lemak esensial adalah asam lemak yang dibutuhkan oleh tubuh untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan. bahkan tetap cair pada suhu dingin karena titik lelehnya lebih rendah dibandingkan dengan MUFA. asam lemak omega-3 penting untuk berfungsinya otak dan retina dengan baik. Contoh PUFA adalah asam linoleat (omega-6). linoleat. dan biji matahari. tromboksan. eikosapentaenoat (EPA). seperti bunga matahari. Senyawa-senyawa ini mengatur tekanan darah. sedikitnya 0. dan linolenat) antara lain berperan dalam transpor dan metabolisme lemak. denyut jantung. Berdasarkan jumlahnya dalam tubuh manusia dibedakan menjadi dua. fungsi kekebalan. Turunan asam lemak arakidonat dari asam linoleat.13 Polyunsaturated fatty acid (PUFA) adalah asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan rangkap. Kelompok asam lemak yang termasuk dalam jenis ini adalah asam alfa linoleat (omega-6) dan asam alfa linolenat (omega-3). Makromineral terdiri dari kalsium. Selain peranannya dalam pencegahan penyakit jantung koroner dan artritis. Asam lemak esensial merupakan prekursor sekelompok senyawa eikosanoid yang mirip hormon. yaitu prostaglandin. dan omega-3. fosfor. mempertahankan fungsi dan integritas membran sel.3 Mineral Mineral termasuk ke dalam golongan nutrisi mikro dalam tubuh yang diperlukan dalam jumlah kecil.

3) komponen senyawa tubuh yang esensial adalah hormon. 2) sebagai katalis untuk reaksi biologis. 5) transmisi impuls saraf. serta mengaktifkan reaksi enzim dan sekresi hormon termasuk insulin oleh pankreas. dan magnesium berperan dalam transmisi impuls-impuls serta kontraksi dan relaksasi otot (Muchtadi 1989). Mineral yang diketahui dibutuhkan oleh tubuh dan terdapat dalam jumlah yang lebih sedikit dari 0. natrium. 6) mengatur kontraktilitas otot. 4) memelihara keseimbangan air dalam tubuh. 1988. pertumbuhan jaringan tubuh. besi. b) Kalium (K) Hampir seluruh kegiatan di dalam tubuh dipengaruhi oleh perubahan kosentrasi kalium di dalam plasma. dan belerang. Sekitar 270 mg kalium berada di dalam sel yang . yang terdiri dari kobalt. Secara umum fungsi mineral bagi tubuh adalah sebagai berikut: 1) mempertahankan keseimbangan asam – basa dalam tubuh. mangan. Kalium juga berperan dalam penyampaian impuls-impuls saraf ke serat-serat otot dan juga dalam kemampuan otot untuk berkontraksi (Fregly 1988).05% dari bobot tubuh disebut sebagai mikromineral. lipase. hemoglobin. kolinesterase. a) Kalsium (Ca) Kalsium diperlukan untuk pembentukan dan perkembangan tulang dan gigi. Kalsium merupakan salah satu faktor yang terpenting dalam pembekuan darah. Kalsium juga berperan dalam pembentukan tulang dan gigi. flourin. iodin. dan seng (Harper et al. Kalsium diperlukan untuk memelihara otot dan syaraf dalam tubuh agar berfungsi normal dan membantu penyerapan vitamin B12 (Harper et al. Kalsium bersama dengan natrium. Sebanyak 98% kalium dalam tubuh berada di dalam intraseluler. Winarno 1992). dan 7). Gaman dan Sherrington 1992). kalium. enzim. dan suksinildehidrogenase. Kalsium berfungsi untuk mengatur transpor ion-ion menembus membran seluler dan diperlukan untuk aktivitas aktomiosin dan miosin ATP-ase. Kalium adalah basa utama yang terdapat di dalam jaringan dan sel-sel darah yang memegang peranan penting dalam pengaturan keseimbangan asam basa tubuh. tembaga. asam lambung. 1988.14 kalium.

hati. tetapi digunakan lagi untuk membuat sel-sel darah merah yang baru. Bersama vitamin C dapat mempertahankan aktivitas enzim-enzim yang tersangkut dalam sintesis elastin (protein dinding . Gaman dan Sherrington 1992). sebagai bagian dari enzim atau sebagai kofaktor pada kegiatan lebih dari dua ratus enzim. dan limpa sebagai senyawa kompleks dengan protein yang dikenal sebagai feritin (Harper et al. Diperlukan untuk sintesis fosfolipida untuk pembentukan myelin yang menyelimuti serat syaraf. dengan cara membantu penyerapan Fe. Sebagai bagian dari enzim-enzim pernafasan misalnya sitokrom oksidase. menstimulir sintesis fraksi heme atau globin. besi tidak hilang dari tubuh. e) Seng (Zn) Seng memegang peranan esensial dalam banyak fungsi tubuh. serta melepaskan Fe simpanan dari ferritin dan hati. dan untuk proses pelepasan energi. Beberapa besi juga disimpan di dalam tubuh seperti dalam sumsum tulang. d) Besi (Fe) Sebagian besar besi terdapat dalam hemoglobin (pigmen darah merah yang terdapat dalam sel darah merah).15 merupakan cairan kation yang mendominasi di dalam intrseluler (Groff dan Gropper 1990). Fosfor juga terdapat dalam semua sel hidup dan diperlukan untuk pelepasan energi. Seng juga 1988. berperan dalam pengembangan fungsi reproduksi laki-laki dan pembentukkan sperma serta berperan dalam fungsi kekebalan. yaitu dalam fungsi sel T dan dalam pembentukan antibodi oleh sel B (Almatsier 2009). Fosfor terdapat dalam kebanyakan makanan dan defisiensi fosfor dalam susunan makanan belum pernah terjadi (Gaman dan Sherrington 1992). Bila sel-sel darah merah melepaskan besi. c) Fosfor (P) Fosfor dan kalsium secara bersama-sama adalah penyusun tulang dan gigi yang sangat penting. di dalam sumsum tulang. f) Tembaga (Cu) Fungsi tembaga dalam tubuh antara lain mencegah terjadinya anemia. Enzim superoksida dismutase di dalam sitosol semua sel. terutama eritrosit diduga berperan dalam memusnahkan anion superoksida yang merusak.

namun perempuan dewasa yang sedang hamil dianjurkan meningkatkan asupan selenium menjadi 60 µg per berat badan setiap hari. selenium bekerja sama dengan vitamin E sebagai zat antioksidan untuk memperlambat oksidasi asam lemak tak jenuh. penyakit jantung. Konsumsi garam Cu dalam jumlah sepuluh kali lebih besar daripada yang terdapat dalam bahan pangan secara normal. Di dalam tubuh. Kebutuhan tersebut akan meningkat saat seorang ibu harus menyusui. mempunyai prospek sebagai zat aktif dalam obat . Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. sebagai bagian dari enzim tirosinase yang mengkatalisis konversi tirosin menjadi melanin. Orang dewasa dianjurkan untuk mengkonsumsi sebanyak 55 µg per berat badan selenium setiap hari. Bersama vitamin E. menambah pamornya sebagai mineral yang bermanfaat besar untuk meningkatkan fungsi kekebalan tubuh manusia. Selenium diketahui memperbaiki sistem imunitas (kekebalan tubuh) dan fungsi kelenjar tiroid. 2.16 aorta) dan kolagen. Tembaga bersifat toksik bila terdapat sebagai ion bebas. Sumber utama selenium adalah tumbuh-tumbuhan dan makanan laut (Conectique 2011). seperti kanker. dan penuaan dini. dapat menyebabkan pusing dan muntah (Muchtadi 2009). selenium berfungsi mempertahankan elastisitas jaringan dan bila kadar selenium berkurang maka tubuh akan mengalami penuaan dini. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh invertebrata laut dan mikroorganisme simbion.4 Komponen Bioaktif dari Moluska Invertebrata laut merupakan produsen senyawa bioaktif terbesar di antara biota lainnya. yaitu kondisi sel yang rusak sebelum waktunya. Tubuh setiap orang memiliki kemampuan untuk melawan radikal bebas yang bisa menghancurkan sel dan menimbulkan berbagai penyakit kronis. g) Selenium (Se) Selenium adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas. yaitu 70 µg per berat badan setiap hari. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Hasil penelitian belakangan ini yang memastikan bahwa selenium dapat mencegah kanker (termasuk kanker kulit akibat paparan matahari).

17 untuk pengobatan penyakit. alkohol dan asam-asam dengan karakteristik dan cita rasa tengik (Winarno 1984). penyakit jantung. 2. dan antikanker. Proses oksidasi tersebut biasanya terjadi dalam produk terutama yang berlemak dengan kandungan asam lemak tidak jenuh sehingga dapat menyebabkan kerusakan produk atau ketengikan. Hasil penelitian Salamah et al. immunologi. yaitu : a) inisiasi. (1996) melaporkan telah mengisolasi kahalaide F dari kerang jenis Elysia rubefescens yang memiliki aktivitas sebagai antikanker usus dan prostat. seperti infeksi. alzheimer’s). neurologi (parkinson. memperlambat atau mencegah terjadinya proses oksidasi. Pada tahap inisiasi terjadi pembentukan radikal bebas (R●) akibat reaksi antara asam lemak (RH) dengan beberapa katalisator.5 Antioksidan dan Metode Pengukurannya Senyawa antioksidan secara umum didefinisikan oleh Schuler (1990) sebagai suatu senyawa kimia yang dapat menunda. Mekanisme oksidasi asam lemak tidak jenuh menurut Hamilton (1983) dan Gordon (1990) terdiri dari 3 tahap. misalnya oksigen. Hamman et al. dan cahaya. Tahap propagasi terjadi akibat reaksi antara radikal bebas (R●) yang terbentuk pada tahap inisiasi dengan oksigen menghasilkan radikal peroksida (ROO●). yaitu nilai IC50 sebesar 201. Penelitian mengenai metabolit sekunder dari moluska telah banyak dilakukan. Radikal peroksida yang terbentuk akan mengikat ion hidrogen dari molekul lemak yang lain membentuk hidroperoksida (ROOH) dan radikal lemak lain (R1). Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak kijing Taiwan adalah kelompok alkaloid dan flavonoid. Moluska merupakan salah satu dari invertebrata laut yang diketahui menghasilkan metabolit sekunder dan sekaligus mempunyai peranan penting dalam ekologinya sehingga menjadi target bagi sumber senyawa bioaktif yang bermanfaat dalam dunia farmasi bahari. ion logam. Ranney (1979) mengklasifikasikan antioksidan atas tiga golongan berdasarkan prinsip kerjanya dalam mencegah terjadinya proses oksidasi. panas. anti-inflammatory. Pertama adalah antioksidan yang mempunyai gugus fenol dan amina aromatik . (2008) diketahui bahwa ekstrak metanol kijing Taiwan yang berpotensi sebagai antioksidan. b) propagasi dan c) terminasi. antivirus. keton. selanjutnya tahap terakhir adalah tahap terminasi ditandai dengan terbentuknya produk-produk non radikal seperti aldehida.52 ppm.

butylated hydroxytoluene (BHT). Contoh antioksidan ini adalah dilauril tiodipropionat (DLTP). Penggolongan ketiga ini sama dengan antioksidan sekunder menurut Winarno (1984) dan Gordon (1990). butylated hydroxyanisole (BHA). Molekul ini mengandung atom sulfur teroksidasi yang mampu bereaksi dengan molekul hidroperoksida berikutnya. Jika radikal antioksidan yang dihasilkan cukup stabil mencegah reaksi berikutnya. Antioksidan sintetik sangat efektif dalam menghambat reaksi oksidasi lemak akan. Jenis penggolongan antioksidan yang lain berdasarkan sumber diperolehnya senyawa tersebut. Antioksidan-antioksidan tersebut bekerja dengan cara berinteraksi dengan radikal bebas yang terdapat di dalam sistem dan membentuk produk subtrat non radikal dan suatu radikal antioksidan. Ketiga adalah antioksidan yang dapat menginaktivasi logam yang bisa mempercepat terjadinya oksidasi. Kedua adalah antioksidan yang berfungsi dengan cara menghilangkan molekul-molekul hidroperoksida dari sistem. Kedua produk yang dihasilkan pada kenyataannya mungkin bereaksi dengan radikal bebas kedua dalam sistem Mekanisme reaksi oksidasi lemak dapat dilihat sebagai berikut : Tahap inisiasi : ROOH ROOH 2ROOH Tahap propagasi : R● + O2 ROO● + R1 H Tahap terminasi : ROO● + R1 OO● R● + RO● ROO● RO● RO● + H● + OH + OH ROO● R1● + ROOH ROOH1 + O2 ROR1 Gambar 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990). Penggolongan ini terdiri atas dua yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami.18 seperti butylated hydroxyanisole (BHA). tertiarybutyl hydroquinon (TBHQ) dan tokoferol (Buck 1991). metilen bisfenol dan difenilamin. Propil galat. Beberapa antioksidan sintetik yang sering digunakan dalam industri pangan antara lain butylated hydroxytoluene (BHT). maka radikal antioksidan tersebut tidak akan berperan sebagai inisiator dari berikutnya. tetapi tanpa melibatkan radikal bebas. tetapi penggunaan antioksidan sintetik banyak menimbulkan kekuatiran akan efek sampingnya karena telah banyak .

b) tidak menimbulkan flavor yang tidak enak.01-0. turunan senyawa hidroksinat. Vattem dan Shetty 2006). kumarin. Senyawa DPPH dalam metode ini digunakan sebagai model radikal bebas. reaksi ini akan memberikan peningkatan kompleks non radikal dan menurunkan radikal DPPH yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning. Ketika sebuah antioksidan mampu mendonorkan hidrogen yang beraksi dengan radikal DPPH.19 penelitian tentang efek patologis yang ditimbulkannya. yang memiliki rumus molekul C18H12N5O6 dan Mr=394. Antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstrak bahan alami. Pada uji ini metanol digunakan sebagai pelarut. harus memenuhi persyaratan tertentu yaitu: a) tidak beracun dan tidak mempunyai efek fisiologis. . Radial bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil pada suhu kamar dan larut dalam pelarut seperti metanol atau etanol (Molyneux 2004. dan inkubasi pada suhu kamar dimaksudkan untuk mengoptimumkan aktivitas DPPH. Jika senyawa ini masuk dalam tubuh manusia dan tidak terkendalikan dapat menyebabkan kerusakan fungsi sel. d) efektif dalam jumlah yang relatif kecil menurut rekomendasi Food and Drug Administration dosis yang diizinkan dalam bahan pangan adalah 0. Penurunan pada absorbsi dapat diukur secara spektrofotometrikal dan dibandingkan dengan sebuah kontrol etanol atau metanol untuk mengkakulasikan aktivitas scavenging radikal DPPH (Vattem dan Shetty 2006).33 (Molyneux 2004. c) larut sempurna dalam lemak dan minyak.1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). Penggunaan bahan antioksidan baik alami maupun sintetik dalam bahan pangan. Adapun antioksidan yang terdapat di dalam bahan alami meliputi golongan senyawa turunan fenolat. Suratmo 2009). rasa dan warna pada lemak atau bahan pangan. Antioksidan alami dalam bahan pangan diperoleh dari: a) antioksidan berupa senyawa endogen yang terdiri dari satu atau lebih senyawa yang terdapat dalam bahan pangan. Ada beberapa metode pengukuran aktivitas antioksidan yang dapat digunakan salah satunya adalah metode 1.1% dan e) tidak mahal serta selalu tersedia (Coppen 1983. b) antioksidan yang terbentuk akibat reaksi selama pengolahan. tokoferol (Sidik 1997). Ketaren 1986). c) antioksidan yang merupakan senyawa eksogen yaitu dengan penambahan antioksidan yang diisolasi dari sumber alami (Pratt 1992).

20

Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen, maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH, jika semua elektron pada radikal bebas DPPH berpasangan, maka warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm akan hilang. Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH disajikan pada Gambar 5. DPPH* Free radical + AH antioksidan DPPH-H neutral + A* new radical

Puplish color

Yellowish color

Gambar 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007). Parameter yang digunakan untuk menginterpretasikan hasil pengujian dengan metode DPPH adalah EC50 (efficient concentration) atau biasa disebut IC50 (inhibition concentration). Inhibition concentration (IC50) dapat didefinisikan sebagai kosentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 0,05 mg/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 0,05-0,10 mg/mL, sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/mL, dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/mL (Blois 1958 diacu dalam Molyneux 2004).

21

3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Sampel diambil dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Provinsi Papua Barat. Ekstraksi dan uji aktivitas antioksidan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan Pusat

Laboratorium Kimia Analitik, FMIPA, Institut Pertanian Bogor,

Laboratorium Terpadu IPB-Bogor. Identifikasi senyawa antioksidan dilakukan di Balai Pengkajian Bioteknologi (Biotech Center-BPPT), Serpong. Penelitian dilaksanakan dari bulan Agustus 2010 – Maret 2011. Gambar 6 menunjukkan diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa antiokksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).
Tambelo kering Maserasi dengan MeOH Ekstraksi dengan MeOH Partisi dengan pelarut n-heksan, dan etil asetat Ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak metanol Uji Fitokima Uji antioksidan Ekstrak terplilih KLT Eluen terbaik Analisis kimia : - uji proksimat - uji asam amino - uji asam lemak - uji mineral

Kromatografi kolom

Uji Fitokima

Uji antioksidan Fraksi terpilih Identifikasi dengan LC-MC

Gambar 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).

antioksidan

22

3.2 Bahan dan Alat Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah tambelo yang berasal dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Propinsi Papua Barat. Tambelo diperoleh dari batang pohon mangrove Rhizopora yang sudah lapuk. Tambelo dibersihkan dengan melepaskan cangkang dan pallet kemudian dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. Tambelo kering selanjutnya digiling dengan menggunakan mortar dan disimpan pada suhu rendah (5-10 oC) sampai siap untuk dianalisis. Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi adalah n-heksana, etil asetat, metanol, dan kertas saring Whatman 40. Bahan kimia yang digunakan untuk uji antioksidan adalah DPPH (1,1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl), BHT dan vitamin super ester C sebagai standar. Bahan untuk uji fitokimia adalah H2SO4, akuades, kloroform p.a (pengenceran), anhidra asetat, asam sulfat pekat, HCl 2N, pereaksi Dregendorff, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, serbuk magnesium, alkohol, HCl 37%, etanol 70%, FeCl3 5%, pereaksi Molish, pereaksi benedict, pereaksi biuret, dan larutan ninhidrin 0,1%. Peralatan utama yang digunakan adalah kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom (KK), spektrofotometer UV-Vis JENWAY 6305,

kromatografi cair (LC-MS) AGILENT TECHNOLOGIES, vacum rotary evaporator Buchi Rotavapor R-205, dan Spektrofotometer serapan atom (SSA) Shimazu-7000. 3.3 Prosedur Penelitian Penelitian ini terbagi atas dua tahap, yaitu 1) analisis komponen kimia tambelo, dan 2) Ekstraksi bahan aktif tambelo. Penelitian tahap pertama meliputi analisis rendemen, uji proksimat, asam lemak, asam amino, dan mineral. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif dengan metode maserasi, partisi cair-cair, uji fitokimia, uji antioksidan dengan metode DPPH, dan identifikasi senyawa

antioksidan dari bahan aktif yang dihasilkan. 3.3.1 Penelitian tahap pertama Penelitian tahap pertama ini bertujuan untuk mendapatkan presentase bagian tubuh yang dapat dimanfaatkan dan memperoleh nilai kandungan gizi atau komposisi kimia dari tambelo. Analisis kandungan gizi terdiri dari analisis

2 Uji proksimat (AOAC 2005) Analisis proksimat yang dilakukan meliputi uji kadar air dan abu dengan metode oven.23 proksimat yang meliputi kadar air. Daging tembelo yang sudah kering ditimbang kembali untuk mengetahui penurunan berat setelah dikeringkan. 3.1. kemudian dimasukan kedalam cawan. Cawan tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 102-105 oC selama 6 jam.3.1. Rendemen merupakan presentase perbandingan antara bagian yang digunakan dengan berat utuh tambelo segar. dan uji kadar protein menggunakan metode kjedahl. serta asam lemak.1 Rendemen (Hustiany 2005) Tambelo dikeluarkan dari freezer. a) Analisis kadar air (AOAC 2005) Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 102-105 o C selama 30 menit. analisis asam amino. uji kadar lemak menggunakan metode sokhlet. kadar lemak. Cawan tersebut kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang bobotnya (C). kadar protein.3. Prinsipnya adalah pembakaran atau pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi . dengan rumus : 3. kadar abu. dicairkan kemudian ditimbang beratnya selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. dan karbohidrat. Tambelo ditimbang sebanyak 1-2 g (B). Cawan tersebut diletakkan dalam desikator (kurang lebih 30 menit) hingga dingin kemudian ditimbang hingga beratnya konstan (A). Kadar air ditentukan dengan rumus: Keterangan: A = berat cawan kosong (gram) B = berat sampel sebelum dioven (gram) C = berat cawan berisi sampel setelah dioven (gram) b) Analisis kadar abu (AOAC 2005) Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven.

sehingga diperoleh abu berwarna putih. Prosedur analisis kadar abu dalam bahan pangan adalah sebagai berikut: cawan abu porselin yang kosong dimasukkan ke dalam oven. dan titrasi. suhu tungku pengabuan diturunkan hingga suhu 40 oC. Zat anorganik ini disebut abu. Suhu pengabuan diturunkan sampai ± 40 oC lalu dipindahkan cawan abu porselin ke dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang bobotnya (C) segera setelah dingin. Kadar protein dihitung berdasarkan kesetimbangan reaksi kimia. Apabila abu belum putih benar harus dilakukan pengabuan kembali. Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari tiga tahap. destilasi. kemudian cawan abu porselin kosong ditimbang untuk mengetahui bobot cawan kosong (A). Sampel dimasukan dalam kantong plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Cawan porselin dikeluarkan dengan menggunakan penjepit dan masukan ke dalam desikator selama 30 menit. yaitu destruksi.24 air (H2O) dan karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar. Homogenat sampel ditimbang 2 gram pada kertas timbang. kemudian masukan ke dalam oven bersuhu 550-600 oC selama 24 jam atau sampai pengabuan sempurna. kemudian dikeringkan menggunakan hot plate dan diabukan kembali pada suhu 550-600 oC sampai diperoleh berat yang konstan. kemudian dimasukan ke dalam labu . Abu dibasahi (dilembabkan) dengan akuades secara bertahap. Kadar abu dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: A = Berat cawan kosong (gram) B = Berat sampel sebelum pengabuan (gram) C = Berat cawan berisi sample setelah pengabuan (gram) c) Analisis kadar protein (AOAC 2005) Penentuan kadar protein dilakukan dengan metode total nitrogen yang didasarkan pada reaksi penetralan asam basa. Tahapan destruksi adalah sebagai berikut: sampel dilumatkan dengan blender hingga partikelnya dapat melewati saringan 20 mesh. Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang 2 gram dan dimasukan ke dalam cawan abu porselin ditimbang (B). Cawan abu porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit. setelah selesai.

Apabila sampel tidak langsung . Tahap kedua adalah distilasi. Prinsip analisis kadar lemak diawali dengan melakukan pengekstrakan sampel dengan pelarut organik untuk mengeluarkan lemak dengan bantuan pemanasan pada suhu titik didih pelarut selama 8 jam. Labu yang berisi hasil destruksi dipasang pada rangkaian alat destilasi uap. yang sudah dibakukan sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral. Sampel ditambahkan 15 mL asam sulfat pekat (95-97%) dan 3 mL hidrogen peroksida secara perlahan dan didiamkan 10 menit dalam ruang asam. sehingga hasil lemak tertinggal dalam labu. kemudian ditambahkan 50-75 mL larutan natrium hidroksida dan natrium thiosulfat dan dilakukan destilasi. Pelarut organik yang mengikat lemak selanjutnya dipisahkan dengan proses penguapan (evaporasi). Kadar protein dapat dihitung dengan persamaan berikut : Keterangan : KP = Kadar Protein Va = mL HCl untuk titrasi sampel Vb = mL HCl untuk titrasi blanko N = Normalitas HCl yang digunakan W = berat sampel c) Analisis kadar lemak (AOAC 2005). selanjutnya destilat ditampung ke dalam erlenmeyer tersebut hingga volume mencapai minimal 150 mL (hasil destilasi akan berubah menjadi kuning). Penetapan bobot lemak dihitung secara gravimetri. Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukan ke dalam wadah plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Sampel tersebut selanjutnya ditambahkan dua tablet katalis serta beberapa butir batu didih. Sampel hasil destruksi didiamkan hingga mencapai suhu kamar dan tambahkan 50-75 mL akuades. Analisis standar blanko dilakukan seperti tahapan sampel. posedur tahapan ini sebagai berikut: sebanyak 25 mL larutan H3BO3 4% yang mengandung indikator sebagai penampung destilat dimasukan dalam erlenmeyer.25 destruksi.2 N. Destruksi dilakukan pada suhu 410 oC selama 2 jam atau sampai larutan jernih. Tahap ketiga adalah titrasi hasil destilat dengan HCl 0.

26 dianalisis. Begitu pula dengan syringe yang akan digunakan juga harus dibilas dengan akuades. Perangkat HPLC sebelum digunakan harus dibilas dengan eluen yang akan digunakan selama 2-3 jam. Campuran lemak dan heksana dalam labu alas bulat dievaporasi sampai kering. Berturut-turut dimasukan 150 mL n-heksana ke dalam labu alas bulat. maka disimpan dalam refrigerator sampai saatnya akan dianalisis.1. Prosedur analisis asam . lemak dan abu.3. Prosedur analisis lemak adalah sebagai berikut : labu alas bulat ditimbang dalam keadaan kosong (A).( % air + % lemak + % protein + % abu ) 3. selongsong lemak ke dalam ekstractor soxhlet. Labu alas bulat yang berisi lemak dimasukan ke dalam oven bersuhu 105 oC selama ± 2 jam untuk menghilangkan sisa n-heksana dan air. batu didih dan lemak d) Analisis kadar karbohidrat (AOAC 2005) Perhitungan kadar karbohidrat dilakukan menggunakan metode by difference yaitu pengurangan 100 % dengan jumlah dari hasil empat komponen yaitu kadar air. Kadar lemak dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: KL = kadar lemak A = bobot contoh B = bobot labu lemak dan labu didih C = bobot labu lemak. maka dilakukan pengadukan ulangan dengan blender sebelum dilakukan pengamatan.3 Analisis asam amino (AOAC 1994) Komposisi asam amino ditentukan dengan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Homogenat sampel ditimbang sebanyak 2 gram (B) dan masukan ke dalam selongsong lemak (ekstraction timbles). dan pasang rangkaian sokhlet dipasang dengan benar. Sampel dikondisikan pada suhu ruang dan pastikan sampel masih homogen sebelum ditimbang. Ekstraksi dilakukan pada suhu 60 oC selama 8 jam. protein. Apabila terjadi pemisahan cairan dan sampel. Perhitungannya sebagai berikut: % Karbohidrat = 100 % . Labu dan lemak didinginkan dalam desikator selama 30 menit. Labu alas bulat yang berisi lemak ditimbang (C) sampai berat konstan.

Buffer fosfat 0. Kondisi alat HPLC saat berlangsungnya analisis asam amino: Temperatur Jenis kolom : 27 oC (suhu ruang) : pico tag 3. Tahapan analisis asam lemak diawali dengan menghidrolisis lemak/minyak dalam sampel menjadi asam lemak. Identifikasi tiap komponen dilakukan dengan .1. kemudian ditransformasi menjadi bentuk esternya yang bersifat lebih mudah menguap.Asetoniril 60% .27 amino menggunakan HPLC disajikan Gambar 7. Komponen-komponen yang dipisahkan harus mudah menguap pada suhu pemisahan yang dilakukan. Metil ester asam lemak (FAME) ini dianalisis dengan alat kromatografi gas.1 mL) BM = bobot molekul dari masing-masing asam amino (g/mol) 3. sehingga suhu operasi biasanya lebih tinggi dari suhu kamar dan biasanya dilakukan derivatisasi untuk contoh yang sulit menguap.5 μg) FB = faktor pengenceran ( 133.3.9x150 μm Kecepatan alir eluen : 1 ml/menit Tekanan Fasa gerak : 3000 psi : .4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) Kandungan asam lemak dapat ditentukan dengan metode gas kromatografi didasarkan pada partisi komponen-komponen dari suatu cairan di antara fasa gerak berupa gas dan fasa diam berupa zat padat atau cairan yang tidak mudah menguap yang melekat pada bahan pendukung inert.1 M Detektor Panjang gelombang Derivatisasi Tipe injeksi Program : UV : 256 nm : derivatisasi pre-kolom : on column injection tanpa septum : isokratik (kecepatan aliran eluen konstan) Kandungan masing-masing asam amino pada bahan dapat dihitung dengan rumus: Keterangan : C = konsentrasi standar asam amino (2. Transformasi dilakukan dengan cara metilasi sehingga diperoleh metil ester asam lemak (FAME).

. pikoiotisianat.75 g Penambahan 5-10 ml HCl 6N Pemanasan dalam oven pada suhu 100 oC selama 24 jam Hidrolisat Protein Penyaringan dengan milipore berukuran 45 mikron Filtrat hidrolisat Penambahan 30 μL larutan pengering (campuran antara metanol.75 g 0.28 membandingkan waktu retensinya dengan standar pada kondisi analisis yang sama. natrium asetat. dan trietilamin dengan perbandingan 3:3:4) Pengenceran dengan buffer asetat sebanyak 200 μL lalu dibiarkan selama 20 menit Penyaringan dengan milipore berukuran 0.45 mikron Injeksi ke alat HPLC Kromatogram Gambar 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC. dan trietilamim dengan perbandingan 2:2:1) Pengeringan dengan gas N2 Hidrolisat protein kering Penambahan 30 μL larutan derivatisasi ( campuran antara metanol. Tambelo kering 0. Waktu retensi dihitung pada kertas rekorder sebagai jarak dari garis pada saat muncul puncak pelarut sampai ke tengah puncak komponen yang dipertimbangkan.

29

a. Preparasi contohd (hidrolisis dan esterifikasi) Contoh lemak ditimbang sebanyak 20-30 mg, kemudia ditambahkan 1 mL larutan NaOH 0,5 N ke dalam metanol dan dipanaskan dalam penangas air selama 20 menit. Sebanyak 2 mL BF3 16% dan 5 mg/mL standar internal ditambahkan pada sampel tersebut, lalu dipanaskan lagi selama 20 menit dan selanjutnya didinginkan. Sampel kemudian ditambahkan 2 mL NaCl jenuh dan 1 mL n-heksana, lalu dikocok dengan baik. Lapisan heksana dipindahkan dengan

bantuan pipet tetes ke dalam tabung yang berisi 0,1 gram Na2SO4 anhidrat, dibiarkan 15 menit. kromatografi gas. b. Analisis komponen asam lemak dengan kromatografi gas Pelarut sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam kolom. Bila aliran gas pembawa dan sistem pemanasan sempurna, puncak pelarut akan nampak dalam kurang dari 1 menit. Sebanyak 5 µL campuran standar FAME diinjeksikan Fasa cair dipisahkan dan selanjutnya diinjeksikan ke

setelah pena kembali ke nol (baseline). Jika semua puncak sudah keluar, diinjeksikan 5 µL sampel yang telah dipreparasi (A). Waktu retensi dan puncak masing-masing komponen tersebut kemudian diukur. Jika rekorder dilengkapi dengan integrator, waktu retensi dan luas puncak langsung diperoleh dari integrator dan membandingkan waktu retensinya dengan standar untuk mendapatkan informasi mengenai jenis dari komponen-komponen dalam contoh. Jumlah dari masing-masing komponen dalam sampel dihitung menggunakan metode internal standar, dengan cara sebagai berikut :

Keterangan :
Cx Cs Ax As R = = = = = kosentrasi komponen x kosentrasi standar internal luas puncak komponen x luas puncak standar internal respon detektor terhadap komponen x relatif terhadap standar

30

Kondisi alat kromatografi gas pada saat dilakukan analisis : 1. Kolom 2. Dimensi kolom 3. Laju alir n2 4. Laju alir h2 5. Laju alir udara 6. Suhu injektor 7. Suhu detektor 8. Suhu kolom - Kolom temperatur : cyanopropil methylsil (kolom kapiler) : p=60m,ø dalam = 0.25 mm, 025 µm film tickness : 20 ml/menit : 30 ml/menit : 200 – 250 ml/menit : 200 oc : 230 oc : program temperatur : awal 190 oC diam 15 menit akhir 230 oC diam 20 menit 9. Ratio 10. Injeksi volum 11. Linier velocity 3.3.1.5 Analisis mineral Mineral yang dianalisis pada sampel tambelo meliputi mineral kalsium (Ca), kalium (K), magnesium (Mg), besi, (Fe), natrium (Na), mangan (Mn), klorida (Cl), seng (Zn), fospat, dan tembaga (Cu), dianalisis dengan metode spektrofotometer serapan atom (SSA). a. Analisis mineral kalsium (Ca), kalium (K), dan seng (Zn) (Yosida et al. 1972). Prinsip penentuan kadar kalsium, kalium dan seng adalah proses pelarutan sampel dengan asam klorida, kemudian absorbansinya diukur dengan : 1:8 : 1 µl : 20 cm.sec

menggunakan SSA. sebagai berikut:

Prosedur analisis mineral kalsium, kalium dan seng adalah

Sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram,

kemudian dihancurkan dan dimasukkan ke dalam gelas piala yang telah dibilas dengan HCl 1 N. Sampel ditambahkan dengan 25 mL HCl 1 N dan disimpan selama 24 jam. Setelah penyimpanan, sampel dikocok dengan shaker dan

disaring dengan kertas Whatman No.1. 1). Analisis mineral kalsium (Ca) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 1 mL, ditambahkan 2 mL larutan lantanum oksida dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 10 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL.

31

Larutan diukur absorbansi dengan SSA pada panjang gelombang 285,2 nm untuk magnesium dan 422,7 nm untuk kalsium. 2). Analisis mineral kalium (K) dan seng (Zn) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 2 mL dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 40 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL. Larutan diukur absorbansi dengan AAS pada panjang gelombang 766,5 nm untuk kalium dan 213,9 nm untuk seng. b. Analisis mineral besi (Fe) Prinsip penentuan kadar besi adalah proses pelarutan bahan dengan larutan asam campur yang terdiri dari asam nitrat, asam sulfat dan asam perklorat, kemudian dilanjutkan dengan proses pemanasan. Prosedur analisis mineral besi adalah sebagai berikut: sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram, kemudian dihancurkan. HNO3, H2SO4, Larutan asam campuran disiapkan yang dibuat dari Sampel yang telah

dan HClO4 dengan perbandingan 5:1:2.

hancur ditambah 10 mL larutan asam campur lalu dipanaskan di dalam ruang asam menggunakan api kecil selama 2 jam. Api dibesarkan sampai larutan

menjadi jernih. Kemudian didinginkan. Larutan ditambahkan akuades sampai volume 50 mL dan disaring dengan kertas saring pencucian asam Whatman No.1 (acid-washed filter paper whatman No.1). Sebanyak 10 mL ekstrak sampel ditambahkan 1 mL hidroquinon dan 1 mL orto-fenantrolin, kemudian ditambahkan sodium sitrat sampai pH menjadi 3,5. Larutan diencerkan dengan akuades sampai volume 50 mL dan dipanaskan dalam water bath selama 1 jam. Larutan deret standar diperlakukan dengan pereaksi yang sama dengan ekstrak sampel. Absorbansi diukur dengan SSA pada panjang gelombang 248,3 nm. c. Analisis mineral tembaga (Cu) dan mangan (Mn) (SNI 01-2362-1991) Prinsip dari penentuan kadar tembaga dan mangan adalah proses pengabuan dengan suhu 450 oC dengan penambahan asam nitrat (HNO3). Prosedur analisis sebagai berikut: sampel ditimbang sebanyak 25 gram dalam gelas piala 250 mL yang terdahulu dicuci dengan HNO3 6N. Sampel dikeringkan di dalam oven pengering pada suhu 110-125 oC selama 8-24 jam. Sample kering kemudian dipindahkan ke dalam tungku, dan atur suhu pada 250 oC. Suhu tunggu

42 yang sebelumnya telah dicuci dengan HNO3 10% dan akuades. .32 dinaikkan secara bertahap hingga mencapai 350 oC selama periode 1-2 jam. kemudian filtrat yang dihasilkan digabungkan dan dipekat dengan menggunakan rotary evaporator.25-1 mL HNO3 pekat. Sampel kemudian dipanaskan kembali pada suhu 450 oC di dalam tungku selama 30-60 menit. Sampel kering ditimbang sebanyak 500 gram. serta uji fraksinasi dan identifikasi senyawa antioksidan. Sampel tersebut kemudian ditambahkan 0. Kondisi pada suhu ini dibiarkan sesaat untuk memberikan kesempatan sebagian besar lemak terbakar habis. Larutan standar. yaitu heksana (non polar). Ekstrak MeOH pekat dipartisi dengan n-heksana menggunakan corong pisah diulang sebanyak 3 kali. Kenaikkan suhu kemudian dilanjutkan hingga 450 oC.1 Ekstraksi bahan aktif Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi tambelo yaitu tiga macam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya. maserasi. blanko dan contoh dialirkan ke dalam SSA. partisi.3. Abu yang dihasilkan harus benar-benar putih. Setiap 1 x 24 jam dilakukan penyaringan. Abu dilarutkan ke dalam 2 mL HNO3 pekat. 3.2. Absorbansi mineral Cu dan Mn masing-masing diukur dengan SSA pada panjang gelombang 324. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya proses pembakaran secara cepat yang menyebabkan contoh dapat terhambur keluar. etil asetat (semi polar).2 Penelitian tahap kedua Penelitian yang dilakukan pada penelitian tahap kedua adalah ekstraksi bahan aktif. kemudian diencerkan dengan akuades hingga 25 mL dan didihkan di atas hot plate. Sampel diletakkan diatas hot plate untuk menguapkan HNO3. Jika proses sampel abu belum putih sempurna. 3. dan metanol (polar). perbandingan 1:5 pada suhu ruang selama 3x24 jam. Tahapan proses ekstraksi tambelo meliputi penghancuran sampel. uji fitokimia.7 nm dan Mn 285. dan evaporasi. apabila tidak proses penambahan asam nitrat harus diulangi. kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol (MeOH) sebanyak 2500 mL. uji aktivitas antioksidan. dan dibiarkan selama semalam (16-24 jam).2 nm. Larutan disaring dengan kertas saring Whatman No.3. sampel dikeluarkan dari tungku dan dinginkan. Filtrat yang diperoleh kemudian diencerkan dengan akuades hingga 50 mL.

rendemen. 2008). lalu dihitung Ekstrak metanol sisa partisi dipekatkan kembali dan dihitung Semua ekstrak diuji fitokimia dan uji antioksidan (Miyaoka et al. rendemennya. Diagram alir proses ekstraksi bahan Sampel (500 g) Maserasi 3x24 jam dengan MeOH perbandingan 1:5 Penyaringan Filtrat Evaporasi Ekstrak MeOH Dipartisi dengan n-Heksana Residu Fase n-heksana Evaporasi Fase MeOH Dipartisi dengan etil asetat Fase etil asetat Ekstrak n-Heksana Evaporasi Fase MeOH Evaporasi Ekstrak etil asetat Ekstrak MeOH Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al. Ekstrak MeOH setelah partisi n-heksana dipartisi kembali dengan etil asetat. .33 Fase n-heksana dikumpulkan dan dipekatkan dan dihitung rendemennya. aktif tambelo disajikan pada Gambar 8. Ebada et al. Fase etil asetat dikumpulkan dan dipekatkan. 2008). 1998. diulang sebanyak 3 kali.

adanya flavonoid ditunjukkan oleh terbentuknya warna merah akibat penambahan H2SO4. Terbentuknya warna hijau atau hijau biru menunjukkan adanya senyawa fenol dalam bahan. selanjutnya diamati warna yang terbentuk. b) Uji saponin Sebanyak 50 mg sampel ditambah dietil eter. f) Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl3) Sebanyak 1 g sampel diekstrak dengan 20 ml etanol 70%. biru atau ungu. e) Uji Tanin Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan dalam 5 ml etanol ditambah dengan beberapa tetes pereaksi FeCl3 1 %. Residu yang tidak larut dalam dietil eter diambil. Meyer. Fraksi asam diambil kemudian ditambahkan pereaksi Dragendrof.2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995) a) Uji alkaloid Sampel sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan 10 mL metanol dan beberapa tetes amoniak. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5%. Filtratnya diuapkan kemudian ditambahkan eter. jika terbentuk warna hijau adalah steroid dan warna merah adalah triterpenoid.3. Fraksi metanol dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2M. . d) Uji Flavonoid Sebanyak 1 gram sampel ditambah metanol 30% sampai terendam kemudian dipanaskan. Lapisan eter yang terbentuk dipipet dan diletakkan papan uji (spot plate) dengan menambahkan pereaksi Liebermen Buchard (3 tetes asam asetat anhidrin dan 1 tetes H2SO4 pekat). Adanya tannin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau. dan Wagner. Filtratnya ditaruh ke dalam spot plate (papan uji) kemudian ditambahkan H2SO4 pekat. c) Uji steroid/Triterpenoid Sampel sebanyak 1 gram ditambahkan 25 mL etanol 30% dipanaskan (50 oC) dan disaring. dipisahkan dan ditambahkan 5 ml air kemudian dikocok sampai timbul busa yang stabil.2.34 3.

Nilai absorbansi sampel diperoleh persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi. dan untuk pembanding dengan masing-masing kosentrasi 4. dan 80 ppm). Hambatan dihitung dengan rumus. 8. Prinsip kerjanya pada sampel (mengandung senyawa bersifat antioksidan) yang dapat meredam radikal bebas DPPH. Serapan sampel tersebut diukur pada panjang gelombang 515 nm. 3. Persamaan ini digunakan untuk mencari Inhibition Concentration 50 % (IC50) dengan memasukkan angka 50 sebagai y sehingga didapatkan nilai x sebagai IC50. Metode yang digunakan ada dua macam. a) Kromatografi lapis tipis (KLT) Pada penelitian ini. 40.3. Butylated hydroxytoluene (BHT) dan vitamin super ester C digunakan sebagai kontrol positif. Pengujian ini dilakukan sebanyak tiga kali ulangan.4 Fraksinasi senyawa antioksidan Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (ekstrak terpilih). 6.3. Persamaan regresi diperoleh dari hubungan antara kosentrasi sampel dan persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. Uji ini dilakukan terhadap ekstrak tambelo. Persamaan regresi yang diperoleh dalam bentuk y = bx + a.2. Nilai kosentrasi dan hambatan ekstrak diplotkan masing-masing pada sumbu x dan y.1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl) (Yeh dan Cen 1995). Ekstrak tersebut masing-masing ditambahkan 200 μl larutan DPPH 1mM dalam metanol.3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995) Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode perendaman radikal bebas DPPH (1. pemilihan pelarut untuk fraksinasi dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada . yaitu kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kolom (KK).35 3. kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit. Volume dicukupkan sampai 5 mL.2. Ekstrak dilarutkan dalam metanol dan dibuat dalam berbagai konsentrasi ( 20. 60. dan 10 ppm.

bagian atas kolom ditutup . untuk memilih eluen terbaik dicoba dengan berbagai eluen n-heksana. b) Kromatografi kolom (KK) (Gritter et al. Ekstrak terpilih sebanyak 0. dan metanol. Pada proses penjenuhan. Pencucian kolom dilakukan dan pembuatan larutan silika gel (silika gel G40-63) yang akan dimasukkan ke dalam kolom sebelum ekstrak dimasukkan ke dalam kolom. pelarut heksan : etil asetat dengan perbandingan 1:1 mL dan pelarut kloroform : metanol dengan perbandingan 17:3 mL. Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT dapat disajikan pada Gambar 9. lalu dilakukan penjenuhan silika gel dalam kolom selama 30-60 menit. Semua larutan silika gel masuk ke dalam kolom. Ekstrak aktif KLT (silika gel) CHCl3:MeOH 9:1ml CHCl3:MeOH Heksan:EtOH 1:1ml 17:3 ml Heksan:EtOH 8:2ml Heksan :CHCl3 3:2 ml terbentuknya spot terbanyak Gambar 9 Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT. Kolom diberi glasswool pada bagian bawahnya. pelarut heksan:etil asetat dengan perbandingan 8:2 dan n-heksana:kloroform (3:2).5 mL pelarutnya. Larutan ekstrak tersebut kemudian ditotolkan pada plat silika gel 60 F254 dengan panjang l0 cm. Diagram alir fraksinasi dengan metode kromatografi kolom dapat dilihat pada Gambar 10. Kombinasi yang digunakan adalah pelarut kloroform:metanol dengan perbandingan 9:1 mL.36 kromatografi lapis tipis (KLT). kloroform. Kombinasi pelarut yang menghasilkan pengembangan spot terbaik digunakan sebagai eluen untuk memfraksinasi ekstrak terpilih dengan kromatografi lapis tipis maupun kromatografi kolom. etil asetat. Silika gel sebanyak 13-15 gram dilarutkan pada eluenn kloroform : metanol = 9:1 sehingga diperoleh larutan silika gel. l99l) Pelaksanaan kromatografi kolom dilakukan dengan memasang kolom pada statif secara tegak lurus.02 gram dilarutkan dalam 0.

Ekstrak dibiarkan mengalir ke bagian penjerap kolom dan kolom terus diisi agar silika gel tidak kering. serta diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH (Yeh dan Cen 1995). Ekstrak yang akan difraksinasi adalah ekstrak terpilih sebesar 1 gram dan dilarutkan pada pelarut asal sebanyak 3 mL. Larutan dalam tabung reaksi kemudian dikeringkan untuk menghasilkan residu ekstrak. Larutan yang keluar dari kolom ditampung pada tabung reaksi dengan masing-masing tabung reaksi berisi ± 3 mL.37 dengan aluminium foil untuk mencegah penguapan eluen yang terdapat dalam kolom sehingga silika gel tetap dalam kondisi basah. dan setiap fraksi penggabungan yang terbentuk dikeringkan dengan aerator di ruang asam. Fraksi hasil kromatografi Kolom (KK) dilakukan pengujian KLT untuk penggabungan fraksi dengan mengacu pada kesamaan pola kromatogram. . Larutan silica gel + eluen 1: 1 (w/v) Larutan silika gel dimasukkan ke dalam kolom Pembuatan larutan ekstrak terpilih 1 g ekstrak terpilih + 3 ml eluen Dijenuhkan selama 30-60 menit Eluen dikeluarkan (silica gel tidak boleh kering) Larutan ektrak terpilih dimasukkan ke dalam kolom Kran dibuka Kolom terus dialiri eluen Larutan ditampung pada tabung reaksi (±10 ml) Ekstrak aktif Gambar 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom. Silika gel harus jenuh sebelum ekstrak dimasukkan dan setelah silika gel jenuh maka kran kolom dibagian bawah kolom dibuka kembali setelah semua ekstrak masuk ke dalam kolom. dihitung rendamennya.

3. yaitu memilih senyawa yang memiliki puncak tinggi.2. kemudian dicocokkan dengan senyawa yang ada pada database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). Analisis yang dilakukan pada tahap identifikasi senyawa aktif.5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al. 1988) Fraksi terpilih dengan nilai aktivitas antioksidan yang tertinggi dilanjutkan dengan mengidentifikasi senyawa antioksidan menggunakan Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) Agilent Technologies dilakukan untuk mendapatkan bobot molekul dan rumus molekul yang sangat membantu dalam elusidasi struktur molekul.38 3. .

1.1.04 2. Kandungan proksimat daging tambelo dapat dilihat pada Tabel 3.73 % 4.1 Penelitian Tahap Pertama 4. Hal ini juga menunjukkan bahwa organisme perairan termasuk tambelo dan ikan ini memiliki kandungan air yang tinggi sehingga diperlukan penanganan yang bagus untuk mengurangi kerusakan pada bahan beku. Kadar air .88 30.07±0.01 56. Tabel 2 Rendemen daging tambelo Sampel Tambelo utuh Daging tambelo Berat segar 2200 gram 40.8 42.72±0.45±2.01 7.72±0.21±0.28±0. dan karbohidrat.62 b Temilok 73. Tabel 3 Kandungan proksimat daging tambelo Proksimat (%) Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Segar Tambelo 82.00% dan setelah dikeringkan rendemen berubah menjadi semakin kecil yang disebabkan banyaknya kandungan air yang menguap.60 1.63±0.88±1. protein.4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4. air akan tersublimasi dan bahan yang tidak tersublimasi berubah menjadi padat atau kering.29 4.22 5.04 7.31 0.08 14.83 21 Sumber : a Syaputra (2007) .1 Rendemen daging tambelo Hasil pengukuran rendemen daging tambelo pada Tabel 2 menunjukkan bahwa tambelo segar setelah preparasi 40. Waranmaselembun (2007) Kadar air merupakan jumlah air yang terkandung di dalam bahan pangan dan ikut menentukan kesegaran dan daya awet bahan pangan tersebut.2 Kandungan proksimat tambelo Hasil analisis proksimat dari daging segar tambelo dan serbuk kering tambelo. abu.01 7. Penurunan rendemen tambelo disebabkan penguapan kandungan air akibat bahan mengalami tekanan vakum yang sangat tinggi setelah dibekukan. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi nilai ekonomisnya sehingga lebih efektif. meliputi kadar air.77±2.27±0.04 4.73%.02 a Kering Tambelo Kerang mas ngur b 6.95 5.27 7. Jumlah rendemen setelah dikeringkan sebesar 22. lemak.00 % Berat kering 22.05 17.

. kadar air tambelo kering menjadi 6. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Syahputra (2007) yang menunjukkan bahwa kadar air temilok segar sebesar 73.63%. Hasil analisis proksimat kadar air tambelo segar adalah 82. sedangkan kadar air tambelo setelah dikeringkan sebesar 6. mempertahankan netralitas tubuh. hemoglobin. protein berfungsi sebagai zat pembangun tubuh dan zat pengatur di dalam tubuh.40 yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri. Protein dalam plasma (serum) darah dapat juga berfungsi sebagai antioksidan (Mucthadi 2009). Protein merupakan zat gizi yang sangat penting bagi tubuh.77%. dan transpor zat gizi dalam tubuh. bahan pengumpal darah). kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada bahan pangan yang dapat mempercepat pembusukkan (Winarno 1997). enzim.60%. sedangkan kadar protein tambelo kering sebesar 42.63%. Hal ini karena air yang terdapat pada tambelo segar tersublimasi akibat adanya tekanan vakum. Fungsi utama protein bagi tubuh adalah untuk pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan. Kadar air yang bahan untuk ekstraksi diisyaratkan sebesar 11%. sehingga tambelo segar menjadi kering. karena selain sebagai sumber energi. Plankton diketahui sebagai sumber protein sekaligus simbion dalam sistem pencernaan pada tambelo. regulasi keseimbangan air dalam tubuh.31%. Kadar air tambelo kering pada hasil penelitian ini memiliki kadar air dibawah kadar air maksimum yang diisyaratkan untuk proses ekstraksi. setelah mengalami pengeringan dengan freeze dry. Hal ini menunjukkan bahwa sampel kering memiliki kadar air yang cukup baik untuk dilakukan proses ekstraksi karena semakin rendah nilai kadar air bahan maka semakin memudahkan pelarut untuk mengekstrak komponen senyawa aktif yang diinginkan. pembentukan senyawa esensial (hormon. pembentukan antibodi dan proses detoksifikasi. Hasil perhitungan nilai rata-rata proksimat dapat dilihat pada Lampiran 1.72%. Kadar protein pada tambelo segar adalah 7. Hal ini bertujuan agar proses ekstraksi dapat berjalan lancar (Setyowati 2009). Kandungan protein pada tambelo kering berasal dari plankton yang merupakan salah satu makanan bagi tambelo.

88% lebih kecil dari kerang mas ngur 7. Abu adalah zat anorganik.41 Hasil analisis kadar lemak dari tambelo segar adalah 0. Peranan lemak dalam bahan pangan yang utama adalah sebagai sumber energi.26%.1997). Ikan menyimpan cadangan energi dalam bentuk lemak di dalam hatinya (lebih dari 50% berat hatinya). karena itulah disebut abu. Elemen-elemen mineral telah jelas diketahui fungsinya pada makanan ternak. lebih kecil dari temilok 4. Karbohidrat merupakan bagian terbesar dari senyawa organik.05% dan kandungan abu pada tambelo kering 5. belum banyak penelitian sejenis dilakukan pada manusia. yaitu sekitar 96% terdiri dari bahan organik dan air. Unsur mineral juga dikenal sebagai zat organik atau kadar abu. bahan-bahan organik terbakar tetapi zat anorganiknya tidak.unsur mineral. sedangkan kadar lemak pada tambelo kering sebesar 14. Peranan berbagai unsur mineral bagi manusia masih belum sepenuhnya diketahui (Winarno.29%). Pada proses pembakaran.28%. Berdasarkan hasil analisis proksimat pada tambelo kering memiliki karbohidrat yang relatif lebih tinggi . dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL (Muchtadi 2009). hal ini disebabkan karbohidrat merupakan bahan pembentukan tumbuh-tumbuhan dan juga terdapat pada hewan dalam jumlah tertentu. Tabel 3 menunjukkan bahwa kandungan abu dalam tambelo segar 2. sisanya terdiri dari unsur. Lemak merupakan sumber yang dapat menyediakan energi sekitar 2. jika dibandingkan dengan literatur yang ada maka nilai hasil analisis memiliki nilai yang tidak jauh berbeda. Sebagian besar bahan makanan. sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. Lemak adalah bentuk energi berlebih yang disimpan oleh hewan sehingga jumlah lemak dalam hewan yang dijadikan bahan pangan ditentukan oleh keseimbangan energi hewan tersebut. kadar lemak tambelo lebih rendah dibandingkan dengan kadar lemak temilok segar (4.25 kali lebih banyak daripada yang diberikan oleh karbohidrat atau protein.07%. yang terkenal dengan sebutan asam lemak omega 3.88%. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Syahputra (2007). Hal ini terutama karena peranan asam lemak eikosapentaenoat (EPA) dan dokosaheksaenoat (DHA). Peranan lemak ikan dalam mencegah timbulnya penyakit jantung koroner telah dibuktikan.

sedangkan asam amino isoleusin yang terendah (0.72 1.25 0. sebaliknya protein yang kurang satu atau lebih asam-asam amino esensial mempunyai mutu yang rendah (Winarno 2008).74 1. Hal ini diperkuat oleh Purchon (1968) yang mengatakan bahwa sistem pencernaan yang dimiliki oleh shipworm atau tambelo mampu mencerna selulosa 80% dan lignin 45 dan pada umumnya kerang-kerangan menyimpan hasil pencernaannya dalam bentuk glikogen (gula otot) dan lemak. sedangkan kromatogram standar asam amino dapat dilihat pada Lampiran 3 dan kromatogram asam amino tambelo pada lampiran 4.81 1. Asam amino merupakan monomolekul dari protein yang memiliki fungsi penting bagi organisme hidup.44%.01 Jenis Asam Amino Gambar 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo.26 0.34 0.37 0.00 3.41 1.50 2. . 4.80 1.00 3. Kandungan asam amino dari tambelo disajikan dalam Gambar 10.1.50 3.55%).50 0.34%).41 0.29 1.63 1.50 1. Hal ini diduga bahwa tambelo menyimpan hasil pencernaan dalam bentuk glikogen. Kadar Asam Amino (%) 4.00 2. Pada prinsipnya suatu protein yang dapat menyediakan asam amino esensial dalam suatu perbandingan yang dapat menyamai kebutuhan manusia dikatakan mempunyai mutu yang tinggi. Jenis asam amino yang tertinggi dalam tambelo adalah asam glutamat (3.55 2. karena sebagian besar juga makanan yang diperolehnya berasal dari kayu bakau sehingga sistem pencernaannya dapat memanfaatkan selulosa dan lignin pada kayu bakau.85 1.3 Kandungan asam amino tambelo Mutu protein dinilai dari perbandingan asam-asam amino yang terkandung di dalam protein tersebut.42 30.00 0.00 1. Tambelo mengandung 17 jenis asam amino.56 1.19 0.

dan asam amino hidrofobik. glutamat yang berasal dari makanan merupakan sumber energi utama bagi usus. Kajian-kajian menggunakan isotop-isotop stabil menunjukkan bahwa usus mendapatkan sebagian besar energi . Menurut the international glutamate information service (IGIS).72 0.43 AAHb 1.80 1. AAHb = asam amino hidrofobik. asam amino basa.63 1.01 1.63 1.43 Kandungan asam amino yang terdapat di dalam tambelo diklasifikasikan menjadi sembilan jenis asam amino yang terdiri dari asam amino esensial. dapat disajikan pada Tabel 4. meningkatkan kesehatan mental dan meredam depresi (Linder 1992).68 AANE = asam amino non esensial.42 61.85 3.85 2.56 1. AAB = asam amino basa.84 20.01 0. mempercepat penyembuhan luka pada usus. Asam glutamat adalah asam amino non esensial yang dapat disintesis dari gugus amida pada molekul glutamin yang diubah menjadi karboksilat melalui proses hidrolisis asam atau basa.19 1.26 1.56 0. asam amino hidrofilik.41 0. asam amino aromatik.81 1.61 2. AAHi = asam amino hidrofilik. asam amio netral.55 3. Asam glutamat bermanfaat untuk menahan konsumsi alkohol berlebih.29 1. AAN = asam amino netral.80 1.64 1.29 0.56 0.52 66.25 1.74 1. AAA = asam amino asam.20 28. asam amino sulfur.80 1.55 3.56 14.44 8.81 1.63 0.01 1.74 40.72 0. asam amino non esensial. AAS = Asam amino sulfur.85 2.97 13.72 0.26 1.62 9.41 1.19 1.74 1.91 0.72 0. AAR= asam amino aromatik.4 4.74 1.29 0.25 1.19 5.34 1. asam amino asam. AAE = asam amino esensial.56 0.82 43.26 1.25 1.19 1.92 26.55 1.81 8. Tabel 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia dari tambelo Jenis asam amino Aspartat Glutamat Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein Histidin Treonin Ariginin Valin Metionin Isoleusin Leusin Fenilalanin Lisin TOTAL % dalam total asam amino Klasifikasi asam amino (% berat protein) AAE AANE AAA AAB AAN AAR AAS AAHi 2.37 1.58 6.

phenilalanin. menginaktifkan radikal bebas. dan juga merupakan salah satu amino yang .44 dari metabolisme asam amino. glisin. Glutathion merupakan pelindung otak dan hati dari kerusakan akibat obat atau racun. alkohol dan unsur-unsur lain yang dapat membahayakan tubuh. sistin. Sistin merupakan penghasil taurin yaitu suatu komponen gliutathion. Sistin juga diperlukan untuk kesehatan kulit. Metionin juga merupakan prekusor sistin yang merupakan asam amino penghasil glutathion untuk detoksifikasi di hati. valin. sistin digunakan untuk memperoduksi hati dan mencegah atau meredakan penyakit yang berbahaya (Cat 2000). Secara medis. Keterkaitan dengan pengunaan tambelo sebagai obat tradisional maka ditinjau dari komposisi asam amino yang diperoleh dapat dijelaskan bahwa umumnya asam-asam amino ini mempunyai kegunaan besar bagi kesehatan manusia. prolin. asam glutamat. baik secara langsung maupun tidak langsung di antaranya adalah metionin. Asam-asam amino hasil pemecahan protein sebelum ditransportasikan ke hati terlebih dahulu diabsorbsi melalui sel-sel mukosa usus dan selanjutnya di serap oleh vena untuk kemudian ditranspor ke hati. alanin. suatu molekul antioksidan yang memainkan peranan penting dalam mekanisme daya tahan tubuh serta perbaikan kerusakan sel dan jaringan tubuh. dan treonin. Metionin merupakan suatu antioksidan yang baik karena dapat mensuplai belerang. usus mempunyai kontak terbesar dengan lingkungan eksternal dalam bentuk makanan. leusin. histidin. isoleusin. lisin. asam aspartat. Usus sangat membutuhkan glutamat. dan membantu meningkatkan daya ingat. detoksifikasi dari tubuh (dalam kaitannya dengan sulfur) serta penghasil kolagen yang digunakan untuk kekenyalan kulit dan tekstur. Usus merupakan garis pertahanan pertama tubuh karena dari semua organ pencernaan. Glutamat yang berasal dari makanan diperlukan bersama dengan sistin dan glisin untuk produksi glutathion. Glutamat bersama dengan glutamin merupakan asam amino yang paling berlimpah dari 20 jenis asam amino yang mencapai 20 persen dari asam-asam amino pada usus (the international glutamate information service). dan telah diperlihatkan bahwa semua glutamat yang dimakan dari bahan makanan hanya 4 % yang keluar dari tubuh. Beberapa asam amino ini secara umum mempunyai kegunaan besar untuk kesehatan manusia.

tulang dan otot serta membantu dalam penyembuhan luka. Secara medis. membantu dalam metabolisme gula dan asam organi. lemah. Alanin merupakan sebuah sumber penting energi untuk jaringan otot. pertumbuhan yang lambat. Valin bermanfaat dalam pertumbuhan dan perbaikan jaringan otot serta menjaga keseimbangan nitrogen dan mengatur penggunaan glukosa. membuat pencernaan menjadi lebih baik. Penambahan valin harus selalu dikombinasikan dengan isoleusin dan leusin pada rasio miligram (Bonderud 2011). menurunkan kadar gula darah. Metionin juga dapat berperan dalam menstabilkan lemak. mengatur gula darah. histidin digunakan dalam mengobati radang sendi dan ketulian saraf. Leusin bermanfaat dalam pengaturan gula darah. radang sendi. membantu proses pemulihan. Isoleusin bermanfaat dalam mempercepat penyembuhan luka. mengatur energi. luka mengkerut. Histidin merupakan suatu prekusor asam amino non esensial. dan sebagai antioksidan. meningkatkan daya tahan tubuh. Histidin di dalam tubuh diperlukan untuk pertumbuhan dan perbaikan dari semua jenis jaringan. dan edema. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. Kekurangan metionin dapat menyebabkan akumulasi lemak di hati. Histidin berperan penting dalam pemeliharaan dan pembuatan glial sel saraf yang disebut oligo-dendrocytes (selendang atau pembungkus) dan mencegah kerusakan otak dan jaringan saraf dalam tulang punggung. dan penyakit hati atau liver (Cat 2006). Leusin bermanfaat . otak dan sistem saraf pusat. Secara medis. Valin merupakan salah satu dari tiga asam amino rantai cabang (yang lain adalah leusin dan isoleusin) yang meningkatkan energi. yaitu suatu campuran yang penting untuk menghasilkan energi dan pertumbuhan otot dan pergerakan tubuh. memperkuat sistem kekebalan tubuh dengan memproduksi antibodi. dan membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). yang mana histidin akan membentuk sistem imun sebagai respon terhadap suatu reaksi alergi. dan membantu dalam pembentukan hemoglobin serta merupakan pertahanan utama tubuh untuk melawan infeksi akibat luka. dan meningkatkan produksi hormon pertumbuhan. metionin digunakan untuk gangguan depresi. memperbaiki jaringan otot.45 diperlukan untuk pembuatan creatine monohydrate di dalam tubuh.

enzim. dan manfaatnya untuk cardiovascular meliputi pemeliharaan kesehatan pembuluh darah. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. Kekurangan lisin akan menyebabkan kekacauan enzim. Lisin digunakan di dalam tubuh kerusakan hati dan pertumbuhan terhambat. Lisin juga diperlukan dalam membentuk antibody. kehilangan energi. dan karbohidrat. menghambat pertumbuhan sel tumor dan kanker serta membantu pelepasan hormon pertumbuhan (Supamas 2011). seperti sakit liver membutuhkan makanan yang tinggi protein dan karbohidrat serta lemak dengan kadar yang sedang karena hal ini akan meringankan kerja hati untuk memperoleh energi yang besar untuk aktivitasnya (Carroli et al. Lisin juga bermanfaat dalam menjaga keseimbangan nitrogen serta membantu menjaga badan pada saat stress berat dan kondisi yang melelahkan. meningkatkan sistem imun. hormon insulin). Fenilalanin secara medis digunakan untuk perawatan radang sendi dan depresi. Kekurangan phenilalanin akan menyebabkan tubuh lemah. testosteron. tidak berselera dan hilang kosentrasi (Cat 2006). Kekurangan treonin akan menyebabkan warna kulit menjadi tidak normal. Penderita gangguan hati. membantu dalam penyembuhan luka. Treonin bermanfaat dalam mencegah penumpukan lemak di hati. Hati mempunyai fungsi untuk melakukan metabolisme protein. lesu. kolagen dan untuk memperbaiki jaringan yang rusak dan juga membantu dalam membangun protein otot yang baru. lemak. Arginin penting untuk kesehatan reproduksi pria karena 80% cairan semen terdiri dari arginin. Arginin berperan dalam membantu detoksiifikasi hati pada sirosis hati dan fatty liver.46 dalam pengaturan gula darah. Tabel 5 menunjukkan skor kimia asam amino esensial tambelo dengan cara melakukan perbandingan antara asam amino protein esensial tambelo dengan . kerontokan rambut. untuk penyerapan kalsium serta pembentukan tulang dan pertumbuhan otot seperti mobilisasi lemak untuk digunakan sebagai energi. mengatur energi serta membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). hormone (GH. tulang dan otot . berat badan menurun. 2006). Apabila fungsi hati terganggu maka akan berdampak pada terganggunya proses metabolisme tersebut. membantu kerja hati dan fungsi lipotropiknya.

87% dengan asam amino pembatas yang utama berada pada isoleusin. Asam palmitoleat adalah salah satu jenis .63 60. Hal ini berarti bahwa protein yang terkadung dalam tambelo dapat dimanfaatkan oleh tubuh hanya sekitar 19. Komposisi asam lemak dalam tambelo dapat dilihat pada Tabel 6. yang terdiri dari 7 jenis asam lemak jenuh (SFA).33 8.22 21. 5 jenis asam lemak tidak jenuh tunggal atau monounsaturated fatty acid (MUFA) dan 3 jenis asam lemak jenuh ganda atau polyunsaturated fatty acid (PUFA).87% dan 21.87%.41 37. baik yang berasal dari hewan atau tumbuhan. Kromatogram standar asam lemak disajikan pada Lampiran 5.95 29.87 41.55 %).16 Referesi FAO (1991) (mg/g prot) 40 70 55 35 60 40 50 Skor kimia amino esensial (%) 19. Berdasarkan analisis kualitatif.65 30.47 referensi dari FAO/WHO (1991). sehingga asam amino esensial perlu difortifikasi untuk meningkatkan nilai gizi protein tambelo.63% sehingga diperoleh skor kimia protein tambelo sebesar 19.1. Jenis asam lemak yang banyak terkandung di dalam serbuk tambelo adalah asam palmitoleat (C16:1) (14.75 76.32 Isoleusin Leusin Lisin Metionin Fenilalanin + tirosin Treonin Valin Keterangan : tritofan bukan asam amino pembatas sehingga tidak dilakukan analisis 4. diketahui bahwa angka terendah ditunjukkan oleh asam amino isoleusin dan treonin masingmasing sebesar 19. keragaman asam lemak pada serbuk tambelo dapat teridentifikasi 15 jenis asam lemak.32 13. sedangkan kromatogram asam lemak daging tambelo disajikan pada Lampiran 6.09 22.4 Kandungan asam lemak tambelo Asam lemak adalah asam organik yang terdapat sebagai ester trigliserida atau lemak. Berdasarkan hasil pengamatan.94 37. Tabel 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo Asam amino Kadar dalam tambelo (mg/g prot) 7.23 42. Analisis asam lemak dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas untuk mengetahui komposisi asam lemak yang terdapat pada tambelo.

Asam lemak tak jenuh tunggal secara umum memiliki efek yang menguntungkan terhadap kadar kolesterol dalam darah. minyak kacang tanah.66 3.10 13. Tabel 6 Komposisi asam lemak dalam tambelo No Asam Lemak Jenuh 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Miristat (C14:0) Pentadekanoat (C15:0) Palmitat (C16:0) Heptadekanoat (C17:0) Stearat (C18:0) Arakidat (C20:0) Heneikosanoat acid (C21:0) Miristoleat (C14:1) Palmitoleat (C16:1) Cis-10-Heptadekanoat (C17:1) Oleat (C18:1ω9) Linolenat (C18:3ω3) Cis-8.29 Asam lemak Hasil (%berat minyak) Asam Lemak Tak Jenuh Asam oleat (omega-9) yang terkandung di dalam tambelo kering sebesar 1.80 0. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. Asam lemak ini tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA).48 asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) yang merupakan jenis asam lemak yang memiliki satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya. asam lemak tak jenuh tak tunggal (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi popular (Achadi 2010).13 0.13 0.14-Eikosatrienoat (C20:3ω6) EPA (C20:4ω3) Arakidonat (20:4ω6) 5.33 14. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun.22 0.94 0.24 1. Asam oleat memiliki sifat lebih stabil dan lebih baik perannya dibandingkan PUFA (PolyUnsaturated Fatty Acid).80 0. minyak biji kapas.55 0.94%. Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) memiliki .10 0.04 0. meskipun PUFA dapat menurunkan kolesterol LDL.11.69 0. dan canola. minyak kedelai.

dan fluor hanya terdapat dalam tubuh dalam jumlah kecil saja. mempertahankan fungsi. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein) serta dapat menurunkan produksi trigliserida dan apolipoprotein beta di dalam hati (Achadi 2010). fungsi imun.5 Kandungan mineral tambelo Sekitar 96% bahan makanan terdiri dari bahan organik dan air.49 kelemahan. Jenis-jenis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) yang terkandung dalam tambelu kering. Hasil penelitian yang dilakukan oleh Mensink (1987) diacu dalam Achadi (2010) menunjukkan bahwa MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. iodium. mangan.46 ppm. yaitu asam linoleat (C18:3ω3). Kandungan mineral pada tambelo diuji karena peranannya sebagai antioksidan dalam sistem pertahanan tubuh terhadap reaksi oksidasi radikal bebas dan mineral ini tergabung dalam enzim antioksidan yang berperan melindungi membran sel dan komponen dalam sitosol. asam eikosatrienoat (C20:3ω6). yaitu dapat menurunkan HDL. dan integritas membran sel. Kadar Kalsium dari tambelo adalah 3532. sedangkan MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. tetapi karena perannya yang sangat penting untuk pembentukan tulang dan gigi terutama pada masa pertumbuhan dan ibu hamil. 4. Kekurangan Kalsium akan menyebabkan osteoporosis dan . asam arakhidonat (C20:4 ω6). Unsur mineral lain. Unsur-unsur ini terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup besar dan karenanya disebut unsur mineral makro. seperti besi. Sampai sekarang telah diketahui ada empat belas unsur mineral yang berbeda jenisnya diperlukan manusia agar memiliki kesehatan dan pertumbuhan yang baik. zink. Unsur kalsium (Ca) juga dianalisis bukan karena sebagai antioksidan. dan asam eikosapentanoat/EPA (C20:4ω3). tembaga. kobalt. Asam lemak tak jenuh ganda berperan penting dalam transpor dan metabolisme lemak. Sisanya terdiri dari unsur-unsur mineral.1. Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo disajikan pada Tabel 7. karena itu disebut trace element atau mineral mikro. Di dalam tubuh unsur mineral berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur.

8. yaitu sebagai kofaktor bagi enzim-enzim yang terlibat dalam reaksi oksidasi reduksi (FAO/WHO 2001. 2000. besi kehilangan tiga elektron sehingga memiliki tiga sisa muatan positif (Fe3+/feri) karena dapat berada dalam dua bentuk ion ini. Zat besi juga berperan dalam imunitas dalam pembentukkan sel-sel limfosit. besi berperan dalam respirasi sel. zat besi merupakan unsur yang sangat reaktif sehingga mampu berinteraksi dengan oksigen. Tabel 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo No Parameter Hasil (ppm) Mineral Makro Kalsium (Ca) 1. dalam keadaan teroksidasi. Seng merupakan mineral penting pada berbagai sistem enzim dan hormon. 11.18 Mineral Mikro Besi (Fe) 7. 9.06 0. Klorida (Cl Kalium (K) Magnesium (Mg) Mangan (Mn) Natrium (Na) 3532. Penyerapan Ca akan dipermudah dengan adanya vitamin D (Muchtadi 2009).50 akan mempengaruhi mental dan juga menyebabkan osteomalasia. 2. Dalam keadaan tereduksi. Seng (Zn) Tembaga (Cu) Fosfor (P) Selenium (Se) Peranan zat besi (Fe) berhubungan dengan kemampuannya dalam reaksi oksidasi dan reduksi.30 ppm. Zat besi sebagian besar berada dalam hemoglobin. Almatsier 2006).05 <0.42 1373.02 435.30 0. Sebagai .41 626.98 2363. 5. Antioksidan enzimatis bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal baru (Marks et al. Aktivitas superoksida dismutase (SOD) dan katalase tergantung pada zat besi. 10. Kandungan seng (Zn) pada tambelo segar adalah 12.46 5. 3. besi kehilangan dua elektron sehingga memiliki dua sisa muatan positif (Fe2+ /fero).45 12. Secara kimia. 4. Winarsi 2007).40 3. 6.

Keadaan tubuh yang mengalami stres karena trauma. meningkatkan aktivitas enzim antioksidan. Selenium (Se) adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas dan merupakan bagian penting enzim glutation peroksidase. dan hormon timulin 1. Peran tembaga sebagai kofaktor maupun sebagai pengatur enzim SOD cukup besar. yaitu ion superoksida. Angka kecukupan Se per hari yang dianjurkan oleh Widya Nasional Pangan dan Gizi (2004) adalah 5-20 µg untuk bayi dan anak di bawah 10 tahun dan 20-30 µg untuk pria dan wanita berumur di atas 10 tahun sebesar. Mineral Cu berperan melalui aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD). diferensiasi.51 salah satu mineral imunitas yang berfungsi untuk maturasi. dan aktivasi sel T. Hasil analisis diketahui bahwa kandungan tembaga (Cu) yang terdapat pada tambelo nilainya kecil. dan luka dapat menghabiskan suplai seng dalam tubuh (Wirahadikusumah 1985). Mineral Zn sebagai komponen protein yang mempunyai gugus SH-(metallothionine) berperan sebagai pembersih radikal bebas. yang dapat menghancurkan peroksida yang terbentuk dari hasil oksidasi lemak di dalam tubuh (Mucthadi D 2009). Jika tubuh kekurangan tembaga maka akan terjadi peningkatan peroksida lipid (Harris diacu dalam Ridwan 1997). proliferasi. Kemampuan tubuh seseorang untuk menyerap seng menurun sesuai dengan pertambahan usia sehingga penting untuk meningkatkan intake mineral seng ketika usia 40-an. kadar IgG antiTT. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Enzim superoksida dismutase mempunyai substrat spesifik. Mineral Zn juga merupakan komponen enzim yang berperan dalam perbaikan asam nukleat (Harris diacu dalam Ridwan 1997). Khusus ibu hamil dan . tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Seng (Zn) berperan dalam sistem pertahanan tubuh dengan cara berkonjugasi dengan thiol sehingga menghambat pembentukan ion superoksida. Hasil penelitian Winarsi (2004) yang memberikan minuman susu skim yang diperkaya dengan isoflavon kedelai sebesar 100 mg dan 8 mg ZnSO4 yang diberikan setiap hari selama 2 bulan pada wanita premenopause diketahui dapat menurunkan sindrom premenopause. yaitu 0. terkena polusi lingkungan.98 ppm.

Penelitian ini dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi yang dilanjutkan dengan partisi cair-cair.52 menyusui mendapat tambahan.2 Penelitian Tahap Kedua 4. Berdasarkan hasil rendemen ekstrak tambelo tersebut. Kadar Selenium di dalam tambelo adalah 0.18 ppm. 4.2. Selain itu. pelarut metanol memiliki nilai kostanta dielektrik tinggi jika dibandingkan dengan pelarut yang lain sehingga pelarut metanol dapat membuka dinding sel yang mengakibatkan hampir semua senyawa dapat tertarik keluar dari dalam sel. sebagian lemak serta tanin yang menyebabkan hasil ekstraksi metanol cukup kuat.72%.86%). terbukti bahwa tambelo mengandung berbagai senyawa dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda. sedangkan ekstrak tambelo yang mengandung rendamen relatif kecil adalah ekstrak n-heksana (2.1 Rendemen ekstrak tambelo Ekstraksi merupakan salah satu cara pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu bahan. Rendemen ekstrak tambelo yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5.19% ) dan etil asetat (2.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Analisis fitokimia adalah salah satu cara untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder pada suatu tanaman atau hewan. Tabel 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Uji Fitokimia Alkaloid Flavonoid Phenol Hidroquinon Steroid Triterpenoid Saponin Tanin n-Heksana + + + + + Jenis Pelarut Etil Asetat + + + + + Metanol + + + + + - . masing-masing sebanyak 5 dan 10 µg/orang/hari (Winarno 2008). 4. Hal ini sesuai dengan pernyataan Heath dan Reineccius (1986) bahwa metanol mampu mengekstrak senyawa organik. Besarnya rendemen ekstrak metanol diduga berkaitan dengan sifat pelarut metanol yang memiliki kemampuan pemisahan komponen dari bahan yang lebih baik. Kandungan fitokimia ekstrak tambelo dapat dilihat pada Tabel 8.2.

komponen fenolik. gula. Pada umumnya. karotenoid. (1998) melaporkan bahwa beberapa senyawa flavonoid bersifat antioksidan dan dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase maupun reaksi superoksida.53 Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kasar tambelo. dimetilsulfoksida. saat ini diketahui sebanyak 5. Cos et al. Kelima belas atom karbon tersebut membentuk dua cincin aromatik (C6) yang terikat pada rantai propana (C3) sehingga membentuk susunan C6-C3-C6. bahwa ekstrak metanol memiliki senyawa alkaloid yang sangat tinggi. butanol. Kemudian dilaporkan juga senyawa flavonoid dari stereospermum . dan 1 neoflavonoid (1’B-4C). katekin. alkaloid bebas basa hanya larut dalam pelarut organic. Hal ini karena pelarut etil asetat bersifat semi polar sehingga memiliki kemampuan melarutkan senyawa polar dan non polar. Menurut Pratt dan Hudson (1990). turunan asam sinamat. Ekstrak etil asetat tambelo (Tabel 8) diketahui mengandung senyawa flavonoid yang tinggi. tanin. meskipun beberapa pseudoalkaloida dan protoalkaloida yang larut dalam air. Alkaloid adalah senyawa alami amina. metanol. asam amino. hewan. Berdasarkan susunan ini dapat dihasilkan 3 jenis struktur. yaitu flavonoid (1’B-2C). Garam alkaloida kuarterner sangat larut dalam air (Sastrohamidjojo 1996). baik pada tanaman. isoflavonoid (1’B-3C). Hal ini diduga senyawa alkaloid merupakan senyawa polar. Pelarut yang bersifat polar mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener. yang memiliki aktivitas antioksidan meliputi flavon. Flavonoid merupakan golongan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 karbon sebagai kerangka dasarnya. dan air (Harborne 1987). dan kalkon. isoflavon. dimetilformamida. aseton. flavonol.500 jenis alkaloid (Harborne 1987). dan glikosida (Harborne 1987). karena senyawa yang terbawa pada proses ekstraksi adalah senyawa yang mempunyai polaritas sesuai dengan pelarutnya yaitu pelarut metanol. polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid. ataupun jamur dan merupakan produk yang dihasilkan dari proses metabolisme sekunder. Flavonoid merupakan senyawa polar yang mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol. Khopkar (2003) berpendapat bahwa bahan dan senyawa kimia akan mudah larut pada pelarut yang relatif sama kepolarannya.

Suatu senyawa dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya ditandai dengan perubahan warna ungu menjadi kuning pucat (Molyneux 2004). 2005). Vattem dan Shetty 2006). glikosida jantung dan vitamin D. Pengukuran absorbansi dilakukan pada setiap sampel antioksidan yang dibuat dengan berbagai konsentrasi. fukosterol. 4. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana bersifat non polar. Senyawa DDPH adalah suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain membentuk senyawa yang lebih stabil dan dapat bereaksi dengan atom hidrogen membentuk DPPH tereduksi (diphenylpicrylhydrazine) yang stabil. Secara teoritis. Berdasarkan hasil uji fitokimia. . Steroid alami berasal dari berbagai transformasi kimia dua triterpena yaitu lanosterol dan sikloartenol.54 personatum selain bersifat antioksidan. Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid yang dapat diklasifikasikan menjadi steroid dengan atom karbon tidak lebih dari 21 yaitu sterol. semakin tinggi kosentrasi antioksidan yang ditambahkan pada larutan DPPH. Besarnya daya peredaman radikal bebas DPPH maka dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm. sapogenin.3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH (1. ekstrak n-heksana tambelo mengandung senyawa steroid yang tinggi. Perubahan warna yang mengindikasikan adanya reaksi peredaman radikal bebas DPPH oleh senyawa antioksidan baik pada larutan ekstrak tambelo maupun pada larutan BHT dan vitamin super ester C. senyawa tersebut juga dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase (Kumar et al.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Molyneux 2004. Perubahan warna pada ekstrak tambelo dapat dilihat pada Lampiran 7. Senyawa steroid dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat (Harbone 1987). Peredaman (inhibisi) terhadap radikal bebas dinyatakan dalam persen. diisolasi dari sumber daya hayati laut bersifat non toksik dan mempunyai khasiat menurunkan kolesterol dalam darah dan mendorong aktivitas antidiabetes (Bhakuni et al. 2006).2. maka nilai absorbansi akan semakin turun karena warna larutan bertambah kuning. Ada beberapa steroid seperti.

27 ppm jauh leih ebih kecil dibandingkan dengan ketiga ekstrak kasar tambelo Tabel 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55. sedangkan .51 27. 300 Rata-rata IC50 (ppm) 250 200 150 100 50 3. BHT.78 81.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.83 84.19 IC50 (ppm) 3.77 29. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Molyneux 2004). Ekstrak metanol tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 85. Tabel 9 memperlihatkan bahwa nilai aktivitas antioksidan pada BHT dengan nilai IC50 3. BHT.21 262. dan vitamin super ester C disajikan pada Gambar 12.01 4.16 10 ppm 94.35 8.02 51. Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.27 15 3.53 Gambar 12 Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.44 63. dan vitamin super ester C.86 ppm.27 Berdasarkan Gambar 12.35 0 BHT Vitamin n-heksana ester super C Sampel Etil asetat Metanol 8. menunjukkan ekstrak etil asetat tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dari kedua ekstrak yang lainnya.56 15.00 ppm.35 ppm dan vitamin super ester C yaitu 8. dengan nilai rata-rata IC50 sebesar 15.55 dan aktivitas antioksidan dinyatakan dengan IC50 (Inhibition Concentration) yang menunjukkan kosentrasi sampel antioksidan yang dapat menghambat atau meredam aktivitas antioksidan yang semakin tinggi atau dengan kata lain IC50 sebagai kosentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH.

Rendahnya aktivitas antioksidan ekstrak n- heksana diduga karena pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak nheksana tambelo dan kristal DPPH pada penelitian ini adalah metanol yang bersifat polar. n-heksana : etil asetat (1:1). Kombinasi yang digunakan adalah yang terdiri dari pelarut kloroform : metanol (9:1). baik pada kosentrasi ekstrak maupun pada kosentrasi standar (BHT dan vitamin super ester C). kloroform.4 Fraksi ekstrak terpilih Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada kromatografi lapis tipis (KLT). Eluen dengan pemisahan terbaik kemudian dikombinasikan satu dengan yang lainnya dengan berbagai perbandingan. 4. Perhitungan persen inhibisi IC50 dan grafik regresi linear pada BHT. Pengujian aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak kasar tambelo memiliki kekuatan penghambatan yang berbeda-berbeda antara yang satu dengan yang lainnya dan menghasilkan hubungan antara kosentrasi ekstrak kasar yang digunakan dengan persen inhibisinya. Eluen yang digunakan adalah n-heksana. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo dapat disajikan pada Lampiran 8. dilakukan pencarian eluen terlebih dahulu dengan menggunakan KLT. Hal ini menyebabkan komponen bioaktif yang bersifat non polar pada ekstrak n-heksana tidak terlarut sepenuhnya pada pelarut tersebut sehingga berpengaruh pada nilai IC50.56 ekstrak n-heksana tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 262. kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm. Sebelum dilakukan fraksinasi terhadap ekstrak kasar etil asetat. . Eluen ini berfungsi sebagai fase gerak saat fraksinasi. (2005) menyatakan bahwa presentase penghambatan (% inhibisi) terhadap aktivitas radikal bebas akan ikut meningkat seiring dengan meningkatnya kosentrasi. sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 100-150 ppm. yaitu etil asetat. dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 150-210 ppm. Hanani et al. etil asetat. Bois (1958) diacu dalam Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm.2.77 ppm. metanol. dan etanol.

84 Rf7 = 7/8.15748%) dan rendamen terkecil pada fraksi 6 (0.00156%). diperoleh eluen terbaik yang terdiri dari campuran kloroform : metanol (9 : 1). Rendamen fraksi terbesar terdapat pada fraksi 1 (0.06 Gambar 12 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) 4.4 Rf2 = 2. Hal ini menunjukkan bahwa dalam fraksi tersebut mengandung senyawa yang . Menurut Markam (1988). Kesepuluh fraksi tersebut kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dan uji fitokimia. Berdasarkan hasil fraksinasi kolom. Data rendamen hasil kolom disajikan pada Lampiran 10.82 Rf6 = 6. dan n-heksana : etil asetat (8:2).57 kloroform : metanol (17:3).5/8. flavonoid.65 Rf4 = 4.5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Berdasarkan hasil fraksinasi kolom. Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan.97 Rf8 = 7. penggunaan kloroform : metanol sebagai eluen pada perbandingan 15 : 1 sampai 3 : 1 dapat memisahkan senyawa flavonoid dengan baik.5/8.5 = 0.4/8.25 Rf1 = 0. diketahui bahwa pada fraksi 9 dan fraksi 10 mengandung senyawa triterpenoid.5 = 0. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang kemudian dilakukan pengujian fitokimia. steroid. Berdasarkan hasil fraksinasi tersebut (Gambar 12). alkaloid dan fenol hidrokuinon.3/8.5 = 0.1/8. Profil pola pemisahan senyawa dengan eluen tersebut disajikan pada Lampiran 9a.2.1/8. Rf9 = 8.48 Rf3 = 3.74 Rf5 = 5.5 = 0. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang disajikan pada Lampiran 9b.2/8.5 = 0. Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) disajikan pada Gambar 12. Berdasarkan analisis dengan menggunakan KLT.5 = 0.5 = 0. Hasil pengecekan terhadap fraksi tersebut.5 = 0.5 = 0. diduga terdapat sembilan jenis senyawa pada ekstrak etil asetat tambelo. diduga bahwa masing-masing fraksi telah menunjukkan adanya 1 spot dengan Rf yang berbeda.1/8.

Hal ini berkaitan dengan fungsi proses fraksinasi yang bertujuan untuk memperoleh pola pemisahan yang sempurna. diketahui bahwa aktivitas antioksidan fraksi kesembilan mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat. terbukti terjadi perubahan warna dari ungu menjadi kuning cerah dengan nilai IC50 8. Gambar 14 memperlihatkan bahwa fraksi 9 memiliki daya inhibisi yang setara dengan vitamin super ester C. Kandungan fitokimia fraksi tambelo disajikan pada Tabel 10.58 memungkinkan dapat menghambat radikal bebas. Aktivitas antioksidan pada fraksi tambelo lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak tambelo. fraksi yang didapat lebih murni senyawa aktif dan lebih banyak terisolasi. Berdasarkan hasil pengujian. Tabel 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Kelompok Senyawa Nama Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Alkaloid + + + + + + + + + + Flavonoid + + + + + + + + + + Phenol Hidroquinon + + + + + + Steroid + + + + + + + + + + Triterpenoid + + + + + + + + + + Saponin + + + + + + + Tanin - 4. disusul dengan fraksi 10 dengan nilai IC50 28. .2. Hal ini memungkinkan adanya senyawa aktif dalam faksi 9 yang berpotensi sebagai obat antioksidan.6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo disajikan pada Gambar 13. Perhitungan persen inhibisi dari hasil fraksinasi dapat lihat pada Lampiran 12.91 ppm.87 ppm.

akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH.04 3.51 4.90 28. Hasil reaksi tersebut berupa DPPH tereduksi (yang tidak reaktif lagi karena telah mendapatkan donor hidrogen (Molyneux 2004). Pengujian dengan menggunakan DPPH merupakan salah satu metode yang sederhana.40 58.43 2.59 120 Rata-rata IC50 100 80 60 40 20 0 15 103. Gambar 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH’ Keterangan: RH = asam lemak tidak jenuh R = radikal bebas .87 74.49 63.68 4.29 43. Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen.91 4.06 8.17 2.69 Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi etil 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 asetat Estrak kasar dan Hasil Fraksi Gambar 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo Sebuah senyawa dapat disebut sebagai antioksidan bila senyawa tersebut dapat mendonorkan atom hidrogennya dengan cepat sehingga dapat menghambat terjadinya pembentukan radikal bebas (Sauriasari 2006).50 61.32 2. maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Mekanisme penghambatan radikal DPPH dapat dilihat pada Gambar 15. Senyawa DPPH merupakan radikal bebas yang bersifat stabil sehingga dapat bereaksi dengan atom hidrogen yang berasal dari suatu senyawa antioksidan.63 5.87 1.64 5.21 76. Jika semua elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen.94 86.

Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).7 Identifikasi senyawa fraksi teraktif Liquid chromatography mass spectrofotometer (LC-MS) merupakan metode analisis kuantitatif yang merupakan kombinasi antara kromatografi cair dengan spektroskopi massa. Data spektrum sampel fraksi 9 dapat dilihat pada Lampiran 11.Analisis senyawa menggunakan LC-MS dilakukan pada fraksi terbaik (fraksi 9). (a) Komponen 1 Farnesic acid glyceride (b) (c) Komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride (d) Komponen 3 Labdane diterpenoid Gambar 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan massa 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid. yaitu farnesic acid glyceride. terdapat empat struktur senyawa yang terbagi atas tiga komponen. instrumen kontrol dan proses data. Analisi LC/MS yang dilakukan secara electrospray ionisation. Instrumentasi LC-MS terdiri atas inlet-LC. Struktur senyawa tersebut disajikan pada Gambar 16. sumber ion. Berdasarkan analisis LC-MS sampel fraksi 9 dengan berat molekul 352.2.60 4. tekanan permukaan. . dan labdane diterpenoid. sesquiterpenoic acid glyceride. massa analyzer. detektor. Ketiga komponen tersebut tergolong dalam kelompok senyawa terpenoid.

tetraterpen (40). inhibitor tumor. monocyclofarnesic acid glyceride. komponen 1 farnesic acid glyceride dan komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride termasuk di dalam kelompok senyawa seskuiterpenoid. Pendapat ini juga didukung oleh Marero et al. Senyawa-senyawa seskuiterpenoid tersebut diturunkan dari cis farnesil pirofosfat dan trans farnesil pirofosfat melalui reaksi siklisasi dan reaksi sekunder lainnya. podolakton inhibitor pertumbuhan tanaman. yang dapat dikelompokkan menjadi monoterpen (C10).3-dihydroxypropilfarnesate dan memiliki dua turunan monoasetoksi. di antaranya adalah sebagai antifeedant. (2003) yang melaporkan bahwa hasil isolasi dari pulmonate Trimusculus peruvianus menghasilkan empat senyawa labdane diterpens melalui jalur oksidasi. triterpen (C30). Diterpenoid merupakan senyawa yang mempunyai 20 atom karbon dan dibangun oleh 4 unit isoprena. dan glyceryl ether. (1983) bahwa di dalam ekstrak nudibranch Archidoris montereyensis mengandung senyawa-senyawa diterpenoic acid glyceride. hormon. antimikroba. Andersen et al. seskuiterpen (C15). . Berdasarkan pengelompokan dari senyawa terpenoid tersebut. Terpenoid yang disebut juga isoprenoid. Kedua komponen tersebut memiliki aktivitas sebagai antibiotik dan antifeedant. dan politerpen (≥ 40) (Sirait 2007). Labdane merupakan diterpen bisiklik alami yang membentuk inti struktural untuk berbagai macam produk alami yang dikenal sebagai labdanes atau diterpenes labdane. Beberapa publikasi tentang ketiga komponen seperti yang dilaporkan oleh Gustafson et al. odheri menghasilkan senyawa 2. antifeedant serangga. (1980) juga melaporkan bahwa nudibranch jenis A. terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. diterpen (C20). Senyawasenyawa tersebut memiliki aktivitas sitotoksik yang menghambat sel kanker usus besar pada manusia. Secara umum senyawa seskuiterpenoid ini mempunyai bioaktifitas yang cukup besar. Seskuiterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit isoprena yang terdiri dari kerangka asiklik dan bisiklik dengan kerangka dasar naftalen.61 Terpenoid adalah senyawa alam yang terbentuk dengan proses biosintetis. Senyawa ini mempunyai bioaktivitas yang cukup luas yaitu sebagai hormon pertumbuhan tanaman. antibiotik dan toksin serta regulator pertumbuhan tanaman dan pemanis. drimane sesquiterpenoic acid glyceride.

. dan anti karsinogen. tidak terdeteksi.62 senyawa pemanis. bisiklik. Tata nama yang digunakan lebih banyak adalah nama trivial (Sirait 2007). antifouling. senyawa flavonoid. Senyawa diterpenoid dapat berbentuk asiklik. Berdasarkan hasil analisis LC-MS. dan tetrasiklik. hal ini diduga bahwa senyawa flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak tambelo termasuk dalam kelompok senyawa volatil sehingga ada kemungkinan bahwa senyawa flavonoid yang berperan sebagai senyawa antioksidan di dalam ekstrak tambelo adalah kelompok senyawa volatil. trisiklik.

flavonoid.1 Simpulan Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kimia tambelo segar terdiri dari air 82. protein 7.72%.71%. Fraksi 9 dari ekstrak etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan sebesar 8.27ppm). triterpenoid dan saponin.88%. metanol) mengandung senyawa alkaloid. protein 42.63 5 SIMPULAN DAN SARAN 5.72%. Pada ke tiga ekstrak (n-heksana. steroid. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC 50 sebesar 15 ppm.28%.77%.21%. lemak 0.63%. abu 2. .87 ppm yang setara dengan vitamin super ester C (8.45%. Komposisi kimia tambelo kering adalah kadar air 6. dan karbohidrat 7. Fraksi 9 menyerupai salah satu dari empat struktur senyawa yang dikelompokkan ke dalam tiga komponen. Rendemen tertinggi terdapat pada ekstrak metanol yaitu 5. abu 5. dan karbohidrat 30. Daging tambelo mengandung 17 jenis asam amino dan 15 jenis asam lemak. lemak 14. sesquiterpenoic acid glyceride dan labdane diterpenoid.2 Saran Perlu dilakukan pemurnian lagi dengan menggunakan kromatografi kolom dan untuk memperoleh satu struktur senyawa aktif digunakan nuclear magnetik resonance (NMR). yaitu farnesic acid glyceride. etil asetat.07%.27%. 5.

Almatsier S. New Delhi: Anamaya Publisher. 2011. Journeyingjames. 302-308 Blunt JW. [kaset audio]. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. hlm. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 17:97-104. Approved Methods of The American Association of Cereal Chemist. Bioactive marine natural Product. ____________. Official Methods of Analysis of Association of official Analytical Chemical. 2005. Association of Official Analytical Chemist Inc. Version # vpcl 13. 21:797-800. Ed. hlm. ____________. 2005. USA. berwarna. Bhakuni DS. 2010. Rajagrafindo Persada. MarinLit-Marine Literature Database.com/2011/01/palawans-kinilaw-na-tamilok/. 1 video kaset: 2:50 menit. Prinsip dasar ilmu Gizi. Associaton of Official Analytic Chemist Inc. 1984. 50-279. Palawan. Pelayanan gizi rumah sakit dan perkembangan ilmu serta teknologi. USA. Department of Chemistry-University of Caterbury. Vol 1. 1980. Bonderud D. Palawan’s Kinilaw na Tamilok. produsen. Mayland. Sum FW. American Association of Cereal Chemist [AACC]. 20-319 Almatsier S. 1994. . USA :American Association of Cereal Chemist. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Association of Official Analytical Chemist Inc. [02 Sept 2011]. http://journeyingjames. http://www. Awat DS. Mayland. Betia J. Association of Official Analytical Chemist [AOAC]. 2011. Virginia. Gizi Indonesia. Blunt DA. 2006. Amino acid: What is Valine. 2008. _________.DAFTAR PUSTAKA Achadi EL. Ed ke-9. hlm. bersuara. 2005. Andersen RJ. Dilengkapi: 4 gambar foto berwarna 10 x 12 inci.wisegeek. 2002. Farnesic acid glycerides from the nudibranch Archidoris odhneri. Christchurch: Marine Chemistry Group. 14-104. 2009.5. Hlm. J. Tetrahedron Lett. Jakarta: PT. Official Methods of Analysis (18 Edn). Official Methods of Analysis (18 Edn).com [08 Maret 2011]. Gizi dan kesehatan Masyarakat.

co/tipsoz_solution/diet_utrition/nutrition/article. Iheringia. Arthur. Tagliaro CH. 1991. Edrada RA. purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrataes. Thailand. Porto Alegre. hlm. 98:17-23. Institut Pertanian Bogor. Rancidity in Foods. Metode Pengujian Kimia Produk Perikanan. .254. Schupp P. US Paten. 17 Mei 1994. 1995. Ebada SS. Pengantar Kromatografi. Coppen PP. Amino acid protein suplemen. Edrada RA. Bogor: Fakultas Pertanian.. Lin W. 2001. Penemu: The United States of America as represented by the Secretary of Agriculture. Reduce-it weight management program Diet and Nutrition (2011). Seasonal abundance of the shipworm Neoteredo reynei (Bivalvia. newsletter@trulyhuge. E Schwarting. 2008. Chem. 27-36. Filho CS. Dietary Amino Acids Benefits. penerjemah. Effendi YH. Diktat. SNI 01-2362-1991. Penentuan Logam Berat. Selenium untuk kekebalan tubuh. 2000. J. www. Pengantar gizi kesehatan. Padmawinata K. Bangkok. 1991. Material Medika Indonesia. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Beasley CR. Handayani D. Wray V. hlm. [DSN]. New York: Science Publishers. [29 Sept 2011].65 Carroli C. Arata D. Bandung: ITB press. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Editor. Structure activity relationship of bioactive metabolites from some Indo-Pasific marine invertebrates. FAO/WHO. Teredinidae) in mangrove driftwood from a northern Brazilian beach. 2008. Balbin-Oliveros M. Effect of threonine deficiency on changes in enzyme activity and liver fat deposition with time. Human Vitamin and Mineral Requirement.Nutrition 1:502-506. Dena CC. Report of a joint FAO/WHO xpert consultation. http://www/conectique. 2006. Proksch P. Griffin et al. Industrial alkaline protease from shipworm bacterium. Sér.com [06 Maret 2011]. Cat B. Roma: Food and Nutrition Division. Hamilton RJ. Protocols: methods for isolation. 1983. Prod.php?article_id=3160. 67-90. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. Zool. Bobbitt JM. Proksch P. Di dalam: Allen JC. 21: 251. Nature 3-12. Nat. The use of antioxidants. Conectique. Dewan Standarisasi Nasional. 2002. Paten 5 512 749. Gritter JR. Ed ke-2. 2006.

Rao JM. Terjemahan dari: Food Nutrition and Agriculture. 2008. Metode Fitokimia. 1988. 2006. Org. Mun’im A. Hanani E. J. 2:127-133. Ali AZ. Pharm. Chem. Two new flavonoids and other constituents in licorice roots: their relative astringency and radical scavenging effect. Free radical scavanging and xanthine oksidase inhibitory constituens from Stereospermum personatun. dari Kepulauan Seribu. Lampung. Bandung: ITB. Bull. 1986.ac. Flavor Chemistry and Technology. Padmawinata K.id/file/arsip [12 April 2009]. Okuda. Gizi dan Pangan 1:1-12. Hardinsyah. Driskel JA. Soediro S. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. Tetrahedron. 2003. Scheuer PJ. The chemistry of ranciditry in food. Hamilton RJ. Suhardjo. Reddy SV. Publ. Otto CS. * Khopkar SM. 2006. Hatano TH. J. 1987. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. Chemical studies of British Colombia Nudibranchs. Ketaren S.unila. New York: Van Nostrand Reinhold Comp. Pangan Gizi dan Pertanian. 1996. J Nat Prod 68:1611-1621.66 Gustafson K. Yasuhara TT. 61: 6594. penerjemah. hlm 1-20. Jakarta: UI-Press. Harper LJ. Chem. editor. Jakarta: Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. 2005. 17-18 November 2008. Dachriyanus. Terjemahan dari Phytochemical method. Papua. 30-69. Jenis dan jumlah konsumsi tambelo. Rao RJ. Hamman MT. Lemak dan Minyak Pangan. Handayani D. HB. 1988. Sayuti N. Deaton BJ. J. Hamilton RJ. Rancidity in Food. penerjemah. Andersen RJ 1985. Reineccius. Kumar US. Apama P. 41:1101-1108. Tiwari AK. Heath. Ed. Jakarta: UI Press. Letsoin J. Dunbar DC. Harbone JB. . siput dan kerang oleh penduduk di kawasan Muara Mimika. http://lemlit. Kagawa H. Kahalalides : bioactive peptides from marine mollusk Elysia rufescens and its algal diet Bryopsis sp. 1986. Sekarini R. Isolasi dan karakteristik senyawa antibakteri epidioksi sterol dari spon laut Petroia Nigrans. Asal Sumatera Barat. G. Penuntun Cara Modern Menaganalisis Tumbuhan. 36:3090-2097. Sumule A. Majalah Ilmu Kefarmasian. Ke-2. hlm. 1983. Konsep Dasar Kimia Analitik. Di dalam: Allen JC. New York: Applied Science Publisher.

Sci. Vol ke-9.org/gb/foto/muller/ecology/09/index.papuaweb. Linder MC. Asam Lemak Omega 9 dan Manfaatnya bagi Kesehatan. Parakkasi A. 2009. 26:211-219. . 2000. 335-344. Munifah I. Antimalarial activity of kalihinol a and realtive diterpenoids from the okinawan sponge. 1998. Advance in marne biology. Muchtadi TRM. Jakarta: UI Press. Alfabeta. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Evaluasi Nilai Gizi Pangan. 1971. J. New York: Academic Press Inc. Technol 2004. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. editor. Yamada Y. Parakkasi A. Biokimia nutrisi dan metabolisme dengan pemakaian secara klinis. Acanthrlla sp. Tetrahedron 13467-13474 Molyneux P. Pengantar Ilmu Gizi. Nair NB. Galeri-Galery. 14-55 hlm. Yonge M. Muller K.scribd. Biokimia nutrisi dan metabolisme. http://www. Saraswathy M. 1989. Linder MC. The biology of wood-boring teredinid mollusca. Gizi Anti Penuaan Dini. Bandung: CV. 1992. Alfabet. Editor. Linder CM. 2004.20-56. hlm. [12 April 2009] Muchtadi D. Songklanakarin J.com/omega9b. Jakarta: UI Press. Persepsi Masyarakat Suku Kamoro terhadap tambelo Bactronophorus thoracites di Kabupaten Mimika [skripsi]. Di dalam: Russell FS.htm. PapuaWeb. Jayapura: Fakultas Keguruan dan ilmu Pendidikan. Ekologi Kamoro-Bab IX. hlm 45-67. 2003. 59:48-55 Muchtadi D. Krisnawang H. Universitas Cenderawasih Jayapura. Muchtadi D. Miyaoka H. penerjemah.html [16 Juli 2009]. Tetrahedron. Shimomura M. penerjemah.intiboga. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Bogor: IPB Press. hlm. 2006. Isolation and antioxidative assay of several marine macroalgae components within ethyl-acetate fraction. Morrero D et al. Kimura H. http://www. Labdane diterpenoid with a new oxidation pattern from the marine pulmonate Trimusculus peruvianus. 2009.com/doc/isolation-seminternationalUGM/2558795 [ 02 Maret 2011]. http://www. editor.67 Linder MC. 2004. 2007. Mayabubun 2003. Bandung: CV. Cetakan I.

Salamah E. Edisi ke-6. penerjemah. Ho CT. Natural antioxidant exploited commercially. 2008. Makalah dalam Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. Tempe mampu menghambat proses ketuaan. Kustiariyah. Hudson BJF. Sirait M. Phenolic Compound in Food and Their Effect on Health. hlm. hlm. Poedjiadi A. 120(1):7-13. Terjemahan dari: The organic constiuteuns of higher plants. Edisi revisi. USA. Imran Z. Setyowati. 1997. 2011. 1990. Robinson T. 1995. London and New York: Elsevier Applied Science. editor. Unit Corn Mill. 8(2):12-25. Di dalam: Hudson BJF. 1979. Purchon RD.org. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. [7 Mei 2011] Sidik. Ayuningrat E. 230-429. 1992. Penapisan awal komponen bioaktif dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea) sebagai senyawa antioksidan. 1990. 8-389 hlm Pratt DE.com [07 Maret 2011]. Supriyanti FMT. Dasar-dasar biokimia.chem-is-try. Kosasih Padmawinata. Bandung: ITB. Suparni.68 Nelson JK. 1994. Natural antioxidant not exploited comercially. Pratt DE. Di dalam: Huang MT. Hungary. 191-246 hlm . 2009. Cermin Dunia Kedokteran. Purwaningsih S. 1997. hlm. 2007.supamas. Asam amino non esensial. editor. Schuler P. 2006. Pergamon Press. Noyes Data Co. Mayor clinic diet manual : A Handbook of Nutrition Practices. 1968. Di dalam: Food Antioxidant. Moxness KE. Ranney MW. London: Elsevier Applied Science. Jakarta: UI Press. editor. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah (Anadara granosa) yang diambil dari Kabupaten Boalemo. Jensen MD. Ed ke-7. Bandung: ITB. Food Antioxidant. Natural antioxidant from plant material.Supamas. Penuntun fitokimia dalam farmasi. www. 11:119-132. 67-78 Nurjanah. Gorontalo. 2005. Park Ridge. 123-280. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. 87-121. Institut Teknologi Bandung 26-27 Juni 1997. Buletin THP. hlm. Antioksidan Alami Asal Tumbuhan. The Biology of The Mollusca. Washington DC: American Society. Buletin TeknologiHasil Perikanan. Gastineau CF. Hudson BJF. Philadelphia : Mosby. Antioxidant Recent Development. Lee CY. Ridwan E.

hlm. 2009. hlm. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama. Ibrahim B. Kimia Pangan dan Gizi. Suharsono. Kimia Pangan dan Gizi. __________. Komposisi kimia dan aktivitas inhibitor topoimerase I dari kerang mas ngur (Attactodea striata). Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. Mengenal dan menangkal http://www.1997. Sudarmadji S.14-55. 3-14 __________.brawijaya. Calloway CB. hlm.supamas. Vizzon VF. Leoncini O and Amaro CSAG. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. 1984. Kimia Pangan dan Gizi. Bogor: Program Pascasarjana. 92-128 Kimia Pangan. 2011. Yparraguirre LA. Potensi ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) sebagai antioksidan. Jakarta: Erlangga.com [ 8 Juni 2011] radikal bebas. 9(1): 33-37. Senra MVX. 2008. 221:1401-1403. Mol. [3 februari 2011] Syaputra D.pdf. __________. Suariasari R.ac. hlm. 1970. Analisis asam amino dalam tepung ikan dan bungkil kedelai. Sociedade Brasileira de Genética. 2007. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. Genetics and Molecular Biology Online Ahead of Print. 2007. Jurnal Sumberdaya Perairan. 2004. Trindade-Silva E. Produk Fermentasi Ikan Dari Cacing Kapal Bactronophorus sp.145-167. Suratmo. Poernomo D. Buletin Teknik Pertanian. Turner RD. Asam amino non esensial. http://fisika.id/bssub/PDF%20FILES/BSS_ 205_I. 1:12-14. . Supamas. 1989. 57-158. Haryono B. Machado-Ferreira E. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. Biokimia. Biol. Printed in Brazil. Bogor: M-Brio Press. [Tesis]. 1992. 12-34. Genet. Science.com [07 Maret 2011]. 2009. Physiological traits of the symbiotic bacterium Teredinibacter turnerae isolated from the mangrove shipworm Neoteredo reynei. Waranmaselembun C. 2006. hlm. Waterbury JB. A cellulolytic nitrogen fixing bacterium cultured from the gland of deshayes in shipworms.beritaiptek. Winarno FG. Suhardi. hlm.69 Sitompul S. Segar. Yogyakarta: Liberty. Institut Pertanian Bogor. 1983.

43:27-32 . Dalam: Peran Biokimia dan Biologi Molekuler dalam Eksplorasi dan Pemanfaatan Sumberdaya Hayati Berkelanjutan. Prosiding Seminar Nasional PBBMI. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity. 2007. hlm. 86-105.70 Winarsi H. J. Yen GC. 2004. Chen HY. Jakarta: Kanisius. 1995. Yogyakarta . of Agricultural and Food Chemistry. Efek Minuman Fungsional yang Disuplementasi Isoflavon Kedelai dan Zn terhadap Profil Lipiddan Produk MDA Plasma Wanita Premenopause. Winarsi H.

71 .

72 LAMPIRAN .

73 .

418 0.99 0.88 30.26 1.62 28.19 0.015 22.31 2.41 0.989 Rata-rata 0.27 5.20 14.45 Rata-rata 6.011 0.285 1.518 0.01 0.035 0.719 0.11 6.290 .35 14.008 0.28 2.34 1.72 0.663 3.055 0.01 1.795 1.651 1.839 1.01 2.42 5.005 1.009 0.195 1.83 Lampiran 2.29 0.821 1.337 0.004 0.007 0.018 0.31 0.729 0.19 1.761 2.854 2.011 0.04 0.74 Lampiran 1.402 22. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.62 44.63 0.72 6.45 II 6.26 1. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.63 42.04 2.019 0.63 41.349 1.85 3.07 7.15 Rata-rata 82.22 1.023 0.841 3.28 II 82.287 0.243 1.81 1.74 1.45 Standar deviasi 0.25 1.293 1.662 1. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.62 b.41 Standar deviasi 0.15 32.56 0.72 7.02 0.112 0.055 0.399 21.179 1.27 7.596 0.820 1.432 1.016 1.236 1.006 0.163 0.21 0.55 1.387 0. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.77 14.88 8.618 0.80 2.403 0.28 0.71 7.43 0.008 0.37 1.72 Standar deviasi 0.423 0.251 1.360 1.

75 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

76 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a. Kromatografi asam amino ulangan I .

Kromatografi asam amino ulangan II .77 b.

78 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

79 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

80 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH .

8.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.60.40. vitamin super ester .6.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.40.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.60.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.60.81 Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.40.8.80 ppm) Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.40.6.60.

Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.02 51.0 70.608x + 27.18.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.56 15.0 10.44 63.0 50.19 IC50 (ppm) 3.87 R² = 0.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.78 81.0 0.16 10 ppm 94.54 R² = 0.287x .35 8.51 27.27 100.82 C dan ekstrak kasar tambelo a.0 80.0 40.0 30.993 % Inhibisi 60.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) b.0 90.0 y = 6. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana .0 20.

96 -6.255x .407 0.09 -0.224x – 9.93 y=0.18 -5.9.490 265.63 7.201x – 8.449 0.423 0.83 Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.376 0.01 12.454 0.9.77 29.94 2.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.94 2.08 4.55 3.531 y=0.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.462 0.46 5.255x – 9.224x .405 2 3 % inhibisi 0 -3.79 6.25 Pers.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.401 0.regresi linear y=0.419 0.58 262.449 290.421 0.412 0.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .143 R² = 0.490 R² = 0.434 0.

041 0.75 1 y=0.53 85.72 47.432 0.45 79. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.40 90.04 15.201x .055 84.225 0.089 0.53 67.119 0.123 0.55 72.17 15.92 71.51 46.062 0.449 R² = 0.64x + 37.231 0.51 R² = 0.13 80.65 87.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.73 19.56 Pers.00 4.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.066 0.660x + 40.8.604x + 43.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.205 0.51 10.084 % inhibisi 52.211 2 0.27 y=0.142 0.604x + 43.

12 19.986 88.30 84.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.372 0.01 3.777 82.312 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.38 y=0.49 21.04 R² = 0.432 0.689x – 6.829 y=0.34 y=0.89 27.371 0.68 29.305 0.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.018 81.641x + 2. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.40 53.01 9.47 9.347 0.660x + 40.303 0.337 0.656x – 7.78 48.64x + 37.73 R² = 0.391 0.223 % inhib Pers.392 0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.201 0.203 0.86 53.99 29.39 .30 13.

656x .641x .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.986 R² = 0.946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.2.7.018 R² = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .689x .777 R² = 0.6.

Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .53 4. Kloroform : Metanol 5. n-Heksana : Etil asetat 2.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a.75 19. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.93 265.30 88.79 10.3 45. n-Heksana : Etil asetat 3. Kloroform : Metanol 4.39 Ratarata 788.34 81.17 15.01 252.03 Standart devisiasi 29.21 3.58 290.87 e.09 82.

51 63.37 Ulangan II 100.43 2.85 44.69 .00506 0.00156 0.82 25.5 26.03 33.32 40.40 4.83 62.86 73.03492 0.88 b. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.63 2.37 73.61 7.04 74.36 70.90 4.72 85.78 58.03 64.87 86.95 75.82 77.46 63.76 60.07 57.0028 0.74 65.0152 0.97 8.00482 0.14 83.13 III 101.56 54.00732 0.00710 0.68 5.06 1.80 43.85 Rata-rata 103.62 83. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.27 62.29 2.47 80.35 Standart deviasi 4.46 76.94 5.77 24.21 3.97 129.41 91.49 174.15748 0.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.50 61.92 10.

425 0.689x + 27.149 0.41 y=0.82 y=0.17 33.76 93.13 27.00 81.536x + 46.87 y=0.193 0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.127 0.246 0.90 4.41 40.073 0.651x + 33. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.179 0.71 88.88 65.148 0.00 70.108 0.18 80.53 76.497x + 45.12 63.41 73.62x + 43.71 42.76 82.78 y=0.59 64.277 0.086 0.187 0.17 25.65 34.89 b.255 0.47 56 68 79.12 74.164 0.082 0.59 81.079 % Inhibisi 0 54.82 57.136 0.099 0.23 7.155 0.29 10.03 8.078 0.85 y=0.086 0.028 0.23 24.64 8.37 y=0.77 Pers.049 0.112 0.65 76.647x + 34.94 79.102 0.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .82 61.

LAMPIRAN .

74 .

820 1.729 0.72 7.821 1.19 0.83 Lampiran 2.518 0.04 0.008 0.63 0.21 0.41 0.360 1.055 0.63 41.31 2.761 2.179 1.11 6.402 22.62 44.854 2.55 1.618 0.651 1.74 1.195 1. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.88 30.005 1.26 1.19 1.719 0.163 0.45 Rata-rata 6.28 II 82.71 7.35 14.07 7.035 0.399 21.56 0.663 3.023 0.80 2.88 8.01 1.45 Standar deviasi 0.43 0.432 1.27 7.62 b.20 14.28 0.25 1.018 0.04 2.99 0.989 Rata-rata 0.795 1.37 1.004 0.418 0.006 0.009 0.34 1.839 1.72 6.22 1.337 0.15 32.41 Standar deviasi 0.112 0.29 0.016 1.055 0.287 0.72 Standar deviasi 0.387 0.01 0.243 1.403 0.015 22.62 28.42 5.26 1.81 1.251 1. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.841 3.02 0.662 1.75 Lampiran 1. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.27 5.349 1.15 Rata-rata 82.28 2.019 0.236 1.293 1.31 0.596 0.72 0.290 .007 0.85 3.008 0.45 II 6.423 0.285 1.63 42. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.77 14.011 0.01 2.011 0.

76 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

77 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a. Kromatografi asam amino ulangan I .

Kromatografi asam amino ulangan II .78 b.

79 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

80 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

40.40.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.60. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.6.60.60.81 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.8.60.40.8.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.6.80 ppm) .80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.40.

78 81.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.0 20.19 IC50 (ppm) 3.0 10.51 27.82 Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.0 70.18.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) .0 80.02 51.56 15.87 R² = 0.608x + 27.0 0.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.35 8.287x .0 y = 6.44 63.16 10 ppm 94. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.0 40.54 R² = 0.0 50. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo a.0 30.0 90.993 % Inhibisi 60.27 100.

434 0.55 3.96 -6.255x – 9.94 2.18 -5.255x .462 0.83 b.79 6.46 5.419 0.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.63 7.412 0.224x – 9.25 Pers.9.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .143 R² = 0.94 2.490 R² = 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.regresi linear y=0.9.531 3 y=0.201x – 8.490 265.401 0.01 12.407 0.09 -0.08 4.376 0.449 290.421 0.58 262.224x .454 0.449 0.77 29.93 2 y=0.423 0.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.405 % inhibisi 0 -3.

Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.51 R² = 0.72 47.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.201x .449 R² = 0.53 85.205 0.55 72.432 0.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .604x + 43.27 y=0.041 0.055 84.56 Pers.123 0.92 71.65 87.40 90.51 10.75 1 y=0.231 0.225 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.062 0.119 0.8.066 0.64x + 37.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.00 4.089 0.17 15.604x + 43.660x + 40.211 2 0.45 79.13 80.142 0.51 46.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.04 15.73 19.53 67.084 % inhibisi 52.

303 0.018 81.30 13.986 88.641x + 2.99 29. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.777 82.86 53.64x + 37.30 84.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.391 0.689x – 6.203 0.12 19.305 0.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.38 y=0.312 0.78 48.68 29.223 % inhib Pers.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.371 0.660x + 40.04 R² = 0.201 0.01 3.337 0.39 .49 21.656x – 7.34 y=0.40 53.829 y=0.89 27.01 9. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.347 0.432 0.47 9.372 0.73 R² = 0.392 0.

986 R² = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .777 R² = 0.946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.7.641x .2.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.6.689x .656x .018 R² = 0.

30 88.58 290.39 Ratarata 788. Kloroform : Metanol 5.53 4.75 19.87 e.93 265.17 15. n-Heksana : Etil asetat 3.21 3.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231. Kloroform : Metanol 4.03 Standart devisiasi 29.3 45.09 82. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.79 10. n-Heksana : Etil asetat 2.01 252. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .34 81.

78 58.69 .37 73.95 75.29 2.47 80.41 91.56 54.0152 0.88 b.82 25.13 III 101.03492 0.00710 0.62 83.00732 0.00506 0.51 63.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.27 62.85 44.61 7.80 43.36 70.35 Standart deviasi 4.37 Ulangan II 100.46 63.83 62. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.82 77.04 74.77 24.49 174.03 64.03 33.90 4.92 10.21 3.00482 0.86 73.43 2.63 2.72 85.00156 0.97 8.87 86.0028 0.15748 0.40 4.32 40.85 Rata-rata 103.97 129.07 57.06 1. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.68 5.46 76.94 5.74 65.76 60.50 61.5 26.14 83.

76 93.00 70.028 0.689x + 27.17 25.647x + 34.59 64.12 74.127 0.85 y=0.12 63.497x + 45.102 0.87 y=0.425 0.164 0.90 4.29 10.37 y=0. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.246 0.049 0.77 Pers.53 76.148 0.187 0.23 7.78 y=0.073 0.18 80.23 24.149 0.086 0.71 88.94 79.64 8.03 8.71 42.82 57.651x + 33.82 61.155 0.136 0. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.193 0.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .82 y=0.89 b.41 73.41 40.099 0.536x + 46.112 0.078 0.00 81.082 0.47 56 68 79.108 0.88 65.079 % Inhibisi 0 54.255 0.76 82.086 0.179 0.41 y=0.59 81.17 33.13 27.65 76.65 34.277 0.62x + 43.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful