KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites

)

JULIANA LEIWAKABESSY

Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Teknologi Hasil Perairan

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Dra. Purwantiningsih S,MS

Judul Tesis Nama NRP

: Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites) : Juliana Leiwakabessy : C351070051

Disetujui, Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Linawati Hardjito, M.Sc Ketua

Dr. Ir. Sri Purwaningsih, M.Si Anggota

Diketahui,

Ketua Program Studi Teknologi Hasil Perairan

Dekan Sekolah Pascasarjana

Dr. Tati Nurhayati, S.Pi, MSi NIP: 19700807 1996 032002

Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc. Agr NIP: 19650814 1990 021001

Tanggal Ujian: 28 September 2011

Tanggal Lulus:

KOMPOSISI KIMIA DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK TAMBELO (Bactronophorus thoracites)

JULIANA LEIWAKABESSY

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011

PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul “ Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo

(Bactronophorus thoracitesi)” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini

Bogor, September 2011

Juliana Leiwakabessy NRP C351070051

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Ambon pada tanggal 24 November 1969 dari ayah Melkias Leiwakabessy dan Ibu Maria Tapilatu. Penulis merupakan putri keenam dari tujuh bersaudara. Tahun 1989 penulis lulus dari SMU Negeri 2 Ambon dan pada tahun 1997 penulis lulus dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Jurusan Pengolahan Hasil Perikanan Universitas Pattimura. Pada tahun 2007, penulis melanjutkan pendidikan sekolah Pascasarjana (S2) di Teknologi Hasil Perairan IPB dengan sponsor BPPS. Penulis bekerja sebagai staf dosen di Jurusan Perikanan, Fakultas Peternakan Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Papua sejak tahun 2003 hingga sekarang.

2. b. penyusunan laporan. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulisan ini tanpa mencantumkan atau menyebut sumber. penulisan karya ilmiah.@ Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor Tahun 2011 Hak Cipta dilindungi Undang-Undang 1. Pengutipan tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan. penelitian. a. Dilarang mengumumkan atau memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB. penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah. .

...................3.............................. 1.... 1............... 42 4. 39 4.....3...3..................DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL ..........................................................3.............4 Kandungan asam lemak tambelo .............2 Kandungan proksimat tambelo ...................................2...........2 Uji proksimat (AOAC 2005) ..............3... 22 3.................... 35 3.............................................................. 1 1 2 3 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA .........................4 Komponen Bioakif dari Moluska .............. 23 3...................................................................................2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995).......... 5 2....................................................................................................................3...............1 Penelitian tahap pertama ..................2................................. 39 4...1 Asam amino .... 27 3...................... 38 4 HASIL DAN PEMBAHASAN .. 21 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ..................................................1 Latar Belakang ...........................................................................5 Analisis mineral .................................. 1......3 Mineral ....... 17 3 METODOLOGI PENELITIAN ...........................3 Tujuan Penelitian .........................3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995)...... xii DAFTAR GAMBAR ......................2 Bahan dan Alat ........................1 Ekstraksi bahan aktif ...............................3.................4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) ....................................................................................3....................................................3...................................... 47 viii ..................................................................... 39 4............. 6 2..3......................................................3........ 26 3............................2................2........4 Manfaat Penelitian ..........................................5 Kerangka Pemikiran .. 16 2........................3................. 11 2............. 9 2............... 22 3.................. 1...3 Analisis asam amino (AOAC 1994) .....................3....... 35 3............................ 5 2............................. 39 4....................................................1 Penelitian Tahap Pertama ......3.3 Prosedur Penelitian .. 22 3.................................5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al....3 Komposisi Kimia ...................................................................................... 1988) ......................................... 13 2.... 1....1................1..2 Perumusan Masalah ................3........................................................................2...................1 Rendemen daging tambelo ................ 34 3........3 Kandungan asam amino tambelo ............3...................................... 30 3................................................... 32 3............. 23 3.............1............................................................................................................................. xiv 1 PENDAHULUAN ..........3........ 32 3.................................2 Asam lemak ............................ xiii DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. 7 2..........3...3...................... 21 3..5 Antioksidan dan Pengukurannya ................................................................................................................2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat .4 Fraksinasi senyawa antioksidan ........................................2 Penelitian tahap kedua ................................................1.................................1 Tambelo .......3...........................1 Rendemen (Hustiany 2005) ......

......................... 54 4................... 56 4.7 Identifikasi senyawa fraksi terpilih ..........2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo ............................... 52 4........................................ 63 DAFTAR PUSTAKA ........2...........3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo .. 60 5 SIMPULAN DAN SARAN ............ 57 4.........................2......6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo .......1 Rendemen ekstrak tambelo ........................... 52 4....................................................................................5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ...................................................2................ 64 LAMPIRAN .................................................................................2.......5 Kandungan mineral tambelo ...................................................................2.............................................4 Fraksi ekstrak terpilih ....... 52 4......... 49 4......2.... 58 4.........................2 Penelitian Tahap Kedua ......................1........................................... 71 ix .........................2..........4...................................

.................................... 39 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia tambelo ................................................................ 55 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo ................ 48 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo ................................................ 47 6 Komposisi asam lemak ekstrak kasar tambelo .................................. 52 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo ...... 61 x ............ 50 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo .............. 39 3 Kandungan proksimat daging tambelo ... 43 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo ............................. 11 2 Rendemen daging tambelo .....................................................................................................................................................................................................................DAFTAR TABEL Halaman 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh .......................................

.............. 21 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC .................................... 7 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990) .............. 20 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan identifikasi senyawa antioksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites) ...... BHT....................... 2008) ................... 6 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo metah (Muller 2004) ..... 3 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) ............. dan vitamin super ester C .............................. 57 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-fraksi tambelo .................................................... 36 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom ................ 37 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo ....................................... 42 12 Nilai IC50 dari ekstrak.............. 59 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH ............................ 33 9 Diagram alir fraksinasi dengan menggunakan KLT .............65 xi ........................................................................................DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Kerangka pemikiran ......... 63 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan mass 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid ........ 55 13 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) ..................... 18 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007) ..................................................................................................... 28 8 Diagram alir ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al..

................................................................. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo .................................................................................................................................................................................... 88 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo ............................................ 80 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH dari ekstrak tambelo .. 89 xii .................................................................... 76 4 Kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC ...................................................... 78 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .................................... 88 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS ........... 75 2 Nilai rata-rata asam amino tambelo ..................................................... 81 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT. 77 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC ................................. 75 3 Kromatogram standar asam amino pada HPLC ... 87 10 Rendamen fraksi tambelo ................................................................................... 82 9 Profil pola pemisahan senyawa ........................DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering ..................

01%. shipworm.28±0. and to identify the compound of active antioxidant obtained from selected fractionated extract. It contained calcium of 3532. Chemical Composition and Identification of Antioxidant Compounds from the Extracts of Tambelo (Bactronophorus thoracites). to conduct antioxidant and phytochemistry tests. The maceration result was evaporated and partitioned with a solvent of n-hexane and ethyl acetate.45±2. The research consisted of two stages. MarinLit database (Blunt and Blunt 2008). 60.72±0. and carbohydrate (by difference) 7.04%. flavonoid.01%. described the crude extract of tambelo contained a group of alkaloid. 8 and 10 ppm. chemical.06 ppm.04%. The first stage involved the analyses of proximate. The composition of fresh tambelo divided into moisture 82.87 ppm. 6. The composition of dried tambelo was moisture 6. protein 7.ABSTRACT JULIANA LEIWAKABESSY. Teredinidae.88±1. fat 14. the identification of fresh antioxidant compound was carried out using LC-MS. and 80 ppm) with DPPH method applying BHT and vitamin super ester C as the standard with a concentration of 4. the extract underwent phytochemical and antioxidant tests (20. Supervised by LINAWATI HARDJITO and SRI PURWANINGSIH Tambelo (Teredinidae) is consumed freshly by local people in Papua without removing the digestive tracts. compound .31%. The second stage was the extraction of active materials by means of maceration. 40. sesquiterpenoic acid glyceride and labdane diterpenoid. The protein of tambelo contained nine essential amino acids and eight non essensial amino acids.72±0. The highest antioxidant activity obtained by column fractionation was the 9th fraction with IC50 of 8.27%. Next. It had seven saturated fatty acids and eight unsaturated fatty acids. ash 5. steroid and triterpenoid. carbohydrate (by difference) 30. Keywords: Activity antioxidants. fat 0.77±2.83%. Phytochemical test.21±0. amino acid and mineral.27±0.46 ppm and phosfor of 2363. protein 42. The highest antioxidant activity was found in the crude extract of ethyl acetate with IC50 of 15 ppm.63±0.07±0.22%. ash 2. This study aimed to investigate the chemical composition of fresh tambelo.62%. Finally. fatty acid.01%. 9th fraction was similar to farnesic acid glyceride.

Mereka percaya bahwa isi pencernaan tambelo berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit diantaranya. natrium 435. tirosin 0. heptadekanoat (C17:0) 0.28±0. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).01%. Aktivitas antioksidan yang tertinggi hasil fraksinasi kolom terdapat pada fraksi 9 dengan IC50 sebesar 8.72%. uji proksimat. Tambelo kering memiliki kadar air 6.22%.27±0. lisin 1.72±0. metionin 0. asam glutamat 3.42 ppm. dan metanol).88±1. dan karbohidrat 30. protein 7. Cis-10Heptadekanoat (C17:1) 0. Kabupaten Manokwari memiliki kadar air 82. Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC50 sebesar 15 ppm.80%. nafsu makan dan vitalitas pria. malaria. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif tambelo dengan cara maserasi.04%. asam gliserida sesquiterpenoid. valin 1. Rendemen ekstrak kasar tambelo kering yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5.01%. pentadekanoat (C15:0) 0. lemak 14. alanin 1.29% dari berat minyak.80%. kalium 626. histidin 1. heneikosanoat acid (C21:0) 0.72±0.56%.41%. dan 8 asam lemak tidak jenuh yang terdiri dari miristoleat (C14:1) 0.63±0.06 ppm.45 ppm. serin 1.31% lemak 0. dan sistein 0.07±0.46 ppm. flavonoid. Tahap pertama adalah analisis rendemen. Penelitian ini terdiri dari dua tahap. sakit pinggang.83%. dan mineral dalam tambelo. mendapatkan antioksidan dan fitokimia. serta mengidentifikasi senyawa aktif antioksidan hasil fraksinasi ekstrak terpilih.63%.29%.81%. glisin 1. EPA (C20:4ω3) 0.25%.72%. Asam amino non esensial pada tambelo. flu. Di Papua masyarakat mengkonsumsi tambelo dalam keadaan mentah tanpa harus dibuang isi pencernaannya terlebih dahulu. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan komposisi kimia tambelo segar. dan arakidonat (20:4ω6) 0. prolin 0.21±0. yaitu asam aspartat 2.fraksi 9 menyerupai senyawa asam gliserida farnesik. arakidat (C20:0) 0.66%.55%. isoleusin 0.22%.04%.85%. fenilalanin 1.27%. protein 42.26%. dan identifikasi senyawa antioksidan menggunakan LC-MS.34%. palmitoleat (C16:1) 14. asam lemak.45±2. analisis fitokimia. Tambelo segar (Bactronophorus thoraites) yang berasal dari perairan Andai.13%.80% dari berat protein. rematik. Tambelo memiliki 7 asam lemak jenuh (saturated fatty acid/SAFA) yang terdiri atas miristat (C14:0) 5. leusin 1.87 ppm. Kandungan mineral pada tambelo yaitu kalsium 3532. abu 2.01%. Dibimbing oleh LINAWATI HARDJITO dan SRI PURWANINGSIH. dan diterpenoid labdan. dan karbohidrat (by difference) 7.19%. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya.55%. Komposisi Kimia dan Identifikasi Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Tambelo (Bactronophorus thoracites). meningkatkan air susu ibu.69%. asam amino. etil asetat. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak kasar tambelo mengandung senyawa alkaloid. abu 5.RINGKASAN JULIANA LEIWAKABESSY.62%. steroid dan triterpenoid (n-heksana. Tambelo mengandung 9 asam amino esensial dan 8 asam amino non esensial.24%.37%.04%. dan besi 1373. fosfor 2363.77±2.41% dari berat protein.74%.33%. Asam amino esensial yang terdapat pada tambelo. stearat (C18:0) 3. palmitat (C16:0) 13. arginin 1. yaitu treonin 0.4 ppm.10%.01%. . pengujian aktivitas antioksidan.

. masyarakat menyebutnya tambelo ”koo” (Hardinsyah et al. 2007). dan moluska. ordo Teredinidae. Tambelo (Teredinidae) merupakan salah satu jenis hewan penggerek kayu yang hidup di dalam batang kayu bakau yang sudah lapuk dan membusuk yang dikelompokkan ke dalam filum bivalvia. tapi juga sebagai sumber bahan alami yang berpotensi sebagai bahan baku obat (Handayani et al. flu. Berdasarkan literatur. 2008). rumput laut. 2000). tambelo dikonsumsi oleh sebagian masyarakat Bangka yang disebut temilok brubus (Syaputra et al. Hasil penelitian menunjukkan banyak dari senyawa kimia tersebut berpotensi menghambat pertumbuhan bakteri dan aktif menghambat pertumbuhan sel kanker serta bioaktivitas lainnya (Edrada et al. 2006). Beberapa organisme laut mampu memproduksi senyawa kimia tersebut untuk mempertahankan dirinya dari serangan predator. dan vitalitas pria (Hardinsyah et al.1 PENDAHULUAN 1. Salah satu moluska yang telah dimanfaatkan selain sebagai bahan pangan juga digunakan sebagai obat alami adalah tambelo. malaria. seperti di Brasil Utara ”turu” (Teredinidae) sangat populer digunakan dalam pengobatan penyakit menular (Trindade-Silva et al. antara lain: sakit pinggang. Hal ini menjadikan perairan Indonesia memiliki potensi kekayaan alam laut yang besar dengan tingkat keragaman hayati yang tinggi. Organisme laut yang sudah dimanfaatkan sebagai bahan obat alami diantaranya spons. Di Philipina masyarakat menyebutnya tamilok (Betia 2011). Di Papua. Tambelo dipercaya dapat menyembuhkan penyakit. dimana di dalamnya terdapat berbagai jenis organisme laut. rematik. 2009). 2006). serta meningkatkan air susu ibu. nafsu makan. suku Kamoro Kabupaten Mimika berpendapat bahwa tambelo berkhasiat menyembuhkan penyakit. cacing laut. teripang. Senyawa kimia dengan bioaktivitas ini diduga dapat dimanfaatkan manusia sebagai bahan obat alami.1 Latar Belakang Indonesia sebagai negara kepulauan memiliki garis pantai lebih kurang 81000 km dan wilayah laut yang sangat luas. Di Papua. kelas Myoida. Pemanfaatan organisme laut ini tidak hanya terbatas sebagai bahan makanan. batuk.

Bacillus cereus dan Staphylococcus sciuri). Kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas di antaranya penuaan dini. tambelo disajikan sebagai makanan pembuka baik dalam keadaan mentah maupun dimasak/digoreng. kanker (Muchtadi 2000). Informasi yang dapat diperoleh dari penelitian terdahulu seperti Trindade-Silva et al. karena merupakan suatu kebiasaan yang sudah turun temurun dilakukan sejak nenek moyang mereka (Hardinsyah et al. acara peminangan dan lain – lain. . Kenyataan bahwa tambelo mampu memberikan efek menyehatkan bila dikonsumsi.2 Masyarakat Kamoro menggunakan tambelo diberbagai acara pesta adat misalnya acara pesta perkawinan. Tambelo adalah salah satu obat tradisional yang telah lama digunakan oleh masyarakat Papua. 2006). Informasi mengenai aktivitas antioksidan pada tambelo sampai saat ini belum ada. piring maupun lensa kaca. memberikan dugaan bahwa di dalam tubuh tambelo terdapat suatu komponen yang bersifat antioksidan. Antioksidan adalah suatu zat yang dapat menangkal pengaruh radikal bebas yang bila masuk ke dalam tubuh dapat menyebabkan kerusakan. proses mengantar mas kawin. sehingga perlu dilakukan penelitian senyawa antioksidan dari bahan tambelo (Bactronophorus thoracites). 1.2 Perumusan Masalah Tambelo (Bactronophorus thoracites) termasuk di dalam famili Teredinidae dan kelas bivalvia. Organisme ini mempunyai potensi ekonomis yang perlu diteliti tentang keberadaan kandungan komponen bioaktif yang terdapat di dalamnya. (2009) menunjukkan bahwa bakteri yang diisolasi dari insang tambelo Neo teredo reynei (Teredinidae) dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif (Sphingomonas. jantung koroner. Stenotrophomonas maltophilia. Pada saat pesta adat dilaksanakan. (1994) melaporkan bahwa enzim protease yang diisolasi dari bakteri yang terdapat dalam kelenjar dari tambelo Psiloteredo healdi (Teredinidae) bersifat sebagai deterjen pembersih lantai. Griffin et al. namun komposisi kimia dan senyawa antioksidan dari tambelo belum banyak diketahui.

mendapatkan aktivitas antioksidan dan fitokimia ekstrak tambelo.4 Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kandungan kimia dan bahan aktif yang dikandung dalam tubuh tambelo sebagai senyawa antioksidan sehingga dapat dimanfaatkan dalam bidang pangan fungsional atau nutraceutical. Tambelo (Bactronophorus thoracites) Pesta Adat Dikonsumsi oleh masyarakat Papua dimasak Direbus Makan mentah Sakit pinggang/rematik. Obat tradisional Analisis kimia : -. 1. . analisis proksimat -. flu malaria.5 Kerangka Pemikiran Berdasarkan latar belakang. 2006 Penelitian yg dilakukan oleh Juliana Gambar 1 Kerangka pemikiran. meningkatkan air susu ibu . analisis asam amino -.3 1. serta mengidentifikasi fraksi aktif senyawa antioksidan. perumusan masalah dan tujuan penelitian maka kerangka pemikiran yang disajikan pada Gambar 1. dan vitalis pria. analisis asam lemak -. batuk. 1. analisis mineral Ekstraksi tambelo Uji fitokimia Uji aktivitas antioksidan Fraksinasi ekstrak terpilih Uji antioksidan hasil fraksinasi - Identifikasi senyawa dengan LC-MS Penelitian yg dilakukan oleh Hardinsyah et al. nafsu makan.3 Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk memperoleh komposisi kimia tambelo segar dan kering.

4 .

Klasifikasi tambelo (Turner 1971) adalah sebagai berikut : Filum : Mollusca kelas Ordo Family Genus Spesies : Bivalvia : Myoida : Teredinidae : Bactronophorus : Bactronophorus thoracites . Lubang pada kayu biasanya dibuat tegak lurus terhadap serat kayu. Kepadatan tambelo tertinggi pada bulan Januari sampai April dan kepadatannya rendah pada bulan Juli (Filho et al. Bentuk morfologi tambelo disajikan pada Gambar 2.1 Tambelo Tambelo atau shipworm adalah hewan jenis moluska yang hidup di dalam pohon bakau yang telah membusuk. Dinding lubang pada kayu tersebut dilapisi dengan suatu subtansi yang mengandung kapur. sehingga panjangnya akan beberapa sentimeter saja dan diameternya kurang lebih dari 0.5 cm (Muslich et al. tergantung pada jenisnya. Tambelo mampu menggali lubang sepanjang 18 cm hingga 2 m (Waterbury et al. 1983). 1988). Tambelo berkembang normal di air dengan salinitas antara 10-30 ppm dan lebih banyak dijumpai di daerah tropis (Muslich et al. memanjang seperti cacing. 1988). Ciri-ciri fisik tambelo adalah tubuhnya lunak. 2008). kepalanya berbentuk bulan sabit yang dilengkapi dengan parut dan kikir yang berguna untuk membuat lubang. kemudian membelok sejajar dengan arah serat kayu. Panjang tubuh tambelo berkisar antara 30 hingga 100 cm dengan diameter antara 1 sampai 1. Tambelo dapat bertahan hidup antara satu hingga beberapa tahun.5 cm.2 TINJAUAN PUSTAKA 2. Keberadaan dan sifat tambelo sangat dipengaruhi oleh tipe habitat. perkembangan tubuhnya akan terbatas. Apabila populasinya terlalu tinggi. Terbentuknya lapisan yang mengandung kapur dihasilkan dari mantel shipworm (Ginuk 1987).

Tambelo yang tumbuh di mangrove Sonneratia sp dan Bruguiera sp. Menurut Mayabubun (2003). Pallet yang terletak pada bagian tubuh depan yang digunakan untuk memarut kayu.2 Potensi Tambelo Bagi Masyarakat Tambelo yang dimakan mentah dipercaya oleh masyarakat Papua lebih berkhasiat daripada direbus atau digoreng. Identifikasi tambelo didasarkan kepada bentuk cangkangnya yang berwarna putih (panjang ± 1 cm) digunakan untuk menutup mulut terowongan. 1 spesies genus Sonneratia dan 1 spesies termasuk dalam genus Bruguiera. . malaria. ada 4 spesies mangrove yang digunakan sebagai habitat dari tambelo yaitu 2 spesies dari genus Rhizophora. seperti disajikan pada Gambar 3. 1983). Bagian pertama adalah usus besar yang berfungsi untuk menampung serbuk kayu. meningkatkan air susu ibu. Cara masyarakat Papua mengkonsumsikan tambelo yaitu setelah tambelo diambil dari pohon bakau yang sudah membusuk.6 Gambar 2 Tambelo (Bactronophorus thoracites) Hewan ini memanfaatkan serbuk kayu makanan. tidak dikonsumsi oleh masyarakat suku Kamoro. 2. dan kejantanan bagi kaum lelaki. tambelo dijadikan sebagai makanan utama di berbagai acara pesta adat seperti pesta budaya Karapao Suku Kamoro. rematik flu. cangkang dan giginya dilepas dan langsung dimakan tanpa dibersihkan isi pencernaannya terlebih dahulu. batuk. Masyarakat Papua percaya bahwa sisa pencernaan dalam perut tambelo sangat berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit di antaranya sakit pinggang. nafsu makan. Perut tambelo terdiri dari dua bagian usus. sebab rasanya pahit dan tidak enak untuk dimakan. Pada masyarakat Kamoro. Bagian kedua adalah kelenjar pencernaan yang difungsikan untuk mencerna partikel-partikel kayu (Waterbury et al.

7 Gambar 3 Masyarakat Kamoro mengkonsumsi tambelo mentah (Sumber: Muller 2004) 2. dan N.O. sanitasi dan higiene.H. media perambatan impuls syaraf. Protein memiliki peranan penting dalam pembentukkan biomolekul daripada sebagai sumber energi. bila organisme sedang kekurangan energi. karbohidrat. alat pengangkut dan alat penyimpanan. Protein berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. dan pengendalian pertumbuhan (Winarno 1992). Kandungan energi protein rata-rata 4 kkal/g atau setara dengan kandungan energi karbohidrat (Sudarmadji et al. berperan sebagai enzim. Protein akan dipakai sebagai sumber energi. . dan air (Harper et al. 1989). mineral. seperti pemukiman. pengatur pergerakan. serta infeksi berulang yang pernah dialami tubuh (Effendi 2002). defisiensi energi protein (marasmus). Kekurangan protein pada anak saat lahir (kwashiorkor).3 Komposisi Kimia Zat gizi dibagi menjadi 5 kelas utama. atau gabungan keduanya dapat mengakibatkan kegagalan pertumbuhan ringan sampai sindrom klinis berat yang spesifik. penunjang mekanis. Keadaan tersebut tidak hanya dipengaruhi oleh asupan makanan. tetapi juga oleh keadaan lingkungan. 1988). pertahanan tubuh atau imunisasi. Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsurunsur C. Fungsi protein bagi tubuh adalah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada. lemak. yaitu protein.

Karbohidrat merupakan sumber kalori utama bagi hampir seluruh penduduk dunia. tekstur. dan karbohidrat rantai pendek (short chain carbohydrates/SC). Gula yang membentuk serat pangan adalah glukosa. Serat pangan atau dietary fiber adalah karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis (dicerna) oleh enzim pencernaan manusia. xylosa. misalnya rasa. dan akan sampai di usus besar (kolon) dalam keadaan utuh sehigga akan menjadi subtrat untuk fermentasi bakteri yang hidup di kolon. koma hepatik. sangat dianjurkan. seperti sayuran dan produk susu. galakturonat. . selain itu beberapa golongan karbohidrat menghasilkan serat (dietary fiber) yang berguna bagi pencernaan. khususnya bagi penduduk negara yang sedang berkembang. sedangkan serat pangan yang tidak larut akan memperbesar volume feses dan akan mengurangi waktu transitnya (bersifat laksatif lemah). galaktosa. arabinosa. Kondisi ini biasanya ditemukan pada pasien Konsumsi sumber protein selain daging. karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosisi. serta 4-o-metil-glukoronat (Muir 1999). mannose. dan gula asam seperti mannurinat. Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan makanan. dan asam amino aromatik (AAA) yang lebih rendah serta asam amino rantai cabang (BCAA) yang lebih tinggi dibandingkan dengan daging (Nelson et al. glukoronat. Kebanyakan jenis karbohidrat yang sampai ke kolon tanpa meliputi polisakarida yang bukan pati (non-starch polysacharides/NSP). Dalam tubuh. Serat pangan dapat diklasifikasikan berdasarkan struktur molekul dan kelarutannya. Sayuran dan produk susu mengandung metionin. 1994). rhamnosa. Karbohidrat merupakan sumber kalori yang murah. terhidrolisis.8 Pembatasan konsumsi protein pada penderita hati dilakukan apabila pasien mengalami intoleransi protein. dan beguna untuk membantu metabolisme lemak dan protein (Winarno 2008). Monomer dari serat pangan adalah gula netral dan gula asam. Serat pangan yang larut sangat mudah difermentasikan dan mempengaruhi metabolisme karbohidrat serta lipida. pemecahan protein tubuh yang berlebihan. kehilangan mineral. warna. pati yang resisten (resisten starch/RS).

Tingkat penyerapan relatif masing-masing asam amino adalah asam amino rantai cabang (valin. 1989). 2. Kadar abu ada hubungannya dengan mineral suatu bahan. Komponen mineral dalam suatu bahan sangat bervariasi baik macam dan jumlahnya (Sudarmadji et al. kemudian dilanjutkan sampai ke dalam pembuluh darah. yaitu asam amino esensial dan nonesensial. Asam amino esensial lebih mudah diserap dari asam amino non esensial. unsur organik akan menghilang dan bahan anorganik (abu) yang tersisa terdiri dari unsur-unsur mineral (Harper et al. Asam amino merupakan komponen utama penyusunan protein.9 Minyak atau lemak berfungsi sebagai sumber energi dan pelarut vitamin A. dan K serta merupakan sumber asam-asam lemak tak jenuh yang esensial. Asam amino glutamat dan aspartat paling lambat terserap (Linder 2006). Protein yang masuk dalam tubuh akan diubah menjadi asam amino. dan dibagi dalam dua kelompok. Asam amino esensial tidak dapat diproduksi dalam tubuh sehingga sering harus ditambahkan . terbentuk dari asam amino yang terikat bersama. yaitu linoleat dan linolenat (Sudarmadji et al. baik yang menguntungkan maupun tidak. leusin. 1989).E. 1989). Pada umumnya penguraian lemak dan minyak menghasilkan zat-zat yang tidak dapat dimakan. yaitu setiap asam mempunyai sedikitnya satu kelompok amino dan satu kelompok karboksil (Sudarmadji et al. 1988). Kerusakan lemak dan minyak menurunkan nilai gizi serta menyebabkan penyimpanan rasa dan bau yang bersangkutan. isoleusin) dan metionin lebih mudah diserap dari asam amino esensial lainnya. Proses absorpsi asam diamino lebih lambat dari pada asam amino netral (Poedjadi dan Supriyanti 2006). Perubahan-perubahan kimia atau penguraian lemak dan minyak dapat mempengaruhi bau dan rasa suatu bahan makanan. Abu adalah zat anorganik sisa hasil pembakaran suatu bahan organik.3. Susunan kimia asam amino bervariasi. tetapi terdapat dua hal yang sama. Asam amino tersebut akan diabsorpsi melalui dinding usus. Mineral digolongkan sebagai zat gizi anorganik atau disebut sebagai abu dalam pangan karena ternyata jika bahan pangan dibakar.1 Asam amino Protein merupakan molekul yang sangat besar.D. Kandungan abu dan komponennya tergantung pada macam bahan dan cara pengabuannya.

Metionin dan serin merupakan prekursor sintesis dan histidin yang diperlukan untuk sintesis histamin . fenilalanin. isoleusin. Asam amino umumnya berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air. Asam amino esensial yang dibutuhkan oleh tubuh manusia ialah histidin. Kelengkapan komposisi asam amino esensial merupakan parameter penting penciri kualitas protein (Astawan 2007). treonin. Selain fungsi tersebut hampir semua asam amino memiliki fungsi khusus. asam amino atau protein berfungsi sebagai zat pembangun. Kebutuhan metionin dapat disubtitusi dengan tirosin atau gabungan sistin dan fenilalanin (Linder 2006).10 dalam bentuk makanan. triptofan. Glutamin dan asparagin merupakan simpanan asam amino dalam tubuh. di dalam tubuh. Arginin terlibat dalam sintesis ureum dalam hati. yaitu menyediakan bahanbahan yang sangat berperan dalam proses pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan tubuh. Asam amino esensial merupakan pembangun protein tubuh yang harus berasal dari makanan atau tidak dapat dibentuk di dalam tubuh. Protein bekerja sebagai pengatur semua proses yang berlangsung di dalam tubuh dan sebagai sumber energi jika karbohidrat dan lemak tidak dapat mencukupi keperluan tubuh. metionin. contohnya tirosin merupakan prekursor yang membentuk pigmen kulit dan rambut. lisin. arginin. Asam amino merupakan unit pembangun protein. valin. sedangkan asam amino nonesensial dapat diproduksi dalam tubuh. Kebutuhan asam amino esensial bagi anak-anak relatif besar daripada orang dewasa (Poedjiadi dan Supriyanti 2006). namun tidak larut dalam pelarut organik nonpolar (Sitompul 2004). leusin. Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh disajikan pada Tabel 1.

Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ujung hidrokarbon nonpolar yang panjang. histidin merupakan asam amino esesnsial bagi anak-anak. ornitin. melanin dan tiroksin. poliamin.3. dan serotoninmetionin donor gugus metil untuk sintesis beberapa senyawa seperti kolin dan kreatin Sebagai pemula tirosin dan keduanya membentuk tiroksin dan epinefrin. Asam lemak adalah asam organik berantai panjang yang mempunyai 4-24atom. . 2. sumber NH3 Sebagai prekusor biosintesis purin dan neurotransmiteri Berfungsi untuk crosslinking protein (seperti dalam kolagen dan elastin) biosintesis karnitin merupakan donor grup metil untuk banyak proses sintetik Sebagai prekusor serotonin dan nikotinamid (vitamin B) Sebagai prekusor tirosin katekolamin. Fenilalanin Glisin Histidin Aspartat Glutamat Glisin Lisin Metionin Triptofan Tirosin Sumber: Poedjiadi dan Supriyanti (2006). melanin dan tiroksin Berperan pada sintesis profirin dari hemoglobin dan juga merupakan konstituen asam glikolat Bagi manusia.11 Tabel 1 Beberapa fungsi asam amino dalam tubuh Jenis asam amino Triptofan Peranan Sebagai pemula vitamin niasin. neurotransmiter α-aminobutirat (GABA). Berfungsi untuk biosintesis urea.2 Asam lemak Asam lemak merupakan komponen unit pembangunan yang sifatnya khas untuk setiap lipid. tetapi terdapat dalam bentuk terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipid berbeda. sitrulin yang ikut berperan dalam sinstesis urea dalam hati serta berfungsi sebagai prekursor tirosin katekolamin. sehingga hampir semua lipid bersifat tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak. arginin. ornitin. Asam lemak tidak terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan. prekursor glikogenik dan pirimidin Sebagai produk antara dalam reaksi interkonversi asam amino. prekusor prolin. yang dapat dibebaskan dari ikatan tersebut melalui hidrolisis kimia atau enzimatik. arginin.

Asam lemak yang terdiri dari rantai karbon yang mengikat semua hidrogen yang dapat diikatnya dinamakan asam lemak jenuh. asam lemak tak jenuh (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi populer. yaitu asam lemak rantai pendek (6 atom karbon atau kurang). sedangkan asam lemak tidak jenuh ganda mengandung dua atau lebih ikatan rangkap (polyunsaturated fatty acid=PUFA). minyak biji kapas. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. dan rantai sangat panjang (20 atom karbon atau lebih). rantai panjang (14-18 karbon). Lemak yang tersusun oleh asam lemak tidak jenuh akan bersifat cair pada suhu kamar.12 Asam lemak dibedakan menurut jumlah karbon yang dikandungnya. Salah satu jenis MUFA adalah omega-9 (oleat) yang memilki sifat lebih stabil dan lebih perannya dibandingkan PUFA. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh. sedangkan yang tersusun oleh lemak jenuh berbentuk padat (Almatsier 2009). rantai sedang (8 hingga 12 karbon). minyak kacang tanah. MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. Asam lemak yang mengandung satu atau lebih ikatan rangkap di mana sebetulnya dapat diikat tambahan atom hidrogen dinamakan asam lemak tidak jenuh. Sementara itu. Titik cair asam lemak meningkat dengan bertambah panjangnya rantai karbon. Semua lemak bahan makanan hewani dan sebagian besar minyak nabati mengandung asam lemak rantai panjang.dan meningkatkan K-HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. asam lemak rantai sangat panjang terdapat dalam minyak ikan. Penelitian yang dilakukan Mensink (1987) menyatakan bahwa MUFA dapat menurunkan LDL. lemak tak jenuh tunggal memiliki efek yang mengutungkan terhadap kolesterol dalam darah. dan canola. Asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) tergolong dalam asam lemak rantai panjang. Secara umum. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. Asam lemak tidak jenuh tunggal mengandung satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya (monounsaturates fatty acid=MUFA). minyak kedelai. Polysaturated fatty acid (PUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein (LDL) dan juga menurunkan high density lipoprotein (HDL). .

Asam lemak esensial adalah asam lemak yang dibutuhkan oleh tubuh untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan. Asam lemak esensial merupakan prekursor sekelompok senyawa eikosanoid yang mirip hormon. dan dokosaheksaenoat (DHA) dari asam linolenat. 2. sedikitnya 0. dan omega-3. fungsi kekebalan. tromboksan. yaitu prostaglandin. Turunan asam lemak arakidonat dari asam linoleat. Berdasarkan jumlahnya dalam tubuh manusia dibedakan menjadi dua.05% dari bobot tubuh dikenal sebagai makromineral. linoleat. Makromineral terdiri dari kalsium. kontraksi otot serta penyembuhan luka (Achadi 2010). sedangkan tubuh tidak dapat mensintesisnya. jagung. eikosapentaenoat (EPA). fosfor. Manfaat PUFA (asam lemak arakhidonat. Mineral yang terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup banyak. dan linolenat) antara lain berperan dalam transpor dan metabolisme lemak. Selain peranannya dalam pencegahan penyakit jantung koroner dan artritis. bahkan tetap cair pada suhu dingin karena titik lelehnya lebih rendah dibandingkan dengan MUFA. denyut jantung. tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA) yang banyak ditemukan pada minyak nabati atau sayur dan minyak ikan.3 Mineral Mineral termasuk ke dalam golongan nutrisi mikro dalam tubuh yang diperlukan dalam jumlah kecil. dan leukotien. Sumber alami PUFA yang penting bagi kesehatan adalah kacang-kacangan dan biji-bijian.13 Polyunsaturated fatty acid (PUFA) adalah asam lemak yang mengandung dua atau lebih ikatan rangkap. tetapi ketersediaan mineral harus tercukupi setiap harinya. . dan biji matahari. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron serta menurunkan produksi trigliserida dan poliprotein β (beta) di dalam hati. fungsi imun. Senyawa-senyawa ini mengatur tekanan darah. Asam lemak ini banyak ditemukan pada ikan dan bahan nabati. bersifat cair pada suhu kamar.3. Contoh PUFA adalah asam linoleat (omega-6). klorin. Kelompok asam lemak yang termasuk dalam jenis ini adalah asam alfa linoleat (omega-6) dan asam alfa linolenat (omega-3). mempertahankan fungsi dan integritas membran sel. magnesium. seperti bunga matahari. prostasiklin. asam lemak omega-3 penting untuk berfungsinya otak dan retina dengan baik. yaitu makromineral dan mikromineral. rangsangan sistem saraf.

14 kalium. kolinesterase. kalium. iodin. Kalium adalah basa utama yang terdapat di dalam jaringan dan sel-sel darah yang memegang peranan penting dalam pengaturan keseimbangan asam basa tubuh. 3) komponen senyawa tubuh yang esensial adalah hormon. 6) mengatur kontraktilitas otot. 4) memelihara keseimbangan air dalam tubuh. Sekitar 270 mg kalium berada di dalam sel yang . mangan. lipase. hemoglobin. flourin. pertumbuhan jaringan tubuh. natrium. 2) sebagai katalis untuk reaksi biologis. 5) transmisi impuls saraf. Kalsium merupakan salah satu faktor yang terpenting dalam pembekuan darah. Kalsium juga berperan dalam pembentukan tulang dan gigi. dan magnesium berperan dalam transmisi impuls-impuls serta kontraksi dan relaksasi otot (Muchtadi 1989). Kalsium berfungsi untuk mengatur transpor ion-ion menembus membran seluler dan diperlukan untuk aktivitas aktomiosin dan miosin ATP-ase. 1988. Sebanyak 98% kalium dalam tubuh berada di dalam intraseluler. dan suksinildehidrogenase. yang terdiri dari kobalt. serta mengaktifkan reaksi enzim dan sekresi hormon termasuk insulin oleh pankreas. dan seng (Harper et al. besi. 1988.05% dari bobot tubuh disebut sebagai mikromineral. tembaga. Kalsium diperlukan untuk memelihara otot dan syaraf dalam tubuh agar berfungsi normal dan membantu penyerapan vitamin B12 (Harper et al. asam lambung. Winarno 1992). b) Kalium (K) Hampir seluruh kegiatan di dalam tubuh dipengaruhi oleh perubahan kosentrasi kalium di dalam plasma. a) Kalsium (Ca) Kalsium diperlukan untuk pembentukan dan perkembangan tulang dan gigi. Gaman dan Sherrington 1992). enzim. Secara umum fungsi mineral bagi tubuh adalah sebagai berikut: 1) mempertahankan keseimbangan asam – basa dalam tubuh. Kalsium bersama dengan natrium. Mineral yang diketahui dibutuhkan oleh tubuh dan terdapat dalam jumlah yang lebih sedikit dari 0. Kalium juga berperan dalam penyampaian impuls-impuls saraf ke serat-serat otot dan juga dalam kemampuan otot untuk berkontraksi (Fregly 1988). dan 7). dan belerang.

Seng juga 1988. berperan dalam pengembangan fungsi reproduksi laki-laki dan pembentukkan sperma serta berperan dalam fungsi kekebalan. tetapi digunakan lagi untuk membuat sel-sel darah merah yang baru. Bila sel-sel darah merah melepaskan besi. Fosfor juga terdapat dalam semua sel hidup dan diperlukan untuk pelepasan energi. menstimulir sintesis fraksi heme atau globin. di dalam sumsum tulang. d) Besi (Fe) Sebagian besar besi terdapat dalam hemoglobin (pigmen darah merah yang terdapat dalam sel darah merah). c) Fosfor (P) Fosfor dan kalsium secara bersama-sama adalah penyusun tulang dan gigi yang sangat penting. hati. sebagai bagian dari enzim atau sebagai kofaktor pada kegiatan lebih dari dua ratus enzim. Diperlukan untuk sintesis fosfolipida untuk pembentukan myelin yang menyelimuti serat syaraf. yaitu dalam fungsi sel T dan dalam pembentukan antibodi oleh sel B (Almatsier 2009). Bersama vitamin C dapat mempertahankan aktivitas enzim-enzim yang tersangkut dalam sintesis elastin (protein dinding . Beberapa besi juga disimpan di dalam tubuh seperti dalam sumsum tulang. dan untuk proses pelepasan energi. terutama eritrosit diduga berperan dalam memusnahkan anion superoksida yang merusak. dan limpa sebagai senyawa kompleks dengan protein yang dikenal sebagai feritin (Harper et al. Enzim superoksida dismutase di dalam sitosol semua sel. Gaman dan Sherrington 1992).15 merupakan cairan kation yang mendominasi di dalam intrseluler (Groff dan Gropper 1990). e) Seng (Zn) Seng memegang peranan esensial dalam banyak fungsi tubuh. Fosfor terdapat dalam kebanyakan makanan dan defisiensi fosfor dalam susunan makanan belum pernah terjadi (Gaman dan Sherrington 1992). f) Tembaga (Cu) Fungsi tembaga dalam tubuh antara lain mencegah terjadinya anemia. serta melepaskan Fe simpanan dari ferritin dan hati. dengan cara membantu penyerapan Fe. Sebagai bagian dari enzim-enzim pernafasan misalnya sitokrom oksidase. besi tidak hilang dari tubuh.

menambah pamornya sebagai mineral yang bermanfaat besar untuk meningkatkan fungsi kekebalan tubuh manusia. seperti kanker. penyakit jantung.4 Komponen Bioaktif dari Moluska Invertebrata laut merupakan produsen senyawa bioaktif terbesar di antara biota lainnya. namun perempuan dewasa yang sedang hamil dianjurkan meningkatkan asupan selenium menjadi 60 µg per berat badan setiap hari. Sumber utama selenium adalah tumbuh-tumbuhan dan makanan laut (Conectique 2011).16 aorta) dan kolagen. yaitu kondisi sel yang rusak sebelum waktunya. 2. selenium berfungsi mempertahankan elastisitas jaringan dan bila kadar selenium berkurang maka tubuh akan mengalami penuaan dini. Tembaga bersifat toksik bila terdapat sebagai ion bebas. Tubuh setiap orang memiliki kemampuan untuk melawan radikal bebas yang bisa menghancurkan sel dan menimbulkan berbagai penyakit kronis. yaitu 70 µg per berat badan setiap hari. Di dalam tubuh. mempunyai prospek sebagai zat aktif dalam obat . Orang dewasa dianjurkan untuk mengkonsumsi sebanyak 55 µg per berat badan selenium setiap hari. dapat menyebabkan pusing dan muntah (Muchtadi 2009). Hasil penelitian belakangan ini yang memastikan bahwa selenium dapat mencegah kanker (termasuk kanker kulit akibat paparan matahari). Kebutuhan tersebut akan meningkat saat seorang ibu harus menyusui. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. sebagai bagian dari enzim tirosinase yang mengkatalisis konversi tirosin menjadi melanin. Beberapa metabolit sekunder yang diproduksi oleh invertebrata laut dan mikroorganisme simbion. Selenium diketahui memperbaiki sistem imunitas (kekebalan tubuh) dan fungsi kelenjar tiroid. dan penuaan dini. Konsumsi garam Cu dalam jumlah sepuluh kali lebih besar daripada yang terdapat dalam bahan pangan secara normal. tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Bersama vitamin E. g) Selenium (Se) Selenium adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas. selenium bekerja sama dengan vitamin E sebagai zat antioksidan untuk memperlambat oksidasi asam lemak tak jenuh.

panas. yaitu nilai IC50 sebesar 201. Hamman et al. Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak kijing Taiwan adalah kelompok alkaloid dan flavonoid. yaitu : a) inisiasi. b) propagasi dan c) terminasi. antivirus.52 ppm. (2008) diketahui bahwa ekstrak metanol kijing Taiwan yang berpotensi sebagai antioksidan. Hasil penelitian Salamah et al.17 untuk pengobatan penyakit. Pada tahap inisiasi terjadi pembentukan radikal bebas (R●) akibat reaksi antara asam lemak (RH) dengan beberapa katalisator. selanjutnya tahap terakhir adalah tahap terminasi ditandai dengan terbentuknya produk-produk non radikal seperti aldehida. Mekanisme oksidasi asam lemak tidak jenuh menurut Hamilton (1983) dan Gordon (1990) terdiri dari 3 tahap. Tahap propagasi terjadi akibat reaksi antara radikal bebas (R●) yang terbentuk pada tahap inisiasi dengan oksigen menghasilkan radikal peroksida (ROO●). Proses oksidasi tersebut biasanya terjadi dalam produk terutama yang berlemak dengan kandungan asam lemak tidak jenuh sehingga dapat menyebabkan kerusakan produk atau ketengikan. ion logam. alkohol dan asam-asam dengan karakteristik dan cita rasa tengik (Winarno 1984). seperti infeksi. immunologi. (1996) melaporkan telah mengisolasi kahalaide F dari kerang jenis Elysia rubefescens yang memiliki aktivitas sebagai antikanker usus dan prostat. dan cahaya. neurologi (parkinson. Moluska merupakan salah satu dari invertebrata laut yang diketahui menghasilkan metabolit sekunder dan sekaligus mempunyai peranan penting dalam ekologinya sehingga menjadi target bagi sumber senyawa bioaktif yang bermanfaat dalam dunia farmasi bahari. 2. misalnya oksigen. anti-inflammatory. penyakit jantung. alzheimer’s). memperlambat atau mencegah terjadinya proses oksidasi. Radikal peroksida yang terbentuk akan mengikat ion hidrogen dari molekul lemak yang lain membentuk hidroperoksida (ROOH) dan radikal lemak lain (R1). dan antikanker. Pertama adalah antioksidan yang mempunyai gugus fenol dan amina aromatik .5 Antioksidan dan Metode Pengukurannya Senyawa antioksidan secara umum didefinisikan oleh Schuler (1990) sebagai suatu senyawa kimia yang dapat menunda. Ranney (1979) mengklasifikasikan antioksidan atas tiga golongan berdasarkan prinsip kerjanya dalam mencegah terjadinya proses oksidasi. Penelitian mengenai metabolit sekunder dari moluska telah banyak dilakukan. keton.

Penggolongan ketiga ini sama dengan antioksidan sekunder menurut Winarno (1984) dan Gordon (1990). Antioksidan-antioksidan tersebut bekerja dengan cara berinteraksi dengan radikal bebas yang terdapat di dalam sistem dan membentuk produk subtrat non radikal dan suatu radikal antioksidan. metilen bisfenol dan difenilamin. maka radikal antioksidan tersebut tidak akan berperan sebagai inisiator dari berikutnya. tetapi tanpa melibatkan radikal bebas. butylated hydroxyanisole (BHA). Kedua produk yang dihasilkan pada kenyataannya mungkin bereaksi dengan radikal bebas kedua dalam sistem Mekanisme reaksi oksidasi lemak dapat dilihat sebagai berikut : Tahap inisiasi : ROOH ROOH 2ROOH Tahap propagasi : R● + O2 ROO● + R1 H Tahap terminasi : ROO● + R1 OO● R● + RO● ROO● RO● RO● + H● + OH + OH ROO● R1● + ROOH ROOH1 + O2 ROR1 Gambar 4 Mekanisme reaksi oksidasi lemak (Gordon 1990). tetapi penggunaan antioksidan sintetik banyak menimbulkan kekuatiran akan efek sampingnya karena telah banyak . Jika radikal antioksidan yang dihasilkan cukup stabil mencegah reaksi berikutnya. Kedua adalah antioksidan yang berfungsi dengan cara menghilangkan molekul-molekul hidroperoksida dari sistem. Antioksidan sintetik sangat efektif dalam menghambat reaksi oksidasi lemak akan. butylated hydroxytoluene (BHT). Ketiga adalah antioksidan yang dapat menginaktivasi logam yang bisa mempercepat terjadinya oksidasi. Penggolongan ini terdiri atas dua yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami. Molekul ini mengandung atom sulfur teroksidasi yang mampu bereaksi dengan molekul hidroperoksida berikutnya. Contoh antioksidan ini adalah dilauril tiodipropionat (DLTP). tertiarybutyl hydroquinon (TBHQ) dan tokoferol (Buck 1991). Propil galat. Beberapa antioksidan sintetik yang sering digunakan dalam industri pangan antara lain butylated hydroxytoluene (BHT).18 seperti butylated hydroxyanisole (BHA). Jenis penggolongan antioksidan yang lain berdasarkan sumber diperolehnya senyawa tersebut.

Jika senyawa ini masuk dalam tubuh manusia dan tidak terkendalikan dapat menyebabkan kerusakan fungsi sel. .19 penelitian tentang efek patologis yang ditimbulkannya. rasa dan warna pada lemak atau bahan pangan. Penggunaan bahan antioksidan baik alami maupun sintetik dalam bahan pangan.01-0. kumarin. Penurunan pada absorbsi dapat diukur secara spektrofotometrikal dan dibandingkan dengan sebuah kontrol etanol atau metanol untuk mengkakulasikan aktivitas scavenging radikal DPPH (Vattem dan Shetty 2006). Ketika sebuah antioksidan mampu mendonorkan hidrogen yang beraksi dengan radikal DPPH. dan inkubasi pada suhu kamar dimaksudkan untuk mengoptimumkan aktivitas DPPH. c) antioksidan yang merupakan senyawa eksogen yaitu dengan penambahan antioksidan yang diisolasi dari sumber alami (Pratt 1992).1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). Antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstrak bahan alami. Suratmo 2009). Senyawa DPPH dalam metode ini digunakan sebagai model radikal bebas. Ketaren 1986). yang memiliki rumus molekul C18H12N5O6 dan Mr=394. c) larut sempurna dalam lemak dan minyak. Radial bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil pada suhu kamar dan larut dalam pelarut seperti metanol atau etanol (Molyneux 2004. Ada beberapa metode pengukuran aktivitas antioksidan yang dapat digunakan salah satunya adalah metode 1. b) tidak menimbulkan flavor yang tidak enak. tokoferol (Sidik 1997). Pada uji ini metanol digunakan sebagai pelarut. d) efektif dalam jumlah yang relatif kecil menurut rekomendasi Food and Drug Administration dosis yang diizinkan dalam bahan pangan adalah 0. Adapun antioksidan yang terdapat di dalam bahan alami meliputi golongan senyawa turunan fenolat. Vattem dan Shetty 2006). reaksi ini akan memberikan peningkatan kompleks non radikal dan menurunkan radikal DPPH yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning. harus memenuhi persyaratan tertentu yaitu: a) tidak beracun dan tidak mempunyai efek fisiologis. turunan senyawa hidroksinat.1% dan e) tidak mahal serta selalu tersedia (Coppen 1983.33 (Molyneux 2004. b) antioksidan yang terbentuk akibat reaksi selama pengolahan. Antioksidan alami dalam bahan pangan diperoleh dari: a) antioksidan berupa senyawa endogen yang terdiri dari satu atau lebih senyawa yang terdapat dalam bahan pangan.

20

Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen, maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH, jika semua elektron pada radikal bebas DPPH berpasangan, maka warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm akan hilang. Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH disajikan pada Gambar 5. DPPH* Free radical + AH antioksidan DPPH-H neutral + A* new radical

Puplish color

Yellowish color

Gambar 5 Reaksi pengujian aktivitas antioksidan dengan DPPH (Munifah 2007). Parameter yang digunakan untuk menginterpretasikan hasil pengujian dengan metode DPPH adalah EC50 (efficient concentration) atau biasa disebut IC50 (inhibition concentration). Inhibition concentration (IC50) dapat didefinisikan sebagai kosentrasi larutan sampel yang akan menyebabkan reduksi terhadap aktivitas DPPH sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 0,05 mg/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 0,05-0,10 mg/mL, sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/mL, dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/mL (Blois 1958 diacu dalam Molyneux 2004).

21

3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian Sampel diambil dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Provinsi Papua Barat. Ekstraksi dan uji aktivitas antioksidan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan Pusat

Laboratorium Kimia Analitik, FMIPA, Institut Pertanian Bogor,

Laboratorium Terpadu IPB-Bogor. Identifikasi senyawa antioksidan dilakukan di Balai Pengkajian Bioteknologi (Biotech Center-BPPT), Serpong. Penelitian dilaksanakan dari bulan Agustus 2010 – Maret 2011. Gambar 6 menunjukkan diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa antiokksidan dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).
Tambelo kering Maserasi dengan MeOH Ekstraksi dengan MeOH Partisi dengan pelarut n-heksan, dan etil asetat Ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat, dan ekstrak metanol Uji Fitokima Uji antioksidan Ekstrak terplilih KLT Eluen terbaik Analisis kimia : - uji proksimat - uji asam amino - uji asam lemak - uji mineral

Kromatografi kolom

Uji Fitokima

Uji antioksidan Fraksi terpilih Identifikasi dengan LC-MC

Gambar 6 Diagram alir penelitian komposisi kimia dan senyawa dari ekstrak tambelo (Bactronophorus thoracites).

antioksidan

22

3.2 Bahan dan Alat Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah tambelo yang berasal dari perairan Andai, Kabupaten Manokwari, Propinsi Papua Barat. Tambelo diperoleh dari batang pohon mangrove Rhizopora yang sudah lapuk. Tambelo dibersihkan dengan melepaskan cangkang dan pallet kemudian dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. Tambelo kering selanjutnya digiling dengan menggunakan mortar dan disimpan pada suhu rendah (5-10 oC) sampai siap untuk dianalisis. Bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi adalah n-heksana, etil asetat, metanol, dan kertas saring Whatman 40. Bahan kimia yang digunakan untuk uji antioksidan adalah DPPH (1,1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl), BHT dan vitamin super ester C sebagai standar. Bahan untuk uji fitokimia adalah H2SO4, akuades, kloroform p.a (pengenceran), anhidra asetat, asam sulfat pekat, HCl 2N, pereaksi Dregendorff, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, serbuk magnesium, alkohol, HCl 37%, etanol 70%, FeCl3 5%, pereaksi Molish, pereaksi benedict, pereaksi biuret, dan larutan ninhidrin 0,1%. Peralatan utama yang digunakan adalah kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom (KK), spektrofotometer UV-Vis JENWAY 6305,

kromatografi cair (LC-MS) AGILENT TECHNOLOGIES, vacum rotary evaporator Buchi Rotavapor R-205, dan Spektrofotometer serapan atom (SSA) Shimazu-7000. 3.3 Prosedur Penelitian Penelitian ini terbagi atas dua tahap, yaitu 1) analisis komponen kimia tambelo, dan 2) Ekstraksi bahan aktif tambelo. Penelitian tahap pertama meliputi analisis rendemen, uji proksimat, asam lemak, asam amino, dan mineral. Tahap kedua meliputi ekstraksi bahan aktif dengan metode maserasi, partisi cair-cair, uji fitokimia, uji antioksidan dengan metode DPPH, dan identifikasi senyawa

antioksidan dari bahan aktif yang dihasilkan. 3.3.1 Penelitian tahap pertama Penelitian tahap pertama ini bertujuan untuk mendapatkan presentase bagian tubuh yang dapat dimanfaatkan dan memperoleh nilai kandungan gizi atau komposisi kimia dari tambelo. Analisis kandungan gizi terdiri dari analisis

a) Analisis kadar air (AOAC 2005) Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 102-105 o C selama 30 menit. Cawan tersebut diletakkan dalam desikator (kurang lebih 30 menit) hingga dingin kemudian ditimbang hingga beratnya konstan (A). kadar protein. kadar abu. uji kadar lemak menggunakan metode sokhlet. Cawan tersebut dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 102-105 oC selama 6 jam. Prinsipnya adalah pembakaran atau pengabuan bahan-bahan organik yang diuraikan menjadi . Rendemen merupakan presentase perbandingan antara bagian yang digunakan dengan berat utuh tambelo segar.1.3.1 Rendemen (Hustiany 2005) Tambelo dikeluarkan dari freezer. kemudian dimasukan kedalam cawan. dan karbohidrat. Cawan tersebut kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang bobotnya (C). analisis asam amino.2 Uji proksimat (AOAC 2005) Analisis proksimat yang dilakukan meliputi uji kadar air dan abu dengan metode oven. Tambelo ditimbang sebanyak 1-2 g (B).23 proksimat yang meliputi kadar air. Kadar air ditentukan dengan rumus: Keterangan: A = berat cawan kosong (gram) B = berat sampel sebelum dioven (gram) C = berat cawan berisi sampel setelah dioven (gram) b) Analisis kadar abu (AOAC 2005) Analisis kadar abu dilakukan menggunakan metode oven.3. serta asam lemak. 3. dicairkan kemudian ditimbang beratnya selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freezer dry. dengan rumus : 3.1. dan uji kadar protein menggunakan metode kjedahl. kadar lemak. Daging tembelo yang sudah kering ditimbang kembali untuk mengetahui penurunan berat setelah dikeringkan.

24 air (H2O) dan karbondioksida (CO2) tetapi zat anorganik tidak terbakar. Prosedur analisis kadar abu dalam bahan pangan adalah sebagai berikut: cawan abu porselin yang kosong dimasukkan ke dalam oven. Zat anorganik ini disebut abu. Homogenat sampel ditimbang 2 gram pada kertas timbang. sehingga diperoleh abu berwarna putih. destilasi. dan titrasi. kemudian dimasukan ke dalam labu . setelah selesai. Abu dibasahi (dilembabkan) dengan akuades secara bertahap. Kadar abu dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: A = Berat cawan kosong (gram) B = Berat sampel sebelum pengabuan (gram) C = Berat cawan berisi sample setelah pengabuan (gram) c) Analisis kadar protein (AOAC 2005) Penentuan kadar protein dilakukan dengan metode total nitrogen yang didasarkan pada reaksi penetralan asam basa. Kadar protein dihitung berdasarkan kesetimbangan reaksi kimia. Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari tiga tahap. Sampel dimasukan dalam kantong plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. kemudian cawan abu porselin kosong ditimbang untuk mengetahui bobot cawan kosong (A). Apabila abu belum putih benar harus dilakukan pengabuan kembali. Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang 2 gram dan dimasukan ke dalam cawan abu porselin ditimbang (B). yaitu destruksi. Cawan abu porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit. kemudian dikeringkan menggunakan hot plate dan diabukan kembali pada suhu 550-600 oC sampai diperoleh berat yang konstan. suhu tungku pengabuan diturunkan hingga suhu 40 oC. Tahapan destruksi adalah sebagai berikut: sampel dilumatkan dengan blender hingga partikelnya dapat melewati saringan 20 mesh. Suhu pengabuan diturunkan sampai ± 40 oC lalu dipindahkan cawan abu porselin ke dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang bobotnya (C) segera setelah dingin. Cawan porselin dikeluarkan dengan menggunakan penjepit dan masukan ke dalam desikator selama 30 menit. kemudian masukan ke dalam oven bersuhu 550-600 oC selama 24 jam atau sampai pengabuan sempurna.

Penetapan bobot lemak dihitung secara gravimetri. Destruksi dilakukan pada suhu 410 oC selama 2 jam atau sampai larutan jernih.25 destruksi. Labu yang berisi hasil destruksi dipasang pada rangkaian alat destilasi uap. Pelarut organik yang mengikat lemak selanjutnya dipisahkan dengan proses penguapan (evaporasi). sehingga hasil lemak tertinggal dalam labu. Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukan ke dalam wadah plastik atau gelas yang bersih dan bertutup. Sampel tersebut selanjutnya ditambahkan dua tablet katalis serta beberapa butir batu didih. Sampel ditambahkan 15 mL asam sulfat pekat (95-97%) dan 3 mL hidrogen peroksida secara perlahan dan didiamkan 10 menit dalam ruang asam. Apabila sampel tidak langsung . Tahap ketiga adalah titrasi hasil destilat dengan HCl 0. Kadar protein dapat dihitung dengan persamaan berikut : Keterangan : KP = Kadar Protein Va = mL HCl untuk titrasi sampel Vb = mL HCl untuk titrasi blanko N = Normalitas HCl yang digunakan W = berat sampel c) Analisis kadar lemak (AOAC 2005). posedur tahapan ini sebagai berikut: sebanyak 25 mL larutan H3BO3 4% yang mengandung indikator sebagai penampung destilat dimasukan dalam erlenmeyer. Sampel hasil destruksi didiamkan hingga mencapai suhu kamar dan tambahkan 50-75 mL akuades.2 N. Prinsip analisis kadar lemak diawali dengan melakukan pengekstrakan sampel dengan pelarut organik untuk mengeluarkan lemak dengan bantuan pemanasan pada suhu titik didih pelarut selama 8 jam. selanjutnya destilat ditampung ke dalam erlenmeyer tersebut hingga volume mencapai minimal 150 mL (hasil destilasi akan berubah menjadi kuning). Analisis standar blanko dilakukan seperti tahapan sampel. yang sudah dibakukan sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral. Tahap kedua adalah distilasi. kemudian ditambahkan 50-75 mL larutan natrium hidroksida dan natrium thiosulfat dan dilakukan destilasi.

Campuran lemak dan heksana dalam labu alas bulat dievaporasi sampai kering.26 dianalisis.3 Analisis asam amino (AOAC 1994) Komposisi asam amino ditentukan dengan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). batu didih dan lemak d) Analisis kadar karbohidrat (AOAC 2005) Perhitungan kadar karbohidrat dilakukan menggunakan metode by difference yaitu pengurangan 100 % dengan jumlah dari hasil empat komponen yaitu kadar air. lemak dan abu. maka dilakukan pengadukan ulangan dengan blender sebelum dilakukan pengamatan. Labu alas bulat yang berisi lemak ditimbang (C) sampai berat konstan. Perangkat HPLC sebelum digunakan harus dibilas dengan eluen yang akan digunakan selama 2-3 jam. Begitu pula dengan syringe yang akan digunakan juga harus dibilas dengan akuades. Berturut-turut dimasukan 150 mL n-heksana ke dalam labu alas bulat. protein. Perhitungannya sebagai berikut: % Karbohidrat = 100 % . Prosedur analisis asam . dan pasang rangkaian sokhlet dipasang dengan benar. Labu dan lemak didinginkan dalam desikator selama 30 menit.( % air + % lemak + % protein + % abu ) 3. Sampel dikondisikan pada suhu ruang dan pastikan sampel masih homogen sebelum ditimbang. maka disimpan dalam refrigerator sampai saatnya akan dianalisis. Kadar lemak dalam bahan pangan dapat dihitung berdasarkan persamaan berikut : Keterangan: KL = kadar lemak A = bobot contoh B = bobot labu lemak dan labu didih C = bobot labu lemak. Prosedur analisis lemak adalah sebagai berikut : labu alas bulat ditimbang dalam keadaan kosong (A). selongsong lemak ke dalam ekstractor soxhlet.3.1. Homogenat sampel ditimbang sebanyak 2 gram (B) dan masukan ke dalam selongsong lemak (ekstraction timbles). Labu alas bulat yang berisi lemak dimasukan ke dalam oven bersuhu 105 oC selama ± 2 jam untuk menghilangkan sisa n-heksana dan air. Apabila terjadi pemisahan cairan dan sampel. Ekstraksi dilakukan pada suhu 60 oC selama 8 jam.

5 μg) FB = faktor pengenceran ( 133. Metil ester asam lemak (FAME) ini dianalisis dengan alat kromatografi gas.27 amino menggunakan HPLC disajikan Gambar 7. sehingga suhu operasi biasanya lebih tinggi dari suhu kamar dan biasanya dilakukan derivatisasi untuk contoh yang sulit menguap. kemudian ditransformasi menjadi bentuk esternya yang bersifat lebih mudah menguap.1. Identifikasi tiap komponen dilakukan dengan .3.4 Analisis asam lemak (AOAC 1984) Kandungan asam lemak dapat ditentukan dengan metode gas kromatografi didasarkan pada partisi komponen-komponen dari suatu cairan di antara fasa gerak berupa gas dan fasa diam berupa zat padat atau cairan yang tidak mudah menguap yang melekat pada bahan pendukung inert.9x150 μm Kecepatan alir eluen : 1 ml/menit Tekanan Fasa gerak : 3000 psi : . Kondisi alat HPLC saat berlangsungnya analisis asam amino: Temperatur Jenis kolom : 27 oC (suhu ruang) : pico tag 3.1 mL) BM = bobot molekul dari masing-masing asam amino (g/mol) 3. Komponen-komponen yang dipisahkan harus mudah menguap pada suhu pemisahan yang dilakukan. Transformasi dilakukan dengan cara metilasi sehingga diperoleh metil ester asam lemak (FAME).Asetoniril 60% .Buffer fosfat 0. Tahapan analisis asam lemak diawali dengan menghidrolisis lemak/minyak dalam sampel menjadi asam lemak.1 M Detektor Panjang gelombang Derivatisasi Tipe injeksi Program : UV : 256 nm : derivatisasi pre-kolom : on column injection tanpa septum : isokratik (kecepatan aliran eluen konstan) Kandungan masing-masing asam amino pada bahan dapat dihitung dengan rumus: Keterangan : C = konsentrasi standar asam amino (2.

. Waktu retensi dihitung pada kertas rekorder sebagai jarak dari garis pada saat muncul puncak pelarut sampai ke tengah puncak komponen yang dipertimbangkan.45 mikron Injeksi ke alat HPLC Kromatogram Gambar 7 Prosedur analisis asam amino menggunakan HPLC. dan trietilamim dengan perbandingan 2:2:1) Pengeringan dengan gas N2 Hidrolisat protein kering Penambahan 30 μL larutan derivatisasi ( campuran antara metanol. natrium asetat.75 g Penambahan 5-10 ml HCl 6N Pemanasan dalam oven pada suhu 100 oC selama 24 jam Hidrolisat Protein Penyaringan dengan milipore berukuran 45 mikron Filtrat hidrolisat Penambahan 30 μL larutan pengering (campuran antara metanol. Tambelo kering 0. dan trietilamin dengan perbandingan 3:3:4) Pengenceran dengan buffer asetat sebanyak 200 μL lalu dibiarkan selama 20 menit Penyaringan dengan milipore berukuran 0.28 membandingkan waktu retensinya dengan standar pada kondisi analisis yang sama.75 g 0. pikoiotisianat.

29

a. Preparasi contohd (hidrolisis dan esterifikasi) Contoh lemak ditimbang sebanyak 20-30 mg, kemudia ditambahkan 1 mL larutan NaOH 0,5 N ke dalam metanol dan dipanaskan dalam penangas air selama 20 menit. Sebanyak 2 mL BF3 16% dan 5 mg/mL standar internal ditambahkan pada sampel tersebut, lalu dipanaskan lagi selama 20 menit dan selanjutnya didinginkan. Sampel kemudian ditambahkan 2 mL NaCl jenuh dan 1 mL n-heksana, lalu dikocok dengan baik. Lapisan heksana dipindahkan dengan

bantuan pipet tetes ke dalam tabung yang berisi 0,1 gram Na2SO4 anhidrat, dibiarkan 15 menit. kromatografi gas. b. Analisis komponen asam lemak dengan kromatografi gas Pelarut sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam kolom. Bila aliran gas pembawa dan sistem pemanasan sempurna, puncak pelarut akan nampak dalam kurang dari 1 menit. Sebanyak 5 µL campuran standar FAME diinjeksikan Fasa cair dipisahkan dan selanjutnya diinjeksikan ke

setelah pena kembali ke nol (baseline). Jika semua puncak sudah keluar, diinjeksikan 5 µL sampel yang telah dipreparasi (A). Waktu retensi dan puncak masing-masing komponen tersebut kemudian diukur. Jika rekorder dilengkapi dengan integrator, waktu retensi dan luas puncak langsung diperoleh dari integrator dan membandingkan waktu retensinya dengan standar untuk mendapatkan informasi mengenai jenis dari komponen-komponen dalam contoh. Jumlah dari masing-masing komponen dalam sampel dihitung menggunakan metode internal standar, dengan cara sebagai berikut :

Keterangan :
Cx Cs Ax As R = = = = = kosentrasi komponen x kosentrasi standar internal luas puncak komponen x luas puncak standar internal respon detektor terhadap komponen x relatif terhadap standar

30

Kondisi alat kromatografi gas pada saat dilakukan analisis : 1. Kolom 2. Dimensi kolom 3. Laju alir n2 4. Laju alir h2 5. Laju alir udara 6. Suhu injektor 7. Suhu detektor 8. Suhu kolom - Kolom temperatur : cyanopropil methylsil (kolom kapiler) : p=60m,ø dalam = 0.25 mm, 025 µm film tickness : 20 ml/menit : 30 ml/menit : 200 – 250 ml/menit : 200 oc : 230 oc : program temperatur : awal 190 oC diam 15 menit akhir 230 oC diam 20 menit 9. Ratio 10. Injeksi volum 11. Linier velocity 3.3.1.5 Analisis mineral Mineral yang dianalisis pada sampel tambelo meliputi mineral kalsium (Ca), kalium (K), magnesium (Mg), besi, (Fe), natrium (Na), mangan (Mn), klorida (Cl), seng (Zn), fospat, dan tembaga (Cu), dianalisis dengan metode spektrofotometer serapan atom (SSA). a. Analisis mineral kalsium (Ca), kalium (K), dan seng (Zn) (Yosida et al. 1972). Prinsip penentuan kadar kalsium, kalium dan seng adalah proses pelarutan sampel dengan asam klorida, kemudian absorbansinya diukur dengan : 1:8 : 1 µl : 20 cm.sec

menggunakan SSA. sebagai berikut:

Prosedur analisis mineral kalsium, kalium dan seng adalah

Sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram,

kemudian dihancurkan dan dimasukkan ke dalam gelas piala yang telah dibilas dengan HCl 1 N. Sampel ditambahkan dengan 25 mL HCl 1 N dan disimpan selama 24 jam. Setelah penyimpanan, sampel dikocok dengan shaker dan

disaring dengan kertas Whatman No.1. 1). Analisis mineral kalsium (Ca) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 1 mL, ditambahkan 2 mL larutan lantanum oksida dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 10 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL.

31

Larutan diukur absorbansi dengan SSA pada panjang gelombang 285,2 nm untuk magnesium dan 422,7 nm untuk kalsium. 2). Analisis mineral kalium (K) dan seng (Zn) Ekstrak sampel dipipet sebanyak 2 mL dan ditambahkan HCl 1 N sampai volume menjadi 40 mL, kemudian ditera dengan penambahan akuades sampai volume menjadi 50 mL. Larutan diukur absorbansi dengan AAS pada panjang gelombang 766,5 nm untuk kalium dan 213,9 nm untuk seng. b. Analisis mineral besi (Fe) Prinsip penentuan kadar besi adalah proses pelarutan bahan dengan larutan asam campur yang terdiri dari asam nitrat, asam sulfat dan asam perklorat, kemudian dilanjutkan dengan proses pemanasan. Prosedur analisis mineral besi adalah sebagai berikut: sampel yang telah kering ditimbang sebanyak 1-2 gram, kemudian dihancurkan. HNO3, H2SO4, Larutan asam campuran disiapkan yang dibuat dari Sampel yang telah

dan HClO4 dengan perbandingan 5:1:2.

hancur ditambah 10 mL larutan asam campur lalu dipanaskan di dalam ruang asam menggunakan api kecil selama 2 jam. Api dibesarkan sampai larutan

menjadi jernih. Kemudian didinginkan. Larutan ditambahkan akuades sampai volume 50 mL dan disaring dengan kertas saring pencucian asam Whatman No.1 (acid-washed filter paper whatman No.1). Sebanyak 10 mL ekstrak sampel ditambahkan 1 mL hidroquinon dan 1 mL orto-fenantrolin, kemudian ditambahkan sodium sitrat sampai pH menjadi 3,5. Larutan diencerkan dengan akuades sampai volume 50 mL dan dipanaskan dalam water bath selama 1 jam. Larutan deret standar diperlakukan dengan pereaksi yang sama dengan ekstrak sampel. Absorbansi diukur dengan SSA pada panjang gelombang 248,3 nm. c. Analisis mineral tembaga (Cu) dan mangan (Mn) (SNI 01-2362-1991) Prinsip dari penentuan kadar tembaga dan mangan adalah proses pengabuan dengan suhu 450 oC dengan penambahan asam nitrat (HNO3). Prosedur analisis sebagai berikut: sampel ditimbang sebanyak 25 gram dalam gelas piala 250 mL yang terdahulu dicuci dengan HNO3 6N. Sampel dikeringkan di dalam oven pengering pada suhu 110-125 oC selama 8-24 jam. Sample kering kemudian dipindahkan ke dalam tungku, dan atur suhu pada 250 oC. Suhu tunggu

3. Kenaikkan suhu kemudian dilanjutkan hingga 450 oC.42 yang sebelumnya telah dicuci dengan HNO3 10% dan akuades. . dan evaporasi. kemudian filtrat yang dihasilkan digabungkan dan dipekat dengan menggunakan rotary evaporator. Jika proses sampel abu belum putih sempurna. 3. Abu dilarutkan ke dalam 2 mL HNO3 pekat.32 dinaikkan secara bertahap hingga mencapai 350 oC selama periode 1-2 jam. kemudian dimaserasi dengan pelarut metanol (MeOH) sebanyak 2500 mL. Larutan standar. kemudian diencerkan dengan akuades hingga 25 mL dan didihkan di atas hot plate. Filtrat yang diperoleh kemudian diencerkan dengan akuades hingga 50 mL.3. Kondisi pada suhu ini dibiarkan sesaat untuk memberikan kesempatan sebagian besar lemak terbakar habis. maserasi. Sampel kering ditimbang sebanyak 500 gram. Abu yang dihasilkan harus benar-benar putih. serta uji fraksinasi dan identifikasi senyawa antioksidan.1 Ekstraksi bahan aktif Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi tambelo yaitu tiga macam pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya.3. etil asetat (semi polar). perbandingan 1:5 pada suhu ruang selama 3x24 jam. blanko dan contoh dialirkan ke dalam SSA. yaitu heksana (non polar). partisi. uji fitokimia. dan metanol (polar). sampel dikeluarkan dari tungku dan dinginkan. Sampel tersebut kemudian ditambahkan 0. apabila tidak proses penambahan asam nitrat harus diulangi. Absorbansi mineral Cu dan Mn masing-masing diukur dengan SSA pada panjang gelombang 324. Larutan disaring dengan kertas saring Whatman No.2 nm.7 nm dan Mn 285. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya proses pembakaran secara cepat yang menyebabkan contoh dapat terhambur keluar. uji aktivitas antioksidan. Sampel diletakkan diatas hot plate untuk menguapkan HNO3. Tahapan proses ekstraksi tambelo meliputi penghancuran sampel.2. Setiap 1 x 24 jam dilakukan penyaringan.2 Penelitian tahap kedua Penelitian yang dilakukan pada penelitian tahap kedua adalah ekstraksi bahan aktif.25-1 mL HNO3 pekat. dan dibiarkan selama semalam (16-24 jam). Ekstrak MeOH pekat dipartisi dengan n-heksana menggunakan corong pisah diulang sebanyak 3 kali. Sampel kemudian dipanaskan kembali pada suhu 450 oC di dalam tungku selama 30-60 menit.

diulang sebanyak 3 kali. rendemennya. aktif tambelo disajikan pada Gambar 8. Ebada et al. Fase etil asetat dikumpulkan dan dipekatkan. Diagram alir proses ekstraksi bahan Sampel (500 g) Maserasi 3x24 jam dengan MeOH perbandingan 1:5 Penyaringan Filtrat Evaporasi Ekstrak MeOH Dipartisi dengan n-Heksana Residu Fase n-heksana Evaporasi Fase MeOH Dipartisi dengan etil asetat Fase etil asetat Ekstrak n-Heksana Evaporasi Fase MeOH Evaporasi Ekstrak etil asetat Ekstrak MeOH Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif tambelo (Ebada et al. . Ekstrak MeOH setelah partisi n-heksana dipartisi kembali dengan etil asetat. rendemen. 1998.33 Fase n-heksana dikumpulkan dan dipekatkan dan dihitung rendemennya. 2008). 2008). lalu dihitung Ekstrak metanol sisa partisi dipekatkan kembali dan dihitung Semua ekstrak diuji fitokimia dan uji antioksidan (Miyaoka et al.

Filtratnya diuapkan kemudian ditambahkan eter.3.34 3. e) Uji Tanin Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan dalam 5 ml etanol ditambah dengan beberapa tetes pereaksi FeCl3 1 %. Terbentuknya warna hijau atau hijau biru menunjukkan adanya senyawa fenol dalam bahan. biru atau ungu. Lapisan eter yang terbentuk dipipet dan diletakkan papan uji (spot plate) dengan menambahkan pereaksi Liebermen Buchard (3 tetes asam asetat anhidrin dan 1 tetes H2SO4 pekat). jika terbentuk warna hijau adalah steroid dan warna merah adalah triterpenoid.2 Uji fitokimia (Departemen Kesehatan RI 1995) a) Uji alkaloid Sampel sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan 10 mL metanol dan beberapa tetes amoniak. b) Uji saponin Sebanyak 50 mg sampel ditambah dietil eter. dipisahkan dan ditambahkan 5 ml air kemudian dikocok sampai timbul busa yang stabil. Residu yang tidak larut dalam dietil eter diambil. c) Uji steroid/Triterpenoid Sampel sebanyak 1 gram ditambahkan 25 mL etanol 30% dipanaskan (50 oC) dan disaring. d) Uji Flavonoid Sebanyak 1 gram sampel ditambah metanol 30% sampai terendam kemudian dipanaskan. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5%. adanya flavonoid ditunjukkan oleh terbentuknya warna merah akibat penambahan H2SO4. Filtratnya ditaruh ke dalam spot plate (papan uji) kemudian ditambahkan H2SO4 pekat.2. dan Wagner. selanjutnya diamati warna yang terbentuk. Fraksi metanol dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2M. Meyer. Fraksi asam diambil kemudian ditambahkan pereaksi Dragendrof. . Adanya tannin ditunjukan dengan terbentuknya warna hijau. f) Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl3) Sebanyak 1 g sampel diekstrak dengan 20 ml etanol 70%.

40. dan untuk pembanding dengan masing-masing kosentrasi 4. Uji ini dilakukan terhadap ekstrak tambelo. dan 10 ppm.4 Fraksinasi senyawa antioksidan Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (ekstrak terpilih). Volume dicukupkan sampai 5 mL. Ekstrak tersebut masing-masing ditambahkan 200 μl larutan DPPH 1mM dalam metanol.3 Uji aktivitas antioksidan (Yeh dan Cen 1995) Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode perendaman radikal bebas DPPH (1. Metode yang digunakan ada dua macam. Persamaan ini digunakan untuk mencari Inhibition Concentration 50 % (IC50) dengan memasukkan angka 50 sebagai y sehingga didapatkan nilai x sebagai IC50. Prinsip kerjanya pada sampel (mengandung senyawa bersifat antioksidan) yang dapat meredam radikal bebas DPPH. Nilai kosentrasi dan hambatan ekstrak diplotkan masing-masing pada sumbu x dan y. kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit. Serapan sampel tersebut diukur pada panjang gelombang 515 nm. a) Kromatografi lapis tipis (KLT) Pada penelitian ini.35 3. Pengujian ini dilakukan sebanyak tiga kali ulangan.2. Persamaan regresi yang diperoleh dalam bentuk y = bx + a.2.3. dan 80 ppm). Hambatan dihitung dengan rumus. yaitu kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kolom (KK). Nilai absorbansi sampel diperoleh persentase penghambatan aktivitas radikal bebas. Persamaan regresi diperoleh dari hubungan antara kosentrasi sampel dan persentase penghambatan aktivitas radikal bebas.1-diphenyl-2-picrlhylhydrazyl) (Yeh dan Cen 1995). 8. 3. kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi. 6.3. pemilihan pelarut untuk fraksinasi dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada . 60. Butylated hydroxytoluene (BHT) dan vitamin super ester C digunakan sebagai kontrol positif. Ekstrak dilarutkan dalam metanol dan dibuat dalam berbagai konsentrasi ( 20.

Ekstrak terpilih sebanyak 0. lalu dilakukan penjenuhan silika gel dalam kolom selama 30-60 menit. Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT dapat disajikan pada Gambar 9. bagian atas kolom ditutup . Pada proses penjenuhan. l99l) Pelaksanaan kromatografi kolom dilakukan dengan memasang kolom pada statif secara tegak lurus. etil asetat. untuk memilih eluen terbaik dicoba dengan berbagai eluen n-heksana. pelarut heksan:etil asetat dengan perbandingan 8:2 dan n-heksana:kloroform (3:2). Pencucian kolom dilakukan dan pembuatan larutan silika gel (silika gel G40-63) yang akan dimasukkan ke dalam kolom sebelum ekstrak dimasukkan ke dalam kolom.02 gram dilarutkan dalam 0. Kombinasi pelarut yang menghasilkan pengembangan spot terbaik digunakan sebagai eluen untuk memfraksinasi ekstrak terpilih dengan kromatografi lapis tipis maupun kromatografi kolom. pelarut heksan : etil asetat dengan perbandingan 1:1 mL dan pelarut kloroform : metanol dengan perbandingan 17:3 mL. Kombinasi yang digunakan adalah pelarut kloroform:metanol dengan perbandingan 9:1 mL. b) Kromatografi kolom (KK) (Gritter et al. kloroform. Silika gel sebanyak 13-15 gram dilarutkan pada eluenn kloroform : metanol = 9:1 sehingga diperoleh larutan silika gel. Diagram alir fraksinasi dengan metode kromatografi kolom dapat dilihat pada Gambar 10. Kolom diberi glasswool pada bagian bawahnya. Semua larutan silika gel masuk ke dalam kolom. Larutan ekstrak tersebut kemudian ditotolkan pada plat silika gel 60 F254 dengan panjang l0 cm. dan metanol.5 mL pelarutnya. Ekstrak aktif KLT (silika gel) CHCl3:MeOH 9:1ml CHCl3:MeOH Heksan:EtOH 1:1ml 17:3 ml Heksan:EtOH 8:2ml Heksan :CHCl3 3:2 ml terbentuknya spot terbanyak Gambar 9 Diagram alir fraksinasi dengan metode KLT.36 kromatografi lapis tipis (KLT).

Larutan yang keluar dari kolom ditampung pada tabung reaksi dengan masing-masing tabung reaksi berisi ± 3 mL. dan setiap fraksi penggabungan yang terbentuk dikeringkan dengan aerator di ruang asam. dihitung rendamennya. Silika gel harus jenuh sebelum ekstrak dimasukkan dan setelah silika gel jenuh maka kran kolom dibagian bawah kolom dibuka kembali setelah semua ekstrak masuk ke dalam kolom.37 dengan aluminium foil untuk mencegah penguapan eluen yang terdapat dalam kolom sehingga silika gel tetap dalam kondisi basah. Ekstrak dibiarkan mengalir ke bagian penjerap kolom dan kolom terus diisi agar silika gel tidak kering. Fraksi hasil kromatografi Kolom (KK) dilakukan pengujian KLT untuk penggabungan fraksi dengan mengacu pada kesamaan pola kromatogram. Larutan dalam tabung reaksi kemudian dikeringkan untuk menghasilkan residu ekstrak. serta diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH (Yeh dan Cen 1995). Larutan silica gel + eluen 1: 1 (w/v) Larutan silika gel dimasukkan ke dalam kolom Pembuatan larutan ekstrak terpilih 1 g ekstrak terpilih + 3 ml eluen Dijenuhkan selama 30-60 menit Eluen dikeluarkan (silica gel tidak boleh kering) Larutan ektrak terpilih dimasukkan ke dalam kolom Kran dibuka Kolom terus dialiri eluen Larutan ditampung pada tabung reaksi (±10 ml) Ekstrak aktif Gambar 10 Diagram alir fraksinasi dengan kromatografi kolom. Ekstrak yang akan difraksinasi adalah ekstrak terpilih sebesar 1 gram dan dilarutkan pada pelarut asal sebanyak 3 mL. .

1988) Fraksi terpilih dengan nilai aktivitas antioksidan yang tertinggi dilanjutkan dengan mengidentifikasi senyawa antioksidan menggunakan Liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) Agilent Technologies dilakukan untuk mendapatkan bobot molekul dan rumus molekul yang sangat membantu dalam elusidasi struktur molekul.5 Identifikasi senyawa antioksidan (Willard et al. Analisis yang dilakukan pada tahap identifikasi senyawa aktif.38 3.2. yaitu memilih senyawa yang memiliki puncak tinggi. . kemudian dicocokkan dengan senyawa yang ada pada database MarinLit (Blunt and Blunt 2008).3.

1.95 5.21±0.88 30.04 4.2 Kandungan proksimat tambelo Hasil analisis proksimat dari daging segar tambelo dan serbuk kering tambelo.83 21 Sumber : a Syaputra (2007) .00 % Berat kering 22.08 14.04 7. Tabel 3 Kandungan proksimat daging tambelo Proksimat (%) Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Segar Tambelo 82. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi nilai ekonomisnya sehingga lebih efektif. protein.88±1.62 b Temilok 73.1. Tabel 2 Rendemen daging tambelo Sampel Tambelo utuh Daging tambelo Berat segar 2200 gram 40. Jumlah rendemen setelah dikeringkan sebesar 22.01 7.27±0. Waranmaselembun (2007) Kadar air merupakan jumlah air yang terkandung di dalam bahan pangan dan ikut menentukan kesegaran dan daya awet bahan pangan tersebut.27 7.05 17.45±2.60 1.72±0.77±2.00% dan setelah dikeringkan rendemen berubah menjadi semakin kecil yang disebabkan banyaknya kandungan air yang menguap. Kandungan proksimat daging tambelo dapat dilihat pada Tabel 3.63±0.8 42.1 Rendemen daging tambelo Hasil pengukuran rendemen daging tambelo pada Tabel 2 menunjukkan bahwa tambelo segar setelah preparasi 40.01 56.4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.73%.1 Penelitian Tahap Pertama 4.29 4. Kadar air .31 0. abu.07±0.04 2. meliputi kadar air.01 7. lemak.22 5.28±0. air akan tersublimasi dan bahan yang tidak tersublimasi berubah menjadi padat atau kering.02 a Kering Tambelo Kerang mas ngur b 6. dan karbohidrat. Penurunan rendemen tambelo disebabkan penguapan kandungan air akibat bahan mengalami tekanan vakum yang sangat tinggi setelah dibekukan.72±0. Hal ini juga menunjukkan bahwa organisme perairan termasuk tambelo dan ikan ini memiliki kandungan air yang tinggi sehingga diperlukan penanganan yang bagus untuk mengurangi kerusakan pada bahan beku.73 % 4.

Protein merupakan zat gizi yang sangat penting bagi tubuh. dan transpor zat gizi dalam tubuh. Kandungan protein pada tambelo kering berasal dari plankton yang merupakan salah satu makanan bagi tambelo. setelah mengalami pengeringan dengan freeze dry.60%.72%. pembentukan antibodi dan proses detoksifikasi. Hasil analisis proksimat kadar air tambelo segar adalah 82.63%.77%. sehingga tambelo segar menjadi kering. kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada bahan pangan yang dapat mempercepat pembusukkan (Winarno 1997). kadar air tambelo kering menjadi 6. Hal ini karena air yang terdapat pada tambelo segar tersublimasi akibat adanya tekanan vakum. Protein dalam plasma (serum) darah dapat juga berfungsi sebagai antioksidan (Mucthadi 2009). Fungsi utama protein bagi tubuh adalah untuk pertumbuhan dan pemeliharaan jaringan. bahan pengumpal darah). karena selain sebagai sumber energi.40 yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri. Kadar protein pada tambelo segar adalah 7. Hal ini bertujuan agar proses ekstraksi dapat berjalan lancar (Setyowati 2009). . Hal ini menunjukkan bahwa sampel kering memiliki kadar air yang cukup baik untuk dilakukan proses ekstraksi karena semakin rendah nilai kadar air bahan maka semakin memudahkan pelarut untuk mengekstrak komponen senyawa aktif yang diinginkan. sedangkan kadar protein tambelo kering sebesar 42.63%. mempertahankan netralitas tubuh. regulasi keseimbangan air dalam tubuh.31%. Plankton diketahui sebagai sumber protein sekaligus simbion dalam sistem pencernaan pada tambelo. hemoglobin. protein berfungsi sebagai zat pembangun tubuh dan zat pengatur di dalam tubuh. pembentukan senyawa esensial (hormon. Kadar air tambelo kering pada hasil penelitian ini memiliki kadar air dibawah kadar air maksimum yang diisyaratkan untuk proses ekstraksi. Hasil perhitungan nilai rata-rata proksimat dapat dilihat pada Lampiran 1. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Syahputra (2007) yang menunjukkan bahwa kadar air temilok segar sebesar 73. sedangkan kadar air tambelo setelah dikeringkan sebesar 6. Kadar air yang bahan untuk ekstraksi diisyaratkan sebesar 11%. enzim.

Lemak merupakan sumber yang dapat menyediakan energi sekitar 2. Sebagian besar bahan makanan. dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL (Muchtadi 2009). Peranan lemak ikan dalam mencegah timbulnya penyakit jantung koroner telah dibuktikan.28%. Peranan berbagai unsur mineral bagi manusia masih belum sepenuhnya diketahui (Winarno. Abu adalah zat anorganik.88%.1997). Ikan menyimpan cadangan energi dalam bentuk lemak di dalam hatinya (lebih dari 50% berat hatinya). sisa hasil pembakaran suatu bahan organik. Berdasarkan hasil analisis proksimat pada tambelo kering memiliki karbohidrat yang relatif lebih tinggi . lebih kecil dari temilok 4.88% lebih kecil dari kerang mas ngur 7.26%.41 Hasil analisis kadar lemak dari tambelo segar adalah 0. Elemen-elemen mineral telah jelas diketahui fungsinya pada makanan ternak. Lemak adalah bentuk energi berlebih yang disimpan oleh hewan sehingga jumlah lemak dalam hewan yang dijadikan bahan pangan ditentukan oleh keseimbangan energi hewan tersebut.05% dan kandungan abu pada tambelo kering 5. yaitu sekitar 96% terdiri dari bahan organik dan air. yang terkenal dengan sebutan asam lemak omega 3.25 kali lebih banyak daripada yang diberikan oleh karbohidrat atau protein.29%). Unsur mineral juga dikenal sebagai zat organik atau kadar abu. Hal ini terutama karena peranan asam lemak eikosapentaenoat (EPA) dan dokosaheksaenoat (DHA). belum banyak penelitian sejenis dilakukan pada manusia. Tabel 3 menunjukkan bahwa kandungan abu dalam tambelo segar 2. Pada proses pembakaran. Karbohidrat merupakan bagian terbesar dari senyawa organik. sedangkan kadar lemak pada tambelo kering sebesar 14. Peranan lemak dalam bahan pangan yang utama adalah sebagai sumber energi. jika dibandingkan dengan literatur yang ada maka nilai hasil analisis memiliki nilai yang tidak jauh berbeda.07%. kadar lemak tambelo lebih rendah dibandingkan dengan kadar lemak temilok segar (4.unsur mineral. karena itulah disebut abu. bahan-bahan organik terbakar tetapi zat anorganiknya tidak. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Syahputra (2007). sisanya terdiri dari unsur. hal ini disebabkan karbohidrat merupakan bahan pembentukan tumbuh-tumbuhan dan juga terdapat pada hewan dalam jumlah tertentu.

41 0. sedangkan asam amino isoleusin yang terendah (0.00 3. sedangkan kromatogram standar asam amino dapat dilihat pada Lampiran 3 dan kromatogram asam amino tambelo pada lampiran 4.00 1.85 1.63 1.29 1.55%). Pada prinsipnya suatu protein yang dapat menyediakan asam amino esensial dalam suatu perbandingan yang dapat menyamai kebutuhan manusia dikatakan mempunyai mutu yang tinggi.19 0.26 0.80 1.1.56 1.50 3. karena sebagian besar juga makanan yang diperolehnya berasal dari kayu bakau sehingga sistem pencernaannya dapat memanfaatkan selulosa dan lignin pada kayu bakau. Tambelo mengandung 17 jenis asam amino.44%.01 Jenis Asam Amino Gambar 11 Histogram kandungan asam amino dari tambelo. Hal ini diduga bahwa tambelo menyimpan hasil pencernaan dalam bentuk glikogen.55 2. sebaliknya protein yang kurang satu atau lebih asam-asam amino esensial mempunyai mutu yang rendah (Winarno 2008).42 30.41 1.34 0.50 2. Jenis asam amino yang tertinggi dalam tambelo adalah asam glutamat (3.74 1.3 Kandungan asam amino tambelo Mutu protein dinilai dari perbandingan asam-asam amino yang terkandung di dalam protein tersebut. .72 1.37 0.00 3.81 1. 4.50 0. Kadar Asam Amino (%) 4.00 0.00 2. Asam amino merupakan monomolekul dari protein yang memiliki fungsi penting bagi organisme hidup.34%).50 1. Kandungan asam amino dari tambelo disajikan dalam Gambar 10.25 0. Hal ini diperkuat oleh Purchon (1968) yang mengatakan bahwa sistem pencernaan yang dimiliki oleh shipworm atau tambelo mampu mencerna selulosa 80% dan lignin 45 dan pada umumnya kerang-kerangan menyimpan hasil pencernaannya dalam bentuk glikogen (gula otot) dan lemak.

AAE = asam amino esensial.56 0.56 14.44 8.58 6.92 26. asam amino basa. asam amino non esensial.81 8. asam amino aromatik. AAHb = asam amino hidrofobik.68 AANE = asam amino non esensial.80 1.64 1. dan asam amino hidrofobik.25 1.19 1.61 2.20 28.74 1. AAB = asam amino basa. Asam glutamat bermanfaat untuk menahan konsumsi alkohol berlebih.01 1.19 5.84 20. asam amino sulfur.81 1.56 1.72 0.52 66.80 1.19 1.56 0.56 0. Kajian-kajian menggunakan isotop-isotop stabil menunjukkan bahwa usus mendapatkan sebagian besar energi .63 1.34 1. Menurut the international glutamate information service (IGIS). AAN = asam amino netral. Asam glutamat adalah asam amino non esensial yang dapat disintesis dari gugus amida pada molekul glutamin yang diubah menjadi karboksilat melalui proses hidrolisis asam atau basa. AAS = Asam amino sulfur. asam amio netral. dapat disajikan pada Tabel 4. Tabel 4 Klasifikasi asam amino berdasarkan sifat fisik dan kimia dari tambelo Jenis asam amino Aspartat Glutamat Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein Histidin Treonin Ariginin Valin Metionin Isoleusin Leusin Fenilalanin Lisin TOTAL % dalam total asam amino Klasifikasi asam amino (% berat protein) AAE AANE AAA AAB AAN AAR AAS AAHi 2.74 40. meningkatkan kesehatan mental dan meredam depresi (Linder 1992). glutamat yang berasal dari makanan merupakan sumber energi utama bagi usus.72 0.01 0.62 9.19 1.25 1. asam amino asam.63 0.29 0.26 1.85 3.85 2.43 Kandungan asam amino yang terdapat di dalam tambelo diklasifikasikan menjadi sembilan jenis asam amino yang terdiri dari asam amino esensial.72 0.29 0.41 0. AAR= asam amino aromatik.74 1.01 1.55 1.97 13. AAHi = asam amino hidrofilik.72 0.29 1.80 1.91 0. AAA = asam amino asam.43 AAHb 1.4 4.74 1.25 1.82 43.55 3.26 1. asam amino hidrofilik.55 3.37 1.85 2.42 61.26 1.81 1.63 1.41 1. mempercepat penyembuhan luka pada usus.

dan telah diperlihatkan bahwa semua glutamat yang dimakan dari bahan makanan hanya 4 % yang keluar dari tubuh. Usus merupakan garis pertahanan pertama tubuh karena dari semua organ pencernaan.44 dari metabolisme asam amino. alkohol dan unsur-unsur lain yang dapat membahayakan tubuh. alanin. dan treonin. Keterkaitan dengan pengunaan tambelo sebagai obat tradisional maka ditinjau dari komposisi asam amino yang diperoleh dapat dijelaskan bahwa umumnya asam-asam amino ini mempunyai kegunaan besar bagi kesehatan manusia. usus mempunyai kontak terbesar dengan lingkungan eksternal dalam bentuk makanan. valin. phenilalanin. Metionin merupakan suatu antioksidan yang baik karena dapat mensuplai belerang. Asam-asam amino hasil pemecahan protein sebelum ditransportasikan ke hati terlebih dahulu diabsorbsi melalui sel-sel mukosa usus dan selanjutnya di serap oleh vena untuk kemudian ditranspor ke hati. baik secara langsung maupun tidak langsung di antaranya adalah metionin. Usus sangat membutuhkan glutamat. isoleusin. menginaktifkan radikal bebas. histidin. Glutamat yang berasal dari makanan diperlukan bersama dengan sistin dan glisin untuk produksi glutathion. prolin. Sistin juga diperlukan untuk kesehatan kulit. Glutamat bersama dengan glutamin merupakan asam amino yang paling berlimpah dari 20 jenis asam amino yang mencapai 20 persen dari asam-asam amino pada usus (the international glutamate information service). sistin. Sistin merupakan penghasil taurin yaitu suatu komponen gliutathion. Metionin juga merupakan prekusor sistin yang merupakan asam amino penghasil glutathion untuk detoksifikasi di hati. sistin digunakan untuk memperoduksi hati dan mencegah atau meredakan penyakit yang berbahaya (Cat 2000). Secara medis. asam glutamat. Beberapa asam amino ini secara umum mempunyai kegunaan besar untuk kesehatan manusia. Glutathion merupakan pelindung otak dan hati dari kerusakan akibat obat atau racun. dan juga merupakan salah satu amino yang . leusin. lisin. asam aspartat. detoksifikasi dari tubuh (dalam kaitannya dengan sulfur) serta penghasil kolagen yang digunakan untuk kekenyalan kulit dan tekstur. dan membantu meningkatkan daya ingat. glisin. suatu molekul antioksidan yang memainkan peranan penting dalam mekanisme daya tahan tubuh serta perbaikan kerusakan sel dan jaringan tubuh.

dan membantu dalam pembentukan hemoglobin serta merupakan pertahanan utama tubuh untuk melawan infeksi akibat luka. Valin bermanfaat dalam pertumbuhan dan perbaikan jaringan otot serta menjaga keseimbangan nitrogen dan mengatur penggunaan glukosa. Valin merupakan salah satu dari tiga asam amino rantai cabang (yang lain adalah leusin dan isoleusin) yang meningkatkan energi.45 diperlukan untuk pembuatan creatine monohydrate di dalam tubuh. dan membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). otak dan sistem saraf pusat. histidin digunakan dalam mengobati radang sendi dan ketulian saraf. meningkatkan daya tahan tubuh. Penambahan valin harus selalu dikombinasikan dengan isoleusin dan leusin pada rasio miligram (Bonderud 2011). pertumbuhan yang lambat. Histidin berperan penting dalam pemeliharaan dan pembuatan glial sel saraf yang disebut oligo-dendrocytes (selendang atau pembungkus) dan mencegah kerusakan otak dan jaringan saraf dalam tulang punggung. membantu dalam metabolisme gula dan asam organi. dan meningkatkan produksi hormon pertumbuhan. Isoleusin bermanfaat dalam mempercepat penyembuhan luka. dan edema. Secara medis. memperbaiki jaringan otot. tulang dan otot serta membantu dalam penyembuhan luka. yaitu suatu campuran yang penting untuk menghasilkan energi dan pertumbuhan otot dan pergerakan tubuh. Kekurangan metionin dapat menyebabkan akumulasi lemak di hati. Histidin di dalam tubuh diperlukan untuk pertumbuhan dan perbaikan dari semua jenis jaringan. Leusin bermanfaat . mengatur gula darah. Alanin merupakan sebuah sumber penting energi untuk jaringan otot. radang sendi. membantu proses pemulihan. yang mana histidin akan membentuk sistem imun sebagai respon terhadap suatu reaksi alergi. Histidin merupakan suatu prekusor asam amino non esensial. menurunkan kadar gula darah. mengatur energi. Metionin juga dapat berperan dalam menstabilkan lemak. Secara medis. metionin digunakan untuk gangguan depresi. Leusin bermanfaat dalam pengaturan gula darah. lemah. luka mengkerut. dan penyakit hati atau liver (Cat 2006). pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. dan sebagai antioksidan. membuat pencernaan menjadi lebih baik. memperkuat sistem kekebalan tubuh dengan memproduksi antibodi.

Apabila fungsi hati terganggu maka akan berdampak pada terganggunya proses metabolisme tersebut. meningkatkan sistem imun. menghambat pertumbuhan sel tumor dan kanker serta membantu pelepasan hormon pertumbuhan (Supamas 2011). tidak berselera dan hilang kosentrasi (Cat 2006). Kekurangan phenilalanin akan menyebabkan tubuh lemah. tulang dan otot . Hati mempunyai fungsi untuk melakukan metabolisme protein. membantu kerja hati dan fungsi lipotropiknya. Arginin penting untuk kesehatan reproduksi pria karena 80% cairan semen terdiri dari arginin. Lisin juga bermanfaat dalam menjaga keseimbangan nitrogen serta membantu menjaga badan pada saat stress berat dan kondisi yang melelahkan. pertumbuhan dan perbaikan jaringan kulit. berat badan menurun. Tabel 5 menunjukkan skor kimia asam amino esensial tambelo dengan cara melakukan perbandingan antara asam amino protein esensial tambelo dengan . Penderita gangguan hati. membantu dalam penyembuhan luka. Fenilalanin secara medis digunakan untuk perawatan radang sendi dan depresi. dan manfaatnya untuk cardiovascular meliputi pemeliharaan kesehatan pembuluh darah. kerontokan rambut. untuk penyerapan kalsium serta pembentukan tulang dan pertumbuhan otot seperti mobilisasi lemak untuk digunakan sebagai energi. seperti sakit liver membutuhkan makanan yang tinggi protein dan karbohidrat serta lemak dengan kadar yang sedang karena hal ini akan meringankan kerja hati untuk memperoleh energi yang besar untuk aktivitasnya (Carroli et al. Lisin juga diperlukan dalam membentuk antibody.46 dalam pengaturan gula darah. kolagen dan untuk memperbaiki jaringan yang rusak dan juga membantu dalam membangun protein otot yang baru. testosteron. dan karbohidrat. kehilangan energi. Lisin digunakan di dalam tubuh kerusakan hati dan pertumbuhan terhambat. hormone (GH. Kekurangan lisin akan menyebabkan kekacauan enzim. Treonin bermanfaat dalam mencegah penumpukan lemak di hati. Kekurangan treonin akan menyebabkan warna kulit menjadi tidak normal. 2006). mengatur energi serta membantu penguraian di dalam otot (Cat 2006). Arginin berperan dalam membantu detoksiifikasi hati pada sirosis hati dan fatty liver. enzim. lesu. hormon insulin). lemak.

33 8. Kromatogram standar asam lemak disajikan pada Lampiran 5. Berdasarkan analisis kualitatif.65 30.16 Referesi FAO (1991) (mg/g prot) 40 70 55 35 60 40 50 Skor kimia amino esensial (%) 19. Berdasarkan hasil pengamatan.32 Isoleusin Leusin Lisin Metionin Fenilalanin + tirosin Treonin Valin Keterangan : tritofan bukan asam amino pembatas sehingga tidak dilakukan analisis 4.63% sehingga diperoleh skor kimia protein tambelo sebesar 19. baik yang berasal dari hewan atau tumbuhan.94 37. 5 jenis asam lemak tidak jenuh tunggal atau monounsaturated fatty acid (MUFA) dan 3 jenis asam lemak jenuh ganda atau polyunsaturated fatty acid (PUFA).63 60.22 21.23 42.09 22.47 referensi dari FAO/WHO (1991). Asam palmitoleat adalah salah satu jenis . Tabel 5 Skor kimia asam amino esensial tambelo Asam amino Kadar dalam tambelo (mg/g prot) 7.75 76. yang terdiri dari 7 jenis asam lemak jenuh (SFA).41 37.55 %).87% dengan asam amino pembatas yang utama berada pada isoleusin. Analisis asam lemak dilakukan dengan menggunakan alat kromatografi gas untuk mengetahui komposisi asam lemak yang terdapat pada tambelo. Hal ini berarti bahwa protein yang terkadung dalam tambelo dapat dimanfaatkan oleh tubuh hanya sekitar 19.95 29. sedangkan kromatogram asam lemak daging tambelo disajikan pada Lampiran 6.87 41. Jenis asam lemak yang banyak terkandung di dalam serbuk tambelo adalah asam palmitoleat (C16:1) (14.32 13.4 Kandungan asam lemak tambelo Asam lemak adalah asam organik yang terdapat sebagai ester trigliserida atau lemak. sehingga asam amino esensial perlu difortifikasi untuk meningkatkan nilai gizi protein tambelo. Komposisi asam lemak dalam tambelo dapat dilihat pada Tabel 6.1.87%. diketahui bahwa angka terendah ditunjukkan oleh asam amino isoleusin dan treonin masingmasing sebesar 19. keragaman asam lemak pada serbuk tambelo dapat teridentifikasi 15 jenis asam lemak.87% dan 21.

10 13. minyak kedelai. dan canola.55 0. Dalam hal penurunan kadar kolesterol darah. meskipun PUFA dapat menurunkan kolesterol LDL.66 3.13 0.29 Asam lemak Hasil (%berat minyak) Asam Lemak Tak Jenuh Asam oleat (omega-9) yang terkandung di dalam tambelo kering sebesar 1. minyak biji kapas.80 0.13 0. Asam lemak tak jenuh tunggal secara umum memiliki efek yang menguntungkan terhadap kadar kolesterol dalam darah. yang kebanyakan ditemukan dalam minyak zaitun. Asam oleat memiliki sifat lebih stabil dan lebih baik perannya dibandingkan PUFA (PolyUnsaturated Fatty Acid).33 14.94%. minyak kacang tanah. asam lemak tak jenuh tak tunggal (MUFA) lebih efektif bila dibandingkan dengan asam lemak tak jenuh jamak (PUFA) sehingga pemanfaatan asam oleat untuk formulasi makanan olahan menjadi popular (Achadi 2010).04 0.48 asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) yang merupakan jenis asam lemak yang memiliki satu ikatan rangkap pada rantai karbonnya.94 0. Tabel 6 Komposisi asam lemak dalam tambelo No Asam Lemak Jenuh 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Miristat (C14:0) Pentadekanoat (C15:0) Palmitat (C16:0) Heptadekanoat (C17:0) Stearat (C18:0) Arakidat (C20:0) Heneikosanoat acid (C21:0) Miristoleat (C14:1) Palmitoleat (C16:1) Cis-10-Heptadekanoat (C17:1) Oleat (C18:1ω9) Linolenat (C18:3ω3) Cis-8. Asam lemak ini tergolong dalam asam lemak rantai panjang (LCFA).22 0.14-Eikosatrienoat (C20:3ω6) EPA (C20:4ω3) Arakidonat (20:4ω6) 5. terutama bila digunakan sebagai pengganti asam lemak jenuh.11.24 1.80 0.10 0. Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) memiliki .69 0.

Unsur-unsur ini terdapat dalam tubuh dalam jumlah yang cukup besar dan karenanya disebut unsur mineral makro. Sisanya terdiri dari unsur-unsur mineral. kobalt. Di dalam tubuh unsur mineral berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo disajikan pada Tabel 7. asam arakhidonat (C20:4 ω6). Hasil penelitian yang dilakukan oleh Mensink (1987) diacu dalam Achadi (2010) menunjukkan bahwa MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL yang lebih besar dibandingkan dengan omega-3 dan omega-6. 4. zink. fungsi imun. mangan.46 ppm. Unsur kalsium (Ca) juga dianalisis bukan karena sebagai antioksidan. sedangkan MUFA mampu menurunkan LDL dan meningkatkan HDL. Asam lemak omega-3 dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein) serta dapat menurunkan produksi trigliserida dan apolipoprotein beta di dalam hati (Achadi 2010). tetapi karena perannya yang sangat penting untuk pembentukan tulang dan gigi terutama pada masa pertumbuhan dan ibu hamil.1. yaitu dapat menurunkan HDL. iodium. asam eikosatrienoat (C20:3ω6). Unsur mineral lain. Kandungan mineral pada tambelo diuji karena peranannya sebagai antioksidan dalam sistem pertahanan tubuh terhadap reaksi oksidasi radikal bebas dan mineral ini tergabung dalam enzim antioksidan yang berperan melindungi membran sel dan komponen dalam sitosol. dan asam eikosapentanoat/EPA (C20:4ω3). dan fluor hanya terdapat dalam tubuh dalam jumlah kecil saja. tembaga. Asam lemak tak jenuh ganda berperan penting dalam transpor dan metabolisme lemak. seperti besi. Kekurangan Kalsium akan menyebabkan osteoporosis dan .49 kelemahan. karena itu disebut trace element atau mineral mikro. mempertahankan fungsi. Sampai sekarang telah diketahui ada empat belas unsur mineral yang berbeda jenisnya diperlukan manusia agar memiliki kesehatan dan pertumbuhan yang baik. Jenis-jenis asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) yang terkandung dalam tambelu kering. yaitu asam linoleat (C18:3ω3). dan integritas membran sel. Kadar Kalsium dari tambelo adalah 3532.5 Kandungan mineral tambelo Sekitar 96% bahan makanan terdiri dari bahan organik dan air.

Secara kimia. 9. dalam keadaan teroksidasi. 2. Kandungan seng (Zn) pada tambelo segar adalah 12. 3. 5. Klorida (Cl Kalium (K) Magnesium (Mg) Mangan (Mn) Natrium (Na) 3532.02 435.98 2363.18 Mineral Mikro Besi (Fe) 7. Aktivitas superoksida dismutase (SOD) dan katalase tergantung pada zat besi. Zat besi juga berperan dalam imunitas dalam pembentukkan sel-sel limfosit. besi kehilangan dua elektron sehingga memiliki dua sisa muatan positif (Fe2+ /fero). Zat besi sebagian besar berada dalam hemoglobin. 4. Seng merupakan mineral penting pada berbagai sistem enzim dan hormon. Dalam keadaan tereduksi. zat besi merupakan unsur yang sangat reaktif sehingga mampu berinteraksi dengan oksigen. 10. Sebagai .45 12. Tabel 7 Kandungan mineral yang terdapat pada tambelo No Parameter Hasil (ppm) Mineral Makro Kalsium (Ca) 1. Almatsier 2006).42 1373.46 5. 6. Seng (Zn) Tembaga (Cu) Fosfor (P) Selenium (Se) Peranan zat besi (Fe) berhubungan dengan kemampuannya dalam reaksi oksidasi dan reduksi.30 ppm. 11. besi kehilangan tiga elektron sehingga memiliki tiga sisa muatan positif (Fe3+/feri) karena dapat berada dalam dua bentuk ion ini.06 0.30 0. besi berperan dalam respirasi sel. Penyerapan Ca akan dipermudah dengan adanya vitamin D (Muchtadi 2009).41 626. Winarsi 2007). 8. Antioksidan enzimatis bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal baru (Marks et al. yaitu sebagai kofaktor bagi enzim-enzim yang terlibat dalam reaksi oksidasi reduksi (FAO/WHO 2001. 2000.50 akan mempengaruhi mental dan juga menyebabkan osteomalasia.05 <0.40 3.

Hasil penelitian Winarsi (2004) yang memberikan minuman susu skim yang diperkaya dengan isoflavon kedelai sebesar 100 mg dan 8 mg ZnSO4 yang diberikan setiap hari selama 2 bulan pada wanita premenopause diketahui dapat menurunkan sindrom premenopause. proliferasi. Khusus ibu hamil dan . Angka kecukupan Se per hari yang dianjurkan oleh Widya Nasional Pangan dan Gizi (2004) adalah 5-20 µg untuk bayi dan anak di bawah 10 tahun dan 20-30 µg untuk pria dan wanita berumur di atas 10 tahun sebesar. kadar IgG antiTT. yaitu ion superoksida. yang dapat menghancurkan peroksida yang terbentuk dari hasil oksidasi lemak di dalam tubuh (Mucthadi D 2009). tetapi diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari. Keadaan tubuh yang mengalami stres karena trauma. Mineral Cu berperan melalui aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD). Mineral Zn sebagai komponen protein yang mempunyai gugus SH-(metallothionine) berperan sebagai pembersih radikal bebas. Hasil analisis diketahui bahwa kandungan tembaga (Cu) yang terdapat pada tambelo nilainya kecil.51 salah satu mineral imunitas yang berfungsi untuk maturasi. diferensiasi. Enzim superoksida dismutase mempunyai substrat spesifik. meningkatkan aktivitas enzim antioksidan. Seng (Zn) berperan dalam sistem pertahanan tubuh dengan cara berkonjugasi dengan thiol sehingga menghambat pembentukan ion superoksida. Kemampuan tubuh seseorang untuk menyerap seng menurun sesuai dengan pertambahan usia sehingga penting untuk meningkatkan intake mineral seng ketika usia 40-an. Selenium (Se) adalah mineral penting yang sangat dibutuhkan oleh tubuh sebagai antioksidan untuk meredam aktivitas radikal bebas dan merupakan bagian penting enzim glutation peroksidase. terkena polusi lingkungan.98 ppm. yaitu 0. dan aktivasi sel T. Peran tembaga sebagai kofaktor maupun sebagai pengatur enzim SOD cukup besar. Mineral Zn juga merupakan komponen enzim yang berperan dalam perbaikan asam nukleat (Harris diacu dalam Ridwan 1997). dan hormon timulin 1. Selenium tidak diproduksi oleh tubuh. Jika tubuh kekurangan tembaga maka akan terjadi peningkatan peroksida lipid (Harris diacu dalam Ridwan 1997). dan luka dapat menghabiskan suplai seng dalam tubuh (Wirahadikusumah 1985).

Rendemen ekstrak tambelo yang terbesar adalah ekstrak kasar metanol 5. terbukti bahwa tambelo mengandung berbagai senyawa dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda.1 Rendemen ekstrak tambelo Ekstraksi merupakan salah satu cara pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu bahan. pelarut metanol memiliki nilai kostanta dielektrik tinggi jika dibandingkan dengan pelarut yang lain sehingga pelarut metanol dapat membuka dinding sel yang mengakibatkan hampir semua senyawa dapat tertarik keluar dari dalam sel.86%).2. Tabel 8 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Uji Fitokimia Alkaloid Flavonoid Phenol Hidroquinon Steroid Triterpenoid Saponin Tanin n-Heksana + + + + + Jenis Pelarut Etil Asetat + + + + + Metanol + + + + + - .52 menyusui mendapat tambahan. masing-masing sebanyak 5 dan 10 µg/orang/hari (Winarno 2008). Kandungan fitokimia ekstrak tambelo dapat dilihat pada Tabel 8.2. Kadar Selenium di dalam tambelo adalah 0. 4. Penelitian ini dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi yang dilanjutkan dengan partisi cair-cair. Berdasarkan hasil rendemen ekstrak tambelo tersebut.72%. Selain itu. Besarnya rendemen ekstrak metanol diduga berkaitan dengan sifat pelarut metanol yang memiliki kemampuan pemisahan komponen dari bahan yang lebih baik. 4. sebagian lemak serta tanin yang menyebabkan hasil ekstraksi metanol cukup kuat.18 ppm. Hal ini sesuai dengan pernyataan Heath dan Reineccius (1986) bahwa metanol mampu mengekstrak senyawa organik.19% ) dan etil asetat (2.2 Kandungan fitokimia ekstrak tambelo Analisis fitokimia adalah salah satu cara untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder pada suatu tanaman atau hewan. sedangkan ekstrak tambelo yang mengandung rendamen relatif kecil adalah ekstrak n-heksana (2.2 Penelitian Tahap Kedua 4.

bahwa ekstrak metanol memiliki senyawa alkaloid yang sangat tinggi. Cos et al. dan 1 neoflavonoid (1’B-4C). isoflavon. Hal ini diduga senyawa alkaloid merupakan senyawa polar. polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid. katekin. (1998) melaporkan bahwa beberapa senyawa flavonoid bersifat antioksidan dan dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase maupun reaksi superoksida. Khopkar (2003) berpendapat bahwa bahan dan senyawa kimia akan mudah larut pada pelarut yang relatif sama kepolarannya. dan air (Harborne 1987). gula. dan kalkon. meskipun beberapa pseudoalkaloida dan protoalkaloida yang larut dalam air. karotenoid. karena senyawa yang terbawa pada proses ekstraksi adalah senyawa yang mempunyai polaritas sesuai dengan pelarutnya yaitu pelarut metanol. yaitu flavonoid (1’B-2C). butanol. Garam alkaloida kuarterner sangat larut dalam air (Sastrohamidjojo 1996). dimetilsulfoksida. Flavonoid merupakan senyawa polar yang mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol. Menurut Pratt dan Hudson (1990). Pada umumnya. Kelima belas atom karbon tersebut membentuk dua cincin aromatik (C6) yang terikat pada rantai propana (C3) sehingga membentuk susunan C6-C3-C6. turunan asam sinamat. Berdasarkan susunan ini dapat dihasilkan 3 jenis struktur. aseton. baik pada tanaman. saat ini diketahui sebanyak 5. ataupun jamur dan merupakan produk yang dihasilkan dari proses metabolisme sekunder.53 Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kasar tambelo. flavonol. hewan. metanol. asam amino. Kemudian dilaporkan juga senyawa flavonoid dari stereospermum . dan glikosida (Harborne 1987). Flavonoid merupakan golongan senyawa polifenol yang terdiri atas 15 karbon sebagai kerangka dasarnya.500 jenis alkaloid (Harborne 1987). Hal ini karena pelarut etil asetat bersifat semi polar sehingga memiliki kemampuan melarutkan senyawa polar dan non polar. Pelarut yang bersifat polar mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener. isoflavonoid (1’B-3C). Ekstrak etil asetat tambelo (Tabel 8) diketahui mengandung senyawa flavonoid yang tinggi. tanin. komponen fenolik. dimetilformamida. alkaloid bebas basa hanya larut dalam pelarut organic. Alkaloid adalah senyawa alami amina. yang memiliki aktivitas antioksidan meliputi flavon.

2005). Hal ini menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana bersifat non polar. 4.54 personatum selain bersifat antioksidan. semakin tinggi kosentrasi antioksidan yang ditambahkan pada larutan DPPH. Berdasarkan hasil uji fitokimia.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Molyneux 2004. Senyawa steroid dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan obat (Harbone 1987).2. Suatu senyawa dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya ditandai dengan perubahan warna ungu menjadi kuning pucat (Molyneux 2004). 2006). Steroid merupakan golongan senyawa triterpenoid yang dapat diklasifikasikan menjadi steroid dengan atom karbon tidak lebih dari 21 yaitu sterol. senyawa tersebut juga dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase (Kumar et al. maka nilai absorbansi akan semakin turun karena warna larutan bertambah kuning. Senyawa DDPH adalah suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain membentuk senyawa yang lebih stabil dan dapat bereaksi dengan atom hidrogen membentuk DPPH tereduksi (diphenylpicrylhydrazine) yang stabil. glikosida jantung dan vitamin D. diisolasi dari sumber daya hayati laut bersifat non toksik dan mempunyai khasiat menurunkan kolesterol dalam darah dan mendorong aktivitas antidiabetes (Bhakuni et al. Perubahan warna yang mengindikasikan adanya reaksi peredaman radikal bebas DPPH oleh senyawa antioksidan baik pada larutan ekstrak tambelo maupun pada larutan BHT dan vitamin super ester C. fukosterol. Besarnya daya peredaman radikal bebas DPPH maka dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 515 nm. Perubahan warna pada ekstrak tambelo dapat dilihat pada Lampiran 7. Peredaman (inhibisi) terhadap radikal bebas dinyatakan dalam persen.3 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH (1. ekstrak n-heksana tambelo mengandung senyawa steroid yang tinggi. Ada beberapa steroid seperti. Pengukuran absorbansi dilakukan pada setiap sampel antioksidan yang dibuat dengan berbagai konsentrasi. Vattem dan Shetty 2006). Secara teoritis. . Steroid alami berasal dari berbagai transformasi kimia dua triterpena yaitu lanosterol dan sikloartenol. sapogenin.

BHT.56 15.35 8. Tabel 9 memperlihatkan bahwa nilai aktivitas antioksidan pada BHT dengan nilai IC50 3.83 84. Ekstrak metanol tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 85.86 ppm.78 81.21 262. sedangkan .02 51.44 63.53 Gambar 12 Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.35 ppm dan vitamin super ester C yaitu 8.00 ppm.16 10 ppm 94.35 0 BHT Vitamin n-heksana ester super C Sampel Etil asetat Metanol 8.55 dan aktivitas antioksidan dinyatakan dengan IC50 (Inhibition Concentration) yang menunjukkan kosentrasi sampel antioksidan yang dapat menghambat atau meredam aktivitas antioksidan yang semakin tinggi atau dengan kata lain IC50 sebagai kosentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya 50% aktivitas DPPH.27 ppm jauh leih ebih kecil dibandingkan dengan ketiga ekstrak kasar tambelo Tabel 9 Aktivitas antioksidan ekstrak tambelo Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55. dan vitamin super ester C disajikan pada Gambar 12. menunjukkan ekstrak etil asetat tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dari kedua ekstrak yang lainnya. BHT.27 15 3. Semakin kecil nilai IC50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Molyneux 2004).19 IC50 (ppm) 3. dengan nilai rata-rata IC50 sebesar 15. 300 Rata-rata IC50 (ppm) 250 200 150 100 50 3.77 29.01 4.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.27 Berdasarkan Gambar 12. Nilai IC50 dari ekstrak tambelo.51 27. dan vitamin super ester C.

dilakukan pencarian eluen terlebih dahulu dengan menggunakan KLT. kloroform. Eluen dengan pemisahan terbaik kemudian dikombinasikan satu dengan yang lainnya dengan berbagai perbandingan. dan etanol. . etil asetat. dilakukan dengan mencoba beberapa kombinasi untuk mengembangkan spot ekstrak terpilih pada kromatografi lapis tipis (KLT). Perhitungan persen inhibisi IC50 dan grafik regresi linear pada BHT. 4.56 ekstrak n-heksana tambelo memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 262. sedang apabila nilai IC50 berkisar antara 100-150 ppm. dan lemah apabila nilai IC50 berkisar antara 150-210 ppm. Hal ini menyebabkan komponen bioaktif yang bersifat non polar pada ekstrak n-heksana tidak terlarut sepenuhnya pada pelarut tersebut sehingga berpengaruh pada nilai IC50. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo dapat disajikan pada Lampiran 8. metanol. kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm. Eluen yang digunakan adalah n-heksana. Kombinasi yang digunakan adalah yang terdiri dari pelarut kloroform : metanol (9:1). Eluen ini berfungsi sebagai fase gerak saat fraksinasi. Pengujian aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak kasar tambelo memiliki kekuatan penghambatan yang berbeda-berbeda antara yang satu dengan yang lainnya dan menghasilkan hubungan antara kosentrasi ekstrak kasar yang digunakan dengan persen inhibisinya.4 Fraksi ekstrak terpilih Fraksinasi terhadap ekstrak kasar tambelo dilakukan pada ekstrak yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. Hanani et al.2. Sebelum dilakukan fraksinasi terhadap ekstrak kasar etil asetat. Bois (1958) diacu dalam Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm. n-heksana : etil asetat (1:1).77 ppm. (2005) menyatakan bahwa presentase penghambatan (% inhibisi) terhadap aktivitas radikal bebas akan ikut meningkat seiring dengan meningkatnya kosentrasi. Rendahnya aktivitas antioksidan ekstrak n- heksana diduga karena pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak nheksana tambelo dan kristal DPPH pada penelitian ini adalah metanol yang bersifat polar. yaitu etil asetat. baik pada kosentrasi ekstrak maupun pada kosentrasi standar (BHT dan vitamin super ester C).

Hal ini menunjukkan bahwa dalam fraksi tersebut mengandung senyawa yang .5/8. flavonoid. alkaloid dan fenol hidrokuinon. Hasil pengecekan terhadap fraksi tersebut. steroid.5 = 0.5 = 0.5 = 0.1/8.5 = 0.1/8. diduga bahwa masing-masing fraksi telah menunjukkan adanya 1 spot dengan Rf yang berbeda.97 Rf8 = 7. Berdasarkan hasil fraksinasi tersebut (Gambar 12).5 = 0.15748%) dan rendamen terkecil pada fraksi 6 (0. Rendamen fraksi terbesar terdapat pada fraksi 1 (0. Rf9 = 8. dan n-heksana : etil asetat (8:2). diperoleh eluen terbaik yang terdiri dari campuran kloroform : metanol (9 : 1). diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang kemudian dilakukan pengujian fitokimia.84 Rf7 = 7/8. Profil pola pemisahan senyawa dengan eluen tersebut disajikan pada Lampiran 9a.00156%).4/8.1/8.5 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Berdasarkan hasil fraksinasi kolom.2.3/8. Kesepuluh fraksi tersebut kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dan uji fitokimia.74 Rf5 = 5.5/8.5 = 0.48 Rf3 = 3.5 = 0. Berdasarkan hasil fraksinasi kolom. Menurut Markam (1988).4 Rf2 = 2.5 = 0.82 Rf6 = 6. Data rendamen hasil kolom disajikan pada Lampiran 10.65 Rf4 = 4.2/8. Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan. penggunaan kloroform : metanol sebagai eluen pada perbandingan 15 : 1 sampai 3 : 1 dapat memisahkan senyawa flavonoid dengan baik. Berdasarkan analisis dengan menggunakan KLT. diperoleh 10 fraksinasi gabungan yang disajikan pada Lampiran 9b.5 = 0. diduga terdapat sembilan jenis senyawa pada ekstrak etil asetat tambelo.57 kloroform : metanol (17:3).06 Gambar 12 Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) 4. Profil pemisahan senyawa dengan eluen kloroform : metanol (9 : 1) disajikan pada Gambar 12.25 Rf1 = 0. diketahui bahwa pada fraksi 9 dan fraksi 10 mengandung senyawa triterpenoid.

91 ppm. disusul dengan fraksi 10 dengan nilai IC50 28. fraksi yang didapat lebih murni senyawa aktif dan lebih banyak terisolasi. Gambar 14 memperlihatkan bahwa fraksi 9 memiliki daya inhibisi yang setara dengan vitamin super ester C. terbukti terjadi perubahan warna dari ungu menjadi kuning cerah dengan nilai IC50 8.87 ppm.6 Aktivitas antioksidan fraksi tambelo Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo disajikan pada Gambar 13. Perhitungan persen inhibisi dari hasil fraksinasi dapat lihat pada Lampiran 12. . Hal ini berkaitan dengan fungsi proses fraksinasi yang bertujuan untuk memperoleh pola pemisahan yang sempurna. Berdasarkan hasil pengujian. Tabel 10 Kandungan fitokimia fraksi tambelo Kelompok Senyawa Nama Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Alkaloid + + + + + + + + + + Flavonoid + + + + + + + + + + Phenol Hidroquinon + + + + + + Steroid + + + + + + + + + + Triterpenoid + + + + + + + + + + Saponin + + + + + + + Tanin - 4. Hal ini memungkinkan adanya senyawa aktif dalam faksi 9 yang berpotensi sebagai obat antioksidan. diketahui bahwa aktivitas antioksidan fraksi kesembilan mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Aktivitas antioksidan pada fraksi tambelo lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak tambelo. Kandungan fitokimia fraksi tambelo disajikan pada Tabel 10.58 memungkinkan dapat menghambat radikal bebas.2.

32 2. Pengujian dengan menggunakan DPPH merupakan salah satu metode yang sederhana. Mekanisme penghambatan radikal DPPH dapat dilihat pada Gambar 15. maka akan terbentuk molekul diamagnetik yang stabil.29 43. Jika semua elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan.64 5.91 4.51 4. akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH. Gambar 15 Mekanisme penghambatan radikal DPPH’ Keterangan: RH = asam lemak tidak jenuh R = radikal bebas .17 2.06 8. Hasil reaksi tersebut berupa DPPH tereduksi (yang tidak reaktif lagi karena telah mendapatkan donor hidrogen (Molyneux 2004).68 4.40 58.63 5.43 2.21 76.50 61.04 3. Ketika DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen.59 120 Rata-rata IC50 100 80 60 40 20 0 15 103.87 1.90 28.94 86. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen.69 Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi etil 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 asetat Estrak kasar dan Hasil Fraksi Gambar 14 Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi-faraksi tambelo Sebuah senyawa dapat disebut sebagai antioksidan bila senyawa tersebut dapat mendonorkan atom hidrogennya dengan cepat sehingga dapat menghambat terjadinya pembentukan radikal bebas (Sauriasari 2006).49 63. Senyawa DPPH merupakan radikal bebas yang bersifat stabil sehingga dapat bereaksi dengan atom hidrogen yang berasal dari suatu senyawa antioksidan.87 74.

sesquiterpenoic acid glyceride.7 Identifikasi senyawa fraksi teraktif Liquid chromatography mass spectrofotometer (LC-MS) merupakan metode analisis kuantitatif yang merupakan kombinasi antara kromatografi cair dengan spektroskopi massa.2. dan labdane diterpenoid. detektor. instrumen kontrol dan proses data. yaitu farnesic acid glyceride. Data spektrum sampel fraksi 9 dapat dilihat pada Lampiran 11.Analisis senyawa menggunakan LC-MS dilakukan pada fraksi terbaik (fraksi 9). terdapat empat struktur senyawa yang terbagi atas tiga komponen.60 4. Berdasarkan analisis LC-MS sampel fraksi 9 dengan berat molekul 352. sumber ion. (a) Komponen 1 Farnesic acid glyceride (b) (c) Komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride (d) Komponen 3 Labdane diterpenoid Gambar 16 Komponen fraksi teraktif dari tambelo dengan massa 352 m/z yang terdeteksi sebagai kelompok senyawa terpenoid. . tekanan permukaan. Berdasarkan database MarinLit (Blunt and Blunt 2008). Ketiga komponen tersebut tergolong dalam kelompok senyawa terpenoid. massa analyzer. Analisi LC/MS yang dilakukan secara electrospray ionisation. Struktur senyawa tersebut disajikan pada Gambar 16. Instrumentasi LC-MS terdiri atas inlet-LC.

(1983) bahwa di dalam ekstrak nudibranch Archidoris montereyensis mengandung senyawa-senyawa diterpenoic acid glyceride. monocyclofarnesic acid glyceride. Secara umum senyawa seskuiterpenoid ini mempunyai bioaktifitas yang cukup besar. antifeedant serangga. drimane sesquiterpenoic acid glyceride. seskuiterpen (C15). (1980) juga melaporkan bahwa nudibranch jenis A. antimikroba. dan glyceryl ether. Andersen et al. antibiotik dan toksin serta regulator pertumbuhan tanaman dan pemanis. podolakton inhibitor pertumbuhan tanaman. diterpen (C20). hormon. yang dapat dikelompokkan menjadi monoterpen (C10). Pendapat ini juga didukung oleh Marero et al.61 Terpenoid adalah senyawa alam yang terbentuk dengan proses biosintetis. Labdane merupakan diterpen bisiklik alami yang membentuk inti struktural untuk berbagai macam produk alami yang dikenal sebagai labdanes atau diterpenes labdane. Senyawa ini mempunyai bioaktivitas yang cukup luas yaitu sebagai hormon pertumbuhan tanaman. odheri menghasilkan senyawa 2. inhibitor tumor. Beberapa publikasi tentang ketiga komponen seperti yang dilaporkan oleh Gustafson et al. Kedua komponen tersebut memiliki aktivitas sebagai antibiotik dan antifeedant. triterpen (C30). di antaranya adalah sebagai antifeedant. Berdasarkan pengelompokan dari senyawa terpenoid tersebut. terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. Senyawasenyawa tersebut memiliki aktivitas sitotoksik yang menghambat sel kanker usus besar pada manusia. Diterpenoid merupakan senyawa yang mempunyai 20 atom karbon dan dibangun oleh 4 unit isoprena. Senyawa-senyawa seskuiterpenoid tersebut diturunkan dari cis farnesil pirofosfat dan trans farnesil pirofosfat melalui reaksi siklisasi dan reaksi sekunder lainnya. (2003) yang melaporkan bahwa hasil isolasi dari pulmonate Trimusculus peruvianus menghasilkan empat senyawa labdane diterpens melalui jalur oksidasi. .3-dihydroxypropilfarnesate dan memiliki dua turunan monoasetoksi. Seskuiterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang dibangun oleh 3 unit isoprena yang terdiri dari kerangka asiklik dan bisiklik dengan kerangka dasar naftalen. dan politerpen (≥ 40) (Sirait 2007). komponen 1 farnesic acid glyceride dan komponen 2 sesquiterpenoic acid glyceride termasuk di dalam kelompok senyawa seskuiterpenoid. Terpenoid yang disebut juga isoprenoid. tetraterpen (40).

hal ini diduga bahwa senyawa flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak tambelo termasuk dalam kelompok senyawa volatil sehingga ada kemungkinan bahwa senyawa flavonoid yang berperan sebagai senyawa antioksidan di dalam ekstrak tambelo adalah kelompok senyawa volatil. Senyawa diterpenoid dapat berbentuk asiklik. Berdasarkan hasil analisis LC-MS. dan tetrasiklik. Tata nama yang digunakan lebih banyak adalah nama trivial (Sirait 2007). tidak terdeteksi. antifouling. trisiklik.62 senyawa pemanis. dan anti karsinogen. senyawa flavonoid. bisiklik. .

28%. Rendemen tertinggi terdapat pada ekstrak metanol yaitu 5. steroid. Komposisi kimia tambelo kering adalah kadar air 6. Fraksi 9 menyerupai salah satu dari empat struktur senyawa yang dikelompokkan ke dalam tiga komponen.72%. Daging tambelo mengandung 17 jenis asam amino dan 15 jenis asam lemak. lemak 14.88%. dan karbohidrat 30.72%. lemak 0.77%. protein 7. etil asetat. abu 2. . Ekstrak kasar etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan IC 50 sebesar 15 ppm. flavonoid. triterpenoid dan saponin.21%. protein 42.63 5 SIMPULAN DAN SARAN 5. metanol) mengandung senyawa alkaloid.71%.87 ppm yang setara dengan vitamin super ester C (8.1 Simpulan Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kimia tambelo segar terdiri dari air 82.45%. yaitu farnesic acid glyceride.63%.07%. abu 5.27%. Pada ke tiga ekstrak (n-heksana.2 Saran Perlu dilakukan pemurnian lagi dengan menggunakan kromatografi kolom dan untuk memperoleh satu struktur senyawa aktif digunakan nuclear magnetik resonance (NMR). dan karbohidrat 7. 5. Fraksi 9 dari ekstrak etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan sebesar 8.27ppm). sesquiterpenoic acid glyceride dan labdane diterpenoid.

Andersen RJ. berwarna. Associaton of Official Analytic Chemist Inc. Jakarta: PT. Association of Official Analytical Chemist Inc. 1980. [02 Sept 2011]. Blunt DA. Dilengkapi: 4 gambar foto berwarna 10 x 12 inci.5. Tetrahedron Lett. Awat DS.wisegeek. hlm. 1984. Bioactive marine natural Product. Mayland. Association of Official Analytical Chemist Inc. 2010. Approved Methods of The American Association of Cereal Chemist. 302-308 Blunt JW. 2005. 2002. Mayland. 1 video kaset: 2:50 menit. Version # vpcl 13. Bonderud D. Ed ke-9. Official Methods of Analysis (18 Edn). ____________. Palawan. 2005. 14-104. 17:97-104. 1994. J. ____________. Hlm. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. USA :American Association of Cereal Chemist. 2009. 21:797-800. Department of Chemistry-University of Caterbury. 20-319 Almatsier S. Almatsier S. Association of Official Analytical Chemist [AOAC]. Vol 1. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Betia J. . Sum FW. Palawan’s Kinilaw na Tamilok. Journeyingjames. Gizi dan kesehatan Masyarakat. Gizi Indonesia. USA. http://www. 2008. Virginia. USA. http://journeyingjames. 2011.com/2011/01/palawans-kinilaw-na-tamilok/. Rajagrafindo Persada. 50-279. 2005. 2011. _________. Official Methods of Analysis of Association of official Analytical Chemical. hlm. [kaset audio]. Farnesic acid glycerides from the nudibranch Archidoris odhneri. produsen. 2006. MarinLit-Marine Literature Database. bersuara. Amino acid: What is Valine. Christchurch: Marine Chemistry Group. Official Methods of Analysis (18 Edn). Ed. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. American Association of Cereal Chemist [AACC]. hlm. New Delhi: Anamaya Publisher. Bhakuni DS.com [08 Maret 2011].DAFTAR PUSTAKA Achadi EL. Prinsip dasar ilmu Gizi. Pelayanan gizi rumah sakit dan perkembangan ilmu serta teknologi.

Bogor: Fakultas Pertanian. Prod. Iheringia. 2002. Protocols: methods for isolation. Bangkok. Dena CC. Sér. Padmawinata K. Gritter JR. New York: Science Publishers. Structure activity relationship of bioactive metabolites from some Indo-Pasific marine invertebrates. Proksch P. Bandung: ITB press. Pengantar Kromatografi. Thailand. Pengantar gizi kesehatan. 21: 251. Selenium untuk kekebalan tubuh. Material Medika Indonesia. Amino acid protein suplemen. . 2008. Metode Pengujian Kimia Produk Perikanan. 1983. Schupp P. Conectique. Griffin et al.com [06 Maret 2011]. J. Filho CS. Industrial alkaline protease from shipworm bacterium. Penemu: The United States of America as represented by the Secretary of Agriculture. Porto Alegre. Cat B. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Handayani D. 1991. Human Vitamin and Mineral Requirement. Teredinidae) in mangrove driftwood from a northern Brazilian beach. FAO/WHO. [29 Sept 2011]. Seasonal abundance of the shipworm Neoteredo reynei (Bivalvia. http://www/conectique. Dewan Standarisasi Nasional. Coppen PP. 17 Mei 1994. Edrada RA.. Wray V.65 Carroli C. Institut Pertanian Bogor.Nutrition 1:502-506. 2006. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Nature 3-12. Ed ke-2. purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrataes. Effect of threonine deficiency on changes in enzyme activity and liver fat deposition with time. Bobbitt JM. 98:17-23. Ebada SS. Edrada RA. Lin W.php?article_id=3160. Rancidity in Foods. Di dalam: Allen JC. Chem. penerjemah. Report of a joint FAO/WHO xpert consultation.254. Tagliaro CH. US Paten. Roma: Food and Nutrition Division. The use of antioxidants. 1991. Zool. 2006. Hamilton RJ. 1995. 67-90. Proksch P.co/tipsoz_solution/diet_utrition/nutrition/article. www. Arthur. hlm. 2001. Effendi YH. 2000. Paten 5 512 749. hlm. Arata D. Editor. [DSN]. Diktat. Balbin-Oliveros M. newsletter@trulyhuge. 27-36. SNI 01-2362-1991. Beasley CR. Penentuan Logam Berat. Nat. Reduce-it weight management program Diet and Nutrition (2011). E Schwarting. Dietary Amino Acids Benefits. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. 2008.

Di dalam: Allen JC. 2003. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II 2008. Suhardjo. Hamilton RJ. Driskel JA. 2:127-133. Jakarta: UI Press. Ke-2. Kagawa H. Penuntun Cara Modern Menaganalisis Tumbuhan. 1988. Sayuti N. Lampung. Ali AZ. Dunbar DC. Apama P. J Nat Prod 68:1611-1621. Majalah Ilmu Kefarmasian. 1983. 41:1101-1108. . Dachriyanus. Hardinsyah. Ketaren S. Bandung: ITB. Org. Jakarta: UI-Press. Metode Fitokimia. Lemak dan Minyak Pangan. 17-18 November 2008. J. Otto CS. Bull. Sumule A. Harper LJ. Padmawinata K. siput dan kerang oleh penduduk di kawasan Muara Mimika. Harbone JB. 30-69. hlm 1-20. Reineccius. Kumar US. Soediro S. 36:3090-2097. Pharm. Heath.ac. Gizi dan Pangan 1:1-12. dari Kepulauan Seribu. Hanani E. Mun’im A. Chemical studies of British Colombia Nudibranchs. Andersen RJ 1985. 1988. Terjemahan dari: Food Nutrition and Agriculture. http://lemlit. Jenis dan jumlah konsumsi tambelo. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. Sekarini R. Okuda. 2005. Yasuhara TT. J. Flavor Chemistry and Technology.66 Gustafson K. Two new flavonoids and other constituents in licorice roots: their relative astringency and radical scavenging effect. Hatano TH. Tetrahedron. 2008. Hamilton RJ. 1986. 2006. J. Jakarta: Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Hamman MT. 1996. Deaton BJ. The chemistry of ranciditry in food. 2006. Pangan Gizi dan Pertanian. Reddy SV. Isolasi dan karakteristik senyawa antibakteri epidioksi sterol dari spon laut Petroia Nigrans. Chem.id/file/arsip [12 April 2009]. Rancidity in Food. penerjemah. Konsep Dasar Kimia Analitik. Rao JM. Papua. 1986. editor. Tiwari AK. G. Letsoin J. 61: 6594. New York: Applied Science Publisher. Asal Sumatera Barat. Chem. Publ. 1987. Kahalalides : bioactive peptides from marine mollusk Elysia rufescens and its algal diet Bryopsis sp. Ed. penerjemah. HB. Free radical scavanging and xanthine oksidase inhibitory constituens from Stereospermum personatun. hlm. New York: Van Nostrand Reinhold Comp. Terjemahan dari Phytochemical method. Rao RJ. * Khopkar SM. Handayani D.unila. Scheuer PJ.

Munifah I. Parakkasi A. 2000. Tetrahedron 13467-13474 Molyneux P. Shimomura M. Alfabet. . hlm. Gizi Anti Penuaan Dini. 1998. PapuaWeb. 14-55 hlm. Jayapura: Fakultas Keguruan dan ilmu Pendidikan. J. Morrero D et al. Acanthrlla sp. Galeri-Galery.intiboga.com/omega9b. Yonge M. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. 2007. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. Jakarta: UI Press. hlm. penerjemah. Jakarta: UI Press. Saraswathy M. Linder MC. [12 April 2009] Muchtadi D. Advance in marne biology. Ekologi Kamoro-Bab IX. 2009. Bandung: CV.20-56.html [16 Juli 2009]. editor. Persepsi Masyarakat Suku Kamoro terhadap tambelo Bactronophorus thoracites di Kabupaten Mimika [skripsi]. 2006. Muller K. The biology of wood-boring teredinid mollusca.67 Linder MC. 1971. http://www. Parakkasi A. Asam Lemak Omega 9 dan Manfaatnya bagi Kesehatan.htm. 1989. 2004.scribd.papuaweb. editor. Pengantar Ilmu Gizi. Miyaoka H. Vol ke-9. Biokimia nutrisi dan metabolisme dengan pemakaian secara klinis. Muchtadi D. 2003. Biokimia nutrisi dan metabolisme. Di dalam: Russell FS.com/doc/isolation-seminternationalUGM/2558795 [ 02 Maret 2011]. Linder MC. Bandung: CV. 1992. penerjemah. http://www. Terjemahan dari: Nutritional biochemistry and metabolism. 2009. 335-344. Labdane diterpenoid with a new oxidation pattern from the marine pulmonate Trimusculus peruvianus. Mayabubun 2003. Isolation and antioxidative assay of several marine macroalgae components within ethyl-acetate fraction. http://www. Cetakan I. Antimalarial activity of kalihinol a and realtive diterpenoids from the okinawan sponge.org/gb/foto/muller/ecology/09/index. Nair NB. Sci. New York: Academic Press Inc. Bogor: IPB Press. Muchtadi TRM. Tetrahedron. Krisnawang H. hlm 45-67. Evaluasi Nilai Gizi Pangan. Editor. Yamada Y. Alfabeta. Songklanakarin J. Kimura H. 2004. 59:48-55 Muchtadi D. Technol 2004. Universitas Cenderawasih Jayapura. Linder CM. 26:211-219.

Jensen MD. 1979. Di dalam: Food Antioxidant. 8(2):12-25. Penuntun fitokimia dalam farmasi.supamas. Sirait M. 87-121. 11:119-132. Ayuningrat E.chem-is-try. Pratt DE. Hudson BJF. Gorontalo. Kustiariyah. editor. Ed ke-7. 2006. hlm. Philadelphia : Mosby. Purwaningsih S. Supriyanti FMT. editor. Imran Z. Unit Corn Mill. 2005. Suparni. 1997. 120(1):7-13. Antioxidant Recent Development. 2009. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www.68 Nelson JK. Poedjiadi A. Ho CT. The Biology of The Mollusca. Bandung: ITB. Makalah dalam Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. Lee CY. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Ridwan E. Natural antioxidant not exploited comercially. Salamah E. 1995. Terjemahan dari: The organic constiuteuns of higher plants. Jakarta: UI Press. London: Elsevier Applied Science.org. www. 1990. Cermin Dunia Kedokteran. Phenolic Compound in Food and Their Effect on Health. Penapisan awal komponen bioaktif dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea) sebagai senyawa antioksidan. Tempe mampu menghambat proses ketuaan. Buletin TeknologiHasil Perikanan. 2008. Park Ridge. Di dalam: Huang MT. Ranney MW. Institut Teknologi Bandung 26-27 Juni 1997. Antioksidan Alami Asal Tumbuhan. Purchon RD. 230-429. Washington DC: American Society. 1992. 1997. 2007. Di dalam: Hudson BJF. 8-389 hlm Pratt DE. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah (Anadara granosa) yang diambil dari Kabupaten Boalemo. USA. editor.com [07 Maret 2011]. Natural antioxidant from plant material. Buletin THP. Hungary. Schuler P. hlm. 2011. Bandung: ITB. Kosasih Padmawinata. 191-246 hlm . 1990. Edisi ke-6. Asam amino non esensial. penerjemah. hlm. hlm. Mayor clinic diet manual : A Handbook of Nutrition Practices. 1994. Gastineau CF. [7 Mei 2011] Sidik. Setyowati. Pergamon Press. London and New York: Elsevier Applied Science. 67-78 Nurjanah. Noyes Data Co. Food Antioxidant. Natural antioxidant exploited commercially.Supamas. Dasar-dasar biokimia. Hudson BJF. Edisi revisi. 1968. Moxness KE. Robinson T. 123-280.

Suratmo.supamas. __________.69 Sitompul S.brawijaya. 221:1401-1403. Science.14-55. Genet. Jakarta: Surya Pagoda Mas http://www. 2007. 2007. 1984.com [07 Maret 2011]. Buletin Teknik Pertanian. Bogor: Program Pascasarjana. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama. . [Tesis].id/bssub/PDF%20FILES/BSS_ 205_I. Suharsono. Potensi ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) sebagai antioksidan.beritaiptek.com [ 8 Juni 2011] radikal bebas. Yparraguirre LA. Produk Fermentasi Ikan Dari Cacing Kapal Bactronophorus sp. 2006. http://fisika. 3-14 __________. Haryono B. 92-128 Kimia Pangan. [3 februari 2011] Syaputra D. Physiological traits of the symbiotic bacterium Teredinibacter turnerae isolated from the mangrove shipworm Neoteredo reynei. 1989. 57-158. Supamas. Asam amino non esensial. Institut Pertanian Bogor. Komposisi kimia dan aktivitas inhibitor topoimerase I dari kerang mas ngur (Attactodea striata). A cellulolytic nitrogen fixing bacterium cultured from the gland of deshayes in shipworms. Jakarta: Erlangga. 1983. 2004. Winarno FG. Calloway CB. Mol.pdf. Trindade-Silva E. hlm. Poernomo D. hlm. Turner RD. Leoncini O and Amaro CSAG. Waterbury JB. Suariasari R. 9(1): 33-37. hlm. Vizzon VF. Jurnal Sumberdaya Perairan. 1970. 12-34. hlm. Segar. 2009. Senra MVX. Biol. Sudarmadji S. Genetics and Molecular Biology Online Ahead of Print. 2011. Kimia Pangan dan Gizi. 2008. Kimia Pangan dan Gizi. Machado-Ferreira E. Sociedade Brasileira de Genética. Bogor: M-Brio Press. Suhardi. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 1:12-14. Analisis asam amino dalam tepung ikan dan bungkil kedelai.145-167. Biokimia. Waranmaselembun C. hlm.ac. 1992.1997. Printed in Brazil. Ibrahim B. Kimia Pangan dan Gizi. Yogyakarta: Liberty. 2009. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. Mengenal dan menangkal http://www. __________. hlm.

hlm. 2007. Dalam: Peran Biokimia dan Biologi Molekuler dalam Eksplorasi dan Pemanfaatan Sumberdaya Hayati Berkelanjutan. of Agricultural and Food Chemistry. Yen GC. Prosiding Seminar Nasional PBBMI. Efek Minuman Fungsional yang Disuplementasi Isoflavon Kedelai dan Zn terhadap Profil Lipiddan Produk MDA Plasma Wanita Premenopause. J. Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity. Yogyakarta . Jakarta: Kanisius. Winarsi H. Chen HY. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. 2004. 43:27-32 . 1995.70 Winarsi H. 86-105.

71 .

72 LAMPIRAN .

73 .

821 1.43 0.01 2.45 Standar deviasi 0.74 1.719 0.195 1.21 0.651 1.72 Standar deviasi 0.018 0.418 0.63 42.29 0.26 1.71 7.31 0.22 1.285 1.055 0.293 1.163 0.055 0.42 5.236 1.729 0.011 0.83 Lampiran 2.11 6.432 1.179 1.287 0.989 Rata-rata 0.35 14.26 1.016 1.72 7.07 7.27 5.005 1.74 Lampiran 1.02 0.45 Rata-rata 6.662 1.035 0.41 0.04 2. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.15 32.19 0.99 0. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.85 3.01 1.25 1.37 1.81 1.402 22.88 30.62 b.34 1.55 1.023 0.008 0.28 II 82.841 3.015 22.27 7.04 0.007 0.45 II 6.618 0.387 0.004 0.518 0.77 14.41 Standar deviasi 0.31 2.006 0.28 2.423 0.15 Rata-rata 82.251 1.596 0.795 1.72 6.399 21.56 0.19 1.009 0.72 0.01 0.349 1.820 1. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.243 1.62 28.62 44.360 1.112 0.761 2.337 0.80 2.663 3.008 0.011 0.019 0.290 .63 41.20 14.28 0.88 8. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.63 0.854 2.403 0.839 1.

75 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

Kromatografi asam amino ulangan I .76 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a.

77 b. Kromatografi asam amino ulangan II .

78 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

79 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

80 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH .

80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.60.6.60.60.40.81 Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.6.40.40.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.8. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.80 ppm) Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.40.8. vitamin super ester .

87 R² = 0.78 81.0 0.608x + 27.02 51.0 80.18.0 50.0 30.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.51 27.19 IC50 (ppm) 3.54 R² = 0.0 70.56 15.0 20.287x .993 % Inhibisi 60.44 63.35 8.0 40. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana .27 100.16 10 ppm 94.0 y = 6.981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) b.0 90.0 10.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.82 C dan ekstrak kasar tambelo a.

9.143 R² = 0.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .401 0.01 12.79 6.94 2.434 0.58 262.490 R² = 0.93 y=0.423 0.46 5.96 -6.18 -5.09 -0.9.454 0.421 0.08 4.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.224x .255x – 9.224x – 9.77 29.407 0.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.449 0.419 0.376 0.25 Pers.201x – 8.462 0.449 290.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.531 y=0.94 2.83 Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.405 2 3 % inhibisi 0 -3.255x .63 7.412 0.490 265.regresi linear y=0.55 3.

Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.56 Pers.55 72.432 0.84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.089 0.73 19.64x + 37.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.142 0.53 67.51 46.201x . Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.211 2 0.17 15.119 0.604x + 43.45 79.04 15.00 4.51 R² = 0.72 47.123 0.40 90.231 0.53 85.225 0.062 0.8.066 0.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.51 10.92 71.041 0.084 % inhibisi 52.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .13 80.604x + 43.055 84.205 0.75 1 y=0.660x + 40.27 y=0.449 R² = 0.65 87.

39 .68 29.777 82.829 y=0.01 3.99 29.04 R² = 0.47 9.223 % inhib Pers.78 48.347 0.30 84.38 y=0.49 21.018 81.392 0.371 0.689x – 6.641x + 2.01 9.30 13.312 0.337 0.391 0.372 0.305 0.73 R² = 0.12 19.660x + 40.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.86 53.34 y=0.432 0.203 0.201 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0.40 53.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.986 88.303 0.89 27.64x + 37.656x – 7. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.

2.986 R² = 0.689x .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.777 R² = 0.656x .641x .946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.6.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .018 R² = 0.7.

58 290. n-Heksana : Etil asetat 2.30 88. n-Heksana : Etil asetat 3.21 3. Kloroform : Metanol 5.03 Standart devisiasi 29.75 19. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.53 4.3 45.34 81.09 82.93 265.39 Ratarata 788.87 e. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a.17 15. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.79 10.01 252. Kloroform : Metanol 4.

46 63.72 85.06 1.27 62.80 43.88 b.00710 0.95 75.94 5.85 Rata-rata 103.50 61.46 76.87 86.86 73.74 65.62 83.82 77.5 26.35 Standart deviasi 4.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.51 63.32 40.82 25.29 2.04 74.49 174.00506 0.37 73.56 54.0152 0.85 44.63 2.15748 0.76 60.61 7.68 5.13 III 101.97 129.14 83.83 62.00732 0.92 10.37 Ulangan II 100. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.40 4.03 64.21 3.00482 0.97 8.36 70.43 2.0028 0.69 .47 80.41 91.07 57.90 4.78 58. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.03492 0.00156 0.77 24.03 33.

76 93.425 0.155 0.41 40.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .71 88.149 0.689x + 27.85 y=0.082 0.78 y=0.078 0.136 0.112 0.108 0.13 27.90 4.94 79.59 64.651x + 33.87 y=0.41 73.29 10. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.77 Pers.102 0.086 0.00 81.246 0.099 0.193 0.03 8.53 76.65 34.148 0.647x + 34.049 0.073 0.028 0.12 63.127 0.18 80.88 65.82 61.64 8.65 76.17 33.086 0.82 57.82 y=0.62x + 43.536x + 46.255 0.079 % Inhibisi 0 54.41 y=0.497x + 45.164 0.187 0.179 0.00 70.59 81.277 0.76 82.89 b.71 42. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.17 25.12 74.37 y=0.47 56 68 79.23 24.23 7.

LAMPIRAN .

74 .

839 1.35 14.45 Rata-rata 6.85 3.63 41. Kandungan proksimat tambelo kering Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 6.22 1.62 44.011 0.179 1.423 0. Nilai rata-rata asam amino tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Jenis asam amino Treonin Valin Metionin Isoleusin Leusin Phenilalanin Lisin Histidin Arginin Asam aspartat Asam glutamate Serin Glisin Alanin Prolin Tirosin Sistein TOTAL Hasil (% berat Protein) I II 0.01 0.31 0.403 0.72 0.07 7.43 0.41 0.75 Lampiran 1.651 1.55 1.662 1.285 1.99 0.81 1.006 0.011 0.019 0.02 0.72 7.055 0.62 b.26 1.418 0.01 1.729 0.63 42.761 2.88 8.360 1.243 1.21 0.80 2.018 0.518 0.37 1.009 0.28 II 82.402 22.112 0.62 28.01 2.290 .83 Lampiran 2.26 1.29 0.618 0.20 14.854 2.195 1.004 0.27 7.989 Rata-rata 0.19 0.349 1.820 1.63 0.016 1.72 6.337 0.035 0.293 1.34 1.15 32. Kandungan proksimat tambelo segar Nutrisi Kadar air Protein Lemak Abu Karbohidrat Tambelo I 82.236 1.28 2.45 II 6.387 0.719 0.15 Rata-rata 82.795 1.005 1.77 14.432 1.74 1.596 0.055 0.821 1.11 6.31 2.42 5.04 2. Nilai rata-rata hasil analisis proksimat tambelo segar dan kering a.251 1.41 Standar deviasi 0.841 3.25 1.008 0.28 0.71 7.007 0.023 0.04 0.72 Standar deviasi 0.19 1.399 21.88 30.163 0.015 22.56 0.287 0.27 5.45 Standar deviasi 0.663 3.008 0.

76 Lampiran 3 Kromatografi standar asam amino pada HPLC .

77 Lampiran 4 kromatogram asam amino daging tambelo pada HPLC a. Kromatografi asam amino ulangan I .

Kromatografi asam amino ulangan II .78 b.

79 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC .

80 Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging tambelo pada GC .

8.60.40.60.10 ppm) Vitamin super ester C + DDPH (4.6.80 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak Etil Asetat + DPPH (20.6.60.40.40.80 ppm) .8.81 Lampiran 7 Perubahan warna yang mengindikasikan reaksi peredaman DPPH Dari ekstrak tambelo Blanko 4 6 8 10 4 6 8 10 BHT + DPPH (4.80 ppm) Ekstrak Metanol + DPPH (20. 10 ppm) 20 40 60 80 20 40 60 80 Ekstrak n-Heksan + DPPH (20.60.80 ppm) Fraksi 9 Etil Asetat + DPPH (20.40.

981 Axis Title 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi vitamin super ester C (ppm) .87 R² = 0.0 y = 6. Persen inhibisi dan IC50 pada BHT dan vitamin super ester C Sampel BHT Vitamin super ester C 4 ppm 55.0 70.27 100.54 R² = 0.0 90.0 20.0 50.993 % Inhibisi 60.78 81.35 8.0 80.56 15.0 40.74 % Inhibisi 6 ppm 8 ppm 65.44 63.608x + 27.82 Lampiran 8 Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada BHT.51 27.18.16 10 ppm 94. vitamin super ester C dan ekstrak kasar tambelo a.287x .0 30.0 10.19 IC50 (ppm) 3.0 0.02 51.0 0 2 4 6 8 10 12 Kosentrasi BHT (ppm) 70 60 50 y = 8.

449 0.9.143 IC50 Rata-rata IC50 Standar deviasi 231.regresi linear y=0.419 0.55 3.490 R² = 0.449 290.434 0.94 2.58 262.18 -5.412 0.376 0.896 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 10 8 6 4 % Inhibisi 2 0 -2 0 -4 -6 -8 20 y = 0.01 12.462 0.94 2.421 0.143 R² = 0.09 -0.255x – 9.79 6.96 -6.888 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 .93 2 y=0.255x .423 0.08 4. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak n-heksana Ulangan Blanko 1 Kosent 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Absorb 432 0.224x – 9.454 0.407 0.9.224x .77 29.405 % inhibisi 0 -3.79 14 12 10 8 % inhibisi 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 20 y = 0.490 265.83 b.201x – 8.46 5.63 7.25 Pers.401 0.531 3 y=0.

00 4.066 0.51 R² = 0.45 79.225 0.13 80.53 85.201x .65 87.604x + 43.53 67.55 72.40 90.055 84.089 0.604x + 43. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak etil asetat Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.084 % inhibisi 52.142 0.73 19.92 71. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi y=0.51 10.27 y=0.449 R² = 0.75 1 y=0.211 2 0.56 Pers.17 15.64x + 37.955 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 1 .84 10 8 6 4 2 0 -2 0 -4 -6 y = 0.51 46.041 0.09 3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % inhibisi y = 0.72 47.8.062 0.04 15.432 0.919 % inhibisi 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 c.119 0.660x + 40.231 0.123 0.205 0.

89 27.018 81.305 0.656x – 7.689x – 6.337 0.223 % inhib Pers.38 y=0.01 9.30 84.39 .203 0.641x + 2.47 9.73 R² = 0.432 0.391 0.30 13.660x + 40.878 60 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 3 d.04 R² = 0.986 88.85 100 90 80 70 % inhibisi 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 y = 0.392 0.99 29.201 0.12 19.829 y=0.68 29.371 0.78 48.923 80 100 Kosentrasi (ppm) ulangan 2 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 % Inhibisi y = 0. Regresi linear IC50 (ppm Rataan IC50 (ppm Standar deviasi 1 2 3 14.312 0.86 53.347 0.34 y=0.777 82.40 53.01 3.64x + 37.372 0. Persen inhibisi dan IC50 pada ekstrak metanol Ulangan Blanko 20 40 60 80 20 40 60 80 20 40 60 80 Kosent Absorb 0.303 0.49 21.

946 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 y = 0.930 0 20 40 60 80 100 Kosentrasi (ppm) .641x .018 R² = 0.986 R² = 0.7.689x .6.777 R² = 0.656x .905 Kosentrasi (ppm) 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.2.86 60 50 % Inhibisi 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.

n-Heksana : Etil asetat 2. Kloroform : Metanol 5. Nilai deviasi ekstrak kasar tambelo Ekstrak n-Heksana Etil asetat Metanol Ulangan I II III 231.83 Lampiran 9 Profil pola pemisahan senyawa a.09 82.30 88.3 45.58 290.75 19. Profil pola pemisahan ekstrak etil esetat tambelo pada berbagai eluen 1 2 3 4 5 Keterangan : Ekstrak Etil asetat 1.39 Ratarata 788. N-Heksana : Kloroform = = = = = 1:1 8:2 9:1 17:3 3:2 .53 4. n-Heksana : Etil asetat 3.87 e.01 252.79 10. Kloroform : Metanol 4.17 15.03 Standart devisiasi 29.21 3.93 265.34 81.

35 Standart deviasi 4.03 64.29 2.85 44.03492 0. Nilai standart deviasi hasil fraksinasi Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 I 108.49 174.00710 0.51 63.80 43.56 54.86 73.0025 Lampiran 11 Perhitungan persen inhibisi (IC50) hasil fraksinasi tambelo a.68 5.83 62.03 33.27 62.07 57.47 80.06 1.90 4.88 b.82 25.85 Rata-rata 103.46 76.21 3.5 26.37 Ulangan II 100.36 70.77 24.00156 0.74 65.72 85.32 40.78 58.76 60.0152 0.61 7.87 86.92 10.82 77.40 4.95 75.43 2. Profil Spesifikasi dan pola pemisahan hasil kromatografi Lampiran 10 Rendamen fraksi tambelo No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Nama Fraksi Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Fraksi 9 Fraksi 10 Rendamen (%) 0.13 III 101.00506 0.62 83.04 74.94 5.46 63.97 129.97 8.00732 0.63 2.69 .37 73.14 83.0028 0.00482 0.50 61.41 91.15748 0.

12 74.85 y=0.00 70.76 93.425 0.651x + 33.079 % Inhibisi 0 54.148 0.086 0.112 0.59 81.136 0.59 64.17 33.41 40.277 0.65 76.41 y=0.88 65.29 10.073 0.03 8. regresi linear IC50 (ppm) Rataan IC50 (ppm) 1.108 0.71 42.049 0.82 61.086 0.76 82.127 0.187 0.193 0.13 27.62x + 43.77 Pers.69 Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa terpenoid tambelo pada LC-MS .255 0.87 y=0.23 7.82 y=0.23 24.647x + 34.53 76.082 0.149 0.164 0.17 25. Perhitungan persen inhibisi dan IC50 pada fraksi 9 dan fraksi 10 Sampel Blanko 20 1 40 60 80 20 Fraksi 9 2 40 60 80 20 3 40 60 80 20 1 40 60 80 20 Fraksi 10 2 40 60 80 20 3 40 60 80 Ulangan Kosentrasi Abs 0.099 0.028 0.155 0.12 63.37 y=0.47 56 68 79.497x + 45.94 79.65 34.71 88.179 0.78 y=0.246 0.18 80.90 4.89 b.00 81.102 0.41 73.536x + 46.689x + 27.82 57.64 8.078 0.