Journal Reading

Limbal Stem-Cell Therapy and Long-Term Corneal Regeneration

I Gusti Agung Putra Mahautama H1A 008 020

DALAM RANGKA MENGIKUTI KEPANITRAAN KLINIK MADYA BAGIAN ILMU PENYAKIT MATA FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MATARAM

Paolo. sel – sel konjungtiva sering mengivasi dan muncul kembali pada kornea. Stanislav. Giorgio. asalkan sebagian kecil dari limbus masih ada pada salah satu dari kedua mata. Luka bakar pada mata dapat merusak limbus dapat menyebabkan defisiensi stem sel limbus. Kejernihan kornea ini tergantung pada avaskularisasi stroma dan integritas epitelnya. Autolog kultur sel limbus juga dapat mengobati pasien yang memiliki kerusakan epitel kornea bilateral yang parah. tetapi akhirnya.2012 NAMA PENULIS : Rama.363:147-145 LATAR BELAKANG : Kornea yang jernih sangat penting untuk tajam penglihatan.. Regenerasi dan perbaikan kornea dimediasi oleh stem sel dari limbus yaitu zona sempit antara kornea dan konjungtiva bulbi. Alogenik transplantasi kornea (keratoplasty) mengembalikan kejernihan kornea sementara. Satu – satunya cara untuk mencegah invasi sel konjungtiva ini adalah dengan mengembalikan limbus. Dalam kasus kerusakan kornea disertai defisiensi stem sel limbus. Matuska. JUDUL TULISAN : Limbal Stem-Cell Therapy and Long-Term Corneal Regeneration JOURNAL ASAL : The New England Journal of Medicine 2010. et al. Ditemukannya kultur sel limbus manusia yang mengandung holoclone forming cells menyebabkan penggunaan terapi graft limbus menjadi terapi yang utama untuk regenerasi epitel kornea. Pengembalian limbus tersebut dapat dicapai dengan melakukan grafting fragmen limbus yang didapatkan dari mata yang tidak terluka. Oleh karena itu metode graft stem sel limbus ini tidak berlaku pada kasus . peradangan kronis.. dan sikatrik stroma dengan kekeruhan kornea dan hilangnya tajam penglihatan.. Paganoni. kornea memperoleh regenerasi epitel melalui invasi sel dari konjungtiva bulbi. Proses ini menyebabkan neovaskularisasi.

METODOLOGI : Penelitian dilakukan dengan menggunakan autolog stem-sel limbus yang di tumbuhkan pada media fibrin untuk mengobati 112 pasien dengan kerusakan kornea yang sebagian di antaranya memiliki luka bakar terkait defisiensi stem-sel limbus. tetapi studi tersebut masih terbatas karena jumlah kasus yang relatif kecil. Subyek Penelitian Pasien sebanyak 112 orang dengan luka bakar pada kornea yang berat atau total. dan sel . Lethally irradiated 3T3-J2 sel digunakan sebagai media kultur. dan kultur sel. Studi terkait telah dilaporkan. heterogenitas sumbersumber transplantasi. peneliti menyelidiki tentang hasil terapi stem sel limbus jangka panjang pada pasien dengan luka bakar yang menyebabkan kerusakan kornea dan defisiensi stem-sel limbus. follow up yang singkat. TUJUAN : Untuk mengetahui hasil terapi sel jangka panjang pada pasien dengan luka bakar yang menyebabkan kerusakan kornea dan defisiensi stem-sel limbus. Pasien mengikuti penelitian dari tahun 1998 – 2007.defisiensi total bilateral stem sel limbus. unilateral atau parsial yang terkait defisiensi stem sel limbus. Prosedur Penelitian Autolog stem sel limbus diperoleh dari spesimen biopsi (1 . Clinicalgrade-certified. . heterogenitas penyebab gangguan epitel kornea. Enam orang pasien dieksklusi karena tidak ikut penelitian sampai selesai.2 mm2) diambil dari mata kontralateral pasien.sel dikultur pada media fibrin yang merupakan substrat alami yang melindungi holoclone forming cells. Pada penelitian ini. Sebanyak 125 stem sel limbus yang dikultur dicangkokkan pada 113 mata (112 pasien) antara Juli 1998 dan Desember 2007.

Peneliti juga menilai hasil klinis sesuai dengan persentase holoclone pembentuk stem-sel limbus yang terdeteksi sebagai sel yang sangat terwarnai secara intens (P63-bright cells) dalam media kultur sel. Pengamatan dilakukan oleh tiga orang klinisi. dimana 2 diantaranya terlibat dalam perawatan pasien dan yang pengamat yang ketiga tidak berpartisipasi dalam prosedur biologis ataupun klinis.lain). Mann-Whitney. chi-kuadrat. Kerusakan epitel kornea pada pasien disebabkan antaralain luka bakar kimia (83 orang luka bakar alkali. HASIL : Karakteristik Subjek Penelitian Rata-rata (± SD) usia pasien adalah 46. pannus. Hasil pengobatan dinilai setelah 1 tahun. McNemar. 78. Kegagalan pengobatan didefinisikan sebagai adanya gejala. Pengobatan dianggap berhasil jika semua gejala telah menghilang kornea jernih.5 ± 14. Analisis Statistik Penelitian ini menganalisis hasil dengan menggunakan analisis KaplanMeier.Follow Up dan Penilaian Hasil Tindak lanjut evaluasi dilakukan sesuai dengan prosedur standar.4 tahun (rentang. 14-80 tahun). dan permukaan kornea yang stabil telah kembali. 16 orang luka bakar asam. masihnya epitel yang rusak. dan adanya peradangan pada tahun pertama. . dan 4 luka bakar lain . Sebagian besar pasien (84%) memiliki riwayat operasi mata namun semua prosedur operasi yang dilakukan gagal yang diakibatkan kurangnya jumlah stem sel limbus yang tersisa. dan Kruskal-Wallis test serta univariat dan multivariat regresi logistik bertahap. dan luka bakar termal 7 orang. Pengobatan dianggap berhasil secara parsial jika gejala utama telah menghilang tapi neovaskularisasi masih berulang.6% dari mereka adalah laki-laki. Dua pasien telah terinfeksi bakteri dan satu pasien telah menjalani iradiasi orbit. avaskular.

Faktor transkripsi p63 muncul di limbus tapi tidak terdapat pada pusat kornea yang terluka. . Holoclone forming cells dapat diidentifikasi melalui ekspresi faktor transkripsi p63. DISKUSI : Holoclone forming cells merupakan stem sel pada limbus yang berfungsi untuk regenerasi epitel kornea. β.masing menghasilkan α. sukses parsial pada 14 mata (13.Regenerasi Epitel Kornea Satu tahun setelah operasi. Holoclone forming cells terletak di limbus tapi tidak terdapat pada pusat kornea. tapi ΔNp63α (selanjutnya disebut sebagai p63) adalah yang paling banyak. dan kegagalan pada 11 mata (10. Faktor transkripsi p63 menopang potensi proliferatif stem sel limbus dan stem sell yang mengekspresikan faktor ini akan menunjukkan pewarnaan yang terang saat berproliferasi (p63-bright cells).3%). 107 transplantasi yang dilakukan diklasifikasikan berhasil pada 82 mata (76.6%). TP63 gen menghasilkan enam isoforms dengan 2 premessenger RNAs yang berbeda yaitu : TAp63 dan ΔNp63. Sebaliknya. Transkripsi dari premessenger RNAs tersebut masing . Faktor transkripsi C / EBPδ juga mempertahankan regenerasi dan mitosis dari sel – sel limbus. Keratinosit pada mata mungkin berisi semua isoform ΔN. Kegagalan graft juga dikaitkan dengan jenis kerusakan awal mata dan komplikasi pasca operasi. hasil kultur di mana sel-sel tersebut 3% atau kurang dari jumlah seluruh sel dikaitkan dengan transplantasi berhasil hanya pada 11% pasien.1%). dan γ isoforms. Dalam analisis post hoc. kriteria keberhasilan dinilai dari regenerasi epitel normal pada donor stroma dikaitkan dengan persentase p63-bright holoclone pembentuk stem-sell limbus pada media kultur. Kultur di mana p63-Bright cells merupakan lebih dari 3% dari jumlah sel clonogenic dikaitkan dengan transplantasi sel limbus yang sukses pada 78% pasien.

Berdasarkan pengamatan ini. prosedur bedah sebelumnya. komplikasi pasca operasi. fibrin. Analisis peneliti memperlihatkan bahwa hasil berbeda secara signifikan tergantung pada apakah kultur sel limbus mengandung lebih dari 3% p63-bright holoclone forming cells atau 3% atau kurang. Tingkat keberhasilan pada p63-bright holoclone forming cells lebih dari 3% adalah 78% dan tingkat keberhasilan pada p63-bright holoclone forming cells kurang dari 3% adalah 11%. Pada multivariat analisis regresi logistik. peneliti berspekulasi bahwa regenerasi kornea tidak dapat dianggap berasal dari suatu stimulasi nonspesifik pengaruh kultur epitel. Pertumbuhan Holoclone forming cells juga membutuhkan substrat yang sesuai untuk pertumbuhan sel yaitu fibrin . kultur dan transportasi graft. (Kultur sel limbus berisi minimum dari 3 × 105 sel. Oleh karena itu. komplikasi. dan peradangan yang terjadi. keparahan kerusakan kornea. graft-transportasi. termasuk usia.Penggunaan media kultur sel 3T3-J2 dan fetal-calf serum untuk media tumbuh Holoclone forming cells didasarkan pada metode pengkulturan ini telah digunakan sejak 1980 di seluruh dunia untuk mengobati pasien dengan luka bakar dalam dan luas yang memerlukan terapi stem sel. Epitel kornea manusia diperbarui sekitar 9 sampai 12 bulan. peneliti menilai perbaikan kornea setiap kurang lebih 1 tahun kemudian. Post hoc analisis menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan . peneliti mengamati sekitar 3000 stem sel limbus yang terdeteksi sebagai p63-bright holoclone forming cells yang diperlukan untuk mencapai kesuksesan terapi klinis. sekitar 30% merupakan sel clonogenic yang sekitar kurang lebih 3% nya merupakan sel holoclones). Enam pasien tidak menyelesaikan studi dalam kurun waktu ini dan dikeluarkan dari penelitian. dan komplikasi pasca operasi. Peneliti kemudian melaporkan hasil yang diperoleh selama maksimum 10 tahun follow-up untuk sisa 106 pasien. Univariat analisis regresi logistik menunjukkan bahwa kegagalan dikaitkan dengan sejumlah faktor. kultur. atau manipulasi bedah pada sel limbus yang tersisa. penyebab defisiensi stem sel limbus. Pada penelitian ini. kegagalan masih signifikan berhubungan dengan tingkat keparahan kerusakan.

Holoclone forming cells terletak di limbus tapi tidak terdapat pada pusat kornea. tetapi akhirnya. Luka bakar pada mata dapat menghancurkan limbus dan menyebabkan defisiensi stem sel pada limbus. SIMPULAN : Kultur stem-sel limbus merupakan sumber sel untuk transplantasi dalam pengobatan kerusakan kornea akibat luka bakar. sel – sel konjungtiva sering mengivasi dan muncul kembali pada kornea. Regenerasi dan perbaikan kornea dimediasi oleh stem sel dari limbus yaitu daerah sempit antara kornea dan konjungtiva bulbi. RANGKUMAN PEMBACA : Kejernihan kornea tergantung pada avaskularisasi stroma dan integritas epitelnya. Faktor transkripsi p63 menopang potensi proliferatif stem sel limbus dan stem sell yang mengekspresikan faktor ini akan menunjukkan pewarnaan yang terang saat berproliferasi (p63-bright cells). Holoclone forming cells merupakan stem sel pada limbus yang berfungsi untuk regenerasi epitel kornea. Holoclone forming cells dapat diidentifikasi melalui ekspresi faktor transkripsi p63. Regenerasi epitel normal pada donor stroma dikaitkan . Keratoplasti mengembalikan kejernihan kornea sementara. Keberhasilan terapi stem sel limbus lebih dari 75% pada pasien dengan kerusakan kornea berat yang disertai defisiensi stem sel limbus.kemungkinan keberhasilan antara mata yang juga diobati dengan keratoplasty (71%) dan mata yang tidak (79%). Kultur stem-sel limbus merupakan sumber sel untuk transplantasi dalam pengobatan kerusakan kornea akibat luka bakar. Keberhasilan terapi stem sel limbus lebih dari 75% pada pasien dengan kerusakan kornea berat yang disertai defisiensi stem sel limbus. Satu – satunya cara untuk mencegah invasi sel konjungtiva ini adalah dengan mengembalikan limbus.

2. Kegagalan graft juga dikaitkan dengan jenis kerusakan awal mata dan komplikasi pasca operasi. Dengan terapi graft stem sel limbus ini maka kejadian proliferasi sel konjungtifa ke kornea dapat dicegah. kultur. hasil kultur di mana sel-sel tersebut 3% atau kurang dari jumlah seluruh sel dikaitkan dengan transplantasi berhasil hanya pada 11% pasien. Dalam penelitian ini penatalaksanaan kerusakaan kornea akibat luka bakar ditatalaksanai dengan graf stel sel limbus. PELAJARAN YANG DAPAT DIPEROLEH : Saat ini telah tersedia berbagai macam terapi untuk penatalaksanaan kerusakan kornea. Penelitian ini dilakukan dengan menghomogenkan sumber transplantasi yaitu dari mata kontralateral yang sehat. Kegagalan masih signifikan berhubungan dengan tingkat keparahan kerusakan. dan komplikasi pasca operasi. Sebaliknya. Penelitian ini dilakukan dengan follow up dalam waktu yang relatif panjang yaitu 1 – 10 tahun sehingga kemajuan pengobatan dapat terukur dengan baik. KELEBIHAN PENELITIAN : 1.dengan persentase p63-bright holoclone pembentuk stem sell limbus pada media kultur. Tidak ada perbedaan yang signifikan kemungkinan keberhasilan antara mata yang juga diobati dengan keratoplasty (71%) dan mata yang tidak (79%) pada terapi graf stem sel limbus. Kultur di mana p63-Bright cells merupakan lebih dari 3% dari jumlah sel clonogenic dikaitkan dengan transplantasi sel limbus yang sukses pada 78% pasien. Latar belakang sudah kuat dan tertulis secara jelas . Penelitian ini dilakukan dengan menghomogenkan penyebab gangguan epitel kornea sehingga dapat mewakili populasi. Dari hasil penelitian ini angka keberhasilan graft stem sel limbus lebih dari 75% sehingga hal ini dapat dijadikan alternatif pada pasien dengan kerusakan kornea yang tidak dapat di sembuhkan melalui operasi. 3. Pada perbandingan dengan keratoplasti masih ada kemungkinan adanya proliferasi dari sel konjuntifa ke kornea. graft-transportasi. 4.

Data dalam penelitian ini merupakan data primer jadi hasil penelitian lebih akurat. menurut pembaca kemungkinan desain penelitian yang digunakan adalah Randomized Clinical Trial 2. 10. 9. Journal ini tidak menjelaskan kriteria inklusi dan eksklusi yang digunakan secara jelas. Tempat penelitian tidak dijelaskan dalam journal ini. Penelitian ini diamati oleh tiga orang klinisi. KEKURANGAN PENELITIAN : 1. dimana 2 diantaranya terlibat dalam perawatan pasien dan yang pengamat yang ketiga tidak berpartisipasi dalam prosedur biologis ataupun klinis sehingga penilaian hasil penelitian lebih akurat. Penelitian ini mengidentifikasi faktor – faktor lain yang 7. Penelitian ini menjelaskan teknik analisa data secara rinci. 4. Penelitian ini dilakukan dengan jumlah sampel yang relatif cukup. Journal ini tidak menjelaskan desain penelitian yang digunakan. 3.5. Pada journal ini variabel penelitian tidak dirinci dengan jelas . 8. Populasi penelitian sudah tertulis secara jelas 6. berpengaruh dengan banyak menggunakan uji statistik sehingga hasil lebih akurat.

Master your semester with Scribd & The New York Times

Special offer for students: Only $4.99/month.

Master your semester with Scribd & The New York Times

Cancel anytime.