P. 1
KROMATOGRAFI KOLOM

KROMATOGRAFI KOLOM

|Views: 92|Likes:
Published by Rizki Arismawati

More info:

Published by: Rizki Arismawati on Jan 04, 2013
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

04/14/2013

pdf

text

original

Kromatografi Kolom

I. Tujuan II. Teori

: Untuk melakukan pemisahan kandungan kimia dari ekstrak hasil fraksinasi : Sekarang ini deteksi sifat spesifik suatu senyawa menjadi sangat

penting,terutama dalam bidang farmasi, kimia, dan klinik, serta bidang lainnya. Suatu analisis kimia seperti pengambilan cuplikan, pemisahan senyawa

pengganggu, isolasi senyawa yang dimaksudkan, pemekatan terlebih dahulu sebelum identifikasi dan pengukuran banyak dilakukan.

Banyak metode analisis seperti spektrofotometri, manganometri, atau lainnya, akan tetapi semuanya membutuhkan kerja ekstra dan waktu yang cukup lama untuk mendapatkan hasil analisis dibandingkan dengan teknik kromatografi. Kromatografi kolom adalah suatu metode pemisahan yang di dasarkan pada pemisahan daya adsorbsi suatu adsorben terhadap suatu senyawa, baik pengotornya maupun hasil isolasinya. Sebelumnya dilakukan percobaan tarhadap kromatografi lapis tipis sebagai pencari kondisi eluen. Misalnya apsolsi yang cocok dengan pelarut yang baik sehingga antara pengotor dan hasil isolasinya terpisah secara sempurna. Alat yang diinginkan adalah kolom gelas yang diisi dengan zat padat aktif seperti selika gel sebagai fase diam. Zat yang dimasukan lewat puncak kolom akan mengalir kedalam zat penyerap. Zat diserap dari larutan secara sempurna oleh zat penyerapan berupa pita sempit pada ujung kolom dengan kecepatan yang berbeda, sehingga terjadi pemisahan dalam kolom. Hasil pemisahan ini disebut kromatogram. Prinsip kerja kromatografi kolom adalah dengan adanya perbedaan daya serap dari masing-masing komponen, campuran yang akan diuji, dilarutkan dalam sedikit pelarut lalu di masukan lewat puncak kolom dan dibiarkan mengalir kedalam zat menyerap. Senyawa yang lebih polar akan terserap lebih kuat sehingga turun lebih lambat dari senyawa non polar terserap lebih lemah dan turun lebih cepat. Zat yang di serap dari larutan secara sempurna oleh bahan penyerap berupa pita sempit

Etil asetat 3. kromatografi 7. Cara kerja : A. 4. Kolom kromatografi 2. kloroform 4. Erlemeyer 3. 3.dll IV. III. Etanol. Oven pengering 5. Kapas 8.ketok-ketok kolom dengan batang karet sampai isi kolom kromatogarafi padat merata. Penyiapan kolom kromatografi 1.pada kolom. Bersihkan kolom kromatografi dan dikeringkan di oven.pipet tetes. . Alat dan Bahan : Alat : 1. Vial berbagai ukuran untuk menampung fraksi hasil kolom 6. 2. Buat suspense silica gel 60 untuk kromatografi dengan cairan pengelusi. Tuangkan ke dalam kolom kromatografi . Pasangkan vertical. Silika gel 60 2.dll Bahan : 1. Pelarut lebih lanjut / dengan tanpa tekanan udara masin-masing zat akan bergerak turun dengan kecepatan khusus sehingga terjadi pemisahan dalam kolom.lapisi bagian bawah kolom kromatografi dengan kapas. gelas ukur 4.

B. V. Lalu tuangkan cairan pengelusi ke dalam kolom kromatografi. 6. Tambahkan fase diam di atasnya.tamping fraksi tetes demi tetes dengan vial yang bersih dan kering. Hasil dan Pembahasan A. Hasil : . 5. Buka kran kolom kromatografi. Tuang dengan hati-hati ke dalam kolom kromatografi. 3. 2. Lalu monitor dengan KLT. 4. Gambar alat kromatografi kolom VI. Penyiapan sampel 1. Sampel dicampurkan dengan sedikit fase diam.

. Pembuatan Eluan : Methanol : Amoniak (200 : 3) 400 ml Methanol Amoniak = = x 400 = 394.0 ml Didapatkan 5 vial hasil fraksi. Sampel : Hasil fraksinasi dari Daun Pulae (Alstoniae Scholaris) 2.Keterangan :  Vial 1 : Bening  Vial 2 : Fraksi 1  Vial 3 : Fraksi 2  Vial 4 : Fraksi 3  Vial 5 : kembali bening B.91 6.08 x 400 = 5. Pembahasan : 1.

tetapi karena keterbatasan waktu pada praktikum ini tidak dilakukan Uji Sampel dengan KLT. .Sebenarnya harus dilakukan Uji Sampel dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT).

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->