P. 1
Pemeriksaan MPN

Pemeriksaan MPN

|Views: 251|Likes:
Published by Christine Destyara

More info:

Published by: Christine Destyara on Apr 05, 2013
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

09/16/2014

pdf

text

original

MOST PROBABLE NUMBER (MPN

)

Hari,tanggal Materi Tujuan

: 11-13 Maret 2013 : Most Probable Number (MPN) : Untuk menghitung jumlah bakteri coliform dan E.coli pencemaran makanan atau minuman. : indicator

Dasar Teori

MPN (Most Probable Number) atau JPT (Jumlah Perkiraan Terdekat), umumnya digunakan untuk menghitung jumlah bakteri coliform dan E.coli sebagai indicator pencemaran makanan atau minuman, namun bisa juga untuk kuman lain, tetapi media yang digunakan harus diganti. Bakteri coliform, bakteri enteric, gram negative, fermentative, kadang-kadang sebatas pada bakteri (basil) enteric gram negative yang meragi laktosa, contoh: E.coli, Klebsiella,Citrobacter. Jenis coliform: 1.faecal : dari faecal 2.Non faecal : dari farmit / benda-benda mati, missal : tanah, daun yang busuk. Koliform merupakan suatu grup bakteri yang digunakan sebagai indicator adanya polusi kotoran dan kondisi yang tidak baik terhadap air, makanan, susu, dan produk-produk susu. Koliform sebagai suatu kelompok dicirikan sebagai bakteri berbentuk batang, gram negatif, tidak membentuk spora, aerob dan anaerob fakultatif yang memfermentasi laktosa dengan menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35oC. adanya bakteri koliform di dalam makanan/minuman menunjukkan kemungkinan adanya mikroba yang bersifat enteropatogenik dan atau toksigenik yang berbahaya bagi kesehatan. Bakteri koliform dapat dibedakan menjadi 2 grup yaitu: (1) koliform fekal misalnya Escherichia coli dan (2) koliform non fekal misalnya Enterobacter aerogenes. Escherichia coli merupakan bakteri yang berasal dari kotoran hewan atau manusia, sedangkanEnterobacter aerogenes biasanya ditemukan pada hewan atau tanaman-tanaman yang sudah mati. Jadi, adanya Escherichia coli dalam air minum menunjukkan bahwa air minum itu pernah terkontaminasi feses manusia dan mungkin dapat mengandung pathogen usus. Oleh karena itu, standar air minum mensyaratkan Escherichia coli harus nol dalam 100 ml. untuk mengetahui jumlah koliform di dalam sampel digunakan metode Most Probable Number (MPN), pemeriksaan kehadiran bakteri koli dari air dilakukan berdasarkan penggunaan medium lactose broth yang ditempatkan di dalam tabung reaksi berisi tabung Durham (tabung kecil yang letaknya terbaik, digunakan untuk menangkap gas yang terjadi akibat fermentasi laktosa menjadi asam dan gas). Metode perhitungan jumlah kuman. - Direct : Menghitung kuman yang hidup dan mati, missal : dengan kamar hitung dan spektrofotometer. - Indirect : Menghitung kuman yang hidup, missal : dengan MPN dan ALT. Sampel atau bahan yang di periksa :
1|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah

 Pemeriksaan Penegasan atau Convirmative test : Menggunakan media BGLB (Brilliant Green Lactosa Broth). jika pada EMB (+) E. dan lain sebagainya 2.vaecalis berarti tercemar faeses). Hasil : positif (+) atau negative (-) gas. club. Sistem 3.S.5 Digunakan untuk pemeriksaan air yang belum diolah. Ragam pemeriksaan MPN 1. Sumur gali dan sumur bor. kemudian isinya di buang seperempat. buah (di blender sampai hancur) Tidak memakai minuman dari bahan pabrik karena ada pengawetnya atau carsentrant yang berfungsi untuk menghambat pertumbuhan kuman.3 dan sistem 5. Air isi ulang : mengalami water treatment atau penyaringan dan dilakukan penyinaran sinar UV  Minuman : Sirup dan jus (ditempatkan di plastik steril). Cara pengambilan:botol steril dimasukkan ke tengah sumur (tidak boleh menyentuh dinding) dengan pemberat steril. Urine : Cara pengambilan (bagian uretra dibersihkan dengan PZ steril atau detergen kemudian di ambil urine porsi tengah secara steril (secara suprapubic aspirasi) Indikator pemeriksaan air : di Indonesia (ada E.  Air minum : 1. Air : 1.coli. kuman bisa di tambah di TSIA / KIA.  Completed test : Menggunakan media EMB (Eosin Methylen Blue) Reagensia dan media IMVIC (Indol.5. Hasil : positif (+) atau negative (-) gas. Simon Citrat). 2. Setelah dari EMB. PDAM. Buka kran dan biarkan air mengalir sampai beberapa menit kemudian tampung pada tempat steril.di luar negeri (ada clostridium perfringer. VP. Nilai MPN di peroleh dari :  Pemeriksaan pendahuluan atau persumtive test : Dibutuhkan media LB I (Single Strength Lactose Broth) dan LB II (Double Strength Lactose Broth).coli berarti tercemar faeses). Air yang sudah dimasak 3.1. Sistem 5.1 Digunakan untuk pemeriksaan air yang sudah diolah karena di perkiraan Jumlah kuman rendah(<240) 2. Air kemasan : air merk aqua. media ini berfungsi untuk menghambat kuman coccus gram (+) yang memecah lactosa dan gas (+). setelah berisi penuh. baru kemudian ditanam di IMVIC. jumlah tabung yang digunakan disesuaikan dengan metode.karena diperkiraan jumlah kuman tinggi(>240/100 ml) 2|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah .3. alcohol (jika dari plastik). MR. contoh air kran Cara pengambilan : kran di steril dengan api (jika dari besi).

Bahan 1. 5.1.dari LB II.Rumus MPN = √ ∑ tabung (+)  100 ( ) Contoh: Dari BGLB terdapat 2 tabung (+). 9. 6. 8.65/100 ML bahan Apabila dari 7 tabung reaksi ada 1 yang (+) → test positif Apabila dari 7 tabung reaksi semua (-) → MPN 0 (harus dinyatakan dengan angka bukan positif atau negative.1 Alat dan bahan : Alat : 1. 7. Metode : 5. 7. MR. 2. 3.LBI(-) MPN = √( = ) ( ) 3  100 ( ) ( ) ( ) = 7. VP. Simon Citrate) Aquadest steril TSIA (Triple Sugar Iron Agar) Sampel : jus jeruk Autoclave Math pipet 10 ml dan 1 ml Erlenmeyer Petridish Kapas Tabung reaksi besar (untuk LB) Tabung reaksi sedang Tabung durham Kapas berlemak 3|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah . 4. : Media EMB (Eosin Methylen Blue) LB I (Single Strength Lactose Broth) dan LB II (Double Strength Lactose Broth) BGLB (Brilliant Green Lactosa Bile) IMVIC (Indol. 2.LBI(+) 1 tabung. 3. 5. 6. 4.

Membuat media yang dibutuhkan. Menyiapkan alat dan bahan. Menginkubasi kuman selama 24 jam 370 C. Pemeriksaan pendahuluan atau persumtive test. 2. d. c. Menyimpulkan hasil praktikum dengan tabel MPN Test. Pemeriksaan Penegasan atau Convirmative test. e. 3. Menanam kuman dari media TSIA ke media IMVIC untuk dilakukan uji biokimia terhadap kuman. Menginkubasi kuman dalam media EMB selama 24 jam 370 C. Melakukan strike kuman pada media EMB dari salah satu media BGLB yang positif kuman. 5. Melakukan uji biokimia terhadap bakteri. Completed test. c. Menanam sebanyak 2-3 mata ose tersebut ke dalam media BGLB. 4. Skema Praktikum : Sampel : Jus Jeruk 4|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah . Menginkubasi kuman dalam media TSIA selama 24 jam 370 C. f. dilihat dari timbulnya gelembung udara pada tabung durham. Mengambil kuman sebanyak 2-3 mata ose dari tabung LB I dan LB II yang positif. a. b. b. Mensterilisasi alat gelas dan aquadest yang akan digunakan.coli. h. b. 6. g. Memipet 1 ml dan 0. Memipet 10 ml sampel pemeriksaan ke dalam media LB II (Double Strength Lactose Broth).Langkah Kerja : 1. Menginkubasi kuman selama 24 jam 370 C. 7. Menginkubasi selama 24 jam 370 C. a. akan terlihat adanya koloni methalic sheen pada media EMB.1 ml sampel pemeriksaan ke dalam media masing-masing tabung LB I (Single Strength Lactose Broth). Menanam koloni methalic sheen pada media TSIA sebagai media differential. Jika kuman merupakan E. c. a.

LB II 10 ml media 10 ml sampel LB I 10 ml media 10 ml sampel Inkubasi 24 jam 370 C BGLB 10 ml media 3 mata ose kuman Inkubasi 24 jam 370 C 5|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah .

EMB Inkubasi 24 jam 370 C EMB Inkubasi 24 jam 370 C 6|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah .

8 MPN /100ml Methalic Sheen (E.1  1.1 0.coli) Lereng : Acid Dasar : Acid Gas : (+) Positif H2S : (-) Negatif Indole : (+) Positif MR : (+) Positif VP : (-) Negatif SC : (-) Negatif 5) Media IMVIC : Gambar Praktikum : IMVIC Simon Citrate VP MR TSIA 7|M P N ( M o s t Probable Number)-Christine dan Diah .1.Hasil Pemeriksaan : 1) 2) 3) 4) Media LB Media BGLB Media EMB Media TSIA : : : : 5.1.

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->