You are on page 1of 101

LAPORAN TETAP PRAKTIKUM BIOKIMIA

Devi Handayani Putri G1A 009 007

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS MATARAM MATARAM 2012

HALAMAN PENGESAHAN

Laporan ini dibuat sebagai salah satu syarat telah mengikuti praktikum biokimia. Mataram : 27 Desember 2012 Mengetahui : Koordinator

(Ayu Kusnandini) G1C 009004 Co. Ass Acara I Co. Ass Acara II

(Ratna Dewi Komalasari) G1C 009031

( Rizky wahyuni) G1C009011

Co. Ass Acara III

Co. Ass Acara IV

( Ni Luh Gede Dita Riasti Giri) G1C 009032

(Erwinda Tenti Primasari) G1C 009028

Co. Ass Acara V

(Harira) GIC 009033

KATA PENGANTAR
Puji syukur kehadirat Allah swt karena berkat rahmat dan hidayah-Nya laporan tetap biokimia ini dapat selesai tepat pada waktunya. Laporan tetap biokimia ini disusun dari hasil praktikum yang telah dilakukan setiap minggunya, yang digunakan sebagai syarat mengikuti respon akhir. Penyusunan laporan tetap ini tidak lepas dari bantuan co. ass baik secara langsung maupun tidak langsung. Penulis mengakui bahwa penyusunan laporan tetap ini masih jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu, diharapkan adanya kritik serta saran yang membangun guna menjadikan laporan tetap ini dapat menjadi lebih baik lagi. Akhir kata semoga laporan tetap ini dapat berguna bagi para pembaca.

Mataram, 27 desember 2012

Penyusun

DAFTAR ISI
Halaman Judul............................................................................................... Halaman Pengesahan..................................................................................... Kata Pengantar............................................................................................... Daftar Isi........................................................................................................ Acara I Karbohidrat.................................................................................................... Daftar Pustaka................................................................................................ Acara II Lipid............................................................................................................... Daftar Pustaka................................................................................................ Acara III Air Liur Dan Cairan Empedu......................................................................... Daftar Pustaka................................................................................................ Acara IV Bahan Makanan............................................................................................. Daftar Pustaka................................................................................................ Acara V Menentukan Kadar Kolesterol....................................................................... Daftar Pustaka................................................................................................

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA KARBOHIDRAT

Oleh: Baiq Witha Yulisvia G1A 009012

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS MATARAM MATARAM 2011

ACARA I KARBOHIDRAT A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM a. Tujuan praktikum : - Mengetahui cara melakukan isolasi amilum dari umbi - Melakukan identifikasi karbohidrat (monosakarida, disakarida dan polisakarida) berdasarkan reaksi-reaksi dan perubahan warnanaya b. Hari, tanggal c. Tempat : Senin, 14 November 2011. : Laboratorium Kimia Dasar Lantai III Fakultas MIPA Universitas Mataram. B. LANDASAN TEORI Karbohidrat merupakan polihidroksi aldehid/keton dengan rumus empirik (CH 2O)n. Karbohidrat terdiri atas monosakarida merupakan gula sederhana memiliki satu unit aldehida atau keton; oligosakarida (beberapa unit monosakarida); dan polisakarida, molekul besar linear atau bercabang yang mengandung banyak unit mosakarida. Gula yang paling banyak terdapat di alam, seperti ribose, glukosa, fruktosa dan monosakarida adalah rangkaian gula D. Gula sederhana dengan 5 atau lebih atom karbon dapat berada dalam bentuk cincin-tertutup hemiasetal, sebagai furanosa (cincin beranggota-lima) atau piranosa (cincin beranggotaenam). Furanosa dan piranosa terdapat dalam proses mutarotasi. Gula yang dapat mereduksi senyawa oksidator disebut gula pereduksi (Lehinger,1975:313). Molekul karbohidrat terdiri atas atom-atom karbon, hydrogen, dan oksigen. Jumlah atom hydrogen dan oksigegen merupakan perbandingan 2:1 seperti pada molekul air. Sebagai contoh molekul glukosa mempunyai rumus kimia C6H12O6, sedangkan rumus sukrossa adalah C12H22O11. Pada glukosa tampak bahwa jumlah atom hydrogen berbanding jumlah atom oksigen ialah 12:6 atau 2:1, sedangkan pada sukrosa 22:11 atau 2:1. Dengan demikian dahulu orang berkesimpulan adanya air dalam karbohidrat.Berbagai senyawa yang termasuk kelompok karbohidrat mempunyai molekul yang berbeda ukurannya, yaitu dari senyawa yang mempumyai berat molekul 90 hingga senyawa yang mempunyai berat molekul 500.000 bahkan lebih. Berbagai senyawa itu di bagi menjadi beberapa golongan,

yaitu monosakarida, disakarida, oligosakarida dan polisakarida. Monosakarida adalah karbohidrat yang paling sederhana, dalam artian molekulnya hanya terdiri atas beberapa atom karbon saja dan tidaak dapat diuraikan dengan cara hidrolisis dalam kondisi lunak menjadi karbohidrat lain. Contoh yang paling sederhana ialah gliseradehida dan dihidroksiaseton. Selain itu terdapat juga beberapa monosakarida yang penting yaitu glukosa, fruktosa, galaktosa dan pentosa. Yang ke dua adalah oligosakarida yakni dua molekul mmonosakaridaa yang tersusun berikatan satu dengan yang lain, membentuk satu molekul disakarida. Contohnya adalah sukrosa, laktosa, maltose, rafinosadan stakiosa. Pada umumnya molekul yang berukuran besar dan lebih kompleks dari pada monosakarida dan oligosakarida disebut dengan polisakarida, yakni molekul yang terdiri atas banyak molekul monosakarida. Yang termasuk dalam molekul ini adalah amilum, glikogen, dekstrin, selulosa dan mukopolisakarida(Winarno, 1992). Dalam larutan asam encer , walaupun dipanaskan monosakarida umumnya stabil. Tetapi apabila dipanaskan dengan asam kuat yang pekat, monosakarida menghasilkan furfural dan derivatnya. Reaksi pembentukan furfural ini adalah reaksi dehidrasi atau pelepasan molekul air dari suatu senyawa. Fural dan derivatnya dapat membentuk senyawa yang berwarna apabila di reaksikan dengan naftol atau timol.Pereaksi molisch terdiri atas larutan naftol dalam alcohol. Apabila peraksi ini ditambahkan pada larutan glukosa misalnya,kemudian secara hati-hati ditambahkan asam sulfat pekat akan terbentuk dua lapisan zat cair. Pada batas antara kedua lapisan itu akan terjadi warna ungu karena terjadai kondensasi antara furfural dengan naftol. Selain itu untuk mengetahui suatu kandumgan karbohidrat dalam suatau zat makanan digunakanlah suatau proses yang dinamakan reaksi benedict.preaksi ini mengandung kuprisulfat, natriumkarbonat dan natriumsitrat.glukosa dapat mereduksi ion CU++ dari kuprisulfat menjadi ion CU+ yang kemudian mengendap sebagai CU2O. adanya natrium karbonat dan natriun sitrat membuat peraksi Benedict bersifat basa lemah. Endapan yang terbentuk dapat berwarna hijau, kuning atau merah bata. Warna endapan ini tergantung pada konsentrasi karbohidrat yang dikandungnya (Poedjiadi, , 2007). Komposisi pati pada umumnya terdiri dari amilopektin sebagai bagian terbesar dan sisanya amilosa. Adanya informasi mengenai komposisi pati diharapkan dapat menjadi data pendukung dalam menentukan jenis produk yang akan dibuat dari pati atau tepung talas. Penelitian pada 71 sampel umbi talas yang diambil dari (Kusnawijaya, 1993). negara Fiji, Samoa Barat dan Kepualauan Solomon, diperoleh kadar pati rata-rata sebesar 24,5% dan serat sebesar 1,46%

Reaksi Molish merupakan salah satu cara uji kualitatif karbohidrat dengan memiliki Prinsip kerja yaitu ikatan glikosida pada karbohidrat akan terhydrolisa oleh H2SO4 (pekat) menghasilkan monosakarida yang kemudian dihydrasi membentuk Furtural. Dan bila direaksikan dengan Alpha Naftol akan memberikan warna ungu.Ada juga cara uji kualitatif lainnya yaitru Reaksi Benedict yang memiliki prinsip kerja Cu 2+ akan direduksi oleh gula menjadi Cu+. Dalam hal ini terbentuk endapan Cu2O. reaksi dinyatakan positif apabila terbentuk endapan berwarna biru kehijauan sampai merah batu bata /tergantung pada kadar gula reduksi yang tersedia ( Anonim, 2009 ). Benedict Reagen digunakan untuk mentes atau memeriksa kehadiran gula monosakarida dalam suatu cairan. Monosakarida bersifat redutor, dengan diteteskannya Reagen akan menimbulkan endapan merah bata. Selain menguji kualitas, secara kasar juga berlaku secara kuantitatif, karena semakin banyak gula dalam larutan maka semakin gelap warna endapan (Anonim, 2009 ). Identifikasi monosakarida dilakukan berdasarkan sifat kemampuannya mereduksi, yang dilakukan menggunakan uji Benedict. Uji Molicsch dipergunakan untuk mengenal karbohidrat yang mudah mengalami dehidrasi membentuk furfural maupun dihidrosifurfural yang lebih lanjut berkondensasi dengan resorsinol, orsinol ataupun a-naftol. Reagen Seliwanof dipergunakan untuk mengenal adanya karbohidrat yang mengandung gugus fungsional aldehid seperti fruktosa dan sukrosa. Pereaksi barfoed digunakan secara umum untuk mengenal adanya monosakarida. Uji iodin secara khusus dipergunakan untuk mengidentifikasi adanya polisakarida amilum(Anonim, 2010). Pereaksi Barfoed, Pereaksi ini terdiri atas larutan kupriasetat dan asam asetat dalam air, dan digunakan untuk membedakan antara monosakarida dengan disakarida. Monosakarida dapat mereduksi lebih cepat daripada disakarida. Jadi Cu2O terbentuk lebih cepat oleh monosakarida daripada oleh disakarida, dengan anggapan bahwa konsentrasi mopnosakarida dan disakarida dalam larutan tidak berbeda banyak. Tauber dan Kleiner membuat modifikasi atas pereaksi ini, yaitu dengan jalan mengganti asam asetat dengan asam laktat dan ion Cu+ yang dihasilkan direaksikan dengan pereaksi warna fosfomolibdat hingga menghasilkan warna biru adanya monosakarida. Disakarida dengan konsentrasi rendah tidak memberikan hasil positif. Perbedaan antara pereaksi Barfoed dengan pereaksi Fehling atau Benedict ialah bahwa pereaksi Barfoed digunakan pada suasana asam. (Anonim, 2009).

C. ALAT DAN BAHAN A. Alat ; Tabung reaksi Rak tabung reaksi Pipet tetes blender Gelas ukur Timbangan analitik Gelas kimia Pengaduk Kertas saring Penangas air Stop watch Penjepit Satu set alat penyaring buchner Gelas arloji Kertas label Tissue Kain kasa

B. Bahan :

Aquades Ubi kayu 100 gram (yang sudah di blender) Alkohol 95 % Larutan amilum Larutan glukosa Larutan 10% alfa naftol H2SO4 pekat Reagen benedict Larutan Fruktosa Larutan Iodine Reagen saliwanoff HCl 2N

D. SKEMA KERJA 1. Isolasi Amilum dari Umbi/Biji-bijian. 100 gram ubi kayu yang sudah diparut - (+) 200 ml aquades kemudian di blender selama 30 detik, dilakukan beberapa kali - Disaring residu dengan kain dan larutan yang keruh ditampung dalam gelas ukur 500 ml ( residu dibuang) - (+) 200 ml aquades dan dikocok Larutan yang jenuh - Didekantasi Larutan yang jenuh Endapan

- (+) 200 mL aquadest dan dikocok. Larutan yang jernih

Endapan - (+) 100 mL alkohol 95% - Disaring dengan kertas saring. Pati

- Dikeringkan pada suhu kamar - Ditimbang Hasil 2. Uji Kualitatif Karbohidrat a. Reaksi Mollisch Tabung reaksi - 2 mL larutan glukosa - 2 tetes larutan 10% alfa naftol - dialirkan 2 mL H2SO4 melalui dinding tabung hasil

Tabung reaksi - 2 mL larutan fruktosa - 2 tetes larutan 10% alfa naftol - dialirkan 2 mL H2SO4 melalui dindingtabung hasil

b. Reaksi Benedict Tabung reaksi

- 5 mL reagen Benedict - 8 tetes larutan glukosa hasil Dilakukan cara yang sama untuk larutan fruktosa

c. Reaksi Iodine Tabung reaksi

- 1 ml larutan karbohidrat - HCl encer beberapa tetes - 2 tetes larutan iodine hasil

d. Reaksi Saliwanoff

Tabung reaksi - 2 - di panaskan ml reagen saliwanoff - 2 tetes larutan glukosa

hasil

Dilakukan cara yang sama untuk larutan fruktosa E. HASIL PENGAMATAN

1.Isolasi Amilum Dari Umbi Berat ubi kayu = 100 gr Setelah diblender akan terjadi penggumpalan Amilum dalam suspensi alcohol 95 % berwarna putih keruh Setelah kering berwarna putih jernih Berat amilum kering = 15,43 gr Berat kertas saring = 1,07 gr Berat kertas saring + pati = 16,50 gr Kadar amilum = 15,43 gr/100 gr 100 % = 15,43 % Kesimpulan : Diperoleh amilum kering 15,43 gr dengan kadar amilum 15,43 % dengan warna putih jernih.

2 .Uji Kualitatif Karbohidrat No Langkah kerja .Reaksi Molissch glukosa 2 ml glukosa + 2 tetes larutan 10 % alfa naftol yang masih baru dan dicampur,dialirkan perlahan-lahan 2 ml H2SO4. Hasil Pengamatan Terdapat 2 lapisan yaitu bagian bawah kuning keemasan dan bagian atas putih keruh serta terdapat bagian pemisah yang berupa cincin yang berwarna ungu yang menandakan adanya kandungan karbohidrat.Larutan ini lama-kelamaan akan terasa panas akibat reaksi dengan asam kuat. -Terdapat seperti kotoran yang melayang di atas larutan dan

1.

setelah ditambah dengan 2 ml H2SO4. Fruktosa 2 ml fruktosa + 2 tetes larutan 10 % alfa naftol yang masih baru dan dicampur,dialirkan perlahan-lahan 2 ml H2SO4. - Terdapat 2 lapisan,bagian atas keruh kehitaman dan bagian bawah bening. - Terdapat cincin berwarna ungu pekat sehingga dapat dilihat pada percobaan ini mengandung karbohidrat.

3.

Reaksi Benedict 2 ml reagen Benedict + 8 tetes (0,5 ml) larutan glukosa dan glukosa diletakkan pada tabung reaksi dan dimasukkan dalam penangas selama 5 menit

Warna bennedict biru,glukosa warna orange Benedict + Glukosa = Biru Setelah dipanaskan menjadi berwarna hijau lumut.Menunjukkan terjadi reaksi positif. Warna bennedict biru,fruktosa

Perlakuan terhadap fruktosa (sama seperti glukosa)

warna orange Benedict + Glukosa = Biru Benedict + fruktosa dipanaskan warnanya orange dan terdapat endapan merah bata.

4.

Reaksi Iodine 1 ml larutan karbohidrat + HCl encer + 2 tetes larutan iodine

Larutan karbohidrat (amilum) berwarna putih bening + HCl + iodine= biru keunguan

5.

Reaksi Saliwanoff 2 ml reagen saliwanoff + 2 tetes larutan karbohidrat (Glukosa dan Fruktosa) dipanaskan 1 menit

Saliwanoff (bening) Saliwanoff+glukosa= menjadi merah Saliwanoff + fruktosa = menjadi agak merah Ini menandakan bahwa mengandung karbohidrat

F. ANALISA DATA

a. Isolasi amilum dari singkong (Manihot utilisima)

Diket : Berat amilum kering = 15,43 gr Berat kertas saring = 1,07 gr Berat kertas saring + pati = 16,50gr Dit : Kadar amilum. . .??? Jawab : Kadar Amilum = Berat amilum kering / 100 gr 100% = 15,43gr / 100 gr 100 % = 15,43 % b. Persamaan Reaksi

1. Reaksi Molisch

CH2OHHCOHHCOHHCOH HCOHC=O + H2SO4 Glukosa

C H + OH Furfural -naftol

Rumus cincin yang terbentuk O H2C C __SO3H OH

Cincin ungu senyawa kompleks

2). Reaksi benedict

3).Reaksi iodine

4).reaksi saliwanof

G. PEMBAHASAN Pada praktikum karbohidrat ini dilakukan proses pengisolasian senyawa karbohidrat yang ada pada umbi. Seperti yang kita ketahui umbi mengandung karbohidrat yang berfungsi sebagai simpanan energi. Karbohidratnya di simpan dalam bentuk amilum. Dan juga dilakukan pengidentifikasian karbohidrat berdasarkan reaksi-reaksi dari perubahan warnanya, menggunakan uji kualitatif karbohidrat. Percobaan yang dilakukan yang pertama yaitu pengisolasian amilum dari umbi, umbi yang digunakan adalah umbi kayu. Untuk mempermudah proses isolasi amilum dari umbi,maka terlebih dahulu dilakukan proses penghancuran atau pemblenderan umbi yang masih utuh sehingga terjadi proses koagulasi (penggumpalan) amilum.Untuk memperjelas adanya amilum maka digunakan suspense alcohol 95 %,karena akan mempengaruhi warna yang akan menjadi alat identifikasi ada tidaknya amilum. Berdasarkan hasil praktikum dan analisis data,dari 100 gr berat umbi kayu diperoleh 15,43 gr amilum dengan kadar 15,43 %. Untuk hidrolisis karbohidrat, dilakukan uji kualitatif karbohidrat yang terdiri dari uji reaksi molisch, uji raksi benedict, uji reaksi iodine dan uji reaksi saliwanoff digunakan kaebohidrat (glukosaa dan fruktosa). Pada reaksi Molisch, adanya senyawa karbohidrat ditandai dengan adanya cincin ungu pada bidang batas dua cairan.Cincin ungu tersebut terbentuk dari adannya ikatan antara glukosa atau fruktosa dengan guguas OH yang ada pada larutan alfa naftol melalui reaksi hidrolisis dimana H2SO4 mengkatalis reaksi tersebut. Pada uji benedict, teori yang mendasarinya adalah gula yang mengandung gugus aldehit atau keton bebas akan mereduksi ion Cu dalam suasana alkalis menjadi Cu yang mengendap sebagai Cu2O ( kupro oksida ) berwarna merah bata. Sukrosa oleh HCL dalam keadaan panas akan terhidrolisis lalu menghasilkan glukosa dan fruktosa, hal ini menyebabkan uji benedict yang sebelum terhidrolisis memberikan hasil negatif menjadi positif. Dari hasil percobaan diperoleh warna hijau lumut yang menunjukan terjadinya reaksi positif, hal ini untuk perlakuan pada glukosa. Sedangkan pada fruktosa diperoleh warna merah bata yang juga menunjukan reaksi positif. Pada reaksi benedict adnya karbohidrat ditunjukan oleh beberapa macam warna. Yang menyebabkan terjadinya bermacam macam kemungkinan warna karena ada ikatan spesifik antara ragen benedict dengan karbohidrat itu dan konsentrasi larutan yang

ditambahkan kedalamnya berbeda- beda. Semakin besar konsentrasinya maka warnanya juga akan semakin pekat. Pada uji reaksi iodine, amilum yang ditambahkan dengan HCl dan iodine menghasilkan warna biru, hal ini menunjukkan bahwa terjadi reaksi positif dan membuktikan adanya polisakarida. Polisakarida dengan penambahan iodium akan membentuk kompleks adsorpsi berwarna yang spesifik. Amilum atau pati dengan iodium menghasilkan warna biru (Anonim, 2009) Sedangkan pada uji reaksi saliwanoff diperoleh hasil larutan warna merah setelah dipanaskan di dalam penangas air pada larutan glukosa maupun fruktosa. Hal ini menandakan terjadinya reaksi positif antara larutan dengan reagen saliwanoff yang menghasilkan warna merah pada larutan. Berdasarkan Anonim(2009) pendidihan lebih lama harus dihindarakan karena aldosa-aldosa akan diubah menjadi ketosa. H. PENUTUP a. Kesimpulan Dari hasil praktikum dan analisis data dapat diambil kmesimpulan sebagai berikut : Untuk mengisolasi amilum dari umbi dapat menggunakan suspense alcohol 95 % Dari 100 gr berat umbi terdapat 15,43 gr amilum dengan kadar 15,43% Karbohidrat merupakan senyawa yang memiliki gugus fungsi OH,gugus aldehid atau gugus keton dengan hasil metabolisme antara lain glukosa dan fruktosa Untuk uji kualitatif karbohidrat dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu : a. Reaksi Molissch : adanya cincin warna ungu pada bidanng batas dua cairan menunjukkan bahwa pada larutan tersebut terdapat karbohidrat. b.Reaksi Benedict : adanya karbohidrat ditandai dengan terbentuknya berbagai warna seperti orange,biru,hijau,dan merah bata.

c. Reaksi Iodine

: adanya karbohidrat ditandai dengan terbentuknya warna biru pada larutan.

d. Reaksi Saliwanoff

: adanya karbohidrat ditandai dengan terbentuknya warna merah pada larutan setelah dipanaskan.

b. Saran Bagi para praktikan diharapkan lebih teliti dan hati-hati dalam menjalankan praktikum agar tidak terjadi hal-hal yang tidak diingkan serta tujuan dari praktikum dapat tercapai.

DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2009. Petunjuk Praktikum Biokimia Umum. Mataram : UNRAM. Anonim. 2010. Laporan biokimia karbohidrat. Diunduh dari: http://sukseskimiasukseskimia.blogspot.com/2010/04/laporan-biokimia-karbohidrat.html pada tanggal 7 januari 2012. Kusnawijaya. 1993. Biokimia. Bandung : Exact Ganeca. Lehninger, A.L. 1997. Dasar-dasar Biokimia : edisi ke-Jilid 1. Erlangga. Jakarta Poedijadi, Anna. 2007. Dasar Dasar Biokimia. Jakarta : UI Press. Winarno,F.G. 1992. Kimia pangan Dan Gizi. Jakarta: Grahamedia . Yukiicettea. 2009. Laporan biokimia. Diunduh dari: http://yukiicettea.blogspot.com / 2009/10/ biochemistry-laporan-biokimia.html. pada tanggal 7 januari 2012.

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA LIPIDA

Oleh: Baiq Witha Yulisvia G1A 009012

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS MATARAM MATARAM 2011 ACARA II LIPIDA
1) PELAKSANAAN PRAKTIKUM

1. Tujuan

: - Mengidentifikasi kualitas minyak dengan uji sifat fisik dan kimia (bilangan penyabunan, bilangan asam, bilangan peroksida dan grease spot test ). - Mempelajari sifat-sifat lipid. - Melakukan analisa lipid secara kualitatif.

2. Hari, tanggal 3. Tempat

: Minggu, 11 Desember 2011. : Laboratorium Kimia Dasar Lantai III, Fakultas Mipa Universitas Mataram.

2) LANDASAN TEORI Lemak adalah suatu ester asam lemak dengan gliserol. Gliserol adalah suatu trihidroksi alkohol yang terdiri atas tiga atom karbon. jadi tiap atom karbon mempunyai gugus OH. Suatu molekul gliserol dapat mengikat satu, dua atau tiga molekul asam lemak dalam bentuk ester, yang disebut monogliserida, digliserida,atau trigliserida. Lemak pada hewan pada umumnya berupa zat padat pada suhu ruangan, sedangkan lemak yang berasal

dari tumbuhan berupa zat cair. Lemak yang mempunyai titik lebur tinggi mengandung asam lemak cair atau yang biasa disebut minyak mengandung asam lemak tak jenuh. Lemak hewan dan tumbuhan mempunyai susunan asam lemak yang berbeda-beda. Untuk menentukan derajat ketidak jenuhan asam lemak yang terkandung didalamnya diukur dengan bilangan iodium. Minyak kelapa sawit mengandung asam lemak tidak jenuh dan dengan proses hidrogenasi ini akan terjadi lemak padat. Ini adalah salah satu proses pada pembuatan margarin dan minyak kelapa sawit. (Poedjiadi,2007:59). Minyak kelapa merupakan bagian paling berharga dari buah kelapa. Kandungan minyak pada daging buah kelapa tua adalah 34,7%, minyak kelapa digunakan sebagai bahan baku industri atau sebagai minyak goreng. Minyak kelapa diperoleh dari daging buah kelapa segar. Proses untuk membuat minyak kelapa dari daging buah kelapa segar dikenal dengan proses basah karena pada proses ini ditambahkan air untuk mengekstraksi minyak. (Tarwiyah,2001:56). Lemak diklasifikasikan berdasarkan panjang rantai karbon yang dimilikinya. Hampir dua per tiga dari kandungan minyak kelapa merupakan asam lemak yang berantai karbon sedang. Hampir 50% dan asam lemak yang terkandung dalam minyak kelapa adalah golongan lauric acid.(Setiabudi,2004:78). Lemak dan minyak merupakan makronutrien penting yang menempati urutan kedua setelah HA sebagai bahan bakar untuk memberikan energi kepada sel-sel tubuh. Lemak mempunyai fungsi lain yang tidak dimiliki oleh HA seperti pembentukan komponen membran vitamin larut lemak. Berdasarkan bentuknya, lemak dibedakan drngan minyak yaitu lemak berbentuk padat sedangkan minyak berbentuk cair. Lemak atau minyak yang terdapat didalam tubuh disebut pula lipid. Lemak yang ada dalam makanan maupun tubuh dapat diklasifikasikan menjadi 3 kelompok utama yaitu:trigliserida, kolesterol dan fosfolipid. Asam lemak dapat dibedakan pula antara asam lemak jenuh dan tidak jenuh. Keduanya dibedakan berdasarkan ada tidaknya ikatan rangkap antara dua atom karbonnya dalam rumus bangunnya. Minyak nabati seperti minyak jaitu, kanola dan kacang lebih banyak mengandung asam lemak omega-9 atau asam oleat sementara minyak kelapa mengandung lebih banyak asam lemak jenuh atau asam palmitat. Karena itu, dua jenis minyak yang disebutkan terakhir ini sering digolongkan kedalam jenis minyak jenuh kendati minyak sawit sendiri dengan pemrosesan dalam industri sudah terolah menjadi jenis minyak yang mengandung cukup banyak asam lemak tak jenuh.(Hartono,2006:28). Dalam cairan yang mengandung asam lemak dikenal peristiwa tengik. Bau yang khas ini disebabkan karena adanya senyawa campuran asam keto dan asam hidroksiketo yang

berasal dari dekomposisi asam lemak yang terdapat dalam cairan itu. Sampai sekarang reaksi menjadi tengik dikenal sebagai reaksi asam lemak tak jenuh.(Martoharsono,2006:59). C. ALAT DAN BAHAN 1. Alat -

Gelas ukur 25 mL. Gelas ukur 50 mL. Pipet volume 50 ml. Pipet tetes. Gelas arloji. Erlenmeyer 100 mL. Erlenmeyer 250 mL. Labu takar. Corong. Statif. Klem. Timbangan Analitik. Hot Plate (penangas uap). Alat refluks. Alat titrasi. Labu pengenceran.

2. Bahan a. Minyak goreng bekas. b. Minyak goreng baru. c.Kertas Saring. d. Larutan KOH 0,5 N.

e.Alkohol 95%. f. Indikator PP. g. Larutan HCl 0,5 N. h. Larutan KOH 0,1 N. i. Aquades. j. Campuran kloroform-asam asetat glasial (3:2 V/V). k. Larutan KI jenuh. l. Larutan Na2S2O3 (tiosulfat) 0,1N. m. Larutan indikator amilum. n. Kertas label. o. Tissue. D. SKEMA KERJA 1. Grease Spot Test ( Test Noda Lemak) - Dilakukan untuk minyak baru dan minyak bekas. Minyak + sedikit dietil eter 2 tetes, dikocok Dituang dalam gelas arloji diuapkan eternya diusap larutan dengan kertas saring

Hasil (ada/tidak noda minyak)

2. Penentuan Bilangan Penyabunan - Dilakukan untuk minyak baru dan minyak bekas. Minyak 4 gram

- Ditimbang dalam erlenmeyer 20 ml

- + 50 ml KOH dalam etanol Erlenmeyer dihubungkan dengan pendingin tegak Minyak dididihkan sampai semua minyak tersabunkan - Didinginkan Gliserol & garam asam lemak - + indikator fenoftalin - Dititrasi dengan larutan standar HCl 0,5 N Hasil (volume HCl untuk titrasi) 3. Penentuan - Dilakukan untuk minyak baru dan minyak bekas. 10 gr minyak Dimasukan dalam erlenmeyer + 25 ml alkohol 95 % Erlenmeyer ditutup dengan pendingin balik Dipanaskan sampai mendidih Digojog kuat-kuat untuk melarutkan asam lemak Larutan Didinginkan Dititrasi dengan KOH 0,1 N menggunakan indikator fenoftalin Hasil (volume larutan KOH untuk titrasi) Bilangan Asam

4. Penentuan Bilangan Peroksida - Dilakukan untuk minyak baru dan minyak bekas. 0,5 gr minyak

- Dimasukkan dalam erlnmeyer 250 mL - + 30 mL pelarut campuran klorofom asam asetat glasial (3:2) v/v

Larutan digoyangkan + 0,5 larutan KI jenuh Dikocok + 30 mL aquadest

Larutan - dititrasi dengan larutan standar Na2S2O3 (natrium tiosulfat) sampai warna kuning hampir hilang (kuning muda) - + 0,5 mL indikator amilum - titrasi kembali dengan Na2S2O3 0,1 N sampai jernih.

E. HASIL PENGAMATAN a.Minyak Baru Langkah kerja 1. Grease Spot test (tes noda lemak) Lemak/minyak dikocok dengan eter,tuang - Terbentuk warna transparan pada dalam kaca arloji uapkan eternya. Usap kaca arloji dengan kertas saring kertas lakmus. kertas saring, menandakan uji positif (adanya noda minyak). - Minyak yang awalnya berwarna kuning menjadi bening. 2. Penentuan bilangan penyabunan Hasil

4 gr minyak dalam erlemeyer 50 ml + 50 - Larutan menjadi putih keruh/putih ml KOH 0,5 N dalam etanol. Erlemeyer dihubungkan dengan pendingin tegak dan minyak didihkan dengan penangas air sampai minyak tersabunkan. Larutan didinginkan + 5 tetes indikator PP. Dititrasi dengan larutan HCL standar 0,5 N. - V titrasi HCL = 41,2 mL, larutan kembali ke warna semula pada saat dititrasi. - Larutan berwarna pink. susu. - Saat dititrasi larutan terbentuk 2 lapisan: atas putih keruh dan bawah putih susu.

1.

- Uji Blanko 50 ml KOH dalam etanol ditambahkan 5 tetes indicator PP lalu dititrasi dengan HCL 0,5 N sampai larutan bening.

- Larutan bening menjadi pink dan lama bening. - Larutan bening, HCL yang dipakai kelamaan menjadi ungu

2.

45,4 mL.

3. Penentuan bilangan asam. 20 gr minyak dalam erlemeyer 250 ml + 50 ml alkohol 95 % dipanaskan. Erlemeyer ditutup dengan pendingin balik dipanaskan sampai mendidih dan digosok kuat. Didinginkan,larutan indikator PP. dititrasi dengan larutan standar KOH 0,1 N dengan

- Tebentuk 2 lapisan yaitu atas: bening dan bawah: kuning. - Terbentuk 2 lapisan yaitu, bawah: kuning (merupakan minyak), dan atas: keruh (air).

- setelah penambahan indikator tidak terjadi perubahan warna tetapi setelah dititrasi terbentuk 2 lapisan yaitu atas: pink dan bawah: kuning. - V KOH yang terpakai = 9,5 mL.

4. Penentuan bilangan peroksida 0,5 gr minyak + 30 ml pelarut kloroform : asam asetat glasial (2:3 v/v) dikocok.

- Larutan berwarna bening.

Ditambahkan 0,5 ml KI jenuh 7 tetes - Warna menjadi agak kuning. sambil dikocok + 30 ml aquadest. Iodium yang dibebaskan oleh peroksida dititrasi dengan larutan standar Na- - Terbentuk 2 lapisan yaitu atas: kuning dan bawah: pink muda tiosulfat 0,1 N dengan indikator amilum 7 tetes (sampai jernih). - V Na2S2O3 yang dipakai = 1,5 mL.

b.Minyak Bekas Langkah kerja 1.Grease Spot test (tes noda lemak) Lemak/minyak dikocok dengan eter,tuang dengan lakmus. dalam kertas kaca saring arloji uapkan eternya.Usap kaca arloji - Minyak kotor berwarna merah bening/kuning. pada uji yang awalnya teh menjadi Hasil

kertas - Terbentuk warna transparan kertas saring, menandakan positif (adanya noda minyak).

2. Penentuan bilangan penyabunan 4 gr minyak dalam erlemeyer 50 ml + 50 ml KOH 0,5 N dalam etanol. Erlemeyer dihubungkan dengan pendingin tegak dan

- Larutan berwarna putih kekuningan.

- Terbentuk 2 lapisan yaitu atas: putih kekuningan dan bawah: keruh. minyak - Menjadi pink.

didihkan dengan penangas. Sampai minyak tersabunkan. - Menjadi warna bening

Larutan didinginkan + 5 tetes - Volume HCL yang dipakai = 41,9 indikator PP. Dititrasi dengan larutan HCL standar 0,5 N. - Terbentuk 2 lapisan, atas kuning bening dan bawah kuning kecoklatan. 3. Penentuan bilangan asam. 10 gr minyak dalam erlemeyer - Terbentuk 2 lapisan: diatas berwarna 250 ml + 25 ml alkohol 95 %. kuning keruh dan bawah kuning pekat. Erlemeyer pendingin kuat. ditutup balik dengan dipanaskan - Setelah ditambah inikator PP tidak ada perubahan tetapi setelah titrasi tebentuk 2 lapisan, atas: pink dan bawah: kecoklatan. Didinginkan,larutan N dengan indikator PP. dititrasi - V KOH yang dipakai = 10 mL. mL.

sampai mendidih dan digosok

dengan larutan standar KOH 0,1

4.Penentuan Bilangan Peroksida 0,5 gr minyak + 30 ml pelarut kloroform : asam asetat glasial (2:3 v/v) dikocok.

- Larutan berwarna kuning bening.

- Berwarna kuning. - terbentuk 2 lapisan, atas: kuning

Ditambahkan 0,5 ml KI jenuh 7 tetes sambil dikocok + 30 mL aquadest.

keruh dan bawah: keruh.

Iodium yang dibebaskan oleh - V Na2S2O3 yang dipakai = 23,5 mL. peroksida dititrasi dengan larutan standar Na-tiosulfat 0,1 N dengan indikator amilum 7 tetes sampai jernih.

F. ANALISIS DATA 1. Persamaan Reaksi KOH + HCl KCl + H2O Asam lemak + etanol Larut Minyak + kloroform + asam asetat glacial Larut I3- + amilum kompleks I3- amilum I3 + 2S2O32- 2I- + 3S4O62-

2. Perhitungan a) Bilangan Penyabunan Reaksi :

CH2COOR1 CHCOOR2

CH2OH CHOH CH2OH gliserol

R1COOK R2COOK R3COOK garam asam lemak

3KOH

CH2COOR3 Trigliserida

HCl(aq) + KOH(aq) Perhitungan :

KCl(aq)

H2O(l)

Minyak Goreng Baru Diket : Berat minyak = 4 gram V1 untuk titrasi blanko = 45,4 mL V2 untuk titrasi minyak = 41,2 mL Penyelesaian :
( 45,4 41,2) x 28,5 4
119,7 ml/gr 4

Bilangan penyabunan =

= 29,92 ml/gr Minyak Goreng Bekas Diket : Berat minyak = 4 gram V1 untuk titrasi blanko = 45,4 ml V2 untuk titrasi minyak = 41,9 ml Penyelesaian :
( 45,4 41,9) x 28,5 4
99,75 ml/gr 4

Bilangan penyabunan =

= 24,94 ml/gr b) Bilangan Asam Reaksi:


H2C O O C R1 H2C OH

HC

O C O C

R2 + 3CH2CH2OH

HC

OH

H2C

R3

H2C

OH

+3RCOOCH2CH3

Perhitungan : Minyak Goreng Baru Diket : Berat minyak = 20 gram VKOH = 9,5 ml NKOH = 0,1 N Penyelesaian : Bilangan asam = =
9,5 x 0,1x56,1 20 53,295 ml/gr 20

= 2,66 ml/gr

Minyak Goreng Bekas Diket : Berat minyak = 10 gram

VKOH = 10 ml NKOH = 0,1 N Penyelesaian : Bilangan asam = =


10 x 0,1x56,1 10 56,1 ml/gr 10

= 5,61 ml/gr c) Bilangan Peroksida Reaksi : CH3CH2CHCOOH + O2 CH3CH2COOCH2COOH As.lemak tak jenuh Peroksida

Perhitungan : Minyak Goreng Baru Diket : Berat minyak = 0,5 gram VNa2S2O3 = 1,5 ml NNa2S2O3 = 0,1 N Penyelesaian : Bilangan peroksida =
1,5 x 0,1x1000 0,5 150

= 0,5

= 300 Minyak Goreng Bekas Diket : Berat minyak = 0,5 gram VNa2S2O3 = 23,5 ml NNa2S2O3 = 0,1 N Penyelesaian : Bilangan peroksida =
23,5 x 0,1x1000 0,5 2350

= 0,5 = 4700 d) Bilangan Ester Minyak goreng baru

Bilangan ester = bilangan penyabunan - bilangan asam = 29,92-2,66 = 27,26 ml/gr Minyak goreng bekas

Bilangan ester = bilangan penyabunan - bilangan asam

= 24,94-5,61 = 19,33 ml/gr

G. PEMBAHASAN Praktikum kali ini dilakukan Identifikasi senyawa dengan menggunakan Grease spot test (tes noda lemak), Identifikasi kualitas minyak melalui penentuan bilangan penyabunan, penentuan bilangan asam, dan bilangan peroksida. Identifikasi yang dimaksudkan disini adalah secara kualitatif berdasarkan sifat- sifat yang diuji tadi. Minyak yang digunakan adalah minyak kelapa yang merupakan salah satu bahan pokok yang digunakan dalam kehidupan sehari-hari. Selain dimanfaatkan sebagai minyak goreng, dapat juga dimanfaatkan untuk keperluan lainnya yaitu sebagai minyak kesehatan. Pada percobaan pertama yaitu identifikasi senyawa dengan tes noda lemak atau Grease spot tes dilakukan dengan meneteskan minyak pada gelas arloji dan ditetesi dengan 1 tetes ester. Dari hasil pengamatan diatas didapatkan warna minyak yang kuning bening setelah eter diuapakan. Warna kuning ini sesuai dengan warna minyak semula. Hal ini berarti minyak tersebut tidak mengalami hidrolisis karena reaksinya dengan eter. Hal ini berarti warna kuning adalah warna yang khas bagi suatu minyak. Suatu sampel (minyak) dilarutkan dalam eter dan dibiarkan menguap lalu diusap dengan kertas saring maka akan tampak adanya bercak pada kertas saring tersebut dan terlihat transparan hal ini menunjukkan bahwa adanya lipid pada munyak tersebut. Pada percobaan kedua dilakukan penentuan bilangan penyabunan. Dimana bilangan penyabunan merupakan jumlah KOH (mg) yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas dan asam lemak hasil hidrolisis dalam 1 gram zat. Atau dapat juga didefinisikan sebagai jumlah mg KOH yang diperlukan untuk menyabunkan satu gram minyak. Jika sejumlah sampel minyak disabunkan dengan larutan KOH dalam alkohol, maka KOH akan bereaksi dengan trigliserida yaitu, tiga molekul KOH bereaksi dengan satu molekul minyak, yang penentuannya dilakukan dengan cara me-refluks dengan larutan KOH-alkohol hingga larutan mendidih, kemudian dilakukan titrasi menggunakan HCl sehingga KOH yang bereaksi dapat diketahui yaitu terbentuknya warna oranye dan minyak tidak bisa menyatu dengan KOH. Ketika minyak dididihkan maka pengaruh panas yang berlebihan pada minyak goreng akan menyebabakan perubahan fisik dan kimia karena adanya oksidasi dan menghasilkan

produk seperti asam lemak bebas, dan dari praktikum ini diperoleh bilangan penyabunan yaitu 24,94 ml /gram untuk minyak kotor dan 29,92 ml/gram untuk minyak baru. Jadi dapat kita ketahui bahwa disini terjadi adanya suatu reaksi yang disebut sebagai hidrolisis. Lemak pada praktikum ini dihidroisis menggunakan basa, sehingga dihasilkan gliserol dan garam asam lemak atau sabun (Poedjiadi, 1994). Untuk menentukan kualitas minyak, dapat diketahui dengan menentukan bilangan asam dan bilangan peroksida. Menurut penelitian yang telah dilakukan, bahwa minyak yang telah digunakan beberapa kali dan mengalami beberapa kali pemanasan memiliki bilangan peroksida dan bilangan asam yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan minyak baru (Hawab, 2009). Pada umumnya, jika minyak dibiarkan di udara dalam jangka waktu yang lama, maka akan menimbulkan bau yang tidak sedap. Hal demikian diebabkan karena adanya proses hidrolisis oleh asam lemak bebas. selain itu terjadi pula adanya proses oksidasi asam lemak tak jenuh yang menghasilkan peroksida yang dapoat menambah bau semakin tidak sedap dan akhir dari proses ini akan membentuk aldehida. Inilah yang menyebabkan minyak menjadi tengik (Poedjiadi, 1994). Pada percobaan ketiga yaitu penentuan bilangan asam didapatkan hasil bilangan asam untuk minyak baru lebih sedikit daripada minyak kotor. Hal ini adalah sesuai dengan teori yang ada bahwa bilangan asam minyak kotor atau minyak bekas lebih tinggi daripada minyak baru. Minyak baru sebesar 2,66 ml/gram sedangkan untuk minyak kotor yaitu 5,61 ml/gram. Bilangan asam didefinisikan sebagai jumlah KOH yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas dalam 1 gram zat. Bilangan asam menunjukkan banyaknya asam lemak bebas dalam minyak yang dinyatakan dengan mg basa per 1 gram minyak. Bilangan asam merupakan parameter penting untuk penentuan kualitas minyak, dan bilangan ini menunjukkan banyaknya asam lemak bebas yang ada dalam minyak akibat adanya reaksi hidrolisis akibat dari reaksi kimia dan pemanasan. Bilangan asam ini menunjukkan banyaknya asam lemak bebas dalam minyak. untuk menentukannya dilakukan dengan cara titrasi menggunakan KOH-Alkohol yang ditambahkan dengan indikator pp. Semakin tinggi bilangan asamnya maka akan semakin banyak minyak yang sudah terhidrolisis. Sehingga dengan bilangan asam yang relatif kecil dapat dikatakan bahwa minyak tersebut masih bagus karena belum terhidrolisis. H. PENUTUP 1. Kesimpulan Berdasarkan hasil yang telah diperoleh, dapat ditarik beberapa kesimpulan dianataranya : a. Grease spot test dapat digunakan untuk menetukan tes noda suatu lemak atau minyak .

b. Bilangan Penyabunan adalah jumah KOH (mg) yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas dan asam lemak hasil hidrolisis dalam 1 gram zat. c. Dalam penetapan bilangan penyabunan digunakan basa kuat yaitu KOH d. Diperoleh bilangan penyabunan yaitu 29,92 ml/gram untuk minyak baru dan untuk minyak kotor yaitu 24,94 ml/gram ,yang menunjukkan bahwa kualitas minyak kotor kurang bagus karena nilainya lebih sedikit dari minyak baru. . e. Bilangan asam adalah jumlah KOH (mg) yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas dalam 1 gram zat. f. Bilangan Asam untuk minyak baru diperoleh nilai 2,66 ml/grm dan untuk minyak kotor yaitu 5,61 ml/gram dan bilangan peroksida pada minyak baru adalah 300 sedangkan untuk minyak kotor adalah 4700. g. Semakin kecil bilangan asam dan bilangan peroksida pada suatu minyak maka minyak tersebut semakin bagus. h. Lipid bersifat larut dalam air. 2. Saran Praktikkkan lebih memperhatikan prosedur yang ada, untuk meminimaslisir kesalahan

DAFTAR PUSTAKA Charles E.. 2010. Lipids introduction. Elmhurst College.

Hart H. 1983. Organic Chemistry, a Short Course, 6th Edition. Michigan State University, Houghton Mifflin Co.Page 87-88. Hartono, Andry.2006. Terapi Gizi dan Diet Rumah Sakit. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC Hawab, Mansjur. 2009. Lipid. http;digilib.biologi.lipid.go.id/view.html?idm=4440 Herlina, Netti dan Ginting.2002. Lemak dan Minyak jurusan teknik kimia. Sumatera Utara : Universitas Sumut Press Iskandar S. 2005. Minyak Tumbuhan, Sumber Energi Alami. Kusumastuti.1990. Stabilitas Krim Santan, optimasi Proses Pengasaman dan Kelarutan protein Kelompok Dalam Air, skripsi FMIPA UGM Yogyakarta Lea PJ, Leegood RC.1999. Plant Biochemistry and Molecular Biology 2nd edition. West Sussex, England: John Wiley & Sons.Page 103. Martoharsono, Soeharsono.2006. Biokimia 1. Yogyakarta: Gajah Mada University Press Poedjiadi, Anna.2007. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta : UI Press Poedjiadi, Anna.1994.. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta : UI Press Taiz L, Zeiger E. 2006. Plant physiology ed ke-4. Sinaver associates, inc., publishers:Massachusetts.Page 56-57. Tarwiyah, Kemal.2001. Minyak Kelapa Dalam Ilmu Pengetahuan, Teknologi dan Industri. Sumatera Barat Yasya, Wichitra. 2007. Pembuatan Minyak Kelapa Murni Secara Enzimatis. Bogor: ITP Central Library

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA UJI SIFAT FISIK DAN KIMIA CAIRAN TUBUH

(AIR LIUR & EMPEDU)

Oleh: Baiq Witha Yulisvia G1A 009012

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS MATARAM MATARAM 2011
ACARA III UJI SIFAT FISIK DAN KIMIA CAIRAN TUBUH

(AIR LIUR DAN EMPEDU) A.PELAKSANAAN PRAKTIKUM 1. Tujuan 2. Hari, tanggal 3. Tempat : Untuk mengetahui sifat fisik dan kimia dari air liur dan empedu : Minggu, 11 Desember 2011 : Laboraturium Kimia Dasar Lantai III, Fakultas MIPA Universitas Mataram B. LANDASAN TEORI Cairan yang terdapat dalam tubuh dapat dibagi dalam dua bagian, yaitu yang terdapat di dalam sel (intra sel) dan di luar sel (ekstra sel). Cairan dalam sel berfungsi untuk medium bagi reaksi-reaksi metabolisme yang berlangsung dalam sel ; sedangkan cairan luar sel berfungsi memberikan zat-zat yang diperlukan oleh sel, baik cairan dalam sel maupun cairan luar sel harus selaalu dalam kondisi konstan. Salah satu cairan tubuh yaitu air liur dan empedu yang berguna dalam proses pengubahan makanan dari awal hingga menjadi berbentuk molekuler yang siap untuk diserap melalui dinding usus, disebut pencernaan makanan dan proses ini berlangsung dalam system pencernaan makanan yang terdiri atas beberapa organ tubuh, yaitu mulut, lambung, dan usus dengan bantuan pankreas dan empedu. Dalam proses pencernaan terdiri dari pencernaan mekanik dan kimiawi. Air liur dan empedu digunakan dalam proses pencernaan secara kimiawi (Poedjiadi, 1994). Dalam pencernaan, air liur berperan dalam membantu pencernaan karbohidrat. Karbohidrat atau tepung sudah mulai dipecah sebagian kecil dalam mulut oleh enzim ptyalin. Enzim dalam air liur memecah amilum menjadi disakarida maltosa dan polimer glukosa kecil lainnya. Saliva mengandung 3 protein pencernaan yaitu lipase lingual, musin dan alpha amilase (ptialin). Kelenjar saliva yang utama adalah kelenjar parotis, sublim encer. Saliva mempunyai pH antara 6,0 - 7,4. Kisaran ini merupakan rentang keasaman yg tepat dan menguntungkan untuk kerja pencernaan dari ptialin. Pada kondisi normal,sekitar 0,5 ml saliva yang hampir semuanya bertipe mukus, disekresikan setiap detik sepanjang waktu kecuali selama tidur, saat sekresi menjadi sangat sedikit. Sekresi ini sangat berperan penting dalam mempertahankan kesehatan jaringan rongga mulut. Rongga mulut berisi bakteri patogen yang dengan mudah merusak jaringan dan menimbulkan karies gigi. Saliva mempunyai daya antibakteri, dan pada penderita dengan defisiensi atau kekurangan salivasi (xerostomia) mempunyai insiden karies gigi yang lebih tinggi daripada normal (Poedjiadi, 2007).

Air liur (saliva) juga melindungi gigi deng Air liur adalah cairan bening yang dihasilkan dalam mulut manusia dan beberapa jenis hewan. Air liur atau saliva sebagian besar diproduksi oleh tiga kelenjar utama yakni kelenjar parotis, kelenjar sublingual dan kelenjar submandibula. Volume air liur yang diproduksi bervariasi yaitu 0,5 1,5 liter setiap hari tergantung pada tingkat perangsangannya. Air liur atau saliva mengandung dua tipe pengeluaran atau sekresi cairan yang utama yakni sekresi serus yang mengandung ptyalin yang merupakan enzim untuk mencernakan karbohidrat dan sekresi mucus yang mengandung musin untuk tujuan pelumasan atau perlindungan permukaan yang sebagian besar dihasilkan oleh kelenjar parotis (Bresnick, 1994). Saliva banyak mengandung elektrolit, mukosa yang terutama mengandung mukopolisakarida dan glikoprotein, senyawaan antibakteri (tiosianat, hidrogen peroksida, dan immunoglobulin A), beberapa macam enzim, di antaranya alfaamilase (EC3.2.1.1), lisozim (EC3.2.1.17), dan lingual lipase (EC3.1.1.3). Amilase dan lipase berturut-turut memulai pencernaan pati dan lemak sebelum makanan ditelan. Enzim-enzim tersebut bekerja optimal pada pH 7,4. Lingual lipase memiliki pH optimum ~4,0, sehingga tak akan aktif jika belum memasuki lingkungan asam. Lisozim berperan dalam lisis bakteri, fosfatase asam ludah A+B (EC3.1.3.2), N-asetilmuramil-L-alanin amidase (EC3.5.1.28), NAD(P)H dehidrogenase-quinone (EC1.6.99.2), laktoperoksidase ludah (EC1.11.1.7), superoksida dismutase (EC1.15.1.1), glutation transferase (EC2.5.1.18), dehidrogenase aldehid kelas 3 (EC1.2.1.3), glukosa-6-fosfat isomerase (EC5.3.1.9), dan kallikrein jaringan (EC3.4.21.35). Adanya produk-produk ini kadang mengakibatkan air liur berbau tidak sedap (Mayes, 1985). Empedu adalah cairan bersifat basa yang pahit dan berwarna hijau kekuningan, yang disekresikan oleh hepatosit hati pada sebagian besar vertebrata. Pada beberapa spesies, empedu disimpan di kantung empedu dan dilepaskan ke usus dua belas jari untuk membantu proses pencernaan ( Anonim, 2010). Kantung empedu adalah organ berbentuk buah pir yang dapat menyimpan sekitar 50 ml empedu yang dibutuhkan tubuh untuk proses pencernaan. Organ ini terhubungkan dengan hati dan usus dua belas jari melalui saluran empedu.Empedu juga berfungsi untuk memberi warna pada feses (Vogel,1985). Saat pencernaan makanan, kantung empedu berkontraksi dan mengeluarkan cairan empedu ke dalam duodenum melalui saluran yang menyatu dengan saluran cairan pangkreas pada bagian akhir. Cairan empedu merupakan cairan jernih, berwarna kuning, agak kental dan berasa pahit. Cairan empedu mengandung zat-zat anorganik yaitu, HCO3-, Cl-, Na+ dan K +, serta zat-zat organic yaitu asam-asam empedu, bilirubin, kolesterol ( Poedjiadi, 1994).

C. ALAT DAN BAHAN 1. Alat Tabung Reaksi 10 buah Gelas kimia 100 ml 2 buah Pipet tetes 12 buah

2. Bahan Aquades Empedu 6 biji, 80 tetes Air liur Kertas indikator pH 1 helai NaOH 10 % CuSO4 setetes Sukrosa 5 % Larutan HNO3 pekat 30 tetes Pereaksi Molisch H2SO4 pekat Minyak 1 tetes Kertas Saring

D. SKEMA KERJA 1. AIR LIUR

a. Penetapan pH Air Liur Air liur ( tidak disaring) - Dicelupkan indicator universal Hasil(pH air liur) b. Uji biuret Dicocokkan warna indicator dengan standar warna pH

2 ml air liur (tidak disaring)

Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 20 tetes NaOH 10 % Ditambah 3 tetes larutan CuSO4

Larutan campuran

+2 tetes warna ungu, + 3 tetes warna makin pekat

c. Uji Mollisch 20 tetes air liur (tidak disaring) - D Dimasukkan ke dalam tabung reaksiDitambah 2 tetes pereaksi mollisch Tabung reaksi dimiringkan dan dialirkan dengan hati-hati

Ditambah 20 tetes asam sulfat pekat dari biuret melalui dinding tabung sehingga tidak bercampur

Reaksi negatif d. Uji presipitasi 2 0 tetes air liur (disaring) -

Dimasukkan ke dalam tabung reaksi

Ditambah 1 tetes asam asetat encer + asam asetat encer tidak bercampur, Terbentuk presipitasi amorf

2. EMPEDU a. Sifat empedu Empedu Diperhatikan dan dicatat sifat fisiknya

Warna hijau, ada yang kecoklatan, kenyal, bau tidak sedap b. Uji Gmelin 30 tetes HNO3 pekat

Dimasukkan dalam tabung reaksi, dimiringkan Dialirkan secara hati-hati 30 tetes larutan empedu encer dari dinding tabung

Tidak tercampur , 2 lapisan: atas hijau lumut dan bawah bening

Diperhatikan warna yang terbentuk pada perbatasan Coklat kehitaman

c. Uji Pettenkofer 20 tetes (seharusnya 50 tetes) cairan empedu Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 5 tetes larutan sukrosa 5 % Dimiringkan tabung Dialirkan dengan hati-hati dari dinding tabung 3 ml asam sulfat pekat

Terbentuk 2 lapisan dan cincin - pada perbatasannya terbentuk) d. Fungsi empedu sebagai emulgator 3 0 tetes air suling Dimasukkan dalam tabung reaksi I Ditambah satu tetes minyak Dikocok

Tidak terjadi emulsi

30 tetes air suling

- Dimasukkan dalam tabung reaksi II Ditambah satu tetes minyak Ditambah 30 tetes larutan empedu encer dan dikocok

Terjadi emulsi

E. HASIL PENGAMATAN 1. Air Liur NO 1 LANGKAH KERJA Penetapan pH air liur (saliva) -sepotong indikator universal ke dalam air liur yang tidak disaring -warna pada indikator dicocokan dengan warna 2 standar pH Uji Biuret tabung reaksi baik -ditambah setets larutan CuSO4 -dicampur dengan baik. Bila belum terbentuk warna lembayung, ditambahkan lagi setetes CuSO4 hingga 3 maksimum 10 tetes. Uji Molisch -masukan 2 ml air liur yang tidak disaring dalam -setelah ditambah pereaksi tabung reaksi -tambahkan 2 tetes pereaksi molisch -miringkan tabung reaksi lalu alirkan dengan hati-hati. molisch, menghasilkan warna coklat. Terdapat endapan coklat dan gelembung saliva. -Air liur ditambahkan 20 ditambahkan berubah unguan. lagi 1 tetes air liur keunguHASIL PENGAMATAN PH 6- 7

-2 ml air liur tidak disaring dimasukan ke dalam tetes NaOH 10% kemudian -ditambahkan 2 ml NaOH 10 % dan dicampur dengan CuSO4 warna menjadi

-tambahkan 2 ml asam sulfat pekat. Reaksi positif -setelah ditambahkan asam ditandai dengan pembentukan cincin ungu antara 2 sulfat pekat terdapat 2 lapisan lapisan cairan. yang dipisahkan oleh cincin

berwarna ungu pada batas kedua lapisan dan stelah dikocok larutan menjadi itam dan terasa panas. 4 Uji Presipitasi -masukan 2 ml air liur yang disaring dalam tabung -awalnya berwarna bening reaksi -warna berubah menjadi -ditambahkan 1 tetes asam asetat encer dan dicampur keruh menandakan terjadinya dengan baik. Diperhatikan dan dicatat, apa ada presipitasi amorf. presipitasi amorf terbentuk

Uji Sulfat -dimasukan 1 ml air liur yang disaring ke dalam -saat ditambah HCL terbentu tabung reaksi -ditambah 3-5 tetes HCL -ditambahkan 5- 10 tetes BaCL2 2 %, dicampur dengan baik -diperhatikan dan dicatat apakah ada endapan putih yang menyatakan adanya sulfat. larutan keruh -saat ditambahkan BaCL2 larutan bertambah keruh dan terdapat endapan putih.

2. Empedu NO 1 LANGKAH KERJA Sifat Empedu -diperhatikan dan dicatat sifat empedu HASIL PENGAMATAN -sifat fisik empedu lonjong dengan warna hijau lumut diselubungi oleh lapisan 2 Uji Gmelin -Dimasukan 3 ml HNO3 pekat ke dalam tabung reaksi -dimiringkan tabung reaksi, dialirkan dengan pipet 3 ml larutan empedu encer melalui dinding tabung sehingga kedua larutan tidak bercampur -diperhatikan warna yang terbentuk pada perbatasan membran - sebelum dikocok, lapisan atas berwarna hijau lumut, di tengah muncul cincin berwarna ungu dan lapisan bawah berwarna jingga. - setelah dikocok pada bagian

antara kedua cairan

atas terdapat gelembung karena penggunaan HNO3 .Lapisan bagian tengah berwarna jingga dan lapisan ketiga (paling bawah) berwarna kuning. - warna larutan empedu hijau lumut pada awalnya, setelah ditambahkan larutan sukrosa, larutan empedu menjadi hangat. -setelah dicmapurkan asam sulfat pekat terbentuk 3 lapisan, dimana bagian atas hijau lumut, terdapat cincin berwarna ungu pada bagian tengah, dan bagian paling bawah berwarna kuning bening serta terasa hangat

Uji Pettenkofer -dimasukan 5 ml larutan empedu encr ke dalam tabung reaksi -ditambahkan 5 tetes larutan sukrosa 5 % -tabung reaksi dimiringkan dan dialirkan 3 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung sehingga terbentuk 2 lapisan cairan. -diperhatikan cincin yang terbentuk pada perbatasan antara kedua lapisan.

Fungsi Empedu sebagai Emulgator Disediakan 2 tabung reaksi .pada masingmasing tabung masukkan 3 ml aquades - pada kedua tabung ditambahkan 4 tetes minyak -Pada tabung kedua ditambahkan 3 ml larutan empedu encer. Kedua tabung dikocok, dicatat dan diperhatikan apakah terbentuk emulsi yang stabil -terjadi 2 fase, bagian atas minyak dan bagian bawah aquades. -setelah dikocok kedua larutan tercampur, menandakan terbentuknya emulsi yang stabil.

F. ANALISIS DATA 1. pH air liur adalah 6-7 2. Reaksi molisch

H CH2OHHCOHHCOHHCOHC=O + H2SO4 Pentosa

O CH + OH Furfural -naftol

H CH2OHHCOHHCOHHCOHHCOHC=O + H2SO4 Heksosa O CH

H2C OH 5-hidroksimetil furfural

+ OH -naftol

Rumus dari cincin ungu yang terbentuk adalah sebagai berikut : O H2C __SO3H C OH

Cincin ungu senyawa kompleks G. PEMBAHASAN Pada praktikum ini kami melakukan dua pengujian sifat yaitu pengujian sifat fisik dan pengujian sifat kimia. Pengujian yang kami lakukan ini berdasarkan pada uji kualitatif, artinya bahwa disini kami melakukan pengujian tidak didasarkan pada jumlah atau kuantitas dari sampel yang digunakan akan tetapi berdasarkan pada akibat yang terjadi dari pencampuran sample- sample yang digunakan, namun tetap memperhatikan perbandingan jumlah sampel. Sampel yang kami gunakan adalah air liur dan empedu, secara biologis kedua cairan ini berfungsi dalam proses pencernaan secara kimiawi. Jika dilihat dari fisik, maka kedua cairan tampak berbeda, dari segi kandungan keduanya pun berbeda. Menurut Setiawan (2008), bahwa air liur mengandung air, bahan organic seperti musin serta enzim dan bahan anorganik diantaranya natrium, kalium, kalsium, magnesium, fosfat dn bikarbonat. Enzim yang terdapat dalam air liur adalah enzim amylase yang berfungsi sebagai penghidrolisis karbohidrat kompleks menjadi senyawa yang lebih sederhana. Enzim ini mengandung -

amilase yang mampu menghidrolisis pati dan glikogen menjadi maltosa dan oligosakarida lain dengan menyerang bagian -1,4-glikosidik. Amylase air liur akan segera terinaktivasi pada pH 4 atau kurang, sehingga enzim ini tidak aktif di lambung. Adapun pengujian sifat fisik yang kami lakukan pada air liur adalah berdasarkan kondisi fisik dari kedua cairan tersebut, mulai warna, bau, sedangkan untuk pengujian sifat kimia adalah dengan pegukuran pH, uji molisch, uji biuret, uji presipitasi dan uji sulfat . Dari hasil penguran pH maka kami mendapatkan pH 6-7, nilai ini menandakan bahwa pH adalah netral. Pengukuran pH kami lakukan dengan menggunakan kertas indicator pH. Menurut referensi yang ada bahwa enzim yang terkandung pada air liur aktif pada kisaran pH 6-7, sehingga pH yang kami dapatkan sudah sesuai dengan teori yang ada. Menurut (Harrow 1946 : 17 ) bahwa uji molish dilakukan untuk menentukan ada tidaknya karbohidrat ,yaitu dengan menambahkan 2 tetes pereaksi molish ke dalam tabung yang berisi air liur. Ketika ada beberapa larutan yang tidak dikenal secara pasti bahwa larutan tersebut mengandung karbohidrat atau tidak maka uji inilah yang dilakukan. Larutan yang bereaksi positif akan memberikan cincin yang berwarna ungu ketika direaksikan dengan -naftol atau yang kita sebut sebagai pereaksi molish dan asam sulfat pekat. Diperkirakan, konsentrasi asam sulfat pekat bertindak sebagai agen dehidrasi yang bertindak pada gula untuk membentuk furfural dan turunannya yang kemudian dikombinasikan dengan -naftol untuk membentuk produk berwarna, sehingga menghasilkan cincin ungu pada bidang batas dua cairan tersebut. Jadi uji molisch merupakan pengujian untuk mengetahui ada tidaknya karbohidrat secara umum pada sample yang digunakan. Jika terdapat karbohidrat pada sample tersebut, maka akan terbentuk cincin ungu pada batas antara kedua cairan yang telah dicampur yaitu antara pereaksi molisch dengan larutan asam sulfat hal ini menunjukkan hasil yang positif. Dari pengamatan yang kami lakukan, terdapat cincin berwarna ungu yang memisahkan kedua campuran teursebut yaitu antara pereaksi molisch dengan asam sulfat, hal ini menunjukkan bahwa praktikum yang dilakukan berhasil karna sesuai dengan teori. menurut referensi yang ada bahwa air liur memiliki komponen enzim yang disebut amylase dan menurut Setiawan (2008) bahwa enzim amylase mengandung -amilase yang mampu menghidrolisis pati atau karbohidrat, untuk menghidrolisis pati maka enzim tersebut hrus memilki komponen yang ditandai oleh molekulpati tersebut yang tersusun dari pati (kofaktor). Dan pada hasil pengamatan terdapat warna coklat, adanya warna coklat ini disebabkan karena karbohidrt menglami hidrolisis, menurut Anonim 2009 bahwa pati lebih mudah terhidrolisis pada suasana asam daripada basa. Perbedaan nilai anomerik hidrolisis -D-glikosidis adalah lebih kecil dari pada -D-anomer, perbedaan ini disebabkan variasi structural dan perbedaan

pada derajad gabungan antara oligo dan polisakarida. Cincin furanosa jauh lebih mudah dihidrolisis daripada cincin firanosa, walaupun hidrolisa pyranosa adalah gabungan molekul, hidrolisis furanosa dianggap sebagai bimolekuler karena entropy negatifnya diaktifkan (Anonim, 2009). Uji presifitasi dilakukan dengan menambahkan asam asetat encer pada air liur yang telah disaring, disini kami mendapatkan adanya endapan berupa partikel kecil- kecil yang disebut presipitasi amorf. Presipitasi memilki arti pengendapan dan amorf berarti tidak berbentuk . Pengendapan tidak berbentuk ini menunjukkan sifat kimia dari air liur yang dapat membentuk endapan amorf ketika ditambahkan asam asetat encer. Uji biuret merupakan pengujian untuk mengetahui adanya protein dari suatu sampel, atau yang terlarut dalam suatu larutan. Pereaksi yang kami gunakan adalah NaOH dan CUSO 4 . menurut Anonim (2008) bahwa kedua pereaksi ini mengikat ikatan peptide sampel, jika sampel memilki ikatan peptide maka akan terjadi perubahan warna pada larutan. Pada percobaan yang kami lakukan, kami mendapatkn hasil adanya perubahan warna dari bening menjadi keungu-unguan ketika dilakukan penambahan CUSO4 sebanyak 1 tetes, hal ini menandakan bahwa memang pada air liur terdapat protein. Adanya protein dalam air liur sebenarnya sudah dapat kita ketahui dari komponen yang terkandung di dalamnya yaitu adanya enzim yang tersusun dari kompleks protein. Dalam air liur juga terdapat atau mengandung asam sulfat.Untuk mengujinya digunakan larutan HCL dan BaCl2 2% yang dicampur. Reaksi positif diitandai dengann adanya endapan putih dan hal ini sama seperti yang dihasilkan pada percobaan. Cairan empedu merupakan cairan jernih berwarna kuning, agak kental dan berasa pahit. Cairan empedu mengandung zat-zat anorganik yaitu : HCO 3 , Cl-, Na++, dan K+, serta zatzat organic yaitu asam asam empedu, bilirubin, kolesterol (Poedjiadi, 1994). Adapun empedu yang kami gunkan dalam praktikum ini adalah empedu ayam, empedu ini mudah didapatkan dibandingkan dengan hewan lain. Uji sifat kimia untuk empedu dilakukan dengan melakukan beberapa uji yaitu uji gmelin, uji pettenkofer, dan uji fungsi sebagai emulgator. Uji gmelin dilakukan dengan adanya penambahan asam nitrat pada empedu encer, adanya penambahan asam nitrat menyebabkan terjadinya perubahan warna yang menandakan adanya pigmen empedu diantaranya Bilirubin yang berwarna jingga/ kuning coklat, Biliverdin berwarna hijau, warna warna yang terbentuk merupakan hasil reaksi dari empedu dengan HNO3 tadi, reaksi yang terjadi diantaranya adalah reksi oksidasi yang mengahasilkan turunan warna tertentu. Dari hasil pengamatan yang kami lakukan, kami mendapatkan hasil bahwa terdapat warna hijau dan warna jingga pada hasil praktikum kami, hal ini menunjukkan adanya pigmen

Bilirubin dan Biliverdin pada empedu. Pada uji Pettenkofer, kami menemukan adanya cincin berwarna ungu. Pengujian selanjutnya yaitu uji fungsi empedu sebagai emulgtor, disini dilakukan perbandingan antara perbedaan yang terjadi dengan penambahan empedu dan tanpa penambahan empedu. Dari pencampuran minyak dengan air suling, tidak terjadi emulsi hal ini ditandakan dengan hasil yang kami dapatkan yaitu tidak adanya perubahan yang terjadi antara pencampuran minyak denga air suling, minyak berada pada bagian atas dari air suling. Berbeda yang terjadi pada penambahan minyak, yaitu pada tabung II yang mengalami perubahan pada saat setelah dikocok terjadi percampuran larutan, tampak tidak ada lagi bentuk minyak, terdapat endapan hitam di dasar tabung, hal ini menandakan bahwa empedu mengemulsikan minyak. Artinya bahwa empedu dapat menghomogenkan minyak dengan air secara sempurna dapat menguraikan lemak menjadi partikel kecil sehingga keduanya tidak dapat dibedakan, fungsi ini berkaitan dengan kemampuan menurunkan tegangan permukaan oleh garam empedu Menurut Murray (2003) bahwa garam empedu memang memiliki kemampuan dalam menurunkan tegangan permukaan. Kemampuan ini membuat getah empedu mampu mengemulsikan lemak di dalam usus dan melarutkan asam lemak serta sabun yang tidak larut dalam air. H. PENUTUP a. Kesimpulan -

Kisaran pH air liur adalah antara 6-7 dan hasil yang didapati adalah pH 6-7. Uji biuret dilakukan untuk mengetahui adanya kandungan protein terlarut dalam air liur. Uji molisch dilakukan untuk mengetahui adanya kandungan karbohidrat terlarut pada air liur yang ditandai dengan terbentuknya cincin berwarna ungu. Pada air liur terjadi pengendapan yang dibuktikan dengan melakukan uji presipitasi yang menunjukkan adanya gumpalan kecil kecil berwarna putih. Empedu mengandung pigmen /zat warna bilirubin dan biliverdin yang ditandai dari adanya warna kuning kehitaman dan hijau pada uji gmelin. Empedu berfungsi sebagai emulgator karena empedu mampu memecah molekul lemak menjadi butiran-butiran yang lebih halus sehingga membentuk suatu emulsi.

b. Saran

Praktikan lebih teliti, serius dalam melakukan praktikum agar tidak terjadi atau meminimalisir kesalahan-kesalahan dalam melakukan praktikum, sehingga hasil atau data yang didapatkan valid. DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2009. Definisi Uji Gmelin. http/wikipedia/definisiuji-gmelin/ diakses pada 8 Desember 2010 Anonim, 2010. Empedu. http://id.wikipedia.org/wiki/Empedu diakses pada 8 desember 2010 Harrow, Benjamin. 1946. Textbook of Biochemistry. London: W. B. Saunder Company. Mayes, A. Peter, dkk.. 1985. Biokimia Harper Edisi ke -20. EGC Penerbit Buku Kedokteran : Jakarta Murray, Robert K., 2003. Biokimia Harper Edisi ke- 25. Penerbit Buku kedokteran: Jakarta Poedjiadi, Anna, 2007. Dasar-dasar Biokimia.Jakarta : UI Press Poedjiadi, Anna, 1994. Dasar-Dasar Biokimia. UI: Jakarta Setiawan, T., 2008. Enzim Amilase. http//teguhsetiawanto.blogspot.com/2007/10/enzim.html diakses pada 8 Desember 2010 Vogel, A.I., 1985. Buku Tes Analisis Anorganik Kualitatif Anorganik Makro dan Semimikro, Kalman media Pustaka: Jakarta

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA BAHAN MAKANAN

Oleh: Baiq Witha Yulisvia G1A 009012

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS MATARAM MATARAM 2012 ACARA IV BAHAN MAKANAN


A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM 1. Tujuan Praktikum :

Menentukan dan membandingkan berat jenis air susu (air susu murni, air susu yang di encerkan 1 kali dengan aquades dan filtrate air susu dari percobaan pengendapan kasein (B3). Menguji reaksi air susu. Menguji air susu secara kualitatif dengan pengendapa kasein. Menguji reaksi warna protein dengan menggunakan beberapa pereaksi. Menguji kadar P-Organik dari kasein dengan menggunakan pereaksi newmann. Menguji endapan kasein dengan menggunakan Grease Spot Test (tes noda lemak). Menunjukkan adanya laktalbumin dari pengendapan kasein. Menunjukkan adanya laktosa dari filtrat pengendapan kasein. Menunjukkan adanya ion Ca dan P-anorganik dari filtrate pengendapan kasein. 2. Hari/ tanggal Praktikum 3. Tempat Praktikum : Minggu, 11 Desember 2011. : Laboratorium Kimia Dasar Lantai III, Fakultas MIPA Universitam Mataram.

B. LANDASAN TEORI Protein merupakan komponen penting atau komponen utama sel hewan atau manusia. Oleh karena sel itu merupakan pembentuk tubuhnya, maka protein yang terdapat pada makanan berfungsi sebagai zat utama dalam pembentukan dan

pertumbuhan.tumbuhan membentuk protein dari co2, h2o dan senywa nitrogen. Hewan yang makan tumbuhan mengubah protein nabati menjadi protein hewani.disamping digunakan untuk pembentukan sel-sel tubuh, protein juga dapat digunakan sebagai sumber energi apabila tubuh kita kekurangan karbohidrat dan lemak. Unit-unit pembentuk protein dinamakan asam amino. Asam amino ialah asam karboksilat yang mmempunyai gugs amino. Asm amino yang terdapat sebagai komponen protein mempunyai gugus NH 2 pada atom karbon dari posisi gugus COOH(Poedjiadi,2007). Klasifikasi protein dalam biokimia didasarkan pada fungsi biologinya yakni berupa enzim, protein pembangun,protein kontraktil, protein pengangkut, protein hormone, protein bersifat racun pelindung dan protein cadangan.Struktur tiga dimensi protein dapat dijelaskan dengan mempelajari tingkat organisasi struktur, yaitu struktur primer, skkunder, tersier dan kuaterterner. Berbagai interaksi yang digunakan untukmempertahankan masing-masing struktur tersebut merupakan pemisahantingkat organisai satu denngan yang lainnya(Winarno,1992) Kasein merupakan jenis protein terpenting dalam susu dan terdapat dalam bentuk kalsium kaseinat. Kasein merupakan partikel-partikel halus berdiameter sekitar 80 m dan membentuk suspense koloidal dalam susu. Kasein dapat diendapkan dengan asam, alkohol, renet, dan logam berat. Asam dapat memindahkan kasein dari kalsium kaseinat sehingga diperoleh endapan kasein yang terpisah dari kalsium. Pada suhu yang tinggi jumlah asam yang diperlukan untuk koagulasi kasein lebih sedikit dibandingkan jika koagulasi dilakukan pada suhu rendah. Susu segar mempunyai pH sekitar 6,6. Apabila pH tersebut diturunkan sampai pada pH 4,7, susu mulai membentuk Curd. pH 4,7 ini merupakan titik isoelektrik kasein. Berat molekul kasein berkisar antara 12.800 375.000.Kasein adalah protein yang bermutu tinggi karena mengandung semua asamasam amino esensial. Karena itu kasein baik dalam susu maupun dalam susu maupun dalam produk-produk olahan susu merupakan komponen yang penting. Kasein dalam susu terdiri dari tiga fraksi yang berbeda, yaitu -kasein, -kasein dan -kasein. Berbeda dengan kasein, albumin merupakan protein yang tidak mengandung fosfor. Pada umumnya albumin dianggap berbentuk larutan sejati dalam susu, tetapi albumin berbentuk larutan koloidal yang sangat halus. Albumin memiliki berat molekul yang lebih rendah daripada kasein, yaitu berkisar antara 1.000 25.000 ( Anonim, 2008 ).

Dalam susu terdapat laktosa yang sering disebut gula susu. Dibandingkan terhadap glukosa, laktosa mempunyai rasa yang kurang manis. Jenis protein ini walaupun terdapat dalam konsentrasi yang sangat rendah tetapi mempunyai peranan yang cukup berarti dalam nilai gizi susu dan produk susu. Laktosa terdapat dalam dua macam bentuk, yaitu -laktosa dan -laktosa. -laktosa dapat berupa hidrat maupun anhidrat. Apabila laktosa atau -laktosa dilarutkan dalam air, masing-masing bentuk laktosa akan berubah menjadi bentuk lain sampai tercapai keseimbangan. Oleh bakteri asam laktat, laktosa akan difermentasikan menjadi asam laktat (Poedjiadi, 2007). C. ALAT DAN BAHAN 1. Alat Tabung reaksi Rak tabung reaksi Penjepit Gelas kimia 10 mL Erlenmeyer 10 mL Gelas ukur 25 mL Penangas air Bunsen Neraca analitik Neraca goyang Corong kaca Gelas arloji Piknometer Pipet tetes Batang pengaduk Gelas kimia 250 mL Labu takar 10 mL Labu takar 50 mL Labu takar 250 mL Pipet volume 1mL

Pipet volume 5mL

2. Bahan Air susu sapi ( Susu ultra) Air susu kedelai CH3COOH glassial 2% HNO3 pekat H2SO4 pekat K-oksalat Eter Aquades Fehling A Fehling B Benedict NaOH 40% CuSO4 0,5% Alpa naftol 1% Kertas saring Amonium Molibdat Biuret Pereaksi Molish Amoniak solution Fruktosa Glukosa Kertas lakmus Tissue Kertas label Reagen Benedict Larutan formaldeid encer (diencerkan 500 kali) Mercuri Sulfat Amonium hidroksida

D. SKEMA KERJA 1. Penetapan Berat Jenis Ditentukan berat jenis air susu piknometer atau labu takar 5ml yang meliputi: Susu kedelai a. Air susu murni - Dimasukan ke dalam tabung - Ditentukan berat jenisnya Hasil

b. Air susu yang diencerkan 1 kali - Dimasukan ke dalam labu takar - Diencerkan satu kali dengan aquades 20 tetes - Ditentukan berat jenis dari air susu Hasil c. Filtrat air susu (dari endapan kasein) - Ditimbang - Ditentukan berat jenis filtratnya Hasil Susu ultra (Susu sapi) a. Air susu murni - Dimasukan ke dalam tabung - Ditentukan berat jenisnya Hasil b. Air susu yang diencerkan 1 kali - Dimasukan ke dalam labu takar - Diencerkan satu kali dengan aquades 20 tetes - Ditentukan berat jenis dari air susu Hasil

c. Filtrat air susu (dari endapan kasein) - Ditimbang - Ditentukan berat jenis filtratnya Hasil 2. Reaksi Air Susu Susu kedelai a. Susu murni Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil

b. Air susu yang diencerkan 1 kali - Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil c. Filtrat air susu (dari endapan kasein) - Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil d. Susu murni didiamkan 2 jam Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil

Susu ultra (Susu sapi) a. Susu murni Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil b. Air susu yang diencerkan 1 kali Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil

c. Filtrat air susu (dari endapan kasein) - Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH Hasil d. Susu murni didiamkan 2 jam Dicek dengan lakmus merah, dicatat PH 2. Pengendapan Kasein Susu kedelai Hasil 20 ml air susu kedelai - Diencerkan dengan 20 ml aquades + asam Asetat glasial Hasil 2% tetes demi tetes sampai terjadi endapan kasein dan - disaring filtrat bening

Endapan (untuk percobaan 4-6) Susu ultra 20 ml air susu ultra

Filtrat (untuk percobaan 7-9)

- Diencerkan dengan 20 ml aquades + asam Asetat glasial 2% tetes demi tetes sampai terjadi endapan kasein dan filtrat bening Hasil - disaring 3. Reaksi-reaksi warna protein

Endapan (untuk percobaan 4-6)

Filtrat (untuk percobaan 7-9)

a. Reaksi Biuret (untuk ikatan peptida) Susu ultra 3 ml susu ultra yang telah - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 2 ml larutan NaOH 40% Hasil + 1 tetes larutan CuSO4 0.5% hingga terjadi warna merah muda atau ungu

Hasil Susu kedelai 3 ml susu kedelai - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 2 ml larutan NaOH 10% Hasil Hasil + 6 tetes larutan CuSO4 0.5% hingga terjadi warna merah muda atau ungu

b. Reaksi Hopkins-Cole (untuk Triptofan) Susu ultra 1 ml susu ultra - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 1 tetes larutan formaldehid encer - + 1 tetes reagen merkuri sulfat - + 1 tetes reagen merkuri sulfat Hasil - Digojog dan ditambah 2-3 tetes H2SO4 pekat Hasil Susu kedelai 1 ml (15 tetes) susu kedelai - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 1 tetes larutan formaldehid encer - + 1 tetes reagen merkuri sulfat Hasil - Dikocok dan ditambah 3 tetes H2SO4 pekat perlahan-lahan Hasil perlahan-lahan

c. Reaksi Xantoprotein (untuk asam amino deengan inti benzena) Susu ultra 3 ml larutan susu ultra - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 3 tetes Asam Nitrat (HNO3) pekat Hasil Dipanaskan dengan pemanas air mendidih hingga larutan menjadi kuning Didinginkan dan dibagi menjadi dua tabung

Tabung I

Tabung II + Amonia (NH3)

Hasil Susu kedelai 3 ml larutan susu kedelai

Hasil

- Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 3 tetes Asam Nitrat (HNO3) pekat Hasil Dipanaskan dengan pemanas air mendidih hingga larutan menjadi kuning Didinginkan dan dibagi menjadi dua tabung

Tabung I

Tabung II + Amonia (NH3)

Hasil

Hasil

d. Reaksi Molish Susu ultra atau Susu keelai

15 tetes susu ultra/ susu kedelai - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + 20 tetes larutan Alpha Neftol 1% dan dikocok Hasil. - + 10 tetes H2SO4 pekat perlahan-lahan melalui dinding tabung hingga membentuk lapisan di bawah campuran Hasil

4. Reaksi Neumann untuk Kasein (P-organik dari Kasein) Sisa endapan kasein susu murni - Dikeringkan di kertas saring dengan memijatnya Hasil Dimasukkan dalam tabung reaksi + 2 tetes nitrat (HNO3) pekat

- + 10 tetes asam sulfat pekat (H2SO4) Campuran - Dipanaskan(dalam lemari asam) sampai keluar asap sulfat putih. - Jika isi tabung berwarna coklat atau hitam maka ditambah 1 tetes asam nitrat pekat. Campuran - Dipanaskan hingga keluar asam putih dan larutan tidak berwarna Campuran - Didinginkan - + ammonium molibdat 30 tetes, Hasil dikocok dan dipanaskan

5. Grease Spot Test (Test noda lemak) Untuk Susu Kedelai atau Susu Ultra Endapan kasein kering - Sebagian dikocok dengan sedikit ester - Dituang ke dalam gelas arloji dan diuapkan esternya - Di asup gelas arloji dengan kertas saring - Diamati

Hasil 7. Menunjukan adanya laktobumin Filtrat pengendapan kasein Dibuat pH 5,4 kemudian dipanaskan Hasil adanya koagulan menunjukkan adanya laktalbumin: Disaring dengan kertas saring

Filtrat untuk percobaan 8

8. Menunjukan adanya laktosa Untuk Susu Kedelai atau Susu Ultra Uji Fehling Filtrat dari percobaan 7 - Dimasukan ke dalam tabung reaksi - + campuran pereaksi fehling A dan B (masing-masimg 5 tetes). - dipanaskan (penangas air) selama 5 menit - Reaksi positif jika terbentuk endapan merah Hasil bata/coklat

9. Menunjukan adanya ion Ca dan P-anorganik Untuk susu kedelai atau susu ultra Filtrat dari percobaan 7 - Ditambah beberapa tetes amonium hidroksida kemudian dipanaskan. Terdapat endapan yang kemudian disaring dengan kertas saring Hasil -Endapan dilarutkan dengan menuangi -asam cuka encer di atas kertas saring

Hasil Filtrat dikumpulkan dalam tabung sebagian Filtrat ditambah K-Oksalat

Hasil berupa fitltrat (untuk menunjukkan fosfat anorganik) Hasil - Didinginkan - + 2 mL ammonium molibdat, dikocok, panaskan

Hasil E. HASIL PENGAMATAN 1. Untuk Susu Kedelai No 1 Langkah kerja Penetapan berat jenis: ditentukan berat jenis dengan piknometer atau sejenisnya untuk: a. Air susu murni b. Air susu diencerkan 1 kali dengan b. Berat susu encer Hasil Pengamatan a. Berat dari masing-masing air susu: Berat ar susu murni = 60,59-41,12 =19,47 gram = 59,62 -41,12 = 18,50 gram

aquades c. Filtrat air susu dari percobaan pengeendapan kasein (B3)

c.

Berat filtrat air susu = 73,18 -41,12 = 32,06 gram

(berat erlenmeyer = 41,12 gram)

Reaksi air susu: diselidiki reaksi air susu dengan kertas lakmus merah, untuk: a. Air susu yang masih baru (murni) b. Pengenceran dengan aquades 20 tetes c. Filtrat kasein PH= 4 d. Air susu yang sudah dibiarkan 2 PH= 6 PH=7 PH= 8

jam Pengendapan Kasein 20 mL air susu + 20mL air ditamahkan bertetes-tetes asam asetat glasial 2% sampai terjadi endapan.

Terbentuknya endapan berwarna putih kekuningan mengering) (setelah didiamkan

Larutan/filtrat berwarna bening Uji biuret:

disaring endapan dengan kertas saring Reaksi warna protein Reaksi Biuret (untuk ikatan peptida): a. 3 mL susu kedelai + 2 mL NaOH 40% b. ditambahkan 6 tetes CuSO4 0,5% Reaksi triptofan): a. 1mL (15 tetes) susu kedelai + 1 tetes formaldehid encer (diencerkan 500 kali) + 1 tetes reagen merkuri sulfat. Hopkins-Cole (untuk

a. Larutan tetap bening, tidak berwarna

b. Setelah ditambahkan dengan CuSO4 0,5% warna menjadi ungu (+) Reaksi Hopkins-Cole: Tidak berubah warna

b. Dikocok + asam sulfat pekat Setelah ditambah H2SO4 timbul warna

(perlahan-lahan) melalui dinding orange tabung. reaksi a. b. Xantoprotein (asam amino a. b. Reaksi Xantoprotein: 3mL susu kedelai + 3 tetes HNO3 larutan menjadi bening kekuningan Setelah dipanaskan warna larutan kuning (+). sampai kuning.

dengan inti benzena): 3mL susu kedelai + 3 tetes HNO3 pekat Dipanaskan dengan penangas air mendidih Dinginkan di bawah air leding, campuran dibagi 2 tabung, c. d. e. tabung 1 tanpa ammonia tabung 2 ditamabhkan ammonia dibandingkan warna tabung 1 dan 2! 5 Reaksi uji Molisch: 15 tetes susu kedelai + 20 tetes larutan Menghasilkan warna putih keruh alpha-Naftol dan dikocok dialirkan perlahan-lahan + 10 tetes Setelah ditambahkan H2SO4 terdapat 2 lapisan, di atas keruh dan di bawah H2SO4 pekat perlahan-lahan berwarna ungu 6 7 Reaksi Neumann untuk Kasein (P-organik dari kasein) Grease spot test (tes noda lemak) Kasein kering+ sedikit eter, dikocok dalam tabung reaksi. dituang dalam kaca arloji dan diuapkan eternya. 8 diusap denan kertas saring Menunjukkan laktalbumin Fitrat dari pengendapan kasein dibuat pH 5,4 kemudian dipanaskan. Adanya koagulan menunjukkan Tidak terbentuk endapan (koagulan) Dalam percobaan hanya menggunakan susu ultra/susu sapi Diusap dengan kertas saring: kertas saring berwarna bening/ transparan. c. Untuk tabung 1, tanpa ammonia berwarna putih dan terdapat endapan kuning, tabung 2 +, ammonia warna kuning dan terdapat endapan

adanya laktalbumin. 9 disaring dengan kertas saring.

Fitrat untuk perccobaan selanjutnya. Menunjukkan adanya laktosa Uji Fehling: Fitrat ditambahkan dengan reagen Fehling (Fehling A + Fehling B) masing-masing 5 tetes, dimasukkan dalam penangas air selama 5 menit. Menunjukkan adanya ion Ca dan Panorganik a. Fitrat dari percobaan nomor 7 + Amonium hidroksida beberapa tetes kemudian dipanaskan terjadi endapan. b. diaring endapan di larutkan dalam (2mL aquades + 10 tetes asam asetat glasial) c. Fitrat dikumpulkan dalam tabung bersih. d. Sebagian fitrat + larutan K-oksalat yang jernih. e. Fitrat lain dikerjakan seperti percobaan ammonium molibdat untuk menunjukkan fosfat organik. e. Tidak dikerjakan c. Larutan keruh (fitrat asam cuka + fitrat 7). b. Setelah ditambahkan asam tidak terjadi perubahan Untuk Fehling: Fehling A + fehling B (warna biru tua), setelah dipanaskan terbentuk gumpalan berwarna hijau

10

a. Endapan putih, fitrat jernih.

2. Untuk Susu Ultra No 1 Langkah kerja Penetapan berat jenis: ditentukan berat jenis dengan piknometer untuk: a. Air susu murni b. Air susu diencerkan 1 kali b. Berat susu encer Hasil Pengamatan Berat dari masing-masing air susu: a. Berat ar susu murni = 51,35-41,12 = 10,23 gram = 47,47 -41,12 = 6,35gram

dengan aquades c. Filtrat air susu dari percobaan pengeendapan kasein (B3) 2 Reaksi air susu: diselidiki reaksi air susu dengan kertas lakmus merah, untuk: a. Air susu yang masih baru tetes

c. Berat filtrat air susu = 67,23-41,12 = 26,11 gram (berat erlenmeyer = 41,12 gram)

PH=9

b. Pengenceran dengan aquades 20 PH=8 c. Filtrat air susu dari percobaan PH=4 pengeendapan kasein (B3) d. Air susu yang sudah dibiarkan 2 PH=6 3 jam Pengendapan Kasein 10 ml air susu + 10 mL aquades ditamahkan bertetes-tetes asam asetat glasial 2% sampai terjadi endapan. 4 disaringlah endapan dengan kertas Terbentuknya endapan berwarna putih (setelah didiamkan mongering) Larutan /filtrat berwarna bening

kekuningan.

saring Reaksi warna protein Reaksi Biuret (untuk ikatan peptida): a. 3ml larutan protein + 1ml NaOH 40% b. Tambahkan 1 tetes CuSO4 0,5% Reaksi Hopkins-Cole (untuk triptofan): a. 1ml larutan protein + 1 tetes frmaldehid encer (diencerkan 500 kali) + 1 tetes reagen merkuri sulfat. b. Dikocok + 2-3 tetes asam sulfat pekat (perlahan-lahan) melalui b. berwarna ungu Reaksi Xantoprotein: dinding tabung. Reaksi Xantoprotein (asam amino dengan inti benzena): a. Tidak berwarna Uji biuret: a. Larutan tetap bening b. Setelah ditambahkan dengan CuSO4 0,5% warna menjadi ungu (+) Reaksi Hopkins-Cole:

a. 3ml susu ultra + HNO3 pekat b. Dipanaskan dengan penangas air mendidih sampai kuning. didinginkan di bawah air leding, campuran dibagi 2 tabung, c. Tabung 1 tanpa amonia d. Tabung 2 ditambahkan ammonia e. dibandingkan warna tabung 1 dan 2!

a. 3mL protein + 1 mL HNO3 larutan menjadi bening kekuningan b. Setelah dipanaskan warna larutan kuning (+).

c. Berwarna putih dan terdapat endapan berwarna kuning d. Tabung 2, terdapat 2 lapisan kuning di bagian atas dan putih dibagian bawah

Reaksi uji Molisch: 15 tetes susu ultra + 20 tetes larutan alpha-Naftol 1% dan dikocok. Alirkan perlahan-lahan + 1 mL H2SO4 pekat perlahan-lahan Menghasilkan keruh Terbentuk 2 fase,Lapisan atas berwarna keruh, lapisan bawah berwarna ungu. warna putih

Reaksi Neumann untuk Kasein (P-organik dari kasein) Sisa endapan dikeringkan di kertas saring dimasukkan sedikit kasein ke dalam Berwarna cokelat tabung reaksi + 2 tetes HNO3 pekat + 10 tetes H2SO4 pekat dipanaskan dengan api kecil dalam lemari asam. Jika tabung berwarna coklat/hitam +1 Berwarana hitam tetes HNO3 pekat. dipanaskan. dibiarkan tabung dingin + 30 tetes ammonium molibdat, dikocok dan Tetap berwarna hitam

dipanaskan. Grease spot test (tes noda lemak)

Diusap dengan kertas saring: kertas saring

Kasein kering + sedikit eter, dikocok terlihat bening/ transparan. dalam tabung reaksi. dituangkan dalam kaca arloji dan

diuapkan eternya. 8 diusap dengan kertas saring. Menunjukkan laktalbumin 9 Fitrat dari pengendapan kasein dibuat pH 5,4 kemudian dipanaskan. Adanya koagulan menunjukkan adanya laktalbumin. disaring dengan kertas saring. (+) terbentuk laktalbumin: terlihat

adanya koagulan atau endapan putih.

Fitrat untuk perccobaan selanjutnya. Menunjukkan adanya laktosa. Uji Fehling: Fitrat ditambahkan dengan reagen Fehling (Fehling A + Fehling B) masing-masing 5 tetes, dimasukkan dalam penangas air selama 5 menit. Untuk Fehling: Filtrat dari susu ultra + fehling A dan fehling B berwarna biru muda, setelah dimasukkan kedalam penangas selama 5 menit warnanya berubah menjadi gumpalan biru tua

10

Menunjukkan adanya ion Ca dan Panorganik a. Fitrat dari percobaan nomor 7 + Amonium tetes hidroksida kemudian a. Endapan putih, fitrat jernih. beberapa

dipanaskan terjadi endapan. b. disaring endapan di larutkan dalam (2mL aquades + 10 tetes asam asetat glasial) c. Fitrat dikumpulkan dalam tabung bersih. d. Sebagian fitrat + larutan Koksalat yang jernih. Fitrat lain dikerjakan ammonium seperti molibdat percobaan c. Larutan keruh (fitrat asam cuka + fitrat 7) dan terdapat endapan. b. Setelah ditambahkan asam tidak terjadi perubahan

untuk menunjukkan fosfat organik.

Tidak dikerjakan

F. ANALISIS DATA 1. Berat Jenis susu kedelai (susu + labu takar) (labu takar kosong) Susu murni Volume (susu + labu takar) (labu takar kosong) Susu encer Volume (susu + gelas kimia) (gelas kimia kosong) Fitrat air susu Volume : 60,59 gram : 41,12 gram : 19,47 gram : 3 mL : 59,62 gram : 41,12 gram : 18,50 gram : 3 mL : 73,18 gram : 41,12 gram : 32,06 gram : 20 mL Susu murni

Susu diencerkan 1 kali

Fitrat air susu

susu sapi (susu + labu takar) (gelas kimia kosong) Susu murni Volume (susu + labu takar) (labu takar kosong) Susu encer Volume (susu + gelas kimia) (gelas kimia kosong) Fitrat air susu Volume : 51,35gram : 41,12gram : 10,23 gram : 3 mL : 47,47 gram : 41,12 gram : 6,35 gram : 3 mL : 67,23 gram : 41,12 gram : 26,11 gram : 20 mL

Susu murni

Susu diencerkan 1 kali

Fitrat air susu

Perhitungan berat jenis: Susu Kedelai Untuk susu murni


=
m V 19,47 gram 3 mL

= 6,49 gram/mL

Untuk susu encer


=
m V 18,50 gram 3 mL

= 6,16 gram/mL Untuk fitrat air susu


=
m V 32,06 gram 20mL

= 1,603 gram/mL Susu Ultra Untuk Susu murni


=
m V 10,23 gram 3 mL

= 3,41 gram/mL Untuk susu encer


=
m V 6,35 gram 3 mL

= 2,1167 gram/mL Untuk fitrat air susu


=
m V 26,11 gram 20 mL

= 1,3055 gram/mL 2. Reaksi Air Susu

Susu Kedelai Susu murni : Lakmus Merah Biru (bersifat basa), PH= 8 Pengenceran dengan aquades: Lakmus merahSedikit Biru (Bersifat sedikit asam dan basa), PH= 7 (netral) Filtrat Kasein : Lakmus Merah warna tetap (bersifat asam), PH= 4 Susu murni setelah 2 jam : Lakmus Merah warna tetap (bersifat asam), PH= 6 Susu Ultra Susu murni: Lakmus Merah Biru (bersifat basa), PH= 9 Pengenceran dengan aquades: Lakmus Merah Biru

(bersifat basa), PH= 8 Filtrat Kasein : Lakmus Merah warna tetap (bersifat asam), PH= 4 Susu murni setelah 2 jam : Lakmus Merah warna tetap (bersifat asam), PH= 6 3. Pengendapan Kasein Reaksi pengendapan kasein [ Ca2+] [Kaseinat2-] + 2 CH3COOH Ca (CH3COO)2 + kasein

Susu Kedelai

Warna Filtrat : bening Warna Endapan: putih kekuningan menunjukan adanya kasein Susu Ultra

Warna Filtrat : kuning bening

- Warna Endapan: putih

4. Reaksi Warna Protein Reaksi Biuret

Reaksi Hopkins-Cole serbuk COOH COOH asam oksalat Mg

CHO COOH asam glioksilat

Reaksi Xantoprotein

5 Reaksi Molish

6.

Reaksi Neumann

7. Grease Spot Test (Tes Noda Lemak) Baik susu kedelai maupun susu ultra: Endapan kasein + eter tidak larut dalam eter Terdapat tetesan bening, kertas menjadi transparan yang mandakan ada lemak 8. Menunjukkan Adanya Laktalbumin a. Susu Kedelai Tidak terbentuk endapan (koagulan) Filtrat kasein (pH: 5,4) b. Susu Ultra

Filtrat kasein (pH 5,4)

(+) terdapat koagulan + endapan putih (terdapat laktalbumin)

9.

Menunjukkan Adanya Laktosa Reaksi Fehling A/B


O R C OH

2 Cu

2+

4OH-(aq)

Cu2O

m e ra h b a ta

10 Menunjukkan Adanya Ion Ca dan P-Anorganik Baik pada susu kedelai maupun susu ultra didapatkan hasil: Fitrat (nomor 7) + NH4OH (endapan putih)

endapan gelartinous dari Ca dan Mg fosfat

Endapan + CH3COOH tidak terjadi perubahan Disaring endapan di larutkan dalam (2mL aquades + 10 tetes asam asetat glasial) menghasilkan larutan keruh (fitrat asam cuka + fitrat 7) dan terdapat endapan.

G. PEMBAHASAN Susu adalah emulsi lemak dalam air yang mengandung gula, garam-garam mineral dan protein dalam bentuk suspense koloidal. Komponen utama susu adalah air, lemak, protein (kasein dan albumin), laktosa (gula susu) dan abu. Komponen susu selain air merupakan Total Solid (TS) dan Total Solid tanpa komponen lemak merupakan Solid non Fat (SNF). Beberapa istilah lain yang biasa digunakan sehubungan dengan komponen utama susu ini adalah plasma susu atau susu skim, yaitu bagian susu yang mengandung semua komponen kecuali lemak dan serum susu atau biasa disebut Whey, yaitu bagian susu yang mengandung semua komponen susu kecuali lemak dan kasein ( Anonim, 2009 ). Pengujian secara biologis dilakukan pada proses pengukuran atau penetapan berat jenis pada air susu kedelai dan air susu sapi/ultra yaitu dengan piknometer. Susu kedelai berdasarkan hasil pengamatan dan analisis data diperoleh massa jenis berturut-turut untuk ketiga tabung reaksi pada volume tetap yaitu 6,49 gr/ml(air susu murni); 6,16 gr/ml(air susu encer); 1,603gr/ml(filtrate air susu). Sedangkan untuk susu sapi berat jenisnya berturut-turut yaitu 3,41 gr/ml(air susu murni); 2,17 gr/ml(air susu encer); 1,30gr/ml(filtrate air susu). Dari hasil yang diperoleh tersebut dapat di lihat dengan jelas perbedaan massa jenisnya,hal tersebut

dipengaruhi oleh penambahan aquadest, dengan penambahan aquadest membuat kerapatan air susu berkurang. Selanjutnya dilakukan uji kimia pada air susu tersebut untuk mengetahui apakah bersifat asam atau basa.Uji ini dilakukan dengan menggunakan kertas lakmus merah dan biru. pada reaksi air susu, ketika air susu baru dicelupkan lakmus merah menghasilkan warna lakmus tetap merah yang berarti keadaannya netral sedangkan ketika lakmus merah dicelupkan dalam air susu lama warnanya lakmus menjadi merah yang berarti dalam keadaan asam. Air susu yang sudah lama bersifat asam karena ada bakteri asam laktat dalam susu dimana bakteri itu mengubah laktosa menjadi asam laktat sehingga pH pada susu turun. Pada pengendapan kasein setelah difiltrat menghasilkan warna bening dan terdapat endapan kasein yang berwarna putih kekuningan. Kemudian pada percobaan mengenai reaksi-reaksi warna protein, yaitu dengan melakukan reaksi biuret, Reaksi Hopkins-Cole, reaksi xantoprotein dan reaksi molisch.. Dimana reaksi biuret merupakan suatu peptide yang mempunyai dua buah ikatan peptide atau lebih dan dapat bereaksi dengan ion Cu 2+ dalam suasana basa dan menghasilkan senyawa kompleks yang berwarna biru ungu. Dari hasil percobaan larutan protein dengan NaOH (bening) ketika ditambahkan CuSO4 dengan menghasilkan warna ungu yang menandakan bahwa pada kedua zat tersebut terdapat ikatan peptide. Ikatan peptida akan terbentuk apabila terdapat dua asam amino esensial yang bereaksi. Pada percobaan reaksi Hopkins-Cole + 2-3 tetes asam sulfat berwarna ungu untuk susu sapi artinya mengandung triptopan dan pada susu kedelai menghasilkan warna orange. Reaksi Hopkins-Cole pada susu kedelai tidak terjadi atau terbentuk dua lapisan, sedangkan pada susu ultra terbentuk dua lapisan yang terdiri dari bagian atas berwarna ungu dan bagian bawah berwarna bening. Selanjutnya reaksi xantoprotein, dimana larutan protein baik yang berasal dari susu kedelai ataupun susu sapi/ultra direaksikan dengan larutan HNO 3 pekat yang dipanaskan tidak menghasilkan gumpalan putih dan warna larutan kuning. Hal ini bertentangan dengan teori, berdasarkan teori jika susu ditambhkan dengan HNO3 maka akan terbentuk endapan putih yang dapat berubah menjadi kuning apabila dipanaskan. Sedangkan untuk reaksi Molisch pada susu ultra maupun susu kedelai menghasilkan 2 lapisan larutan yang berwarna ungu (bawah) dan putih keruh (atas) setelah ditambahkan pereaksi molisch dan H2SO4. Untuk uji tes noda lemak(Grease Spot Test), tetap menggunakan endapan kasein tersebut yang ditambahkan dengan sedikit eter. Berdasarkan hasil praktikum,diperoleh bahwa

terdapat noda minyak atau lemak pada gelas arloji . Adanya laktalbumin dapat di buktikan dengan ada atau tidaknya koagulan. Dimana, adanya koagulan menunjukkan bahwa zat tersebut mengandung laktalbumin. Sementara, untuk menunjukkan adanya laktosa di lakukan uji fehling, dimana adanya laktosa ditandai dengan adanya endapan merah bata. Pada hasil percobaan diperoleh gumpalan pada larutan yaitu pada susu kedelai berwarna hijau sedangkan pada susu sapi/ultra terdapat gumpalan berwarna biru.

H. PENUTUP 1. Kesimpulan Pada praktikum bahan makanan digunakan susu kedelai dan susu sapi/ ultra Dilakukan perhitumgan massa jenis, dan dilakukan beberapa uji kimia Untuk uji Reaksi reaksi warna protein dilakukan dengan beberapa cara yaitu dengan reaksi biuret, reaksi Hopkins-cole, reaksi xantoprotein dan reaksi molish. Susu yang telah diencerkan mempunyai pH netral, sedangkan yang telah didiamkan bersifat asam. Air susu yang sudah lama bersifat asam karena ada bakteri asam laktat dalam susu dimana bakteri itu mengubah laktosa menjadi asam laktat sehingga pH pada susu turun. Pada percobaan identifikasi senyawa dengan tes noda lemak, di dapatkan hasil berupa bercak yang teransparan pada kertas saring yang menandakan bahwa susu mengandung lemak Untuk membuktikan adanya laktabumin biasanya ditandai dengan adanya koagulan. Untuk menunjukan adanya laktosa biasanya ditandai dengan adanya endapan merah bata.

2. Saran Kerjasama antar co.asst dan praktikan perlu ditingkatkan.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2011. Kasein. http://www.id.wikipwdia.org.wiki/ kasein. diakses pada tanggal14 Desember 2011. Poedjiadi, Anna Dan Supriyanti,F.M. 2007. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta : UI Press. .

Winarno,F.G. 1992. Kimia pangan Dan Gizi. Jakarta :Grahamedia

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA MENENTUKAN KADAR KOLESTEROL

Oleh: Baiq Witha Yulisvia G1A 009012

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS MATARAM MATARAM 2011
ACAR V MENETAPKAN KADAR KOLESTEROL A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM 1. Tujuan Praktikum 2. Hari, tanggal 3. Tempat : : : Untuk menentukan kadar kolesterol suatu sampel. Senin, 21 November 2011 Laboratorium Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Mataram

B.

LANDASAN TEORI Kolesterol adalah lemak berwarna kekuningan berbentuk seperti lilin yang diproduksi oleh tubuh manusia, terutama di lever (hati). Kolesterol terbentuk secara alamiah. Dari segi ilmu kimia, kolesterol merupakan senyawa lemak kompleks yang dihasilkan oleh tubuh dengan berbagai macam fungsi, antara lain untuk membuat hormon seks, hormon korteks adrenal, vitamin D, dan untuk membuat garam empedu untuk membantu usus untuk menyerap lemak. Jadi, bila takarannya pas atau normal, kolesterol

adalah lemak yang berperan penting dalam tubuh. Namun, jika terlalu banyak, kolesterol dalam aliran darah justru berbahaya bagi tubuh (Nilawati, 2008 : 12). Kolesterol ialah jenis khusus lipid yang disebut steroid. Steroid ialah lipid yang memiliki struktur kimia khusus. Struktur ini terdiri dari 4 cincin atom karbon. Steroid lain termasuk steroid hormon seperti kortisol, estrogen, dan testosteron. Nyatanya, semua hormon steroid terbuat dari perubahan struktur dasar kimia kolesterol (Achmad, 1986). Steroid adalah lipid yang ditandai dengan suatu kerangka karbon yang terdiri atas 4 cincin yang menyatu. Steroid yang berbeda bervariasi dalam gugus fungsional yang terikat dalam kumpulan cincin ini. Salah satu steroid adalah kolesterol yang merupakan komponen umum membran sel hewan dan juga merupakan prekursor yang mna dari prekursor ini steroid lain yang sintesis. Banyak hormon termasuk hormon seks vertebrata merupakan streroid yang dihasilkan dari kolesterol. Dengan demikian kolesterol merupakan molekul penting dalam tubuh hewan meskipun dalam konsentrasi tinggi dalam darah akan menyebabkan aterosklerosis (Campbell, 2002). Kalibrasi merupakan proses verifikasi bahwa suatu akurasi alat ukur sesuai dengan rancangannya. Kalibrasi biasa dilakukan dengan membandingkan suatu standar yang terhubung dengan standar nasional maupun internasional dan bahan-bahan acuan tersertifikasi. Kalibrasi, pada umumnya, merupakan proses untuk menyesuaikan keluaran atau indikasi dari suatu perangkat pengukuran agar sesuai dengan besaran dari standar yang digunakan dalam akurasi tertentu. Contohnya, termometer dapat dikalibrasi sehingga kesalahan indikasi atau koreksi dapat ditentukan dan disesuaikan (melalui konstanta kalibrasi), sehingga termometer tersebut menunjukan temperatur yang sebenarnya dalam celcius pada titik-titik tertentu di skala (Vogel, 1985). C. ALAT DAN BAHAN a. Alat yang dipakai : Labu ukur 10 ml Vortex mixer Penangas air Pipet tetes UV-VIS Kuvet Tabung reaksi

Penjepit Pipet volume 5 ml Bolb Rak tabung reaksi b. Bahan yang dipakai : Alkohol absolut Serum darah (kolesterol rendah dan kolesterol tinggi) Petroleum benzine Aquades Colour reagen (1,0 mgr FeCl3.6H2O/ml asam asetat glasial) Asam sulfat pekat Larutan kolesterol standar 0,05 mg/ml petroleum benzine Kertas label Tissue D. 1. SKEMA KERJA Uji Sampel 2,5 ml alkohol absolut Dimasukkan ke dalam tabung reaksi bertutup + 0,1 ml serum Dikocok Hasil + 5 ml petroleum benzine Tabung ditutup rapat Dicampur menggunakan vortex mixer selama 30 detik Hasil + 3 ml aquades Dikocok lagi selama 10-15 detik

Didiamkan sampai terbentuk 2 lapisan

Lapisan atas Diambil dg pipet ukur Dimasukkan ke dalam tabung reaksi Lapisan atas (dalam tabung reaksi) Diuapkan (tabung reaksi dimasukkan ke dalam penangas air (80oC) sampai cairan tinggal sedikit) Hasil (cairan sedikit dlm tabung) Tabung diambil & dibiarkan mengering di udara terbuka Hasil + 4ml colour reagen Tabung blanko B Diambil Dimasukkan 4 ml colour reagen (0,000 gr FeCl3.6H2O/ml asam asetat glasial) Tabung S Dimasukkan ke dalam penangas air hangat beberapa menit untuk melarutkan sisa-sisa kolesterol Didinginkan pada temperatur kamar Tabung S dan B + 3 ml asam sulfat pekat dengan mengalirkan melalui dinding tabung yang

lapisan bawah

dimiringkan sehingga dasar tabung terbentuk 2 lapisan yang terpisah Dikocok dengan vortex mixer Hasil Didiamkan dalam ruang gelap selama 30 menit Diukur A dan %T larutan S dan B spektrofotometer pada = 560 nm (kuvet sebelumnya dicuci dengan aquades dan dikeringkan di udara). Untuk ini dibutuhkan waktu inisial selama 30 menit & warna stabil selama 1 jam. Hasil 2. Kurva Kalibrasi 3 tabung reaksi Masing-masing dimasukkan 0,5 ml, 1 ml dan 2 ml larutan kolesterol standar 0,05 mg/ml + petroleum benzine Diuapkan sampai kering dalam penangas air (80oC) dan sisanya yang tertinggal diuapkan pada temperatur kamar. Kadar kolesterol masingmasing adalah 125mg %, 250 mg %, dan 500 mg %. Hasil + 4ml colour reagen Tabung blanko B Diambil Dimasukkan 4 ml colour reagen (0,000 gr FeCl3.6H2O/ml asam asetat glasial)

Tabung S Dimasukkan ke dalam penangas air hangat beberapa menit untuk melarutkan sisa-sisa kolesterol Didinginkan pada temperatur kamar Tabung S dan B + 3 ml asam sulfat pekat dengan mengalirkan melalui dinding tabung yang dimiringkan sehingga dasar tabung terbentuk 2 lapisan yang terpisah Dikocok dengan vortex mixer Hasil Didiamkan dalam ruang gelap selama 30 menit Diukur A dan %T larutan S dan B spektrofotometer pada = 560 nm (kuvet sebelumnya dicuci dengan asam asetat glasial dan dikeringkan di udara). Untuk ini dibutuhkan waktu inisial selama 30 menit & warna stabil selama 1 jam. Hasil E. a. 1. HASIL PENGAMATAN Uji Sampel Langkah Kerja Tabung reaksi bertutup (tabung S) 2. disediakan. 2,5 ml alkohol dimasukkan dalam tabung reaksi Alkohol berwarna bening Hasil Pengamatan Belum di masukkan larutan

3.

0,1 ml serum ditambahkan dan dikocok dan terdapat endapan kecil.

Sampel kolesterol rendah berubah menjadi keruh Sampel kolesterol tinggi lebih keruh dibandingkan sampel kolesterol rendah dan endapannya lebih banyak dan besar. Tidak terjadi perubahan

4.

5 ml petroleum benzine ditambahkan dan tabung ditutup rapat Dicampur dengan vortex mixer selama 30 detik

5.

Kecepatan putaran = 1500 rpm. Larutan menjadi homogen Sampel kolesterol rendah keruh Sampel kolesterol tinggi bening dan terdapat endapan di dasar tabung

6.

3 ml aquades ditambahkan dan dikocok lagi selama 10-15 detik, kemudian didiamkan sampai terjadi 2 lapisan

Sampel kolesterol rendah : terdapat 2 lapisan yaitu bening (atas) dan keruh (bawah). Sampel kolesterol tinggi : lapisan atas bening, terdapat endapan dan lapisan bawah keruh. Tabung I (Sampel kolesterol rendah) : bening. Tabung II (Sampel kolesterol tinggi) : bening Sampel kolesterol rendah dan Sampel kolesterol tinggi sama-sama keruh

7.

Lapisan atas dimasukkan ke tabung reaksi

8.

Diuapkan dalam penangas air (80oC) sampai cairan tinggal sedikit. Tabung diambil dan dibiarkan mengering 4 ml Colour reagen ditambahkan

9.

Sampel kolesterol rendah berwarna orange Sampel

10.

Dimasukkan 4 ml colour reagen ke dalam tabung balanko Tabung S dimasukkan dalam penangas air selama beberapa menit kemudian didinginkan 3 ml H2SO4 ditambahkan ke dalam tabung S dan B dengan mengalirkan melalui dinding tabung yang dimiringkan

kolesterol tinggi berwarna kuning. Berwarna bening

11.

Terbentuk endapan merah

12.

Sampel kolesterol tinggi : terbentuk 2 lapisan yaitu hijau muda (atas) dan agak kemerahan (bawah) Sampel kolesterol rendah : terbentuk 2 lapisan yaitu kuning bening (atas) dan kuning (bawah) Blanko : terdapat 2 lapisan yaitu bening (atas) dan kuning (bawah) Terasa panas pada tabung Larutan menjadi homogen Sampel kolesterol tinggi : terjadi perubahan warna. Lapisan atas berwarna kuning keemasan dan lapisan bawah berwarna cokelat Sampel kolesterol rendah : terjadi perubahan warna. Lapisan atas berwarna kuning dan lapisan bawah berwarna kuning keemasan. Nilai absorban : Sampel kolesterol rendah = 0,075 A Sampel kolesterol tinggi = 0,68 A

13. 14.

Dikocok dengan vortex mixer Tabung S dan B didiamkan dalam ruang gelap selama 30 menit

15.

Diukur A dan % T larutan S terhadap B dengan spektrofotometer pada = 560 nm

b.

Kurva Kalibrasi

1.

Langkah Kerja 3 tabung reaksi disediakan, masing-masing tabung diisi 0,5 ml, 1 ml, dan 2 ml larutan kolesterol standar 0,05 mg/ml + petroleum benzine

Hasil Pengamatan Berwana kuning keruh

2.

Diuapkan sampai kering dalam penangas air (80oC) dan sisanya diuapkan pada temperatur kamar. Kadar kolesterol masingmasing : Tabung I : 125 mg % Tabung II : 250 mg %

Tidak terjadi perubahan warna

Tabung III : 500 mg % 3. 4 ml Colour reagen ditambahkan 4. Dimasukkan 4 ml colour reagen ke dalam tabung blanko 5. Tabung S dimasukkan dalam penangas air selama beberapa kemudian didinginkan 6. 3 ml H2SO4 ditambahkan ke dalam tabung S dan B dengan mengalirkan melalui dinding tabung yang dimiringkan

Terjadi perubahan warna menjadi kuning Berwarna bening

Tidak terjadi perubahan warna

Sampel 0,5 ml : terdapat 2 lapisan yaitu orange (atas) dan bening (bawah) Sampel 1 ml : terdapat 2 lapisan yaitu kuning cerah (atas) dan bening (bawah) Sampel 2 ml : terdapat 2 lapisan yaitu kuning (atas) dan bening (bawah) Tidak terjadi perubahan

7.

Dikocok dengan

8.

vortex mixer Tabung S dan B didiamkan dalam ruang gelap selama 30 menit banyak warna bening

Sampel 0,5 ml : tidak terjadi perubahan warna, namun lebih Sampel 1 ml : terjadi perubahan warna yaitu hitam (atas) dan cokelat (bawah) dan larutannya lebih pekat Sampel 2 ml : terjadi perubahan warna yaitu cokelat (atas) dan kuning (bawah) Nilai absorban : Sampel 0,5 ml = 0,96 A Sampel 1 ml = 1,86 A Sampel 2 ml = 0,86 A

9.

Diukur A dan % T larutan S terhadap B dengan spektrofotometer pada = 560 nm

F. 1.

ANALISIS DATA Perhitungan a. Diket Hitungan % Transmitan : Sampel 0,5 ml = A1 = 0,96 A Sampel 1 ml = A2 = 1,86 A Sampel 2 ml = A3 = 0,86 A Dit Jawab : : %T

A1 = -log T T1 = -10A = -100,96 T1 = - 9,12

A2 = -log T2 T2 = -10 A = -101,86 = -72,44

A3 = -log T3 T3 = -10A = -100,86 = -7,24

b.

Hitungan Berat Kolesterol kadar kolesterol standar = 0,05 mg/ml massa = V x kadar kolesterol standar (mg/ml)

Sampel 0,5 ml Massa = 0,5 ml x 0,05 mg/ml = 0,025 mg

Sampel 1 ml Massa = 1 ml x 0,05 mg/ml = 0,05 mg

Sampel 2 ml Massa = 2 ml x 0,05 mg/ml = 0,1 mg

2.Persamaan Reaksi

2. Kurva

Penentuan kadar kolesterol dalam serum darah (x) Y=-0,05X+1,326 Sampel kolesterol rendah Y= 0,075 A 0,075= - 0,05X+1,326 0,05X=1,326-0,075 0,05X= 1,251 X= 1,251/0,05 = 25,02 mg/ml Sampel kolesterol tinggi Y=0,68 A 0,68= - 0,05X+1,326 0,05X= 1,326-0,68 0,05X= 0,646 X= 0,646/0,05

= 12,92 mg/ml

G.

PEMBAHASAN Praktikum kali ini membahas tentang menentukan kadar kolesterol dari suatu sampel dan dilakukan 2 percobaan yaitu uji sampel dan kurva kalibrasi. Pada uji sampel, kami menggunakan 2 macam sampel yaitu kolesterol rendah dan kolesterol tinggi. Kolesterol merupakan steroida penting, bukan saja karena merupakan komponen membran tetapi juga karena merupakan pelopor biosintetik umum untuk steroid lain termasuk hormon steroida dan garam empedu. Pada manusia kolesterol diperoleh secara langsung dari makanan dan juga dibiosintesis dari asetat melalui skualena di dalam limpa. Jumlah seluruh kolesterol dalam darah tergantung pada sebagian besar makanan, umur, kelamin. Kolesterol dalam tubuh manusia sumbernya 2 yaitu berasal dari diet makanan asal hewan yang mengandung kolesterol dan juga disintesis oleh liver dari Asetil KoA (Asetil KoA berasal dari penguraian karbohidrat dan lemak) (Kusnawijaya, 1993). Sintesis kolesterol terutama di hati dan di usus. Semua atom C-nya (27) berasal dari asetil-KoA yang dapat berasal dari oksidasi karbohidrat, lipid, dan asam amino. Proses ini berasal dari oksidasi karbohidrat, lipid dan asam amino. Sintesis kolesterol berlangsung di sitosol dalam 4 tahap, dengan enzim HMG-KoA reduktase sebagai (enzim regulator), yaitu (Anonim, 2010) : 1. Sintesis mevalonat, dari asetil-KoA: 2 mol asetil-KoA berkondensasi menjadi asetoasetil-KoA kemudian kondensasi dengan asetil-KoA ketiga membentuk beta-OH-beta metilglutaril- KoA (HMG KoA) dengan enzim HMG KoA sintase, tereduksi menjadi mevalonat, enzim HMG KoA reduktase (enzim regulator). 2. 3. 4. enam. Pada saat praktikum, serum dicampurkan dengan alkohol. Alkohol disini berfungsi untuk melarutkan kolesterol yang terdapat dalam serum darah karena kolesterol merupakan senyawa yang tidak dapat larut dalam air tetapi larut dalam minyak atau alkohol (Vogel, 1985). Pelarut lain yang digunakan dalam praktikum adalah dietil eter. Pada saat praktikum digunakan pula H2SO4 yang berfungsi sebagai katalisator. Konversi mevalonat menjadi 2 isopren aktif (5 atom C). Kondensasi 6 isoprene aktif menjadi skualen (30 atom C). Perubahan skualen, lanosterol, inti steroid yang mengandung 4 cincin segi

Pada saat praktikum uji sampel digunakan vortex mixer yang berfungsi untuk menghomogenkan larutan. Setelah itu ditambahkan aquades agar terbentuk 2 lapisan. Selain itu, vortex mixer juga digunakan dalam percobaan kurva kalibrasi. Setelah itu, larutan kolesterol didiamkan di ruang gelap sebelum diukur absorbannya. Hal ini dilakukan agar cepat terjadi pemisahan larutan menjadi 2 lapisan dan agar larutan kolesterol tidak cepat menguap (Anonim, 2010). H. PENUTUP Dari hasil praktikum dapat disimpulkan bahwa: Kesimpulan 1. 2. Kolesterol ialah jenis khusus lipid yang disebut steroid. Kolesterol dalam tubuh manusia sumbernya 2 yaitu berasal dari diet makanan asal hewan yang mengandung kolesterol dan juga disintesis oleh liver dari Asetil KoA (Asetil KoA berasal dari penguraian karbohidrat dan lemak). 3. 4. 5. 6. Asetil koA merupakan sumber semua atom karbon pada kolesterol. Kolesterol merupakan senyawa yang tidak larut dalam air tetapi larut dalam minyak , alkohol atau dietil eter. Vortex mixer berfungsi untuk menghomogenkan larutan. Larutan kolesterol didiamkan di ruang gelap sebelum diukur absorbannya, agar cepat terjadi pemisahan larutan menjadi 2 lapisan dan agar larutan tersebut tidak cepat menguap. saran Diharapkan kerja sama yang baik antara co.ass dan praktikan.

DAFTAR PUSTAKA

Achmad, Sjamsul Arifin. 1986. Materi Pokok Kimia Organik Bahan Alam. Jakarta : Penerbit Karunika. Anonim.2010. Metabolisme Lipid (http://merumerume.wordpress.com/2010/04/17/metabolisme-lipid/ ; diakses 18 November 2011). Campbell, Neil. 2002. Biologi. Jakarta : Erlangga. Kusnawijaya. 1993. Biokimia. Bandung : Exact Ganeca. Nilawati, Sri. 2008. Care Yourself, Kolesterol. Jakarta : Penebar Plus. Vogel, A.I. 1985. Buku Teks Analisis Anorganik Kualitatif Anorganik Makro dan Semimikro, Penerjemah L. Setiono dan A.H Pudjaatmaka. Jakarta : Kalman Media Pustaka.

You might also like