P. 1
Makalah Ob

Makalah Ob

|Views: 117|Likes:

More info:

Published by: Siti Nurwahidah Sri Lestari on Jun 02, 2013
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

11/08/2013

pdf

text

original

a. b. c. d. a. b. c. a. b. c. d.

Alat transfer, pengukur dan penakar Pipet Pipet ukur / graduated pipette dan drum pipet Volumetric pipette Pipet tetes / Pasteur Pipette Transfer pipette Pipet aids Rubber bulb / pipet filler Pipet-aid Pipet pump Pipettors Adjustable volume pipettors Fixed volume pipetors Multichannel pipettors Automatic pippetors pH meter dan kertas pH meter universal. Timbangan / neraca digital Labu erlenmeyer Beaker glass Gelas ukur / graduated cylinder Alat penghancur dan penghomogenisasi Stomacher Blender Vortex mixer Hot plate & stirrer Mortar & pestle Alat untuk keperluan sterilisasi dan keadaan aseptis : Biological Safety Cabinet (BSC) atau Laminar Air Flow (LAF) Autoklaf Oven Filter apparatus dan kertas membran filter Bunsen burner, loop incinerator dan pembakar spirtus Gas torch Sprayer Alat untuk keperluan inokulasi dan kultivasi mikroorganisme Cawan Petri Tabung reaksi Botol Spreader (L rod) / hockey-stick-shape-glass-rod / glass spreader / Drigalsky spatulas Glass beads Pemutar cawan petri (Petri dish turntable) Tabung durham Media dispenser (glass repeating dispenser) Jarum inokulum / ose (inoculating loops) Pinset, gunting, pisau, spatula dan scalpel

Alat untuk penjagaan suhu dan penyimpan Inkubator Waterbath Refrigerator Freezer Sample container Rak tabung reaksi Desikator Alat observasi dan penghitung Mikroskop cahaya Mikroskop stereo Object glass dan cover glass UV Cabinet Colony counter Alat-alat lain Disc dispenser Freeze-drying Anaerobic jars Centrifuge Spektrofotometer Alat transfer, pengukur dan penakar Pipet Pipet adalah selongsongan tabung yang berfungsi untuk mentransfer cairan. Instilah pipet lebih ditekankan kepada tabung kaca atau plastik tersebut. Jenis-jenis pipet antara lain: a.Pipet ukur / graduated pipette dan drum pipet Pipet gelas berskala yang berguna untuk memindahkan cairan ini umumnya dipakai dengan volume 1 ml, 5 ml atau 10 ml. Sebaiknyajangan mentransfer volume sampel <10% dari volume total pipet, misalnya untuk mentransfer cairan 0,1 ml jangan menggunakan pipet ukur >1 ml (5 ml atau 10 ml). Pipet ukur dilengkapi dengan cotton wool yang dimasukkan pada bagian pangkalnya yang berfungsi untuk mencegah kontaminasi saat pemipetan dari alat penghisap dan sebaliknya. Pipet ukur umumnya disterilisasi secara berkelompok dan dimasukkan ke dalam drum pipet dari aluminium. Untuk mencegah kerusakan ujung pipet ukur pada bagian dasar drum pipet dapat dimasukkan gumpalan kapas. b.Volumetric pipette volumetric pipette adalah pipet dengan bagian tengah menggelembung (yang menampung sebagian besar cairan) dan hanya memiliki satu garis skala misalnya 10 ml atau 5 ml (tidak memiliki pembagian skala lebih kecil seperti pipet ukur). c.Pipet tetes / Pasteur Pipette Pipet gelas berdiameter 6-7 mm ini berfungsi untuk memindahkan sejumlah kecil cairan dengan menghisapnya memakai gelembung karet elastis yang dapat ditekan. Volume pasti yang disedot tidak dapat diketahui. Salah satu penerapannya adalah untuk menambahkan asam sedikit demi sedikit pada media saat mengatur pH. d.Transfer pipette Pipet yang bentuknya mirip dengan pipet tetes namun terbuat dari plastik. Antara bagian gelembung dan tabung pipetnya menyatu. Umumnya digunakan sekali buang (disposable).

pippetors memerlukan tip untuk menampung cairan yang dihisap. Tip disterilisasi dalam tip box. Proses penghisapan dan peniupan dikerjakan menggunakan prinsip peristaltis. 1 ml.Automatic pippetors Alat pempipet otomatis yang mampu memindahkan cairan dari wadah satu ke wadah lain tanpa ditekan secara manual. Kemudian katup E (exhaust) berfungsi untuk mengeluarkan cairan dari pipet ukur. 10 ul. Beberapa pilihan kisaran volumenya adalah 1-10 ml. Pipettors tidak memerlukan pipet ukur. Dalam penggunaannya. umumnya dibawah 100 ul dan mungkin akan menimbulkan ketidaknyamanan jikapipettors dengan kisaran volume 1-10 ml disebut dengan mikropipet. Pangkal pipet ukur dapat dimasukkan kedalam alat ini. Volume yang tersedia diantaranya adalah 5 ml.Adjustable volume pipettors Adjustable volume pipettors adalah pipettors yang dapat diatur volume cairannya berdasarkan besar kecilnya volume udara yang dihisap. Tip ini fungsinya sama seperti pipet ukur namun hanya berguna untuk menampung cairan tanpa adanya skala.Pipet-aid Alat penghisap cairan yang dapat dipasangi pipet ukur. Istilah pipet aids lebih ditujukan untuk alat yang membantu pipet. Istilah mikropipet lebih menjurus kepada pipettors dengan skala volume yang kecil. Katup yang bersimbol A (aspirate) berguna untuk mengeluarkan udara dari gelembung. 100 ul. Jenis-jenis pipet aids antara lain: a. tidak seperti pipet-aids.Rubber bulb / pipet filler Rubber bulb adalah alat untuk menyedot larutan yang dapat dipasang pada pangkal pipet ukur. 1-5 ml. Pipet aids Pipet aids adalah sekumpulan alat yang fungsinya untuk membantu proses penyedotan dan alat-alat ini dapat dipasang pipet seperti pipet ukur. Jumlah percabangan yang tersedia adalah 4. dll. 8 atau 12 cabang. Jenisjenis pipettors antara lain: a. Volume cairan dapat diatur dan .Fixed volume pipettors Pipettors yang memiliki volume hisap yang tidak dapat diubah atau tetap. 2-10 ul. b. c.Salah satu fungsinya adalah menambahkan specimen kultur cair pada object glass untuk diamati. d.Multichannel pipettors Pipettors yang mempunyai banyak ujung sehingga satu alat dapat dipasang beberapa tip untuk mentransfer cairan-cairan ke beberapa wadah sekaligus. Filler memiliki 3 saluran yang masing-masing saluran memiliki katup. Karet sebagai bahan filler merupakan karet yang resisten bahan kimia. Prinsipnya sama dengan penyedotan cairan pada syringe. Pipet-aid bekerja menggunakan motor elektrik yang dikendalikan melalui dua tombol yaitu tombol hisap dan tombol tiup. maka dari itu alat ini membutuhkan selang.Pipet pump Pemompa cairan yang penyedotannya dikendalikan melalui thumb wheel. b. Sumber tenaga pipet-aid dapat berupa baterai rechargeable atau kabel yang terkoneksi langsung dengan sumber tegangan. Prinsip penghisapan adalah sama dengan syringe namun dilengkapi dengan pegas yang dapat mengembalikan posisi tombol penghisap ke tempat semula. dll. Pipettors Pipettors atau alat pempipet adalah sebutan alat-alat yang berguna untuk menghisap cairan dan mentransfernya. c. S (suction) merupakan katup yang jika ditekan maka cairan dari ujung pipet akan tersedot ke atas. 10-100 ul. Untuk mengeluarkan cairan maka plunger / tombol drain cairan dapat ditekan sehingga cairan keluar dengan cepat. Alat ini tidak begitu banyak dipakai dalam mikrobiologi namun lebih sering digunakan pada laboratorium serologi atau bioteknologi.

pH meter dan kertas pH meter universal. Beaker glass Beaker glass adalah alat penampung cairan yang dapat digunakan untuk berbagai macam keperluan. Pada saat mengukur volume larutan. Salah satu cara meningkatkan presisi dan efektifitas pengukuran maka untuk mengukur volume tertentu (20 ml misalnya) dituang dahulu cairan sampai sedikit dibawah batas skala yang diinginkan (18 ml misalnya) kemudian sisanya ditambahkan sedikit demi sedikit menggunakan pipet tetes. dan fitur lainnya. Klasifikasi pipet dan alat pipet diatas adalah berdasarkan Barker (1998). Untuk mengurangi resiko pecah tersedia juga gelas ukur plastik. pH meter berguna untuk mengukur/mengetahui pH suatu larutan. dll. ketelitian yang tinggi. Fungsinya hampir sama dengan Erlenmeyer namun perbedaannya adalah beaker glass memiliki mulut bercucuk yang lebar dan diameter mulut sama dengan diameter bagian dasar sehingga sesuai untuk proses pengadukan dengan spatula. sebaiknya batas air tersebut ditentukan berdasarkan meniskus cekung larutan. Seperti labu erlenmeyer. Terdapat juga cara pengukuran pH yang lebih sederhana yaitu dengan menggunakan kertas yang mengandung bahan indikator pH. Alat penghancur dan penghomogenisasi Hot plate stirrer dan Stirrer bar Hot plate stirrer dan Stirrer bar (magnetic stirrer) berfungsi untuk menghomogenkan suatu larutan dengan pengadukan dan panas. AOAC (2000) menyebutkan bahwa timbangan analitik standar untuk mikrobiologi harus memiliki ketelitian 0. gelas ukur memiliki beberapa pilihan berdasarkan skala volumenya. pengubah satuan. Terdapat beberapa pilihan berdasarkan volume cairan yang dapat ditampungnya yaitu 100 ml. menimbang sampel. Pelat (plate) yang terdapat dalam alat ini dapat dipanaskan sehingga . Alat ini terdiri dari hot plate stirrer dan batangan magnet yang terpisah. dll. kultivasi mikroba dalam kultur cair. Alat ini tidak cocok untuk menampung cairan steril mengingat mulut yang lebar memperbesar resiko kontaminasi dan tumpah. Gelas ukur / graduated cylinder Berguna untuk mengukur volume suatu cairan. Mulut labu yang kecil tapi dengan bagian bawah yang melebar memberkan keuntungan tersendiri saat bekerja secara aseptis atau ketika mengkultur mikroba yang membutuhkan aerasi.1 g dengan kapasitas ≥2000 g. Labu Erlenmeyer dapat digunakan untuk meracik dan menghomogenkan bahan-bahan komposisi media. menampung akuades. Timbangan digital saat ini dilengkapi dengan penara kembali (tare). dsb. Hal ini sangat penting dalam pembuatan media karena pH pada media berpengaruh terhadap petumbuhan mikroba. 1000 ml. Di dalam lab mikrobiologi umumnya dipakai untuk menimbang media pertumbuhan. Untuk mengukur cairan dengan volume yang kecil (8 ml misalnya) sebaiknya menggunakan pipet atau pipettors tidak dengan gelas ukur berukuran 10 ml.alat akan berhenti menyedot setelah volume tersebut selesai dipindahkan. 500 ml. pH meter dapat berbentuk peralatan digital ataupun analog yang dilengkapi probe untuk mendeteksi konsentrasi ion hidrogen atau hidroksida. Salah satu penerapannya adalah saat membagi media pada tabung-tabung dengan volume yang sama. Kertas pH indikator dicelupkan sampai tidak ada perubahan warna kemudian strip warna dicocokkan dengan skala warna acuan Timbangan / neraca analitik Timbangan / neraca analitik adalah alat untuk mengetahui berat / massa suatu bahan. membuat pelarut. Labu erlenmeyer Labu erlenmeyer berfungsi untuk menampung larutan atau cairan. 250 ml.

Di dalam pelat juga terdapat suatu magnet yang dapat diatur kecepatan putarannya sehinggamagnetic stirrer yang dimasukkan ke dalam wadah berisi larutan akan mengikuti putaran di dalam pelat dan tercipta arus pengadukan otomatis.mampu mempercepat proses homogenisasi. Kecepatan. Lama sterilisasi yang dilakukan adalah 15 menit pada suhu 121oC. Stomacher Berbeda dengan blender. artinya udara yang terdapat di daerah tersebut benar-benar steril. misal daging. Menurut Morello et al. Area steril ini dapat diciptakan oleh LAF atau BSC karena alat ini mampu menyaring partikel udara termasuk sel mikroba sehingga udara yang dihembuskan ke area kerja menjadi bebas mikroorganisme. kacang atau tanah sebelum diproses lebih lanjut. Umumnya digunakan untuk menghomogenisasi larutan dalam botol atau tabung saja. Vortex mixers Vorteks adalah alat yang memiliki suatu dudukan berengsel yang dapat berputar cepat sehingga larutan dalam botol atau tabung yang diletakkan (dengan ditekan) akan berputar dan teraduk. (2003) tekanan yang digunakan pada umumnya 15 Psi atau sekitar 1 atm dan dengan suhu 121oC (250oF). Blender Blender atau mixer dalam mikrobiologi digunakan untuk menghancurkan sampel padatan supaya homogen dan mudah untuk dianalisa. tekanan dan waktu tersebut maka segala bentuk mikroorganisme dapat dimatikan. Jadi tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi2 (15 Psi = 15 pounds per square inch). Blender dapat benar-benar membuat suatu larutan menjadi homogen karena terjadi pencacahan bahan berkali-kali dan bahan mengalami kontak langsung dengan pisau. (untuk informasi lebih lengkap mengenai autoklaf dapat dilihat pada Bab Sterilisasi) Biological Safety Cabinet (BSC) atau Laminar Air Flow (LAF) Di dalam laboratorium mikrobiologi harus terdapat suatu area kerja yang bebas dari mikroorganisme. Fungsi daerah ini adalah untuk tempat kerja proses transfer atau manipulasi biakan. Mortar-pestle Mortar (mangkuk) dan pestle (penumbuk) yang terbuat dari porselin digunakan untuk menumbuk atau menghancurkan materi sampel. Dengan syarat suhu. Kelemahan blender adalah dapat menciptakan penyebaran aerosol yang menjadi berbahaya jika sampel diperkirakan mengandung patogen. Penggunaan LAF atau BSC dalam kerja .000 rpm dan juga wadah bertutup berukuran 1000 ml. jarak himpitan dan lama waktu dapat diatur dan disesuaikan jenis sampel. Kelebihannya adalah alat tidak perlu disterilisasi ulang dan tidak menciptakan aerosol. Sampel dimasukkan kedalam plastik steril heavy duty lalu plastik dihimpit berkali-kali dengan pedal. Alat ini memiliki suatu pompa untuk menghirup udara dan melewatkannya pada saringan berukuran pori-pori sangat kecil. Spesifikasi blender minimal menurut Maturin and Peeler (2001) adalah yang memiliki 4 pisau putar stainless steel tajam dengan putaran 10. Jika menggunakan alat ini analis tidak perlu mengocok tabung menggunakan tangan dan cara ini mampu meminimalisasi resiko tumpahan. cara stomacher menghancurkan sampel adalah dengan ditekan menggunakan satu lempeng yang dinamakan pedal.000-12. Alat untuk keperluan sterilisasi dan keadaan aseptis Autoklaf (Autoclave) Autoclave adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yang digunakan dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan.

selang.65 um dll. tinta skala yang tidak beracun. filter base. Kertas membran filter memiliki pori-pori yang sangat kecil. loop incinerator dan pembakar spirtus Bunsen burner dan pembakar spirtus digunakan untuk sterilisasi alat inokulasi dengan pembakaran seperti sterilisasi jarum inokulum atauspreader. minmal 70 % luas area berpori.aseptis akan sangat menekan resiko kontaminan dari udara sekitar kepada biakan dan juga menjaga atau membuat aman operator dari terpaparnya kepada biakan bakteri berbahaya. dan pompa vakum. Oleh karena itu sebaiknya tetap menggunakan LAF jika menginginkan kerja pada udara yang steril. penjepit corong. Menurut APHA (1999) kertas membran yang baik adalah yang bebas dari bahan inhibitor atau stimulus pertumbuhan. Tersedia juga alat loop incinerator / electric bunsen burner / electric incinerator untuk membakar jarum inokulum. Alkohol yang disebarkan dalam aerosol kecil-kecil akan meningkatkan efisiensi .2 um. Seringkali hal ini dianggap mampu menciptakan lingkungan udara yang aseptis disekitar pembakar spirtus. Untuk memastikan kesterilannya jarum inokulum dibakar sampai membara dan spreader dapat dicelupkan alkohol lalu dibakar. Diameter pori-pori dapat berukuran 0. Sterilisasi dapat dilakukan pada suhu 60-180oC selama ½ sampai 3 jam. Pembakar spirtus dapat menciptakan sirkulasi udara dari bawah ke atas melewati api karena proses pembakaran. antibiotik. (untuk informasi lebih lengkap mengenai teknik filtrasi dapat dilihat pada Bab Sterilisasi dan Teknik Membran Filtrasi Untuk Menghitung Mikroba) Bunsen burner.45 um. Mampu dilewati dengan flow rate 55 ml/menit/cm2 pada 25 oC. labu pengumpul. glukosa dll. tetapi jika memang load kontaminasi besar dan banyak gangguan aliran udara maka hal ini juga tidak sepenuhnya benar. pipa atau yang lainnya sebelum pengambilan sampel dilakukan. diharapkan tetap mampu menyaring kultur cair 1x103 Serratia marcescens. berpori maksimal 0. lebih kecil dari ukuran bakteri pada umumnya. Filter apparatus dan kertas membran filter Alat-alat ini digunakan untuk proses sterilisasi secara mekanis (dengan penyaringan). Fungsinya adalah untuk mensterilisasi sample point yang dapat berupa kran. berdiameter 47 mm. Sprayer Alat penyemprot sederhana ini dapat sangat membantu dalam proses sterilisasi menggunakan alcohol. 0. 0. Umumnya alat-alat yang disterilisasi dengan oven adalah alat gelas seperti cawan atau pipet ukur. Filter apparatus juga dapat digunakan untuk menghitung mikroorganisme dengan prinsip yang sama dengan sterilisasi filtrasi. Namun pembakar spirtus lebih mudah ditemukan di banyak laboratorium karena efisien dan portable. bebas dari bahan yang mampu menginterfrensi indikator media. Selain itu dapat digunakan untuk sterilsasi dengan api pada berbagai alat karena gas torch lebih nyaman digenggam dibandingkan pembakar bunsen atau pembakar spirtus. Pada umumnya bahan yang disterilkan melalui cara ini adalah bahan yang mengandung senyawa tidak tahan suhu tinggi atau tekanan tinggi seperti serum darah. Bunsen burner berbahan bakar gas yang disalurkan melalui pipa sedangkan pembakar spirtus berbahan bakar spirtus (methanol). Ujung jarum inokulum dapat dimasukkan ke dalam tabung keramik panas (815oC) selama 6 detik untuk mensterilisasinya. Filter apparatus umumnya terdiri dari corong. (untuk informasi lebih lengkap mengenai LAF atau BSC dapat dilihat pada Bab Sterilisasi) Oven Oven berfungsi sebagai alat sterilisasi dengan prinsip panas kering. Prinsipnya yaitu menyaring suatu cairan non steril dengan kertas membran sehingga cairan yang melewatinya akan terbebas mikroba (steril). Gas torch Gas torch atau pembakar api portabel berbahan bakar gas sangat berguna saat dilakukan pengambilan sampel diluar laboratorium.45 um.

Menurut Collins et al. tutup metal.1 ml) di atas permukaan agar. Untuk membuat agar miring. Cawan petri tersedia dalam berbagai macam ukuran yaitu berdiameter 5 cm. Sudut lekukan yang besar pada drigalsky spatulas (berujung segitiga tumpul) dapat mempengaruhi fungsinya secara tidak langsung. 110 ml (menampung 50-100 ml cairan) atau 560 ml (menampung 250-500 ml cairan). Banyak juga tersedia cawan petri disposable yang terbuat dari plastik. dipilih cawan yang bebas gelembung dan goresan sehingga distribusi agar dapat merata. Botol Botol pipih ataupun bulat di dalam mikrobiologi dapat digunakan sebagai wadah pengambilan sampel atau penyimpanan media pertumbuhan. sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup diisi media sebanyak 10 ml. tutup plastik atau aluminium foil. Semakin besar lekukannya maka akan sulit menjangkau atau meratakan air sampai di sudut tepian cawan petri. Tabung reaksi dipilih karena bentuknya yang vertikal (bandingkan dengan cawan petri) sehingga mempermudah penanganan dan menghemat tempat penyimpanan. Menurut Collins et al. perlu diperhatikan tentang kemiringan media yaitu luas permukaan yang kontak dengan udara tidak terlalu sempit atau tidak terlalu lebar dan hindari jarak media yang terlalu dekat dengan mulut tabung karena memperbesar resiko kontaminasi. Cawan berventilasi digunakan untuk pembiakan anaerob. selain itu alkohol sangat pekat mampu merusak kulit. Batang L dapat dibuat sendiri dengan memanasi batang gelas lurus yang kemudian ditekuk menjadi batang L (jarak tekukan 36 mm dari ujung bawah). Tabung reaksi Di dalam mikrobiologi. Spreader yang terbuat dari kaca (berdiameter 3-4 mm) memiliki beberapa bentuk seperti berbentuk L atau berujung segitiga. Umumnya digunakan alkohol (ethanol) 70% bukan 95% karena akan tidak mudah menguap tapi masih dalam konsentrasi yang mematikan bagi mikroorganisme. Alat untuk keperluan inokulasi dan kultivasi mikroorganisme Cawan Petri Cawan petri terbuat dari gelas dan berfungsi sebagai tempat pembiakan mikroorganisme.kontak dengan mikroorganisme pengontaminan. Botol sebaiknya harus berpenutup ulir (lebih dari satu putaran) dan terbuat dari borocilicateglass. untuk standardisasi gunakan cawan berukuran 15 mm x 100 mm atau 15 mm x 90 mm. 152 x 16 mm (menampung 5-10 ml). Tabung reaksi dapat diisi media padat maupun cair. Media padat yang dimasukkan ke tabung reaksi dapat diatur menjadi 2 bentuk menurut fungsinya. 8 cm. (2004) ukuran yang umum digunakan adalah 127 x 12. 178 x 25 mm (menampung 20 ml). yaitu media agar tegak (deep tube agar) dan agar miring (slants agar). . Alternatif lainnya botol dapat terbuat dari plastik tahan sterilisasi yang dapat menekan resiko pecah. kelebihannya tidak beresiko pecah dan aman untuk ditumpuk cukup tinggi. Sedangkan menurut AOAC (2000). 9 cm atau 15 cm. Tutup tabung reaksi dapat berupa kapas. Spreader (L rod) / hockey-stick-shape-glass-rod / glass spreader / Drigalsky spatulas Spreader berfungsi untuk meratakan dan menyebarkan air dari pengenceran (0. Tutup tabung yang paling baik dan aman digunakan adalah tutup plastik polypropylene berulir karena akan mencegah timbulnya aerosol. Media pertumbuhan dapat dituang ke cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup. Cawan berdiameter 15 cm dapat menampung media sebanyak 15-20 ml. (2004) terdapat dua jenis cawan petri yaitu cawan tidak berventilasi (yang umum dipakai) dan berventilasi. tabung reaksi digunakan sebagai tempat media pertumbuhan atau penampungan cairan lainnya seperti pelarut dalam pengenceran.5 mm (menampung 4 ml). Ukuran botol yang cocok digunakan adalah 60 ml (untuk menampung 50 ml cairan). Untuk manguji kebocoran botol saat ditutup sempurna maka botol berisi air dibiarkan terbalik beberapa hari. 152 x 19 mm (menampung 10-15 ml).

Media agar yang tipis dapat mempengaruhi teknik inokulasi streak.Glass beads Glass Beads adalah manik-manik atau bola gelas kecil (umumnya berdiameter 3 mm) yang digunakan untuk meratakan suspensi biakan dengan menyebarkan beberapa butir di atas permukaan agar dan digoyang merata. Media dispenser (glass repeating dispenser) Alat yang dapat dipasang pada mulut erlenmeyer ini digunakan untuk membagi / menuang media agar ke dalam cawan petri dengan volume yang sama setiap cawan. Bentuk ujung jarum dapat berbentuk lingkaran (loop) dan disebut ose atau inoculating loop / transfer loop. Selain itu glass beads dapat juga digunakan untuk melepaskan sel-sel mikroorganisme dari kepala swab saat glass beads digoncangkan pada botol sampel berisi batang swab. Glass beads digunakan pada teknik spread plate yang fungsinya sama dengan batang L atau Spreader. Pintu kaca yang terdapat pada beberapa model dibiarkan tertutup saat melihat biakan secara sekilas supaya tidak terjadi penurunan suhu. Inoculating loopcocok untuk melakukan streak di permukaan agar. Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu. dan yang berbentuk lurus disebut inoculating needle / transfer needle. Penuangan media padat bisa juga dilakukan tanpa media dispenser tetapi lebih beresiko meningkatkan variasi ketebalan agar setiap cawan. Sebaiknya alat-alat tersebut terbuat dari stainless steel. Sebelum dituang media ditampung dahulu pada wadah di media dispenser selanjutnya sejumlah volume media tersebut dituangkan ke cawan petri. Jarum inokulum biasanya terbuat dari kawat nichrome atau platinum sehingga dapat berpijar jika terkena panas. . Tabung durham berfungsi untuk menampung/menjebak gas yang terbentuk dari metabolisme pada bakteri yang diujikan. Cara penggunaannya yaitu cawan petri diletakkan diatas lempengan putar. Sterilisasi pemutar cawan petri umumnya dilakukan dengan alkohol. Jarum inokulum / ose (inoculating loops) Jarum inokulum berfungsi untuk memindahkan biakan untuk ditanam/ditumbuhkan ke media baru. kemudian sampel yang diberikan ke permukaan agar dapat disebarkan dengan menekan spreadersambil memutar alat ini. sedangkan inoculating needle digunakan untuk inokulasi secara tusukan pada agar tegak (stab inoculating). Pemutar cawan petri (Petri dish turntable) Alat ini dapat membantu saat penanaman mikroorganisme menggunakan teknik spread plate. Semakin kecil ukuran inkubator maka semakin rentan pula perubahan suhunya saat pintu inkubator dibuka. Terdapat juga jarum inokulum berbentuk L yang sangat bermanfaat saat membelah agar untuk preprasi Heinrich’s Slide Culture. Alat untuk penjagaan suhu dan penyimpan Inkubator (Incubator) Inkubator adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol (umumnya diatas suhu ambient). pisau. gunting. Tabung durham Tabung durham berbentuk mirip dengan tabung reaksi namun ukurannya lebih kecil dan tanpa tutup. Pinset. Penempatannya terbalik dalam tabung reaksi dan harus terendam sempurna dalam media (jangan sampai ada sisa udara) sebelum diinokulasikan bakteri uji. spatula dan scalpel Berbagai alat-alat ini sering sangat bermanfaat dalam laboratorium mikrobiologi terutama pada saat preparasi sampel atau penanaman. dan pengatur waktu. Perlu dipertimbangkan pula keseragaman suhu yang ada didalam dengan memperhatikan pola penempatan elemen pemanas atau terdapatnya kipas penyebar suhu.

Tipe lain inkubator berdasarkan kegunaannya secara khusus menurut Collins et al. Waterbath Fungsi waterbath cukup beragam dalam lab mikrobiologi. Suhu beku berfungsi untuk menyimpan bahan yang akan rusak jika dibiarkan dalam keadaan tidak beku. Sampel yang akan dianalisa jangan disimpan dalam freezer karena tidak semua mikroorganisme dapat bertahan dalam temperatur beku. -Automatic temperature change incubator. Refrigerator Refrigerator digunakan untuk menyimpan benda yang membutuhkan suhu dingin dalam penyimpanannya (2-80C). -CO2 incubator. inkubator yang mampu menyediakan keadaan kaya karbondioksida. dll. Selain elemen pemanas beberapa tipe juga dilengkapi dengan pencipta arus untuk menjaga suhu tetap seragam. Rak tabung reaksi Berguna untuk meletakkan atau menyimpan tabung reaksi sehingga mudah diorganisir. Rak tabung reaksi sebaiknya terbuat daripolypropylene sehingga dapat diautoklaf dan mengurangi resiko pecah. 2001)). menyimpan kultur. Tutup waterbath dapat mencegah evaporasi yang berlebihan ketika tercapai suhu tinggi. Lebih baik hindari rak tabung reaksi yang terbuat dari kayu karena dikhawatirkan dalam keadaan lembab kayu akan ditumbuhi jamur. menjaga media agar tetap cair sebelum dituang. menyimpan larutan. seperti reagen. Lebih baik menggunakan akuades untuk mencegah kerak yang ditimbulkan saat mempergunakan suhu panas. suatu ruangan yang diubah menjadi inkubator sesuai dengan keperluan dan syarat mikrobiologisnya. Sample container umumnya dirancang untuk menjaga suhu dingin maka dari itu terdapat sekat/isolator suhu. inkubator untuk suhu inkubasi dibawah suhu ambient. selain itu dapat juga memanfaatkan suatu benda untuk menutupi permukaan air yang panas misalnya bola-bola pingpong mampu mengurangi evaporasi dengan memperkecil luas permukaan air yang kontak dengan udara. menyimpan media pertumbuhan. Desikator . (2004) adalah -Shaker incubator. -Cooled incubator. Aplikasi dalam mikrobiologi diantaranya adalah untuk menyimpan sampel sementara. Freezer Freezer umumnya memiliki suhu 0 sampai -200C. -Portable incubator. salah satunya adalah untuk inkubasi dalam waktu singkat seperti perlakuan suhu panas (heat shock). thawing sampel beku (sampel beku dicairkan secara bertahap pada suhu 28°C selama 18 jam (Maturin dan Peeler. -Incubator room. inkubator yang dilengkapi dengan pengatur perubahan suhu otomatis sehingga tidak perlu memindahkan kultur ke inkubator lain saat membutuhkan perubahan suhu secara bertahap. Suhu dingin dibuat dengan memasukkan es ke dalamsample container. dll. reaksi aglutinasi. thawing sampel beku secara cepat (suhu 45°C tidak lebih dari 15 menit). fungsi utama refrigerator adalah menghambat atau memperlambat pertumbuhan mikroorganisme sehingga bahan memiliki daya simpan yang lebih lama. Sample container Setelah pengambilan sampel dilakukan maka diperlukan suatu wadah penyimpan botol sampel yang dapat menjaga jumlah dan jenis mikroorganisme saat transportasi sampel oleh karena itu sample container atau ice box diperlukan. inkubator jinjing atau mudah dibawa yang umumnya diaplikasikan untuk mikrobiologi lingkungan. enzim. inkubator yang dilengkapi dengan pengocok untuk aerasi biakan. faktor pertumbuhan atau larutan tertentu. Keunggulan waterbath dibandingkan dengan inkubator adalah waterbath lebih cepat mencapai temperatur yang diinginkan dan tidak cepat kehilangan panas karena mempergunakan air dalam distribusi suhu.

Jika peletakan paper disc pada media dapat diletakkan satru persatu menggunakan pipet maka alat ini mempermudah pekerjaan tersebut dengan menyebarkan beberapa paper disc dalam sekali tekan pada satu cawan petri.1 mm maka jika ingin melihat morfologi sel mikroorganisme diperlukan bantuan mikroskop. Mikroskop memiliki banyak jenis dan fungsinya. Mikroskop cahaya umumnya memiliki perbesaran dari 40x sampai 1000x sehingga sesuai untuk melihat morfologi sel mikroorganisme. dapat dilihat pada Morfologi Mikroorganisme) Object glass / glass slide dan Cover glass Ulasan spesimen padat atau cair yang akan dilihat dengan mikroskop ditempatkan ke permukaan object glass kemudian dilapisi (ditutup) dengan cover glass supaya melindungi lensa mikroskop dari spesimen. Colony counter Alat ini berguna untuk mempermudah perhitungan koloni yang tumbuh setelah diinkubasi di dalam cawan karena adanya kaca pembesar. tetapi jenis mikroskop yang paling umum digunakan adalah mikroskop cahaya. Perbesaran maksimal yang mampu dilihat adalah 40x. Pada umumnya mata tidak mampu membedakan benda dengan diameter lebih kecil dari 0.1. Alat-alat lain Disc dispenser Disc dispenser adalah alat untuk meletakkan kertas cakram (paper disc) berisi antibiotik ke permukaan media agar pada metodedisc diffusion. mikroskop stereo biasanya digunakan untuk menghitung atau mengamati secara detail bentuk koloni bakteri atau jamur yang tumbuh pada cawan petri. (informasi lebih lengkap mengenai cara penggunaan mikroskop. Cover glass umumnya memiliki luas 16 mm2 dengan ketebalan Grade No. UV Cabinet Pada suatu uji mikrobiologi tertentu yang menghasilkan suatu zat yang hanya berpendar jika dikenai sinar UV pada koloni atau disekitar koloni suatu bakteri tidak dapat dilihat dengan mata telanjang oleh karena itu dibutuhkan UV cabinet untuk melihat perpendaran tersebut. . Uap air yang berada dalam kontainer desikator akan diserap olehdesiccant yang akan berubah warnanya (dari biru menjadi pink) jika telah jenuh dengan air. Selain itu terdapat colony counter berbentuk seperti pulpen dengan ujung pulpen dilengkapi dengan sensor sehingga penekanan terhadap perhitungan koloni selain menandai koloni dengan tinta sekaligus juga menghitung otomatis setiap penekanan pada cawan. Di Laboratorium Mikrobiologi. Mikroskop stereo Mikroskop ini berfungsi untuk melihat objek yang membutuhkan perbesaran tidak terlalu besar. Cover glass yang terbuat dari plastik juga tersedia di pasaran. Jumlah koloni pada cawan Petri dapat ditandai dan dihitung otomatis yang dapat di-reset. jenis-jenis mikroskop dan aplikasinya. Object glass umumnya dijual dalam box berisi 100 slides dan sebaiknya sekali pakai langsung dibuang tidak dicuci lagi. Selain itu alat tersebut dilengkapi dengan skala/ kuadran dan latar belakang bercahaya yang sangat berguna untuk pengamatan pertumbuhan koloni sangat banyak. Alat observasi dan penghitung Mikroskop cahaya Mikroskop adalah alat berlensa yang digunakan untuk melihat objek kecil yang sukar dibedakan jika dilihat dengan mata telanjang.Di dalam lab mikrobiologi desikator biasanya digunakan untuk menjaga suatu bahan tetap kering seperti menyimpan media pertumbuhan yang sangat higroskopis atau reagen tertentu.

Anaerobic jars dapat terbuat dari metal atau polikarbonat transparan dan pada beberapa tipe dilengkapi dengan pengukur tekanan. (informasi lebih lengkap mengenai teknik pembiakan bakteri anaerob dapat dilihat pada bagian Isolasi Mikroorganisme). PTFE (polytetrafluoroethylene / teflon). Centrifuge Centrifuge dalam mikrobiologi digunakan untuk mengendapkan atau memekatkan sel mikroorganisme sehingga dapat dipisahkan antara medium (supernatan) dan selnya yang mengendap (natan). Pengukuran kekeruhan (optical density) digunakan untuk menggambarkan jumlah bakteri pada suatu kultur cair. Sebaiknya dipilih tabung centrifuge yang memiliki tutup berulir. . Ambil sampel pada rongga mulut dengan cutton bud . polycarbonate. 2004). Anaerobic jars Anaerobic jars adalah suatu wadah berpenutup kedap udara yang digunakan untuk kultivasi mikroorganisme anaerob. untuk keperluan mikrobiologis seperti fungsi diatas. dapat digunakan centrifuge dengan kecepatan maksimum 4000 rpm yang dapat menampung 15-50 ml kultur. (2004). Aplikasi dalam mikrobiologi diantaranya untuk menghitung optical density pada saat men grafik pertumbuhan suatu bakteri. Prinsip yang digunakan untuk mengawetkan sel adalah dengan membekukan dan mengeringkan dengan penguapan dibawah keadaan vakum yang dinamakan liofilisasi (lyophilization). (informasi lebih lengkap mengenai spektrofotometer dapat dilihat pada Bab menghitung mikroorganisme) Catatan: Beriikut adalah jenis-jenis plastik yang dapat disterilisasi menggunakan autoklaf (autoclavable): polypropylene. nylon. Centrifuge modern umumnya dapat mencapai daya sentrifugasi 3000g yang merupakan kekuatan yang cukup untuk mendepositkan bekteri dalam waktu yang tidak terlalu lama. PROSEDUR LAB Praktikum 1 PENGAMBILAN SAMPEL RONGGA MULUT 1. Sterilkan semua alat 2. Sedangkan jenis-jenis plastik yang tidak tahan disterilisasi dengan autoklaf adalah : polyethylene.Freeze-drying Alat ini dipakai untuk mempreservasi / mengawetkan kultur mikroorganisme. Centrifuge dengan swing-out head (tabung centrifuge yang dapat berayun) lebih aman dibandingkan dengan angle head (dudukan tabung miring) karena menekan terbentuknya aerosol jika menggunakan tabung yang tidak bertutup. TPX (methylpenthene polymere). Pemeraman mikroorganisme anaerob dilakukan dengan meletakkan cawan petri di dalam anaerobic jar dan ditambah dengan katalisator pembentuk keadaan anaerobik. Cawan dalam alat ini diletakkan dalam keadaan tidak dibalik karena terkadang tekanan yang turun karena keadaan anaerob dapat menumpahkan media agar ke tutup cawan. Spektrofotometer Kekeruhan suatu kultur mikroorganisme dapat diukur menggunakan alat ini. polystyrene dan rigid polyvinylchloride (Collins et al. Spektrofotometer dapat membaca kekeruhan kultur dengan melewatkan suatu berkas cahaya kemudian persentase cahaya yang melewatinya dihitung. polyalomer. Semakin keruh berarti cahaya yang diterima semakin sedikit.. Menurut Collins et al.

Tuliskan karakteristik koloni yang tumbuh (bentuk. ukuran. Masukkan 9 ml aquades dan 1 ml sampel kedalam tabung I dan homogenkan 3. 7. Buka bungkus cawan petri yang telah di inkubasi 2. III. Siapkan 5 buah tabung reaksi steril 2. Dari tabung I. Tuliskan jumlah koloni yang terbentuk 6. V diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam cawan petri 6. Gambarkan koloni yang terbentuk (bentuk. Buka bungkus cawan petri 2. dll) 4. Untuk menghasilkan isolat murni.3. Inkubasi dalam inkubator suhu 37oC selama 1 x 24 jam Praktikum 4 REPLIKASI 1. masukkan ke tabung II yang berisi 9ml aquades 4. Inkubasi dalam inkubator dengan suhu 37oC selama 1 x 24 jam Praktikum 2 PENGENCERAN 1. Tunggu setelah 10-15 menit. Buka cawan petri yang telah di inkubasi 2. dll) 5. homogenkan. warna. Ambil 1 ose koloni . tekstur. ukuran. Masukkan dalam botol vial yang berisi medium transport 4. Demikian seterusnya sampai tabung V 5. Tuang medium BHIA steril sebanyak 10-15 ml ke dalam tiap cawan petri. medium BHIA akan memadat Praktikum 3 MELIHAT DAN MENGHITUNG KOLONI 1. Amati koloni yang tumbuh dengan menggunakan lup 3. Inkubasi dalam inkubator suhu 37oC selama 1 x 24 jam Praktikum 5 PENGAMATAN ISOLAT MURNI 1. ambil 1 ose koloni yang tumbuh lalu tana. Kemudian ambil 1 ml dari tabung I. Ambil 1 ose dari koloni yang terbentuk di kuadran ke 4 3. Goreskan pada medium BHIA pada cawan petri 4. warna. pada medium BHIA pada cawan petri steril dengan cara menggores secara kuadratum 7. tekstur. Sumbat dengan kapas dan aluminium foil 5.

Inkubasi dalam inkubator suhu 37oC selama 1 x 24 jam Praktikum 6 UJI DAYA HAMBAT 1 1. Tumbuhkan dalam BHIA miring dalam tabung reaksi steril dengan cara menggores zig-zag 4. (2004:4) kultur media adalah . Sedangkan menurut Andrews et al. Ambil airnya ± 0. Tutup dengan kapas 5. celupkan paper disk ke dalam tabung reaksi yang berisi antimikroba tadi. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi yang disediakan dari media berupa molekul-molekul yang selanjutnya dirakit untuk menyusun komponen sel dan memperbanyak diri sehingga sel-sel tersebut dapat dimanfaatkan. Tambahkan aquadest sampai 1/3 tabung dan homogenkan 3. 3. Masukkan bahan antimikroba (sesuai kelompok masing-masing.2 ml dan masukkan kedalam cawan petri. Gambarkan secara sistematis hasil pengamatan PENGENALAN MEDIUM Media pertumbuhan : a. homogenkan 4. listerine. Masukkan medium MHA ke cawan petri. dll) kedalam tabung reaksi.3. Ambil tabung reaksi pada praktikum kemarin 2. dan letakkan paper disk tadi pada cawan petri 4. Inkubasi dalam inkubator suhu 37oC selama 1 x 24 jam Praktikum 8 UJI DAYA HAMBAT 3 1. tambahkan aquadest dan homogenkan untuk bahan yang bukan liquid. contohnya : pepsodent. tunggu sampai memadat 5. Dengan menggunakan pinset. 2. Inkubasi dalam inkubator suhu 37oC selama 1 x 24 jam Praktikum 7 UJI DAYA HAMBAT 2 1. Dengan adanya media pertumbuhan dapat dilakukan isolasi mikroorganisme menjadi kultur tunggal dan juga memanipulasi mikroorganisme yang didapatkan untuk kepentingan tertentu. Buka bungkus cawan petri yang telah di inkubasi pada praktikum kemarin. zona halo dengan menggunakan kalipper 3. lalu di angkat. Pengertian dan fungsi media Medium (jamak : media) pertumbuhan adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Buka cawan petri dan amati zona halo yang terbentuk di seUkur keliling paper disk 2.

sodium phosphate dll. meat extract. Jika suatu jenis mikroorganisme ingin ditumbuhkan dalam cawan petri atau tabung maka harus dipenuhi kebutuhan unsur tersebut dari molekul organik yang terdapat pada media. Bahan-bahan media pertumbuhan 1. Bahan organik inilah yang menjadi sumber karbon utama untuk mikroorganisme heterotrof yang umum dikultivasi. protein atau senyawa bernitrogen lain yang terkandung pada peptone. lemak. P. maka istilah “modified” diletakkan setelah nama media. c. Media yang tidak memiliki nama formal umumnya dinamai berdasarkan organisme yang ditargetkan. misalnya TSA adalah singkatan dari Trypticase™ Soy Agar. Banyak media juga dikenal sebagai akronim. Na. Jika seseorang memodifikasi komposisi media yang telah ada (memiliki nama asli). glukosa. b. N. kofaktor atau ATP yang dapat dijumpai pada bahan yeast extract atau pepton. setengah padat atau padat yang mengandung bahan alami dan atau buatan untuk mendukung perkembangbiakan mikroorganisme. 2010:1). Sumber karbon Molekul organik umumnya mengandung karbon sebagai tulang punggungnya seperti karbohidrat. Berikut adalah sumber nutrisi media. O. Ca. S. 2002:98). Misalnya TSA. dan Tryptic Soy Agar produced diproduksi Difco (BD Diagnostic Systems) yang semuanya memiliki komposisi yang sama. (Prescott & Harley.substansi dengan kadar tertentu dalam bentuk cair.Sumber nutrisi atau zat makanan Analisa dari komposisi kandungan unsur sel mikroorganisme menunjukkan lebih dari 95% dari berat kering terdiri dari unsur utama (major elements) yaitu unsur C. misalnya Bacillus stearothermophilus Broth (Atlas. H. Komposisi setiap bahan pada media tertentu terhadap mikroorganisme target menggambarkan kondisi nutrisi pada habitat aslinya karena pada keadaan itulah mikroorganisme tersebut optimal tumbuh. atau tryptose. modified bukan Modified TSA. Mg. Sumber fosfat Sumber fosfat organik seperti beberapa protein. . dll. Namun hampir semua mikroorganisme dapat memanfaatkan fosfat anorganik yang ditambahkan langsung pada media sepertipotassium phosphate. K. Sejumlah mikroba juga dapat menggunakan sumber N anorganik seperti urea. sebagian besar oksigen didapatkan langsung dari udara sedangkan mikroorganisme yang dikultur pada media cair sumber oksigen berasal dari oksigen yang terlarut air. Oleh karena itu aerasi pada kultur cair dapat meningkatkan pasokan oksigen kepada mikroorganisme. protein yang terdapat pada pepton. Tryptone Soy Agar diproduksi oleh Oxoid Unipath. Misalnya Trypticase™ Soy Agar diproduksi oleh BBL (BD Diagnostic Systems). Terdapat juga media dengan komposisi yang sama tetapi memiliki nama yang berbeda karena diproduksi oleh perusahaan yang berbeda. Sumber nitrogen Sumber nitrogen mencakup asam amino. Nama-nama media Media pertumbuhan memiliki banyak nama yang umumnya mengacu kepada nama asli sesuai literatur. dan Fe. Sumber oksigen Untuk mikroorganisme heterotrof yang dikulturkan pada cawan.

Cu dll. Mo. Co. Pencairan dan pemadatan berkali-kali atau sterilisasi yang terlalu lama dapat menurunkan kekuatan agar. Umumnya agar terbuat dari ganggang merah. vitamin. tellurite. mineral dantrace metals. terutama pada pH yang asam. Bahan antimikroba juga dapat digunakan untuk menekan pertumbuhan bakteri tertentu. Berikut adalah beberapa bahan-bahan yang umum dipakai dalam pembuatan media pertumbuhan menurut Atlas (2010:1-8). Ekstrak jaringan hewan mengandung lebih banyak bahan protein larut air dan glikogen sedangkan ekstrak tumbuhan lebih banyak terdapat karbohidrat di dalamnya. 2002:96). sodium lauryl sulfate. azide. unsur mikronutrien (Zn. Agar bukan sebagai sumber nutrisi bagi mikroorganisme namun fungsinya lebih bersifat mekanis yaitu memadatkan media cair sehingga sel tidak larut dalam cairan. selenite. Casein banyak digunakan sebagai substrat pembentuk peptone. Bile salts (garam empedu). Peptone Peptone adalah hasil hidrolisis protein yang dibentuk dari proses enzimatik atau digesti asam. asam lemak dan nutrisi dari darah. Crystal Violet. dan D-glucuronic acid. sodium chloride (konsentrasi tinggi). phenylethanol. Mn.) dapat diperoleh dari akuades atau peralatan gelas. tetapi beberapa bahan lain seperti soybean meal juga sering digunakan. dan Methylene Blue) umumnya dipakai sebagai bahan selektif. Komponen selektif dipakai pada media selektif yang berguna untuk mengisolasi bakteri spesifik dari populasi campuran.6-anhydro-L-galactose. Faktor tumbuh Banyak mikroorganisme yang membutuhkan faktor tumbuh spesifik yang harus ada dalam media pertumbuhannya. peptida dengan berat molekul rendah.Sumber unsur sekelumit (mikronutrient/trace element) Pada lingkup media pada cawan petri. karbohidrat. Agar Agar adalah bahan yang paling umum digunakan sebagai gelling agent pada media yang terbuat dari ekstrak alga. Beberapa diantaranya adalah vitamin. diantaranya adalah ampicillin. tetra-hionate. Fungsi mikronutrien ini umumnya menjadi bagian dari enzim atau kofaktor untuk menjadi katalis reaksi atau menjaga struktur protein. Oleh karena itu pembuktian kebutuhan unsur mikronutrien sangat sulit dilakukan dalam skala laboratorium karena setiap jenis mikroorganisme membutuhkannya dalam jumlah yang sangat sedikit (Prescott & Harley. 2. 3. dan beberapa pewarna (eosin. asam amino. . Komponen selektif Suatu bahan yang berfungsi untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme non target disebut komponen selektif. Meat / plant extract Ekstrak dagung dan tumbuhan mengandung asam amino. Ni. Struktur agar terdiri dari D-galactose. Agar cocok menjadi agen pemadat karena setelah dilarutkan pada suhu mendidih dapat didinginkan sampai 40-42°C sebelum memadat dan tidak akan mencair lagi sebelum suhu mencapai 80-90°C.Komposisi media pertumbuhan Formulasi media pertumbuhan prinsipnya hampir sama dengan resep masakan di dapur yang setiap bahan bakunya diatur dengan takaran tertentu.

Medium cair akan memberi kesempatan bakteri untuk menyebar dan tercampur dengan seluruh nutrisi sehingga lebih cocok untuk mengoptimumkan pertumbuhan mikroba. nalidixic acid. tidak padat dan tidak begitu cair. dan vancomycin. pH buffer / buffer salts pH buffer digunakan untuk menjaga pH media selama digunakan untuk tumbuh karena beberapa mikroorganisme akan tumbuh optimal pada kisaran pH yang spesifik. cycloheximide. Komponen diferensial Berbeda dengan komponen selektif. kondisi anaerob atau sedikit oksigen meningkatkan metabolisme nitrat tetapi bakteri ini juga diharuskan tumbuh merata diseluruh media.chloramphenicol. Semisolid juga bertujuan untuk mencegah/menekan difusi oksigen.Berdasarkan kandungan bahan Media sintetik / media terdefinisi (synthetic media / defined media) . 2. LB (Lactose Broth).3-0. colistin. Media semi solid dibuat dengan tujuan supaya pertumbuhan mikroba dapat menyebar ke seluruh media tetapi tidak mengalami percampuran sempurna jika tergoyang. d. gentamicin. Semisolid media Medium setengah padat yaitu media yang mengandung agar 0. sulfadiazine. Bahan lainnya berupa pewarna kromogenik yang mampu berubah warna jika suatu reaksi enzim spesifik terjadi. Macam-macam media pertumbuhan 1. Dapat juga untuk mengetahui karakter suatu mikroba berdasarkan kebutuhan oksigen. Media padat juga menampakkan difusi hasil metabolit bakteri sehingga memudahkan dalam pengujian suatu hasil metabolit.Berdasarkan sifat fisik Solid media Medium padat yaitu media yang mengandung agar 15g/L sehingga setelah dingin media menjadi padat. Misalnya bakteri yang tumbuh pada media NfB (Nitrogen free BromthymolBlue) semisolid akan membentuk cincin hijau kebiruan di bawah permukaan media. Media padat berguna untuk menjaga sel tidak berpindah tempat sehingga akan mudah dihitung dan dipisahkan jenisnya ketika tumbuh menjadi koloni.4% sehingga menjadi sedikit kenyal. Liquid media Medium cair yaitu media yang tidak mengandung agar. kanamycin. contohnya adalah NB (Nutrient Broth). komponen diferensial ini tidak menekan pertumbuhan mikroorganisme tertentu namun sebagai bahan untuk memudahkan pembedaan mikroorganisme target dari populasi campurannya (deteksi visual). misalnya pada media Nitrate Broth. jika media ini cair maka cincin ini dapat dengan mudah hancur. Bahan diferensial seperti pH indikator akan membuat koloni target berbeda warna karena memproduksi asam.

Media ini tidak digunakan untuk kebutuhan sehari-hari namun .0 mL Media kompleks (complex media) Media kompleks adalah media yang sebagian komposisinya tidak diketahui dengan pasti. Media untuk peremajaan kultur (maintenance of cultures) Media peremajaan kultur seharusnya tidak begitu kaya nutrisi sehingga mempercepat pertumbuhan.Berdasarkan tujuan Berikut adalah pembagian media berdasarkan tujuan menurut Barrow & Feltham (1993:8-9) : Media isolasi Media isolasi adalah media umum yang digunakan untuk mengisolasi suatu mikroba menjadi kultur murni. 3.0g -NaNO3 1. meat extract dan yeast extract. Contoh media kompleks adalah nutrient broth.075g K -H2PO4 0. aureus.04g -CaCl2·2H2O 0. Banyak jenis mikroorganisme kemoorganotrof heterotrof dapat tumbuh pada media sintetik dengan glukosa sebagai sumber karbon dan ammonium salt sebagai sumber nitrogen (Prescott et al. Media pengkaya (enrichment media) Media pengkaya termasuk media selektif namun lebih berfungsi untuk memperbanyak mikroba target sehingga saat dilakukan pengkulturan. Umumnya media selektif menseleksi mikroba target berdasarkan kelompok. Media kompleks seringkali dibutuhkan karena kebutuhan nutrisi dari beberapa bakteri tidak diketahui sehingga media sintetik tidak dapat dibuat untuk keperluan ini. mikroba yang tidak diinginkan tidak dalam jumlah besar.0 mg -EDTA disodium salt 1.0 mg -Trace metal mix A5 1.Media sintetik adalah media yang seluruh komposisinya diketahui. Baird parker untuk isolasi S.02g -Citric acid 6.5g -MgSO4·7H2O 0. tryptic soy broth dan MacConkey agar (Prescott et al. Seringkali satu jenis media kompleks dapat cukup kaya untuk memenuhi kebutuhan banyak jenis bakteri. Media untuk penentuan kebutuhan nutrisi / kemampuan penggunaan substrat. Media sintetik digunakan dalam penelitian mengenai uji metabolisme suatu mikroorganisme. misalnya Blood agar atau Chocolate agar.036g -Na2CO3 0.0 mg -Ferric ammonium citrate 6. misalnya EMB agar untuk menseleksi E. Biasanya mengandung semua kebutuhan untuk tumbuh. misalnya Nutrient agar. 2002:105). Media pengkaya harus dalam bentuk cair dan digunakan di awal tahap analisa. Media ini berfungsi untuk mendeteksi dan mengidentifikasi kebutuhan suatu substrat dari bakteri (yang tidak diketahui kebutuhan nutrisinya) dengan menghilangkan atau mensubtitusi komponen suatu substrat. genus atau spesiesnya. coli. Media selektif (selective or inhibitory media) Berfungsi untuk menumbuhkan mikroba target / yang diinginkan dan menekan pertumbuhan mikroba yang tidak diinginkan (background flora). 2002:105). Berikut contoh komposisi media sintetik : BG–11 Medium for Cyanobacteria (g/liter) -Agar 10. media ini dapat mengandung bahan yang tidak diketahui pasti komposisinya seperti peptone.

Media dasar tanpa nutrisi (non-nutrient basal media) Berfungsi untuk berbagai keperluan pendukung pertumbuhan mikroba seperti pelapisan Chitin agar menggunakan media chitin yang dilarutkan pada Salt agar. f. Sedangkan media untuk uji antibiotik tidak begitu membutuhkan kepastian kemurnian media karena nutrisi asing tidak berpengaruh kepada hasil uji. h.e. Hal-hal penting dalam pembuatan media pertumbuhan Bahan baku air Air yang digunakan sebagai bahan baku pembuatan media dapat memakai air destilasi. g. lebih untuk keperluan penelitian. Media untuk karakterisasi bakteri Umumnya mengandung nutrisi yang cukup untuk pertumbuhan dan ditambah substrat yang akan diuji penggunaannya. Penimbangan tidak perlu dilakukan secara aseptis namun tetap dalam keadaan bersih. Media skrining (screening media) Media ini diperuntukkan untuk menggambarkan sekilas reaksi yang diperoleh dari beberapa substrat seperti produksi H2S pada TSI oleh enterobacteria. Ilustrasi pembuatan media Referensi e. Penimbangan secara aseptis sebaiknya dilakukan pada medium yang tidak diperbolehkan untuk diautoklaf. Media uji mikrobiologi untuk vitamin. Penimbangan media pertumbuhan Penimbangan sebaiknya dilakukan pada timbangan analitik dengan ketelitian 0. Sebagai contoh sederhananya adalah Koser Citrate untuk mendeteksi penggunaan citrate sebagai sumber karbon tunggal. Konsentrasi agar dan proses pelarutan agar . Konduktivitas air yang digunakan sebaiknya tidak lebih dari 25 µS/cm pada 25 °C dan mengandung kontaminasi mikroba tidak lebih dari 1000 CFU/ml dan akan lebih baik jika menggunakan air berkonsentrasi mikroba dibawah 100 CFU/ml (ISO/TS 11133-1. Penggunaan cawan kotor dimungkinkan akan menyediakan nutrisi sehingga hasil uji menjadi rancu. Reagen atau indikator tertentu dapat juga ditambahkan untuk mengetahui hasil reaksi. asam amino dan antibiotik Media ini memerlukan pengontrolan ketat pada saat preparasinya untuk memastikan kemurniannya.1 g dengan kapasitas ≥2000 g. Untuk mencegah tercampurnya media dalam wadahnya dengan bahan lain maka sebaiknya menggunakan spatula yang berlainan. 2009:7). Hal-hal penting dalam pembuatan media Bahan baku air Penimbangan media pertumbuhan Konsentrasi agar dan proses pelarutan agar Ketebalan agar dan luas cawan yang digunakan Pengaturan pH Proses sterilisasi Pencairan kembali media agar Penuangan media ke dalam cawan atau tabung Pemyimpanan media jadi Perlakuan untuk media kultivasi anaerob Penanganan commercial dehydrated media.

-tidak melakukan sterilisasi media dengan pH >7.=".5 (untuk mengatasinya. -sterilisasi garam mineral terpisah dengan agar.0 g/L umumnya digunakan untuk membuat media padat. Proses pelarutan agar dapat menggunakan hot plate dan magnetic stirrer. -sterilisasi fosfat terpisah dengan pepton atau komponen garam mineral. -tidak melakukan sterilisasi larutan agar dengan pH <6 . Konsentrasi agar yang lebih dari ketentuan mengakibatkan proses pemadatan lebih cepat pada saat penuangan. 2009:8). Namun sebaliknya media padat yang terlalu tebal tentu sangat memboroskan.5 g/l. Pengaturan pH pH sebaiknya diukur sebelum sterilisasi pada suhu 25°C sesuai ketentuan pH menggunakan pH meter. Sebaiknya pada saat pelarutan hindari panas berlebihan. Indikasi larutnya agar umumnya ditunjukkan dengan beningnya media atau mencairnya serbuk agar yang tertempel pada dinding erlenmeyer. Setelah disterilisasi pH sebaiknya dicek kembali dengan sedikit menuang sampel media steril (ISO/TS 11133-1. 1993:13). Jika hal ini tidak dilakukan maka tekanan dalam wadah lebih rendah dari chamber autoklaf dan menyebabkan sterilisasi menjadi tidak efisien. Atlas (2010:8) menyarankan bahwa media yang mengandung karbohidrat disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 116–118°C untuk mencegah dekomposisi karbohidrat dan pembentukan formasi senyawa toksik yang menghambat mikroba. 2010:1). Sehingga setelah proses sterilisasi media akan memiliki pH sesuai persyaratan (± 0. Sedangkan untuk media yang tidak tahan . pencoklatan dan pecahnya substrat pada sterilisasi menggunakan autoklaf dapat dilakukan beberapa cara pencegahan yaitu : -sterilisasi glukosa terpisah dengan pepton (asam amino) atau senyawa fosfat. Menurut Barker (1998:156) Jika media yang disterilisasi dengan autoklaf terdapat dalam jumlah 1 L pada erlenmeyer 2 L maka sebaiknya waktu sterilisasi diperpanjang menjadi 30 menit. Namun ketebalan media lebih mempengaruhi faktor teknis dalam penanaman seperti ketahanan agar saat menerima tekanan spreader atau saat di goresloop dan kehilangan air karena menguap. 121oC selama 15 menit) harus dibuka sedikit tutupnya (jika menggunakan wadah tutup berulir) atau harus dilubangi plastiknya supaya tekanan yang dihasilkan autoklaf dapat masuk ke dalam media." span="span"> Dampak pemanasan terhadap komposisi media mulai sejak suhu 60 yang berdampak pada dekomposisi growth factor. Konsentrasi yang lebih rendah (7. Jika pengaturan pH diperlukan maka dapat diatur dengan larutan steril sodium hydroxide (NaOH) 40 g/l atau hydrochloric acid (HCl) 36.2 pH unit). Ketebalan agar dan luas cawan yang digunakan Media agar yang sangat tipis ketebalannya masih memungkinkan mikroorganisme untuk tumbuh (yang mungkin akan berpengaruh kepada ukuran koloni) dan nutrisi media yang tipis masih cukup memenuhi kebutuhan.0 g/L) dipakai untuk membuat soft agars atau media semisolid. (untuk informasi lebih lengkap mengenai autoklaf dapat dilihat pada Bab Sterilisasi) Menurut Barker (1998:157) untuk mencegah presipitasi. Overheating mengakibatkan sebagian media menjadi buih dan akan mendesak keluar dari mulut wadah dan juga membuat kerak pada dasarnya. Agar larut pada suhu 84°C dan memadat pada 38°C (Atlas. Proses sterilisasi Media yang telah siap disterilisasi (15 Psi/1 atm. sterilisasi pada pH netral kemudian diatur pH menjadi basa dengan larutan basa steril). Volume yang cukup untuk cawan petri diameter 9 cm adalah antara 12-15 ml media. karamelisasi gula (reaksi Maillard antara gula dan asam amino) dan perubahan pH (Barrow & Feltham.Konsentrasi agar 15.5–10.

Penuangan media sebaiknya tidak dilakukan dalam keadaan panas >50oC supaya tidak terjadi kondensasi berlebihan pada tutup cawan. Terkadang demi waktu dan efisiensi. Bahan yang heat-labile seperti larutan antibiotik. ISO/TS 11133-1 (2009) menyatakan bahwa pengeringan media cawan yang telah dituang dapat dilakukan dengan membuka tutup cawan pada LAF dan bagian permukaan media menghadap ke bawah supaya kondensasi air yang berada pada cawan petri hilang. Cara lainnya adalah menggunakan media dispenser (glass repeating dispenser) seperti yang telah dijelaskan pada Bab Pengenalan Alat.2 ml sehingga setelah disterilisasi volume akhir masuk dalam kisaran spesifikasi.) Pencairan kembali media agar Pencairan kembali media agar steril dapat dilakukan pada waterbath suhu 47-50 °C dengan waktu minimal supayauntuk menjaga kualitas media. Untuk mencegah kondensasi maka media siap tuang didinginkan (dijaga) pada suhu 50oC selama 30 menit kemudian dituang. Pembakaran mulut tabung/Erlenmeyer sebaiknya dilakukan untuk mencegah kontaminasi. (2004:9).2 ml maka sebaiknya pipet diatur pada 9. Misalnya peptone diluents yang menurut metode tertentu memiliki spesifikasi volume 9±0. 2009:9). Cara ini dapat dilakukan dengan cara memanaskan pada Arnold steam sterilizer dengan suhu 75°–80°C selama 2 jam dan dilakukan pada tiga hari yang berurutan (jeda hari ditujukan untuk memberikan kesempatan mikroba kontaminan untuk berkecambah).1-0. tetapi adakalanya dibutuhkan persiapan yang membuat media pertumbuhan yang sudah jadi harus disimpan. Pengeringan sebaiknya dilakukan jangan terlalu lama. Pemyimpanan media jadi Media jadi pada cawan yang telah siap pakai sebaiknya disimpan dengan posisi terbalik dan ditumpuk tidak lebih dari tiga cawan atau dapat menggunakan petri plate storage holder. 2002:78). (untuk informasi lebih lengkap mengenai teknik sterilisasi dapat dilihat pada Bab Sterilisasi. overdrying mengakibatkan media menjadi retak-retak. Kemudian media steril dalam tabung (sebelum agar memadat) disebarkan ke setiap cawan (Prescott & Harley. banyak praktisi yang langsung menuang media padat dari botol atau erlenmeyer langsung ke dalam cawan yang tentu saja membutuhkan keahlian dan ketepatan intuisi dalam membaginya. Penuangan media ke dalam cawan atau tabung Keseragaman volume sangat dibutuhkan dalam pendistribisan media untuk memenuhi spesifikasi metode yang dipakai.3 ml sehingga diperlukan penakaran lebih dari yang dipersyaratkan. Untuk media cair yang dituang ke tabung-tabung maka sebaiknya volume yang dipindahkan lebih besar dari pada volume yang dipersyaratkan. angkat segera setelah semuanya mencair dan digunakan tidak melebihi waktu simpan 4 jam (ISO/TS 11133-1. Menurut Andrews et al.terhadap sterilisasi autoklaf (seperti media yang mengandung protein telur) sebaiknya disterilisasi menggunakan teknik inspisasi (inspissation). vitamin atau karbohidrat disterilisasi menggunakan teknik membran filter yang kemudian ditambahkan ke dalam media setelah didinginkan sampai 50°C. Media pertumbuhan sebaiknya digunakan fresh setelah dibuat. Menurut ISO/TS 11133-1 (2009) media jadi disimpan pada suhu 5±3 °C dan disarankan untuk disimpan tidak melebihi 2-4 minggu untuk . Keseragaman penuangan volume yang sama pada cawan petri dapat diperoleh dengan cara memasukkan media padat yang telah larut ke dalam tabung-tabung sebelum disterilisasi sesuai volume yang dibutuhkan. atau keringkan pada oven dengan suhu 25-59oC. proses sterilisasi dapat mengurangi volume media sebesar 0. Waktu penyimpanan media jadi sangat beragam. Sebaiknya tidak overheating.

2 Light rose.2003:388).2 Light amber.6±0. clear Screw (Lauryl Tryptose) to slightly capped opalescent tube/bottles MRS Agar 14 days 4±2°C 6.2 Green clear Screw (Brilliant Green capped Lactose Bile) tube/bottles BS Agar 1-3 days 4°C 7.2 Light yellow Sealed (Trypticase Soya petridish Agar) TT Broth 7 days 4±2°C 7. Storage Temperature pH Storage Name Form Color time storage storage Condition BGLB Broth 1 month 4±2°C 7. clear Sealed (De Mann petridish Rogosa Sharpe) RV Broth 6 months 4±2°C 5.3±0.2±0. Terdapat juga bahan dapat berubah menjadi beracun ketika terpapar cahaya seperti beberapa pewarna (dye).3±0.media cawan dan 3-6 bulan untuk media cair.2 Light rose. Sealed (Xylose Lysine transparent petridish Tergitol 4) XLD Agar 5 days 4±2°C 7. Pada keadaan terbungkus .4±0.4±0. Media jadi sebaiknya disimpan dalam suatu kemasan yang berguna untuk meminimalisasi kehilangan air dalam media agar. Dengan alasan inilah terdapat petunjuk penyimpanan media pada keadaan gelap (Corry et al.2±0.4±0.2 Green-blue. Sealed (Xylose Lysine transparent petridish Deoxicholate) (Corry et al.8±0.. melindungi dari cahaya dan juga melindungi dari kontaminasi. DG18 Agar 7 days 4±2°C 5. Sealed (Hektorn Enteric) transparent petridish LT / LST Broth 1 month 4±2°C 6. Screw (Rappaport transparent capped Vassiliadis) tube/bottles TSA Agar 30 days 4±2°C 7. Secara umum plastik tahan panas cocok untuk membungkus media cawan (tidak peka cahaya) yang telah jadi.2 Light amber.4±0.2 Amber slightly Sealed (Dichloran opalescent petridish Glycerol 18) HE Agar 3 weeks 4±2°C 7..2 Blue-green.2 Pale green/ straw Sealed (Bismuth (5 days opaque with petridish Sulphite) max) flocculent precipitate which must be uniformly dispersed. Media yang ditambah suplemen sebaiknya dipakai pada hari yang sama saat pembuatan.2 Pale milky opaque Screw (Terta Thionate) which on standing capped gives a pale liquid tube/bottles over a heavy precipitate XLT4 Agar 3 months 4±2°C 7.2003:394-635).5±0. Untuk lebih jelasnya lihat pada tabel shelf life prepared media berikut.

al. menipis. Reduksi ini dapat dilakukan saat preparasi media.inilah media dapat disimpan atau dipindahkan keluar dari kondisi aseptis. Cystein juga dapat menghambat beberapa enzim proteolitik. pecah-pecah dan jika kehilangan semua air maka akan menjadi kerak di cawan petri. Pengecekan sterilitas media dapat mengacu kepada tabel sterility testing yang disarankan oleh Andrews et. Jika oksidasi terjadi maka media berubah menjadi pink yang menandakan bahwa media sebaiknya tidak dipakai. Penyimpanan pada suhu refrigerator lebih dapat mempertahankan kandungan air dalam media agar. Media ini sebaiknya mengandung indikator Eh yaitu resazurin yang akan berubah menjadi tidak berwarna ketika terreduksi. (2004:7) untuk menguji kualitas media. Suhu uji/penyimpanan inkubasi Waktu minimum uji sterilitas 4-8 °C 10-14 hari 20-25 °C 2-5 hari 35-37 °C 48-72 jam Perlakuan untuk media kultivasi anaerob Holdeman. Trubleshooting kesalahan dalam pembuatan media Masalah Kemungkinan kesalahan Agar tidak memadat overheating selama preparasi pH rendah yang menyebabkan terjadinya hidrolisis kesalahan penimbangan agar agar tidak larut sempurna komposisi tidak diaduk dengan rata pH tidak sesuai overheating selama preparasi kualitas air yang rendah kontaminasi larutan kimia lain pengukuran pH tidak pada suhu yang disarankan kesalahan pada pH meter buruknya kualitas medium Warna tidak normal overheating selama preparasi kualitas air yang rendah kesalahan pengukuran pH kontaminasi larutan kimia lain buruknya kualitas medium Terbentuknya presipitat overheating selama preparasi / endapan kualitas air yang rendah . Cato & Moore (1977) dalam Barrow & Feltham (1993:7) menyarankan bahwa untuk mengoptimalkan pertumbuhan mikroorganisme anaerob obligat dapat dilakukan dengan menurunkan potensial redoks (Eh) media sebelum diinokulasikan. Tehnik khusus ini dinamkan pre-reduced anaerobically sterilized (PRAS) yaitu dengan cara: -menghilangkan oksigen terlarut dengan memanaskan hingga mendidih. Media padat yang disimpan terlalu lama pada suhu ruang akan kehilangan kadar airnya sehingga media semakin mengeras. oleh karena itu jangan menambahkan cystein jika akan melakukan uji mengenai enzim tersebut. kondisi ini dijaga pada saat penyimpanan dan sebisa mungkin saat inokulasi. -menambahkan cystein -flushing dengan gas bebas oksigen dan menyimpannya pada wadah dengan gas bebas oksigen.

Setiap batch yang dibuat akan menghasilkan konsentrasi yang seragam. Penanganan commercial dehydrated media Commercial dehydrated media adalah sebutan untuk media hasil produksi suatu perusahaan yang komposisinya telah diracikkan sesuai takaran literatur lalu dihilangkan kandungan airnya supaya bertahan lama dan didistribusikan secara komersial. Penghematan waktu dan biaya. . Mudah dalam preparasinya dan tanpa pengaturan pH. Sedangkan kekurangannya adalah 1.kesalahan pengukuran pH kontaminasi larutan kimia lain buruknya kualitas medium Produktivitas yang kesalahan pada penimbangan atau penambahan suplemen rendah residu senyawa toksik pada alat gelas atau air overheating selama preparasi buruknya kualitas medium kualitas air yang rendah Selektivitas yang rendah kesalahan penambahan suplemen suplemen terkontaminasi kesalahan penimbangan buruknya kualitas medium overheating selama preparasi kontaminasi kesalahan sterilisasi kesalahan teknik aseptis suplemen terkontaminasi (ISO/TS 11133-1. Umumnya memiliki sifat higroskopis. 3. Dehydrated media tidak cocok untuk jenis media yang mengandung darah atau bahan termolabil lain (Barrow & Feltham. 4. Keuntungan penggunaan dehydrated media adalah 1. 2. 1993:7). Kualitas media setelah dibuka sangat tergantung pada kondisi penyimpanannya. 2. Dapat digunakan untuk pembuatan dengan volume kecil (hal yang sangat sulit jika membuat media racikan dalam volume kecil). Lebih baik media disimpan pada suhu dingin dan jauh dari sinar (terdapat petunjuk detail pada package). Sebaiknya perlu dicatat mengenai tanggal penerimaan media dan tanggal pembukaan media.Dehydrated media biasanya ditempatkan dalam container berpenutup ulir dan suplemen atau bahan selektif disediakan dalam bentuk cair atau padatan. Penurunan kualitas media dapat dilihat dengan adanya perubahan karakteristik bubuk media atau perubahan warna media. 2009:17) f.

Ilustrasi pembuatan media .g.

23: Microbiological Methods. BAM (Bacteriological Analytical Manual). Traynor. 2003. Laboratory Manual in General Microbiology. McGraw-Hill Companiies. 1998. New York : CRC Press. and A. Second Edition. Harley. 2004. Granato. dan WEF (Water Environtment Federation).2. Arnold Publishers. Culture Media Special Interest Group Australian Society for Microbiology. Chapter 3. Barrow. .M.35). Laboratory Manual and Workbook in Microbiology. Mc Graw Hill Companies. Grange.P. Brown.M. Mc Graw Hill Companies. Application to Patient Care. Lyne. Handbook of Culture Media for Food Microbiology (Vol. J. and R.A. Handbook of Microbiological Media (4th Edition). Chapter 17. Food and Drug Administration. J. G.W. 2004. Tan. 2004.D. New York : Cambridge University Press. Prescott. J. P.. Mizer.. Gerba.I. Falkinham III. Ronald M.. At The Bench. Laboratory Exercises in Microbiology. and C. Cowan and Steel’s. Morello. 2001. 1999. Collin and Lyne’s. Maturin. Pepper. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Barker. 2000. 2002.A. 2001.E. 2003. Anderson. Barker. New York. J. 1998. APHA (American Public Health Association). Guidelines for Assuring Quality of Food and Water Microbiological Culture Media. Corry.M. Elsevier Academic Press. Scholtes.L.L. A Laboratory Navigator. Aerobic Plate Count. Benson : Microbiological Application. A. Cold Spring Harbor Laboratory Press. A. Australian Society for Microbiology. 5th Edition. and J. AOAC (Asociation of Official Analytical Chemistry) Official Methods of Analysis. and R. APHA.H.. C. N. A Laboratory Navigator.. Curtiss.DAFTAR PUSTAKA ALAT DAN BAHAN : Referensi : AOAC.M. 7th Edition. 8th Edition. 1993. H. Kathy. Environtmental Microbiology A Laboratory Manual. Microbiological Methods. New York. London. Atlas.. Amsterdam: Elsevier. Feltham. Peeler.E. P. AWA (American Water Association). Baird. Shepherd.E. Manual for the Identification of Medical Bacteria. I. 2010.K. 8th Edition. J.01..P. PENGENALAN MEDIUM Referensi Andrews. AOAC Official Method 966. At The Bench. Collins.A. Larry and J. P. Kathy. G. L. S.O. New York :Cold Spring Harbor Laboratory Press. T.

5th Edition. Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and production of culture media — Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of culture media in the laboratory. Microbiology. 2nd edition . 2002. Laboratory Exercises in Microbiology. and J. 5 th Edition. Harley and D.A. L.M.M.. McGraw-Hill Companies. J. Klein.. 2002. Prescott. McGraw-Hill Companies ISO/TS 11133-1. L.P.P. 2009. Harley.Prescott.

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->