MEDIA PERBENIHAN PADAT DAN CAIR Makalah

Disusun untuk memenuhi tugas Mata Kuliah Praktikum Media & Reagensia II

Oleh: Sara Lisya Sujana NIM P17334110037 Tingkat IA

Kemenkes RI Politeknik Kesehatan Bandung Jurusan Analis Kesehatan Cimahi 2011
BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Bakteri merupakan makhluk hidup bersel satu tanpa klorofil,kebanyakan berukuran 1-5 mikron. Menurut cara hidupnya,bakteri dibedakan menjadi bakteri autotrof dan bakteri heterotrof. Bakteri autotrof yaitu bakteri yang hidupnya tidak bergantung pada makhluk lain, karena dapat mensintesa makanannya sendiri.sedangkan Bakteri heterotrof adalah bakteri yang hidupnya tergantung pada makhluk lain, karena tidak dapat mensintesa makanannya sendiri. Dapat bersifat saprofit yaitu bila hidupnya pada sisa-sisa organisma lain (yang telah mati) Dapat bersifat parasit yaitu bila hidupnya langsung tergantung dari organisma lain yang masih hidup dan merugikan. Prinsip pertumbuhan bakteri bahwa laju pertumbuhan bakteri istilah pertumbuhan bakteri lebih mengacu kepada pertambahan jumlah sel bukan mengacu kepada perkembangan individu organisme sel. Bakteri memiliki kemampuan untuk menggandakan diri secara eksponensil dikarenakan system reproduksinya adalah pembelahan biner melintang,dimana tiyap sel membelah diri menjadi dua sel.

2 Tujuan Penulisan Tujuan dari penulisan makalah ini adalah untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah praktikum. sehingga dikembangkan berbagai macam media pertumbuhan untuk digunakan dalam diagnosa mikrobiologi. Selain itu dapat pula ditambahkan komponen lain seperti senyawa organik dan senyawa kompleks lainnya Syarat-syarat media  Media harus mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan oleh mikroba  Media harus mempunyai tekanan osmosa.Dalam suatu penelitian tertentu. vitamin dan zat pengatur tumbuh (ZPT). Oleh karena bakteri yang berbeda memerlukan kebutuhan akan nutrisi yang berbeda pula . sumber energi (karbon). pebanyakan bakteri sangat diperlukan untuk mendukung suatu analisa. Unsur tersebut berupa garam organik. untuk menumbuhkan bakteri diperlukan suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Media biakan yang mampu mendukung optimalisasi pertumbuhan milroorganisme harus dapat memenuhi persyaratan nutrisi bagi mikroorganisme. BAB II PEMBAHASAN Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zatzat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Oleh karena itu. Dengan media pertumbuhan dapat dilakukan isolat mikroorganisme pertumbuhannya. tegangan permukaan dan pH yang sesuai dengan pertumbuhannya . Media dan Reagensia. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media 1. Dengan media pertumbuhan dapat dilakukan isolasi mikroorganisme menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya sesuai kebutuhan bakteri. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel.

Nutrisi atau zat makanan  Nikroba dapat menggunakan sumber N anorganik seperti urea. Media harus mengandung unsurunsur yang diperlukan untuk metabolisme sel yaitu berupa unsur makro seperti C. Silica gel khusus digunakan untuk memadatkan media bagi mikroorganisme autotrof obligat. P. . lemak. fungsi dari suatu media perbenihan diantaranya: Isolasi Memperbanyak Pengujian sifat-sifat fisiologis atau biokimia Perhitungan jumlah mikroba Menyimpan mikroba Bahan-bahan media pertumbuhan Bahan dasar  Air (H2O) sebagai pelarut  Agar (dari rumput laut) yang berfungsi untuk pemadat media. N. Kekurangannnya adalah lebih banyak jenis mikroba yang mampu menguraikannya dibanding agar. Mg  Sumber karbon dan energi yang dapat diperoleh berupa senyawa organik atau anorganik sesuai dengan sifat mikrobanya.  Silica gel. O. protein atau senyawa bernitrogen lain dan sejumlah vitamin. Jasad heterotrof memerlukan sumber karbon organik antara lain dari karbohidrat. protein dan asam organik. Agar sulit didegradasi oleh mikroorganisme pada umumnya dan mencair pada suhu 45⁰C.  Gelatin adalah polimer asam amino yang diproduksi dari kolagen.  Sumber nitrogen mencakup asam amino. unsur mikro seperti Fe. Fungsinya juga sebagai pemadat media. Media tidak mengandung zat penghambat kecuali yang sengaja ditambahkan pada media selektif atau one-purpose media  Media harus steril Secara umum. H. yaitu bahan yang mengandung natrium silikat.

plasenta dan daging sapi. Jenis karbohidrat yang umumnya digunakan dalam amilum. dll. sukrosa.1 Media Perbenihan Padat Media padat dibuat dengan penambahan bahan pengeras pada campuran bahan gizi dan air.  Karbohidrat. Antibiotik ditambahkan untuk menghambat pertumbuhan mikroba nontarget/kontaminan. gelatin dan kedelai. Media perbenihan terdiri dari dua bentuk yaitu bentuk cair dan padat (agar).Konsentrasi yang ditambahkan untuk analisis fermentasi adalah 0. Meat extract mengandung basa organik terbuat dari otak. susu. lactalbumin. dengan kata lain dalam satu koloni adalah bakteri yang sama genus dan spesiesnya .limpa. glukosa. manitol.  Yeast extract. JENIS MEDIA PERBENIHAN Oleh karena bakteri yang berbeda memerlukan kebutuhan akan nutrisi yang berbeda pula . 2. galaktosa. Dengan kondisi inkubasi yang sesuai bakteri dapat tumbuh dan berkembang dalam jumlah yang banyak sehingga dapat dilihat tanpa menggunakan mikroskop. sehingga dikembangkan berbagai macam media pertumbuhan untuk digunakan dalam diagnosa mikrobiologi. Karbohidrat ditambahkan untuk memperkaya pembentukan asam amino dan gas dari karbohidrat. darah. Bahan lain yang sering digunakan dalam pembuatan media  Peptone.Bahan tambahan  Bahan-bahan tambahan yaitu bahan yang ditambahkan ke medium dengan tujuan tertentu.5-1%. Biasanya digunakan agarosa yang memiliki sifat cair pada suhu ≥ 95⁰C tetapi berbentuk padat pada suhu dibawah 50⁰C. casein. liver. Yeast extract terbuat dari ragi pengembang roti atau pembuat alcohol. fruktosa.  Meat extract. misalnya phenol red (indikator asam basa) ditambahkan untuk indikator perubahan pH akibat produksi asam organik hasil metabolisme. Yeast extract mengandung asam amino yang lengkap & vitamin (Bcomplex).Komposisinya tergantung pada bahan asalnya dan bagaimana cara memperolehnya. peptone adalah produk hidrolisis protein hewani atau nabati seperti otot. Pertumbuhan bakteri membentuk kelompok yang terdiri dari satu jenis bakteri yang disebut koloni.

sebagai koloni atau dalam garis). Solid media biasanya digunakan sebagai: miring menusuk piring petri Ilustrasi. Plate Count Agar (PCA) PCA digunakan sebagai medium untuk mikroba aerobik dengan inokulasi di atas permukaan.memiliki karakteristik gen dan fenotip yang sama. Medium padat memiliki struktur fisik ( kaldu tidak memiliki struktur) dan ini memungkinkan bakteri tumbuh di informatif atau berguna cara fisik (misalnya. Salah satu contoh media padat. Pembiakan bakteri yang terdiri dari satu macam koloni yang seragam disebut dengan pembiakan murni. yeast extract. Media PCA ini baik untuk pertumbuhan total mikroba (semua jenis mikroba) karena di dalamnya mengandung komposisi casein enzymic hydrolisate yang menyediakan asam amino dan substansi nitrogen komplek lainnya serta ekstrak yeast mensuplai vitamin B kompleks. PCA dibuat dengan melarutkan semua bahan (casein enzymic hydrolisate. medium padat medium padat agar darah plat dokumentasi pribadi .5 g/L kemudian disterilisasi pada autoklaf (15 menit pada suhu 121°C). dextrose. agar) hingga membentuk suspensi 22. yaitu. untuk memudahkan pengambilan koloni yang sama ketika ditanam pada media identifikasi. Pembiakan yang murni diperlukan untuk identifikasi bakteri.

dan penumbuhan bermacam mikroorganisme. Dikalium fosfat ditambahkan sebagai buffer untuk mempertahankan pH. untuk isolasi. medium cair pada aplikasi uji biokimia bakteri . Salah satu contoh media cair yaitu. bahan-bahan gizi dilarutkan dalam air sehingga pertumbuhan bakteri ditandai dengan perubahan warna madia menjadi keruh. Media ini banyak digunakan untuk isolasi bakteri dari spesimen laboratorium dan akan mendukung pertumbuhan mayoritas bakteri patogen.medium agar miring (paling kiri) dokumentasi pribadi 2. Dekstrosa adalah sumber energi dan natrium klorida mempertahankan kesetimbangan osmotik. Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai yang menyediakan asam amino dan substansi nitrogen lainnya yang membuatnya menjadi media bernutrisi untuk bermacam mikroorganisme. Trypticase Soy Broth (TSB) TSB adalah media broth diperkaya untuk tujuan umum. semakin banyak bakteri tumbuh akan semakin keruh larutan.2 Media Perbenihan Cair Pada media cair.

Koloni yang tumbuh pada media padat merupakan klon yang berbeda. tetapi mereka tidak dapat tumbuh dalam media cair dengan pH 9 atau lebih tinggi. Sebagai contoh. sel-sel E. Semua kondisi pertumbuhan dibahas dibawah ini hanya berkaitan dengan media cair kecuali jika dinyatakan lain. .5% ekstra. Klon E. Padat dan media cair mungkin memiliki komposisi yang sama persis kecuali bahwa media padat berisi agar-agar 1. Koloni ini digunakan untuk seleksi klon di kloning DNA dan ekspresi protein dalam studi biologi molekuler.coli yang dipilih dapat ditanam dalam jumlah besar dalam media cair.coli dapat tumbuh di piring medium padat pada pH 11. Sebuah klon E. 3 Solid vs media pertumbuhan cair Escherichia coli atau sel-sel E.coli dapat tumbuh pada padat atau dalam medium pertumbuhan cair di bawah kondisi laboratorium.coli yang berbeda mungkin memiliki sifat yang berbeda.coli sel memiliki sifat pertumbuhan yang berbeda di dalam media padat atau cair meskipun mereka memiliki komposisi yang sama kecuali agar. E.dokumentasi pribadi 2. Sebuah media cair sering digunakan untuk DNA plasmid dan produksi protein rekombinan.

2003. http://perdetik.osu.com/2008/11/bab-2-media-pertumbuhan.html diakses tanggal 19/05/2011 Anonim. Mikrobiologi Dasar Media Pertumbuhan.htm diakses tanggal 20/05/2011 Anonim. http://mansfield.blogspot. http://rockapolka. Media dan Sterilisasi. 2009.exptec.com/2009/12/media-dan-sterilisasi.blogspot.blogspot.edu/~sabedon/biol4035.html diakses tanggal 19/05/2011 Anonim. Growth Media. Media Perbenihan. 2009.html di akses tanggal 20/05/2011 Stephen.com/2011/04/media-perbenihan. 1998. http://www. 2011.htm di akses tanggal 20/05/2011 . Culturing Microbes. http://ekmon-saurus.com/Expression%20Technologies/Bacteria%20growth%20media.BAB IV DAFTAR PUSTAKA sumber gambar : dokumentasi pribadi Anonim.