PEMERIKSAAN BILIRUBIN DIRECT DAN BILIRUBIN TOTAL A. Tujuan B. Metode C.

Prinsip : Untuk mengetahui kadar Bilirubin Direct (D) dan Bilirubin Total (T) : Jendrassik / Grof :

Bilirubin bereaksi dengan Diazotized Sulphanilic Acid (DSA) membentuk zat warna merah azo. Absorbans zat warna ini pada 546 nm sebanding dengan konsentrasi bilirubin dalam sampel. Glucuronides bilirubin yang larut dalam air bereaksi langsung dengan DSA yang mana albumin yang terkonjugasi dalam bilirubin indirect hanya akan bereaksi dengan DSA, dibantu adanya accelerator (zat pemercepat). Bilirubin total = bilirubin direct + bilirubin indirect. D. Reaksi Bilirubin +DSA Bilirubin + accelerator E. Bahan : Serum atau plasma heparin. : Asam sulfanilic + natrium nitrit DSA DIRECT azobilirubin TOTAL azobilirubin

Hindari hemolisis. Sampel harus terlindungi dari sinar. Stabilitas : Bilirubin stabil selama 3 hari bila disimpan terlindung dari sinar pada 2-8°C. F. Reagen :

1. 1 x 100 ml reagen Bilirubin Total (tutup putih) Asam sulfanilic Asam hydroclorit Caffeine (accelerator) Natrium benzoate 2. 1 x 9 ml reagen T-Nitrit (tutup putih) untuk pengukuran Bilirubin Total Natrium nitrit 14 mmol/l 14 mmol/l 250 mmol/l 200 mmol/l 420 mmol/l

3. 1 x 100 ml reagen Bilirubin Direct (tutup merah) Asam sulfanilic Asam hydroclorit 4. 1 x 9 ml reagen D-Nitrit (tutup merah) untuk pengukuran Bilirubin Direct Natrium nitrit G. Alat : 0.9 mmol/l 14 mmol/l 250 mmol/l

2. Sampel 100 µl 100 µl Campur. Bilirubin Total Pipet ke dalam cuvet Reagen. Sampel 100 µl 100 µl Campur. Pemeriksaan Panjang gelombang Celah optik Suhu Pengukuran c. Kedua reagen dan larutan nitrit siap pakai. : Persiapan reagen dan stabilitas 1. inkubasi pada suhu kamar selama 10 sampai 30 menit. Cara Kerja a. bilirubin direct (3) Reagen D-Nitrit Blanko sampel 1000 µl Sampel 1000 µl 40 µl Campur dengan baik. Ukur absorbans sampel terhadap blanko sampel (∆A546) . Tabung reaksi 4. inkubasi pada suhu kamar selama 5 menit tepat. Fotometer H. Stabil sampai tanggal kadaluarsa bila tidak dibuka dan disimpan pada 15-25°C. Tip biru dan tip kuning 3. Ukur absorbans sampel terhadap blanko sampel (∆A546) 2. inkubasi selama 5 menit. inkubasi selama 2 menit. Prosedur : 546 nm : 1 cm : 20-25°C : terhadap blanko sampel 1. b.1. Bilirubin Direct Pipet ke dalam cuvet Reagen. bilirubin total (1) Reagen T-Nitrit Blanko sampel 1000 µl Sampel 1000 µl 40 µl Campur dengan baik. Micropipet 2.

I.5 205.0 (mg/dl) x 17. sampai 0. J.1 = (µmol/l) K. Perhitungan : Hitung konsentrasi bilirubin total dan direct dengan menggunakan faktor 13.25 4. Untuk konsentrasi bilirubin melebihi 25 mg/dl.9%) dan ulangi pemeriksaan.5 1.0 25.6 18. encerkan sampel 1 + 4 dengan garam fisiologis (0. sampai Bilirubin direct Dewasa.3 : mg/dl 5 12 1. Kalikan hasil dengan 5. Nilai Rujukan Bilirubin total Pada kelahiran.8 . sampai 1 bulan.0 Konsentrasi bilirubin (mg/dl) = ∆A546 x 13. sampai Dewasa. sampai 5 hari. Interpretasi Hasil : Linearitas : Pemeriksaan linear sampai 25 mg/dl.1 µmol/l 85.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful