PEMERIKSAAN BILIRUBIN DIRECT DAN BILIRUBIN TOTAL A. Tujuan B. Metode C.

Prinsip : Untuk mengetahui kadar Bilirubin Direct (D) dan Bilirubin Total (T) : Jendrassik / Grof :

Bilirubin bereaksi dengan Diazotized Sulphanilic Acid (DSA) membentuk zat warna merah azo. Absorbans zat warna ini pada 546 nm sebanding dengan konsentrasi bilirubin dalam sampel. Glucuronides bilirubin yang larut dalam air bereaksi langsung dengan DSA yang mana albumin yang terkonjugasi dalam bilirubin indirect hanya akan bereaksi dengan DSA, dibantu adanya accelerator (zat pemercepat). Bilirubin total = bilirubin direct + bilirubin indirect. D. Reaksi Bilirubin +DSA Bilirubin + accelerator E. Bahan : Serum atau plasma heparin. : Asam sulfanilic + natrium nitrit DSA DIRECT azobilirubin TOTAL azobilirubin

Hindari hemolisis. Sampel harus terlindungi dari sinar. Stabilitas : Bilirubin stabil selama 3 hari bila disimpan terlindung dari sinar pada 2-8°C. F. Reagen :

1. 1 x 100 ml reagen Bilirubin Total (tutup putih) Asam sulfanilic Asam hydroclorit Caffeine (accelerator) Natrium benzoate 2. 1 x 9 ml reagen T-Nitrit (tutup putih) untuk pengukuran Bilirubin Total Natrium nitrit 14 mmol/l 14 mmol/l 250 mmol/l 200 mmol/l 420 mmol/l

3. 1 x 100 ml reagen Bilirubin Direct (tutup merah) Asam sulfanilic Asam hydroclorit 4. 1 x 9 ml reagen D-Nitrit (tutup merah) untuk pengukuran Bilirubin Direct Natrium nitrit G. Alat : 0.9 mmol/l 14 mmol/l 250 mmol/l

Bilirubin Direct Pipet ke dalam cuvet Reagen. Kedua reagen dan larutan nitrit siap pakai. Ukur absorbans sampel terhadap blanko sampel (∆A546) . Tip biru dan tip kuning 3. inkubasi selama 5 menit. Tabung reaksi 4. inkubasi pada suhu kamar selama 5 menit tepat. inkubasi pada suhu kamar selama 10 sampai 30 menit. Stabil sampai tanggal kadaluarsa bila tidak dibuka dan disimpan pada 15-25°C. Prosedur : 546 nm : 1 cm : 20-25°C : terhadap blanko sampel 1. inkubasi selama 2 menit. Bilirubin Total Pipet ke dalam cuvet Reagen. Micropipet 2. 2. Cara Kerja a. : Persiapan reagen dan stabilitas 1. bilirubin direct (3) Reagen D-Nitrit Blanko sampel 1000 µl Sampel 1000 µl 40 µl Campur dengan baik.1. b. Sampel 100 µl 100 µl Campur. bilirubin total (1) Reagen T-Nitrit Blanko sampel 1000 µl Sampel 1000 µl 40 µl Campur dengan baik. Ukur absorbans sampel terhadap blanko sampel (∆A546) 2. Sampel 100 µl 100 µl Campur. Fotometer H. Pemeriksaan Panjang gelombang Celah optik Suhu Pengukuran c.

6 18.8 .0 25. sampai Bilirubin direct Dewasa.25 4. sampai 5 hari. Nilai Rujukan Bilirubin total Pada kelahiran. Untuk konsentrasi bilirubin melebihi 25 mg/dl. sampai 1 bulan. sampai Dewasa. Interpretasi Hasil : Linearitas : Pemeriksaan linear sampai 25 mg/dl.0 (mg/dl) x 17. Kalikan hasil dengan 5.1 µmol/l 85. J. encerkan sampel 1 + 4 dengan garam fisiologis (0.9%) dan ulangi pemeriksaan.5 205.I. Perhitungan : Hitung konsentrasi bilirubin total dan direct dengan menggunakan faktor 13.1 = (µmol/l) K.3 : mg/dl 5 12 1.0 Konsentrasi bilirubin (mg/dl) = ∆A546 x 13.5 1. sampai 0.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful