PEMERIKSAAN BILIRUBIN DIRECT DAN BILIRUBIN TOTAL A. Tujuan B. Metode C.

Prinsip : Untuk mengetahui kadar Bilirubin Direct (D) dan Bilirubin Total (T) : Jendrassik / Grof :

Bilirubin bereaksi dengan Diazotized Sulphanilic Acid (DSA) membentuk zat warna merah azo. Absorbans zat warna ini pada 546 nm sebanding dengan konsentrasi bilirubin dalam sampel. Glucuronides bilirubin yang larut dalam air bereaksi langsung dengan DSA yang mana albumin yang terkonjugasi dalam bilirubin indirect hanya akan bereaksi dengan DSA, dibantu adanya accelerator (zat pemercepat). Bilirubin total = bilirubin direct + bilirubin indirect. D. Reaksi Bilirubin +DSA Bilirubin + accelerator E. Bahan : Serum atau plasma heparin. : Asam sulfanilic + natrium nitrit DSA DIRECT azobilirubin TOTAL azobilirubin

Hindari hemolisis. Sampel harus terlindungi dari sinar. Stabilitas : Bilirubin stabil selama 3 hari bila disimpan terlindung dari sinar pada 2-8°C. F. Reagen :

1. 1 x 100 ml reagen Bilirubin Total (tutup putih) Asam sulfanilic Asam hydroclorit Caffeine (accelerator) Natrium benzoate 2. 1 x 9 ml reagen T-Nitrit (tutup putih) untuk pengukuran Bilirubin Total Natrium nitrit 14 mmol/l 14 mmol/l 250 mmol/l 200 mmol/l 420 mmol/l

3. 1 x 100 ml reagen Bilirubin Direct (tutup merah) Asam sulfanilic Asam hydroclorit 4. 1 x 9 ml reagen D-Nitrit (tutup merah) untuk pengukuran Bilirubin Direct Natrium nitrit G. Alat : 0.9 mmol/l 14 mmol/l 250 mmol/l

Kedua reagen dan larutan nitrit siap pakai. b. Sampel 100 µl 100 µl Campur. inkubasi pada suhu kamar selama 5 menit tepat. inkubasi pada suhu kamar selama 10 sampai 30 menit. Sampel 100 µl 100 µl Campur. Bilirubin Total Pipet ke dalam cuvet Reagen. Stabil sampai tanggal kadaluarsa bila tidak dibuka dan disimpan pada 15-25°C. Ukur absorbans sampel terhadap blanko sampel (∆A546) 2. Prosedur : 546 nm : 1 cm : 20-25°C : terhadap blanko sampel 1. inkubasi selama 2 menit. bilirubin total (1) Reagen T-Nitrit Blanko sampel 1000 µl Sampel 1000 µl 40 µl Campur dengan baik. Tabung reaksi 4.1. Ukur absorbans sampel terhadap blanko sampel (∆A546) . inkubasi selama 5 menit. Bilirubin Direct Pipet ke dalam cuvet Reagen. : Persiapan reagen dan stabilitas 1. Cara Kerja a. 2. bilirubin direct (3) Reagen D-Nitrit Blanko sampel 1000 µl Sampel 1000 µl 40 µl Campur dengan baik. Fotometer H. Micropipet 2. Pemeriksaan Panjang gelombang Celah optik Suhu Pengukuran c. Tip biru dan tip kuning 3.

9%) dan ulangi pemeriksaan. J. Perhitungan : Hitung konsentrasi bilirubin total dan direct dengan menggunakan faktor 13. sampai Bilirubin direct Dewasa.3 : mg/dl 5 12 1.I. sampai Dewasa.0 (mg/dl) x 17.1 µmol/l 85. sampai 1 bulan.25 4.6 18. Untuk konsentrasi bilirubin melebihi 25 mg/dl. Nilai Rujukan Bilirubin total Pada kelahiran. Interpretasi Hasil : Linearitas : Pemeriksaan linear sampai 25 mg/dl.0 25.1 = (µmol/l) K. Kalikan hasil dengan 5.5 205. encerkan sampel 1 + 4 dengan garam fisiologis (0. sampai 5 hari.0 Konsentrasi bilirubin (mg/dl) = ∆A546 x 13. sampai 0.8 .5 1.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful