TUJUAN Menetapkan nilai Km enzim fosfatase alkali dan enzim fosfatase asam yang berasal dari hati sapid

dan memperlihatkan bahwa kedua enzim ini mengkatalisis reaksi yang sama dengan substrat danproduk yang sama, tetapi mempunyai pH optimum yang berbeda !A"A# !alam per$obaan berikut ini, kedua ma$am fosfatase meme$ah substrat fosfat organi$ yang sama, yaitu para nitrofenil fosfat %p&N''( men)adi fosfat anorganik dan paranitrofenol %p&N'( yang berwarna kuning dalam suasana basa !ensitas opti$ p&N' yang terbentuk diba$a pada * +,- nm fosfatase p&nitrofenilfosfat &&&&&&&&&&&&& p&nitrofenol . fosfat organi$ % kuning * +,- nm( /leh karena , mol p&N'' diubah men)adi , mol p&N' yang berwarna, pengukuran densitas opti$ p&N' menggambarkan p&N'' yang diolah !alam per$obaan ini, ke$epatan reaksi pada saat enzim baru sa)a berikatan pada substrat membentuk kompleks 0" dan belum membentuk produk % ke$epatan reaksi pada saat t 1 - ( dianggap sama pada ke$epatan reaksi pada tabung blanko %2( !engan sendirinya densitas opti$ pada saat itu %!/ -( ialah !/ pada tabung 2 2AHAN !AN A3AT • hati sapi • larutan Na4l -,5 6 • larutan dapar karbonat bikarbonat pH 5,7 • larutan dapar sitrat 'h +,8 • larutan substrat p&nitrofenilfosfat %p&N''( 7- mmol • larutan Na/H -,, M • alat 9 blender, sentrifus, penangas air, spektrofotometer

4A#A K0#JA 2, U, 2: U: 2; U; 2+ U+ 3arutan dapar : : : : : : : : 0nzim & ,-- & ,-- & ,-- & ,-'ra inkubasi %dipanaskan dengan suhu ;< dera)at $el$ius( Na/h 8 8 8 8 8 8 8 8 =nkubasi %dipanaskan dengan suhu ;< dera)at 4 selama ,> menit( 0nzim ,-- & ,-- & ,-- & ,-- &

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful