PRINSIP DAN CARA KERJA AUTOKLAF

Autoklaf merupakan salah satu alat yang digunakan dalam laboratorium. Autoclave digunakan untuk mensterilkan alat-alat dan bahan yang akan digunakan dalam laboratorium. Prinsip kerja alat ini sama dengan prinsip kerja kukusan (alat sederhana untuk menanak nasi) hanya saja memiliki tekanan sehingga menghasilkan panas yang lebih tinggi. Hal ini bertujuan untuk lebih menyempurnakan proses sterilisasi. Tahap sterilisasi sebenarnya cukup singkat yaitu dengan suhu lebih ! jam. Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh endospora% yaitu sel resisten yang diproduksi oleh bakteri% sel ini tahan terhadap pemanasan% kekeringan% dan antibiotik. Pada spesies yang sama% endospora dapat bertahan pada kondisi lingkungan yang dapat membunuh sel vegetatif bakteri tersebut. &ndospora dapat dibunuh pada suhu '' ()% yang merupakan titik didih air pada tekanan atmosfer normal. Pada suhu ! ()% endospora dapat dibunuh dalam $aktu *-" menit% dimana sel vegetatif bakteri dapat dibunuh hanya dalam $aktu +-,' detik pada suhu +" (). Perhitungan $aktu sterilisasi autoklaf dimulai ketika suhu di dalam autoklaf mencapai ! (). -ika objek yang disterilisasi cukup tebal atau banyak% transfer panas pada bagian dalam autoklaf akan melambat% sehingga terjadi perpanjangan $aktu pemanasan total untuk memastikan bah$a semua objek bersuhu ! () untuk $aktu '- " menit. Perpanjangan $aktu juga dibutuhkan ketika cairan dalam volume besar akan diautoklaf karena volume yang besar membutuhkan $aktu yang lebih lama untuk mencapai suhu sterilisasi. Performa autoklaf diuji dengan indicator biologi% contohnya Bacillus stearothermophilus. Terdapat tiga jenis autoklaf% yaitu gravity displacement% prevacuum atau high vacuum% dan steam-flush pressure-pulse. Perbedaan ketiga jenis autoklaf ini terletak pada bagaimana udara dihilangkan dari dalam autoklaf selama proses sterilisasi. 1. Gravity Displacement Autoclave ! derajat celsius selama " menit. #amun $aktu keseluruhan mulai dari pemanasan a$al (kenaikan suhu) sampai pendinginan (penurunan suhu) bisa mencapai kurang

.dara dalam ruang autoklaf dipindahkan hanya berdasarkan gravitasi. Prinsipnya adalah memanfaatkan keringanan uap dibandingkan dengan udara% sehingga udara terletak di ba$ah uap. )ara kerjanya dimulai dengan memasukan uap melalui bagian atas autoklaf sehingga udara tertekan ke ba$ah. /ecara perlahan% uap mulai semakin banyak sehingga menekan udara semakin turun dan keluar melalui saluran di bagian ba$ah autoklaf% selanjutnya suhu meningkat dan terjadi sterilisasi. Autoklaf ini dapat bekerja dengan cakupan suhu antara ! - ,* () dengan $aktu '-,' menit. 2. Prevacuum atau High Vacuum Autoclave Autoklaf ini dilengkapi pompa yang mengevakuasi hampir semua udara dari dalam autoklaf. )ara kerjanya dimulai dengan pengeluaran udara. Proses ini berlangsung selama 0' menit. 1etika keadaan vakum tercipta% uap dimasukkan ke dalam autoklaf. Akibat kevakuman udara% uap segera berhubungan dengan seluruh permukaan benda% kemudian terjadi peningkatan suhu sehingga proses sterilisasi berlangsung. Autoklaf ini bekerja dengan suhu ,!- ," () dengan $aktu ,-* menit. 3. Steam-Flush Pressure-Pulse Autoclave

Autoklaf ini menggunakan aliran uap dan dorongan tekanan di atas tekanan atmosfer dengan rangkaian berulang. 2aktu siklus pada autoklaf ini tergantung pada benda yang disterilisasi. Prinsip Cara Kerja Aut !"a#e Pada saat sumber panas dinyalakan% air dalam autoclave lama kelamaan akan mendidih.

 .ap air yang terbentuk mendesak udara yang mengisi autoclave. /etelah udara dalam autoclave diganti dengan uap air% katup udara3uap ditutup sehingga tekanan udara dalam autoclave naik. Pada saat tercapai tekanan dan suhu yang sesuai% maka proses sterilisasi dimulai dan timer mulai menghitung $aktu mundur. /etelah proses sterilisasi selesai% sumber panas dimatikan dan tekanan dibiarkan turun perlahan hingga mencapai suhu '(.

)ara kerja autoclave 4 . /ebelum melakukan sterilisasi cek dahulu banyaknya air dalam autoclave. -ika air kurang dari batas yang ditentukan% maka dapat ditambah air sampai batas tersebut. 5unakan air hasil destilasi% untuk menghindari terbentuknya kerak dan karat. !. ,. *. ". 6asukkan peralatan dan bahan. -ika mensterilisasi botol bertutup ulir% maka tutup harus dikendorkan. Tutup autoclave dengan rapat lalu kencangkan baut pengaman agar tidak ada uap yang keluar dari bibir autoclave. 1lep pengaman jangan dikencangkan terlebih dahulu. #yalakan autoclave% diaturtimer dengan $aktu minimal " menit pada suhu ! o). Tunggu sampai air mendidih sehingga uapnya memenuhi kompartemen autoclave dan terdesak keluar dari klep pengaman. 1emudian klep pengaman ditutup (dikencangkan) dan tunggu sampai selesai. Penghitungan $aktu "7 dimulai sejak tekanan mencapai ! atm.

+.

-ika alarm tanda selesai berbunyi% maka tunggu tekanan dalam kompartemen turun hingga sama dengan tekanan udara di lingkungan (jarum padapreisure gauge menunjuk ke angka nol). 1emudian klep-klep pengaman dibuka dan keluarkan isi autoclave dengan hati-hati. 8aela #urul 9ahma. !' ,.Autoclave dan Waterbath (:nline4 http433elagadisimut. blogspot.com3!' ,3' 3tugas-instrumentasi-;i-autoclave-dan.html) diakses pada !< /eptember !' ,.

TUGAS MIKROBIOLOGI I PRINSIP KERJA AUTOKLAF

FITRI RAHMAYANTI E1A010038

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MATARAM

2013