P. 1
Laporan praktikum ekotoksikologi

Laporan praktikum ekotoksikologi

5.0

|Views: 7,359|Likes:
Published by blackradit

More info:

Published by: blackradit on Jan 15, 2010
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

12/31/2013

pdf

text

original

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI PERAIRAN (M10A135

)

Disusun oleh : Kelompok 9 Kelas A

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNIVERSITAS PADJADJARAN 2010

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI PERAIRAN (M10A135)

Disusun oleh : Kelompok 9 / Kelas Perikanan A Ahmad tabroni Radityo Nur Hardono Ocky Herlambang Rioaldy Sughandi Danies Sadyarta Pratama 230110070009 230110070019 230110070029 230110070039 230110070049

Alexander Burhani Marda 230110070059 Mugni Triyadzi 230110070069

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNIVERSITAS PADJADJARAN 2010

LEMBAR PENGESAHAN

LAPORAN PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI PERAIRAN

Semeser Ganjil, TA 2009/2010

Disusun Oleh,
Kelompok Kelas : : 9 A

Acc : Jatinangor, 13 Januari 2010 Pembimbing

Mochamad Untung K. Agung, S.Kel. NIP : 198307142006041004

i

KATA PENGANTAR Syukur kehendak Allah SWT yang selalu berada di samping kita dalam segala segi kehidupan. Dengan bimbinganNya lah kami dapat menyelesaikan laporan praktikum ekotoksikologi ini. Tanpa bimbinganNya saya pasti tidak mampu menyelesaikan makalah ini. Setelah mengalami beberapa kali refisi dari team dosen pembimbing praktikum dan diselingi oleh kegiatan kuliah, UAS, juga kesibukan dari masing-masing anggota kelompok, syukur alhamdulilah akhirnya laporan praktikum ini dapat kami selesaikan dan kami beri judul “Laporan Akhir Praktikum Ekotoksikologi Perairan (Uji Toksisitas Lethal, Uji Toksisitas Sub-Lethal, Pengamatan Preparat Histologi)” Penulis menyadari laporan praktikum ini jauh dari sempurna, karena kesempurnaan hanyalah milik Allah SWT. Oleh karena itu kritik dan saran yang membangun diharapkan untuk memperbaiki kesalahan yang ada. Penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada teman, dosen, dan orang tua yang selalu membantu dalam kegiatan perkuliahaan Akhir kata, penulis berharap laporan praktikum ini dapat memberi pengetahuan kepada pembaca, dan menambah wawasan mengenai hal yang penulis paparkan.

Jatinangor, 13 Januari 2010

Penulis

ii

DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENANTAR ................................................................. DAFTAR ISI ............................................................................ DAFTAR TABEL ..................................................................... DAFTAR GAMBAR ................................................................ I . UJI TOKSISITAS LETHAL BAB I. PENDAHULUAN

i ii vii viii

1.1. Latar Belakang .............................................................. 1.2. Tujuan Praktikum .......................................................... 1.3. Manfaat Praktikum ........................................................ BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

1 2 2

2.1. Tinjauan Umum Uji Toksisitas Akut/Lethal .................. 2.2. Tinjauan Umum Biota Uji ............................................. 2.2.1. Artemia .............................................................. 2.2.2. Dhapnia .............................................................. 2.3. Tinjauan Umum Bahan Toksik ............ .......................... 2.3.1. Herbisida ............................................................ 2.3.1.1. Roundup ............................................... 2.3.2. Methylen Blue .................................................... 2.3.2.1. Dosis dan Cara Pemberian .................... 2.3.3. Ekstrak Nimba .................................................... 2.4. Tinjauan Umum LC50 (Lethal Concentration 50) ............

3 4 4 6 10 10 12 13 14 15 16

iii

BAB III. METODOLOGI PRAKTIKUM 3.1. Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum .................... 3.2. Alat dan Bahan ................................................................ 3.2.1. Alat-Alat ............................................................ 3.2.2. Bahan ................................................................. 3.3. Prosedur kerja ............................................................... 3.3.1. Prosedur Plaksanaan Uji Toksisitas Akut ............. 3.3.2. Pengenceran ....................................................... 3.4. Analisis Data ............................................................ ....... 3.4.1 Prosedur Analisis Data ....................................... BAB IV. ... HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil .............................................................................. 4.1.1. Artemia .............................................................. 4.1.2. Daphnia .............................................................. 4.2. Pembahasan ................................................................... 4.2.1. Artemia .............................................................. 4.2.2. Daphnia .............................................................. BAB V. .... KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan .................................................................... 5.2. Saran ............................................................................. DAFTAR PUSTAKA ............................................................... 48 49 50 25 25 36 45 45 46 18 18 18 19 19 19 20 23 23

II .

UJI TOKSISITAS SUB-LETHAL BAB I. PENDAHULUAN 51 51 51

1.1. Latar Belakang .............................................................. 1.2. Tujuan Praktikum .......................................................... 1.3. Manfaat Praktikum ........................................................

iv

BAB II.

TINJAUAN PUSTAKA 52 53 53 56 56 57 57 57 57 59 60

2.1. Tinjauan Umum Uji Toksisitas Sub-Lethal .................... 2.2. Tinjauan Umum Biota Uji (Ikan Mas Cyprinus carpio) . 2.2.1. Ikan mas ............................................................. 2.2.2. Umum ................................................................ 2.2.3. Taksonomi dan Kekerabatan ............................... 2.2.4. Morfologi ........................................................... 2.2.5. Penyebaran ......................................................... 2.3. Tinjauan Umum Bahan Toksik ............ .......................... 2.3.1. PbO (Plumbum Monoksida) ................................ 2.3.2. CuSO4 (Cuprum Sulphat) ................................... 2.3.3. FeCl2 (Ferri Chloride) ....................................... 2.4. Tinjauan Umum Pengamatan Fisiologi Ikan (Buka Tutup Operculum dan Gejala Klinis/ Lendir) ................. BAB III.... METODOLOGI PRAKTIKUM 3.1. Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum .................... 3.2. Alat dan Bahan ................................................................ 3.2.1. Alat-alat ............................................................. 3.2.2. Bahan ................................................................. 3.3. Prosedur Kerja .............................................................. 3.3.1. Prosedur Pemaparan ........................................... 3.4. Analisis Data ............................................................ ....... BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil .............................................................................. 4.2. Pembahasan ................................................................... BAB V. .... KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan .................................................................... 5.2. Saran .............................................................................

61

63 63 63 63 64 64 65

66 68

70 70

v

DAFTAR PUSTAKA ................................................................

71

III .

PENGAMATAN PREPARAT HISTOLOGI BAB I. PENDAHULUAN 72 73 73

1.1. Latar Belakang .............................................................. 1.2. Tujuan Praktikum .......................................................... 1.3. Manfaat praktikum ........................................................ BAB II. .... TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Tinjauan Uumum Analisis Histologi dan Histopatologi .. 2.1.1. Hepar .................................................................. 2.1.2. Insang ................................................................. 2.1.3. Intestinum .......................................................... 2.1.4. Ren ..................................................................... 2.2. Tinjauan Umum Kerusakan Jaringan/Organ Akibat Bahan Toksik............................................................................ 2.2.1. Hiperplasia .......................................................... 2.2.2. Hiploplasia ......................................................... 2.2.3. Necrosis ............................................................. 2.3. Pembuatan Preparat Histologi ............ ............................ BAB III. METODOLOGI PRAKTIKUM 3.1. Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum .................... 3.2. Alat dan Bahan ................................................................ 3.3. Prosedur Kerja .............................................................. 3.4. Analisis Data ............................................................ ....... BAB IV. ... HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil .............................................................................. 4.1.1. Ren ..................................................................... 4.1.2. Hepar..................................................................

74 75 75 76 77

77 77 77 78 78

81 81 81 81

82 82 83

vi

4.1.3. Insang ................................................................. 4.1.4. Intestinum .......................................................... 4.2. Pembahasan ................................................................... 4.1.1. Ren ..................................................................... 4.1.2. Hepar.................................................................. 4.1.3. Insang ................................................................. 4.1.4. Intestinum .......................................................... BAB V. .... KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan .................................................................... 5.2. Saran ............................................................................. DAFTAR PUSTAKA ...............................................................

84 85 85 85 86 86 86

87 87 88

vii

DAFTAR TABLE

Tabel 1 : Sifat Kimia-Fisika Methylen Blue ............................................ Tabel 2 : Alat-Alat Uji Toksisitas Akut ................................................... Tabel 3 : Bahan-Bahan Uji Toksisitas Akut............................................. Tabel 4 : Nilai Hasil LC50 Praktikum Berdasarkan Metode Hubert .......... Tabel 5 : Pengaruh kisaran pH terhadap ikan........................................... Tabel 6 : Alat-Alat Uji Toksisitas Sub-lethal ........................................... Tabel 7 : Bahan-Bahan Uji Toksisitas Sub-lethal ....................................

15 18 19 48 55 63 63

viii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1 : Artemia jantan dan artemia betina ......................................... Gambar 2 : Siklus hidup artemia ............................................................. Gambar 3 : Daphnia ................................................................................ Gambar 4 : Siklus hidup daphnia ............................................................ Gambar 5 : Daun Nimba ......................................................................... Gambar 6 : Benih Ikan Mas ................................................................... Gambar 7 : a. Hepar kontrol, b. Hepar patologi ....................................... Gambar 8 : a. Insang kontrol, b. Insang patologi ..................................... Gambar 9 : a. Intestinum kontrol, b. Intestinum patologi ......................... Gambar 10 : a. Ren kontrol, b. Ren patologi............................................ Gambar 11 : a. Ren patologis, b. Ren normal .......................................... Gambar 12 : a. Hepar kontrol, b. Hepar patologi ..................................... Gambar 13 : a. Insang kontrol, b. Insang patologi.................................... Gambar 14 : a. Intestinum kontrol, b. Intestinum patologi .......................

4 5 7 9 16 54 75 75 76 77 82 83 84 85

1

I. Mata Acara Praktikum : Uji Toksisitas Lethal

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Kehidupan mahluk hidup tergantung dari apa yang terjadi di

lingkunganya. Lingkungan yang bebas mudah dimasuki bahan-bahan yang tidak diketahui misalnya Limbah. Toksikologi adalah ilmu yang mempelajari proses peracunan atau sifat-sifat bahan racun dan pengaruhnya terhadap mahluk hidup. Ilmu yang mempelajari mengenai proses peracunan yang terjadi di lingkungan disebut ekotoksikologi. Ekotoksigologi merupakan cabang ilmu dari Toksikologi. Wilayah perairan adalah zona bebas dimana banyak effluent yang masuk baik secara langsung melalui pipa-pipa pembuangan atau run off dari aliran bawah tanah. Banyak zat-zat kimia yang masuk ke sungai diantaranya adalah dari limbah-limbah industri yang banyak memakai bahan kimia, atau limbah dari kegiatan akuakultur yang biasanya menghasilkan limbah bahan-bahan organik. Zat-zat tersebut diatas dapat menimbulkan efek terhadap perairan tempat pembuangan limbah tersebut. Efek yang ada dapat mengakibatkan kualitas suatu perairan menurun atau efek terhadap organisme air yang terpapar langsung dengan zat racun yang terlarut di perairan. Efek keracunan yang terjadi dapat bersifat akut, sub-akut, khronis, delayed. Hal ini ditentukan oleh waktu, lokasi organ (lokal/sistemik). Kemampuan racun untuk menimbulkan kerusakan apabila masuk kedalam tubuh dan lokasi organ yang rentan disebut toksisitas. Toksisitas dapat ditentukan dari beberapa faktor yaitu: 1. Spesies (jenis makhluk hidup: hewan, manusia dan tumbuhan) 2. Portal of entry, cara masuknya zat racun tersebut : kulit, pernafasan dan mulut 3. Bentuk/ sifat kimia - fisik dll.

2

Ada beberapa macam uji toksisitas, diantaranya uji toksisitas akut, uji toksisitas lethal dan uji toksisitas sublethal. Pada praktikum kali ini yang dilakukan adalah uji toksisitas akut dengan bahan uji (herbisida, methyelen blue dan ekstrak nimba).

1.2 Tujuan Praktikum Tujuan dari praktikum uji toksisitas akut ini adalah untuk menghitung nilai LC50 dari bahan toksik herbisida, methylen blue dan ekstra nimba, dengan begitu dapat diketahui pada konsentrasi berapa bahan toksik dapat mematikan 50% organime uji (Artemia dan Daphnia).

1.3 Manfaat Praktikum Manfaat dari diadakannya praktikum uji toksisitas akut yang ialah untuk mengetahui respon kematian hewan uji artemia dan daphnia selama 24 jam dengan konsentrasi pemaparan yang diberikan yaitu : 1. Herbisida 48.6 µg/mL, 4.86 µg/mL, dan 0.486 µg/mL. 2. Methylen Blue 20 µg/mL, 2 µg/mL, 0.2 µg/mL. 3. Ekstrak Nimba 10 µg/mL, 1 µg/mL, 0.1 µg/mL.

3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tinjauan Umum Uji Toksisitas Akut/Lethal Toksisitas akut adalah efek total yang didapat pada dosis tunggal/multipel dalam 24 jam pemaparan. Toksisitas akut sifatnya mendadak, waktu singkat, biasanya reversibel, yang secara statistik dapat menyebabkan kematian 50% dari hewan percobaan, dinyatakan dengan LC50 (Lu, 1995). Nilai LC50 sangat berguna untuk menentukan klasifikasi zat kimia sesuai dengan toksisitas relatifnya. Klasifikasi lazim adalah sebagai berikut (Lu, 1994) : Kategori Supertoksik Amat sangat toksik Sangat toksik Toksik sedang Toksik ringan Praktis tidak toksik 5 5 – 50 LC 50 mg / kg atau kurang mg / kg

50 – 500 mg / kg 0,5 – 5 g / kg 5 – 15 > 15 g / kg g / kg

Kegunaan dari uji toksisitas akut adalah untuk mengetahui dosis yang aman dari sebuah penggunaan bahan kimia terhadap organisme uji. Uji toksisitas akut adalah uji yang dapat menunjukan tentang dosis yang sebaiknya digunakan dalam pengujian/penelitian selanjutnya (uji pendahuluan). Uji toksisitas akut ini biasanya menggunakan organisme uji yang memiliki umur pendek seperti artemia atau lebih dikenal dengan BST(Brine shrimp letality test). BST menggunakan artemia sebagai bioassay.

4

2.2 Tinjauan Umum Biota Uji 2.2.1 Artemia Artemia merupakan kelompok udang-udangan dari phylum Arthropoda. Mereka berkerabat dekat dengan zooplankton lain seperti copepod dan daphnia (kutu air). Artemia hidup di danau-danau garam (berair asin) yang ada di seluruh dunia. Udang ini toleran terhadap selang salinitas yang sangat luas, mulai dari nyaris tawar hingga jenuh garam. Secara alamiah salinitas danau dimana mereka hidup sangat bervariasi, tergantung pada jumlah hujan dan penguapan yang terjadi. Apabila kadar garam kurang dari 6% telur artemia akan tenggelam sehingga telur tidak bisa menetas, hal ini biasanya terjadi apabila air tawar banyak masuk kedalam danau di musim penghujan. Sedangkan apabila kadar garam lebih dari 25% telur akan tetap berada dalam kondisi tersuspensi, sehingga dapat menetas dengan normal. Adapun klasifikasi dari artemia antara lain : Kingdom Phylum Subphylum Class Order Family Genus Spesies : Animalia : Arthropoda : Crustacea : Branchiopoda : Anostraca : Artemiidae : Artemia : Artemia salina

Gambar 1 : Artemia jantan dan artemia betina (Golden Gate Frozen Brine Shrimp)

5

1. Siklus Hidup Siklus hidup artemia bisa dimulai dari saat menetasnya kista atau telur. Setelah 15-20 jam pada suhu 25°C kista akan menetas manjadi embrio. Dalam waktu beberapa jam embrio ini masih akan tetap menempel pada kulit kista. Pada fase ini embrio akan menyelesaikan perkembangannya kemudian berubah menjadi naupli yang sudah akan bisa berenang bebas. Pada awalnya naupli akan berwarna orange kecoklatan akibat masih mengandung kuning telur. Artemia yang baru menetas tidak akan makan, karena mulut dan anusnya belum terbentuk dengan sempurna. Setelah 12 jam menetas mereka akan ganti kulit dan memasuki tahap larva kedua. Dalam fase ini mereka akan mulai makan, dengan pakan berupa mikro alga, bakteri, dan detritus organik lainnya. Pada dasarnya mereka tidak akan peduli (tidak pemilih) jenis pakan yang dikonsumsinya selama bahan tersebut tersedia diair dengan ukuran yang sesuai. Naupli akan berganti kulit sebanyak 15 kali sebelum menjadi dewasa dalam waktu 8 hari. Artemia dewasa rata-rata berukuran sekitar 8 mm, meskipun demikian pada kondisi yang tepat mereka dapat mencapai ukuran sampai dengan 20 mm. Pada kondisi demikian Biomasnya akan mencapi 500 kali dibandingakan biomas pada fase naupli.

Gambar 2 : Siklus hidup artemia (FAO Corporate Document Repsitory)

6

Dalam tingkat salinitas rendah dan dengan pakan yang optimal, betina Artemia bisa mengahasilkan naupli sebanyak 75 ekor perhari. Selama masa hidupnya (sekitar 50 hari) mereka bisa memproduksi naupli rata-rata sebanyak 1011 kali. Dalam kondisi super ideal, Artemia dewasa bisa hidup selama 3 bulan dan memproduksi nauplii atau kista sebanyak 300 ekor (butir) per 4 hari. Kista akan terbentuk apabila lingkungannya berubah menjadi sangat salin dan bahan pakana sangat kurang dengan fluktuasi oksigen sangat tinggi antara siang dan malam hari. Artemia dewasa toleran terhadap selang suhu -18 hingga 40°C. Sedangkan tempertur optimal untuk penetasan kista dan pertubuhan adalah 25-30°C. Meskipun demikian hal ini akan ditentukan oleh strain masing-masing. Artemia menghendaki kadar salinitas antara 30-35 ppt, dan mereka dapat hidup dalam air tawar salama 5 jam sebelum akhirnya mati. Variable lain yang penting adalah pH, cahaya dan oksigen. pH dengan selang 8-9 merupakan selang yang paling baik, sedangkan pH di bawah 5 atau lebih tinggi dari 10 dapat membunuh Artemia. Cahaya minimal diperlukan dalam proses penetasan dan akan sangat menguntungkan bagi pertumbuhan mereka. Lampu standar grow-lite sudah cukup untuk keperluan hidup 2. Penetasan Kista Artemia Kista artemia dapat ditetaskan secara optimal, apabila sarat-sarat yang diperlukannya dapat dipenuhi. Beberapa syarat tersebut adalah: a) Salinitas antara 20-30 ppt (parts per thousand) atau 1-2 sendok teh garam per liter air tawar. Untuk buffer bisa ditambahkan magnesium sulfate (20 % konsentrasi) atau 1/2 sendok teh per liter air. b) Suhu air 26-28°C. c) Disarankan untuk memberikan sinar selama penetasan untuk merangsang proses. d) Aerasi yang cukup; untuk menjaga oksigen terlarut sekitar 3 ppm e) pH 8.0 atau lebih, apabila pH drop dibawah 7.0 dapat ditambahkan soda kue untuk menaikkan pH. f) Kepadatan sekitar 2 gram per liter.

7

g) Sebelumnya dapat dilakukan proses dekapsulisasi untuk melunakan cangkang.

2.2.2 Dhapnia Daphnia seringkali dikenal sebagai kutu air karena kemiripn bentuk dan cara bergeraknya yang menyerupai seekor kutu. Pada kenyataannya daphnia termasuk dalam golongan udang-udangan dan tidak ada hubugannya dengan kutu secara taxonomi. Daphnia merupakan udang-udangan renik air tawar dari golongan brachiopoda. Mereka bisa dikatakan masih saudara dengan artemia, meskipun gerakannya tampak meloncat seperti seekor kutu sebenarnya binatang ini berenang dengan menggunakan kakinya (sering disebut antena). Daphnia merupakan sumber pakan bagi ikan kecil, burayak dan juga ikan kecil lainnya. Kandungan proteinnya bisa mencapai lebih dari 70% kadar bahan kering. Secara umum dapat dikatakan terdiri dari 95% air, 4% protein, 0.54% lemak, 0.67% karbohidrat, dan 0.15% abu. Kepopulerannya sebagai pakan ikan selain karena kandungan gizi serta ukurannya adalah karena kemudahannya dibudidayakan sehingga dapat tersedia dalam jumlah mencukupi setiap saat. Adapun klasifikasi dari daphnia (menurut Müller, 1785), antara lain : Kingdom Filum Subfilum Klass Ordo Famili Genus Spesies : Animalia : Arthropoda : Crustacea : Branchiopoda : Cladocera : Daphniidae : Daphnia : Daphnia sp

Gambar 3 : Daphnia (Wikimedia, 2005)

8

1

Siklus Hidup Daphnia merupakan udang-udangan yang telah beradaptasi pada

kehidupan badan perairan yang secara periodik mengalami kekeringan. Oleh karena itu, dalam perkembangbiakannya (seperti halnya Artemia) dapat dihasilkan telur berupa kista maupun anak yang "dilahirkan". Telur berupa kista ini dapat bertahan sedemikian rupa terhadap kekeringan dan dapat tertiup angin kemanamana, sehingga tidak mengherankan kalau tiba-tiba dalam genangan air disekitar rumah kita ditemukan Daphnia. Dalam keadaan normal, dimana kualitas air sesuai dan jumlah pakan cukup maka daphnia akan menghasilkan keturunannya tanpa perkawinan (aseksual/parternogenesis). Dalam kondisi demikian hampir semua Daphnia yang ada adalah betina. Telur yang tidak dibuahi ini berkembang sedemikian rupa dalam kantung telur di tubuh induk, kemudian berubah menjadi larva. Seekor Daphnia betina bisa menghasilkan larva setiap 2 atau 3 hari sekali. Dalam waktu 60 hari/ekor betina bisa menghasilkan 13 milyar keturunan, yang semuanya betina. Tentu saja tidak semua jumlah ini bisa sukses hidup hingga dewasa, keseimbangan alam telah mengaturnya sedemikian rupa dengan diciptakannya berbagai musuh alami Daphnia untuk mengendalikan populasi mereka. Daphnia muda mempunyai bentuk mirip dengan bentuk dewasanya tetapi belum dilengkapi dengan "antena" yang panjang. Apabila kondisi lingkungan hidup tidak memungkinkan dan cadangan pakan menjadi sangat berkurang, beberapa Daphnia akan memproduksi telur berjenis kelamin jantan. Kehadiran jantan ini diperlukan untuk membuahi telur, yang selanjutnya akan berubah menjadi telur tidur (kista/aphippa). Seekor jantan bisa membuahi ratusan betina dalam suatu periode. Telur hasil pembuahan ini mempunyai cangkang tebal dan dilindungi dengan mekanisme pertahanan terhadap kondisi buruk sedemikian rupa. Telur tersebut dapat bertahan dalam lumpur, dalam es, atau bahkan kekeringan. Telur ini bisa bertahan selama lebih dari 20 tahun dan menetas setelah menemukan kondisi yang sesuai. Selanjutnya mereka hidup dan berkembang biak secara aseksual. Dan begitu seterusnya.

9

Gambar 4: Siklus hidup daphnia (O-FISH 2002) 2 Persyaratan hidup Daphnia hidup pada selang suhu 18-240C, selang suhu ini merupakan suhu optimal bagi pertumbuhan dan perkembangan daphnia. Diluar selang tersebut daphnia akan cenderung dorman. Daphnia membutuhkan PH sedikit alkalin yaitu antara 6.7 sampai 9.2. Seperti halnya hewan akuatik lainnya, pH tinggi dan kandunan ammonia tinggi akan menyebabkan daphnia mengalami kematian, oleh karena itu tingkat ammonia perlu dijaga dengan baik dalam suatu system budidaya. Seluruh spesies daphnia diketahui sangat sensitive terhadap ion-ion logm seperti Mn, Zn dan Cu, dan bahan beracun terlarut lain seperti pestisida, bahan pemutih dan deterjen. Daphnia merupakan filter feeder, artinya mereka "memfilter" air untuk medapatkan pakannya berupa mahluk-mahluk bersel tunggal seperti algae, dan jenis protozoa lain serta detritus organik. Selain itu, mereka juga membutuhkan vitamin dan mineral dari dalam air. Mineral yang harus ada dalam air adalah Kalsium, unsur ini sangat dibutuhkan dalam pembentukan "cangkang"nya. Oleh karena itu, dalam wadah pembiakan akan lebih baik apabila di tambahkan potongan batu kapur, karang (koral) batu apung dan sejenisnya. Selain dapat meningkatkan pH bahan tersebut akan memberikan suplai kalsium yang cukup bagi Daphnia. Beberapa jenis kotoran hewan yang sering dijadikan "media"

10

tumbuh Daphnia seringkali telah mengandung kalsium dalam jumlah cukup, dalam kondisi demikian kalsium tidak perlu lagi ditambahkan. Daphnia diketahui toleran dengan kadar oksigen terlarut rendah. Pada kondisi dengan kadar oksigen terlarut rendah, mereka akan membentuk hemoglobin untuk membantu pendistribusian oksigen dalam tubuh mereka. Kehadiaran hemoglobin ini sering menyebabkan Daphnia berwarna merah. Hal ini tidak akan terjadi apabila kadar oksigen terlarut cukup. (Warna Daphnia seringkali ditentukan oleh jenis pakan yang dikonsumsi, sebagai contoh apabila mereka mengkonsumsi algae, maka tubuhnya akan cenderung berwarna hijau). Suplai oksigen dapat diberikan pada kultur untuk menjamin kadar oksigen yang memadai. Oksigen dapat diberikan dalam bentuk gelembung besar, tanpa melalui distributor seperti batu berpori.

2.3 Tinjauan Umum Bahan Toksik 2.3.1 Herbisida Herbisida (dari bahasa Inggris herbicide) adalah senyawa atau material yang disebarkan pada lahan pertanian untuk menekan atau memberantas tumbuhan yang menyebabkan penurunan hasil (gulma). Lahan pertanian biasanya ditanami sejenis atau dua jenis tanaman pertanian. Namun demikian tumbuhan lain juga dapat tumbuh di lahan tersebut. Karena kompetisi dalam mendapatkan hara di tanah, perolehan cahaya matahari, dan atau keluarnya substansi alelopatik, tumbuhan lain ini tidak diinginkan keberadaannya. Herbisida digunakan sebagai salah satu sarana pengendalian tumbuhan "asing" ini. Terdapat dua tipe herbisida menurut aplikasinya: herbisida pratumbuh (preemergence herbicide) dan herbisida pascatumbuh (postemergence herbicide). Yang pertama disebarkan pada lahan setelah diolah namun sebelum benih ditebar (atau segera setelah benih ditebar). Biasanya herbisida jenis ini bersifat nonselektif, yang berarti membunuh semua tumbuhan yang ada. Yang kedua diberikan setelah benih memunculkan daun pertamanya. Herbisida jenis ini harus selektif, dalam arti tidak mengganggu tumbuhan pokoknya.

11

Pada umumnya herbisida bekerja dengan mengganggu proses anabolisme senyawa penting seperti pati, asam lemak atau asam amino melalui kompetisi dengan senyawa yang "normal" dalam proses tersebut. Herbisida menjadi kompetitor karena memiliki struktur yang mirip dan menjadi kosubstrat yang dikenali oleh enzim yang menjadi sasarannya. Cara kerja lain adalah dengan mengganggu keseimbangan produksi bahan-bahan kimia yang diperlukan tumbuhan. Contoh: a) Glifosat (dari Monsanto) mengganggu sintesis asam amino aromatik karena berkompetisi dengan fosfoenol piruvat b) Fosfinositrin mengganggu asimilasi nitrat dan amonium karena menjadi substrat dari enzim glutamin sintase. Pemakaian herbisida menuai kritik karena menyebarkan bahan kimia yang berbahaya bagi tumbuhan bukan sasaran. Meskipun sebagian besar herbisida masa kini tidak berbahaya bagi manusia dan hewan, herbisida yang tersebar (karena terbawa angin atau terhanyut air) berpotensi mengganggu pertumbuhan tumbuhan lainnya. Karena itu, herbisida masa kini dibuat supaya mudah terurai oleh mikroorganisme di tanah atau air. Kritik lainnya ditujukan pada pemakaian tanaman transgenik tahan herbisida tertentu. Meskipun dapat menekan biaya, teknologi ini bermotifkan komersial (meningkatkan penggunaan herbisida merek tertentu). Selain itu, teknologi ini dianggap tidak bermanfaat bagi pertanian non mekanik (pertanian dengan padat karya) atau berlahan sempit. Persistensi merupakan kemampuan herbisida tetap berada pada tanah dalam keadaan tetap aktif. Informasi tentang persistensi pestisida sangat perlu agar penggunaannya dapat memberikan hasil sesuai yang diharapkan. Persistensi ini merupakan ekspresi positif dan negatif dari herbisida itu sendiri. Semakin lama persistensi herbisida dalam tanah, maka akan semakin menguntungkan bila ditinjau dari segi efikasinya. Namun apabila ditinjau dari segi ekologi yang dikaitkan dengan kualitas lingkungan, maka persistensi herbisisda yang terlalu

12

lama tentunya merupakan hal yang tidak diinginkan dan harus dihindari karena akan mencemari lingkungan sekitar. Herbisida merupaan pestisida kationik dengan kelarutan di dalam air sangat tinggi. Bahan aktif yang terkandung dalam herbisida merupakan pestisida kationik (divalent), sehingga berpotensi mengalami pertukaran kation di dalam tanah. Ion paraquat dapat bereaksi dengan lebih dari satu ion COO- koloid organic tanah. Paraquat akan bereaksi dan diikat oleh dua gugus reaktif koloid organic tanah, mungkin oleh ion COO-, fenolat O-, kombinasi keduanya, atau kombinasi salah satu ion tersebut dengan radikal bebas. Penggunaan herbisida pada dasarnya untuk mengendalikan gulma yang tumbuh dipermukaan tanah, akan tetapi dalam aplikasinya dapat mengalami beberapa proses salah satunya teradsorpsi oleh partikel tanah. Hal ini menyebabkan herbisida tersebut tidak optimal dalam mengendalikan gulma, jika herbisida paraquat tersebut terakumulasi dalam tanah dalam jumlah yang besar dapat mencemari lingkungan. Adsorpsi herbisida di dalam tanah di pengaruhi oleh sifat tanah seperti jenis tanah, kandungan bahan organik, suhu, kelembaban, pH tanah serta macam kandungan mineral liat tanah. Keberadaan herbisida di dalam tanah dapat di deteksi dengan menggunakan metode Batch. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin besar konsentrasi herbisida paraquat yang diberikan, adsorpsi herbisida pada tanah dystrudept, dystrandept dan psamment juga semakin meningkat dan adsorpsi herbisida paraquat cendrung meningkat seiring dengan menurunnya pH tanah. Aplikasi herbisida pada suatu tanah bila melebihi kemampuan adsorpsi maksimum dapat mencemari lingkungan. Senyawa kimia yang terkandung dalam Herbisida yang meresap ke dalam tanah ada yang tidak dapat terurai. Dan ini dapat membentuk senyawa baru yang bisa berbahaya mencemari tanah dan air (Dr. Ir. Dermiyati, M.Agr.Sc, 2007)

2.3.1.1 Roundup Roundup adalah nama merek sistematik, spectrum luas herbisida yang dihasilkan oleh perusahaan Monsanto di US. Mengandung banyak bahan aktif glifosfat. Glifosfat merpakan herbisida yang paling banyak digunakan di Amerika

13

Serikat, dan Roundup adalah herbisida yang nomor satu diseluruh dunia, setidaknya sejak tahun1980. Bahan utama yang aktif dari Roundup adalah isopropylamine garam dari glifosat. Unsur penting lain Roundup adalah surfaktan POEA (polyethoxylated tallow amine), yang dikenal dengan keracunan satwa liar. Ini akan meningkatkan penetrasi herbisida dalam tanaman dan sel binatang. Efek yang terjadi pada perairan akan menyebabkan Ikan dan

air invertebrata lebih sensitif terhadap Roundup dari organisme darat. Glifosat umumnya kurang persisten dalam air daripada di tanah, dengan 12-60 hari persitensi Kanada diamati dalam air kolam, namun kegigihan dari lebih dari satu tahun telah diamati di kolam sedimen di Michigan dan Oregon. Uni Eropa mengklasifikasikan R51/53 Roundup sebagai “Beracun untuk organisme akuatik, dapat menyebabkan jangka panjang efek dalam lingkungan perairan.” Meskipun Roundup tidak terdaftar untuk menggunakan air dan studi tentang dampaknya pada amfibi menunjukkan hal itu adalah racun bagi mereka, para ilmuwan telah menemukan bahwa hal itu mungkin angin di rawa-rawa kecil di mana kecebong hidup, karena kurang hati-hati penyemprotan selama

aplikasi. Sebuah penelitian baru menemukan bahwa bahkan pada konsentrasi sepertiga dari konsentrasi maksimum yang diharapkan dalam alam, roundup masih membunuh hingga 71 persen dari kecebong dibesarkan di luar tank.

2.3.2 Methylen Blue Metil Biru (Methylene Blue) merupakan pewarna thiazine yang kerap digunakan sebagai bakterisida dan fungsida pada akuarium. Di beberapa tempat penggunaan bahan ini sudah semakin tidak populer karena diketahui mempunyai pengaruh buruk terhadap filtrasi biologi dan kemampuan warnanya untuk melekat pada kulit, pakaian, dekorasi akuarium dan peralatan lainnya termasuk lem akuarium. Diduga bahan inipun dapat berakibat buruk pada tanaman. Metil biru diketahui efektif untuk pengobatan ichthyopthirius (white spot) dan jamur. Selain itu, juga sering digunakan untuk mencegah serangan jamur pada

14

telur ikan. Metil biru biasanya tersedia sebagai larutan jadi di toko-toko akuarium, dengan konsenrasi 1 - 2 persen. Selain itu tersedia pula dalam bentuk serbuk.

2.3.2.1 Dosis dan Cara Pemberian Untuk infeksi bakteri, jamur dan protozoa dosis yang dianjurkan adalah 2 ml larutan dengan konsentrasi 1 persen per 10 liter air akuarium. Perlakuann dilakukan malalui perendaman jangka panjang. Hal ini hendaknya dilakukan pada akuarium terpisah, atau akuarium karantina untuk menghindari terjadinya efek buruk pada sistem filtrasi biologi dan menempelnya warna pada dekorasi akuarium. Sebagai profilaktik untuk mencegah serangan jamur pada telur, dosis yang dianjurkan adalah 2mg/liter. Cara yang lebih mudah adalah dengan menambahkan metil biru pada bak pemijahan setetes demi setetes. Pada setiap tetesan biarkan larutan metil biru tersebut tersebar secara merata. Tetesan dihentikan apabila air akuarium telah berwarna kebiruan atau biru jernih (tembus pandang). Artinya isi di dalam akuarium tersebut masih dapat dilihat dengan jelas. Perlakuan ini cukup dilakukan sekali kemudian dibiarkan hingga warna terdegradasi secara alami. Dengan demikian, apabila telur menetas nanti dan burayak makan untuk pertama kali diharapkan sudah tidak akan terpengaruh oleh kehadiaran metil biru tersebut. Setelah telur menetas, penggantian air sebanyak 5% setiap hari dapat dilakukan untuk membantu mengurangi kadar metil biru dalam air tersebut, dan juga membantu mengurangi akumulasi bahan organik dan amonium yang mungkin terbentuk dalam bak pemijahan. Pada spesies ikan yang memiliki waktu inkubasi telur lebih dari 4 hari maka pemberian larutan metil biru dapat diberikan setiap dua hari atau tiga hari sekali.

15

Tabel 1 : Sifat Kimia-Fisika Methylen Blue Titik Didih 100°C> Kepadatan (H20 = 1) Tekanan Uap (mm Hg dan Temperature) Kepadatan Uap (udara=1) 18-20°C 0.6 Laju Evaporasi (n-butyl alcohol= ) Kelarutan dalam air

1.02 1 Larut

Warna dan Bau:Biru-ungu, tidak berbau. Sumber : O-Fish Efek negatif dari penggunaan methilen blue pada suatu media pemeliharaan ikan adalah dapat merusak filter biologis, kandungan warnanya yang dapat melekat pada ornamen-ornamen akuarium jika digunakan secara berlebihan. Selain itu juga dapat merusak tanaman air, hal ini akan berakibat fatal jika ada di dalam perairan karena tanaman air sebagai produsen utama di perairan tidak dapat menyuplai oksigen terlarut di perarian jika tergangu oleh adanya methilen blue dalam konsentrasi yang tinggi ini.

2.3.3 Ekstrak Nimba Pohon Nimba atau dalam bahasa latinnya Azadirachta indica A juss biasa dijadikan tanaman peneduh jalan. Diameter rimbunan daunnya yang dapat mencapai 10 meter menjadikan pohon ini cocok dijadikan sebagai peneduh jalan. Pohon asal India yang di Bali dikenal dengan nama Intaran dan di Jawa dengan nama Imbau ini dapat tumbuh hingga ketinggian 30 meter dan diameter batang mencapai 2-5 meter. Bunganya kecil berwarna putih biseksual yang tersusun pada ranting secara aksilar. Bunga pohon nimba mempunyai aroma seperti madu sehingga banyak menarik lebah. Daun Nimbah tersusun saling berhadapan dalam satu tangkai, kecuali daun ujungnya. Daun Nimba ini memiliki banyak kesamaan dengan daum Mindi (Melia azedarach). Secara botani, kedua tanaman ini memang berbeda namun kandungan kimia tumbuhan itu hampir sama karena mengandung azadirachtin. Buah pohon nimba berbentuk bulat lonjong seperti melinjo berukuran 2 cm. Buah matang berwarna kuning atau hijau kekuningan dan mengandung

16

daging buah yang berasa manis menyeliputi biji. Bagian yang paling banyak dimanfaatkan dari pohon Nimba adalah daun dan biji (kernel). Bagian biji banyak mengandung minyak dan bahan aktif pestisida yang disebut azadirakhtin. Kandungan azadirakhtin biji Nimba berkisar antara 0,1 hingga 0,5% dari bobot keringnya. Azadirakhtin termasuk kelompok senyawa tripenoid dengan kerangka struktur limonoid. Adapun klasifikasi dari daun nimba adalah sebagai berikut : Divisi Subdivisi Kelas Ordo Famili Genus Spesies : Spermatophyta : Angiospermae : Dicotyledonae : Rutales : Meliaceae : Azadirachta : Azadirachta Indica A. Juss

Gambar 5. Daun Nimba (Sumber : Brigade Proteksi Tanaman Situbondo 2008) 2.4 Tinjuan Umum LC50 (Lethal Concentration 50) Standar ukuran dari toksisitas menengah sekitarnya yang akan membunuh separuh dari sampel populasi tes spesifik-hewan di ditentukan periode melalui pemaparan melalui inhalasi (respirasi). LC50 diukur dalam mikrogram (atau miligram) dari materi per liter, atau bagian per juta (ppm), udara atau air; menurunkan jumlah lebih beracun materi. Digunakan dalam perbandingan dari toksisitas, LC50 nilai-nilai tidak dapat secara langsung ekstrapolasi dari satu logam ke yang lain atau ke manusia. Juga disebut rata-rata konsentrasi mematikan atau populasi konsentrasi kritis 50. Ditulis juga sebagai LC50.

17

Yang dimaksud dengan LC50 (Median Lethal Concentration) yaitu konsentrasi yang menyebabkan kematian sebanyak 50% dari organisme uji yang dapat diestimasi dengan grafik dan perhitungan, pada suatu waktu pengamatan tertentu, misalnya LC50-48 jam, LC50-96 jam (Dhahiyat dan Djuangsih, 1997) sampai waktu hidup hewan uji.

18

BAB III METODOLOGI PRAKTIKUM 3.1 Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum Praktikum uji toksisitas akut ini dilaksanakan pada hari Jumat sampai dengan Sabtu tanggal 20-21 November 2009 pada pukul 08.00-09.40 WIB yang bertempat di Laboratorium Akuakultur Gedung Dekanat Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universtias Padjadjaran dan pengamatanya dilaksanakan selama 24 jam.

3.2 Alat dan Bahan 3.2.1 Alat-alat Tabel 2 : Alat-Alat Uji Toksisitas Akut No 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Nama Alat Gelas Kimia Pipet Kegunaan Sebagai wadah cairan stok dan organisme uji Untuk mengambil organisme uji (Atemia dan Daphnia) Gelas Ukur Label Untuk menakar bahan toksik Untuk memberi nama jenis organisme uji dan bahan toksiknya. Vial Alat suntik Alat penunjuk waktu Petridish Tempat hewan uji Untuk mengambil bahan toksik Untuk melihat waktu dedah hewan uji Wadah untuk menghitung jumlah hewan uji sebelum dimasukkan ke vial Luv Erlenmeyer Untuk memudahkan melihat hewan uji Wadah pengenceran larutan

19

3.2.2 Bahan Tabel 3 : Bahan-Bahan Uji Toksisitas Akut No 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Nama bahan Larva Artemia Larva Daphnia Herbisida Methylen blue Ekstra nimba Air tawar Air garam Aquades Hewan uji Hewan uji Bahan toksik Bahan toksik Bahan toksik Media kultur daphnia Media kultur artemia Media pengenceran Kegunaan

3.3 Prosedur Kerja 3.3.1 Prosedur Pelaksanaan Uji Toksisitas Akut 1. Menyiapkan larva artemia, yang diawali dengan dekapsulisasi dan penetasan kista artemia, serta menyiapkan daphnia. 2. Dalam vial yang telah diisi air medium (air laut/air garam) untuk larva artemia sebanyak 9ml. 3. Masukkan masing-masing 10 ekor larva artemia yang berumur 24 jam dengan menggunakan transpettor kedalam vial yang telah diisi air medium sebanyak 9ml hingga mencapai 10 ml. 4. Masukkan bahan toksik uji (herbisida, methylen blue, dan ekstrak nimba) ke dalam vial, dengan masing-masing konsentrasi yang telah di tentukan sebanyak 1% (100ml). 5. Lakukan pengamatan selama 24 jam dengan selang waktu pngamatan 15 menit, 30 menit, 1 jam, 2 jam, 4 jam, 8 jam, 16jam, dan 24jam. 6. Lakukan perhitungan mortalitas jumlah larva yang mati.

20

3.3.2 Pengenceran 1. Herbisida Konsentrasi Awal : 486 g/l = 486 000µg/mL 1 ml V1N1 = V2N2 (486.000)(1) = (X1)(100) 486 µg/mL X1 = 486 µg/mL

V1N1 = V2N2 100 mL 1 ml (486)(1) = (X2)(10) X2 = 48.6 µg/mL

48.6 µg/mL

10 ml

1 ml

V1N1 = V2N2 (48.6)(1) = (X2)(10)

4.86 µg/mL

X2 = 4.86 µg/mL

10 ml

1 ml

V1N1 = V2N2 (4.86)(1) = (X2)(10)

0.486 µg/mL

X2 = 0.486 µg/mL

10 ml

21

2. Methylen Blue Konsentrasi Awal = 20.000 ppm 1 ml V1 N1 = V 2 N2 (486.000)(1) = (X1)(100) 200 µg/mL V1 = 486 µg/mL

V1 N1 = V 2 N2 100 mL 1 ml (V1)(200) = (10)(20) V1 = 1 µg/mL

20 µg/mL

10 ml

1 ml

V1 N1 = V2 N2 (V1)(20) = (10)(2)

2 µg/mL

V1 = 1 µg/mL

10 ml

1 ml

V1 N1 = V2 N2 (V1)(2) = (10)(0.2)

0.2 µg/mL

V1 = 1 µg/mL

10 ml

22

3. Ekstrak nimba Konsentrasi Awal 1 ml : 10 g/l = 10.000 µg/mL V1N1 = V2N2 (V1)(10.000) = (100)(100) V1 = 1 mL 100 µg/mL V1N1 = V2N2 100 mL 1 ml (V1)(100) = (10)(10) V1 = 1 mL 10 µg/mL

10 ml

1 ml

V1N1 = V2N2 (V1)(100) = (10)(1)

1 µg/mL

V1 = 1 mL

10 ml

1 ml

V1N1 = V2N2 (V1)(100) = (10)(0.11)

0.1 µg/mL

V1 = 1 mL

23

3.4 Analisis Data 3.4.1 Prosedur Analisis Data Analisis data yang digunakan untuk menentukan nilai LC50-24 jam adalah analisis probit yang mengacu pada Hubert (1979) yaitu, sebagai berikut : Hubungan nilai logaritma konsentrasi bahan toksik uji dan nilai probit dari persentase mortalitas hewan uji merupakan fungsi linear Y= a + bX. Nilai LC5024 jam diperoleh dari anti log m, dimana m merupakan logaritma konsentrasi klorin pada Y = 5, yaitu nilai probit 50% hewan uji. Nilai m diperoleh dari :

y  ax  bx

bx  y  a
x  y a b

Dimana x = m dan y = 5, jadi persamaan regresinya menjadi :

m

5a b
1 n  X n

Nilai a dan b dapat diperoleh berdasarkan persamaan berikut :


b 

XY 
2

 X
a  1 n

 1



Y X 
2

 Y

 b X

nilai LC50-24 jam diperoleh sebagai berikut : LC50-24 jam = anti log m

24

Keterangan : Y X n a b m = Nilai probit mortalitas = Logaritma konsentrasi bahan uji = Banyaknya perlakuan = Konstanta = Slope/ kemiringan = Nilai X pada Y = 5

Setelah dihitung menggunakan metode Hubert maka data divalidasi dengan program komputer bernama EPA PROBIT VER. 1.5.

25

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil 4.1.1 Artemia 1. Data Per Kelompok Kelompok : 1,2, dan 3

Bahan Toksik : Herbisida Konsentrasi Waktu 15’ 30’ 1 2 4 6 8 16 24 Jumlah 1 3 6 9 48.6 ppm 2 1 1 5 7 3 1 1 4 6 1 4 1 1 1 2 9 4.86 ppm 2 2 2 2 6 3 2 2 4 8 1 1 1 1 1 4 0.486ppm 2 2 1 2 5 3 1 1 1 1 4 8

26

Kelompok

: 4,5,dan 6

Bahan Toksik : Methylen Blue Konsentrasi Waktu 15’ 30’ 1 2 4 6 8 16 24 Jumlah 1 1 1 1 3 20 ppm 2 1 2 3 3 2 2 1 1 3 2 6 2 ppm 2 1 1 1 5 1 9 3 1 6 7 1 1 1 0,2 ppm 2 1 1 1 2 5 3 1 2 1 1 1 6

Kelompok

: 7,8, dan 9

Bahan Toksik : Ekstrak Nimba Konsentrasi Waktu 15’ 30’ 1 2 4 6 8 16 24 Jumlah 1 2 1 2 2 7 10 ppm 2 1 1 2 3 7 3 1 1 3 1 6 1 7 7 1 ppm 2 1 1 7 9 3 6 6 1 1 1 1 3 0,1 ppm 2 1 2 3 3 2 2

27

2. Data Kelas Artemia Jenis Hewan Uji Jenis Bahan Toksik : Artemia : Herbisida Konsentrasi 48.6 ppm 1 2 3 Rerata 90 70 60 73.3 4.86 ppm 90 60 80 76.67 0.486ppm 40 50 80 56.67

Ulangan

Data Analisis Probit LC50-24 jam d 48.6 4.86 0.486 n 30 30 30 r 22 23 17 p 73.33 76.67 56.67 x 1.69 0.69 -0.31 2.06 b = b a = 1/n (∑Y – b ∑X), b a m y 5.61 5,74 5.18 16.53 x2 2.84 0.47 0.10 3.14 x.y 9.46 3.94 -1.62 11.78

JUMLAH b ∑ XY – 1/n (∑X ∑Y), = ∑X2 – 1/n (∑X)2

m = 5-a b

(11.78) – 1/3 ((2.06)(16.53)) 3.14 – 1/3 (2.06)2 (11.78) + 11.35) = 3.14 – 1.41 = 0.22 = 1/3 (16.53 – 0.45) = 5.36 = 5 – 5.36 0.22 = - 1.69

LC50-24 jam artemia herbisida = anti log m = anti log -1.69 = 0.02 ppm

28

29

30

Jenis Hewan Uji Jenis Bahan Toksik

: Artemia : Methylen Blue Konsentrasi 20 µg/mL 1 2 3 Rerata 30 30 20 26.67 2 µg/mL 60 90 70 73.33 0.2 µg/mL 10 50 60 40

Ulangan

Data Analisis Probit LC50-24 jam d 20 2 0.2 n 30 30 30 r 8 22 12 p 26.67 73.33 40 x 1.30 0.30 -0.70 0.90 b b b a = /n (∑Y – b ∑X),
1

y 5.18 5.61 4.75 14.75

x2 1.69 0.09 0.49 2.27

x.y 5.71 1.69 -3.32 4.08

JUMLAH b = ∑ XY – 1/n (∑X ∑Y), ∑X2 – 1/n (∑X)2

= =

(4.08) – 1/3 ((0.90)(14.75) 2.27 – 1/3 (0.90)2 4.08 – 4.43 2.27 – 0.27

= -0.18

= 1/3 (14.75 – (-0.18)(0.90)) = 1/3 (14.75 – (-0.162)) = 4.97 5-a m = m = 5 – 4.97 b -0.18 = -0.16 LC50-24 jam artemia methylen blue = anti log m = anti log -0.16 = 0.69 ppm a

31

32

33

Jenis Hewan Uji Jenis Bahan Toksik

: Artemia : Ekstrak Nimba Konsentrasi 10 µg/mL 1 2 3 70 70 60 66.67 1 µg/mL 70 90 60 73.33 0.1 µg/mL 30 30 20 26.67

Ulangan

Rerata

Data Analisis Probit LC50-24 jam d 10 1 0.1 n 30 30 30 r 20 22 8 p 66.67 73.33 26,67 x 1 0 -1 0 b b b a = /n (∑Y – b ∑X),
1

y 5.44 5.61 4.39 15.44

x2 1 0 1 2

x.y 5.44 0 -4.39 1,05

JUMLAH b ∑ XY – 1/n (∑X ∑Y), = ∑X2 – 1/n (∑X)2

= =

(1.05) – 1/3 ((0)(15.44) 2 – 1/3 (0)2 1.05 2

= 0.53 = 1/3 (15.44 – (0.53)(0)) = 1/3 (15.44) = 5.15

a

m =

5-a b

m = 5 – 5.15 0.53

= - 0.28 LC50-24 jam artemia ekstrak nimba = anti log m = anti log -0.28 = 0.53 ppm

34

35

36

4.1.2 Daphnia Jenis Hewan Uji Jenis Bahan Toksik Ulangan 48.6 µg/mL 1 2 3 Rerata 90 90 100 93.33 : Daphnia : Herbisida Konsentrasi 4.86 µg/mL 80 90 80 83.33 0.486 µg/mL 50 60 60 56.67

Data Analisis Probit LC50-24 jam d 48.6 4.86 0.486 n 30 30 30 r 19 25 17 p 63.33 83.33 56.67 x 1.69 0.69 -0.31 2.06 b = ∑ XY – 1/n (∑X ∑Y), ∑X2 – 1/n (∑X)2 b b b a = 1/n (∑Y – b ∑X), a = = y 5.33 5,95 5.18 16.46 x2 2.84 0.47 0.10 3.41 x.y 8.99 4.09 -1.62 -13.39

(-13.39) – 1/3 ((2.06)(16.46) 3.41 – 1/3 (2.06)2 -13.39 – 11.30 3.41 – 1.41

= -12.37 = 1/3 (16.46 – (-12.37)(2.06)) = 1/3 (16.46 + 25.49) = 13.98

m =

5-a b

m = 5 – 13.98 -12.37 = 0.73

LC50-24 jam daphnia herbisida = anti log m = anti log 0.73 = 5.32 ppm

37

38

39

Jenis Hewan Uji Jenis Bahan Toksik Ulangan

: Daphnia : Methylen Blue Konsentrasi 20 µg/mL 2 µg/mL 50 60 60 56.67 0.2 µg/mL 30 20 40 30

1 2 3 Rerata

70 70 80 73.33

Data Analisis Probit LC50-24 jam d 20 2 0.2 n 30 30 30 r 22 17 9 p 73.33 56.67 30.00 x 1.30 0.30 -0.70 0.90 b b b a = 1/n (∑Y – b ∑X), a = = = 0.57 = 1/3 (15.27 – (0.57)(0.90)) = 1/3 (15.27 – 0.52) = 4.92 y 5.61 5.18 4.48 15.27 x2 1.69 0.09 0.49 2.27 x.y 7.30 1.56 -3.13 5.73

JUMLAH b = ∑ XY – 1/n (∑X ∑Y), ∑X2 – 1/n (∑X)2

(5.73) – 1/3 ((0.90)(15.27) 2.27 – 1/3 (0.90)2 5.73 – 4.58 2.27 – 0.27

m = 5-a b

m = 5 – 4.92 0.57

LC50-24 jam daphnia methylen blue = anti log m = anti log 0.14 = 1.39 ppm

40

41

42

Jenis Hewan Uji Jenis Bahan Toksik Ulangan

: Daphnia : Ekstrak Nimba Konsentrasi 10 µg/mL 1 µg/mL 60 40 40 46.67 0.1 µg/mL 30 40 30 33.33

1 2 3 Rerata

80 90 90 86.67

Data Analisis Probit LC50-24 jam d 10 1 0.1 n 30 30 30 r 26 14 10 p 86.67 46.67 33.33 x 1 0 -1 0 b b b a = = y 6.13 4.92 4.56 15.61 x2 1 0 1 2 x.y 6.13 0 -4.56 1.57

JUMLAH b = ∑ XY – 1/n (∑X ∑Y), ∑X2 – 1/n (∑X)2

(1.57) – 1/3 ((0)(15.61) 2 – 1/3 (0)2 1.57 – 0 2–0

a

= /n (∑Y – b ∑X),

1

= 0.79 = 1/3 (15.61 – (0.79)(0)) = 1/3 (15.61 – 0) = 5.20

m = 5-a b

m = 5 – 5.20 0.79 = -0.26

LC50-24 jam daphnia ekstrak nimba = anti log m = anti log -0.26 = 0.55 ppm

43

44

45

4.2 Pembahasan 4.2.1 Artemia Beberapa diantara hewan uji (Biotest) terdapat kelemahan diantaranya ialah, berbedanya jangka waktu perlakuan dari prosedur praktikum. Pada prosedur praktikum artemia yang digunakan harulah yang sudah berada pada waktu 24jam setelah penetasan. Dipilihnya artemia yang telah berumur 24jam karena pada umur 24 jam ini artemia sudah dewasa dan sudah bias berkembang biak. Tidak seimbangnya kematian pada masing masing konsentrasi yang dipaparkan pada masing-masing keolompok terhadap artemia yang berada didalam vial ini juga disebabkan oleh faktor manusia (human erorr) dan lemahnya daya tahan tubuh artemia itu sendiri. Alasan mengapa adanya faktor kesalahan manusia ini ialah karena para praktikan belum paham betul cara melakukan praktikum ujitoksisitas akut dan adanya kesalah pahaman dalam pengamatan serta penentuan waktu yang terkadang terlupa karena sesuatu hal. Pada toksik herbisida dengan pemberian konsentrasi sebesar 48.6 µg/mL, 4.86 µg/mL, dan 0.486 µg/mL didapatkan hasil yang tidak stabil.pada konsentrasi 48.6 µg/mL dan 0.486 µg/mL rerata masing-masing mortalitas artemia ialah 73.33% dan 56.67% sedangkan pada konsentrasi 4.86 µg/mL rerata mortalitas artemia ialah 76.67%. Naik turunnya rerata mortalitas artemia ini kurang lebih karena tidak mengindahkan aturan praktikum yang benar, yaitu di amati didalam labortorium namun pada kenyataannya, praktikum uji toksisitas akut ini berada diluar laboratorium. Vial yang telah diisi dengan artemia yang telah diberikan toksik herbisida ini dapat berpengaruh besar, karena dibawa kemana-mana (sesuai kemana sang pembawa itu pergi) dan lamanya vial dalm posisi tetutup sehingga suplai oksigen kedalam vial tidak ada. Pada toksik methylen blue dengan pemberian konsentrasi sebesar 20 µg/mL, 2 µg/mL, dan 0.2 µg/mL, didapatkan hasil yang juga tidak stabil. Pada konsentrasi 10 µg/mL reratanya ialah 26.67%, pada konsentrasi 1 µg/mL reratanya ialah 73.33% dan pada konsentrasi 40 µg/mL reratanya ialah 40%. Hal

46

ini juga dapat disebabkan oleh faktor manusia dan juga daya tahan tubuh artemia tersebut. Pada toksik ekstrak nimba dengan pemberian konsentrasi sebesar 10 µg/mL, 1 µg/mL, dan 0.1 µg/mL, didapatkan hasil yang juga tidak stabil. Pada konsentrasi 10 µg/mL rerata yang didapat ialah 66.67%, pada konsentrasi 1 µg/mL rerata yang didapat ialah 73.33%, dan pada konsentrasi 0.1 µg/mL rerata yang didapat ialah 26.67%. Ini juga merupakan hasil yang tidak stabil. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa konsentrasi 1 µg/mL menunjukkan angka mortalitas yang terbesar. Pembahasan dari perbandingan nilai LC50 dari tiap-tiap bahan toksik adalah sebagai berikut, pada hewan uji artemia nilai LC50 herbisida adalah 0,02 ppm, nilai LC50 methilyen blue adalah 0,69 ppm dan nilai LC50 ekstrak nimba adalah 0,53 ppm. Jika dilihat dari nilai-nilai tersebut maka herbisida merupakan bahan yang paling toksik karena pada konsentrasi 0,02 ppm saja sudah membunuh 50% dari hewan uji disbanding dengan methilyen blue dan ekstrak nimba.

4.2.2 Daphnia Pada uji coba dengan mengunakan toksik herbisida terhadap daphnia terlihat bahwa pada konsentrasi 48.6 µg/mL bahwa jumlah mortalitas pada daphnia ialah 93.33%. dibandingkan dengan herbisida dengan konsentrasi yang dipaparkan sebesar 4.86 µg/mL dan 0.486 µg/mL. Hal ini menyatakan bahwa pada konsentrasi 48.6 µg/mL merupakan konsentrasi yang besar dan dapat membunuh ikan mas dengan jumlah yang banyak. Pemaparan konsentrasi uji toksik dengan toksik methylen blue dengan tiga konsentrasi uji yaitu 20 µg/mL, 2 µg/mL, 0.2 µg/mL. jumlah mortalitas terbesar pada toksik methylen blue ini ialah pada konsentrasi 20 µg/mL yaitu sebesar 73.33%. Toksik ekstrak nimba yang dipaparkan terhadap 30 hewan uji yaitu daphnia juga dapat membunuh ikan. Konsentrasi yang diberikan diantaranya ialah 10 µg/mL, 1 µg/mL, 0.1 µg/mL. hasil yang didapat ialah jumlah mortalitas terbesar berada di konsentrasi 10 µg/mL.

47

Pada hewan uji daphnia nilai LC50 Herbisida adalah 5,32 ppm, nilai LC50 Methilyen blue adalah 1.39 ppm dan nilai LC50 Ekstrak Nimba adalah 0,55 ppm. Nilai ini hampir berbanding terbalik dengan nilai LC50 yang dipaparkan ke hewan uji artemia. Pada hewan uji daphnia ekstrak nimba merupakan bahan yang paling toksik dibandingkan dengan methylen blue dan herbisida.

48

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan Pada hewan uji artemia nilai LC50 herbisida adalah 0,02 ppm, nilai LC50 methilyen blue adalah 0,69 ppm dan nilai LC50 ekstrak nimba adalah 0,53 ppm. Pada hewan uji daphnia nilai LC50 Herbisida adalah 5,32 ppm, nilai LC50 Methilyen blue adalah 1.39 ppm dan nilai LC50 Ekstrak Nimba adalah 0,55 ppm. disajikan dalam tabel berikut ini : Tabel 4 : Nilai Hasil LC50 Praktikum Berdasarkan Metode Hubert Artemia Herbisida Methylen Blue Ekstrak Nimba 0,02 0,69 0,53 Daphnia 5,32 1,39 0,55

Nilai LC-50 ini menunjukan tingkat toksisitas bahan kimia terhadap organisme uji. Semakin kecil nilai LC-50 maka semakin tinggi tingkat toksisitasnya. Pada hewan uji artemia herbisida merupakan bahan toksik yang berbahaya. Namun sebaliknya pada daphnia herbisida merupakan bahan yang relatif lebih aman. Padahal herbisida merupakan bahan yang paling berbahaya, kesalahan dalam praktikum yang menyebabkan perbedaan ini. Penggunaan konsentrasi toksik yang berlebih dapat memperbesar jumlah mortalitas plankton yang berada dekat dengan wilayah penggunaan bahan uji tersebut. Namun lain hal dengan hewan uji artemia yang dilakukan oleh mahasiswa. Terlihat bahwa ketidak sesuaian ritme mortalitas hewan uji pada setiap kelompok akan membuat praktikan ini menjadi bingung sendiri.

49

5.2 Saran Hendaknya praktikum yang dilakukan harus dilakukan dengan teliti dan tidak membawa sampel keluar dari laboratorium. Adanya pemindahan tempat dapat membuat hewan uji (pada praktikum ini praktikan menggunakan hewan uji artemia dan daphnia) menjadi stres dan mudah untuk mengalami mortalitas. Adapun pengaruh dari pemindahan tersebut dapat berakibat fatal karena pemindahan tempat haruslah secepat mungkin dan harus selalu mendapatkan oksigen untuk melangsungkan hidup mereka, dan tidak bolesh terlalu banyak goncangan yang terjadi pada tabung vial.

50

DAFTAR PUSTAKA

http://pustaka.unpad.ac.id/wpcontent/uploads/2009/04/uji_toksisitas_limbah_cair_ tahu_sumedang.pdf

http://translate.google.co.id/translate?hl=id&sl=en&u=http://www.businessdiction ary.com/definition/lethal-concentration-50LC50.html&ei=h146S5XuL86LkAWakPT3CA&sa=X&oi=translate&ct=resu lt&resnum=1&ved=0CAwQ7gEwAA&prev=/search%3Fq%3DLethal%2BC oncentration%2B50%26hl%3Did%26client%3Dfirefoxa%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DM0N

http://pencemaran.files.wordpress.com/2008/09/ekotoksikologi-organisme2.ppt

http://elib.iatmi.or.id/uploads/IATMI_3-M31_FP_08_(Uji_Toxicity_Characteristic_Leaching_Pr.pdf

http://www.breederkoi.com/article/article_detail.asp?cat=5&id=28

http://translate.google.co.id/translate?hl=id&sl=en&tl=id&u=http://en.wikipedia.o rg/wiki/Roundup

http://loveyourearthbaby.blogspot.com/2009/03/tugas-ptat_25.html

51

II. Mata Acara Praktikum : Uji Toksisitas Sub-Lethal BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Bahan toksik dalam suatu perairan biasanya bersifat larut dalam air, kemudian akan terpapar ke organisme yang berada di perairan tersebut. Toksisitas bahan toksik ada yang bersifat akut seperti praktikum sebelumnya dan ada yang bersifat khronis yaitu proses peracunanya tidak langsung mematikan organisme namun membutuhkan waktu untuk proses peracunanya. Uji toksisitas sub-lethal (sub khronis) dilakukan selama beberapa hari untuk mengamati bagaimana kondisi ikan pada saat pemaparan bahan toksik. Pengamatan dilakukan dengan melihat kondisi fisik ikan seperti bukaan operculum, lendir, aktfi atau tidaknya ikan. Uji ini merupakan bagian dari uji toksisitas kuantitatif yang dilakukan dengan perbedaan larutan kimia/polutan dalam jangka waktu relative lama efek sublethal dapat terjadi dalam beberapa hari, minggu sampai beberapa bulan. Parameter yang diamati umunya gejala fisiologis seperti aktifitas gerak (aktif/pasif), gerak renang, gerak operculum/mulut ikan dalam aktifitas repitasi gejala klinis(produksi lender pada sisik, keadaan insang).

1.2 Tujuan Praktikum Untuk mengetahui dan menganalisis respon-respon fisiologis hewan uji (benih ikan mas) terhadap pemberian bahan toksik (FeCl2, PbO, dan CuSO4).

1.3 Manfaat Praktikum Mahasiswa mampu menentukan toksisitas bahan toksik setelah melakukan praktikum uji toksisitas sub-lethal.

52

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tinjauan Umum Uji Toksisitas Sub-Lethal Uji toksisitas sub lethal merupakan bagian dari uji toksisitas kuantitatif yang dilakukan dalam jangka waktu yang lama sebagai akibat dari pemaparan jangka waktu yang lama terhadap suatu bahan kimia. Efek akut dapat terjadi dalam selang waktu beberapa bulan atau tahun, dengan kata lain uji toksisitas sub lethal ini bersifat permanen, lama, konstan, kontinu, irreversible. Parameter yang dapat diamati dalam uji toksisitas sub lethal antara lain keadaan fisiologis organism uji, tingkah laku, biokimiawi, perubahan biologis hewan uji, dan juga dapat mengitung nilai hematokritnya. Tujuan utama : a. Skrining kedua terhadap mutagenesitas b. Uji interaksi (sinergisme, antagonisme) c. Uji farmakokinetika d. Uji perilaku Pemaparan bahan toksik dapat dilakukan dengan berbagai cara diantaranya: a. Static Test (Uji Statis) Medium statis (tergenang/ tenang/ stagnan) dalam wadah uji tanpa diganti, dengan pengenceran bahan toksik. b. Renewal Test (Semi-Statis) Hampir sama dengan Uji Statis, namun medium uji diganti secara periodik dalam selang waktu tertentu. c. Resirculation Test Medium uji dan media kontrol dipompa menuju alat filter untuk menjaga kualitas airnya, dengan tidak mengurangi taraf konsentrasi.

53

d. Flow Trough Test Medium uji dan media kontrol bebas mengalir masuk dan keluar wadah uji di mana di dalamnya hewan uji dipaparkan. Taraf konsentrasi dipaparkan dengan alat otomatis.

2.2 Tinjauan Umum Biota Uji (Ikan Mas Cyprinus carpio) 2.2.1 Ikan Mas Ikan Mas (Cyprinus carpio L.) dapat digunakan sebagai hewan uji hayati karena sangat peka terhadap perubahan lingkungan (Brinley cit. Sudarmadi, 1993). Di Indonesia ikan yang termasuk famili Cyprinidae ini termasuk ikan yang populer dan paling banyak dipelihara rakyat, serta mempunyai nilai ekonomis. Ikan mas sangat peka terhadap faktor lingkungan pada umur lebih kurang tiga bulan dengan ukuran 8–12 cm. Disamping itu ikan mas di kolam biasa (Stagnan water) kecepatan tumbuh 3 cm setiap bulannya (Arsyad dan Hadirini cit. Sudarmadi, 1993).

54

Phylum Sub phylum
Class Sub class Ordo Family Genus Spesies

: Chordata : Pisces
: Osteichthyes : Actinopterygii : Cypriniformes : Cyprinidae : Cyprinus : Cyprinus carpio

Gambar 6 : Benih Ikan Mas (okezone.com, 2008)

Hal – hal yang dapat mempengaruhi ikan mas (Cyprinus carpio L.) dalam fungsinya sebagai Early Warning System adalah sebagai berikut : - Suhu Suhu mempengaruhi aktifitas ikan, seperti pernapasan, pertumbuhan dan reproduksi (Huet, 1970 dalam Lelono, 1986). Suhu air sangat berkaitan erat dengan konsentrasi oksigen terlarut dan laju konsumsi oksigen hewan air. Pada perairan umum semakin bertambah kedalaman air maka suhu semakin semakin menurun (Ahmad dkk, 1998). - pH Toksisitas suatu senyawa kimia dipengaruhi oleh derajat keasaman suatu media. Nilai pH penting untuk menentukan nilai guna suatu perairan. Batas toleransi organisme air terhadap pH adalah bervariasi tergantung suhu, kadar oksigen terlarut, adanya ion dan kation, serta siklus hidup organisme tersebut

55

(Pescond, 1973). Sedang titik batsas kematian organisme air tehadap pH adalah pH 4 dan pH 11. (Caborese, 1969 dalam Boyd, 1988).

Tabel 5 : Pengaruh kisaran pH terhadap ikan Kisaran pH <4 4–5 5 – 6.5 6.5 – 9 > 11 Sumber : Boyd (1990) Pengaruh Terhadap Ikan Titik kematian pada kondisi asam Tidak bereproduksi Pertumbuhan lambat Sesuai untuk reproduksi Titik kematian pada kondisi basa

- DO (Dissolved Oxigen) DO merupakan perubahan mutu air paling penting bagi organisme air, pada konsentrasi lebih rendah dari 50% konsentrasi jenuh, tekanan parsial oksigen dalam air kurang kuat untuk mempenetrasi lamela, akibatnya ikan akan mati lemas (Ahmad dkk,1998). Kandungan DO di kolam tergantung pada suhu, banyaknya bahan organik, dan banyaknya vegetasi akuatik (Huet, 1970 dalam Lelono, 1986). - Amoniak (NH3-N) Sumber utama amoniak adalah bahan organik dalam bentuk sisa pakan, kotoran ikan, maupun dalam bentuk plankton dan bahan organik tersuspensi. Pembusukan bahan organik terutama yang banyak mengandung protein menghasilkan amonium (NH4+) dan amoniak. Bila proses dilanjutkan dari proses pembusukan (nitrifikasi) tidak berjalan lancar maka terjadi penumpukan amoniak sampai pada konentrasi yang membahayakan bagi ikan. Didalam perairan NH3 terdapat dalam bentuk terionisasi dan tidak terionisasi (Boyd, 1982). Amoniak tidak terionisasi toksik

56

terhadap ikan dan ketoksikannya meningkat ketika kandungan DO rendah (Markens dan Downing, 1958 dalam Boyd, 1990). - Karbondioksida (CO2) Karbondioksida bersumber dari hasil proses fotosintesis atau difusi dari udara dan hasil dari proses respirasi organisme akuatik. Di dasar perairan karbondioksida juga dihasilkan oleh proses dekomposisi. Karbondioksida sebesar 10 mg/L atau lebih masih dapat ditolerir oleh ikan bila kandungan oksigen di perairan cukup tinggi. Kebanyakan spesies biota akuatik masih dapat hidup pada perairan yang memiliki kandungan karbondioksida bebas lebih dari 60 mg/L). Ketika kandungan oksigen perairan rendah, proses fotosintesis berjalan lambat, sehingga karbondioksida banyak dilepaskan oleh proses respirasi biota akuatik dan yang tidak terserap oleh phytoplankton (Boyd, 1982).

2.2.2 Umum Cyprinus carpio yang umum dikenal sebagai ikan mas merupakan ikan omnivora bernilai ekonomis penting yang hidup di air tawar yang

pembudidayaannya telah memasyarakat. Ikan ini mampu beradaptasi dari dataran tinggi sampai dataran rendah. Ikan mas dibudidayakan terutama untuk pangan manusia dan ada sebagian kecil yang dipelihara sebagai ikan hias. Ada beberapa ras ikan mas yang terkenal antara lain ras Majalaya, Punten, dan Sinyonya. Di Indonesia produksi ikan mas menempati urutan tertinggi di antara ikan-ikan budidaya lainnya.

2.2.3 Taksonomi dan Kekerabatan Cyprinus merupakan genus dari famili Cyprinidae dan pada umumnya dikenal sebagai famili Cyprinid. Genus tersebut hanya terdiri dari satu spesies yang dikenal yaitu Cyprinus carpio. Cyprinid yang lain misalnya ikan tawes (Puntiun gonionotus), ikan nilem Osteochilus hasselti), ikan mata merah (P. orphroides), yang juga terkenal dibudidayakan di Indonesia, di samping

57

merupakan ikan asli yang hidup di negara-negara Asia Tenggara lainnya seperti Malaysia dan Thailand.

2.2.4 Morfologi Tubuh ikan mas agak memanjang dan memipih tegak (compressed). Di bagian anterior mulut terdapat dua pasang sungut. Secara umum, hampir seluruh tubuh ikan mas ditutupi dengan sisik. Hanya sebagian kecil saja tubuhnya tidak tertutup sisik. Sisik ikan mas berukuran relatif besar dan digolongkan dalam tipe sisik sikloid. Sirip punggung (dorsal) berukuran relatif panjang dengan bagian belakang berjari-jari sirip keras dengan jari-jari sirip yang ketiga dan keempat terakhirnya bergerigi. Letak permukaan sirip punggung berseberangan dengan permukaan sirip perut (ventral). Sirip dubur (anal) yang terakhir bergerigi. Gurat sisi (linea lateralis) terletak di pertengahan tubuh, melintang dari tutup insang sampai ke ujung belakang pangkal ekor. Gigi kerongkongan (pharyngeal teeth) terdiri dari tiga baris yang berbentuk gigi geraham.

2.2.5 Penyebaran Ikan mas asal mulanya dari sungai Danube dan Laut Hitam. Karena ikan ini tahan terhadap lingkungan, maka dengan cepat mudah menyebar ke seluruh dunia. Ikan mas yang ada di Indonesia berasal dari Cina dan Eropa yang kemudian berkembang menjadikan budidaya. Karena domestikasinya sudah sedemikian lama, kini terdapat ras ras atau strain-strain lokal yang terbentuk secara alami maupun karena campur tangan manusia.

2.3 Tinjuan Umum Bahan Toksik 2.3.1 PbO (Plumbum Monoksida) Timbal (Pb) merupakan salah satu logam berat yang banyak terkandung dalam air buangan industri terutama industri elektroplating atau metalurgi dan industri yang menggunakan logam sebagai bahan baku proses. Keberadaan logam Pb di dalam air buangan sangat berpotensi mencemari lingkungan. Dengan

58

maksud untuk mendapatkan suatu proses pengolahan air buangan yang mengandung logam berat maka penelitian ini ditujukan untuk menyisihkan logam Pb dengan bakteri anaerob kultur tercampur terbatas pada kondisi dimana medium mengandung bahan organik. Timbal (Pb) merupakan salah satu logam yang sangat toksik yang digunakan secara luas sebagai bahan bake industri. Konsentrasi Pb dari 0-400 mg/1 dilaporkan dan bebempa proseding bemsai dari limbah industri. Penyisihan timbal dan air buangan yang banyak diterapkan khususnya di Indonesia adalah secara presipitasi kimia. Dengan cara ini sebagian besar lumpur tidak dapat ditangani. Salah satu alter nltif penyisihan timbal yang efektif dan dapat direcovery adalah melalui sementasi menggunakan presipitan besi, dan sangat sesuai untuk air buangan yang mengandung logam (Pb) yang rendah(kurang dari 5g/l). Kelemahan proses sementasi ini adalah hares dilaksanakan pada pH rendah yang menyebabkan pemakaian logam besi berlebihan don stoikiometri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mempelajari kinetika penyisihan timbal, menentukan efektifitas dam meminimumkan penggunaan best serta menentukan ungkapan matematis untuk memperkirakan laju proses. Penyisihan timbal dipelajari dalam sailor batch dam reaktor konlinu pada temperatur kamar dan kondisi aerobik. Data yang diperoleh dianalisa dengan metode staitistik, dan laju perpindahan Massa dikorelasikan dalam bentuk persamaan empiris terhadap variabel yang mengendalikan karakteristik aliran, dan dibandingkan dengan data dalam literatur. Efisiensi penyisihan timbal diujikan menggunakan air buangan industri pe nbuatan ingot (sel baterai). Efek Toksik Pb di dalam tubuh bisa menghambat aktivitas enzim yang terlibat dalam pembentukan haemoglobin (Hb) dan sebagian kecil Pb disekresikan lewat urin atau feses karena sebagian terikat oleh protein, sedangkan sebagian lagi terakumulasi dalam ginjal, hati, dan jaringan lemak. Waktu paruh timbal (Pb) dalam eritrosit adalah 35 hari, dalam jaringan ginjal dan hati selama 40 hari, sedangkan waktu paruh dalam tulang adalah selama 30 hari. Tingkat ekskresi Pb melalui sistem urinaria adalah sebesar 76%, gastrointestinal 16% ( Klaassen et al., 1986).

59

2.3.2 CuSO4 (Cuprum Sulphat) Logam Cupprum atau biasa disebut dengan tembaga di Indonesia merupakan logam yang umum terlarut dalam air. Logam ini berada di perairan karena pembuangan limbah-limbah industri ke perairan. Logam ini berbahaya jika diabsorpsi oleh organism air. Tembaga (Cu) merupakan logam transisi yang sangat diperlukan dalam jumlah kecil namun bersifat toksik dalam jumlah besar. Adanya logam Cu dalam lingkungan (medium) akan menghambat proses metabolisme secara umum yaitu dengan menonaktifkan enzim-enzim yang terlibat dalam proses metabolisme termasuk enzim yang terlibat dalam biosintesis asam indol asetat (IAA). Logam tembaga (Cu) merupakan salah satu logam essensial yang diperlukan makhluk hidup dalam pertumbuhannya. Cu banyak terdapat dalam air, tanah, dan udara baik dalam bentuk ion maupun persenyawaan. Semakin meningkatnya aktifitas dan tuntutan kesejahteraan manusia akan berdampak pada peningkatan pencemaran berbagai macam logam berat, diantaranya adalan Cu. Berdasarkan hasil penelitian, tikus yang diberi makanan mengandung CuSO4 500 ppm mengalami kemunduran pertumbuhan, sedangkan pemberian makanan mengandung CuSO4 4.000 ppm mengakibatkan kematian hewan uji. Pemberian makanan mengandung CuSO4 5-9% menunjukan hati hewan uji domba mengandung Cu 0,28-1,47 mg/g. Sedangkan kadar Cu dalam hati domba normal sebesar 0,005 mg/g. Di New Delhi terjadi keracunan akut Cu, terutama yang disebabkan oleh CuSO4 yang meracuni 200-300 orang dikarenakan air minum yang telah terkontaminasi Cu sebesar 1-12 g. Gejala keracunan akut tersebut, antara lain adanya rasa logam pada pernafasan penderita, rasa terbakar pada episgastrum dan muntah berulang-ulang, diare, serta pendarahan pada gastrointestinal. Berdasarkan jasil penelitan pada hati, terlihat terjadinya nekrosis pada sentrilobular. Toksisitas Cu bisa menghambat enzim dihydrophil hydratase yaitu enzim yang terlibat haemopoiesis (Palar,1994; Wikipedia, 2006)

60

2.3.3 FeCl2 (Ferri Chloride) Besi di perairan biasanya berasal dari kegiatan industri yang membuang limbahnya ke saluran-saluran yang menuju ke sungai. Besi termasuk unsur yang esensial bagi makhluk hidup. Pada tumbuhan, termasuk algae, besi berperan sebagai penyusun sitokrom dan klorofil. Kadar besi yang berlebihan selain dapat mengakibatkan timbulnya warna merah juga mengakibatkan karat pada peralatan yang terbuat dari logam, serta dapat memudarkan bahan celupan (dyes) dan tekstil. Pada tumbuhan, besi berperan dalam system enzim dan transfer electron pada proses fotosintesis. Namun, kadar besi yang berlebihan dapat menghambat fiksasi unsure lainnya. Konsentrasi Besi yang berlebihan di perairan akan menimbulkan suatu efek polutan terhadap organisme yang ada di perairan tersebut. Pemaparan yang berlebih dapat menyebabkan efek khronis yang bisa saja menyebabkan kematian pada organisme yang ada di perairan. Besi adalah logam yang berasal dari bijih besi (tambang) yang banyak digunakan untuk kehidupan manusia sehari-hari dari yang bermanfaat sampai dengan yang merusakkan. Dalam tabel periodik, besi mempunyai simbol Fe dan nomor atom 26. Besi juga mempunyai nilai ekonomis yang tinggi. Besi adalah logam yang paling banyak dan paling beragam

penggunaannya. Hal itu karena beberapa hal, diantaranya: o Kelimpahan besi di kulit bumi cukup besar, o Pengolahannya relatif mudah dan murah, dan o Besi mempunyai sifat-sifat yang menguntungkan dan mudah dimodifikasi. Salah satu kelemahan besi adalah mudah mengalami korosi. Korosi menimbulkan banyak kerugian karena mengurangi umur pakai berbagai barang atau bangunan yang menggunakan besi atau baja. Sebenarnya korosi dapat dicegah dengan mengubah besi menjadi baja tahan karat (stainless steel), akan tetapi proses ini terlalu mahal untuk kebanyakan penggunaan besi. Korosi besi memerlukan oksigen dan air. Berbagai jenis logam contohnya Zink dan Magnesium dapat melindungi besi dari korosi.

61

Kerusakan-kerusakan

jaringan

karena

akumulasi

Fe

disebut

hemokromatosis. Hal itu terjadi karena hemosiderin sulit melepaskan Fe. Penderita hemokromatosis bisa mengakumulasi Fe dalam hemosiderin hingga mencapai 40 g. Hemokromatosis adalah penabsorpsi Fe dari usus. Penderita hemakromatosis menunjukan akumulasi Fe di hati, limpa, tulang sumsum, jantung dan jaringan lainya. Penderita hemakromatosis beresiko terserang serosis, kanker hati, penyakit jantung, dan berbagai penyakit lain. Konsumsi Fe dosis besar akan merusak sel alat pencernaan secara langsung, lalu Fe akan mengikuti peredaran darah. Kerusakan sel juga meluas pada hati, jantung, dan organ lainya, bahkan bisa berakhir pada kematian. Seimpanan Fe yang berlebihan antara lain berupa hemakromatosis, hemosiderosis, dan polistemia. Untuk itu, pemberian suplemen Fe bisa bebahaya bagi penderita hemokromatosis, hemosiderosis, polisitemia, nausea, diare, dan konstipasi.

2.4 Tinjauan Umum Pengamatan Fisiologi Ikan (Buka Tutup Operculum dan Gejala Klinis/ Lendir) Insang dimiliki oleh jenis ikan (pisces). Insang berbentuk lembaranlembaran tipis berwarna merah muda dan selalu lembap. Bagian terluar dare insang berhubungan dengan air, sedangkan bagian dalam berhubungan erat dengan kapiler-kapiler darah. Tiap lembaran insang terdiri dare sepasang filamen, dan tiap filamen mengandung banyak lapisan tipis (lamela). Pada filamen terdapat pembuluh darah yang memiliki banyak kapiler sehingga memungkinkan OZ berdifusi masuk dan CO2 berdifusi keluar. Insang pada ikan bertulang sejati ditutupi oleh tutup insang yang disebut operkulum, sedangkan insang pada ikan bertulang rawan tidak ditutupi oleh operkulum. Insang tidak saja berfungsi sebagai alat pernapasan tetapi dapat pula berfungsi sebagai alat ekskresi garam-garam, penyaring makanan, alat pertukaran ion, dan osmoregulator. Beberapa jenis ikan mempunyai labirin yang merupakan perluasan ke atas dari insang dan membentuk lipatan-lipatan sehingga merupakan rongga-rongga tidak teratur. Labirin ini berfungsi menyimpan cadangan 02 sehingga ikan tahan pada kondisi yang kekurangan 02. Contoh ikan yang

62

mempunyai labirin adalah: ikan gabus dan ikan lele. Untuk menyimpan cadangan 02, selain dengan labirin, ikan mempunyai gelembung renang yang terletak di dekat punggung. Stickney (1979) menyatakan salah satu penyesuaian ikan terhadap lingkungan ialah pengaturan keseimbangan air dan garam dalam jaringan tubuhnya, karena sebagian hewan vertebrata air mengandung garam dengan konsentrasi yang berbeda dari media lingkungannya. Ikan harus mengatur tekanan osmotiknya untuk memelihara keseimbangan cairan tubuhnya setiap waktu. Insang tidak saja berfungsi sebagai alat pernapasan tetapi dapat pula berfungsi sebagai alat ekskresi garam-garam, penyaring makanan, alat pertukaran ion, dan osmoregulator. Beberapa jenis ikan mempunyai labirin yang merupakan perluasan ke atas dari insang dan membentuk lipatan-lipatan sehingga merupakan rongga-rongga tidak teratur. Labirin ini berfungsi menyimpan cadangan O2 sehingga ikan tahan pada kondisi yang kekurangan O2. Contoh ikan yang mempunyai labirin adalah: ikan gabus dan ikan lele. Untuk menyimpan cadangan O2, selain dengan labirin, ikan mempunyai gelembung renang yang terletak di dekat punggung.

63

BAB III METODOLOGI PRAKTIKUM 1.1 Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum Kegiatan Praktikum Uji Toksisitas Sub-lethal dilaksanakan pada tanggal 4 sampai dengan tanggal 10 Desember 2009 pada pukul 08.00-09.40 WIB dan pengamatan selama 7 hari yang bertempat di Laboratorium Akuakultur Gedung Dekanat Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran.

1.2 Alat dan Bahan 3.2.2.1 Alat-Alat Tabel 6 : Alat-Alat Uji Toksisitas Sub-lethal No 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Nama Alat Gelas Kimia Akuarium Gelas Ukur Erlenmeyer Aerator Hand counter Alat penunjuk waktu Seser Kegunaan Sebagai wadah cairan stok dan organisme uji Wadah pengamatan Untuk menakar bahan toksik Wadah pengenceran larutan Suplai oksigen Alat pencacah untuk melihat waktu dedah hewan uji Untuk mengambil hewan uji dari akuarium

3.2.2.2 Bahan Tabel 7 : Bahan-Bahan Uji Toksisitas Sub-lethal No 1. 2. 3. 4. Nama bahan Ikan mas Pellet PbO FeCl2 Hewan uji Pakan ikan Bahan toksik Bahan toksik Kegunaan

64

5. 6.

CuSO4 Aquades

Bahan toksik Media pengenceran

1.3 Prosedur Kerja 1.3.1 Prosedur Pemaparan 1. Aklimasi benih ikan mas dalam bak fiber selama 3 hari di laboratorium. 2. Bersihkan akuarium dan bilas dengan air bersih, lalu isi air sebanyak 20 liter. 3. Set alat aerasi beserta perlengkapannya. 4. Setelah semuanya siap, Masukkan benih ikan mas pada tiap-tiap akuarium, masing-masing 10 ekor pada tiap kelompok. 5. Masukkan bahan toksik (PbO, FeCl2, atau CuSO4) yang telah dilakukan pengenceran dengan konsentrasi yang berbeda, sesuai dengan perlakuan masing-masing kelompok. 6. Amati hewan uji tersebut pada satu jam pertama, dilanjutkan dengan pengamatan harian selama satu minggu. 7. Setiap hari hewan uji di beri pakan sebanyak setengah sendok kecil dan disifon setiap hari dengan mengganti air sebanyak yang dibuang dengan air media sesuai konsentrasi yang ditetapkan. 8. Pengamatan dilakukan dengan melihat beberapa hal, diantaranya : a. Gerak operculum permenit pada tiga ekor ikan uji selama 3 menit, hasilnya dirata-ratakan. Pengambilan hewan uji dilakukan secara random. b. Aktifitas gerak, diamati secara visual (aktif, pasif, atau stress) c. Gejala klinis, diamati produk lender pada kulit (normal, atau berlebih) d. Mortalitas hewan uji dicatat jumlahnya e. Nilai hematokrit, diamati menjelang akhir pengamatan.

65

1.4 Analisis Data Bahasan meliputi jenis polutan, konsentrasi polutan, waktu dedah, keadaan ikan uji, gejala fisiologis, gejala klinis, survival rate. Perhitungan gerakan operculum: 1. Menggunakan 3 ikan di dalam akuarium sebagai sample 2. Mengukur bukaan operculum tiap-tiap ikan. 3. Hitung rata-rata bukaan operculumnya. 4. Catat untuk dianalisa. Analisis data berdasarkan data kelas kemudian dilakukan pembandingan dengan data kelompok dan data berbagai jenis konsentrasi polutan. Kemudian juga dilakukan perbandingan dengan perlakuan kontrol sebagai acuan data praktikum.

66

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Kelompok Jenis Bahan toksik Konsentrasi bahan Waktu Dedah 15 menit 1 jam 1 hari 2 hari 3 hari 4 hari 5 hari 6 hari 7 hari :9 : PbO : 0,048 µg/ml Gejala Klinis + + + + + + + + +

Gejala Fisiologis Gerak Operculum 157 157 124 154 138 102 123 100 131 Aktifitas Gerak + + + + + + + + +

Mortalitas

Ket

2 Airasi mati

67

Gerak Operculum
200 100 0 Gerak Operculum

Data Kelas Polutan Kel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Jenis Kontrol FeCL2 FeCl2 FeCl2 CuSO4 CuSO4 CuSo4 PbO4 PbO4 PbO4 Konsentrasi Kontrol 0,585 0,39 0,195 0,3 0,2 0,10 0,072 0,048 0.024 Gejala Fisiologis GO Rata 153 233 77 81 111 116 115 118 126 108 AG Rata + + + + + + + + + + Gejala Klinis + + + + ++ + + ++ + + Survival Rate (%) 30 90 60 50 30 90 60 70 80 50

68

GO Rata-rata
250 200 150 100 50 0 GO Rata-rata

Survival Rate (%)
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

Survival Rate (%)

4.2 Pembahasan PbO yang masuk dalam perairan dalam bentuk limbah akan mengalami pengendapan yang dikenal dengan istilah sedimen (Palar, 1994). Bakteri mampu beradaptasi dengan limbah Pb yang terdapat di perairan, dalam metabolismenya logam berat Pb terakumulasi pada membran sel (ekstraseluler) dan pada

69

sitoplasma (intraseluler). Peningkatan jumlah bakteri pengikat Pb juga didukung oleh adanya faktor fisika-kimia diperairan. Konsentrasi PbO yang paling mematikan berdasarkan data adalah 0,024 ppm. hal ini tidak sesuai dengan konsentrasi yang lain (0,048 dan 0,072). Karena konsentrasi yang lain yang lebih besar konsentrasinya justru memiliki tingkat mortalitas yang rendah. Konsentrasi CuSO4 yang paling mematikan berdasarkan data adalah 0,3 ppm. jika dibandingkan dengan konsentrasi CuSO4 yang lain (0,2 dan 0,1). Lebih masuk akal karena konsentrasi 0,3 adalah konsentrasi yang paling tinggi dan yang memiliki kans paling tinggi untuk mematikan organisme uji. Konsentrasi FeCl2 yang paling mematikan berdasarkan data adalah 0,195 ppm. jika dibandingkan dengan konsentrasi FeCl2 yang lain (0,585 dan 0,39). hal ini tidak sesuai dengan konsentrasi yang lain. Karena konsentrasi yang lain yang lebih besar konsentrasinya justru memiliki tingkat mortalitas yang rendah. Perbandingan pada hasil praktikum kelompok Sembilan dengan data kelas dari semua kelompok dapat diberi kesimpulan bahwa gerak operculum pada kelompok Sembilan terlihat naik turun. Pada beberapa hari ada yang gerak operculumnya lebih ceapt dari hari yang lain, hal ini disebabkan karena kurangnya oksigen yang ada di akuarium percobaan. Begitu juga pada data kelas, naik turunnya pergerakkan operculum memperlihatkan kurang stabilnya antara setiap ikan pada setiap akuarium dari masing-masing kelompok. Hal ini disebabkan karena kurangnya pengamatan, pengamatan dilakukan hanya berdasarkan hari, sehingga tidak mengawasi apakah aerasi itu mati atau tidak. Beberapa kelompok mengalami matinya aerasi dan ini menyebabkan matinya beberapa ikan pada setiap akuarium.

70

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan Praktikum kali ini menghasilkan kesimpulan yang kurang akurat. Karena pada perlakuan kontrol didapat tingkat mortalitas tinggi, yang seharusnya pada perlakuan kontrol organisme harus bisa berada dalam keadaan sehat. Namun jika hasil pada perlakuan kontrol diabaikan maka konsentrasi yang paling mematikan terhadap biota uji adalah CuSO4 dengan dosis 0,3 ml yang dapat mematikan biota uji sampai 70% atau dengan survival rate 30%. Adanya perbedaan yang sangat jauh antara perlakuan kontrol dengan perlakuan lain membuat proses analisa sulit. Maka kesimpulanya adalah dalam praktikum harus lebih teliti dalam memilih organisme uji. Organisme yang sehat adalah organisme yang baik untuk dijadikan bahan praktikum ini.

5.2. Saran Pada uji toksisitas subletal waktu yang digunakan cukup singkat yaitu sekitas 6 hari, namun dalam pengamatan uji toksisitas sub-kronis pengamatan seharusnya sampai 30-96hari.

71

DAFTAR PUSTAKA

http://dhamadharma.wordpress.com/2009/11/21/laporan-praktikum-fisiologihewan-air-operculum-ikan-mas/

http://smk3ae.wordpress.com/2008/07/24/ikan-mas-cyprinus-caprio-l-sebagaiearly-warning-system-pencemaran-lingkungan/

http://techno.okezone.com/index.php/read/2008/08/31/56/141461/ikan-samacerdasnya-dengan-tikus

72

III. Mata Acara Praktikum : Pengamatan Preparat Histologi BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Histologi berasal dari kata Yunani yaitu histos yang berrti jringan dan logos yang brarti ilmu yang menguraikan struktur dari hewan secara terperinci dan hubungan antara struktur pengorganisasian sel dan jringan serta fungsi-fungsi yang mereka lakukan. Jaringan merupakan sekumpulan sel yang tersimpan dalam satu kerangka struktur atau mortalitas yang mempunyai suatu kerangka organisasi yang mampu mempertahankan kekutan penyesuaian terhadap lingkungan di luar batas dirinya ( Bavelender, 1988 ). Menurut wikipedia (2009) histrologi adalah bidang biologi yang mempelajari srtuktur jaringan secara detail menggunakan mikroskop pada sediaan jaringan yang di potong tipis, Histologi dapat juga di sebut sebagai ilmu anatomi mikroskop. Histologi adalah bidang biologi yang mempelajari tentang struktur

jaringan secara detail menggunakan mikroskop pada sediaan jaringan yang dipotong tipis. Histologi dapat juga disebut sebagai ilmu anatomi mikroskopis. Bidang biologi ini amat berguna dalam keakuratan diagnosis tumor dan berbagai penyakit lain yang sampelnya memerlukan pemeriksaan histologis. (dalam praktikum ini digunakan untuk mengamati jaringan pada ikan mas) Histopatologi adalah cabang biologi yang mempelajari kondisi dan

fungsi jaringan dalam hubungannya dengan penyakit. Histopatologi sangat penting dalam kaitan dengan diagnosis penyakit karena salah satu pertimbangan dalam penegakan diagnosis adalah melalui hasil pengamatan terhadap jaringan yang diduga terganggu. Zat racun yang masuk ke dalam tubuh organisme dapat menyebabkan kelainan pada fungsi organ. Kelainan tergantung dari seberapa besar toksisitas zat racun yang masuk ke dalam tubuh organisme. Untuk mempelajari sejauh apa zat

73

racun dapat merusak jaringan organ maka dilakukan pengamatan hispatologi. Yaitu dengan cara melihat jaringan yang ingin diamati dibawah mikroskop. Histopatologi dapat dilakukan dengan mengambil sampel jaringan (misalnya seperti dalam penentuan kanker payudara) atau dengan mengamati jaringan setelah kematian terjadi. Dengan membandingkan kondisi jaringan sehat terhadap jaringan sampel dapat diketahui apakah suatu penyakit yang diduga benar-benar menyerang atau tidak. Ilmu ini dipelajari dalam semua bidang patologi, baik manusia, hewan, maupun tumbuhan.

1.2 Tujuan Praktikum Untuk mengetahui dan membandingkan antara jaringan organ dalam ikan mas yang normal dengan jaringan yang telah terkena pemaparan pestisida.

1.3 Manfaat Praktikum Manfaat dari diadakannya praktikum histologi ini ialah agar mahasiswa dapatmengetahui pakah suatu jaringan yang telah terkena pathogen ataupun toksik yang berada ada suatu lingkunan perairan akan sama dengan yang tidak terkena pencemaran dan dapat membedakan ciri-ciri dari jaringan yang masih normal dengan jaringan yang abnormal.

74

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan Umum Analisis Histologi dan Histopatologi Histologi adalah ilmu yang menguraikan struktur dari hewan secara terperinci dan hubungan antara struktur pengorganisasian sel dan jaringan serta fungsi-fungsi yang mereka lakukan. Jaringan merupakan sekumpulan sel yang tersimpan dalam suatu kerangka struktur atau matriks yang mempunyai suatu kesatuan organisasi yang mampu mempertahankan keutuhan dan penyesuaian terhadap lingkungan diluar batas dirinya (Bavelander, 1998). Histologi adalah cabang ilmu biologi yang mempelajari tentang jaringan. Sedangkan analisis histologi adalah analisa tentang sel jaringan mahluk hidup (Wikipedia Indonesia). Histopatologi adalah cabang biologi yang mempelajari kondisi dan fungsi jaringan dalam hubungannya dengan penyakit. Histopatologi sangat penting dalam kaitan dengan diagnosis penyakit karena salah satu pertimbangan dalam penegakan diagnosis adalah melalui hasil pengamatan terhadap jaringan yang diduga terganggu (Wikipedia Indonesia). Analisa organ ikan yang dilakukan pada praktikum adalah menganalisa bagian tubuh ikan dan membandingkan organ yang normal dengan organ yang terkena kontaminasi, baik kondisi lingkungan yang terkena pecemar seperti logam berat (patologi). Perbedaan-perbaedaan antara organ kontrol (sehat/tidak terkontaminasi) dan ogan patologi sangat jelas sekali dengan analisa histologi ini. Organ yang terkena pencemar telah mengalami perubahan-perubahan atau kerusakan-karusakna pada jaringan organ tersebut dilihat secara kasat mata melalui mikroskop. Organ Ikan yang digunakan untuk analisis histologi pada praktikum ini adalah ikan mas (Cyprinus carpio). Organ-ogan yang dianalisa adalah ren (ginjal), insang, intestinum, dan hepar (hati).

75

2.1.1 Hepar

A Gambar 7 : a. Hepar kontrol, b. Hepar patologi

B

Hepar (hati) antara yang kontrol dengan patologi sangat berbeda jelas, dari segi warna, kenampakan, bentuk dan ukurannya. Warna hepar kontrol terlihan cerah, sedangkan yang patologi warnanya terlihat gelap atau merah tua. Pada jarinagn hepar yang patologi terdapat bercak hitam (necrosis) itu menandakan bahwa jaringan tersebut rusak atau terkena bahan pencemar. Perbandingan ukuran antara hepar yang tidak terkontaminasi logam berat (kontrol) dengan patologi, hepar patologi lebih besar atau dengan kata lain mengalami pembengkakan jarinagn karena kontaminasi tersebut. Karakteristik lain dari hepar patologo adalah, adanya benjolan-benjolan pada jaringan. 2.1.2 Insang

A Gambar 8 : a. Insang kontrol, b. Insang patologi

B

Dari gambar diatas, nampak jelas antara organ insang ikan mas yang patologi atau terkontaminasi oleh bahan pencemar denagn yang tidak. Gambar insang normal/kontrol warnanya merah (cerah) sedangkan yang patologi berwarna gelap, itu menunjukan insang terkena bahana pencemar. Pada organ insang yang

76

patologi, ukurannya lebih besar atau dengan kata lain insang mengalami pembengkakan akibat kontaminasi dari lingkungan. Selain itu, ciri dari insang yang terkena kontaminasi adanya bercak hitam pada bagian lamelanya. Hal lain yang membedakan antara kontrol dengan patologi adalah dari susunan lamela, susunan lamela insang kontrol terlihat lebih rapih, sedangkan patologi tidak. 2.1.3 Intestinum

A B Gambar 9 : a. Intestinum kontrol, b. Intestinum patologi Organ intestinum yang terkontaminasi baham pencemar seperti logam berat, mengalami perubahan ukuran. Ukiuran intestinum normal (kontrol) berbentuk bulat tidak rata, sedangkan yang patologi atau yang terkena kontaminasi berbentuk oval. Rongga-rongga dalam intestinum kontrol terlihat lebih renggang, sedangkan yang patologi rapat, dan hampir tidak ada rongga antara satu dengan yang lainnya. Warna intestinum kontrol nampak lebih cerah sedangkan yang terkontaminasi/patologi terlihat lebih kusam. Nampak tidak ada bercak hitam (necrosis) pada jaringan baik yang kontrol maupun patologi.

77

2.1.4 Ren

A Gambar 10 : a. Ren kontrol, b. Ren patologi

B

Pada organ ini perbedaan antara paologi denagn kontrol, dimana warna ren kontrol terlihan lebih cerah dibandingkan dengan patologi. Warna ren patologi nampak gelap, itu dikarenakan akibat dari kontaminasi bahan pencemar seperti logam berat yang mempengaruhi ren. Ukuran ren patologi lebih besar atau ren mengalami pembengkakan akibat dari kontamisnasi bahan pencemar

dibandingkan dengan ren kontrol. Selain itu, bercak hitam yang ada pada ren patologi menunjukan ren tersebut terkoena kontaminasi bahan pencemar, sedangkan yang kontrol tidak nampak atau tidak ada bercak hitam.

2.2 Tinjauan Umum Kerusakan Jaringan/ Organ Akibat Bahan Toksik 2.2.1 Hiperplasia Hiperplasia adalah pembesaran kelenjar suatu jaringan atau organ yang disebabkan oleh bertambahnya jumlah sel. Hiperplasia yang patologik terjadi akibat rangsang patologik tertentu dalam jangka waktu yang lama. Hiperplasia merupakan salah satu mekanisme pertahanan insang ikan terhadap barbagai iritan berupa fisik, kimia, atau biologi.

2.2.2 Hipoplasia Hipoplasia adalah sebuah kelainan yang mengindikasikan sebuah perkembangan/pertumbuhan yang terhambat, sehingga organ yang terkena kelainan tersebut berukuran lebih kecil/mengecil dari ukuran normalnya.

78

Hipoplasia adalah terhambatnya perkembangan atau pertumbuhan sebagian atau seluruh jaringan tumbuhan akibat serangan patogen (Abdul Fatah Alu, Rabu, 8 April 2009). Hipoplasia merupakan perkembangan yang tidak sempurna dari suatu organ. Suatu organ yang mengalami hipoplasia terbentuk normal. Namun, ukuran organ terlalu kecil jika dibandingkan dengan ukuran normal. Pada atrofi, alat tubuh pernah mencapai ukuran normal dan selanjutnya menjadi lebih kecil, sedangkan pada hipoplasia, dari awal organ tersebut memang berukuran kecil dan tidak akan mencapai ukuran yang normal (littleaboutme, 19 July 2009)

2.2.3 Necrosis Sel yang mengalami nekrosis akan melibatkan sekelompok sel, sehingga sel tersebut akan terlihat membengkak yang kemudian mengalami lisis. sel yang terkena nekrosis ini akan mengalami kebocoran pada lisosom dan kromatinsel tersebut bergerombol dan terjadi agregasi. Pada pemeriksaan histologi sel yang terkena nekrosis terlihat suatu respon peradangan yang nyata di sekitar sel-sel yang mengalami nekrosis yang kemudian sel tersebut dimakan oleh makrofag.

2.3 Pembuatan Preparat Histologi Analisis histologis merupakan teknik pengamatan sel serta jaringan tubuh ikan yang sering digunakan. Analisis ini bertujuan untuk menghasilkan sediaan histologis yang dapat diwarnai dengan pewarna khusus sehingga dapat diamati secara langsung dengan menggunakan mikroskop cahaya. Tahapan analisis histologis pada ikan meliputi : 1. Pengambilan jaringan ikan. Pada sampel ikan yang masih kecil dapat langsung fiksasi tanpa dipotong. Pada ikan yang berukuran besar diambil jaringan tertentu yang akan diamati dan dimasukkan ke dalam larutan fiksasi.

79

2.

Fiksasi. Larva atau ikan berukukan kecil difiksasi dengan larutan PFA 4% dalam medium Phosphate buffered saline (PBS). Sampel dimasukkan ke dalam botol yang sudah berisi larutan fiksatif dengan perbandingan antara sampel dengan larutan adalah 1:20. kemudian disimpan selama 24 jam dalam refrigerator. Setelah 24 jam kemudian sampel diambil dan dicuci dengan PBS selama 5 menit sebanyak 3 kali untuk menghilangkan sisa-sisa PFA sebelum ke tahap selanjutnya. Ikan yang berukuran relatif besar difiksasi dengan larutan Bouin’s selama 1 minggu dalam suhu kamar. Selanjutnya sampel dicuci dalam larutan alkohol 70% hingga warna kuning hilang, kemudian sampel disimpan dalam alkohol 70% hingga pemrosesan lebih lanjut. Sampel yang berukuran besar harus melaui prosedur dekalsifikasi dalam larutan 5% trichloroacetid acid selama 24 jam untuk melunakkan struktur tulangnya.

3.

Dehidrasi. Sampel yang sudah difiksasi kemudian dimasukkan berturutturut ke dalam larutan sebagai berikut: Alkohol 70%, Alkohol 80%, Alkohol 90%, Alkohol Absolut I, Alkohol Absolut II, masing-masing selama 45 menit, kemudian dilanjutkan ke proses penjernihan.

4.

Penjernihan (clearing). Sampel dari proses dehidrasi dimasukkan ke dalam larutan alkohol:xylol 1:1 dan 1:3 selama 30 menit. kemudian Xylol I dan Xylol II masing-masing selama 30 menit.

5.

Infiltrasi. Sampel yang sudah dijernihkan dalam xylol diinfiltrasi secara bertahap dalam campuran xylol : paraffin 3:1 ; 1:1 dan 1:3 masingmasing selama 30 menit, dilanjutkan dengan paraffin murni sebanyak 2 x 60 menit. Seluruh rangkaian infiltrasi dilakukan dalam inkubator pada temperatur 58-60oC.

6.

Penanaman sampel (Embedding). Parafin dicairkan di dalam inkubator pada temperatur 60oC. Cetakan berukuran 2x2x2 cm diisi dengan paraffin cair, bagian bawah cetakan didinginkan di atas blok es sehingga paraffin pada dasar cetakan agak memadat. Sampel diletakkan di atas paraffin yang agak memadat tersebut sesuai dengan orientasi

80

irisan yang direncanakan, kemudian ditempelkan holder yang telah diberi label sesuai dengan kode sampel. Cetakan paraffin selanjutnya dibiarkan dalam temperatur ruang agar parafinnya memadat. 7. Pengirisan (Sectioning) dan peletakan pada gelas obyek. Water bath disiapkan dengan suhu 40-50oC dan disiapkan wadah berisi air dingin. Kemudian blok yang sudah didinginkan dipasang di mikrotom yang sudah diatur pada ketebalan 4-7 µm. Putaran mikrotom dibuat konstan sampai blok yang berisi sampel jaringan teriris. Setelah itu irisan dipindahkan ke dalam baskom yang berisi air dingin, kemudian ditempelkan pada gelas obyek yang sudah dilapisi gelatin dan diberi kode sama dengan blok yang di iris. Selanjutnya dicelupkan ke dalam air hangat dalam water bath agar irisan mengembang. Kemudian ditiriskan untuk dilakukan pewarnaan.

81

BAB III METODOLOGI PRAKTIKUM 3.1 Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum Praktikum Ekotoksikologi Perairan tentang uji toksisitas akut ini dilaksanakan pada hari Jumat, 11 Desember 2009 pada pukul 08.00-09.40 WIB yang bertempat di Laboratorium Akuakultur Gedung Dekanat Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universtias Padjadjaran

3.2 Alat dan Bahan Untuk pengamatan hispatologi hanya digunakan mikroskop sebagai alat untuk melihat dan preparat hispatologi sebagai bahan pengamatanya.

3.3 Prosedur Kerja 1. Mempersiapkan mikroskop untuk digunakan dalam pengamatan 2. Mengambil preparat kemudian diletakkan di mikroskop 3. Amati perbedaan antara preparat yang belum tercemar dengan preparat yang sudah tercemar pada mikroskop dengan pembesaran 40x.

3.4 Analisis Data Data adalah hasil perbandingan dari preparat organ yang sehat dengan preparat organ yang telah terpaparkan oleh pestisida

82

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil 4.1.1 Ren

A B Gambar 11 : a. Ren patologis, b. Ren normal Kontrol Warna Ukuran Noktah Karakter Merah Mengecil ke patologis Meregang ke patologis Lonjong kecil Lonjong besar Bening Patologis

83

4.1.2 Hepar

A

B

Gambar 12 : a. Hepar kontrol, b. Hepar patologi Kontrol Warna Ukuran Noktah Karakter Merah dengan sedikit hitam Meregang ke patologis Meregang ke patologis Ada (Merah) Patologis Merah ke unguan

84

4.1.3 Insang

A

B

Gambar 13 : a. Insang kontrol, b. Insang patologi

Kontrol Warna Ukuran Noktah Merah Membesar ke patologis Hancur Karakter Tertata

Patologis Merah marun / pucat

-

Beberapa tidak ada lamela

85

4.1.4 Intestinum

A B Gambar 14 : a. Intestinum kontrol, b. Intestinum patologi

Kontrol Warna Ukuran Noktah Karakter Bulat Merah Membesar ke patologis Melonjong ke patologis Bening

Patologis

Lonjong

4.2 Pembahasan 4.2.1 Ren Pada ginjal perubahan sel jaringan menjadi abnormal dapat terjadi. Warna yang awalnya merah berubah menjadi bening. Pada ukuran secara garis luar ukuran menjadi kecil namun dari segi dalam terlihat bahwa adanya peregangan. Bentuk yang semula hanya lonjong kecil juga berubah. Masih tetap lonjong namun membesar.

86

4.2.2 Hepar Pada hati terjadi perubahan abnormal sel jaringan tubuh. Warna jaringan memudar dari warna mereah menjadi merah keungan hal ini karena adanya pemaparan toksik pada suatu organism yang dapat merusak hati orga nisme tersebut.

4.2.3 Insang Efek toksik memberikan pengaruh terhadap insang sehingga terjadi suatu perubahan jaringan tubuh yang ditandai dengan perubahan warna dan perubahan ukuran organ/jaringan. Pemudaran warna jaringan dari merah ke merah marun/pucat.

4.2.4 Intestinum Efek toksisitas pada organ usus mengakibatkan perubahan bentuk yang ditandai oleh penyempitan organ. Penyimpitan ini dikenal dengan nama hiperplasia yaitu menambah besarnya jaringan suatu organ sehingga mengalami penyempitan Hal ini disebabkan oleh pemaparan toksik pada organism uji.

87

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan Bahan toksik sekecil apapun konsentrasinya akan mempengaruhi organorgan yang ada pada ikan. Efek polutan tersebut menyerang sel jaringan suatu organ hingga mempengaruhi fungsi organ. Setiap toksik tidak selamanya menyerang semua sel jaringan sebelum dia menyerang satu sel tujuan dari jenis toksik tersebut. Pada hepar, insang, intestinum, dan ren itu merupakan hal fital pada ikan. Ini terlihat bahwa toksik lebih dahulu menyerang ke satu bagian jaringan baru kemudian meyerang sel jaringan yang lain.

5.2 Saran Praktikum hispatologi ini sebaiknya dimulai dari pembuatan preparat histologi. Sehingga mahasiswa nantinya mampu jika dituntut untuk membuat suatu preparat dari organ-organ tertentu.

88

DAFTAR PUSTAKA

http://www.m3undip.org/ed3/artikel_12_03.htm

http://id.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080824010617AAQslmP

http://theblues68.blogspot.com/2009/04/ganguan-karenapenyakit.html?zx=d688f56dca02616e

http://littleaboutmyworld.wordpress.com/2009/07/19/patologi-dan-histologi-gigisulung-yang-resorbsi/

http://afie.staff.uns.ac.id/2008/12/25/beda-apoptosis-dan-nekrosis/

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->