P. 1
Laporan Praktikum BIOKIM

Laporan Praktikum BIOKIM

|Views: 10,008|Likes:

More info:

Published by: Natalia Debora Panggabean on Apr 07, 2010
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOC, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

06/13/2013

pdf

text

original

Laporan Praktikum Biokimia

Hari Tanggal Waktu PJP Asisten

: Selasa : 1 September 2009 : 11.00-12.40 : Martini Hudayanti : Intan Hapsariyani Wiwasman N

KARBOHIDRAT I

Kelompok 2 Nama Ady Suryo Negoro Natalia Debora P Selly Ariesya

NIM J3L208121 J3L108022 J3L108069

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA DIREKTORAT PROGRAM DIPLOMA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009

PENDAHULUAN Dalam kehidupan sehari-hari kita melakukan aktivitas, baik yang merupakan kebiasaan misalnya berdiri, berjalan, mandi, makan, dan sebagainya, atau yang hanya kadang-kadang saja kita lakukan. Untuk melakukan aktivitas itu kita memerlukan energi, energi yang diperlukan ini kita peroleh dari bahan makanan yang kita makan. Pada umumnya bahan makanan itu mengandung tiga kelompok utama senyawa kimia yaitu, karbohidrat, protein, dan lemak atau lipid. Karbohidrat merupakan senyawa karbon, hidrogen dan oksigen yang terdapat dalam alam. Banyak karbohidrat mempunyai rumus empiris CH2O, misalnya glukosa (C6H12O6). Karbohidrat sangat beraneka ragam sifatnya. Salah satu perbedaan utama antara pelbagai tipe karbohidrat ialah ukuran molekulnya, diantaranya monosakarida, disakarida, oligosakarida dan polisakarida. (Fessenden : 1986) Karbohidrat merupakan golongan utama bahan organik dan dapat di temukan pada semua sel terutama pada sel tumbuhan. Karbohidrat juga merupakan komponen gizi utama bahan makanan yang berenergi lebih tinggi dari biomolekul lain. Biomolekul karbohidrat adalah suatu makromolekul senyawa organik. Satu makromolekul karbohidrat adalah satu polimer alam yang dibangun oleh monomer polisakarida. Kedudukan karbohidrat sangatlah penting pada manusia dan hewan tingkat tinggi lainnya, yaitu sebagai sumber kalori. Karbohidrat juga mempunyai fungsi biologi lainnya yang tak kalah penting bagi beberapa makhluk hidup tingkat rendah, ragi misalnya, mengubah karbohidrat (glukosa) menjadi alkohol dan karbondioksida untuk menghasilkan energi. (Hawab, HM : 2004) Karbohidrat berfungsi sebagai pembangun struktur maupun yang berperan fungsional dalam proses metabolisme. Hasil metabolisme karbohidrat antara lain glukosa yang terdapat dalam darah sedangkan glikogen adalah karbohidrat yang disintesis dalam hati dan digunakan oleh sel-sel pada jaringan otot sebagai sumber energi. Sifat kimia karbohidrat berhubungan erat dengan gugus fungsi yang terdapat pada molekulnya yaitu gugus –OH, gugus aldehida dan gugus keton. Berbagai uji telah dikembangkan untuk analisis kualitatif maupun kuantitatif terhadap keberadaan karbohidrat, mulai dari yang membedakan jenis-jenis karbohidrat dari yang lain

sampai pada yang mampu membedakan jenis-jenis karbohidrat secara spesifik. Uji reaksi tersebut meliputi uji Molisch, Barfoed, Benedict dan fermentasi. (Poedjiyadi, A : 2006) TUJUAN Tujuan praktikum adalah menunjukkan sifat dan struktur karbohidrat melelui uji-uji kualitatif, mengamati struktur beberapa karbohidrat melalui sifat reaksinya dengan beberapa reagen uji yaitu uji Molisch, Benedict, Barfoed, dan fermantasi. ALAT DAN BAHAN Bahan-bahan yang digunakan adalah Glukosa 1%, Fruktosa 1%, Sukrosa 1%, Laktosa 1%, Maltosa 1%, Pati 1%, pereaksi Molisch, pereaksi Benedict, pereaksi Barfoed, Fosfomolibdat, Asam sulfat pekat, ragi, NaOH 10%, kapas, aquades, tissu. Alat-alat yang digunakan adalah, tabung fermentasi, oven, gelas piala 250ml, tabung reaksi, pipet Mohr 5ml, kaki tiga, kasa, pembakar spirtus, pipet tetes, lemari asam, bulp. PROSEDUR PERCOBAAN Pada uji molisch, sebanyak 5ml larutan yang di uji (glukosa, fruktosa, sukrosa, laktosa, maltosa, dan pati) di masukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi molish , dicampur rata, kemudian ditambahkan 3 ml asam sulfat pekat secara perlahan-lahan melalui dinding tabung, warna violet (ungu) kemerah-merahan pada batas kedua cairan menunjukkan reaksi positif, sedangkan warna hijau menunjukan reaksi negatif. Untuk uji Benedict, sebanyak 5 ml reaksi Benedict dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 8 tetes larutan bahan yang diuji dicampur rata dan dididihkan selama 5 menit, biarkan sampai dingin kemudian diamati perubahan warnanya, jika terbentuk warna hijau, kuning atau endapan merah bata berarti positif. Sedangkan warna biru pada larutan menunjukkan hasil yang negatif. Dilakukan Uji

ini terhadap larutan Glukosa 1%, Fruktosa 1%, Sukrosa 1%, Laktosa 1%, Maltosa 1%, Pati. Pada uji barfoed, sebanyak 1 ml pereaksi dan bahan percobaan dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian dipanaskan dalam air mendidih selama 3 menit dan didinginkan, setelah itu masukkan 1 ml fosfomoliubdat , kocok dan amati warna yang tejadi, jika terbentuk warna biru setelah penambahan fosfomolibdat, maka reaksi positif. Dilakukan Uji ini terhadap larutan Glukosa 1%, Fruktosa 1%, Sukrosa 1%, Laktosa 1%, Maltosa 1%, Pati Pada uji fermentasi, 25 ml larutan bahan percobaan dan 1 gram ragi roti digerus sampai terbentuk suspensi yang homogen , kemudian suspensi diisikan ke dalam tabung fermentasi sampai bagian kaki tertutup dan terisi penuh oleh cairan. Selanjutnya dilakukan pemeraman pada suhu 360C, kemudian diamati setiap selang 20 menit sebanyak 3 kali pengamatan. Jika terdapat ruang gas pada kaki tabung yng tertutup ukurlah panjang atau isi gas tersebut, lalu untuk membuktikan bahwa gas yang terbentuk gas CO2 , dilakukan penambahan larutan NaOH 10% kedalam tabung fermentasi melalui kaki yang terbuka dan tutuplah mulut tabung dengan ibu jari sambil tabung dibolak-balik beberapa kali. Isapan pada ibu jari menunjukkan adanya gas CO2. . Dilakukan Uji ini terhadap larutan Glukosa 1%, Fruktosa 1%, Sukrosa 1%, Laktosa 1%, Maltosa 1%, Pati. HASIL PENGAMATAN Tabel 1 Hasil Uji Molisch Bahan uji Glukosa 1% Fruktosa 1% Sukrosa 1% Laktosa 1% Maltosa 1 % Pati Keterangan : + Hasil uji + + + + + + Warna yang terbentuk Cincin violet Cincin violet Cincin violet Cincin violet Cincin violet Cincin violet

: Sampel mengandung karbohidrat : Sampel tidak mengandung karbohidrat

Gambar 1 Glukosa dalam Uji Molisch

Gambar 2 Fruktosa dalam Uji Molisch

Gambar 3 Sukrosa dalam Uji Molisch

Gambar 4 Maltosa dalam Uji Molisch

Gambar 5 Laktosa dalam Uji Molisch

Gambar 6 Pati dalam Uji Molisch

Tabel 2 Hasil Uji Benedict Bahan Uji Glukosa 1% Hasil + Warna yang terbentuk Hijau kebiruan Endapan Merah bata

Fruktosa 1% Sukrosa 1% Laktosa 1% Maltosa 1 % Pati Keterangan : + -

+ Hijau kebiruan Biru tua + Hijau kebiruan + Hijau kebiruan biru : Sampel mengandung gula pereduksi : Sampel tidak mengandung gula pereduksi

Merah bata -

Gambar 7 Glukosa dalam Uji Benedict

Gambar 8 Fruktosa dalam Uji Benedict

Gambar 9 Sukrosa dalam Uji Benedict

Gambar 10 Maltosa dalam Uji Benedict Tabel 3 Hasil Uji Barfoed Bahan Uji Glukosa 1% Fruktosa 1% Sukrosa 1% Laktosa 1% Maltosa 1 % Pati

Gambar 11 Laktosa dalam Uji Benedict Hasil + + -

Gambar 12 Pati dalam Uji Benedict

Warna yang terbentuk Biru tua Biru tua Biru muda Biru muda Biru muda Biru muda

Keterangan

: + -

: Sampel merupakan monosakarida : Sampel bukan merupakan monosakarida

Gambar 13 Glukosa dalam Uji Barfoed

Gambar 14 Fruktosa dalam Uji Barfoed

Gambar 15 Sukrosa dalam Uji Barfoed

Gambar 16 Maltosa dalam Uji Barfoed Tabel 4 Hasil Uji Fermentasi Bahan uji Glukosa 1% Sukrosa 1% Pati Keterangan : + Gas CO2

Gambar 17 Laktosa dalam Uji Barfoed

Gambar 18 Pati dalam Uji Barfoed

Panjang gas dalam tabung (cm) 15 menit pertama 15 menit kedua + 0,5 cm Hanya di ujung tabung + 0,2 cm 0,6 cm + 1,5 cm 2,0 cm : Terbentuk gas karbondioksida : Tidak terbentuk gas karbondioksida

Gambar 19 Fermentasi Pati

Gambar 20 Struktur Glukosa

Gambar 21 Struktur Fruktosa

Gambar 22 Struktur Maltosa

Gambar 23 Struktur Laktosa PEMBAHASAN

Gambar 24 Struktur Sukrosa

Pada uji Molisch, pereaksi yang digunakan merupakan larutan 5% α-naftol dalam alkohol 95%. Uji ini berdasarkan pembentukan furfural atau turunan-turunan dari karbohidrat yang didehidratasi oleh asam pekat (dalam uji ini adalah asam sulfat pekat). Reaksi pembentukan furfural ini adalah reaksi dehidrasi atau pelepasan molekul air dari suatu senyawa. Furfural atau derivatnya dapat membentuk senyawa berarna apabila direaksikan dengan α-naftol. Apabila ditambahkan asam sulfat pekat akan terbentuk dua lapisan zat cair. Pada batas antara kedua lapisan itu akan terjadi warna ungu karena terjadi reaksi kondensasi antara furfural dengan α-naftol. Reaksi

ini tidak spesifik untuk karbohidrat namun hasil reaksi yang negatif menunjukkan bahwa sampel tidak mengandung karbohidrat. Berdasarkan percobaan, hasil uji menunjukkan bahan semua bahan yang diuji adalah karbohidrat. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya cincin berwarna ungu pada tabung. Dengan demikian telah dibuktikan bahwa glukosa, sukrosa, frukrosa, maltosa, laktosa dan pati merupakan karbohidrat. Pada uji Benedict, pereaksi yang digunakan merupakan kuprisulfat, natrium karbonat dan natrium sitrat yang dapat mereduksi ion Cu2+ dari kuprisulfat menjadi ion Cu+ kemudian mengendap sebagai Cu2O. Adanya natrium karbonat dan natrium sitrat membuat pereaksi benedict bersifat basa lemah. Larutan tembaga yang basa bila direduksi oleh karbohidrat yang mempunyai gugus aldehida atau keton bebas akan membentuk kuprooksida (CuO). Endapan yang terbentuk dapat berwarna hijau kebiruan, hijau dan kuning. Warna endapan ini bergantung kepada konsentrasi karbohidrat yang diperiksa. Berdasarkan uji yang dilakukan, pada sampel glukosa dan fruktosa memberikan hasil positif yang ditandai dengan warna larutan hijau kebiruan dan terdapat endapan merah bata. Sedangkan pada laktosa dan maltosa memberikan hasil positif yang ditandai dengan warna larutan hijau kebiruan tanpa endapan merah bata. Warna hijau kebiruan tersebut mengindikasikan terdapatnya gula dengan konsentrasi sekitar 250 mg/dL. Pada sukrosa dan pati menunjukkan hasil yang negatif karena warna yang terbentuk adalah warna biru yang menunjukkan tidak terdapatnya gula pereduksi pada sampel. Pada uji Barfoed, pereaksi yang digunakan merupakan larutan kupriasetat dan asam asetat dalam air, dan digunakan untuk membedakan antara monosakarida dan bukan monosakarida. Ion Cu+ dari pereaksi Barfoed dalam suasana asam akan direduksi lebih cepat oleh gula reduksi monosakarida daripada disakarida. Ion Cu+ yang dihasilkan direaksikan dengan pereaksi warna fosfomolibdat sehingga menghasilkan warna biru yang menunjukkan adanya monosakarida. Berdasarkan percobaan, hasil uji menunjukkan bahwa glukosa dan fruktosa adalah monosakarida. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya larutan berwarna biru tua pada tabung. Sedangkan pada sukrosa, maltosa, laktosa dan pati menunjukkan hasil yang negatif

dengan warna larutan biru muda. Dengan demikian telah dibuktikan bahwa glukosa dan frukrosa. Sedangkan sukrosa, maltosa, laktosa dan pati bukan merupakan monosakarida. Fermentasi adalah proses produksi energi dalam sel dalam keadaan anaerob (tanpa oksigen). Secara umum, fermentasi adalah salah satu bentuk respirasi anaerob, akan tetapi, terdapat definisi yang lebih jelas yang mendefinisikan fermentasi sebagai respirasi dalam lingkungan anaerobik dengan tanpa akseptor elektron eksternal. Karbohidrat (gula) adalah bahan yang umum dalam fermentasi. Beberapa contoh hasil fermentasi adalah etanol, asam laktat, dan hidrogen. Akan tetapi beberapa komponen lain dapat juga dihasilkan dari fermentasi seperti asam butirat dan aseton. Ragi dikenal sebagai bahan yang umum digunakan dalam fermentasi untuk menghasilkan etanol dalam bir, anggur dan minuman beralkohol lainnya. Respirasi anaerobik dalam otot mamalia selama kerja yang keras (yang tidak memiliki akseptor elektron eksternal), dapat dikategorikan sebagai bentuk fermentasi. Pada uji fermentasi, gas karbondioksida yang berasal dari ragi lebih cepat terjadi pada monosakarida khususnya glukosa. Hal ini menunjukkan bahwa monosakarida lebih reaktif daripada disakarida dan polisakarida. Selain itu pati dan disakarida lainnya merupakan molekul yang relatif lebih besar dibandingkan dengan monosakarida sehingga kemampuan ragi untuk mencerna mengubah pati tersebut menjadi etil alkohol dan karbondioksida lebih banyak memerlukan energi dan waktu yang lebih lama. Berdasarkan percobaan, hasil uji menunjukkan bahwa glukosa, sukrosa dan pati menghasilkan gas karbondioksida pada proses fermentasi. Reaksi anaerob terdiri atas serangkaian reaksi yang mengubah glukosa menjadi asam laktat. Proses ini disebut glikolisis. Tiap reksi dalam proses glikolisis ini menggunakan enzim tertentu. Tahap pertama glikolisis adalah pengubahan glukosa menjadi glukosa-6-fosfat dengan reaksi fosforilasi. Gugus fosfat diterima dari ATP dalam reaksi sebagai berikut :

Gambar 25 Reaksi Pertama Glikolisis Enzim heksokinasi merupakan katalis dalam reaksi tersebut dibantu oleh ion Mg++ sebagai kofaktor. Enzi mini ditemukan oleh Meyerhof pada tahun 1927 dan telah dapat dikristalkan dari ragi, mempunyai berat molekul 111.000. Heksokinase yang berasal dari ragi dapat merupakan katalis pada reaksi pemindahan gugus fosfat dariATP tidak hanya kepada glukosa tetapi juga pada fruktosa, manosa dan glukosamina. Dalam otak, otot dan hati terdapat enzim heksokinase yang multi substrat ini. Disamping itu, ada pula enzim-enzim yang khas tetapi juga pada kepada fruktosa, manosa dan glukosamina. Dalam kinase. Hati juga memproduksi fruksokinase yang menghasilkan fruktosa-1-fosfat. Proses glikolisis dimulai dengan molekul glukosa dan diakhiri dengan terbentuknya asam laktat. Serangkaian reaksireaksi dalam proses glikolisis tersebut dinamakan juga jalur embeden-Meyerhof (lihat Gambar 26).

Gambar 26 Bagan reaksi glikolisis

Reaksi-reaksi yang berlangsung pada proses glikolisis dapat dibagi dalam dua fase. Pada fase pertama, glukosa diubah menjadi triosafosfat dengan proses fosforilasi. Fase kedua dimulai dari reaksi oksidasi triosafosfat hingga terbentuk asam laktat. Perbedaan antara kedua fase ini terletak pada fase energi yang berkaitan dengan reaksi-reaksi dalam kedua fase tersebut. Dalam proses glikolisis satu mol glukosa diubah menjadi dua mol asam laktat. Fase pertama dalam proses glikolisis melibatkan 2 mol ATP yang diubah menjadi ADP. Jadi fase pertama ini menggunakan energi yang tersimpan dalam molekul ATP. Fase kedua mengubah dua mol triosa yang terbentuk pada fase pertama menjadi dua mol asam laktat, dan dapat menghasilkan 4 mol ATP. Jadi fase kedua ini menghasilkan energi. Apabila ditinjau secara keseluruhan proses glikolisis ini menggunakan 2 mol ATP dan menghasilkan 4 mol ATP sehingga masih ada sisa 2 mol ATP yang ekivalen dengan energi sebesar 14.000 kalori. Energi tersebut tersimpan dan dapat digunakan oleh otot dalam energi yang dibebaskan untuk reaksi glukosa menjadi asam laktat adalah 56.000 kalori, maka dapat dihirung 14.000/56.000 x 100%=25%. Suatu tingkat efisiensi yang cukup tinggi. KESIMPULAN Uji Molisch digunakan untuk menentukan karbohidrat secara umum dan telah dibuktikan bahwa semua contoh (glukosa, fruktosa, sukrosa, laktosa, maltosa, dan pati) merupakan karbohidrat. Uji Benedict digunakan untuk menentukan gula pereduksi dalam karbohidrat, dan telah dibuktikan bahwa glukosa, fruktosa, laktosa, dan maltosa mengandung gula pereduksi. Uji Barfoed digunakan untuk mengidentifikasi antara monoskarida dan bukan monosakarida dan telah dibuktikan bahwa yang termasuk monosakarida adalah glukosa dan fruktosa. Uji fermentasi yang menggunakan ragi dapat mencerna dan merubah karbohidrat menjadi etil alkohol dan gas karbondioksida dan terbukti bahwa semua contoh menghasilkan karbondioksida

DAFTAR PUSTAKA Hart, Harold. 1983. Kimia Organik. Jakarta : Erlangga. Poedjiyadi, Anna dkk. 2006. Dasar-DasarBiokimia. Jakarta : UI-Press. Fessenden. 1986. Kimia Organik Jilid 2. Jakarta : Erlangga. Hawab, HM. 2004. Pengantar Biokimia. Jakarta : Bayu Media Publishing. Lehninger.1982. Dasar-Dasar Biokimia. Penerjemah : Maggy Thenawijaya. Jakarta : Erlangga. Mulia, Isnan. 2007. Fermentasi.http://metabolismelink.freehostia.com/fermentasi.htm [terhubung berkala]. [4 September 2009] BPP, Poni. 2006. Fermentasi. http://id.shvoong.com/exact-sciences/1663623fermentasi/ [terhubung berkala]. [4 September 2009] Earley, Clarke. 2008. Physiological Chemistry. http://www.personal.kent.edu/~cearley/PChem/glycol/carbomet.gif [terhubung berkala]. [5 September 2009]

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->