HASIL PENGAMATAN a.

Uji Praduga Inkubasi 24 jam 10 ml 10 ml Sampel Air aqua Air masak Air zam2 Air sumur Air tanah Air pam Air keran Air kosan
10 ml 1 ml 1 ml 1 ml 0.1 ml 0.1 ml 0.1 ml MPN Kisaran

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Sampel 1

Sampel 2

Sampel 3

Sampel 4

Sampel 5

Sampel 6

Sampel 7

Sampel 8

1

Uji Penguat Kelompok III 7 Kelompok IV 8 Kelompok V Tidak terbentuk warna hijau metalik Kelompok VI Tidak terbentuk warna hijau metalik Kelompok VII Tidak terbentuk warna hijau metalik Kelompok VIII Terbentuk warna hijau metalik yang sangat jelas c.1 ml 0.Inkubasi 48 Jam 10 ml 10 ml 10 ml 1 ml 1 ml 1 ml 0.1 ml Sampel Air aqua Air masak Air zam2 Air sumur Air tanah Air pam Air keran Air kosan MPN Kisaran 3 4 5 6 b.1 ml 0. Uji Penyempurna Terbentuk warna hijau metalik Tidak terbentuk warna hijau namun tidak begitu jelas metalik 2 .

Lebih tepatnya. kualitas air semakin baik. maka air tersebut dianggap berbahaya bagi penggunaan domestik. Penentuan coliform fekal menjadi indikator pencemaran dikarenakan jumlah koloninya pasti berkorelasi positif dengan keberadaan bakteri patogen. Contoh bakteri coliform adalah. Selain itu. bakteri coliform fekal adalah bakteri indikator adanya pencemaran bakteri patogen. coliform adalah indikator kualitas air. Terdapatnya bakteri coliform dalam air dapat menjadi indikasi kemungkinan besar adanya organisme patogen lainnya. bentuk basil pendek dan dinding sel berwarna pink ( Positif E-coli ) Gram positif. Esherichia coli artinya.Kelompok VI Kelompok VII Gram negatif. coli. coli secara normal hanya ditemukan di saluran pencernaan manusia (sebagai flora normal) atau hewan mamalia. cepat. sebenarnya. atau bahan yang telah terkontaminasi dengan tinja manusia atau hewan. dan Entereobacter aerogenes. Makin sedikit kandungan coliform. Keberadaan E. jarang sekali ditemukan dalam air dengan kualitas kebersihan yang tinggi. Bakteri coliform dibedakan menjadi 2 tipe. Jadi. bentuk basil pendek. E. mendeteksi Coliform jauh lebih murah. yaitu faecal coliform dan non-faecal coliform. c) Bila dalam air tersebut ditemukan E. yaitu hidup dalam saluran pencernaan manusia. E. dinding sel berwarna ungu ( negatif E-coli / bukan E-coli ) PEMBAHASAN Bakteri coliform adalah golongan bakteri intestinal. coli dalam air dapat menjadi indikator adanya pencemaran air oleh tinja. Bakteri coliform adalah bakteri indikator keberadaan bakteri patogenik lain. coli adalah bagian dari faecal coliform. dan sederhana daripada mendeteksi bakteri patogenik lain. 3 . coli digunakan sebagai indikator pemeriksaan kualitas bakteriologis secara universal dalam analisis dengan alasan. coli mudah diperiksa di laboratorium dan sensitivitasnya tinggi jika pemeriksaan dilakukan dengan benar. a) E. b) E.

yaitu bila terjadi perubahan warna jadi kuning/orange dan terdapat gas pada tabung durham maka pada sampel tersebut terdapat bakteri golongan coliform.1 ml dimasukkan pada media LBSS (Lactose Broth Single Stegth) yang berkomposisi sama tapi hanya kadar laktosa setengah dari LBDS yaitu 5 gr.4 6. air sumur. 3. air masak. 1. Bila belum mengalami perubahan warna maka air dieramkan lagi 48 jam.d) Ada kemungkinan bakteri enterik patogen yang lain dapat ditemukan bersama-sama dengan E. hal ini menunjukkan tidak terdapat aktivitas mikroba (bakteri Coliform) dalam tabung kultur. air kosan). air keran. dilakukan metoda Jumlah Perkiraan Terdekat atau Most Probable Number. Untuk mengetahui jumlah sel bakteri golongan coliform yang terdapat dalam sampel air.2 %) per liternya. Berdasarkan hasil percobaan yang dilakukan terhadap 8 sampel yang di uji (air merek aqua. 2. air zam-zam. Nilai MPN ditentukan dengan kombinasi jumlah tabung positif (asam dan gas) tiap serinya setelah diinkubasi. Uji Praduga Media pada tabung adalah Lactose Broth yang diberi indikator perubahan pH dan ditambah tabung durham. hal ini terjadi karena mikroba (bakteri Coliform) yang tumbuh mampu memfermentasikan laktosa menjadi asam dan gas. Untuk inkubasi 24 jam 4 . lactose (10 gr) dan Bromthymol Blue (0. Tanda negatif (-) pada tabel menunjukkan tidak terdapatnya gelembung dalam tabung durham dan gas pada tabung reaksi. Untuk sampel 1 ml dan 0. coli dalam air tersebut. peptone (5 gr). Pemberian sampel pada tiap seri tabung berbeda-beda. Gelembung gas menunjukan adanya metabolisme pada bakteri tersebut. Berdasarkan tabel hasil pengamatan hanya sampel 3. Penting untuk kita mengetahui adanya bakteri coliform atau tidak. air tanah. Hasil negatif terdapat pada sampel 1 dan 2. untuk menentukan apakah air yang digunakan masih sesuai peruntukannya sebagai air minum atau tidak. Untuk sampel sebanyak 10 ml ditumbuhkan pada media LBDS (Lactose Broth Double Stegth) yang memiliki komposisi Beef extract (3 gr). Tanda positif pada tabel hasil pengamatan menunjukkan adanya bakteri coliform dalam sample air yang diuji. air pam. Indikator yang digunakan dalam melakukan pengamatan ini adalah dengan melihat perubahan warna yaitu menjadi kuning. terdapat tiga tahap pengujian yang dilakukan yaitu : a. jika dalam 48 jam tidak ada perubahan warna maka air tersebut tidak mengandung bakteri coliform. dan 8 yang positif pada waktu inkubasi 24 jam sedangkan sampel 5 ( air tanah ) dan 7 (air keran) terbentuk gas pada inkubasi 48 jam sehingga di sebut meragukan. ada gelembung dalam tabung durham dan gas pada tabung reaksi.

4. karena kandungan eosin akan menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif. Hasil sample air pada tabung yang positif ( sampel 3. dan bentuknya berupa basil pendek.coli.065 Methylene blue. Berdasarkan identifikasi tersebut berarti pada sampel 7 tidak terdapat E. c. sampel nomor 6 ( air pam ) teridentifikasi adanya bakteri gram negatif yang ditandai dengan warna pink pada dinding selnya. yaitu uji penguat. Berdasarkan identifikasi tersebut berarti pada sampel 6 terdapat E. Lain halnya dengan sampel 7 (air keran). Uji Penyempurna Uji ini dilakukan untuk memperkuat dugaan bahwa pada sampel air 6 dan 7 terdapat bakteri E. 13.coli. 6 dan 8 ) dan yang meragukan ( sampel 5 dan 7) kemudian dilakukan uji lanjut. 0.4. EMB (Eosin-Methylen Blue) merupakan media selektif untuk isolasi dan diferensial bakteri enterik.5 gram agar. LB digunakan untuk menguji kembali terbentuknya gas pada tabung durham sebagai hasil fermentasi lactose oleh E.coli dan berdasarkan hasil percobaan pada kedua tabung reaksi terbentuk gelembung gas. Uji Penguat Pada uji ini digunakan medium EMB yang komposisinya terdiri dari Pepton 10 gram. 5 gram lactose. 5 .coli. 0. Untuk lebih meyakinkan adanya keberadaan E. sirkuler dan halus berwarna hijau metalic sheen yaitu pada sampel 6 ( Air pam) dan sampel 7 (air keran) . 2 gram K 2 HPO 4 . sedangkan Methylen Blue sebagai indikator fermentasi laktosa dan sukrosa yang ditunjukkan oleh adanya perubahan warna Hasil dari isolasi pada media EMB tampak adanya koloni berbentuk bulat. b. Fermentasi laktosa dan sukrosa membentuk koloni berwarna gelap. hasil pengamatan di bawah mikroskop mengidentifikasikan bakteri yang ada adalah bakteri gram positif yang ditandai dengan warna ungu pada dinding sel yang terwarnai dengan bentuknya berupa basil pendek. Presipitat gelap ini mungkin MB-eosionate yang dipresipitasi sebagai akibat pH rendah yang berada di sekitar koloni yang memfermentasi laktosa atau sukrosa. Namun pada pengamatan mikroskop.4 gram eosin Y.coli. Sedangkan pada 4 petri lainnya tidak terjadi warna hijau metalik hal ini menunjukan pada ke empat sampel air tersebut tidak ditemukannya E.coli pada sampel tersebut maka perlulah dilakuka uji selanjutnya yaitu uji Penyempurna. Pada uji ini dilakukan dua pengujian yaitu dengan menggunakan LB dan tabung durham sedangkan yang kedua dengan menanam bakteri tersebut pada NA agar miring sehingga setelah inkubasi selama 24 jam dapat diamati di bawah mikroskop dengan terlebih dahulu melakukan pewarnaan gram.

Jakarta : UI Press Darkuni.Penuntun Praktikum Mikrobiologi. 2001.  Koliform sebagai suatu kelompok dicirikan sebagai bakteri berbentuk batang.Media EMBA yang digunakan untuk dapat digunakan untuk penanaman bakteri.2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. 2005. b. M. Virologi.KESIMPULAN . dan Mikologi). gram negatif. Michael. Dwidjoseputro.  Pengidentifikasian bakteri E. 6 . Dasar-dasar Mikrobiologi. 2006. Sampel akan dikatakan mengandung bakteri E. Noviar. mulai dari pembiakan bakteri pada lactose broth. coli tersebut dilakukan dengan berbagai tahapan.Denpasar:Program Studi Ilmu Kesehatan Masyarakat. yang kemudian dilanjutkan dengan pengecatan gram. penanaman pada EMBA. tidak membentuk spora. c. aerobik dan anaerobik fakultatif yang memfermentasi laktosa dengan menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35oC  Faktor-faktor yang mempengaruhi pengidentifikasian bakteri E. Tabung durham pada tabung reaksi yang digunakan untuk mengidentifikasi adanya metabolism bakteri coliform dimana udara pada tabung durham yang merupakan hasil dari fermentasi dari laktosa. D.  Bakteri coliform adalah bakteri indikator keberadaan bakteri patogenik lain.Media cair Lactosa Broth yang digunakan untuk media penanaman bakteri karena memiliki molekul gula yang lebih sederhana sehingga mudah difermentasi oleh bakteri. coli apabila menunjukkan warna hijau metalik. Malang: Universitas Negeri Malang. Mikrobiologi (Bakteriologi. I Nengah. DAFTAR PUSTAKA Sujaya. Surabaya: Djambatan Pelczar.coli adalah sebagai berikut : a.

http//wordpress. 2.(t.Bakteri Indikator Sanitasi dan Keamanan Air Minum.Imron.coli maka untuk memperkuat dugaan harus diikut sertakan pada uji selanjutnya. 7 . Hasil meragukan adalah hasil dimana gas pada tabung durham terbentuk setelah inkubasi selama 48 jam sedangkan pada inkubasi 24 jam belum terbentuk gas.(2008). selain itu Salmonella tidak dapat memfermentasi laktosa sehingga tidak dapat membentuk gas pada tabung durham itulah sebabnya metode MPN tidak dapat langsung diterpakan pada Salmonella thyposa. Dewanti. Tamyis Ali.Ratih dan Hariyadi. Jawaban Pertanyaan. dan tidak membentuk indol motil. Pengukuran Coliform Fecal Dengan MPN (PDF). tumbuh pada sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon.t). Diikut sertakannya hasil ini pada uji penguat karena masih ada kemungkinan bahwa gas yang terbentuk merupakan hasil fermentasi lactose oleh E. Salmonella thyposa memiliki kemampuan untuk menghasilkan H2S. (teknik penghitungan MPN berdasarkan keberadaan tabung durham pada tabung durham ).com. 1.