P. 1
Praktikal 5 sce 3101

Praktikal 5 sce 3101

|Views: 2,618|Likes:
Published by cikaifa

More info:

Published by: cikaifa on Apr 12, 2011
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOC, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

04/14/2013

pdf

text

original

PRAKTIKAL 5 Praktikal 5 Objektif : enzim dan pencernaan.

:

a. Untuk menunjukkan aktiviti amylase pada kanji. b. Untuk mengetahui kesan suhu pada tindak balas enzim. c. Untuk mengetahui tindak balas pepsin pada putih telur (protein) d. Untuk melihat penggumpalan susu. e. Untuk melihat emulsifikasi lemak.

1

TEORI

:

Secara teori, enzim adalah protein globular. Mereka menurunkan tenaga pengaktifan yang diperlukan untuk tindakbalas berlangsung. Mereka bertindak sebagai mangkin biologi dan mempercepat reaksi metabolisme. Enzim sangat khusus di dalam setiap tindak balas. Enzim mempunyai tapak aktif dan hanya akan mengkatalisis reaksi ketika substrat dan tapak aktif memiliki bentuk yang saling melengkapi. Sebagai contoh, katalase mengkatalisis penguraian peroksida hydrogen untuk air dan oksigen. Reaksi kimia dikatalisis oleh enzim biasanya berbalik Jumlah enzim yang sangat kecil yang diperlukan untuk bertindak balas dengan sejumlah besar substrat. Enzim mempunyai nombor turnover yang tinggi. Sebagai contoh, jumlah turnover untuk katalase adalah 600.000. Salah satu molekul katalase enzim dapat mengkatalisis penguraian daripada 600.000 molekul peroksida hidrogen pada saat ke dalam air dan oksigen pada suhu badan. Sebahagian besar enzim berkesan hanya dalam julat pH yang sedikit. PH optimum pH di mana kadar maksimum reaksi berlaku. enzim yang berbeza mempunyai optima pH yang berbeza. . Di atas suhu optimum, tenaga kinetik meningkat menyebabkan atom molekul enzim bergetar dengan kuat. Hidrogen dan ikatan ion yang membantu untuk menahan bentuk tiga-dimensi tertentu dari molekul enzim yang rosak. Molekul enzim terungkap dan menjadi terdenaturasi. Kesannya adalah ireversibel. substrat tidak dapat masuk ke dalam diubah daripada laman aktif.Tingkat reaksi enzim yang dikendalikan dengan cepat jatuh. Beberapa bacteria termofilik dan alga secara motabolisme mereka mempunyai termostabil mereka mempunyai kualiti suhu yang optimum. Mikroorganisme yang hidup di Artik dan Antartika mempunyai enzim dengan suhu optimum sangat rendah.Sesetengah memerlukan kofaktor enzim, zat non-protein, yang penting bagi mereka untuk berfungsi secara berkesan. Ada tiga jenis kofaktor: kumpulan prostetik, koenzim dan pengaktif. Kadar reaksi enzim-dikawal mungkin akan menurun dengan adanya inhibitor kompetitif dan non-kompetitif.

2

Radas dan bahan Bikar

:

Kertas litmus biru dan merah Silinder penyukat Termometer Tabung uji Jubin putih Penitis Jam randik 1% larutan kanji Hidroklorik asid cair’ Natrium hidroksida cair’ Larutan bedenict Larutan iodine Telur Pepsin Rennin Susu Minyak kelapa

3

(a) Untuk menunjukkkan tindakan amylase terhadap kanji. Problem :

Apakah julat suhu yang sesuai untuk amylase saliva bertindak? Hipotesis :

Julat suhu yang sesuai untuk amylase saliva bertindak ialah antara 6.5 hingga 7.5. Pembolehubah :

1. Pembolehubah manipulasi :Jenis larutan yang ditambah ke dalam larutan amylase saliva 2. Pembolehubah bergerakbalas : Keputusan untuk ujian iodine dan dan ujian Benedict 3. Pembolehubah yang dimalarkan : Isipadu amylase saliva Isipadu kanji Masa untik larutan Benedict

4

Prosedur 1. Mulut dibersihkan 2. Air liur dikumpulkan di dalam tabung uji. 3. Air liur tersebut diuji mengunakan kertas litmus untuk menentukan samada air liur itu berasud atau beralkali. 4. Isipadu air suling bersamaan dengan isipadu air liur ditambah ke dalam tabung uji. 5. Air liur yang disediakan dibahagikan kepada tiga jumlah yang sama ke dalam tabung uji dan dilabelkan sebagai B,C,D.Kandungan setiap tabung uji adalah seperti berikut: A-3 cm3 air suling B-3 cm3 air liur yang disediakan C-3 cm3 air liur yang disediakan dan 3 cm3 asid hidroklorik cair D-3 cm3 air liur disediakan dan 3 cm3 natrium hidroksida cair. 6. 5 cm3 larutan kanji dicampur ke dalam setiap tabung uji dan dikacau rata. 7.Selepas 30 minit,setengah daripada larutan setiap tabung uji diuji dengan larutan iodine dan setengah lagi dididihkan dengan isipadu larutan Benedict yang sama isipadunya. 8.Keputusan ujian dijadualkan seperti di bawah.

5

Keputusan Tabung uji A Kanji Bahan

: Ujian Iodine Ujian Benedicts + Coklat kekuningan Warna kekal berwarna biru. tidak Untuk ujian iodine: yang positif.Ini menunjukkan kehadiran kanji. Ujian Benedicts: Keputusan penurun. • Kanji tidak terhidrolis liur kepada maltose.Ini kerana ketiadaan enzim(air maltose) ujian negative.Ini menunjukkan ketidakhadiran gula Inferens

air suling

berubah dan Keputusan

B

Kanji air liur

+ Warna berubah kekal warna

tidak Biru dan hijaukuni dalam ng coklat Mendapan merah bata.

Untuk

iodine:ujian menunjukkan

negative.Ini

ketidakhadiran kanji. Untuk ujian Benedicts: Ujian • positif.Ini Kanji maltose saliva menunjukkan kepada amylase secara kehadiran gula penurun. ditukar oleh bertindak

kekuningan .

saliva .Ini kerana amylase optimum pada pH 6.5-7.5. Untuk ujian iodine: keputusan positif.Ini menunuikkan kehadiran kanji Untuk ujian Benedicts:keputusan negative.Ini menunjukkan ketidakhadiran gula penurun.

C

Kanji asid

+ Coklat biru gelap

Tiada perub ahan dalam warna

air liur + kekuningan hidroklori k cair •
6

Kekal

dalam warna biru

Kan

ji

tidak

berubah hidroklorik terlalu

menjadi maltose.Ini kerana penambahan asid dan larutan saliva menyebabkan

menjadi tidak

berasid.Jadi,amylase bertindak secara aktif. Biruhija Untuk ujian iodine:keputusan u kuning Mendapan merah bata negative.Ini menunjukkan ketidakhadiran kanji. Untuk ujian Benedicts: Ini menunjukkan kehadiran gula penurunan. Amilase saliva menukarkan kanji kepada maltose. • Penambahan menyebabkan menjadi alkali.Jadi,amylase dapat bertindak menukar maltose. kanji saliva dengan kepada NaOH larutan

D

Kanji NAOH cair

+

Tiada perubah an dalam warna

air liur +

Perbincangan

:

7

1. Dalam eksperimen ini ,kita dapat lihat apabial kanji dicampur dengan air suling,ujian iodine menunjukkan keputusan yang positif.Ini disebabkan kehadiran kanji.Manakala,ujian Benedicts pula menunjukkan keputusan negative disebabkan ketidakhadiran gula penurun.Kanji tidak terhidrolis kepada maltose kerana kehadiran enzim iaitu amilase saliva. 2. Apabila air liur dicampur dengan kanji,ujian Iodin menunjukkan keputusan negatif disebabkan ketidakhadiran kanji.Manakala ujian Benedicts pula menunjukkan keputusan positif kerana kehadiran gula penurun.Kanji diurai ke maltose kerana amilase saliva bertindak secara optimum pada pH 6.5-7.5. 3. Dalam tabung uji C,kita melihat warna iodine dalam ujian Iodine tidak berubah.Warna masih juga tidak berubah apabila diuji dengan ujian Benedicts.Ini disebabkan ujian iodine menunjukkan kehadiran kanji manakala ujian Benedicts menunjukkan ketidakhadiran gula penurun.Kanji tidak ditukar ke maltose disebabkan penambahan hidroklorik asid dan ianya menyebabkan larutan menjadi terlalu berasid.Jadi,amylase saliva tidak bertindak balas dengan aktif. 4. Di dalam tabung uji D,campuran kani,air liur dan NAOH cair menunjukkan tiada perubahan dalam warna dan warna kekal coklat kekuningan apabial diuji dengan ujian iodine test.Apabila diuji dengan ujian Benedicts,larutan bertukar warna mendapan merah bata.Ini disebabkan penambahan NaOH dan menyebabkan larutan bertukar menjadi alkali.

Langkah berjaga-jaga

8

1. Untuk mengelakkan kehadiran mikroorganisma,cuci mulut terlebih dahulu sebelum mengumpul amylase saliva. 2. Semua bahan dan radas diperiksa terlebih dahulu untuk memastikan kelancaran semasa eksperimen dijalankan.
3. Semasa menjalankan ujian Benedicts,pastikan suhu sentiasa tetap iaitu pada

100oC. 4. Pastikan amylase saliva dilarutkan dengan air suling pada kadar isipadu yang sama untuk memastikan kepekatan amylase saliva adalah sama dengan kepekatan larutan kanji.Ini adalah kerana reaksi kadar enzim-mangkin adalah berkadaran terus dengan kepekatan enzim. 5. Berhati-hati semasa mengendalikan air panas untuk mengelakkan kecederaan. Kesimpulan Julat pH untuk amylase saliva untuk bertindak balas adalah pada 6.5 – 7.5.Ini menunjukkan kehadiran gula penurun dan kanji telah ditukar menjadi maltose oleh amylase saliva.Ujian iodine menunjukkan keputusan negative kerana ketidakhadiran kanji.Ujian Benedicts pula menunjukkan keputusan positif disebabkan oleh kehadiran gula penurun.Hipotesis diterima.

b) Menyiasat Kesan Suhu Terhadap Aktiviti Amilase Air Liur.

9

Masalah

:

Apakah kesan suhu terhadap aktiviti amilase air liur terhadap kanji? Hipotesis :

Enzim amilase tidak aktif pada suhu yang rendah. Kadar aktiviti akan meningkat apabila meningkatnya suhu. kadar akan menurun apabila suhu melebihi suhu optimum. Pemboleh ubah a) Manipulasi : : suhu yang berbeza

b) Bergerak Balas : tempoh masa bagi campuran bertukar kepada warna kuning. c) Dimalarkan : isipadu larutan saliva, isipadu larutan kanji, kepekatan larutan kanji.

Prosedur:

10

1. larutan saliva disediakan sama seperti yang disediakan untuk eksperimen (a).
2. 5cm3 larutan saliva diletakkan di dalam tabung uji dan 5cm3 1% larutan kanji

diletakkan di dalam berlainan tabung uji. 3. Kedua-dua tabung uji dibiarkan di dalam suhu bilik. 4. Titis demi titis larutan cair iodin dititiskan di atas permukaan jubin putih. 5. Kedua-dua larutan tersebut dicampur dan dikacau dengan sebati selama 1 minit. 6. Campuran tersebut dititiskan dengan menggunakan batang kaca kemudian diuji dengan titisan iodine yang ada pada jubin putih. Warna biru pekat mula kelihatan. 7. Ujikaji ini diulang selang 1 minit, batang kaca dibersihkan dengan menggunakan air suling setiap ujikaji hingga campuran gagal bertukar menjadi warna biru. 8. Jumlah masa yang diambil diantara mencampurkan larutan saliva dan larutan kanji serta hingga tamat ujikaji direkodkan. Masa inilah masa untuk semua kanji berubah kepada maltose dengan bantuan amylase di dalam suhu bilik.
9. Eksperimen diulang dengan menggunakan suhu yang berbeza: 50, 150, 250, 450,

550, 650, 750. 10. Ia adalah penting untuk memastikan setiap ujikaji larutan saliva dan larutan kanji adalah panas atau sejuk sebelum kedua-dua larutan dicampurkan. 11. Keputusan ujikaji direkodkan.

Keputusan :
11

Suhu (ºC) Suhu bilik 5 15 25 35 45 55 65 75

Tempoh masa yang diperlukan untuk kanji berubah Aktiviti menjadi maltose (minit,t) 1 / / / / / / / / / 2 / / / / / / / / / 3 / / / / x / / / / 4 x / / x x / / / / 5 x / / x x / / / / 6 x / / x x x / / / 7 x / x x x x / / / 8 x X x x x x x / / 9 x x x x x x x / / 10 X x X x x x x / / (1/t) 1/3 = 0.33 1/7 = 0.14 1/6 = 0.17 1/3 = 0.33 1/2 = 0.50 1/5 = 0.2 1/7 = 0.14 1/10 = 0.10 1/10 = 0.10

kata kunci: / = ada kanji X = kanji telah berubah menjadi maltose Apabila semakin pendek tempoh masa yang diambil maka semakin aktif enzim, aktiviti (kadar tindak balas) merujuk kepada 1/t (timbale balik bagi tempoh masa yang diambil)

Perbincangan Berdasarkan graf tersebut, suhu optimum adalah 35oC
12

Kadar tindak balas amylase meningkat dari 5oC , kemudian mencapai kadar maksimum iaitu 35oC. Dari 28oC dan seterusnya, kadar tindak balas menurun. 1. Semasa eksperiman dijalankan, langkah –langkah yang perlu dijaga ialah: i) aktif ii) Tahap pH kanji diuji dengan menggunakan kertas litmus. Kanji perlu berada dalam keadaan beralkali kerana amylase bertindak balas dalam medium yang beralkali. Suhu hendaklah sentiasa dijaga sepanjang prosedur dijalankan. Jika suhu lebih tinggi daripada yang diperlukan maka molekul-molekul di dalam enzim akan bergerak lebih pantas kesan daripada teori kinetic. Oleh yang waktu yang iii) demikian, kesan terhadap enzim tidak dapat dilihat pada tertentu. Tabung uji hendaklah dibersihkan dengan menggunakan air suling supaya bahan tidak tercemar kerana ia mampu merubah hasil eksperimen. iv) Gunakan pipette berbanding silinder penyukat atau picagari untuk mendapatkan isipadu yang tepat. v) Amilase haruslah dicairkan bersama nisbah yang sama air suling untuk mendapat tindak balas yang diperlukan. vi) secara vii) Pastikan larutan kanji dan amylase diletakkan di dalah air selama 5 minit supaya seimbang.jika tidak maka eksperimen tidak akan berjalab lancer. Pastikan bawah thermometer tidak menyentuh dasar bikar supaya suhu tidak meningkat dengan mendadak. viii) Sambil mengambil bacaan thermometer atau picagari, elakkan parallax error untk mendapat bacaan yang tepat.

13

x)

Ulang eksperimen sebanyak 3 kali untuk mengira purata masa dengan tepat. Ini dapat memastikan meningkat ketepatan keputusan.

Kesimpulan

:

Aktiviti amilase air liur dipengaruhi suhu. di bawah suhu optimum, kadar tindakbalas meningkat apabila suhu meningkat sehingga suhu mencapai suhu optimum pada 35oC. Kadar tindakbalas menurun dengan pantas apabila suhu meningkat lebih daripada suhu optimum. Hipotesis diterima.

Soalan

14

1.

Lukiskan graf antara 1/t dan suhu apakahsuhu yang optimum bagi eksperimen ini? Suhu optimum ialah 35oC.

2.

Terangkan bagaimana suhu mempengaruhi aktiviti amylase air liur.. Enzim merupakan molekul preotein yang berglobul yang berfungsi sebagai mangkin biologi. Enzim kekal tidak berubah dan boleh digunakan semula untuk memangkinkan tindak balas serupa yang lain. Enzim tidak aktif pada suhu rendah. Peningkatan suhu akan

meningkatkan tenaga kinetic bagi molekul-molekul subtract dan enzim. Molekul bergerak lebih pantas dan ini meningkatkan peluang perlanggaran molekulmolekul substrat pada tapak aktif enzim. Kadar tindak balas meningkat dua kali ganda bagi setiap peningkatan suhu sebanyak 10oC sehingga suhu optimum. Suhu optimum merupakan suhu di mana kadar tindak balas adalah maksimum, iaitu kira-kira 35-40oC. Umumnya, haiwan mempunyai suhu optimum yang lebih tinggi daripada tumbuhan. Enzim-enzim di dalam tubuh manusia berfungsi paling baik pada suhu kira-kira 37oC. Pada suhu yang melebihi suhu optimum, peningkatan tenaga kinetic menyebabkan ikatan kimia yang mengikat molekul enzim kepada bentuknya terputus. Bentuk tiga dimensi enzim dan tapak aktif akan berubah. Enzim dikatakan mengalami penyahaslian. Kesan ini tidak berbalik. Molekul subtract tidak lagi muat ke dalam tapak aktif enzim. Kadar tindak balas menurun dengan pantas. Bagi kebanyakan organisma, kadar tindakbalas akan terhenti apada suhu 60oC akibat penyahaslian lengkap enzim badan.

15

16

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->