P. 1
6-Kromatografi Kolom Dan KLT

6-Kromatografi Kolom Dan KLT

|Views: 869|Likes:

More info:

Published by: Ihsanulfajar Mulyanto on May 03, 2011
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOC, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

05/23/2013

pdf

text

original

KROMATOGRAFI KOLOM DAN KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS Isolasi Kurkumin Dari Kunyit (Curcuma longa L.

)

I.

Tujuan
1. Menentukan Rf kurkumin dan senyawa turunannya.

2. Menentukan urutan polaritas dari kurkumin dan senyawa turunannya. II. Teori Dasar Kromatografi adalah prinsip pemisahan campuran senyawa berdasarkan perbedaan kecepatan migrasi masing – masing komponen pada dua fasa, yakni fasa diam dan fasa gerak. Perbedaan kecepatan migrasi tersebut disebabkan oleh perbedaan kemampuan masing – masing komponen untuk diarbsobsi oleh salah satu fasa, baik fasa gerak maupun fasa diam. Zat terlarut yang memiliki afinitas terhadap fasa gerak yang lebih besar akan tertahan lebih lama pada fasa diam. Dengan demikian senyawa-senyawa dapat dipisahkan komponen demi komponen akibat perbedaan migrasi di dalam fasa gerak dan fasa diam. Zat terlarut di dalam suatu fasa gerak mengalir dalam suatu fasa diam. Fasa diam adalah fasa tidak bergerak, sedangkan fasa gerak adalah fasa yang bergerak melalui fasa diam dan membawa komponen-komponen senyawa yang akan dipisahkan. Terdapat empat jenis utama kromatografi yaitu kromatografi cair, kromatografi gas, kromatografi lapis tipis, dan kromatografi kertas. Keakuratan hasil pemisahan dengan metode kromatografi bergantung pada beberapa factor berikut : 1. Pemilihan adsorben sebagai fasa diam 2. Kepolaran pelarut atau pemilihan pelarut yang sesuai sebagai fasa gerak 3. Ukuran kolom (panjang dan diameter) relatif terhadap jumlah material yang akan dipisahkan 4. Laju elusi atau aliran fasa gerak Kunyit (Curcuma longa L.) adalah salah satu tumbuhan yang memilki banyak manfaat. Kunyit memiliki kandungan minyak atsiri sebanyak 6% yang terdiri dari senyawa monoterpen dan sesquiterpen, zat warna kuning yang

Hasil Rf untuk ketiga gradasi warna tersebut adalah : Rf a : 0. Dengan Rf = 0. protein.4 cm Rf c : 0. Komponen aktif utama dalam kunyit adalah kurkumin. 1.6 cm IV.6-heptadiena-3. dan fraksi kuning (paling bawah).7-bis(4’-hidroksi-3’-metoksifenil)-1. 2. KLT Preparatif Terdapat tiga gradasi warna hasil KLT dengan eluen CH2Cl2 : CH3OH = 97 : 3. Kromatografi Kolom Larutan ekstrak dengan eluen CH2Cl2 : CH3OH = 99 : 1 terbagi menjadi 3 fraksi bergradasi dalam kolom kromatografi. Pembahasan Pada percobaan kali ini diawali dengan penambahan diklorometana pada rimpang kunyit kering. monodesmotoksikurkumin dan bidesmetoksikurkumin). kalium.5-dion III.5609. Kurkumin memiliki sifat antikanker dan antitumor dan mampu menghambat enzim HIV-1 integrase.25. fosfor. Penggunaan diklorometana bertujuan untuk melarutkan kurkumin dan turunannya yang merupakan senyawa kurkuminoid dari kunyit. Data Pengamatan dan Pengolahan Data 1. Sedangkan larutan ekstrak dengan eluen CH2Cl2 : CH3OH = 97 : 3 memiliki Rf = 0. besi dan vitamin C.disebut kurkuminoid sebanyak 5% (meliputi kurkumin 50%-60%. yakni fraksi merah (paling atas).25 cm Rf b : 0. Pemilihan pelarut didasarkan atas persamaan kepolaran dengan kurkumin dan . fraksi jingga (tengah).

Hasil dari analisis padatan menunjukkan adanya 3 komponen utama yang terkandung dalam padatan tersebut. Isolasi kurkumin dilakukan dengan kromatografi kolom sedangkan analisis terhadap padatan yang diperoleh dilakukan dengan KLT preparatif. Penambahan n-heksana pada residu hasil pemekatan berfungsi untuk memisahkan pengotor dengan komponen kunyit yang akan diisiolasi. demetoksikurkumin (hydroxycinnamoyl feruloylmethane) & bis-demetoksikurkumin (dihydroxydicinnamoyl methane). Diklorometana adalah pelarut organik sehingga ekstrak kurkumin akan berada pada fasa organik. Diklorometan bersifat non-polar dan kurkumin dan turunannya bersifat non-polar pula sehingga kurkumin dapat larut dalam diklorometana. Berdasarkan literatur diketahui bahwa 3 komponen tersebut adalah senyawa-senyawa kurkuminoid yaitu kurkumin (diferuloylmethane). . Larutan kemudian didistilasi untuk memperoleh ekstrak kurkumin yang lebih pekat dan murni.turunannya.

eluen CH2Cl2 : CH3OH harus tercampur dengan merata ke seluruh permukaan silika gel. akan terikat dengan gugus hidroksil tersebut dalam 2 cara yaitu ikatan hidrogen dan interaksi dipoldipol. Kolom pun dijaga tidak menggelembung agar suspensi fasa diam menjadi homogen sehingga saat kromatografi. Kromatografi Kolom Kromatografi kolom berprinsip pada perbedaan kecepatan migrasi masing-masing komponen untuk memisahkan senyawa-senyawa yang tercampur di dalamnya. Fasa gerak dalam percobaan ini yaitu CH2Cl2 : CH3OH = 99 : 1 yang bersifat non-polar.1. oleh karena itu untuk menjaga agar kolom tidak rusak. Saat pembuatan kolom. fasa diam (Silica gel) bersifat polar dan fasa gerak (eluen CH2Cl2 : CH3OH) bersifat non-polar. eluen CH2Cl2 : CH3OH ditambahkan hingga beberapa cm diatas silika gel. Sifat polar ini dikarenakan adanya gugus hidroksil pada permukaan silika gel sehingga bila senyawa polar dilewatkan. Dalam kolom terbentuk tiga lapisan warna yaitu kuning (lapisan paling bawah). Fasa diam pada percobaan ini adalah silika gel (SiO2) yang bersifat polar. Fasa diam yang bersifat polar lebih berikatan dengan komponen yang cenderung polar. Kolom harus dibuat dengan hati – hati agar tidak retak sehingga proses adsorpsi senyawa dapat berlangsung dengan baik. Silika gel cepat sekali mengering. atau kombinasi cairan-padatan) dan fase gerak (berupa cairan atau gas). Semua kromatografi memiliki fase diam (dapat berupa padatan. semakin lama pula senyawa tersebut tertahan di fasa diam sedangkan senyawa-senyawa yang kurang polar akan terbawa keluar kolom lebih cepat. jingga (lapisan tengah). Dalam kromatografi ini. Maka semakin polar suatu senyawa. tidak ada senyawa/komponen berhenti karena tertahan gelembung. dan merah (lapisan paling .

kurkumin terletak pada lapisan paling atas yaitu pada fraksi warna merah. Pada percobaan komponen yang berada dalam larutan yang diuji bergerak dengan eluen dan menimbulkan bercak warna. Berdasarkan data pada literatur. Oleh karena itu. Eluet tersebut terbawa keluar kolom lebih cepat karena senyawanya lebih tertahan pada fasa gerak yang bersifat non polar sehingga sifat senyawa tersebut pastilah yang paling non polar. Pada percobaan ini pelarut yang digunakan adalah CH2Cl2 : CH3OH karena kepolarannya sama dengan senyawa yang akan diuji. sedangkan fraksi paling bawah yaitu fraksi berwarna kuning adalah bisdemetoksikurkumin yang merupakan komponen paling non-polar diantara ketiga senyawa kurkuminoid. Pelarut yang dipilih disesuaikan dengan sifat kelarutan senyawa yang dianalisis. berwarna jingga dan merah.0. CH2Cl2 : CH3OH bersifat non-polar dan kurkumin beserta turunannya cenderung bersifat non polar juga. KLT Preparatif Pemeriksaan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) preparatif bertujuan untuk menguji kemurnian kristal yang terbentuk. Eluet kedua yaitu larutan berwarna jingga merupakan senyawa yang sifat polarnya lebih besar kedua setelah eluet pertama.atas). 2. Eluet ketiga yaitu larutan berwarna merah adalah senyawa yang paling polar karena lebih tertahan pada fasa diam yang bersifat polar. Pelarut dapat . Fraksi kedua dari atas yaitu eluet berwarna jingga adalah demetoksikurkumin yang memiliki kepolaran tertinggi kedua setelah kurkumin. Eluet yang pertama terelusi yaitu larutan berwarna kuning merupakan senyawa yang paling tidak polar diantara ketiga lainnya. Nilai Rf dapat didefinisikan sebagai jarak yang ditempuh oleh senyawa dari titik asal dibagi dengan jarak yang ditempuh oleh pelarut dari titik asal. Setelah dilakukan elusi akan diperoleh larutan yang berwarna kuning saja. kurkumin merupakan senyawa yang lebih polar dibanding senyawa kurkuminoid lainnya sehingga pada percobaan ini kurkumin akan terelusi paling terakhir. Data yang diperoleh dari KLT preparatif adalah nilai Rf yang berguna untuk identifikasi senyawa. Lapisan ini menandakan ketiga senyawa kurkuminoid yang ada. Oleh karena itu bilangan Rf selalu lebih kecil dari 1.

Pada percobaan ini. . nilai Rf kurkumin berada diantara rentang tersebut yaitu 0. demetoksikurkumin (dihydroxydicinnamoyl methane). Bila dibandingkan dengan hasil uji KLT preparatif. CRC Handbook of Chemistry and Physics. Rf demetoksikurkumin adalah 0. Robert C. Ketiga titik ini adalah senyawa kurkuminoid yang juga merupakan pigmen warna kuning pada kunyit. Kurkumin berada pada lapisan warna paling bawah dalam KLT preparatif.25. Inc. Rf kurkumin berada diantara 0. Dapat dikatakan bahwa kurkumin berhasil diisolasi. Simpulan 1.6. sedangkan bercak akan timbul sebelum batas atas lempengan. Pengukuran nilai Rf berlangsung sebagai berikut: Rf = jarak yang ditempuh oleh komponen jarak yang ditempuh oleh pelarut Menurut data pada literatur. V. Hal ini berarti kurkumin merupakan senyawa yang paling polar diantara senyawa kurkuminoid lainnya karena lebih tertahan pada silica gel (fase diam) yang bersifat polar. 2.4 dan Rf bis- demetoksikurkumin adalah 0.4. Daftar Pustaka • Weast. Urutan polaritas kurkumin dan senyawa turunannya dari senyawa yang kepolarannya lebih besar yaitu kurkumin. dan bisdemetoksikurkumin (hydroxycinnamoyl feruloylmethane). ada 3 noda/bercak yang timbul. Hal 293. karena diperoleh nilai Rf yang dapat dibandingkan dengan Rf pada literatur. Florida: CRC Press. walaupun kemurniannya tidak 100%.25. Senyawa yang kepolarannya setelah kurkumin adalah demetoksikurkumin dan senyawa yang paling non-polar diantara ketiganya adalah bis-demetoksikurkumin. tergantung fasa gerak dan diam yang digunakannya.2-0. Rf kurkumin adalah 0.mencapai bagian atas dari lempengan. 1978. Pemisahan dengan KLT preparatif lebih akurat daripada kromatografi kolom. demetoksikurkumin dan bisdemetoksikurkumin. VI. yakni kurkumin (diferuloylmethane). 308.

• Underwood. Analisa Kimia Kuantitatif.A. 2nd ed.. 1986. Day Jr. R. (Halaman 479) • http://id.wikipedia. Jakarta: Penerbit Erlangga.org/wiki/Kurkumin .L. A.

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->