PEMBUATAN MEDIA PDA (Laporan Praktikum Mikrobiologi Pertanian) Oleh: ARI SETIAWAN

0914013079 Dosen PJ Dr. Ir. Cipta Ginting, M.Sc LABORATORIUM HAMA PENYAKIT
TANAMAN JURUSAN AGROEKOTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS
LAMPUNG 2010 I. PENDAHULUAN

Latar Belakang

Sebelum melakukan pengamatan terhadap bakteri dan jamur di laboratorium, telebih dahulu
kita harus menumbuhkan ataumembiakan bakteri/jamur tersebut. Mikroorganisme dapat
berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan manusia. Mikroorganisme yang
dikembangkan oleh manusia diantaranya melalui substrat yang disebut media. Untuk
melakukan hal ini, haruslah dimengerti jenis-jenis nutrisi yang diisyaratkan oleh bakteri atau
jamur dan juga macam lingkungan fisik yang menyediakan kondisi optimum bagi
pertumbuhannya. Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu substrat
yang disebut medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan kebutuhan
jenis-jenis mikroorganisme yang bersangkutan. Beberapa mikroorganisme dapat hidup baik
pada medium yang sangat sederhana yang hanya mengandung garam anargonik di tambah
sumber karbon organik seperti gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan suatu
medium yang sangat kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan-
bahan kompleks lainnya.

B. Tujuan Praktikum

1. Mengetahui cara membuat media yang umum digunakan.

2. Mengetahui cara mensterilkan media buatan dengan otoklaf

3. Mengetahui jenis dan kegunaan media

4. Mampu membuat media PDA sebagai media untuk biakan bakteri.

II. PROSEDUR KERJA

A. Alat dan Bahan Alat : Beaker glass, Batang penggaduk, Neraca elektrik, Kapas,
Alumunium Foil, Labu erlenmeyer, Autuklaf,Cawan Petri, tabung reaksi, pisau potong,
kompor Bahan : Dekstrose, Aquades 500 ml, Agar kering 15 g, kentang, Alkohol 70%

B. Cara Kerja

– kentang dipotong kecil ukuran dadu kemudian ditimbang seberat 100 gr

– potong kecil-kecil agar batang kemudian timbang sebanyak 10 gr

– rebus kentang dalam air sampai sarinya keluar dan kemudian diambil ekstraknya

– masukkan kentang kedalam tabung erlenmeyer 500 ml

 –masukkan dextrose/gula pasir dan agar sedikit demi sedikit sambil terus diaduk (jangan
sampai menggumpal)

– tutup dengan kertas alumunium foil

– bungkus dengan plstik tahan panas kemudian sterilkan dengan menggunakan autoklaf
dengan suhu 121o C

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pengamatan Dalam pembuatan PDA ini akan menghasilkan media yang akan
digunakan sebagai media biakan bakteri dan jamur. Media PDA pada saat masih panas akan
berbentuk cairan yang kental kemudian setelah dingin akan menjadi padatan. B. Pembahasan
Media PDA (Potato Dextrosa agar) merupakan medium semi sintetik. Media merupakan
tempat dimana tejadi perkembangan organisme.Organisme menyerap karbohidrat dari kaldu
kentang dan gula serta dari agar yang telah bercampur. Hal inilah yang menyebabkan
mengapa kentang harus di potong dadu, agar karbohidrat di kentang dapat keluar dan
menyatu dengan air sehngga menjadi kaldu. Semakin kecil permukaan, maka semakin besar
daya osmosisnya. Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu substrat
yang disebut medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan kebutuhan
jenis-jenis mikroorganisme yang bersangkutan. Penggunaan kentang dalam pembuatan media
karena kentang kaya akan karbohidrat yang sangat diperlukan oleh suatu mikroorganisme.
Dalam pembuatan PDA ini biasa digunakan Dextrosa, namun dextros ini dapat digantikan
dengan gula pasir biasa.

V. KESIMPULAN

Dari percobaan diatas dapat disimpulkan bahwa:

1. Mikroorganisme dapat dikembangkan oleh manusia diantaranya melalui substrat yang

disebut media.

2. Nutrien dalam medium harus memenuhi kebutuhan dasar makhluk hidup, yang meliputi
air,karbon, energi, mineral dan faktor tumbuh.

3. Kentang adalah bahan yang baik untuk digunakan sebagai bahan media buatan karena
banyak mengandung karbohidrat

4. media PDA (Potato Dextrosa Agar) merupakan media semisintetik 5. penggunaan alat dan
bahan dalam bekerja haruslah slalu terjaga dari kontaminan.

DAFTAR PUSTAKA

Ermila, Mila. 2005. Penuntun Praktikum Mikrobiologi. dalam http//ekmon-

saurus.blogspot.com/2008/11/bab-2-media-pertumbuhan.html. diakses pada 06 Maret 2010.
Nur Qalbi dkk, 2006. Pembuatan Media Potato Dextrose Agar (PDA): IPB. Bogor
Pelczar, M. J. dan E. C. S. Chan. 1986. Dasar-dasar Mikrobiologi. UI Press, Jakarta

Pradhika, E. Indra. http//ekmon-saurus.blogspot.com/2008/11/bab-2-media-

pertumbuhan.html. diakses pada 16 Maret 2010.

Volk dan Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar Jilid. dalam http//ekmon-

aurus.blogspot.com/2008/11/bab-2-media-pertumbuhan.html. diakses pada 16 Maret 2010.

http://blog.unila.ac.id/setiawan/2010/04/12/pembuatan-media-pda-laporan-praktikum-
mikrobiologi-pertanian-oleh-ari-setiawan-0914013079-dosen-pj-dr-ir-cipta-ginting-m-
sc-laboratorium-hama-penyakit-tanaman-jurusan-agroekote/

PENDAHULUAN
A. Latar Belakang

Media biakan merupakan suatu zat yang digunakan untuk menumbuhkan jasad
renik di laboraturium. Fungsi dari suatu media biakan adalah memberikan tempat dan kondisi
yang mendukung pertumbuhan dan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang
ditumbuhkan. Sebelum menumbuhkan mikroorganisme dengan baik, langkah pertama harus
dapat dipahami kebutuhan dasar mikroorganisme lalu mencoba memformulasikan suatu
medium yang memberikan hasil terbaik.

Potato Dextrose Agar merupakan salah satu media yang banyak digunakan untuk
membiakkan suatu mikroorganisme, baik itu berupa cendawan/fungi, bakteri, maupun sel
makhluk hidup. Potato Dextrose Agar merupakan paduan yang sesuai untuk menumbuhkan
biakan. Karena ekstrak potato (kentang) merupakan sumber karbohidrat, dextrose (gugusan
gula, baik itu monosakarida atau polysakarida) sebagai tambahan nutrisi bagi biakan
,sedangkan agar merupakan bahan media/tempat tumbuh bagi biakan yang baik, karena
mengandung cukup air.

B. Tujuan
Praktikum ini bertujuan agar mahasiswa mengetahui fungsi dari pembuatan medium dan
dapat membuat medium semisintetik PDA (Potato Dextrosa Agar).

TINJAUAN PUSTAKA
Sebelum menumbuhkan mikroorganisme dengan sebaik-baiknya, pertama-tama
anda harus dapat memahami kebutuhan dasarnya lalu mencoba memformulasikan suatu
medium yang memberikan hasil yang terbaik. Yang dimaksud dengan medium disini adalah
bahan yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme diatas atau didalamnya.
Sebenarnya tidak ada satu macam medium pun yang cocok untuk setiap cendawan berbeda-
beda. Beberapa cendawan dapat tumbuh dengan baik pada setiap macam medium yamg
mengandung beberapa bahan organik, cendawan yang lain memerlukan zat-zat kimia tertentu
(Hadiotomo,1993).

Menurut Anonim (2006), media biakan adalah bahan atau campuran bahan yang
dapat digunakan untuk membiakkan mikroorganisme, karena memiliki daya dukung yang
tinggi terhadap pertumbuhan dan perkembangbiakkannya.

Menurut susunannya, media dapat dibagi menjadi tiga golongan, yaitu media alam,
media semi sintetik, dan media sintetik. Dalam media alam, komponen nutrisi tidak dapat
diketahui dengan pasti setiap waktu karena dapat berubah-ubah dalam bahan yang digunakan
dan bergantung dari asalnya; sebagai contoh ialah kentang, jagung, serangga, rambut dan
sebagainya. Dalam media semi sintetik, selain bahan hasil pertanian, digunakan pula zat-zat
kimia yang komposisinya diketahuidengan tepat. Contoh medium semi sintetik adalah agar
dekstrosa kentang (ADK) yang biasa disebut potato dextrose agar (PDA). Dalam media semi
sintetik, misalnya agar Czapek (Czapek’s agar), semua zat kimia diketahui dengan tepat
komposisi beserta konsetrasinya. Berbeda dengan media sintetik tidak dapat diulang secara
tepat.

Menurut Dwijoseputro(1987), medium buatan manusia dapat berupa medium cair,

medium kental atau padat, medium yang kering, medium yang diperkaya, medium yang
sintetik.
METODOLOGI
A. Waktu dan Tempat Pelaksanaan

Praktikum pembuatan media Potato Dextrose Agar (PDA) dilakukan pada hari
Jumat, tanggal 24 November 2006 pada pukul 09.00-11.00 WIB. Praktikum ini dilaksanakan
di Laboratorium Patologi Hutan-Fakultas Kehutanan.

B. Alat dan Bahan


Alat:

1. Timbangan
2. Kompor
3. Pengaduk
4. Gelas ukur
5. Gelas Erlenmeyer
6. Kapas
7. Botol
8. Alumunium foil

Bahan:
1. Kentang: 100 gram
2. Gula pasir: 10 gram
3. Bubuk agar bening: 6-7 gram
4. Aquades: 0.5 liter

C. Cara kerja :
- Kentang tanpa kulit di potong-potong berbentuk dadu
- Dimasak selama ½ jam lalu disaring untuk diambil ekstraknya, kemudian
ditambah air suling hingga mencapai 1000 ml
- Ekstrak kentang dan air suling dimasak hingga mendidih lalu dimasukan agar
dan gula. Apabila air yang digunakan berkurang maka ditambahkan dengan ukuran
yang hilang sesuai besar penguapan.
- Apabila telah masak, masukan PDA tersebut ke dalam erlenmenyer / wadah
kemudian ditutupi dengan kapas dan aluminium foil.
-Mensterilkan media dalam autoklaf dengan suhu 121˚C selama 15 menit pada
tekanan 1 atm.
- Jika media tidak langsung dipakai, maka disimpan di dalam lemari pendingin.

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil
Pembuatan media Potato Dextrose Agar pada praktikum ini menghasilkan± 0.5 liter
media yang steril dalam bentuk agar (padatan).
B. Pembahasan
Media PDA (Potato Dextrosa agar) merupakan medium semi sintetik. Media
merupakan tempat dimana tejadi perkembangan organisme. Organisme menyerap karbohidrat
dari kaldu kentang dan gula serta dari agar yang telah bercampur. Hal inilah yang
menyebabkan mengapa kentang harus di potong dadu, agar karbohidrat di kentang dapat
keluar dan menyatu dengan air sehngga menjadi kaldu. Semakin kecil permukaan, maka
semakin besar daya osmosisnya.
Suatu media untuk menumbuhkan jasad renik harus memiliki kriteria yang
mendukung kehidupan makhluk hidup yang tumbuh di dalamnya.
Syarat media yang baik adalah:
Mengandung bahan makanan yang sesuai bagi jasad renik
Mengandung oksigen tersedia yang dibutuhkan
Mengandung kelembaban tertentu
Ph media harus sesuai
Suhu media harus cocok
Media harus steril
Media harus terlindung dari kontaminasi

Potato Dextrose Agar merupakan salah satu media biakan karena kaya akan nutrisi
yang dibutuhkan oleh mikroba untuk hidup. Nutrisi yang diberikan media untuk mikroba
berupa karbohidrat (pati) dari kentang, glukosa dari dekstrosa atau fruktosa serta kandungan
air dalam agar. Media yang miskin hara seperti air hanya dapat dugunakan untuk
penyimpanan , karena mikroba tidak mudah berkembangbiak pada media miskin nutrisi yang
dapat menyebabkan pertumbuhan mikroba dapat terhambat.

Bagian kentang yang digunakan adalah sari patinya karena selain mengandung
ekstrak mineral juga mengandung pati (amilum) yang merupakan bentuk darip o lysa ka rid a
sebagai tambahan makanan biakan. Glukosa yang digunakan adalah gula pasir, karena
banyak tersedia dan harganya lebih murah.

Sterilisasi dilakukan dalam autoklaf dengan suhu 121°C dalam waktu ±15 menit
dengan tekanan 1 atm . Suhu ini merupakan ketetapan, karena umumnya organisme tidak
dapat bertahan hidup pada suhu dan waktu tersebut. Setelah 15 menit, maka autokalaf dapat
dimatikan. Biarkan autoklaf sampai tekanannya menjadi 0,setelah itu PDA baru dapat
dikeluarkan.

Agar bertindak sebagai lingkungan bagi perkembangan organisme. Penggunaan

agar karena merupakan suatu bahan yang cocok, meskipun padat, akan tetapi lunak dan
mudah ditembus oleh biakan. Selain itu agar mengandung sejumlah air yang diperlukan bagi
biakan. Agar lebih stabil bila dibandingkan dengan air yang lebih mudah menguap dan
berubah. Semua pengerjaan penuangan PDA ke media dilakukan dalam laminar air flow, agar
media tidak terkontaminasi. Untuk mencegah kondensasi yang berlebihan pada tutup cawan
petri yang dapat menghasilkan uap air, maka suhu PDA saat dituang adalah sekitar 45oC.

KESIMPULAN
Media biakan berfungsi untuk memberikan tempat dan kondisi yang mendukung
pertumbuhan dan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang ditumbuhkan. PDA
merupakan media penumbuhan mikroorganisme yang sangat efektif, hal tersebut dikarenakan
sebagian besar mikroorganisme dapat tumbuh dan berkembang di dalam media
tersebutdalam. Proses pembuatan PDA membutuhkan waktu yang tidak singkat maka PDA
perlu dipersiapkan jauh-jauh hari sebelumnya apabila akan digunakan.
DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2006. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Dasar. IPB Press : Bogor.
Dwijaseputro. 1987. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Universitas Brawijaya. Djambatan : Malang.
Hadioetomo, Ratna Siri. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. PT Gramedia Pustaka
Utama : Jakarta

http://www.google.co.id/url?sa=t&source=web&ct=res&cd=5&ved=0CA8QFjAE&url=http
%3A%2F%2Fcoba1.netai.net%2Fbahankuliahkehutananjadul%2Flaporan%2520PH-
PDA.doc&rct=j&q=laporan+mikrobiologi+tentang+pembuatan+media+PDA&ei=jFjIS5
X_HMmvrAewk-z2CQ&usg=AFQjCNF-eHuUGyBJ9FUQt3RwrbyGU7wM4Q

Mikroorganisme yang ingin kita tumbuhkan, yang pertama harus dilakukan adalah
memahami kebutuhan dasarnya kemudian memformulasikan suatu medium atau bahan yang
akan digunakan. Air sangat penting bagi organisme bersel tunggal sebagai komponen utama
protoplasmanya serta untuk masuknya nutrien ke dalam sel. Pembuatan medium sebaiknya
menggunakan air suling. Air sadah umumnya mengandung ion kalsium dan magnesium yang
tinggi. Pada medium yang mengandung pepton dan ektrak daging, air dengan kualitas air
sadah sudah dapat menyebabkan terbentuknya endapan fosfat dan magnesium fosfat
(Hadioetomo,1993).Alat yang akan digunakan dalam suatu penelitian atau praktikum harus
disterilisasi terlebih dahulu untuk membebaskan semua bahan dan peralatan tersebut dari
semua bentuk kehidupan. Sterilisasi merupakan suatu proses untuk mematikan semua
organisme yang teradapat pada suatu benda. Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi 3
macam, yaitu penggunaan panas (pemijaran dan udara panas); penyaringan; penggunaan
bahan kimia (etilena oksida, asam perasetat, formaldehida dan glutaraldehida alkalin)
(Hadioetomo,1993).

Tujuan praktikum ini adalah agar dapat melakukan pembuatan media serta cara
mensterilisasikan suatu alat atau bahan. Memformulasikan suatu medium atau bahan yang
akan digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme di dalamnya harus memperhatikan
berbagi macam ketentuan seperti jika yang ingin kita membuat medium untuk organisme
bersel tunggal, biasanya air sangat penting sebagai komponen utama protoplasmanya serta
untuk masuknya nutrien ke dalam sel. Pembuatan medium agar padat, digunakan agar-agar,
gelatin atau gel silika. Bahan agar yang utama adalah galaktan (komplek karbohidrat yang
diekstrak dari alga genusGe lid iu m). Agar akan larut atau cair pada suhu hampir 100oC dan
akan cair apabila kurang lebih 43oC (Hadioetomo, 1993). Menurut Schlegel (1993) agar
merupakan media tumbuh yang ideal yang diperkenalkan melaluimetode bacteriaological.
Organisme hidup memerlukan nutrisi untuk pertumbuhannya. Subtansi kimia organik
dan inorganik diperoleh dari lingkungan dalam berbagai macam bentuk. Nutrien diambil dari
lingkungan kemudian ditransformasikan melalui membran plasma menuju sel. Di sel
beberapa nutrisi diolah menghasilkan energiyang digunakan dalam proses seluler (Lim,
1998). Bakteri dalam medium juga memerlukan makanan untuk pertumbuhannya. Bakteri
yang tidak punya akar harus berada pada permukaan larutan makanan yang cair.
Pertumbuhan bakteri berarti meningkatnya jumlah sel yang konstituen (yang menyusun).
Apabila disusun 10 bakteri dalam 1 ml medium yang cocok dan 24 jam kemudian ditemukan
10 juta bakteri tiap milimeternya, maka terjadilah pertumbuhan bakteri. Meningkatnya
jumlah bakteri terjadi denganproses yang disebut dengan pembelahan biner, dimana setiap
bakteri membentuk dinding sel baru (Volk, 1993).

Pertumbuhan bakteri selain memerlukan nutrisi, juga memerlukan pH yang tepat.

Kebanyakan bakteri tidak dapat tumbuh pada kondisi yang terlalu basa, kecuali Vibrio
cholerae yang dapat hidup pada pH lebih dari 8. Suhu juga merupakan variabel yang perlu
dikendalikan.Kelompok terbesar yaitu mesofil, suhu optimum untuk pertumbuhannya 20-
40oC (Volk, 1993).

PH merupakan faktor yang sangat mempengaruhi suatu keberhasilan dalam

pembuatan medium sehingga kondisi pH yang terlalu basa atau terlalu asam tidak cocok
untuk dijadikan medium mikroba karena mikroba tidak dapat hidup pada kondisi tersebut.
Medium didiamkan atau disimpan selama 2 x 24 jam untuk menyakinkan bahwa medium
masih steril, karena selain pH sebagai penentu tumbuhnya mikroba, alat dan medium yang
steril juga menentukan (Dwidjoseputro, 1994).

Pembuatan medium Potato Dextrose Agar (PDA), kentang sudah ditimbang dan

direbus, dengan ukuran kentang 50,31 g dan agar 4,03 g. Disini menggunakan agar untuk

mengentalkanmedium. Ekstrak kentang dan agar disetir dan diatur suhu dan pHnya. Sebelum

dilakukan sterilisasi, medium berawarna kuning, setelah disterilisasi dalam autoklaf medium

berwarna kecoklatan dan didapat endapan berwarna putih. Setelah didinginkan beberapa saat,
medium dapat ditanami bakteri (Schegel, 1993).

Pembuatan medium Nutrien Agar (NA) menggunakan bahan utama beef ekstrak 5 g,

peptom 3 g dan agar 3 g. Pada awal pengamatan medium Nutrien Agar, sebelum proses

sterilisasi berwarna kuning, setelah sterilisasi warna medium menjadi agak coklat. Pada

pembuatan medium NA ini ditambahkan pepton agar mikroba cepat tumbuh, karena

mengandung banyak N2 (Dwidjoseputro, 1994). Agar yang digunakan dalam proses ini untuk
mengentalkan medium sama halnya dengan yang digunakan pada medium PDA yang juga

berperan sebagai media tumbuh yang ideal bagi mikroba (Schlegel, 1993).

Sterilisasi yang umum dilakukan dapat berupa:

a. Sterilisasi secara fisik (pemanasan, penggunaan sinar gelombang pendek yang dapat

dilakukan selama senyawa kimia yang akan disterilkan tidak akan berubah atau terurai

akibat temperatur atau tekanan tinggi). Dengan udara panas, dipergunakan alat

“bejana/ruang panas” (oven dengan temperatur 170o – 180oC dan waktu yang digunakan

adalah 2 jam yang umumnya untuk peralatan gelas).

b. Sterilisasi secara kimia (misalnya dengan penggunaan disinfektan, larutan alkohol, larutan
formalin).

c. Sterilisasi secara mekanik, digunakan untuk beberapa bahan yang akibat pemanasan tinggi

atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan, misalnya adalah dengan saringan/filter.

Sistem kerja filter, seperti pada saringan lain adalah melakukan seleksi terhadap partikel-

partikelyang lewat (dalam hal ini adalah mikroba) (Suriawiria, 2005).

Autoklaf digunakan sebagai alat sterilisasi uap dengan tekanan tinggi. Penggunaan
autoklaf untuk sterilisasi, tutupnya jangan diletakkan sembarangan dan dibuka-buka karena
isi botol atau tempatmedium akan meluap dan hanya boleh dibuka ketika manometer
menunjukkan
angka 0 serta dilakukan pendinginan sedikit demi sedikit. Medium yang mengandung
vitamin,
gelatin atau gula, maka setelah sterilisasi medium harus segera didinginkan. Cara ini untuk
menghindari zat tersebut terurai. Medium dapat langsung disimpan di lemasi es jika medium
sudah dapat dipastikan steril (Dwidjoseputro, 1994).

Dwidjoseputro, D. 1994. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan, Jakarta.

Hadioetomo, R.S. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. Gramedia, Jakarta.
Lim,D. 1998.Micro b io log y, 2nd Edition. McGrow-hill book, New york.
Schegel, G.H. 1993. General Microbiologi seventh edition. Cambrige University Press, USA.

Suriawiria, U. 2005. Mikrobiologi Dasar. Papas Sinar Sinanti, Jakarta.

Volk , W. A & Wheeler. M. F. 1993. Mikrobiologi Dasar Jilid 1 Edisi ke 5. Erlangga, Jakarta.
http://blogkita.info/pembuatan-media-n-sterilisasi/
medium na dan cara pembuatan medium
Posted on April 19, 2009 by firebiology07

BAB I
PENDAHULUAN
I.1 Latar Belakang
Untuk menelaah mikroorganisme di laboratorium, kita harus dapat menumbuhkan
mereka. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan
manusia. Mikroorganisme yang dikembangkan oleh manusia diantaranya melalui substrat
yang disebut media. Untuk melakukan hal ini, haruslah dimengerti jenis-jenis nutrien
yang diisyaratkan oleh bakteri dan juga macam lingkungan fisik yang menyediakan
kondisi optimum bagi pertumbuhannya (Label, 2008). Mikroorganisme yang kita isolasi
harus kita ketahui jenis medium yang disukai sehingga dapat tumbuh dengan baik pada
media. Dalam hal ini medium ini akan digunakan olehmikroorganisme sebagai sumber energi
untuk melakukan pertumbuhan dan perkembangbiakan maka hendaknya harus sesuai dengan
komposisi bahan medium.Berdasarkan hal tersebut di atas maka dilakukanlah praktikum ini
untuk mempelajari macam- macam medium, cara- cara pembuatan dari beberapa medium dan
sekaligus mengetahui bahan- bahan yang digunakan serta komposisi juga fungsi dari masing-
masing bahan tersebut dalam membantu pertumbuhan mikroorganisme tersebut. Sehingga
nantinya diharapkan dapat menumbuhkan, mengisolasi dan menguji sifat fisiologi atau
perhitungan mikroorganisme tertentu.

I.2 Tujuan Percobaan

Adapun tujuan dari percobaan ini adalah

1. Untuk mengetahui macam- macam medium baik berdasarkan susunan kimianya

maupun berdasarkan konsistensinya.
2. Untuk mengetahui cara pembuatan komposisi medium dan fungsi dari medium semi
alamiah.
I.3 Waktu dan Tempat Percobaan
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Rabu, 11 Maret 2009, pukul 14.00- 17.30 WITA
dan bertempat di Laboratorium Mikrobiologi, Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Hasanuddin, Makassar.

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-
zat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya.
Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit
untuk menyusun komponen sel. Dengan media pertumbuhan dapat dilakukan isolat
mikroorganisme menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media
pertumbuhannya (Indra, 2008).
Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu substrat yang disebut
medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan
mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan kebutuhan jenis-jenis
mikroorganisme yang bersangkutan. Beberapa mikroorganisme dapat hidup baik pada
medium yang sangat sederhana yang hanya mengandung garam anargonik di tambah
sumber karbon organik seperti gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan
suatu medium yang sangat kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau
bahan-bahan kompleks lainnya (Volk, dan Wheeler,1993).
Akan tetapi yang terpenting medium harus mengandung nutrien yang merupakan
substansi dengan berat molekul rendah dan mudah larut dalam air. Nutrien ini adalah
degradasi dari nutrien dengan molekul yang kompleks. Nutrien dalam medium harus
memenuhi kebutuhan dasar makhluk hidup, yang meliputi air, karbon, energi, mineral
dan faktor tumbuh (Label, 2008).
Untuk menelaah bakteri di dalam laboratorium , pertama- tama kita harus dapat
menumbuhkan bakteri tersebut di dalam suatu biakan murni. Untuk melakukannya
haruslah dimengerti jenis- jenis nutrient yang disyartakan oleh bakteri dan juga macam
lingkungan fisik yang mana dapat menyebabkan kondisi yang optimum bagi
pertumbuhannya tersbut (Pelczar, 1986).
Adapun macam-macam media Pertumbuhan antara lain (Indra, 2008) :
1. Medium berdasarkan sifat fisik
Ø Medium padat yaitu media yang mengandung agar 15% sehingga setelah dingin media
menjadi padat..
Ø Medium setengah padat yaitu media yang mengandung agar 0,3-0,4% sehingga
menjadi sedikit kenyal, tidak padat, tidak begitu cair. Media semi solid dibuat dengan
tujuan supaya pertumbuhan mikroba dapat menyebar ke seluruh media tetapi tidak
mengalami percampuran sempurna jika tergoyang. Misalnya bakteri yang tumbuh pada
media NfB (Nitrogen free Bromthymol Blue) semisolid akan membentuk cincin hijau
kebiruan dibawah permukaan media, jika media ini cair maka cincin ini dapat dengan
mudah hancur. Semisolid juga bertujuan untuk mencegah/menekan difusi oksigen, misalnya
pada media Nitrate Broth, kondisi anaerob atau sedikit oksigen meningkatkan
metabolisme nitrat tetapi bakteri ini juga diharuskan tumbuh merata diseluruh media.
Ø Medium cair yaitu media yang tidak mengandung agar, contohnya adalah NB (Nutrient
Broth), LB (Lactose Broth).
2. Medium berdasarkan komposisi
Ø Medium sintesis yaitu media yang komposisi zat kimianya diketahui jenis dan
takarannya secara pasti, misalnya Glucose Agar, Mac Conkey Agar.
Ø Medium semi sintesis yaitu media yang sebagian komposisinya diketahui secara pasti,
misanya PDA (Potato Dextrose Agar) yang mengandung agar, dekstrosa dan ekstrak
kentang. Untuk bahan ekstrak kentang, kita tidak dapat mengetahui secara detail tentang
komposisi senyawa penyusunnya.
Ø Medium non sintesis yaitu media yang dibuat dengan komposisi yang tidak dapat
diketahui secara pasti dan biasanya langsung diekstrak dari bahan dasarnya, misalnya
Tomato Juice Agar, Brain Heart Infusion Agar, Pancreatic Extract.
3. Medium berdasarkan tujuan
Ø Media untuk isolasi
Media ini mengandung semua senyawa esensial untuk pertumbuhan mikroba, misalnya
Nutrient Broth, Blood Agar.
Ø Media selektif/penghambat
Media yang selain mengandung nutrisi juga ditambah suatu zat tertentu sehingga media
tersebut dapat menekan pertumbuhan mikroba lain dan merangsang pertumbuhan
mikroba yang diinginkan. Contohnya adalah Luria Bertani medium yang ditambah
Amphisilin untuk merangsang E.coli resisten antibotik dan menghambat kontaminan
yang peka, Ampiciline. Salt broth yang ditambah NaCl 4% untuk membunuh
Streptococcus agalactiae yang toleran terhadap garam.
Ø Media diperkaya (enrichment)
Media diperkaya adalah media yang mengandung komponen dasar untuk pertumbuhan
mikroba dan ditambah komponen kompleks seperti darah, serum, kuning telur. Media
diperkaya juga bersifat selektif untuk mikroba tertentu. Bakteri yang ditumbuhkan dalam
media ini tidak hanya membutuhkan nutrisi sederhana untuk berkembang biak, tetapi
membutuhkan komponen kompleks, misalnya Blood Tellurite Agar, Bile Agar, Serum
Agar, dll.
Ø Media untuk peremajaan kultur
Media umum atau spesifik yang digunakan untuk peremajaan kultur
Ø Media untuk menentukan kebutuhan nutrisi spesifik.
Media ini digunakan unutk mendiagnosis atau menganalisis metabolisme suatu mikroba.
Contohnya adalah Koser’s Citrate medium, yang digunakan untuk menguji kemampuan
menggunakan asam sitrat sebagai sumber karbon.
Ø Media untuk karakterisasi bakteri
Media yang digunakan untuk mengetahui kemempuan spesifik suatu mikroba. Kadang-
kadang indikator ditambahkan untuk menunjukkan adanya perubahan kimia. Contohnya
adalah Nitrate Broth, Lactose Broth, Arginine Agar.
Ø Media diferensial
Media ini bertujuan untuk mengidentifikasi mikroba dari campurannya berdasar karakter
spesifik yang ditunjukkan pada media diferensial, misalnya TSIA (Triple Sugar Iron
Agar) yang mampu memilih Enterobacteria berdasarkan bentuk, warna, ukuran kolonidan
perubahan warna media di sekeliling koloni.
Meskipun telah dijabarkan berbagai macam jenis dari medium, perlu diiingat bahwa tidak
ada satupun perangkat kondisi yang memuaskan bagi kultivasi untuk semua bakteri di
laboratorium. Bakteri amat beragam, baik dari persyaratan nutrisi maupun fisiknya.
Beberapa berapa bakteri memiliki persyaratan nutrient yang sederhana, sedang yang lain
memiliki persyaratan yang rumit. Karena alsan ini kondisi harus disesuaikan sedemikian
rupa sehingga bisa menguntungkan bagi kelompok bakteri yang sedang ditelaah (Pelczar,
1986).

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
VI.2 Pembahasan
Nama medium : Tauge Ekstrak Agar (TEA)
Tauge ekstrak agar (TEA) termasuk medium semi alamiah karena tersusun atas bahan
alami (tauge) dan bahan sintesis (Sukrosa dan agar). TEA digunakan untuk
menumbuhkan khamir dan kapang.
Fungsi bahan yang digunakan pada medium TEA :
- Tauge : Sebagai sumber vitamin, nitrogen organik dan senyawa karbon.
- Sukrosa : sebagai sumber gula dan energi
- Agar : Untuk memadatkan medium TEA.
- Aquadest : Untuk melarutkan agar, sukrosa, dan tauge.
Nama medium : Potato Dextrose Agar (PDA)
Potato dextrose agar (PDA) termasuk medium semi alamiah karena tersusun atas bahan
alami (kentang) dan bahan sintesis (dextrose dan agar). PDA digunakan untuk
menumbuhkan jamur.
Fungsi bahan yang digunakan pada medium PDA :
- Kentang : sumber karbon (karbohidrat), vitamin dan energi.
- Dextrose : sebagai sumber gula dan energi
- Agar : Untuk memadatkan medium PDA.
- Aquadest : Untuk melarutkan agar, dextrose, dan kentang.

Nama medium : Nutrient Agar (NA)

Nutrient agar (NA) termasuk medium semi alamiah karena tersusun atas bahan alami
(daging) dan bahan sintesis (pepton dan agar). PDA digunakan untuk menumbuhkan
semua mikroba.
Fungsi bahan yang digunakan pada medium NA :
- Daging : sebagai sumber vitamin B, mengandung nitrogen organik dan senyawa karbon.
- Pepton : sebagai sumber utama nitrogen organic dan sumber nutrisi
- Agar : Untuk memadatkan medium NA.
- Aquadest : Untuk melarutkan agar, pepton, dan daging.

BAB V
PENUTUP
V.1 Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang diperoleh dari percobaan ini adalah :
• Jenis medium dapat digolongkan berdasarkan konsistensinya berupa ; medium cair

medium padat, medium diperkaya, medium selektif, medium diferensiasi, medium

penguji, medium umum, medium khusus, dan medium untuk perhitungan jumlah koloni.
Sedangkan berdasarkan susunan kimianya berupa ; medium alamiah, medium semi
alamiah, dan medium sintesis.
• Pada umumnya, pembuatan medium semi alamiah bahan umum yang digunakan yaitu
agar untuk merapatkan medium dan aquadest sebagai pelarut. Bedanya pada medium
Tauge ekstrak agar menggunakan tauge dan sukrosa sebagai sumber makanan bagi
mikroba, pada medium Potato dextrose agar menggunakan kentang dan dextrose, dan
pada Nutrient agar menggunakan daging dan pepton.
V.2 Saran
Sebaiknya praktikan diajarkan pula mengenai cara pembuatan medium yang lain sebab
pada praktikum ini hanya medium TEA, PDA, dan NA saja yang dipraktikumkan.
DAFTAR PUSTAKA
Indra., 2008, http//ekmon-saurus/bab-2-Media- pertumbuhan/.htm . diakses pada tanggal
08 maret 2009, Makassar.

Label, Caray.,2008, http//Caray label makalah –dan – skripsi pembuatan-media- agar

dan-sterilisasi/htm .diakses pada tanggal 08 maret 2009, Makassar.

Pelczar, Michael, 1986, Dasar- Dasar Mikrobiologi, Universitas Indonesia, Jakarta.

Volk, dan Wheeler., 1993, Dasar- Dasar Mikrobiologi, Erlangga, Jakarta

http://firebiology07.wordpress.com/2009/04/19/medium-dan-cara-pembuatan-medium