PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

TEKNOLOGI BIOENKAPSULASI BIO-YOGHURT UNTUK TERAPI

HIPERKOLESTEROLEMIA

BIDANG KEGIATAN
PKM PENELITIAN

Diusulkan Oleh:
Mega Nurjayanti 0810920048 (2008)
Khoirun Nisyak 0810920046 (2008)
Sesotya Raka Pambuka 0810550036 (2008)
Tito Ari Santoso 0610540054 (2006)
Ardhana Galih I. A. 0610543001 (2006)

UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2010
 HALAMAN PENGESAHAN
USULAN PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

1. Judul Kegiatan : Teknologi Bioenkapsulasi Bio-Yoghurt Untuk Terapi

Hiperkolesterolemia
2. Bidang Kegiatan : (X) PKMP ( ) PKMK
( )PKMT ( ) PKMM
3. Bidang Ilmu : ( ) Kesehatan (X) Pertanian
( ) MIPA ( )Teknologi dan Rekayasa
( ) Sosial Ekonomi ( ) Humaniora
( ) Pendidikan
4. Ketua Pelaksana Kegiatan
a. Nama Lengkap : Mega Nurjayanti
b. NIM : 0810920048
c. Jurusan : Kimia
d. Universitas : Universitas Brawijaya
e. Alamat Rumah dan No Tel./HP. : Jalan Watugong 40 Ketawanggede
Malang
HP. 085755880907
f. Email : megz_maniezz@yahoo.co.id
5. Anggota Pelaksana Kegiatan/Penulis : 4 orang
6. Dosen Pendamping
a. Nama Lengkap dan Gelar : Dr. Sasangka Prasetyawan, MS.
b. NIP : 19630404 198701 1 001
c. Alamat Rumah dan Telp./HP : Jalan Hamid Rusdi No. 109 Malang
HP. 081931854192
7. Biaya Kegiatan Total :
a. Dikti : Rp 7.000.000,-
b. Sumber Lain : –
8. Jangka Waktu Pelaksanaan : 4 Bulan
Malang, 20 Oktober 2010
Menyetujui
Ketua Jurusan Kimia, Ketua Pelaksana,

Dr. Sasangka Prasetyawan, MS. Mega Nurjayanti

NIP. 19630404 198701 1 001 0810920048

Pembantu Rektor Bidang Kamahasiswaan Dosen Pendamping,

Universitas Brawijaya,

Ir.H.RB.Ainurrasjid, MS. Dr. Sasangka Prasetyawan, MS.

NIP. 19550618 198103 1 002 NIP. 19630404 198701 1 001
A. JUDUL
Teknologi Bioenkapsulasi Bio-yoghurt untuk Terapi Hiperkolesterolemia
B. LATAR BELAKANG MASALAH
Hiperkolesterolemia merupakan salah satu faktor penyebab terjadinya
penyakit jantung koroner dan stroke. Sekitar 36 juta (18% dari total populasi)
penduduk Indonesia mengalami hiperkolesterolemia dan dari jumlah itu 80 %
pasien meninggal mendadak akibat serangan jantung (Misbach dan Kalim, 2009).
Hiperkolesterolemia merupakan suatu kondisi yang ditandai dengan peningkatan
kadar kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein) atau pada umumnya disebut
sebagai kolesterol buruk. Hiperkolesterolemia dapat berkembang menjadi
arterosklerosis pada pembuluh arteri berupa penyempitan pembuluh darah dan
mengakibatkan hipertensi (Hardiningsih dan Nurhidayat, 2006).
Hipertensi adalah salah satu faktor penyebab dari penyakit kardiovaskular,
termasuk gagal jantung, jantung koroner, penyumbatan pembuluh arteri, dan
stroke. Hipertensi merupakan masalah kesehatan yang cukup kompleks dan dapat
menimbulkan komplikasi yang serius serta membutuhkan biaya perawatan yang
mahal (Mancia et al., 2007). Salah satu upaya yang dilakukan untuk mereduksi
beberapa kendala mahalnya biaya perawatan hipertensi yaitu dengan menciptakan
makanan fungsional berbasis susu yaitu Bio-yoghurt yang ditambahkan dengan
kultur probiotik (Kimoto et al., 2002).
Penelitian yang dilakukan oleh Ruidavets et al. (2006) membuktikan
bahwa probiotik yoghurt mempunyai berbagai aktivitas klinis antara lain yaitu
dapat menurunkan resiko penyakit hipertensi, menyerap bahan berbahaya dari
saluran pencernaan, mempunyai efek antagonistik dengan membunuh bakteri
patogen dalam pencernaan, dan mempunyai efek penurunan resiko penyakit
hiperkolesterolemia Lactobacillus helveticus merupakan salah satu spesies bakteri
asam laktat yang telah banyak digunakan sebagai probiotik.
Keunggulan dari L. helveticus yaitu memiliki viabilitas yang tinggi selama
fermentasi dan merupakan salah satu bakteri probiotik yang telah diuji secara
klinis mampu memberikan efek menguntungkan bagi kesehatan dan
keseimbangan mikroflora dalam saluran pencernaan (Burke et al., 2001), namun
demikian viabilitas probiotik selama transportasi menuju usus dalam sistem
pencernaan menghadapi beberapa kendala diantaranya keberadaan pH yang
rendah dari asam lambung, garam empedu (bile salt) dan kompetisi dengan
mikroba lain. Upaya untuk menghadapi beberapa kendala tersebut serta untuk
meningkatkan viabilitas probiotik terhadap pH rendah asam lambung dan garam
empedu, maka perlu dikembangkan perlindungan probiotik dengan cara
bioenkapsulasi.
Bioenkapsulasi adalah pembentukan kapsul menyelubungi sel probiotik
dengan bahan enkapsulat tertentu yang bermanfaat untuk meningkatkan viabilitas
dan perlindungan probiotik dari kondisi lingkungan yang ekstrim (Widodo, 2003).
Salah satu produk bahan pangan yang diduga dapat berperan sebagai prebiotik
adalah gum arab, tapioka, whey protein hidrolisat dan kasein. Kemampuan ini
didasarkan pada komponen polimer polisakarida yaitu gum arab dan tapioka
mempunyai kandugan SDF (soluble dietary fibre) seperti beberapa oligosakarida,
RS (resistant starch) yang dapat digunakan sebagai sumber nutrisi bagi probiotik
(Gibson dan Fuller, 1998). Senyawa protein yang digunakan yaitu whey hidrolisat
dan kasein berfungsi sebagai sumber peptida dan asam amino serta asupan gizi
yang ideal bagi L. helveticus sehingga dapat meningkatkan viabilitasnya dalam
menghadapi stres selama berinteraksi dengan asam lambung dan garam empedu
(Sothornvit dan Krochta, 2000).

C. PERUMUSAN MASALAH
Lactobacillus helveticus yang digunakan pada produk Bio-yoghurt
mengalami stres pada saat masuk ke dalam saluran pencernaan karena asam
lambung dan garam empedu sehingga viabilitasnya rendah. Berdasarkan hal
tersebut, maka perlu diketahui apakah gum arab, tapioka, protein whey hidrolisat
dan kasein dalam proses bioenkapsulasi dapat meningkatkan viabilitas L.
helveticus terhadap asam lambung dan garam empedu serta meningkatkan
aktivitasnya dalam menurunkan kolesterol?

D. TUJUAN
Tujuan penelitian ini, yaitu :
1. Mengetahui jenis bahan yang efektif digunakan sebagai bahan
mikroenkapsulat probiotik yoghurt (L. helveticus) yang dapat
 meningkatkan viabilitas L. helveticus terhadap asam lambung dan garam
empedu serta meningkatkan aktivitas sebagai penurun kolesterol darah.
2. Mengetahui dosis Bio-yoghurt yang efektif digunakan sebagai terapi
hiperkolesterolemia.

E. LUARAN YANG DIHARAPKAN

Produk agen bioterapi Bio-yoghurt terhadap penyakit hiperkolesterolemia
berbasis susu yang aman dikonsumsi.

F. KEGUNAAN
Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai bahan informasi
tentang penggunaan bahan yang tepat digunakan sebagai bioenkapsulasi L.
Helveticus untuk meningkatkan viabilitas dan aktivitasnya dalam menurunkan
kolesterol dalam darah bila digunakan dalam produk Bio-yoghurt.

G. TINJAUAN PUSTAKA
G.1. Hiperkolesterolemia
Hiperkolesterolemia terjadi akibat adanya akumulasi kolesterol dan lipid
pada dinding pembuluh darah. Kolesterol merupakan molekul yang berperan
sangat penting dalam sintesis membran sel, prekusor sintesis hormon steroid,
hormon korteks adrenal, sintesis asam-asam empedu dan vitamin D. Kolesterol
terdiri atas high density cholesterol (HDL), low density cholesterol (LDL) dan
trigliserida. HDL berperan dalam membawa kolesterol dari aliran darah ke hati.
LDL berperan dalam membawa kolesterol kembali ke aliran darah. Kolesterol
yang terdapat dalam tubuh dapat berasal dari makanan (eksogen) atau disintesis
oleh tubuh (endogen). Hiperkolesterolemia disebabkan kadar kolesterol melebihi
239 mg/mL dalam darah (Cuchel et al, 1997).
Hipertensi adalah suatu keadaan dimana tekanan darah meningkat
melebihi batas normal. Batas tekanan darah normal bervariasi sesuai dengan usia.
Berbagai faktor dapat memicu terjadinya hipertensi, walaupun sebagian besar
(90%) penyebab hipertensi tidak diketahui (hipertensi essential). Penyebab
tekanan darah meningkat adalah peningkatan kecepatan denyut jantung,
peningkatan resistensi (tahanan) dari pembuluh darah tepi dan peningkatan
volume aliran darah (Kurniawan, 2009).
G.2. Probiotik
Probiotik adalah mikroorganisme hidup baik dalam kondisi tunggal atau
campuran yang ditambahkan pada bahan pangan dengan tujuan memberikan efek
menguntungkan bagi kesehatan sistem pencernaan, karena sebagai penghambat
bakteri patogen dalam sistem pencernaan, pengendalian kadar serum kolesterol,
mengurangi resiko penyakit kanker saluran pencernaan, peningkatan kemampuan
cerna laktosa serta mengurangi tingkat resiko sakit perut dan diare. Salah satu
contoh probiotik adalah Lactobacillus helveticus (Widodo, 2003).
G.3. Aktivitas Anti-Hiperkolesterolemia
Penelitian yang dilakukan Kimoto et al., (2002) membuktikan bahwa L
helveticus yang digunakan sebagai probiotik yoghurt memiliki aktivitas
antihipertensif setelah dikonsumsi secara oral pada tikus yang terserang
hiperkolesterolemia, hal tersebut dikarenakan selama fermentasi probiotik dapat
menghasilkan peptida, yaitu Valin-Prolin-Prolin dan Isoleusin-Prolin-Prolin.
Menurut Hirata et al. (2002) adanya peptida Valin-Prolin-Prolin dan Isoleusin-
Prolin-Prolin dapat berfungsi sebagai antihiperkolesterolemia. Ikatan peptida
memiliki kemiripan dengan hormon endorphin, yaitu hormon yang dapat
merelaksasikan otot jantung, sehingga tekanan darah menjadi normal.
G.4. Viabilitas Probiotik
Beberapa faktor yang berpengaruh terhadap viabilitas probiotik, yaitu
apabila probiotik berinteraksi dengan lingkungan yang memiliki pH rendah,
Hidrogen peroksida, konsentrasi asam yang berlebihan. Usaha untuk
meningkatkan viabilitas dari kultur dapat dilakukan dengan bioenkapsulasi,
suplementasi nutrisi dalam susu yang digunakan untuk pertumbuhan probiotik
atau biasa disebut prebiotik (Bertolini dan Grosso, 2001).
G.5. Bioenkapsulasi
Bioenkapsulasi merupakan teknik perlindungan atau pengemasan droplet
cairan atau partikel padat yang didesain untuk melindungi bahan yang
dienkapsulasi dari faktor-faktor yang dapat mengakibatkan kerusakan. Melalui
pendekatan lain, dinding enkapsulan didesain dapat mengontrol pelepasan bahan
yang dienkapsulasi pada suatu kondisi tertentu yang dinginkan. Enkapsulasi
bahan-bahan yang sensitif seperti senyawa volatil menjadi dalam bentuk kering
yang diproteksi oleh dinding enkapsulan dari kerusakan akibat penguapan,
oksidasi dan rekasi kimia (Rosenberg et al., 1990). Enkapsulat merupakan bahan
yang ditambahkan dalam proses pengolahan pangan untuk melapisi komponen
inti, meningkatkan jumlah total padatan, mempercepat proses pengeringan dan
mencegah kerusakan bahan akibat panas (Dziezak, 1988). Jenis enkapsulat yang
digunakan tergantung pada jenis metode enkapsulasi yang digunakan, antara lain
yaitu maltodekstrin, gum arab, pati termodifikasi, sukrosa, siklodekstrin, garam,
gelatin, protein susu, protein nabati, dan lemak biasanya digunakan sebagai
enkapsulat (Sultana et al., 2000).
G.6. Bahan Bioenkapsulasi
Pemilihan enkapsulan untuk setiap penerapan merupakan hal penting,
misalnya setiap jenis enkapsulan memiliki sifat pengemulsi yang unik dan
kemampuan membentuk film yang mempengaruhi kemampuannya untuk
berfungsi sebagai enkapsulat (Kim et al, 1996). Pada umumnya bahan penyalut
tidak larut air digunakan untuk mengkapsulasi bahan inti yang larut atau
sebaliknya. Bahan penyalut untuk mikroenkapsulasi dengan spray drying haruslah
memiliki flavor yang tawar, kelarutan yang tinggi dan menunjukkan kemampuan
emulsifikasi, pembentukan film, dan sifat pengeringan yang baik. Selain itu,
bahan penyalut dalam larutan berkonsentrasi tinggi haruslah memiliki viskositas
yang rendah (Young et al,. 1993).
G.6.1. Gum Arab
Gum arab merupakan hidrokoloid yang dihasilkan dengan eksudasi alami
dari pohon akasia, merupakan hidrokoloid yang sangat mudah larut dalam air
panas maupun air dingin, membentuk larutan dengan viskositas rendah, akan
tetapi tidak larut pada alkohol dan pelarut organik lainnya. Gum arab dapat
mempertahankan flavor dari makanan yang dikeringkan dengan metode spray
drying karena gum ini dapat membentuk lapisan yang dapat melindungi dari
oksidasi, absorbsi dan evaporasi (Bertolini et al., 2001). Karena sifat
viskositasnya yang rendah dan tidak adanya rasa dan warna, maka gum arab dapat
ditambahkan dalam jumlah tertentu tanpa mengganggu sifat organoleptik produk
pangan dimana gum arab ditambahkan (Mosilhey, 2003).
G.6.2. Tapioka
Tepung tapioka adalah tepung yang terbuat dari pati ketela dan tidak
berbau serta berasa. Secara umum produk susu memerlukan cita rasa yang khas.
Pati yang digunakan pada produk susu biasanya tidak berbau dan tidak berasa.
Pemanfaatan tepung tapioka digunakan sebagai bahan mikroenkapsulat menurut
Kim et al, (1996), penambanan turunan dari selulosa seperti xantan gum atau
tapioka dapat berinteraksi dengan alginate dan CaCl2 untuk memberikan kekuatan
interaksi antar enkapsulat. Jaringan granula pati akan direkatkan oleh keberadaan
gum dan diikat oleh CaCl2, sehingga meningkatkan kemampuan granula untuk
menjebak probiotik, meningkatkan solubilitas amilosa dan mencegah kristalisasi
amilosa (retrogredasi).
G.6.3. Whey Protein Hidrolisat
Protein whey hidrolisat merupakan modifikasi dari proten whey yang
dihidrolisis dengan enzim protease (Britten dan Giroux, 1994). Protein whey
hidrolisat mengandung peptida bioaktif dalam jumlah tinggi dan mineral susu
yang kaya kalsium, fosfat dan mineral lainya serta berat molekul yang kecil,
sehingga protein whey hidrolisat lebih reaktif dan dapat meningkatkan sifat
fungsionalnya (Gauthier dan Pauliot, 2003). Pengaruh protein whey hidrolisat
dalam pertumbuhan bakteri probiotik dalam susu adalah sebagai penyediaan
sumber nutrien peptida dan asam amino yang dibutuhkan untuk pertumbuhan
bakteri asam laktat, khususnya bakteri probiotik (Mc Comas dan Gilliland, 2003).
Protein whey berkombinasi dengan karbohidrat dapat digunakan sebagai
dinding material dalam mikroenkapsulasi melalui spray drying. Protein whey
isolat dapat digunakan sebagai dinding atau pelapis bahan enkapsulasi, untuk
memperbaiki sifat emulsifikasi dan kemampuan enkapsulasinya (Young et al.,
1993). Penambahan sistein, WPC, dan hidrolisat kasein dapat meningkatkan
viabilitas probiotik. Sumber N dalam bentuk peptida dan asam amino dapat
meningkatkan viabilitas sel – sel probiotik dalam yogurt yang dibuat dengan
kombinasi Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium dan S. thermophilus (Dave
and Shah, 1998).
G.6.4. Kasein
Kasein merupakan protein utama dari susu yang diekstrak dari susu
berdasarkan titik isoelektrik dan penggumpalan secara enzimatis. Asam yang
ditambahkan pada susu menurunkan pH sampai dengan 4,6 sehingga
mengakibatkan kasein mengendap dari protein whey. Kasein merupakan protein
yang tersusun dari asam – asam amino yaitu 35 – 45% adalah asam amino non
polar yaitu Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Pro (Fox et al., 2000). Menurut Britten dan
Giroux (1994) sifat yang paling penting yang dimiliki oleh kasein adalah
fleksibilitasnya. Sifat ini menyebabkan kasein baik sebagai bahan pengemulsi,
mampu bertindak sebagai surfaktan dan juga untuk membentuk lapisan penstabil
yang meluas di sekeliling droplet emulsi.

H. METODE PELAKSANAAN
H.1. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Biokimia Jurusan Kimia Fakultas
MIPA dan Laboratorium Mikrobiologi Teknologi Hasil Ternak Fakultas
Peternakan yang dilakukan selama 4 bulan.
H.2. Bahan dan Alat Penelitian
H.2.1. Alat-Alat
Alat-alat yang digunakan, yaitu: pasteurizer, erlenmeyer, cawan petri,
thermometer, inkubator, refrigerator, spektofotometer UV, autoclave, magnetic
stirrer, tabung reaksi, oven, kandang mencit, kuvet, seperangkat pipet dan
perlengkapan injeksi.
H.2.2. Bahan Penelitian
Susu sapi, starter L. Helveticus, MRS Broth, PCA, pepton, gum arab,
tapioka, whey protein hidrolisat, kasein, HCl, sodium alginat, akuades, mencit,
lemak kambing, telur ayam, minyak kelapa, larutan garam empedu, CaCl2. 2H2O,
kapas, dan kertas kraft.
H.3. Tahap Penelitian
Tahap kerja yang dilakukan dalam penelitian ini meliputi :
1. Pembuatan biokapsul L. helveticus.
2. Pembuatan Bio-yoghurt L. helveticus.
3. Pengujian viabilitas probiotik dalam Bio-yoghurt
 4. Pengujian viabilitas probiotik dalam Bio-yoghurt terhadap asam lambung.
5. Pengujian viabilitas probiotik dalam Bio-yoghurt terhadap garam empedu.
6. Percobaan aktivitas antihiperkolesterolemia Bio-yoghurt secara in vivo
terhadap mencit
7. Analisis data
H.4. Prosedur Kerja
H.4.1. Pembuatan Biokapsul Lactobacillus helveticus
L.helveticus diinokulasikan ke dalam MRS broth kemudian diinkubasikan
pada suhu 37º C selama 24 jam. Kultur L. helveticus yang didapatkan kemudian
ditambahkan 1% sodium alginat dan bahan bioenkapsulasi (gum arab, tapioka,
whey protein hidrosilat, atau kasein). Proses selanjutnya adalah homogenisasi
kemudian diteteskan ke dalam CaCl2. 2H2O. Hasil yang didaptakan dikeringkan
pada suhu 45ºC selama 3 jam (Monnet et al,. 2003).
H.4.2. Pembuatan Bio-Yoghurt Lactobacillus helveticus
Enkapsulat L. helveticus yang didapatkan diinokulasikan sebanyak 5% ke
dalam susu sapi. Langkah selanjutnya adalah menginkubasinya pada suhu 42º C
selama 4 jam, kemudian dilakukan pemanenan produk Bio-yoghurt.
H.4.3. Pengujian Viabilitas Probiotik dalam Bio-Yoghurt
Pengujian viabilitas L. helveticus dalam Bio-yoghurt adalah sebagai
berikut (Menurut Fardiaz, 1993) yang dimodifikasi dalam hal jenis larutan
pengencer dan media pertumbuhan :
a. Persiapan Bahan dan Media
Larutan pepton dibuat dengan melarutkan 1 gram pepton dalam 1 liter
aquades, sehingga terbentuk larutan 0,1%, selanjutnya dimasukkan ke dalam
tabung reaksi, masing-masing sebanyak 9 ml. Tabung reaksi kemudian ditutup
dengan kapas dan dibungkus dengan kertas kraft, selanjutnya disterilisasi pada
suhu 1210C selama 15 menit. Media MRS agar dibuat dengan melarutkan 62 gram
MRS agar dalam 1 liter aquades, diaduk menggunakan magnetic stirrer dan
dipanaskan dengan hot plate hingga mendidih, selanjutnya disterilkan pada suhu
1210C selama 15 menit.
b. Pengujian viabilitas dalam Bio-yoghurt
1 ml Bio-yoghurt probiotik dimasukkan dalam 9 ml larutan pepton steril
10-1 kemudian dilakukan pengenceran hingga 10-7. Dituang dalam cawan petri
sebanyak 1 ml kemudian dituang MRS agar, diratakan dengan membentuk angka
8 (metode pour plate). Inkubasi pada suhu 370C selama 48 jam. Dilakukan
perhitungan jumlah koloni.
H.4.4. Pengujian Viabilitas Probiotik dalam Bio-Yoghurt terhadap Asam
Lambung
Pengujian viabilitas L. helveticus dalam probiotik Bio-yoghurt terhadap
asam lambung dilakukan menurut Mosilhey (2003) sebagai berikut:
a. Persiapan Bahan dan Media
Larutan asam lambung dibuat dari HCl 37% dengan pH 2, selanjutnya
dimasukkan ke dalam tabung reaksi sebanyak 9 ml. Tabung reaksi kemudian
ditutup dengan kapas dan dibungkus dengan kertas kraft, selanjutnya disterilisasi
pada suhu 1210C selama 15 menit. Larutan pepton dibuat dengan melarutkan 1
gram pepton dalam 1 liter aquades, sehingga terbentuk larutan 0,1%, selanjutnya
dimasukkan ke dalam tabung reaksi, masing-masing sebanyak 9 ml. Tabung
reaksi kemudian ditutup dengan kapas dan dibungkus dengan kertas kraft,
selanjutnya disterilisasi pada suhu 1210C selama 15 menit. Media MRS agar
dibuat dengan melarutkan 62 gram MRS agar dalam 1 liter aquades, diaduk
menggunakan magnetic stirrer dan dipanaskan dengan hot plate hingga mendidih,
selanjutnya disterilkan pada suhu 1210C selama 15 menit.
b. Pengujian Viabilitas terhadap Asam Lambung
1 ml Bio-yoghurt probiotik dimasukkan dalam 9 ml larutan asam lambung
steril selanjutnya diinkubasi selama 0, 1, dan 2 jam pada suhu 37 0C. Langkah
selanjutnya adalah pengenceran dengan menggunakan pepton steril hingga 10-5.
Dituang dalam cawan petri sebanyak 1 ml kemudian dituang MRS agar, diratakan
dengan membentuk angka 8 (metode pour plate) serta diinkubasi pada suhu 370C
selama 48 jam, selanjutnya dilakukan perhitungan jumlah koloni.
H.4.5. Pengujian Viabilitas Probiotik dalam Bio-Yoghurt terhadap Garam
Empedu
Pengujian viabilitas L. helveticus dalam probiotik Bio-yoghurt terhadap
garam empedu dilakukan menurut Mosilhey (2003) sebagai berikut:
a. Persiapan bahan dan media :
Larutan garam empedu dibuat dengan melarutkan 0,05 gram garam
empedu dalam 10 ml aquades sehingga terbentuk larutan garam empedu 0,5%,
selanjutnya dimasukkan ke dalam tabung reaksi sebanyak 9 ml. Tabung reaksi
kemudian ditutup dengan kapas dan dibungkus dengan kertas kraft, selanjutnya
disterilisasi pada suhu 1210C selama 15 menit. Larutan pepton dibuat dengan
melarutkan 1 gram pepton dalam 1 liter aquades, sehingga terbentuk larutan 0,1%.
Selanjutnya dimasukkan ke dalam tabung reaksi, masing–masing sebanyak 9 ml.
Tabung reaksi kemudian ditutup dengan kapas dan dibungkus dengan kertas kraft,
selanjutnya disterilisasi pada suhu 1210C selama 15 menit. Media MRS agar
dibuat dengan melarutkan 62 gram MRS agar dalam 1 liter aquades, diaduk
menggunakan magnetic stirrer dan dipanaskan dengan hot plate hingga mendidih,
selanjutnya disterilkan pada suhu 1210C selama 15 menit.
b. Pengujian viabilitas terhadap garam empedu
1 ml probiotik Bio-yoghurt dimasukkan dalam 9 ml larutan garam empedu
steril selanjutnya diinkubasi selama 0, 1, dan 2 jam pada suhu 37 0C. Langkah
selanjutnya dilakukan pengenceran dengan menggunakan pepton steril hingga 10-
5
. Dituang dalam cawan petri sebanyak 1 ml kemudian dituang MRS agar,
diratakan dengan membentuk angka 8 (metode pour plate) dan diinkubasi pada
suhu 370C selama 48 jam, selanjutnya dilakukan perhitungan jumlah koloni.
H.4.6. Percobaan Aktivitas Antihiperkolesterolemia Bio-Yoghurt Secara In
Vivo Terhadap Mencit
40 ekor mencit jantan yang digunakan dalam penelitian ini diadaptasikan
selama satu hari terhadap lingkungannya. Upaya meningkatkan kadar kolesterol
darah mencit dibuat pakan hiperkolesterolemia yang mengandung kolesterol 1,5%
dari kuning telur ayam, lemak kambing 10%, dan minyak kelapa 1%. Pakan
kolesterol 1,5% artinya dalam setiap 100 g pakan terkandung 1,5 g kolesterol
(Hardiningsih dan Nurhidayat, 2006). Pemberian pakan hiperkolesterolemia
dilakukan selama satu minggu, kemudian di uji kadar serum kolesterol, HDL dan
HDL. 40 ekor mencit kemudian dikelompokkan menjadi lima kelompok
berdasarkan perlakuan yaitu :
1. Kelompok I (kontrol) : 10 ekor diberi pakan hiperkolesterolemia 1,5% selama
1 minggu kemudian pakan standart selama 2 minggu.
 2. Kelompok II : 10 ekor diberi pakan hiperkolesterolemia 1,5% selama 1 minggu
kemudian Bio-yoghurt secara oral dengan dosis 0,1 ml (single dose) selama 2
minggu.
3. Kelompok III : 10 ekor diberi pakan hiperkolesterolemia 1,5% selama 1
minggu kemudian Bio-yoghurt secara oral dengan dosis 0,2 ml (double dose)
selama 2 minggu.
4. Kelompok IV : 10 ekor diberi pakan hiperkolesterolemia 1,5% selama 1
minggu kemudian Bio-yoghurt secara oral dengan dosis 0,3 ml (triple dose)
selama 2 minggu.
* keterangan : penentuan besarnya dosis yang akan diberikan pada mencit
dilakukan anologi dengan dosis terhadap manusia (Young, 1993).

Rata-rata volume darah total mencit X standart konsumsi yoghurt

Rata-rata volume darah manusia
2,4 mL
x 200 mL = 0,096 mL ~ 0,1
5000 mL mlmlmL
H.4.7. Metode Analisis Data
a. Analisis Viabilitas Probiotik Terhadap Asam Lambung dan Garam Empedu
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen dengan
Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan penambahan empat jenis bahan
mikroenkapsulasi probiotik yaitu : gum arab, tapioka, Whey Protein Hidrolisat
(WPH), dan Kasein. Desain penelitian ini tersaji pada tabel berikut :
Jenis Bahan Ulangan
Enkapsulat 1 2 3 4 5
Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap
Gum Arab - HCl - HCl - HCl - HCl - HCl
- Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu
Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap
Tapioka - HCl - HCl - HCl - HCl - HCl
- Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu
Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap
WPH - HCl - HCl - HCl - HCl - HCl
- Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu
Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap Viabilitas terhadap
Kasein - HCl - HCl - HCl - HCl - HCl
- Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu - Garam Empedu
b. Analisis Aktivitas Antihiperkolesterolemia
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen dengan
Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan dengan ulangan 10 kali. Perlakuan pada
mencit adalah pemberian dosis pada masing-masing perlakuan yaitu : kontrol
(tanpa pemberian Bio-yoghurt), single dose (0,1 ml), doble dose (0,2 ml) dan
triple dose (0,3 ml). Desain penelitian ini tersaji pada tabel berikut :
Ulangan
Hewan Uji
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
kontrol P1U1 P1U2 P1U3 P1U4 P1U5 P1U6 P1U7 P1U8 P1U9 P1U10
Single dose P2U1 P2U2 P2U3 P2U4 P2U5 P2U6 P2U7 P2U8 P2U9 P2U10
Doble dose P3U1 P3U2 P3U3 P3U4 P3U5 P3U6 P3U7 P3U8 P3U9 P3U10
Triple dose P4U1 P4U2 P4U3 P4U4 P4U5 P4U6 P4U7 P4U8 P4U9 P4U10
*keterangan : P1 tanpa pemberian, P2 single dose (0,1 ml), P3 doble dose (0,2 ml),
P4 triple dose (0,3 ml) dan U1,2,3, dst ulangan 1, 2, 3, dst.
Data yang diperoleh dianalisis dengan sidik ragam, jika ada perbedaan
dilanjutkan dengan Uji Jarak Berganda Duncan (UJBD) (Yitnosumarto, 1991),
kemudian untuk mengetahui perlakuan terbaik antar perlakuan, analisis data
dilakukan dengan metode D’Garmo.

I. JADWAL KEGIATAN
No Nama Kegiatan Bulan Bulan Bulan Bulan
I II III IV
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
1. Pembelian alat dan bahan
2. Pembuatan biokapsul L
helveticus
3. Pembuatan Bio-yoghurt L
helveticus
4. Pengujian Viabilitas Probiotik
dalam Bio-yoghurt
5. Pengujian Viabilitas Probiotik
dalam Bio-yoghurt terhadap
Asam Lambung
6. Pengujian Viabilitas Probiotik
dalam Bio-yoghurt terhadap
Garam Empedu
7 Pengujian Aktivitas Penurunan
Kolesterol secara in vivo
9 Analisis Data
10 Penulisan Laporan Akhir
J. RANCANGAN BIAYA
1. Biaya Alat
No Jenis Peralatan Harga
1. Sewa Spektrofotometer UV Rp. 240.000
2. Sewa Laboratorium Tek. Hasil Ternak UB Rp. 150.000
3. Sewa Laboratorium Biokimia UB Rp. 250.000
4. Sewa Laboratorium Kedokteran UB Rp. 500.000
TOTAL Rp. 1.140.000
2. Biaya Bahan Habis Pakai
No Jenis Bahan Jumlah Harga Satuan Harga (Rp)
. Kebutuhan (Rp)
1. Susu Sapi 50 liter 7000 Rp 350.000
2. Gum Arab 500 g 54.000/100 g Rp 270.000
3. Tapioka 500 g 10.000/ Kg Rp 5.000
4. Kasein 500 g 75.000/ 100 g Rp 375.000
5. Whey Protein Hidrosilat 500 g 100.000/ 100 g Rp 500.000
5. Pepton 50 g 5.000/ 1 g Rp 250.000
6. Starter L.helveticus 1 paket 350.000 Rp 350.000
7. Kertas Kraft 20 lembar 3.000 Rp 60.000
8. Kapas 10 bungkus 5.000 Rp 50.000
10. HCl 500 ml 35.000/ 100 ml Rp 175.000
11. Akuades 50 liter 1.500 Rp 75.000
12. CaCl2 500 g 4000/ g Rp 200.000
13. Larutan garam empedu 500 ml 35.000/ 100 ml Rp 175.000
14. Sodium alginate 50 g 3.000/ g Rp 150.000
15. PCA 175 g 5.000/ g Rp 875.000
16. MRS Broth 50 g 5.000/ g Rp 125.000
17. Mencit 50 ekor 20.000 Rp 1.000.000
18. Benang Wool 10 gulung 2.000 Rp 20.000
19. Minyak Kelapa 2 liter 10.000/ L Rp 20.000
20. Lemak Kambing 5 Kg 15.000/ Kg Rp 75.000
21. Telur Ayam 10 Kg 11.000/ Kg Rp 110.000
TOTAL Rp. 5.210.000
3. Biaya Transportasi
No Jenis Kegiatan Biaya Satuan Harga
.
1. Pembelian Alat dan Bahan 10 x 5.000 Rp. 50.000
2. Pengujian 10 x 5.000 Rp 50.000
TOTAL Rp. 100.000
4. Biaya Lain-Lain
No Nama Harga
.
1. Fotokopi dan Penjilidan Rp. 150.000
2. Penelusuran Pustaka Rp. 100.000
3. Pembuatan Laporan Akhir Rp. 100.000
4. Dokumentasi Kegiatan Rp. 200.000
TOTAL Rp. 550.000
REKAPITULASI DANA
No Jenis Biaya Harga
1. Biaya Peralatan Rp. 1.140.000
2. Biaya Bahan Rp. 5.210.000
3. Biaya Transportasi Rp. 100.000
 4. Biaya Lain-Lain Rp. 550.000
JUMLAH Rp. 7.000.000
K. DAFTAR PUSTAKA
Bertolini A.C., A.C. Siani dan C.R.F. Grosso. 2001. Stability of Monoterpenes
Encapsulated in Gum Arabic by Spray Drying. J. Agr. Food. Chem.
49:780–785.
Britten. M and H.J. Giroux. 1994. Effect of pH During Heat Processing of
Partislly Hydrolyzed Whey Protein. J. Dairy Sci. 77: 676-684.
Burke V, Hodgson JM, Beilin LJ, Giangiulioi N, Rogers P, Puddey IB. 2001.
Dietary Protein And Soluble Fiber Reduce Ambulatory Blood Pressure In
Treated Hypertensives. Hypertension. 2001; 38: 821-6.
Cuchel, Marina., et al. 1997. Lovastatin Decreases De Novo Cholesterol Synthesis
and LDL Apo B-100 Production Rates in Combined-Hyperlipidemic
Males. Journal of Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology.
American Heart Association. 1910-1917.
Dave R.I and N.P Shah. 1998. Ingredient Supplementation Effect on Viability of
Probiotic Bacteria in Yoghurt. J. Dairy Sci. 81(11): 2804-2816.
Dziezak. 1988. Microencapsulation in Food Addititives in Jackson, L and Lee,
K.1991. Microencapsulation and food industry. Lebenson – Wiss – U
Technol 24:289 – 287.
Fardiaz, S. 1993. Mikrobiologi Pangan 1. Jakarta : PT. Gramedia Pustaka Utama.
Fox, P.F., T.P. Guinee, T.M., Cogan, L.H. Paul and M. Sweeney. 2000.
Fundamentals of Cheese Science. New York : Aspen Publishers, Inc.
Gauthier, S.F and Y. Pouliot. 2003. Functional And Biological Properties Of
Peptides Obtained By Enzymatic Hydrolysis Of Whey Proteins. J. Dairy
Sci. 86: E78-E87.
Gibson, G. and Fuller, F. 1998. The Role Of Probiotics And Prebiotics In
Functional Food Concept. British Nutrition Foundation. 3 – 13.
Hardiningsih dan Nurhidayat. 2006. Pengaruh Pemberian Pakan
Hiperkolesterolemia Terhadap Bobot Badan Tikus Putih Wistar yang
Diberi Bakteri Asam Laktat. Biodiversitas. Vol.7. 127-130.
Hirata, Nakamura Y, Yada H, Moriguchi S, Kajimoto O, Takahashi T. 2002.
Clinical Effects Of New Sour Milk Drink In Mild Or Moderate
Hypertensive Subjects. J. New Rem. & Clin., 51, 60-6, 2002.
Kim, Y.D. and C.V Morr. 1996. Microencapsulations Properties Of Gum Arabics
And Several Food Proteins : Spray – Dried Oranges Emulsions Particles.
J. Agric. Food Chemistry. 44 : 1308 – 1313.
Kimoto, H., S. Ohmomo, T. Okamoto. 2002. Cholesterol removal from media by
Lactococci. Journal Dairy Science 85:3182-3188.
Kurniawan, A., 2009, Gizi Seimbang Untuk Mencegah Hipertensi,
http://www.bahanpang.sumutprov.go.id. Diakses tanggal 29 Juli 2010.
Mancia G, De Backer G, Dominiczak A, Cifkova R, Fagard R, Germano G et al.
2007. Guidelines For The Management of Arterial Hypertension: The
Task Force for The Management of Arterial Hypertension of The
European Society of Hypertension (Esh) and of The European Society of
Cardiology (Esc). J Hypertens. 2007;25:110587.
McComas, K.A, Jr, and S.E, Gilliland. 2003. Growth of Probiotic and Traditional
Yoghurt Cultures in Milk Supplemented with Whey Protein Hydrolysate.
J. Food Sci. Vol. 68, No. 6.
Misbach, J dan Kalim, H. 2009. Kaitan Penyakit Kardiovaskular,
Hiperkolesterolemia dan Pola Hidup.
Http://medicastore.com/cardiovascular/art193.html. diakses 4 Oktober
2010.
Monnet, C., C. Beal and G. Corrie. 2003. Improvement of The Resistance of
Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus to Freezing by Natural Selection.
Journal Dairy Science. 86 : 3048-3053.
Mosilhey, S.H. 2003. Influence of Different Capsule Materials on The
Physiological Properties of Microencapsulated Lactobacillus acidophilus.
Institute of Food Technology. Faculty of Agriculture University of Bonn.
153 pages.
Rosenberg, M., I.J. Kopelman and Y. Talmon, 1990. Factors Affecting Retention
in Spray Drying Microencapsulation of Volatile Materials. J. Agric.
Foodchem. 38:1288-1294.
Ruidavets JB, Bongard V, Simon C, Dallongeville J, Ducimetiere P, Arveiler D.
2006. Independent Contribution of Dairy Products and Calcium Intake to
Blood Pressure Variations at a Population Level. J Hypertens .2006; 24:
671-81.
Sultana K, G. Godward, N. Reynolds, R.Arumugaswamy, P. Peiris and K.
Kailasapathy. 2000. Encapsulation of Probiotic Bacteria Withalginate-
Starch and Evaluation of Survival in Simulated Gastro Intestinal Condition
and in Yoghurt. J. Food Microbiol. 62:47–55.
Sothornvit, S. and J.M. Krochta. 2000. Water Vapor Permeability and Solubility
of Film from Hydrolyzed Whey Protein. J. Food Sci. Vol. 65, No. 4.
Widodo. 2003. Bioenkapsulasi Probiotik (Lactobacillus cassei) dengan Pollard
dan Tepung Terigu Serta Pengaruhnya Terhadap Viabilitas dan Laju
Pengasaman.
Yitnosumarto, S. 1993. Percobaan Rancangan, Analisis dan Interpretasinya.
Jakarta : Gramedia Pustaka Utama..
Young, S.L., X. Sarda and M. Rosenberg. 1993. Microencapsulating Properties of
Whey Proteins, Microencapsulation of Anhydrous Milk Fat. Journal
Dairy Science. 76 : 2868-2877.
L. LAMPIRAN
Ketua Pelaksana Kegiatan
1. Nama Lengkap : Mega Nurjayanti
2. NIM : 0810920048
3. Fakultas/jurusan : MIPA/ Kimia
4. Tempat/Tanggal Lahir : Balikpapan, 30 September 1990
5. Alamat di Malang : Jalan Watugong 40, Ketawanggede
6. Waktu untuk kegiatan PKM : 24 jam/minggu
7. Riwayat pendidikan :
 SDN Rembang 2
 SLTPN 1 Blitar
 SMAN 1 Blitar
 Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Brawijaya
8. Pengalaman Organisasi :
 Anggota Himpunan Mahasiswa Kimia (HMK) UB
9. Pengalaman Ilmiah :-

Malang, 20 Oktober 2010

Mega Nurjayanti
0810920048

Anggota Pelaksana 1
1. Nama Lengkap : Tito Ari Santoso
2. NIM : 0610540054
3. Fakultas/jurusan : Peternakan/THT
4. Tempat/Tanggal Lahir : Batu, 20 November 1987
5. Alamat di Malang : Jl Abdul Gani 06 Batu
6. Waktu untuk kegiatan PKM : 24 jam/minggu
7. Riwayat pendidikan
 SDN Ngaglik 02 Batu
 SMPN 01 Batu
 SMAN 01 Batu
 Teknologi Hasil Ternak Fakultas Peternakan Universitas Brawijaya
8. Pengalaman Organisasi : Ketua Umum HIMATENA Fakultas
Peternakan UB
9. Pengalaman Ilmiah : Penggunan Litesse dan Simplesse pada Pembuatan Es
Krim Strawberry Rendah Lemak
Malang, 20 Oktober 2010
 Tito Ari Santoso
0610540054

Anggota Pelaksana 2
1. Nama Lengkap : Ardhana Galih Indera. A
2. NIM : 0610543001
3. Fakultas/jurusan : Peternakan/Teknologi Hasil Ternak
4. Tempat/Tanggal Lahir : Jombang, 16 Oktober 1987
5. Alamat di Malang : Jalan Tirtosari No. 6 Landungsari Malang
6. Waktu untuk kegiatan PKM : 24 jam/minggu
7. Riwayat pendidikan :
 SDN Tanggung Kramat Ploso Jombang
 SMP N 2 Jombang
 SMA N 2 Jombang
 Teknologi Hasil Ternak, Fakultas Peternakan, Universitas Brawijaya
8. Pengalaman Organisasi :
 UAKI bidang Syi’ar tahun 2008
9. Pengalaman Ilmiah :
 Finalis PKM-T dalam PIMNAS XXII dengan judul “Rancang Bangun
Mikrowave Ekstraktor Sebagai Pengekstraksi Essensial Oil Jahe Untuk
Pengawet Bakso”
Malang, 20 Oktober 2010

Ardhana Galih Indera. A.

0610543001
Anggota Pelaksana 3
1. Nama Lengkap : Khoirun Nisyak
2. NIM : 0810920046
3. Fakultas/jurusan : MIPA/ Kimia
4. Tempat/Tanggal Lahir : Mojokerto, 6 Desember 1989
5. Alamat di Malang : Jalan Sumbersari Gang IV/263, Malang
6. Waktu untuk kegiatan PKM : 24 jam/minggu
7. Riwayat pendidikan
 SDN Sudimoro 03 Malang
 SMP Al-Munawwariyyah Malang
 SMAN 2 Jombang
 Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Brawijaya
8. Pengalaman Organisasi :
 Pengurus HMK-UB Divisi Penelitian dan Pengembangan Keilmuan Periode
2009-2010
9. Pengalaman Ilmiah :
 Finalis PKM-GT pada PIMNAS XXII dengan judul “Pemanfaatan Getah
Kamboja Untuk Pengobatan Kutil Kulit” pada tahun 2009
Malang, 20 Oktober 2010
 Khoirun Nisyak
0810920046

Anggota Pelaksana 4
1. Nama Lengkap : Sesotya Raka P
2. NIM : 0810550036
3. Fakultas/jurusan : Peternakan/Ilmu Peternakan
4. Tempat/Tanggal Lahir : Nganjuk, 6 Desember 1989
5. Alamat di Malang : Jalan Kertowaluyo No 10 Malang
6. Waktu untuk kegiatan PKM : 24 jam/minggu
7. Riwayat pendidikan
 SDN 1 Banaran
 SMPN 1 Kertosono
 SMAN 1 Kertosono
 Ilmu Peternakan Fakutas Peternakan Universitas Brawijaya
8. Pengalaman Organisasi :
9. Pengalaman Ilmiah :
 Finalis PKM-GT pada PIMNAS XXIII dengan judul ” Bank Biogas
Sebagai Solusi Kreatif Pengurangan Emisi Karbon Dan Krisis Energi”
tahun 2010
Malang, 20 Oktober 2010

Sesotya Raka. P.
0810550036
Daftar Riwayat Hidup Dosen Pembimbing
Nama : Dr. Sasangka Prasetyawan, MS.
Pangkat/Jabatan /Gol : Lektor Kepala
NIP : 19630404 197001 1 001
Tempat & Tanggal lahir : Malang, 4 April 1963
Unit kerja : Jurusan Kimia-Fakultas MIPA Universitas
Brawijaya
Jl. Veteran Malang. Telpon/Fax : (0341) 575838
Alamat rumah : Jalan Hamid Rusdi No. 109 Malang
Email : sasangka_463@yahoo.com

Malang, 20 Oktober 2010

Dr. Sasangka Prasetyawan, MS.

19630404 197001 1 001