Teknologi Identifikasi DNA

Identifikasi DNA
Akhir-akhir ini marak di bicarakan tentang kasus pembunuhan atau perselisihan rumah tangga,yang dibicarakan adalah tentang status dari si_Korban Pembunuhan atau identikasi dari korban serta identikasi dari seorang anak yang diragukan statusnya dengan melalui tes DNA Ketika seseorang dengan alasan yang sangat beragam dan pribadi ingin tahu akan identitasnya, maka salah satu cara yang dapat dilakukan untuk menyelesaikan masalah tersebut adalah identifikasi DNA (Deoxyribo Nucleic Acid). Identifikasi DNA dapat dimanfaatkan untuk mengetahui hubungan biologis antar individu dalam sebuah keluarga dengan cara membandingkan pola DNA individu-individu tersebut. Lembaga Biologi Molekul Eijkman melalui Yayasan GenNeka menawarkan pelayanan identifikasi DNA, berupa tes paternitas dan tes maternitas.

Apakah DNA itu?
Setiap orang memiliki DNA yang unik. DNA adalah materi genetik yang membawa informasi yang dapat diturunkan. Di dalam sel manusia DNA dapat ditemukan di dalam inti sel dan di dalam mitokondria. Di dalam inti sel, DNA membentuk satu kesatuan untaian yang disebut kromosom. Setiap sel manusia yang normal memiliki 46 kromosom yang terdiri dari 22 pasang kromosom somatik dan 1 pasang kromosom sex (XX atau XY). DNA Mitokondria ? Tes mtDNA penurunan maternal

Pola penurunan matrilineal DNA Inti ?Tes Paternitas/Maternitas

Pola penurunan patrilineal dan matrilineal

Sampel disimpan pada suhu 4°C.Setiap anak akan menerima setengah pasang kromosom dari ayah dan setengah pasang kromosom lainnya dari ibu sehingga setiap individu membawa sifat yang diturunkan baik dari ibu maupun ayah. Sedangkan DNA yang berada pada mitokondria hanya diturunkan dari ibu kepada anak-anaknya. Apakah tes paternitas? Tes paternitas adalah tes DNA untuk menentukan apakah seorang pria adalah ayah biologis dari seorang anak. perwalian anak. . Kedua pola penurunan materi genetik dapat diilustrasi seperti gambar sebelumnya. imigrasi. adopsi. darah. Kita semua mewarisi DNA (materi genetik) dari orang tua biologis kita. rambut beserta akarnya. dan tanggal pengambilan sampel. Keunikan pola pewarisan DNA mitokondria menyebabkan DNA mitokondria dapat digunakan sebagai marka untuk mengidentifikasi hubungan kekerabatan secara maternal. Dengan perkembangan teknologi. Tes paternitas membandingkan pola DNA anak dengan terduga ayah untuk memeriksa bukti pewarisan DNA yang menunjukkan kepastian adanya hubungan biologis. walaupun lebih dipilih penggunaan darah dalam tabung (sebanyak 2ml) sebagai sumber DNA. seperti buccal swab (usapan mulut pada pipi sebelah dalam). Cara pengambilan sampel: Sampel darah diambil sebanyak 2 ml dengan menggunakan tabung EDTA kemudian diberi label yang jelas. pemeriksaan DNA dapat digunakan untuk mengidentifikasi dan membedakan individu yang satu dengan individu yang lain Untuk apa saja tes DNA dilakukan? Tes DNA dilakukan dengan berbagai alasan seperti persoalan pribadi dan hukum antara lain: tunjangan anak. warisan dan masalah forensic (dalam Identifikasi korban pembunuhan) Sampel apakah yang akan diambil untuk tes DNA? Hampir semua sampel biologis dapat dipakai untuk tes DNA.

Identifikasi DNA dengan penanda STR merupakan salah satu prosedur tes DNA yang sangat sensitif karena penanda STR memiliki tingkat variasi yang tinggi baik antar lokus STR maupun antar individu. . Metoda identifikasi DNA apakah yang digunakan dalam tes paternitas dan tes maternitas? Identifikasi DNA untuk tes paternitas dilakukan dengan menganalisa pola DNA menggunakan marka STR (short tandem repeat). STR adalah lokus DNA yang tersusun atas pengulangan 2-6 basa.atau dapat dikatakan keluarga sekandung Dapatkah tes paternitas dilakukan bila hanya terduga ayah dan anak saja yang diperiksa? Dapat. Seperti pada tes paternitas. kasus anak angkat dan lain-lain. anak dan terduga ayah. Akan tetapi kami dapat melakukan tes paternitas tanpa partisipasi ibu. seperti kasus dugaan tertukarnya bayi. tes ini membandingkan pola DNA anak dengan terduga ibu untuk menentukan kecocokan DNA anak yang diwariskan dari terduga ibu. Dalam genom manusia dapat ditemukan pengulangan basa yang bervariasi jumlah dan jenisnya. tanpa dipungut biaya tambahan. Apabila anak belum dewasa maka di perlukan fotokopi surat kelahiran dan atau surat perwalian anak yang menyatakan terduga ayah atau wali anak memiliki hak untuk membawa anak tersebut untuk melakukan tes paternitas. Partisipasi ibu pada tes paternitas dapat membantu menyingkirkan separuh DNA anak. sehingga separuhnya lagi dapat dibandingkan dengan DNA terduga ayah. tetapi hanya bila ibu biologis tidak bersedia di tes. Umumnya tes maternitas dilakukan untuk kasus. dengan menggunakan analisis tambahan (penambahan penanda) memberikan hasil yang sama akuratnya. kasus bayi tabung. Siapa saja yang perlu di periksa untuk tes paternitas? Ibu.Apakah tes maternitas? Tes maternitas adalah tes DNA untuk menentukan apakah seorang wanita adalah ibu biologis dari seorang anak.

terduga ayah dapat diambil darahnya di kota domisili dan mengisi formulir surat pernyataan persetujuan untuk melakukan tes paternitas serta menandatanganinya di atas materai. Tes DNA dapat dilakukan dengan sampel dari jaringan janin (Chorionic Villi Sample. atau dengan cara amniosentesis pada umur kehamilan 14-24 minggu. alkohol. Apakah harus ada persiapan sebelum tes DNA? Tidak. Untuk pengambilan jaringan janin ini harus dilakukan oleh ahli kebidanan/kandungan. Apakah tes paternitas dapat dilakukan sebelum anak lahir? Dapat. Konfirmasi dilakukan dengan mengulang tes terhadap terduga ayah. Apakah kerahasiaan hasilnya terjamin? . kecuali jika sampel yang diperiksa diambil melalui prosedur hukum (surat dan polisi atau jaksa). makanan. Apakah hasil ini dapat digunakan sebagai bukti hukum? Hasil tes ini hanya dapat digunakan sebagai referensi pribadi. Berapa lamakah hasilnya dapat diperoleh? Hasil tes DNA akan selesai dalam 12 hari kerja terhitung dari tanggal diterimanya sampel. walaupun kami sering bekerjasama dengan dokter dan banyak kasus kami berhubungan dengan mereka.Apakah perlu surat dokter untuk melakukan tes DNA? Tidak. Bagaimana kalau terduga ayah berada di kota lain? Dengan surat pengantar dari dokter. Pengguna jasa dapat meminta dan menjadwal tes paternitas dan/atau tes maternitas secara langsung sesuai dengan keinginannya. Ibu yang ingin melakukan tes DNA prenatal harus berkonsultasi dengan ahli kebidanan/kandungan. obat2an. maka sampel tersebut memiliki kekuatan hukum. umur atau gaya hidup tidak akan mengubah pola DNA seseorang. Berapa akurasi hasil tes paternitas dan tes maternitas? Tes DNA adalah 100% akurat bila dikerjakan dengan benar.99% probabilitas paternitas bila DNA terduga ayah dan DNA anak cocok (matched). dengan analisis DNA. tetapi untuk tes DNA ini tidak perlu surat pengantar dokter. tes paternitas dapat dilakukan sebelum anak dilahirkan (prenatal). Apabila DNA terduga ayah dan anak tidak cocok (mismatched) maka terduga ayah yang di tes 100% bukanlah merupakan ayah biologis anak tersebut. CVS) umumnya pada umur kehamilan 10-13 minggu. Tes DNA ini memberikan hasil lebih dari 99.

identifikasi DNA dilakukan dengan membandingkan mtDNA ibu dengan mtDNA anak. Hasil dari tes ini juga dapat digunakan untuk konfirmasi hubungan biologis dari anak angkat. Hasil tes DNA hanya akan diberikan kepada individu yang melakukan tes. sampel dapat diambil dan disimpan sampai seluruh individu yang akan diperiksa telah terkumpul. Kapan tes Y-STR harus digunakan? Apabila sampel DNA yang diperiksa merupakan campuran DNA wanita dan lakilaki. mengenai tes dan hasil tes akan dijamin kerahasiaannya. Jika pola mtDNA nya tidak cocok. bila pola mtDNA seorang ibu sama dengan pola mtDNA anak maka dikatakan bahwa kedua individu tersebut memiliki garis keturunan maternal yang sama. dan pada saat itu tes baru dapat dilakukan. Apakah sampel yang akan diperiksa harus diambil pada waktu yang bersamaan? Tidak. Apakah tes Y-STR penurunan paternal (Y-STR paternal lineage test)? Tes Y-STR penurunan paternal digunakan untuk menentukan apakah dua atau lebih laki-laki mempunyai hubungan keluarga melalui ayah mereka (secara paternal/garis ayah). Tes dapat dilakukan pada janin dan bahkan pada orang yang sudah meninggal. Apakah ada batasan umur untuk melakukan tes DNA? Tidak.Tentu. Pada tes ini. Hasil tes ini juga dapat digunakan untuk konfirmasi hubungan biologis dari anak laki-laki angkat. Apakah tes mtDNA penurunan maternal (mtDNA maternal lineage test)? Tes mtDNA penurunan maternal digunakan untuk menentukan apakah dua atau lebih individu mempunyai hubungan keluarga melalui ibu mereka (secara maternal/garis ibu). tes DNA tidak dipengaruhi oleh umur. Tes ini sering digunakan untuk memberikan bukti tambahan pada kasus paternitas yang sulit dimana terduga ayah tidak dapat di tes. karena pertanyaan mengenai paternitas sangat sensitif. dengan komponen DNA laki-laki pada sampel lebih sedikit dari komponen . Metode identifikasi DNA apakah yang digunakan dalam tes mtDNA penurunan maternal? Dalam tes mtDNA yang diturunkan secara maternal. karena DNA mitokondria hanya diwariskan secara maternal pada anaknya. seluruh informasi pasien. maka kedua individu tersebut dinyatakan 100% bukan berasal dari satu garis keturunan ibu. Tes ini sering digunakan untuk memberikan bukti tambahan pada kasus maternitas yang sulit dimana terduga ibu tidak dapat di tes.

000..per paket *. dll). dengan atau tanpa kehadiran ibu adalah Rp. Pengguna jasa juga harus menandatangani surat pernyataan persetujuan tes DNA di atas materai. Jika anda akan memeriksakan lebih banyak orang (lebih dari satu tersangka ayah.500. 2.-. 5. maka tes Y-STR dapat membantu membedakan kontributor.000.-/per orang *. Biaya pemeriksaan Biaya tes paternitas yang dilakukan oleh seorang anak dan seorang terduga ayah.. mereka dapat dilibatkan dalam proses pemeriksaan dengan biaya tambahan Rp. Biaya tes Y-STR penurunan paternal untuk dua individu adalah Rp. 4. Pada sampel yang diperiksa apabila terjadi kontribusi DNA laki-laki lebih dari satu.000.000.000. Persyaratan yang diperlukan dalam melakukan identifikasi DNA Pengguna jasa harus menyerahkan fotokopi kartu identitas diri (KTP/ paspor). saudara.000.7. akte atau surat keterangan lahir anak dan foto-foto dari individu yang diperiksa.000. Biaya tes mtDNA penurunan maternal untuk dua individu adalah Rp.per paket * . 350.DNA wanita.-/per paket *. biaya ini sudah termasuk biaya konsultasi pemeriksaan identifikasi DNA seharga Rp.500. maka tes Y-STR akan memberikan pola DNA laki-laki.

Azhari. data pemeriksaan medis. tiba-tiba sebuah ledakan dahsyat mengguncang kota Kuta di pulau Bali. Sangkot Marzuki. serta penggunaan teknologi masa depan atau modern semisal microarray dalam identifikasi DNA. adalah benar milik sang insinyur asal Negeri Jiran Malaysia. sidik jari. hingga Bom Bali II di Jimbaran Bali 1 Oktober 2005. Uji DNA semakin memberi kepastian bahwa potongan tubuh yang ditemukan di Batu. Adapun fokus utama acara ini adalah membahas tentang upaya dan strategi membangun bank data (data base) populasi dan kriminal. Dalam hal ini kepolisian Indonesia bekerja sama dengan Kepolisian Federal Australia. Rentetan peristiwa tersebut membuat wajah Indonesia kian suram di mata internasional. M. kepolisian mulai menggunakan teknologi identifikasi yang lebih modern. Tak tanggung-tanggung.Sc. dan pemeriksaan berdasarkan prinsip eksklusi. Menentukan identitas jenazah terkadang tidak mudah. Bahkan sekarang telah dibangun laboratorium DNA forensik bertaraf internasional dibawah Biddokpol (Bidang Kedokteran Kepolisian) Pusdokkes (Pusat Kedokteran dan Kesehatan) POLRI Jakarta. Lihat saja. Ibarat sapi dipecut. Kalau tubuhnya utuh. Mulai dari ledakan bom di Hotel JW Marriott Jakarta 5 Agustus 2003. desakan dunia internasional ini membuat kepolisian Indonesia tergopoh-gopoh melakukan investigasi. baik dari dalam maupun luar negeri. Pada jasad yang masih dapat dikenali dengan metode identifikasi lain. . acara ini bertujuan untuk mempromosikan pengembangan kapasitas tes DNA forensik di Indonesia. Simposium ini adalah acara pertama yang digelar di Indonesia yang membahas keilmuan forensik DNA secara komprehensif dan overview yang lengkap. Identifikasi korban dan pelaku kejahatan terorisme tersebut menjadi momentum mulainya Indonesia memasuki era DNA forensik. Kesembilan metode itu ialah pemeriksaan secara visual. sepotong daging. Apalagi pembicarapembicaranya adalah memang pakar di bidangnya. Prof. menjadi momentum mulainya Indonesia memasuki era DNA forensik Malam hari tanggal 12 Oktober 2002. korban dan prilaku kriminal teroris berhasil diungkap satu-persatu. Menurut Ketua Panitia. Malang Jawa Timur pada 9 November 2005 silam itu. Kerjasama yang telah dimulai itu semakin diperkuat dengan penyelenggaraan simposium dan workshop mengenai “Forensic DNA : Identification and medicolegal Aspecs. Kejadian ini dianggap sebagai peristiwa terorisme terparah dalam sejarah Indonesia.Identifikasi korban dan pelaku kejahatan terorisme di Tanah Air baru-baru ini. kami lebih menekankan pada peran uji DNA dan aspek medikolegalnya. yakni Deoxyribo Nucleic Acid (DNA) forensik. tulang. Tokoh-tokoh dunia mengutuk dan mengecam insiden tersebut dan meminta agar dalangnya segera ditangkap. pemeriksaan medis DNA dilakukan hanya untuk lebih memastikan. Dengan teknologi DNA forensik ini. Dr. bom Bali juga dianggap sebagai ’peletakan batu pertama’ dari kebangkitan terorisme di Tanah Air. Tapi pada kasus tubuh hancur. “Pada simposim perdana ini. serologi. dan merenggut 202 orang korban meninggal serta 209 korban cedera. di Kedutaan Besar Australia 9 September 2004. Apalagi bila sampel yang ditemukan berupa serpihan seperti rambut.” jelas Sangkot pada Farmacia. pakaian. apalagi hangus terbakar. Topik-topik yang disuguhkan cukup menarik minat peserta. dan universitas-universitas. dan gigi. Direktur Lembaga Biologi Molekuler Eijkman.” pada 5-6 Februari 2007 di Hotel Borobudur Jakarta. Lembaga Biologi Molekuler Eijkman. pemeriksaan DNA menjadi sangat berperan bahkan penentu. masih dapat diungkap lewat dua dari sembilan metode identifikasi. Tak hanya itu. Termasuk buron paling dicari di Indonesia yang menjadi otak dari serangkaian bom tersebut. di tengah suasana pesta-pora. sejak itu ledakan bom terus meneror kota-kota besar di Bumi Pertiwi ini setiap tahunnya. lewat dokumen atau surat. Dr. pemeriksaan gigi dan odontologi. dari perhiasan.

Departemen Pertanian. dan POLRI. sehingga sangat rawan konflik dan terorisme.569 bp Kopi per sel 2 (1 dari tiap induk) Bisa lebih dari 1000 Struktur Linier. yaitu ada sekitar 350 populasi etnik. Untuk keperluan ini. Bangun Data Induk DNA Populasi dan Kriminal Selain maraknya kejahatan transnasional yang timbul belakangan ini. bahkan untuk yang hanya berupa serpihan tubuh sekalipun. rumah sakit. Kondisi alam ini membuat Indonesia juga rawan mengalami bencana alam. gempa. dan Australia. Sementara Singapura hanya berpenduduk sekitar 1. Bayangkan saja. pemeriksaan DNA untuk pembuatan data base profil DNA umumnya dilakukan dengan sistem kodifikasi. DNA Inti DNA Mitokondria Ukuran genoma -3 juta bp 16. Singapura. sistem ini telah diaplikasikan. maka dilakukan pemeriksaan STR (Short Tandom Repeat) DNA. Sangkot . upaya untuk membangun data induk DNA (database) juga dilatari oleh kondisi Indonesia yang sangat kompleks. sehingga bisa mengungkap jati diri seseorang. Belum lagi geografis Indonesia yang merupakan negara kepulauan dengan banyak gunung aktif serta dikelilingi lautan dan samudera. Namun untuk Indonesia tampak agak sedikit susah dan kompleks.500 km dan dari Utara ke Selatan sejauh 2000 km. bila dibandingkan dengan Malaysia yang hanya terdiri dari 20 etnik. Kemudian sistem ini telah banyak diadopsi dan dikembangkan di berbagai negara di seluruh jagad raya. Sangkot mengatakan. serta kolega dari Malaysia.Di meja registrasi terdaftar sekitar 200 peserta yang berpartisipasi. Selain itu juga bisa dilakukan dengan pendekatan profil mitokondria DNA “ Sistem kodifikasi yang seperti itu belum dilakukan di Indonesia. Lalu dengan hal sebesar ini. yaitu ada sekitar 240 juta jiwa yang tersebar dari Barat ke Timur sejauh 4.“ Perbedaan Penanda DNA Nuklear dengan DNA Mitokondria. dan lumpur panas telah merenggut banyak nyawa. terbungkus kromosom Sirkular Diturunkan dari Ayah dan Ibu (kecuali Y) Ibu Keunikan Unik untuk tiap individu Tidak sepenuhnya unik/khas (kecuali saudara kembar identik0 Tingkat mutasi Rendah 5-10 kali DNA inti Sistem kodifikasi yang akrab disebut Codis itu. sebenarnya berasal dari Amerika Serikat. database populasi ini nanti juga berguna untuk melihat varietas antar etnik dan mutasi genetik dari populasi Indonesia. LIPI. yakni dari 20 universitas. populasi di Indonesia sangat beragam. BPPT. banjir. Selain itu. Setiap individu mempunyai pola pengulangan DNA yang berbeda. maka akan sangat mudah mengidentifikasi korban dan pelaku kriminal. yakni bagian DNA yang memiliki urutan berulang. Dengan ketersediaan database DNA populasi dan kriminal. bencana-bencana besar seperti tsunami. lanjut Sangkot. Lebih lanjut Sangkot mengatakan. Di negara tetangga. seperti di Singapura dan Malaysia. yang dalam hal ini ada 13 marka. longsor. Mereka berasal dari 20 institusi di seluruh Indonesia. Indonesia terdiri dari beragam suku. Tapi nanti kita akan mengarah kesana. bagaimana kita harus bertindak atau mengerjakannya?“ ujar Sangkot menegaskan bahwa proses pembangunan database DNA itu memang harus dilakukan secara bertahap. Sistem ini akan mengidentifikasi markamarka DNA tertentu. budaya. dan agama. karena Indonesia adalah negara besar dan populasi sangat besar. serta akses yang gampang terhadap uji DNA. “Pertama-tama. Sepanjang 5 tahun belakangan saja.5 juta orang dan Malaysia 23 juta.

Tapi masalahnya bagaimana membuat hal tersebut menjadi tersebar merata. proguanil. Contoh lain dari mutasi genetik juga dilihat dari efek farmakokinetik suatu obat. Sedangkan 307 pria dari 23 etnik populasi diperiksa untuk kromoson Y. dan Indonesia). Belum lagi masalah akreditasi laboratorium (GLP).Etnik dengan mutasi tertinggi adalah dari Makasar. sebenarnya Indonesia telah memiliki alat dan fasilitas yang canggih serta tenaga terlatih. sekitar 30 diantaranya ditemukan di Indonesia. Halaman: 56 (3740 hits) . Misalnya saja dari perbedaan mutasi enzim CYP2C19. diazepam. apalagi yang cuma nyolong ayam. Hingga kini Eijkmen sudah mengumpulkan lebih dari 6000 sampel yang dipilih secara acak. Mulai September 2005. prevalensi metabolisme yang buruk dari obat tersebut meningkat. di Eropa metabolismenya masih normal. sitalopram. apakah harus mencatumkan DNA mitokondria juga. dan propanol. mefenitoin. (Arnita) Seperti tercetak di Majalah Farmacia Edisi Maret 2007 . Dari sekitar 300 mutasi gen penyebab thalasemia yang diidentifikasi di dunia. Tentu tidak mungkin semua kriminal ditentukan profil DNA-nya. Eijkmen telah aktif melakukan suatu studi dan membuat strategi untuk mengumpulkan sampel. Penelitian ini didanai oleh USANSF. Apa yang harus dicantumkan dalam database. Intinya Indonesia baru mulai merangkak ke era baru dan jalannya masih cukup panjang menuju DNA forensik. Lebih dari 1000 diantaranya yang berasal dari 35 etnik diuji untuk DNA mitokondria. Akibatnya metabolisme obat-obat ini jadi buruk. Ini menunjukkan pada populasi di Indonesia banyak ditemukan telah terjadi mutasi enzim CYP2C19. Enzim ini penting untuk memetabolisme sederet obat-obatan terutama barbiturat. Dalam rangka membangun database populasi. siapa saja atau apa kriteria kriminal yang diambil DNA databasenya. Tapi bila pergi ke Asia (Jepang. Temuan ini sangat penting untuk strategi pemberian dosis yang tepat. imipramin. sampel mana yang digunakan. China. Korea. Selain itu belum ada standarisasi bagaimana strategi pengumpulan profil DNA kriminal tersebut.mencontohkan. Sedangkan untuk membangun kriminal DNA database. omeprazol. Bila dilihat di antara populasi dunia. klomipramin. Eijkmen mulai menganalisa 1000 pria dari populasi yang terisolasi untuk penentuan gen Y STR. Di Indonesia saja sekitar 40 % poor metabolize. amitripilin. populasi Indonesia memiliki pola mutasi gen coding beta globin (penyebab thalasemia) dari hemoglobin yang berbeda antar etnik. klorproguanil. data distribusi. dan kluster populasi. Selanjutnya perlu dikaji bagaimana format databasenya.

.8. -.:0-.  $%#5.3.3/03.9  094/0/0391.9073.7.5.../:90780-:9 /3.7809:7:3.380.3./:3.3-:  5.290829.35..9073.4 2../.54.3 54..78.3/3.9083 .8.9073.3. !.79083:..2.9073.3-:8.2.3/:3.8..293.3-448/..29443/7.3/9:7:3. ./:.2-..298047.9/.4.5./.9/908 ./..290829 503:7:3..09089  %08 $%#503:7:3.20.9.. /0391.9/:3.9.78.3 2.5.703.:-:3../.3..9073.2.0/:.78-: %08 38073/:3. 80.8:82./03.3 202-.:.29.3.2..-:9/.3:39: 43172.3-.35.3/./...7..7./.3-:99.3.3:39:202-07.30.35.2070..2.5.30:./:90780-:9202..3/.9073.7.9.908 $%#503:7:3.8/.7.3..5.32.9073./.329-:/03. .329.. 2025:3. ..5..9073.3:39:203039:./.38:9 /2...54.3.90739.8:-:3.907/:.3/.38.8/.9:.:..3.380. .7809:7:3.3-07.0/:.3 -:.

25:7..39.3.2-.3 -448/.9/:3./.3 4254303  .9/..5.3:39:43172.9/908 .8./...35.90739. 8.9  .250  .-.3 .3908 $%#.89083:.38:9/2..3 5.3 .. 907/:.5.8:-:3.. 5./.7 4254303 .5. . ..8:85.7:8/:3./.3 /5078.3  . 8.7. 207:5.  /03...250 0- 80/9 /. ... /.3.3:39:202-07.78. %083 8073/:3.3-:99.3..

/.5.  !.79:/0399.:.3/. 8.8.39:202-0/.39.7:820307.-...9.907. .0-/.8 !03:3. 908  $%# .5.34397-:947  !078.9202-...8/7 %!.  2..220.9: 2. .354.3 202-07.3149445.3/0391.3/507:.. .7.3..908  $%#/.78..250 .  ./4397-:8.3/5078..

#5   .8./7./.5.7:8 203.:9.73/.  /03./.3.3.8.82.90.:8:7.3.31494 1494/..38:7.9 0907..9.3.3/5078..3908/./.3/.3408047.:.3-:.9.3/.0.9.3./:..3.  .8547 .38047....35.:.907.3.502078.95073.9.90739.3 .3507809::.9..7..3907/:. !03:3.9085.

3-.09 -.3#5   ...78./.2-....7.3.438:9.47.3.5.9/-. 8. / 2070.8:-.9...9072...2574808502078.9.3/.3 0-/..:/.#5   .5075.3/.880.3/0391.3202078..3 /03.30--.7.3 8:/..8502078.9: 9078..

.9073./.3  .:39:/:../.09  ./:.908 $%#503:7:3.50747.09    .#5  5075..9073./:.32.90829503:7:3.35.3/.#5  5075..:39:/:.3/.

9 -07507.8.5  !.2. 907454 454 20./0391.9 8.. -007.3 -.:7 .0.3 ! #.. 9.9. 503:3.7 &802./.390.3.  9-. .7. .7.. /05..3 -07:5./5:.:8:7. /9.. /..3 50789../2-..350.8  5.3 3 /.3 80.  %45 945 .7...3 /.3 90.8.7/-/.. .9. /-.3 202-.3 90344 /0391.2-:9 8054943/. .2 38/03 90780-:9 /.3 /902:..3 9/.  0.9/:3. 8:.9.3  502078. 507.79.3 3.3 50.7 /.357.9 /4:203 .7.:9.8 :3.3 4.3-07/.3 0/07.9:802. 5079.3.22.. -.3:3  0548.7 502078.3.7 0/. .3.3.3..320703:9 47.3././.7..2 /0391.3 03.73007  .7 / 3/4308..9 .: 24/073 8028.3.3383:7.3 47-..3 /.349. /-..7. 825482 507/..502-. 3/4308.3  /. 3/4308.50.9..9:  ... . /.. 44 40:07 2.3 /8::..3 .89. -. 5009.72..3 2:..8 03.8 .3-.0/07.8 /:3...3 %.:9  /08.3 ..7802-.39..89.3 203.0 .7/.79. 907..   0-7:./.7: -.843. 8007..3:3 9.3.3 4/43944  8/ .3:3 -.947:2  147038 -079./ 242039:22:.850 20/40.3903441470383 47-.8. 3  .3 :39: 202574248.35.::5 203./.3 08.0/.3 /0399.. 2..8 9039.8 47-.3/.  4.7. 709:702-..7 507...8: 07.3 / .3 3/4308.4440:072.   /0391. 502-...80  545:.3/.3  03.7/:2!0793809.7.3 3/4308.9. 90747820 9075.. 850..77.7:897.  $2548:2 3 .9.7. 2:/.3.  .33. 90780-:9 202-:.9508079.9/:.3 8:7...9.8 . 3 -079::. 50789./.8 02:.3.3:8907-.9: 5079.5. /...7 9.9:0/.8: -:743 5.40.  /./.9.  94-07    / 903.3.9  /.3 20239.3.3 0548.9..3 -.202./.3/4308.2 .39074782090780-:9 203.5 /50.9/03.3-42907:8203074749.390747820/%..8 /./.9 0548.  07.3/ 20/.89.:5:3:..3 50302-.3 .3 897.5.../. 5089.3495. /.3 0/4907.33... .3 2094/0 /0391.3 2094/0/0391.728..349..35738508:8 !.3. 3 0548.$05902-07  3. 54943. 8.:./.3.3 /:3..1 39073.42.   47-. :39: 0- 202.3 .7 0-.907478-07.3.7:  $.8 908  147038 / 3/4308.8:07.59. 80-:. 9:  -42 ..-08.0789.7-..8.7.3 502078.  :89:8    / 0/:9.3/.3  5.  5.3-4290780-:9 7 ./. .7:3 203.3 9:.5  -.8 0802-.8   /.38050797.843.5.3 :5.3 0548.. 9-..7. 203:9: /.3.5 80-.7..  0. /.847-.79. :.3 . .0789..8  .8.2. 425700381 /.5 80-.90/4907.3/507:./ 242039:2 2:. 3 202-:.250 .3202-0705.29: .. 94-07   #03909.3 /902:.2 / 2.7 23.77499 .3 :  /./03./  147038  03039:.3/. 203:3..9 8. /2:.9: 5078.7807. 3/4308.8..8.3.2 80. 547.8.:723../.  /0391.9:  %072.3 /.8:.3 20/8  /.55.5:3 14:8 :9.  !741 7 $.-03. 7  .39.3 .3 . 39073. /.  0. 502078. 502078.3080.3:3 .:.7  /.5 8. /03. %2:75.3 90747820 / %.2. 202-.3 0-24/073 .8$.2 0- 2030.3 .:0. 8079. !.3 :3.202.089. 3 .8. 8075.: 9:-:3..: 0.3 20/8  80744  502078.3. /.7 / 3/4308.3 /.:33..7..3...8:89:-:..3503003..3 82548:2 /...9/03.7   / 490 474-:/:7 .. 202.  147038  .3 2033..3 90344 2./ 8.3 -42 / 490  .90 202-.-47./.3.7.  :.  %44 944 /:3.3 5.74.8/.3 47845 20303.8 /.02-07   8..843.3 2030.3 !:8/408 !:8.  03:7:9 09:.3 203.2 .  8079. -.. :9:  2.147038 .7.0077.:.8  %. 47038.3 147038  80.9203:3.3047-4:.943 . 49..07..32.2.3  /.3 2094/0 9: . 8.  80. 39073..3 /0..  02-../. /./ 49.3  /.3 723.3 503039:  5. //454 /.2. :897./.  %.5.3 80.3 9:-: .

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

9 .7 3  -.9..3545:. . 30..- /80-:9 4/8 9:  .92:9.3/. 9.02-.33.7   093  .9:.7/. /.: /03..:..8...7   :9.9.7.3. .3.3 .39 $8902 4/1.9. .7.2.380.7&9. 80-08. /./458 /.39.3 /02-.3:9$.9 -07.7 545:..:/.39:.5. 47. -07./.7./.3 .3492030..349203.703.5:7. . 8.3 /.8../7. 809.2.380.-08.3 .833.8.7.7.: 2 $02039.8 3/4308..:.2.8 .: 20307.3/3.7. 907/7 /.5  0-.. / 80:7: .3 .3 2:9.8.349 .8 0.80/98:8.:    2 /.574808502-.88.9.3:9 $.8 0309 /.  805079 / $3.8 093  -./.2  .80 9:202.8.80545:.3.3 .3 /.3 9:  545:.7:8/.709.9.7 /.9  02:/. :..3 .73.8.7./.342508  !079.9. 9.2:3:39:3/4308.9: .8 .   30.8 #03/.3.7/039  %3.7.3/4308.. ..3..7.8 /3/4308.809.3 / -07-.3-.0$0.5:7. 88902390.$3..3 /.-..3.3:3.7 093 /.7  .7:8 -0793/.  :9.30.   .7$.3.7   :9../.-07503/:/:809.-079.3 88902 3 90.3. -..7   545:.:39: 20. .  $.390780-. /-.-07:3.  $0.-.7 207..3.25.349  80-03.3.9-08.3 /03./.7 . 909.8. $07.9 0%2:7 80.

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

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful