P. 1
03520054

03520054

|Views: 202|Likes:
Published by Ruspan Pandiangan

More info:

Published by: Ruspan Pandiangan on Oct 27, 2011
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

03/26/2015

pdf

text

original

ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARI DAUN SIRIH (Piper betle L.

)
SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli,
Staphylococcus aureus DAN Candida albicans




SKRIPSI



Oleh:
MIFTACHUL HANIAH
NIM : 03520054



















JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MALANG
MALANG
2008



ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARI DAUN SIRIH (Piper betle L.)
SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli,
Staphylococcus aureus DAN Candida albicans




SKRIPSI


Diajukan kepada:
Universitas Islam Negeri Malang
Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Dalam
Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)



Oleh:
Miftachul Haniah
NIM : 03520054









JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MALANG
MALANG
2008



ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARIDAUN SIRIH (Piper betle L.)
SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli,
Staphylococcus aureus DAN Candida albicans


SKRIPSI


Oleh:
MIFTACHUL HANIAH
NIM : 03520054



Telah disetujui oleh :


Dosen Pembimbing I





Dosen Pembimbing Agama



Dra. Ulfa Utami, M.Si
NIP. 150 291 272

Ahmad Barizi. M.A
NIP. 150 283 991


Tanggal 17 Maret 2008


Mengetahui,
Ketua Jurusan Biologi




Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si
NIP. 150 229 505


ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARI DAUN SIRIH (Piper betle L.)
SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli,

Staphylococcus aureus DAN Candida albicans


SKRIPSI


Oleh:
MIFTACHUL HANIAH
NIM : 03520054



Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi dan
Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu Persyaratan
Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)


Tanggal : 31 Maret 2008

Susunan Dewan Penguji: Tanda Tangan
1. Penguji Utama : Ir. Lilik Harianie ( )
2. Ketua : Dwi Suherianto, M.P ( )
3. Sekretaris : Dra. Ulfah Utami, M.Si. ( )
4. Anggota : Ahmad Barizi, M.A ( )


Mengetahui dan Mengesahkan
Ketua Jurusan Biologi




Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si
NIP. 150 229 505



MOTTO MOTTO MOTTO MOTTO



”Sesungguhnya Allah tiada segan membuat perumpamaan berupa nyamuk atau yang
lebih rendah dari itu. adapun orang-orang yang beriman, Maka mereka yakin bahwa
perumpamaan itu benar dari Tuhan mereka, tetapi mereka yang kafir mengatakan:
"Apakah maksud Allah menjadikan Ini untuk perumpamaan?." dengan perumpamaan
itu banyak orang yang disesatkan Allah, dan dengan perumpamaan itu (pula) banyak
orang yang diberi-Nya petunjuk. dan tidak ada yang disesatkan Allah kecuali orang-
orang yang fasik.”
(Q.s. Al-baqarah: 26).

















‘Seseorang dengan tujuan yang jelas akan membuat kemajuan walaupun
melewati jalan yang sulit. Seseorang yang tanpa tujuan, tidak akan membuat
kemajuan walaupun ia berada di jalan yang mulus’ (Thomas Carlyle)














Sebuah Persembahan
Kepada Orang Tuaku,
Adik Kecilku,
Dan Orang Yang Selalu Ada Untukku





















KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah Swt. atas segala rahmat dan
hidayah yang telah dilimpahkan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan
skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains (S.Si). Penulis
menyadari banyak pihak yang telah berpartisipasi dan membantu dalam menyelesaikan
penulisan skripsi ini. Untuk itu, iringan doa dan ucapan terima kasih yang sebesar-
besarnya penulis sampaikan, terutama kepada:
1. Prof. Dr. H. Imam Suprayogo selaku Rektor Universitas Islam Negeri (UIN)
Malang
2. Prof. Drs. Sutiman Bambang Sumitro,S.U., DSc selaku Dekan Fakultas Sains dan
Teknologi UIN Malang
3. Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M. Si selaku Ketua Jurusan Biologi Fakultas
Sains Dan Teknologi UIN Malang.
4. Dra. Ulfah Utami, M.Si. selaku Dosen Pembimbing I yang telah meluangkan
waktunya untuk memberikan bimbingan kepada penulis dengan tekun dan sabar.
Semoga Allah Swt. melimpahkan Rahmat-Nya kepada beliau dan keluarganya.
5. Ahmad Barizi, M.A. selaku Dosen Pembimbing Integrasi Sains dan Islam yang telah
memberikan masukan dan meluangkan waktu untuk penulis. Semoga Allah Swt.
selalu melimpahkan rahmat-Nya kepada beliau.
6. Segenap Dosen Universitas Islam Negeri Malang yang telah membimbing penulis
selama menempuh studi di Universitas Islam Negeri Malang.

7. Ayah dan Ibunda tersayang yang telah mendidik dan mencurahkan kasih sayang
dengan ketulusan dan keikhlasan yang tidak akan mampu untuk membalasnya.
Semoga berkah dan rahmat Allah Swt. selalu menaungi mereka.
8. Semua pihak yang telah membantu dan memberikan dukungan, yang tidak bisa
penulis sebutkan satu persatu.
Akhirnya penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi
penulis khususnya, dan bagi para pembaca pada umumnya. Semoga Allah senantiasa
melindungi dan melimpahkan rahmat dan ridho-Nya, Amin.

Malang, 11 Maret 2008

Penulis














DAFTAR ISI


Halaman

KATA PENGANTAR ............................................................................. i
DAFTAR ISI ............................................................................................ iii
DAFTAR TABEL .................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ............................................................................... vi
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... vii
ABSTRAK ................................................................................................ viii

BAB I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang ............................................................................... 1
1.2. Rumusan Masalah .......................................................................... 7
1.3. Tujuan Penelitian ........................................................................... 7
1.4. Manfaat Penelitian ......................................................................... 7
1.5. Batasan Masalah ........................................................................... 8

BAB II. KAJIAN PUSTAKA
2.1. Tinjauan Umum Tentang tanaman Sirih (Piper betle L.) ............... 9
2.1.1. Klasifikasi ........................................................................... 9
2.1.2. Morfologi dan Karakteristik ............................................... 9
2.1.3. Manfaat dan Kandungan Kimia .......................................... 10
2.2. Fungi Endofit ................................................................................. 16
2.2.1. Produksi Senyawa Antibiotika Oleh Fungi Endofit ............. 18
2.2.2. Potensi Mikroba Endofit....................................................... 19
2.3. Bahan Antimikrobial .................................................................... 23
2.3.1. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas
Antimikroba..................................................................... 24
2.3.2. Mekanisme Kerja Bahan Antimikroba ............................ 27
2.4. Escherichia coli .............................................................................. 29
2.5. Staphylococcus aureus.................................................................... 32
2.6. Candida albicans............................................................................ 34

BAB III. METODE PENELITIAN
3.1. Rancangan Penelitian ..................................................................... 38
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian ........................................................ 38
3.3. Alat dan Bahan ............................................................................ 38
3.3.1. Alat ....................................................................................... 38
3.3.2. Bahan..................................................................................... 39
3.4. Prosedur Kerja .............................................................................. 39
3.4.1. Sterilisasi Alat dan Bahan ..................................................... 39
3.4.2. Pembuatan Media ................................................................. 39
3.4.3. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih................................... 41

3.4.4. Pemurnian Jamur Endofit...................................................... 41
3.4.5. Identifikasi Isolat Jamur Endofit ........................................... 42
3.4.6. Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba..... 43
a. Produktifitas Metabolit Antimikroba.................................. 43
b. Uji Antimikroba Terhadap Candida albicans ................... 43
c. Uji Antimikroba Terhadap Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus ....................................................... 44

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih ............................................ 45
4.2. Identifikasi Isolat Jamur Endofit .................................................... 48
4.3. Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba............... 56

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan .................................................................................... 63
5.2. Saran .............................................................................................. 63


DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 65
LAMPIRAN ............................................................................................. 68






















DAFTAR TABEL

No. Judul Halaman
Table 4.1. Diskripsi Bentuk dan Warna Koloni Isolat Jamur Endofit .......... 46

Tebel 4.2. Rata-rata diameter zona hambat metabolit jamur endofit ............ 57










































DAFTAR GAMBAR


No. Judul Halaman
Gambar 4.1. Jamur Endofit dari Jaringan Daun Sirih
(Piper battle L.) ........................................................................ 45
Gambar 4.2. Isolat B1................................................................................... 49
Gambar 4.3. Isolat B2................................................................................... 50
Gambar 4.4. Isolat B3................................................................................... 50
Gambar 4.5. Isolat B4................................................................................... 51
Gambar 4.6. Isolat B5................................................................................... 52
Gambar 4.7. Isolat K1................................................................................... 53
Gambar 4.8. Isolat K2................................................................................... 54
Gambar 4.9. Isolat K3................................................................................... 55
Gambar 4.10. Isolat K4.................................................................................. 56
Gambar 4.11. Zona hambat yang dihasilkan oleh
Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Candida albicans
setelah diinkubasi selama 24 jam............................................. 58
























DAFTAR LAMPIRAN


Judul Halaman
Lampiran 1. Diagram Alir Metode Kerja ...................................................... 68
Lampiran 2. Data Hasil Pengukuran Zona Hambat pada Mikroba Uji ......... 69
Lampiran 3. Alat-alat yang Digunakan dalam Penelitian.............................. 70
Lampiran 4. Sampel Tanaman Piper betle L................................................. 71
Lampiran 5. Bukti Konsultasi........................................................................ 72
Lampiran 6. Surat Pernyataan Telah Melakukan Penelitian ......................... 74


































ABSTRAK

Haniah, Miftachul. 2008. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih (Piper betle L.)
Sebagai Antimikroba Terhadap Escherichia coli, Staphylococcus aureus
dan Candida albicans. Pembimbing I: Dra. Ulfah Utami, M.Si. Pembimbing II:
Ahmad Barizi, M.A.

Kata Kunci: Jamur Endofit, Daun Sirih (Piper betle L.), Antimikroba.

Banyak mikroba penyebab penyakit berbahaya, misalnya E. coli, S. aureus dan C.
albicans yang merupakan flora normal tubuh manusia. Untuk itu diperlukan obat
antimikroba yang efektif. Islam juga memberikan perhatian khusus dalam hal kesehatan.
Dalam beberapa riwayat disebutkan: “Berobatlah, karena tiada suatu penyakit yang
diturunkan Allah, kecuali diturunkan pula obat penangkalnya, selain dari satu penyakit,
yaitu ketuaan”. (HR. Abu Daud dan At-Tirmidzi dari sahabat Nabi Usamah bin
Syuraik). Beberapa penelitian menyebutkan bahwa senyawa aktif dari daun sirih
memiliki aktivitas antimikroba. Namun penggunaan tanaman obat dari tanaman
induknya secara terus-menerus dikhawatirkan akan menimbulkan kerusakan ekologis.
Jamur endofit hidup intraseluler di dalam jaringan tanaman yang sehat dan mampu
memproduksi senyawa metabolit sekunder sesuai dengan tanaman inangnya. Jamur
endofit dapat dijadikan solusi dalam penemuan antimikroba baru karena dapat
diproduksi secara berkesinambungan, reproducible dalam skala industri, dengan waktu
yang relatif singkat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menyeleksi jamur
endofit dari daun sirih yang mempunyai potensi sebagai penghasil antimikroba terhadap
bakteri S. aureus, E. coli dan C. albicans.
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium HPT Fakultas Pertanian Universitas
Brawijaya pada bulan Desember 2007 sampai Februari 2008. Metode yang digunakan
adalah metode eksplorasi. Penelitian dilakukan dengan cara mengisolasi jamur endofit
dari daun sirih dan mengidentifikasinya. Sampel daun sirih diperoleh dari Ds.
Banjaranyar Kec. Kras Kab. Kediri dan Kel. Ketawanggede Kec. Lowokwaru Kota
Malang. Produksi metabolit sekunder jamur endofit didapat dengan metode fermentasi
dan diuji aktivitasnya terhadap S. aureus, E. coli dan C. albicans dengan metode difusi
agar (Kirby-Bauer). Kuman uji yang digunakan diperoleh dari Lab. Mikrobiologi
Universitas Brawijaya.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa sebanyak 9 isolat jamur endofit berhasil
diisolasi dari daun Sirih (P. betle L.), yaitu 5 isolat jamur endofit sampel dari Ds.
Banjaranyar dan 4 isolat jamur endofit sampel dari Kel. Ketawanggede. Hasil uji 9
isolat jamur endofit, memperlihatkan bahwa semua isolat dapat menghambat
pertumbuhan bakteri S. aureus dan E. coli dengan zona hambat 31,76 mm pada S.
aureus dan 23,44 mm pada E. coli. Sedangkan pada jamur C. albicans memperlihatkan
zona hambat sebesar 1,96 mm, dua dari isolat jamur endofit tidak bisa menghambat
pertumbuhan jamur C. albicans yaitu, isolat B1 dan isolat K1




BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang
Beberapa tahun terakhir ini, masyarakat di negara kita banyak ditimpa berbagai
penyakit yang disebabkan oleh beberapa hal, salah satu penyebabnya adalah mikroba,
baik itu bakteri maupun jamur. Golongan mikroba tersebut dapat menyebabkan penyakit
yang cukup berbahaya misalnya Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan Candida
albicans yang dapat menyebabkan penyakit infeksi berbahaya pada manusia.
Musibah berbagai penyakit tersebut merupakan cobaan dari Allah Swt. kepada
hamba-Nya. Akan tetapi dengan segala rahmat-Nya Allah menurunkan penyakit
sekaligus obatnya. Hal ini tersirat dalam firman Allah
_¸.´¸ ¸_é ¸,`_: ! .1l> ¸_,>¸¸ _>l- l ¿¸`¸´.. ¸__¸

“Dan segala sesuatu kami ciptakan berpasang-pasangan supaya kamu mengingat
kebesaran Allah”.(adz-Dzariyaat/51:49)

Ayat di atas menjelaskan bahwa segala sesuatu diciptakan oleh Allah Swt.
secara berpasang-pasangan misalnya, Allah menciptakan siang juga menciptakan
malam, begitupun penyakit juga diciptakan obatnya. Dalam berbagai riwayat
ditunjukkan bahwa Nabi Muhammad Saw. pernah berobat untuk dirinya sendiri, serta
pernah menyuruh keluarga dan sahabatnya yang sakit agar berobat.
`,`, .,· = `, ¸,`, .· .¸ ¸,`' `··· .,· `,`,· ¸.· ¸-, ,`·, `·`,,. ,·,_ ,,' ·,,·
¸·,, ¸· ··' ¸, :,,,


“Berobatlah, karena tiada suatu penyakit yang diturunkan Allah, kecuali diturunkan
pula obat penangkalnya, selain dari satu penyakit, yaitu ketuaan”. (HR. Abu Daud dan
At-Tirmidzi dari sahabat Nabi Usamah bin Syuraik) (Shihab, 1996).

Berdasarkan hadist di atas jelaslah bahwa Allah itu maha pengasih lagi maha
penyayang. Sehingga tidak mungkin Allah memberikan penyakit tanpa ada obatnya. Di
sisi lain Allah juga memberikan anugrah berupa akal pikiran kepada manusia untuk
berpikir agar dapat menemukan obat dari berbagai macam penyakit yang diturunkan
oleh Allah Swt.
Indonesia kaya akan tumbuh-tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat berbagai
penyakit, termasuk penyakit infeksi yang disebabkan oleh mikroba. Beberapa penelitian
juga menunjukkan bahwa sebagian besar komponen di dalam tanaman obat bersifat
sebagai antimikroba. Komponen utama tanaman obat yang mempunyai aktivitas
antimikroba adalah bagian minyak atsiri, misalnya minyak atsiri daun sirih yang bersifat
antimikroba.
Penelitian tentang khasiat ekstrak daun sirih (Piper betle L.) sebagai antiseptik
sudah dilakukan Shinta (2000) yang menyatakan bahwa senyawa aktif dari daun sirih
memiliki aktivitas antimikroba terhadap jamur Candida albicans, bakteri Escherichia
coli, Bacillus subtilis dan Pseudomonas aerrighrosa. Pada konsentrasi 1250 gg/ml
senyawa tersebut memberikan diameter daerah hambat sebesar 31 mm untuk C.
albicans, dan 23 mm untuk E. coli serta B. subtilis. Untuk P. aerrighrosa, konsentrasi
optimum ditemukan pada 1000 tig/ml dengan diameter daerah hambat 22 mm.
Pangarungan (2003) juga menyatakan bahwa telah diuji aktivitas antiseptik
ekstrak daun sirih (P. betle L., Piperaceae) terhadap C. albicans, E. coli, dan S. aureus
dengan metode koefisien fenol yang menggunakan natrium hipoklorit sebagai pengganti
fenol. Hasilnya menunjukkan bahwa ekstrak air daun sirih pada konsentrasi 8% b/v

mampu menghambat pertumbuhan C. albicans. Hasil ini dapat dimanfaatkan sebagai
dasar pemanfaatan daun sirih sebagai antimikroba Komponen aktif dalam daun sirih
yang diduga memberikan khasiat antimikroba adalah fenol yang terkandung di dalam
minyak atsiri daun sirih.
Selain sebagai antiseptik daun sirih masih mempunyai banyak manfaat lain
untuk kesehatan, seperti obat batuk, keputihan, obat sariawan, pencuci luka,
menghentikan pendarahan dan sebagainya. Menurut Suriawiria (2006) kandungan kimia
yang terdapat pada daun sirih terdiri dari minyak atsiri, hidroksikavicol, kavicol,
kavibetol, allylprokatekol, karvacrok, eugenol, p-cymene, cineole, caryofelen, kadimen
estragol, terpenena, fenil propada, tanin, dan sebagainya. Karena kelengkapan
kandungan zat atau senyawa kimia bermanfaat inilah, daun sirih memiliki manfaat yang
sangat luas sebagai bahan obat.
Untuk mengambil senyawa bioaktif secara langsung dari tanamannya
dibutuhkan sangat banyak biomassa atau bagian dari tanamannya. Untuk
mengefisienkan cara memperoleh bioaktif tersebut, maka digunakan mikroba endofit
spesifik yang diperoleh dari bagian dalam tanaman yang diharapkan mampu
menghasilkan sejumlah senyawa bioaktif yang dibutuhkan tanpa harus mengekstrak dari
tanamannya.
Mikroba endofit merupakan mikroba yang hidup dalam jaringan tumbuhan tanpa
menimbulkan gejala penyakit pada tumbuhan inangnya. Hubungan antara mikroba
endofit dan tumbuhan inangnya merupakan suatu bentuk hubungan simbiosis
mutualisma, yaitu sebuah bentuk hubungan yang saling menguntungkan. Mikroba
endofit dapat memperoleh nutrisi untuk melengkapi siklus hidupnya dari tumbuhan

inangnya, sebaliknya tumbuhan inang memperoleh proteksi terhadap patogen tumbuhan
dari senyawa yang dihasilkan mikroba endofit (Prihatiningtias, 2006).
Jamur endofit hidup intraseluler di dalam jaringan tanaman yang sehat.
Kemungkinan terjadi rekombinasi genetik dengan inangnya, sehingga beberapa endofit
terbukti menghasilkan senyawa alami yang karakteristik bagi inangnya (Tan and Zou,
2001 dalam Sugijanto dkk., 2004). Hipotesa ini memang kemudian banyak terbukti.
Pada tanaman-tanaman obat yang sudah digunakan masyarakat tradisional secara turun-
temurun ditemukan endofit yang mampu menghasilkan antibiotik kelas tinggi.
Kemampuan mikroba endofit memproduksi senyawa metabolit sekunder sesuai
dengan tanaman inangnya merupakan peluang yang sangat besar dan dapat diandalkan
untuk memproduksi metabolit sekunder dari mikroba endofit yang diisolasi dari
tanaman inangnya tersebut. Dari sekitar 300.000 jenis tanaman yang tersebar di muka
bumi ini, masing-masing tanaman mengandung satu atau lebih mikroba endofit yang
terdiri dari bakteri dan jamur (Radji, 2005). Sugijanto dkk. (2004) menambahkan bahwa
melalui jamur endofit yang diperoleh, dapat diproduksi secara fermentasi senyawa
metabolit yang berkhasiat obat secara berkesinambungan, reproducible dalam skala
industri, dengan waktu yang relatif singkat, tidak merusak tanaman inangnya dan tidak
menimbulkan kerusakan ekologis.
Seluruh alam raya diciptakan untuk digunakan oleh manusia dalam melanjutkan
evolusinya, hingga mencapai tujuan penciptaan. Kehidupan makhluk-makhluk Tuhan
saling berkaitan. Bila terjadi gangguan yang luar biasa terhadap salah satunya, maka
makhluk yang berada dalam lingkungan hidup tersebut ikut terganggu pula (Shihab,
1994). Agama mengundang kita untuk membangun tanpa merusak. Manusia sebagai

khalifah dimuka bumi bertanggung jawab untuk memelihara kelestarian alam. Hal ini
dijelaskan dalam firman Allah yang tersirat dalam Q.s. al-Qashash: 77
¸_.¯,¦´¸ !.,¸· ...¦´, ´<¦ ´¸¦.]¦ :¸¸>¸¦ ¸´¸ _.. ,,,¸.. _¸. !´,.´.l¦ _¸.>¦´¸
!.é ´_.>¦ ´<¦ .,l¸| ¸´¸ ¸_¯,. :!.±l¦ _¸· ¸_¯¸¸¦ ¿¸| ´<¦ ¸ ´¸¸>´ _¸¸.¸.±.l¦ ¸__¸

“ Dan carilah pada apa yang telah dianugerahkan Allah kepadamu (kebahagiaan)
negeri akhirat, dan janganlah kamu melupakan bahagianmu dari (kenikmatan) duniawi
dan berbuat baiklah (kepada orang lain) sebagaimana Allah telah berbuat baik,
kepadamu, dan janganlah kamu berbuat kerusakan di (muka) bumi. Sesungguhnya
Allah tidak menyukai orang-orang yang berbuat kerusakan.”(Q.s. al-Qashash/28: 77)

Berdasarkan uraian di atas, maka peneliti tertarik untuk meneliti keberadaan
mikroba endofit khususnya jamur endofit yang diisolasi dari jaringan daun Sirih (P.
betle L.) yang mempunyai potensi sebagai antimikroba. Untuk mengetahui
efektivitasnya sebagai antimikroba maka jamur endofit tersebut diujikan terhadap
bakteri E. coli, S. aureus dan jamur C. albicans.
Penelitian ini difokuskan pada isolasi jamur endofit, mengingat jamur endofit
berdasarkan studi literatur potensial menghasilkan metabolit (Tan and Zou, 2001 dalam
Sugijanto dkk., 2004). Selain itu juga lebih sederhana kebutuhan medianya dan murah,
pertumbuhannya lebih mudah dikendalikan dari pada bakteri.
Bakteri uji dibagi berdasarkan sifatnya terhadap pewarnaan Gram. E. coli dipilih
mewakili bakteri Gram negatif, bakteri tersebut merupakan flora normal pada saluran
pencernaan manusia akan tetapi menjadi patogen apabila mencapai jaringan diluar
saluran pencernaan. S. aureus dipilih mewakili bakteri Gram positif. Darkuni (1997)
dalam Chasanah (2001) menyatakan bahwa S. aureus merupakan bakteri yang banyak
digunakan dalam pengujian daya antimikroba karena merupakan bakteri yang memiliki

ketahanan lebih tinggi terhadap bahan kimia yang berupa bahan antimikroba
dibandingkan dengan bakteri lainnya.
Jamur uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah C. albicans, jamur
tersebut merupakan flora normal pada traktus gastrointestinal, kulit, dan membran
mukosa. Sebagai flora normal, Candida tidak infeksius. Namun, bila terjadi gangguan
imunitas atau disfungsi imun, baik yang berdiri sendiri maupun yang disebabkan oleh
penyakit lain, infeksi Candida dapat terjadi.


1.2. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas maka dapat dirumuskan masalah sebagai
berikut:
1. Apakah jamur endofit dapat ditemukan dari jaringan daun sirih (Piper betle L.)?
2. Apakah senyawa metabolit skunder yang dihasilkan jamur endofit dari jaringan
daun sirih (Piper betle L.) mempunyai kemampuan sebagai antimikroba terhadap
Candida albicans, Escherichia coli, dan Staphylococcus aureus?

1.3. Tujuan Penelitian
Berdasarkan rumusan masalah di atas maka penelitian ini bertujuan:
1. Untuk mengetahui keberadaan jamur endofit pada jaringan daun sirih (P. betle L.).
2. Untuk mengetahui kemampuan metabolit skunder jamur endofit dari jaringan daun
sirih (P. betle L.) sebagai antimikroba terhadap C. albicans, E. coli, dan S. aureus.



1.4. Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan untuk:
1. Memberikan informasi tentang adanya jamur endofit pada jaringan daun sirih (P.
betle L.).
2. Memperbanyak pengetahuan di bidang mikrobiologi atau bidang lainnya, khususnya
jamur endofit yang mempunyai potensi sebagai penghasil senyawa antimikroba.
3. Senyawa antimikroba yang didapat, diharapkan nantinya dikembangkan lebih lanjut
sehingga bermanfaat untuk menanggulangi penyakit yang disebabkan oleh bakteri
E. coli, bakteri S. aureus dan jamur C. albicans.

1.5. Batasan Masalah
Untuk mendapatkan penelitian yang lebih terarah, maka penelitian ini perlu
dibatasi sebagai berikut:
1. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun sirih (P. betle L.) yang
diperoleh dari Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang dan
Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten Kediri.
2. Jamur endofit yang digunakan dalam penelitian ini diisolasi dari jaringan daun
tanaman sirih (P. betle L.).
3. Jamur C. albicans, bakteri E. coli dan bakteri S. aureus yang digunakan dalam
penelitian ini diperoleh dari laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya.
4. Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah diameter zona hambat dari
berbagai isolat jamur endofit.

5. Pada uji aktivitas antimikroba terhadap mikroba uji, penelitian ini tidak
memperhitungkan kadar kosentrasi dari zat antimokroba tersebut.


BAB II
KAJIAN PUSTAKA

2.1. Tinjauan Umum Tentang Tanaman Sirih (Piper betle L.)
2.1.1. Klasifikasi
Menurut Dasuki (1991) kedudukan tanaman sirih dalam sistematika tumbuhan
(taksonomi) diklasifikasikan sebagai berikut:
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub-kelas : Magnoliidae
Ordo : Piperales
Famili : Piperaceae
Genus : Piper
Species : Piper betle L.

2.1.2. Morfologi dan Karakteristik
Sirih (Piper betle L.) adalah jenis tanaman merambat yang diakui banyak
kegunaannya di hampir semua tempat di Indonesia dan memiliki nama yang beragam.
Misalnya ranub (Aceh), belo (Batak Karo), demban (Batak Toba), lahina atau tawuo
(Nias), sireh, sirih (Palembang), suruh, sirih (Minang), canbai (Lampung), seureuh
(Sunda). Namun, nama yang paling umum adalah sirih (Suriawiria, 2006).
Daun sirih mempunyai bau yang khas aromatik, rasanya agak pedas. Daunnya
berupa helaian-helaian berbentuk bulat telur, adapula yang bulat telur memanjang,
berujung runcing, pangkal daun berbentuk jantung yang kadang-kadang tidak

setangkup. Permukaan daun berwarna hijau tua, hijau muda agak kekuning-kuningan.
Panjangnya sekitar 5 - 18 cm dan lebar 2 - 20 cm (Kartasapoetra, 1992).
Tanaman sirih bisa mencapai tinggi 15 m. Batang sirih berwarna coklat
kehijauan, berbentuk bulat, beruas dan merupakan tempat keluarnya akar. Bunganya
majemuk berbentuk bulir dan terdapat daun pelindung ± 1 mm berbentuk bulat panjang.
Pada bulir jantan panjangnya sekitar 1,5 - 3 cm dan terdapat dua benang sari yang
pendek, sedang pada bulir betina panjangnya sekitar 1,5 - 6 cm dimana terdapat kepala
putik tiga sampai lima buah berwarna putih dan hijau kekuningan. Buahnya buah buni
berbentuk bulat berwarna hijau keabu-abuan. Akarnya tunggang, bulat dan berwarna
coklat kekuningan(Suriawiria, 2006).

2.1.3. Manfaat dan Kandungan Kimia
Allah menciptakan segala yang ada di langit dan di bumi dengan
beranekaragam, baik jenisnya maupun manfaatnya. Allah Swt. berfirman dalam Q.s. an-
Nahl: 11
¸¸,.`, _> l ¸«¸, _¯¸¸l¦ _¡.,¸l¦´¸ _,¸>.l¦´¸ ¸.´.s¸¦´¸ _¸.´¸ ¸_é ¸,¸.:l¦ ¿¸| _¸·
.¸l : «,¸ ¸,¯¡1¸l _¸`¸÷± ., ¸¸¸¸
“ Dia menumbuhkan bagi kamu dengan air hujan itu tanam-tanaman; zaitun, korma,
anggur dan segala macam buah-buahan. Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-
benar ada tanda (kekuasaan Allah) bagi kaum yang memikirkan.” (Q.s. An-nahl/16: 11)

Ayat di atas menjelaskan bahwa tumbuhan itu terdiri dari berbagai macam jenis.
Setiap jenis mempunyai manfaat tersendiri berdasarkan kandungan zat aktif yang
terdapat di dalamnya. Seperti tamanam sirih yang mengandung zat antiseptik yang bisa
dimanfaatkan sebagai antibiotik. Manfaat-manfaat tersebut hanya bisa diketahui oleh

orang-orang yang mau memikirkan dan mengkaji secara mendalam tentang
kandungannya. Sehingga bisa mempertebal keyakinan akan kebesaran Allah Swt. dan
menambah wawasan akan manfaat keanekaragaman tumbuhan untuk kemaslahatan
umat manusia.
Manfaat daun sirih untuk pengobatan jumlahnya sangat banyak, mulai sebagai
obat batuk, bronchitis, gangguan lambung, rematik, menghilangkan bau badan,
keputihan, dan sebagainya. Rebusan daun sirih juga sangat bermanfaat untuk obat
sariawan, pelancar dahak, pencuci luka, obat gatal-gatal, obat sakit perut yang melilit,
obat jantung, menghentikan pendarahan (Suriawiria, 2006).
Khasiat daun sirih sudah banyak dikenal dan telah teruji secara klinis. Hingga
kini, penelitian tentang tanaman ini masih terus dikembangkan. Daun sirih telah
berabad-abad dikenal oleh nenek moyang kita sebagai tanaman obat berkhasiat.
Tanaman ini mengandung zat antiseptik yang mampu membunuh kuman. Kandungan
fenol dalam sifat antiseptiknya lima kali lebih efektif dibandingkan dengan fenol biasa
(Triarsari, 2007).
Zat antiseptik di dalam sirih dapat digunakan sebagai obat kumur dan menjaga
kesehatan alat kelamin wanita. Sirih juga umum digunakan untuk mengatasi bau badan
dan mulut, sariawan, mimisan, gatal-gatal dan koreng, serta mengobati keputihan pada
wanita. Daun sirih juga dapat memperbanyak keluarnya air susu ibu (ASI) untuk ibu
yang baru melahirkan dengan banyak meminum air rebusan daun sirih (Anonymous,
2007).
Nurswida (2002) membuktikan bahwa dekok sirih pada konsentrasi 7,5 % dapat
menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans. Efek hambat dekok sirih terhadap
pertumbuhan C. albicans disebabkan komponen derivat fenol, seperti eugenol,

iseugenol, allypyrocathechol, chavichol, safrole, anethole, cavibetol, carvacrol,
betlefenol. Fenol adalah denaturan protein yang poten. Mekanisme kerja phenolic
melalui perusakan membran plasma, inaktivasi enzim dan denaturasi protein. Disini
fenol Bl berkaitan dengan membran yang ergosterol akan merusak membran tersebut
sehingga jamur akan mati.
Dalam daun sirih 100 gram terdapat kandungan: air 85,4 mg; protein 3,1 mg;
karbohidrat 6,1 mg; serat 2,3 mg; yodium 3,4 mg; mineral 2,3 mg; kalsium 230 mg;
fosfor 40 mg; besi ion 3,5 mg; karoten (vitamin A) 9600 iu, kalium nitrat 0,26–0,42 mg;
tiamin 70 mg; riboflavin 30 mg; asam nikotinal 0,7 mg; vitamin C 5 mg; kanji 1,0–
1,2%; gula non reduksi 0,6–2,5%; gula reduksi 1,4–3,2%. Sedangkan minyak atsirinya
terdiri dari: alilkatekol 2,7–4,6%; kadinen 6,7–9,1%; karvakol 2,2–4,8%; kariofilen 6,2–
11,9%; kavibetol 0,0–1,2%; kavikol 5,1–8,2%; sineol 3,6–6,2%; eugenol 26,8– 42,5%;
eugenol metil eter 26,8–15,58%; pirokatekin (Agustin, 2005). Sedangkan menurut
Kartasapoetra (1992) komponen di dalam daun sirih meliputi minyak atsiri sampai
4,2% yang di dalamnya terdapat fenol yang khas disebut betelfenol, khavikol, diastase,
zat penyamak, gula dan pati.
Minyak atsiri merupakan senyawa terpenoid. Secara kimia, terpenoid umumnya
larut dalam lemak dan terdapat di dalam sitoplasma sel tumbuhan. Kadang-kadang
minyak atsiri terdapat di dalam sel kelenjar khusus pada permukaan daun (Harborne,
1987). Sifat fisik terpenting minyak atsiri adalah sangat mudah menguap pada suhu
kamar dan larut dalam lemak. Famili tumbuhan Lauraceae, Myrtaceae, Rutaceae,
Myristicaceae, Astereaceae, Apocynaceae, Umbeliferae, Pinaceae, Rosaceae dan
Labiatae adalah famili tumbuhan yang sangat populer sebagai penghasil minyak atsiri
(Agusta, 2000).

Fungsi minyak atsiri yang paling luas dan paling umum diminati adalah sebagai
pengharum, baik itu sebagai parfum untuk tubuh, kosmetik, pengharum ruangan,
pengharum sabun, pasta gigi, pemberi citra rasa pada makanan maupun produk rumah
tangga lainnya (Agusta, 2000).
Kebanyakan minyak atsiri bersifat sebagai antibakteri dan antijamur yang kuat.
Minyak atsiri daun sirih (P. betle L.) merupakan salah satu minyak atsiri yang bersifat
antibakteri. Minyak ini dapat menghambat pertumbuhan beberapa jenis bakteri
merugikan seperti Escherichia coli, Salmonella sp, Staphylococcus aureus, Klebsiella
dan Pasteurella (Agusta, 2000).
Setiap tanaman memiliki senyawa aktif yang berbeda satu sama lain. Ada
beberapa faktor yang mempengaruhi sifat/kadar bahan aktif pada tumbuhan. Menurut
Kartasapoetra (1989) faktor yang mempengaruhi sifat/kadar bahan aktif pada tumbuhan
antara lain adalah sebagai berikut:
a. Faktor Genetik
Faktor ini menyesuaikan sifat hasil tanaman yang mana sifat ini merupakan sifat
bawaan dari induk tanamannya, seperti rasa, bau, komposisi kimiawi, nilai gizi dan
termasuk kemampuan produksinya. Tanaman jenis unggul dapat memberikan produk
lebih baik dan banyak dari jenis tanaman tidak unggul.
b. Faktor Lingkungan
Faktor lingkungan merupakan faktor luar dari tanaman yang juga banyak
berpengaruh terhadap sifat/kadar bahan aktif pada tumbuhan. Faktor lingkungan/faktor
luar ini dapat dikatakan pula faktor lingkungan hidup seperti:



• Sinar Matahari
Sinar matahari banyak berpengaruh pada pembentukan zat makanan dalam
jaringan tanaman, melalui fotosintesis misalnya pembentukan zat makanan dalam
jaringan tanaman itu akan sangat terbantu. Hasil penelitian menyatakan bahwa banyak
atau sedikitnya sinar matahari yang diterima tanaman akan mempengaruhi pembentukan
zat-zat makanan dalam jaringan dan sifat hasil tanamannya. Sebagai contoh misalnya
pada buah yang tanamannya banyak menerima sinar matahari kandungan vitamin C-nya
akan lebih tinggi dibanding dengan buah yang tanamannya kurang memperoleh sinar
matahari.
• Temperatur
Bagi tanaman, temperatur lingkungan yang optimum merupakan faktor yang
penting karena berpengaruh terhadap produksi hasil-hasil tanamannya (pembentukan
zat-zat makanan dalam jaringan). Hasil tanaman yang tumbuh baik pada kondisi
temperatur yang cocok akan sangat berbeda dengan hasil tanaman yang tumbuh pada
temperatur yang tidak cocok.
• Musim
Musim juga sangat berpengaruh terhadap produksi hasil-hasil tanamannya
(pembentukan zat-zat makanan dalam jaringan). Hasil tanaman yang tanamannya biasa
tumbuh pada musim kering yang panas akan mengandung zat makanan lebih tinggi.
• Tempat/Daerah Pertumbuhan
Tempat/daerah pertumbuhan merupakan faktor geografis yang kaitannya sangat
erat dengan macam atau sifat tanahnya. Mutu hasil tanaman yang tanamannya tumbuh
di tempat/daerah yang mempunyai ketinggian tertentu yang tanahnya merupakan tanah

lempung akan berbeda dengan mutu hasil tanaman sejenis yang tumbuh pada ketinggian
yang sama yang tanahnya merupakan tanah berkapur.
• Zat Makanan
Zat makanan atau pupuk juga merupakan faktor yang dapat meningkatkan hasil
tanaman. Pemupukan dengan dosis yang memadai dimaksudkan agar zat makanan
cukup tersedia bagi pertumbuhan tanaman. Tanaman yang tumbuh pada lahan yang
kurang kandungan zat makanan maka menyebabkan tanaman tersebut akan tumbuh
kerdil, sedangkan keadaan tersebut akan mengurangi sifat dan mutu hasil tanaman.

c. Faktor Tingkat Kemasakan
Perbedaan tingkat kemasakan sangat berpengaruh pada zat-zat penyusun yang
terkandung, tekstur dan warna hasil tanaman. Hasil penelitian menyatakan bahwa
dengan makin masaknya hasil tanaman, maka kandungan zat tepung, zat gulanya makin
meningkat pula, sedangkan kandungan vitamin C pada umumnya menurun kecuali pada
buah/hasil tanaman seperti tomat, mangga, asparagus, anggur, apel dan sebagainya.

2.2. Fungi Endofit
Segala sesuatu yang ada di muka bumi diciptakan bukan tanpa tujuan. Akan
tetapi tidak semua tujuan tersebut diketahui oleh manusia sehingga harus dipelajari
terlebih dahulu. Allah Swt. berfirman dalam Q.s. al-Baqarah: 26
¤ ¿¸| ´<¦ ¸ .¸_> .`., ¿¦ ´,¸¸.¸ ¸ : . !. «.¡`- , !.· !¸·¯¡·
“Sesungguhnya Allah tiada segan membuat perumpamaan berupa nyamuk atau yang
lebih rendah dari itu……..”(Q.s. al-Baqarah/2: 26).


Pada ayat di atas terdapat lafadz fama fauqohaa yang diartikan sebagai hewan
yang lebih kecil dari nyamuk. Dapat diasumsikan bahwa hewan yang lebih kecil dari
nyamuk tersebut termasuk mikroba. Walaupun keberadaanya tidak bisa dilihat secara
kasat mata, mikroba tertentu ada yang bermanfaat bagi kehidupan manusia, salah
satunya adalah mikroba endofit yang dapat menghasilkan zat antibiotik yang dapat
dimanfaatkan sebagai obat.
Fungi endofit adalah fungi yang terdapat di dalam sistem jaringan tumbuhan,
seperti daun, bunga, ranting ataupun akar tumbuhan. Fungi ini menginfeksi tumbuhan
sehat pada jaringan tertentu dan mampu menghasilkan mikotoksin, enzim serta
antibiotika (Carrol, 1988 ; Clay, 1988 dalam Worang, 2003). Tan et al., (2001) dalam
Radji (2005) menambahkan bahwa setiap tanaman tingkat tinggi dapat mengandung
beberapa mikroba endofit yang mampu menghasilkan senyawa biologi atau metabolit
sekunder yang diduga sebagai akibat koevolusi atau trasfer genetik (genetic
recombination) dari tanaman inangnya ke dalam mikroba endofit.
Asosiasi fungi endofit dengan tumbuhan inangnya, oleh Carrol (1988) dalam
Worang (2003) digolongkan dalam dua kelompok, yaitu mutualisme konstitutif dan
induktif. Mutualisme konstitutif merupakan asosiasi yang erat antara fungi dengan
tumbuhan terutama rumput-rumputan. Pada kelompok ini fungi endofit menginfeksi
ovula (benih) inang, dan penyebarannya melalui benih serta organ penyerbukan inang.
Mutualisme induktif adalah asosiasi antara fungi dengan tumbuhan inang, yang
penyebarannya terjadi secara bebas melalui air dan udara. Jenis ini hanya menginfeksi
bagian vegetatif inang dan seringkali berada dalam keadaan metabolisme inaktif pada
periode yang cukup lama.

Ditinjau dari sisi taksonomi dan ekologi, fungi ini merupakan organisme yang
sangat heterogen. Petrini et al. (1992) dalam Worang (2003) menggolongkan fungi
endofit dalam kelompok Ascomycotina dan Deuteromycotina. Keragaman pada jasad
ini cukup besar seperti pada Loculoascomycetes, Discomycetes, dan Pyrenomycetes.
Strobell et al. (1996) dalam Worang (2003), mengemukakan bahwa fungi endofit
meliputi genus Pestalotia, Pestalotiopsis, Monochaetia, dan lain-lain.
Clay (1988) dalam Worang (2003) melaporkan, bahwa fungi endofit
dimasukkan dalam famili Balansiae yang terdiri dari 5 genus yaitu Atkinsonella,
Balansiae, Balansiopsis, Epichloe dan Myriogenospora. Genus Balansiae umumnya
dapat menginfeksi tumbuhan tahunan dan hidup secara simbiosis mutualistik dengan
tumbuhan inangnya. Dalam simbiosis ini, fungi dapat membantu proses penyerapan
unsur hara yang dibutuhkan oleh tumbuhan untuk proses fotosintesis serta melindungi
tumbuhan inang dari serangan penyakit, dan hasil dari fotosintesis dapat digunakan oleh
fungi untuk mempertahankan kelangsungan hidupnya. (Bacon, 1991; Petrini et al.,
1992; Rao, 1994 dalam Worang, 2003).

2.2.1. Produksi Senyawa Antibiotika oleh Fungi Endofit
Banyak kelompok fungi endofit yang mampu memproduksi senyawa antibiotika
yang aktif melawan bakteri maupun fungi patogenik terhadap manusia, hewan dan
tumbuhan, terutama dari genus Coniothirum dan Microsphaeropsis (Petrini et al., 1992
dalam Worang, 2003). Penelitian Dreyfuss et al. (1986) dalam Worang (2003),
menunjukkan aktivitas yang tinggi dari penisilin N, sporiofungin A, B, serta C yang
dihasilkan oleh isolat-isolat endofit Pleurophomopsis sp. dan Cryptosporiopsis sp. yang
diisolasi dari tumbuhan Cardamin heptaphylla Schulz.

Penelitian Brunner dan Petrini (1992) yang melakukan seleksi pada lebih dari
80 spora fungi endofit, hasilnya menunjukkan bahwa 75 % fungi endofit mampu
menghasilkan antibiotika. Fungi endofit Xylotropik, suatu kelompok fungi yang
berasosiasi dengan tumbuhan berkayu, juga merupakan penghasil metabolit sekunder.
Pada suatu studi perbandingan yang dilakukan terhadap berbagai fungi, lebih dari 49 %
isolat Xylotropik yang diuji menunjukkan aktivitas antibiotika, sedangkan fungi
pembandingnya hanya 28 % (Petrini et al., 1992 dalam Worang 2003).
Fungi endofit juga mampu menghasilkan siklosporin A, yang berpotensi sebagai
antifungal dan bahan imunosupresif (Borel et al., 1976; Petrini et al., 1992 dalam
Worang, 2003). Siklosporin dihasilkan oleh strain Acremonium luzulae (Fuckel) W.
Gams, yang diisolasi dari buah strawberry (Moussaif et al., 1977 dalam Worang, 2003).
Senyawa antibiotika lainnya seperti sefalosporin mulanya dihasilkan oleh satu strain
Cephalosporium dan Emericellopsis (Acremonium). Selanjutnya juga ditemukan pada
fungi Anixiopsis, Arachnomyces,Diheterospora, Paecilomyces, Scopulariopsis dan
Spiroidium (Morin, 1982 dalam Worang, 2003).

2.2.2. Potensi Mikroba Endofit
Mikroba endofit terdiri atas bakteri, fungi/jamur, dan aktinomisetes, namun yang
paling banyak ditemukan adalah golongan fungi dan aktinomisetes. Mikroba endofit ini
mendapat perhatian besar karena dapat menghasilkan senyawa bioaktif yang berpotensi
sebagai antibiotik disebabkan oleh aktivitasnya yang besar dalam membunuh mikroba-
mikroba patogen. Disamping mampu menghasilkan senyawa-senyawa antimikroba,
mikroba endofit juga mampu menghasilkan senyawa-senyawa yang berpotensi sebagai
antikanker, antimalaria, anti HIV, antioksidan dan sebagainya (Prihatiningtias, 2006).

Mikroba endofit yang diisolasi dari tumbuhan obat akan memiliki aktivitas yang
lebih besar, bahkan dapat memiliki aktivitas yang lebih besar dibandingkan aktivitas
tumbuhan inangnya. Dilihat dari segi efisiensi, hal ini sangat menguntungkan, karena
siklus hidup mikroba endofit lebih singkat dibandingkan siklus hidup tumbuhan
inangnya, sehingga dapat menghemat waktu yang dibutuhkan untuk mendapatkan
senyawa tersebut, dan jumlah senyawa yang diproduksi dapat dibuat dalam skala yang
besar dengan menggunakan proses fermentasi. Di samping hal-hal yang sudah
disebutkan di atas, ada keuntungan lain yang diperoleh, yaitu menjaga kelestarian
tumbuhan-tumbuhan obat, terutama yang termasuk jenis tumbuhan langka, agar tidak
dieksploitasi secara terus menerus yang akhirnya akan mengakibatkan kepunahan
(Prihatiningtias, 2006).
Radji (2005) menyebutkan bahwa berbagai jenis endofit telah berhasil diisolasi
dari tanaman inangnya, dan telah berhasil dibiakkan dalam media perbenihan yang
sesuai. Demikian pula metabolit sekunder yang diproduksi oleh mikroba endofit
tersebut telah berhasil diisolasi dan dimurnikan serta telah dielusidasi struktur
molekulnya. Beberapa diantaranya adalah :
1. Mikroba endofit yang menghasilkan antibiotika Cryptocandin adalah anti-fungi
yang dihasilkan oleh mikroba endofit Cryptosporiopsis quercina yang berhasil
diisolasi dari tanaman obat Tripterigeum wilfordii, dan berhasiat sebagai
antijamur yang patogen terhadap manusia yaitu Candida albicans dan
Trichopyton spp. (Strobel et al., 1999 dalam Radji, 2005).
2. Jenis endofit lainnya yang juga menghasilkan antibiotika berspektrum luas
adalah mikroba endofit yang diisolasi dari tanaman Grevillea pteridifolia.
Endofit ini menghasilkan metabolit kakadumycin. Aktifitas antibakterinya sama

seperti munumbicin D, dan kakadumycin ini juga berkhasiat sebagai anti malaria
(Castillo et al., 2003 dalam Radji, 2005).
3. Mikroba endofit yang memproduksi antivirus Jamur endofit Cytonaema sp.
dapat menghasilkan metabolit cytonic acid A dan B, yang struktur malekulnya
merupakan isomer p-tridepside, berhasiat sebagai anti virus. Cytonic acid A dan
B ini merupakan protease inhibitor dan dapat menghambat pertumbuhan
cytomegalovirus manusia. (Guo et al., 2000 dalam Radji, 2005).
4. Mikroba endofit yang menghasilkan metabolit sebagai antikanker Paclitaxel dan
derivatnya merupakan zat yang berkhasiat sebagai antikanker yang pertama kali
ditemukan yang diproduksi oleh mikroba endofit. Paclitaxel merupakan
senyawa diterpenoid yang didapatkan dalam tanaman Taxus. Senyawa yang
dapat mempengaruhi molekul tubulin dalam proses pembelahan sel-sel kanker
ini, umumnya diproduksi oleh endofit Pestalotiopsis microspora, yang diisolasi
dari tanaman Taxus andreanae, T. brevifolia, dan T. wallichiana. Saat ini
beberapa jenis endofit lainnya telah dapat diisolasi dari berbagai jenis Taxus dan
didapatkan berbagai senyawa yang berhasiat sebagai anti tumor. Demikian pula
upaya untuk sintesisnya telah berhasil dilakukan (Strobel et al., 2002 dalam
Radji, 2005).
5. Mikroba endofit penghasil zat anti malaria Colletotrichumsp. merupakan endofit
yang diisolasi dari tanaman Artemisia annua, menghasilkan metabolit
artemisinin yang sangat potensial sebagai anti malaria (Lu H. et al., 2000 dalam
Radji, 2005). Di samping itu beberapa mikroba endofit yang diisolasi dari
tanaman Cinchona spp, juga mampu menghasilkan alkaloid cinchona yang dapat

dikembangkan sebagai sumber bahan baku obat anti malaria (Simanjuntak et al.,
2002 dalam Radji, 2005).
6. Endofit yang memproduksi antioksidan Pestacin dan isopestacin merupakan
metabolit sekunder yang dihasilkan oleh endofit P. microspora. Endofit ini
berhasil diisolasi dari tanaman Terminalia morobensis, yang tumbuh di Papua
New Guinea. Baik pestacin ataupun isopestacin berhasiat sebagai antioksidan,
dimana aktivitas ini diduga karena struktur molekulnya mirip dengan flavonoid
(Strobel et al., 2002 dalam Radji, 2005).
7. Endofit yang menghasilkan metabolit yang berkhasiat sebagai antidiabetes
Endofit Pseudomassaria sp yang diisolasi dari hutan lindung, menghasilkan
metabolit sekunder yang bekerja seperti insulin. Senyawa ini sangat menjanjikan
karena tidak sebagaimana insulin, senyawa ini tidak rusak jika diberikan peroral.
Dalam uji praklinik terhadap binatang coba membuktikan bahwa aktivitasnya
sangat baik dalam menurunkan glukosa darah tikus yang diabetes. Hasil tersebut
diperkirakan dapat menjadi awal dari era terapi baru untuk mengatasi diabetes di
masa mendatang (Zhang et al.,1999 dalam Radji, 2005).
2.3. Bahan Antimikrobial
Bahan antimikroba adalah suatu bahan yang dapat menganggu pertumbuhan dan
metabolisme mikroba. Dalam penggunaan umum, istilah ini menyatakan penghambatan
pertumbuhan,dan bila dimaksudkan untuk kelompok-kelompok organisme yang khusus,
maka seringkali digunakan istilah-istilah seperti antibakterial atau antifungal (Pelczar,
1988).
Menurut Brooks dkk. (1996) zat antimikroba yang berasal dari mikroorganisme
dinamakan antiboitika. Gan (1987) menambahkan bahwa antibiotika adalah zat yang

dihasilkan oleh suatu mikroba, terutama fungi, dan bersifat dapat membasmi mikroba
jenis lain.
Dijelaskan lebih lanjut oleh Pelczar (1988) tujuan utama pengendalian mikroba
adalah:
a. Mencegah penyebaran penyakit dan infeksi.
b. Membasmi mikroorganisme pada inang yang terinfeksi.
c. Mencegah pembusukan dan perusakan oleh mikroba.
Suatu zat antimikroba yang ideal memiliki toksisitas selektif. Artinya bahwa
suatu obat berbahaya bagi parasit tetapi tidak membahayakan inang (Brooks dkk.,
1996). Pelczar (1988) mengemukakan beberapa hal pokok yang harus dipenuhi oleh
suatu bahan antimikroba yaitu:
a. Harus mempunyai kemampuan untuk merusak atau menghambat
mikroorganisme patogen spesifik.
b. Tidak mengakibatkan resisten pada mikroba patogen.
c. Berspektrum luas.
d. Mudah larut dalam air dan stabil.
e. Tidak melenyapkan flora mikroba normal dalam tubuh inang.
f. Tidak menimbulkan efek samping pada inang dalam jangka waktu yang lama.
g. Tetap aktif dalam plasma darah.
h. Konsentrasi antimikroba dalam jaringan atau darah harus dapat mencapai taraf
cukup tinggi sehingga mampu menghambat atau mematikan.
Siswandono (1995) menambahkan bahwa antibiotika dapat dikelompokkan
berdasarkan spektrum aktifitasnya:

a. Antibiotika dengan spektrum luas, efektif baik terhadap bakteri Gram positif
maupun bakteri Gram negatif.
b. Antibiotika yang aktifitasnya lebih dominan terhadap bakteri Gram positif.
c. Antibiotika yang aktifitasnya lebih dominan terhadap bakteri Gram negatif.
d. Antibiotika yang aktifitasnya lebih dominan terhadap Mycobacteriae.
e. Antibiotika yang aktif terhadap jamur/antijamur.
f. Antibiotika yang aktif terhadap neoplasma (antikanker)

2.3.1. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Antimikroba
Banyak faktor dan keadaan yang dapat mempengaruhi kerja bahan atau zat
mikroba. Faktor-faktor yang mempengaruhi kerja zat antimikroba harus diperhatikan
guna keefektifan penggunaan zat antimikroba tersebut. Ada beberapa faktor yang dapat
mempengaruhi kerja zat antimikroba, diantaranya adalah: umur bakteri, konsentrasi zat
antimikroba, suhu, kandungan bahan antimikroba, dan sebagainya.
Menurut Ristiati (2000) bahwa kecapatan populasi mikroba mengalami kematian
erat hubungannya dengan umur mikroba. Pada umumnya mikroba yang lebih muda
daya tahannya lebih rendah dibandingkan dengan bakteri yang lebih tua (fase stasioner).
Kemampuan suatu bahan dalam menghambat atau membentuk mikroba tergantung pada
tinggi rendahnya konsentrasi dan bahan antimikroba. Pada umumnya, kecepatan
kematian mikroba berhubungan secara langsung dengan konsentrasi antimikroba. Ini
berarti semakin tinggi konsentrasi antimikroba yang digunakan, semakin cepat mikroba
terbunuh. Sedangkan menurut Darkuni (1997) dalam Chasanah (2001) menyatakan
bahwa keefektifan suatu bahan antimikroba untuk menghambat atau membunuh

mikroorganisme ditentukan dari rendahnya konsentrasi bahan yang digunakan, tetapi
mempunyai daya hambat atau daya bunuh besar.
Beberapa hal yang dapat mempengaruhi kerja zat antimikroba menurut Pelczar
(1988) adalah sebagai berikut:
a. Konsentrasi atau intensitas zat antimikroba
Semakin tinggi konsentrasi suatu zat antimikroba semakin tinggi zat
antimikrobanya, artinya banyak bakteri akan terbunuh lebih cepat bila
konsentrasi zat tersebut lebih tinggi.
b. Jumlah mikroorganisme
Semakin banyak jumlah organisme yang ada makin banyak pula waktu yang
diperlukan untuk membunuhnya.
c. Suhu
Kenaikan suhu yang besar dapat menaikkan keefektifan suatu desinfektan atau
bahan mikrobial lain. Hal ini disebabkan karena zat kimia merusak
mikroorganisme melalui reaksi kimia. Dan reaksi kimia dipercepat dengan
meningkatkan suhu.
d. Spesies mikroorganisme
Spesies mikroorganisme menunjukkan ketahanan yang berbeda-beda terhadap
suatu bahan kimia tertentu.
e. Adanya bahan organik
Adanya bahan organik asing dapat menurunkan keefektifan zat kimia
antimikrobial dengan cara menginaktifkan bahan kimia tersebut. Adanya bahan
organik dalam campuran zat antimikrobial dapat mengakibatkan

1) Penggabungan zat antimikrobial dengan bahan organik membentuk
produk yang tidak bersifat antimikrobial.
2) Penggabungan zat antimikrobial dengan bahan organik menghasilkan
suatu endapan sehingga antimikrobial tidak mungkin lagi mengikat
mikroorganisme
3) Akumulasi bahan organik pada permukaan sel mikroba menjadi suatu
pelindung yang akan mengganggu kontak antara zat antimikrobial
sengan sel.
f. Keasaman atau kebasaan (pH)
Mikroorganisme yang hidup pada pH asam dapat dibasmi pada suhu yang lebih
rendah dan dalam waktu yang lebih singkat bila dibandingkan dengan
mikroorganisme yang sama di dalam lingkungan yang basa.
Kenaikan suhu dapat meningkatkan keefektifan suatu disinfektan atau bahan
antimikroba. Hal ini disebabkan dengan meningkatnya suhu akan dapat mempercepat
laju reaksi kimia, sehingga akan semakin cepat pula zat tersebut untuk merusak
mikroba. Sedangkan adanya kandungan bahan organik akan dapat menghambat atau
menurunkan keefektifan zat antimikroba, yang mengakibatkan kemampuan bahan
antimikroba menjadi lemah. Disamping itu, pH dan spesies mikroba juga berpengaruh
terhadap keefektifan kerja zat antimikroba.

2.3.2. Mekanisme Kerja Bahan Antimikroba
Brooks dkk. (1996) menyatakan bahwa pada dasarnya mekanisme kerja zat
antimikroba adalah penghambatan sintesis dinding sel, fungsi selaput sel, sintesis
protein dan sintesis asam nukleat.

Menurut Pelczar (1988) cara kerja zat antimikroba dalam melakukan efeknya
terhadap mikroorganisme adalah sebagai berikut :
a. Merusak dinding sel
Pada umumnya bekteri memiliki suatu lapisan luar yang kaku disebut dinding sel.
Dinding sel ini berfungsi untuk mempertahankan bentuk dan menahan sel, dinding
sel bakteri tersusun atas lapisan peptidoglikan yang merupakan polimer komplek
yang terdiri atas rangkaian asam N-asetil glukosamin dan asam N-asetilmuramat
yang tersusun secara bergantian. Keberadaan lapisan peptidoglikan ini menyebabkan
dinding sel bersifat kaku dan kuat sehingga mampu menahan tekanan osmotik
dalam sel yang kaku. Struktur dinding sel dapat dirusak dengan cara menghambat
pembentukannya atau dengan mengubahnya setalah selesai dibentuk. Pada
konsentrasi rendah, bahan antimikroba yang ampuh akan menghambat pembentukan
ikatan glikosida sehingga pembentukan dinding sel baru tergangu. Selanjutnya
dijelaskan bahwa pada konsentrasi tinggi bahan antimikroba akan memyebabkan
ikatan glikosida menjadi terganggu dan pembentukan dinding sel terhenti.
b. Merubah molekul protein dan asam nukleat
Kelangsungan hidup sel sangat tergantung pada molekul-molekul protein dan asam
nukleat. Hal ini berati bahwa gangguan apapun yang terjadi pada pembentukan atau
fungsi zat-zat tersebut dapat mengakibatkan kerusakan total pada sel. Bahan
antimikroba yang dapat mendenaturasi protein dan asam nukleat dapat merusak sel
tanpa dapat diperbaiki lebih lanjut.
c. Merubah permeabilitas sel
Sitoplasma dibatasi oleh selaput yang disebut membran sel yang mempunyai
permeabilitas selektif, membran ini tersusun atas fosfolipid dan protein. Membran

sitoplasma berfungsi mengatur keluar masuknya bahan-bahan tertentu dalam sel.
Proses pengangkutan zat-zat yang lebih diperlukan baik kedalam maupun keluar sel
kemungkinan karena didalam membran sel terdapat protein pembawa (carrier), di
dalam membran sitoplasma juga terdapat enzim protein untuk mensintesis
peptidoglikan komponen membran luar. Apabila fungsi membran sel terganggu oleh
adanya bahan antimikroba, maka permeabilitas sel bakteri akan mengalami
perubahan, sehingga akan mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau
kematian sel .
d. Menghambat kerja enzim
Di dalam sel terdapat enzim protein yang membantu kelangsungan proses-proses
metabolisme, banyak zat kimia telah diketahui dapat mengganggu reaksi biokimia
misalnya logam berat, golongan tembaga, perak, air raksa dan senyawa logam berat
lain, umumnya efektif sebagai bahan antimikroba pada konsentrasi relatif rendah.
Dengan demikian kerja enzim yang terhambat akan menyebabkan proses
metabolisme terganggu, sehingga aktifitas sel bakteri akan terganggu, hal ini dapat
menyebabkan sel bakteri hancur dan akan mati.
e. Menghambat sintesis asam nukleat dan protein
DNA, RNA, dan protein memegang peranan penting dalam proses kehidupan
normal sel, beberapa bahan antimikroba dalam bentuk antibiotik dapat menghambat
sintesis protein. Apabila keberadaan DNA, RNA dan protein mengalami gangguan
atau hambatan pada pembentukan atau fungsi zat tersebut dapat mengakibatkan
kerusakan sel sehingga proses kehidupan sel terganggu.



2.4. Escherichia coli
Bakteri Escherichia coli termasuk basil coliform, mempunyai ukuran panjang
2,0–6,0 µm dan lebar 1,1–1,5 µm, tersusun tunggal, berpasangan, dengan flagella
peritikus, tidak berkapsul, umumnya mempunyai fimbria dan bersifat motile. Bakteri ini
mampu meragi laktosa dengan cepat sehingga pada agar Mc. Concey dan EMB
membentuk koloni merah muda sampai tua dengan kilat logam yang spesifik dan
permukaan halus (Supardi, 1999).
Bakteri Escherichia coli merupakan penghuni normal dalam saluran pencernaan
manusia dan hewan. Bakteri ini berbentuk batang, anaerobik fakultatif, merupakan
bakteri Gram negatif. Bakteri Gram negatif memiliki struktur dinding sel yang tipis (10-
15 nm) dan berlapis tiga (multi). Kandungan lipid diding sel bakteri Gram negatif lebih
tinggi (11-22 %) dari pada yang dikandung bakteri Gram positif, peptidoglikan ada di
dalam lapisan kaku sebelah dalam (Pelczar, 1986).
Volk (1993) menambahkan bahwa bakteri Gram negatif mengandung lebih
sedikit peptidoglikan (10 sampai 20 persen bobot kering dinding sel), tetapi di luar
lapisan peptidoglikan, ada struktur membran kedua, yang tersusun dari protein,
fosfolipida dan lipopolisakarida (asam lemak yang dirangkai dengan polisakarida).
Escherichia coli tumbuh pada suhu antara 10-40
o
C, dengan suhu optimum 37
o
C. pH optimum untuk pertumbuhannya adalah pada 7,0–7,5, pH minimum pada 4,0 dan
maksimum pada pH 9,0. Bakteri ini sangat sensitif terhadap panas. Susunan antigen
yang penting dalam penentuan serologi E. coli ada tiga macam yaitu: antigen O
(somatik) yang terdiri dari polisakarida, H (flagellar) dan K (kapsul). Di samping itu
terdapat antigen fimbria yang ikut berperan dalam penentuan starin dari berbagai
serotype E. coli (Supardi, 1999).

Sejak 1940 di Amerika Serikat telah ditemukan strain-strain E. coli yang tidak
merupakan flora normal saluran pencernaan. Serotype dari E. coli yang dapat
menyebabkan diare pada manusia disebut Escherichia coli enteropatogenik (EPEK).
Berdasarkan sifat patogenik dan produksi toksinnya, starin enteropatogenik Escherichia
coli (EPEK) dapat dibedakan menjadi dua grup. Grup I terdiri dari strain yang bersifat
patogenik, tetapi tidak dapat memproduksi toksin, sedangkan grup II terdiri dari strain
yang memproduksi enterotoksin dan menyebabkan gejala enterotoksigenik. Strain yang
termasuk grup II ini disebut Escherichia coli enterotoksigenik (EPET), dan merupakan
bakteri penyebab diare yang banyak menyerang bayi (Supardi, 1999).
Salah satu faktor yang mempengaruhi sifat patogenik E. coli adalah kemampuan
untuk melakukan adesi pada sel-sel hewan dan manusia. Kemampuan untuk adesi ini
diduga disebabkan oleh adanya fimbria atau pili yang dapat menyebabkan adesi dan
kolonisasi strain ETEK pada hewan dan manusia (Supardi, 1999).
Menurut Bergey’s manual of Determinative Bacteriology edisi ketujuh
(Dwidjosaputro, 1998) bakteri E. coli diklasifikasikan sebagai berikut:
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Familia : Enterobacteriaceae
Genus : Escherichia
Spesies : Escherichia coli
2.5. Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus adalah suatu kokus tidak berfaglela, tidak bergerak,
Gram positif, katalase-negatif. Berdiameter sekitar 0,5-I,5 µm. Pembelahan sel terjadi

pada lebih dari satu bidang sehingga terbentuk masa tidak teratur menyerupai untaian
anggur. Bakteri ini sangat patogen, menyebabkan infeksi berat pada individu yang
terjadinya sehat. Koloni S. aureus biasanya berpigmen, warna kuning muda sampai
jingga tua atau kuning lemon oleh pigmen karotinoid yang dihasilkan mikoroorganisme
(Shulman dkk., 1994).
Bakteri Gram positif mempunyai struktur dinding sel yang tebal yaitu 15–80 nm
dan berlapis tunggal (mono), sedangkan kandungan lipidnya rendah yaitu 1–4 %.
Lapisan peptidoglikan pada bakteri Gram positif ada sebagai lapisan tunggal dengan
jumlah lebih dari 50 % berat kering (Pelczar, 1986).
Bakteri S. aureus memproduksi koagulase dan dapat memfermentasikan glukosa
dan mannitol dengan memproduksi asam dalam keadaan anaerobik. Bakteri ini bersifat
anaerobik sangat lambat. S. aureus akan tahan terhadap lisis yang disebabkan oleh
enzim lysozim dan memproduksi enzim fosfatase dan deoksiribonuklease (Supardi,
1999).
S. aureus mudah tumbuh pada kebanyakan pembenihan bakteri dalam keadaan
aerobic atau mikroaerofilik. Bakteri ini tumbuh paling cepat pada suhu 37
o
C, tetapi
membentuk pigmen paling baik pada suhu kamar (20-25
o
C). Koloni pada pembenihan
padat berbentuk bundar, halus, menonjol dan berkilau. Supardi (1999) menambahkan
bahwa bakteri ini tidak dapat tumbuh pada media sintetik yang tidak mengandung asam
amino atau protein.
Selain memproduksi koagulase, yaitu suatu enzim yang dapat menggumpalkan
plasma, S. aureus juga dapat memproduksi berbagai toksin, diantaranya: (1) eksotoksin
-α yang sangat beracun, (2) toksin - β yang terdiri dari hemolisin, yaitu suatu
komponen yang dapat menyebabkan lisis pada sel darah merah, (3) toksin F dan S, (4)

hialuronidase, yaitu suatu enzim yang dapat memecah asam hyaluronat di dalam
tenunan sehingga mempermudah penyebaran bakteri ke seluruh tubuh, (5) suatu grup
enteotoksin yang terdiri dari protein sederhana (Supardi, 1999).
Dijelaskan lebih lanjut oleh Supardi (1999) bahwa S. aureus hidup sebagai
saprofit di dalam saluran-saluran pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan hewan
seperti hidung, mulut dan tenggorokan dan dapat dikeluarkan pada waktu batuk atau
bersin. Bakteri ini juga sering terdapat pada pori-pori dan permukaan kulit, kelenjar
keringat dan saluran usus.
Menurut Bergey’s manual of Determinative Bacteriology edisi ketujuh
(Dwidjosaputro, 1998) bakteri S. aureus diklasifikasikan sebagai berikut:
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Familia : Micrococcaceae
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus

2.6. Candida albicans
Menurut Lodder (1970) dalam Suprihatin (1982), taksonomi Candida albicans
adalah sebagai berikut:
Divisi : Deuteromycota
Famili : Cryptococcaceae
Sub famili : Candidoidea
Genus : Candida

Spesies : Candida albicans
C. albicans memperbanyak diri dengan membentuk tunas yang akan terus
memanjang membentuk hifa semu. Hifa semu terbentuk dengan banyak kelompok
blastospora berbentuk bulat atau lonjong di sekitar septum. Pada beberapa strain,
blastospora berukuran besar, berbentuk bulat atau seperti botol, dalam jumlah sedikit.
Sel ini dapat berkembang menjadi klamidospora yang berdinding tebal dan bergaris
tengah sekitar 8-12 µ. Morfologi koloni C. albicans pada medium padat agar Sabouraud
Dekstrosa, umumnya berbentuk bulat dengan permukaan sedikit cembung, halus, licin
dan kadang-kadang sedikit berlipat-lipat terutama pada koloni yang telah tua. Umur
biakan mempengaruhi besar kecil koloni. Warna koloni putih kekuningan dan berbau
asam seperti aroma tape. Dalam medium cair seperti glucose yeast, extract pepton, C.
albicans tumbuh di dasar tabung (Tjampakasari, 2006).
Sel jamur Candida berbentuk bulat, lonjong atau bulat lonjong, dengan ukuran 2
− 5µ × 3 − 6 µ hingga 2-5,5µ × 5 − 28,5 µ, bergantung pada umurnya. Koloninya pada
medium padat sedikit menimbul dari permukaan medium, dengan permukaan halus,
licin atau berlipat-lipat, berwarna putih kekuningan dan berbau ragi. Besar koloni
bergantung pada umurnya. Pada tepi koloni dapat dilihat hifa semu sebagai benang-
benang halus yang masuk ke dalam medium. Pada medium cair jamur biasanya tumbuh
pada dasar tabung (Suprihatin, 1982).
Dinding sel C. albicans berfungsi sebagai pelindung dan juga sebagai target dari
beberapa antimikotik. Dinding sel berperan pula dalam proses penempelan dan
kolonisasi serta bersifat antigenik. Fungsi utama dinding sel tersebut adalah memberi
bentuk pada sel dan melindungi sel ragi dari lingkungannya. C. albicans mempunyai
struktur dinding sel yang kompleks, tebalnya 100 sampai 400 nm. Komposisi primer

terdiri dari glukan, manan dan khitin. Manan dan protein berjumlah sekitar 15,2-30 %
dari berat kering dinding sel, -1,3-D-glukan dan 1,6-D-glukan sekitar 47-60 %, khitin
sekitar 0,6-9 %, protein 6-25 % dan lipid 1-7%. Dalam bentuk ragi, kecambah dan
miselium, komponen-komponen ini menunjukkan proporsi yang serupa tetapi bentuk
miselium memiliki khitin tiga kali lebih banyak dibandingkan dengan sel ragi. Dinding
sel C. albicans terdiri dari lima lapisan yang berbeda (Tjampakasari, 2006).
C. albicans dianggap spesies terpatogen dan menjadi penyebab utama kandidias.
Jamur ini tidak terdapat di alam bebas, tetapi dapat tumbuh sebagai saproba pada
berbagai alat tubuh manusia, terutama yang mempunyai hubungan dengan dunia luar,
misalnya rongga usus. Usus merupakan sumber infeksi terpenting untuk manusia
(Suprihatin, 1982).
C. albicans dapat dibedakan dari spesies lain berdasarkan kemampuannya
melakukan proses fermentasi dan asimilasi. Pada kedua proses ini dibutuhkan
karbohidrat sebagai sumber karbon. Pada proses fermentasi, jamur ini menunjukkan
hasil terbentuknya gas dan asam pada glukosa dan maltosa, terbentuknya asam pada
sukrosa dan tidak terbentuknya asam dan gas pada laktosa. Pada proses asimilasi
menunjukkan adanya pertumbuhan pada glukosa, maltosa dan sukrosa namun tidak
menunjukkan pertumbuhan pada laktosa. Seperti halnya pada eukariot lain, nukleus C.
albicans merupakan organel paling menonjol dalam sel. Organ ini dipisahkan dari
sitoplasma oleh membran yang terdiri dari 2 lapisan. Semua DNA kromosom disimpan
dalam nukleus, terkemas dalam serat-serat kromatin. Isi nukleus berhubungan dengan
sitosol melalui pori-pori nucleus. Vakuola berperan dalam sistem pencernaan sel,
sebagai tempat penyimpanan lipid dan granula polifosfat. Mikrotubul dan mikrofilamen

berada dalam sitoplasma. Pada C. albicans mikrofilamen berperan penting dalam
terbentuknya perpanjangan hifa (Tjampakasari, 2006).
Potensi patogen dari C. albicans berkaitan erat dengan perubahan bentuk dari
ragi menjadi hifa. Ini berdasarkan pada penampakan faktor virolensi dihubungkan
dengan perlekatan dan invasi pada fase hifa dan pengamatan klinis bahwa terdapat hifa
pada lesi invatif. Hifa dari C. albicans memiliki kapasitas berkaitan dengan sejumlah
struktur molekul pada jaringan tubuh manusia. Termasuk komponen matrik
ekstraseluler seperti fibronectin, kolagen, laminin, dan produk konversi komplemen C
3.
Pendekatan ini diperantai oleh komponen mannoprotein dari permukaan luar fibril
organisme, tapi tidak jelas perlekatan tunggal atau ganda yang bertanggung jawab.
Sebagaimana protein yang membentuk komponen matrik ekstraseluler host diketahui
bersama-sama membentuk rangkaian spesifik, mungkin saja jika satu molekul C.
albicans dapat memperantai perlekatan pada banyak komponen di jaringan host
(Sherris, 1994 dalam Nurswida, 2002)











BAB III
METODE PENELITIAN

3.1. Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksplorasi. Eksplorasi dengan cara
mengisolasi jamur endofit dari daun sirih (Piper betle L.) yang diperoleh dari Kelurahan
Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang dan Desa Banjaranyar Kecamatan
Kras Kabupaten Kediri, kemudian menyeleksi isolat jamur endofit yang mempunyai
kemampuan menghasilkan senyawa aktif sebagai antimikroba terhadap Escherichia
coli, Staphylococcus aureus dan Candida albicans.

3.2. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Jurusan Hama dan Penyakit
Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universitas Brawijaya dan dimulai pada bulan
Desember 2007 sampai Februari 2008.

3.3. Alat dan Bahan Penelitian
3.3.1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah laminar flow cabinet,
autoklaf, oven, cawan petri, jarum ose, bunsen, kompor gas, pengaduk kaca, entkas,
pinset, kertas saring, incubator, aluminium foil, mikroskop, cover glass, gelas obyek,
gelas ukur, tabung reaksi, pipet volume, erlenmeyer, jangka sorong, botol media, shaker
incubator, sentrifugasi, timbangan analitik dan silet.



3.3.2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Media PDASV(Potato
Dextrose Agar Streptomycin Vankomysin), media NA (Nutrient Agar), media PDB
(Potato Dextrose Broth), larutan NaOCl 1 %, daun sirih, aquades steril, spirtus, kapas,
biakan C. albicans, E. coli dan S. aureus, alkohol 70 %, kertas cakram dan tissue.
3.4. Prosedur Penelitian
3.4.1. Sterilisasi Alat dan Bahan
Sterilisasi alat dan bahan dengan cara membungkus alat-alat dengan aluminium
foil, kemudian memasukkannya ke dalam autoklaf pada suhu 121
0
C dengan tekanan 15
psi (per square inchi) selama 15 menit.
3.4.2. Pembuatan Media
a. Media PDASV, cara pembuatannya sebagai berikut:
• Menyiapkan bahan yang terdiri dari kentang 0,5 kg, glukosa/sukrosa 20 gram,
agar-agar 20 gram, streptomycin sulfate 100 ug/ml, vancomycin 50 ug/ml dan
aquades steril 1000 ml.
• Memasukkan semua bahan tersebut ke dalam labu erlenmeyer kemudian
dipanaskan dan diaduk sampai homogen.
• Menuangkan larutan PDASV tersebut ke dalam cawan petri dengan ketebalan
media ± 5 ml dan ke dalam tabung reaksi masing-masing sebanyak 4 ml (untuk
media miring) dan menutupnya dengan kapas, kemudian didiamkan sampai
membeku.
• Kemudian memasukkanya ke dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121
0
C
dengan tekanan 15 psi.

• Membiarkan media tersebut selama 24 jam pada suhu kamar sebelum
digunakan.
b. Media PDB, cara pembuatannya sebagai berikut:
• Menyiapkan bahan yang terdiri dari kentang 0,5 kg, glukosa/sukrosa 20 gram
dan aquades steril 1000 ml.
• Memasukkan semua bahan tersebut ke dalam labu erlenmeyer kemudian
dipanaskan dan diaduk sampai homogen.
• Menuangkan larutan PDB tersebut ke dalam tabung reaksi masing-masing
sebanyak 4 ml dan menutupnya dengan kapas.
• Kemudian memasukkanya ke dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121
0
C
dengan tekanan 15 psi.
• Membiarkan media tersebut selama 24 jam pada suhu kamar sebelum
digunakan.
c. Media NA, cara pembuatannya sebagai berikut:
• Menyiapkan bahan yang terdiri dari beef ekstrak 3 gram, bacto pepton 5 gram,
agar padat 15 gram dan aquades 1000 ml.
• Memasukkan semua bahan tersebut ke dalam labu erlenmeyer kemudian
dipanaskan dan diaduk sampai homogen.
• Menuangkan larutan NA tersebut ke dalam cawan petri dengan ketebalan media
± 5 ml, kemudian didiamkan sampai membeku.
• Media miring dan media lempeng disterilkan dalam autoklaf selama 15 menit
pada suhu 121
0
C dengan tekanan 15 psi.
• Membiarkan media tersebut selama 24 jam pada suhu kamar sebelum
digunakan.

3.4.3. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih
Jamur endofit diisolasi dari tanaman sirih (P. betle L.) sehat yang diambil dari
daunnya. Bagian daun sirih tersebut dicuci dengan air mengalir selama 5 menit. Setelah
pencucian, dilakukan sterilisasi permukaan dengan memasukkannya ke dalam larutan
alkohol 70 % selama 5 menit, dilanjutkan kedalam larutan NaOCl 1 % selama 5 menit
kemudian dikeringkan dengan tissue steril. Setelah itu dibilas dengan aquadest steril ± 1
menit diulang dua kali, lalu ditempelkan di atas cawan petri yang berisi media PDASV,
perlakuan ini berfungsi sebagai kontrol. Kemudian potongan daun sirih dikeringkan di
atas kertas tissue steril dan ditanam pada cawan petri yang berisi media PDASV.
Pengamatan dilakukan setiap hari sampai tampak jamur yang tumbuh. Kemudian jamur
endofit tersebut diisolasi dan dimurnikan pada media PDASV baru. Jamur endofit yang
digunakan untuk penelitian adalah jamur yang tumbuh pada belahan daun bagian dalam
(Indriana, 2005).
3.4.4. Pemurnian Jamur Endofit
Medium yang digunakan untuk permurnian jamur endofit yaitu medium
PDASV. Jamur endofit yang tumbuh pada medium PDASV, dimurnikan masing-
masing pada medium plat dan media miring PDASV. Kemudian diinkubasi selama 24 -
48 jam pada suhu 25
0
C, setelah inkubasi dilakukan pengamatan terhadap bentuk dan
warna koloni pada medium PDASV. Setiap koloni yang berbeda bentuk maupun
warnanya disubkultur lagi pada medium PDASV baru.
3.4.5. Identifikasi Isolat Jamur Endofit
Jamur endofit yang telah diinkubasi selama 24 - 48 jam pada suhu 25
0
C tadi
diidentifikasi berdasarkan ciri-ciri makroskopis. Pengamatan ciri-ciri makroskopis
dengan cara langsung melihat bentuk dan warna koloni jamur endofit. Sedangkan

pengamatan ciri-ciri mikroskopis dengan menggunakan mikroskop binokuler.
Pengamatan secara mikroskopis dilakukan setiap hari sampai tampak adanya konidia.
Pembuatan preparat untuk pengamatan yang menggunakan mikroskop binokuler
adalah sebagai berikut:
• Media agar diambil dari cawan petri dengan jamur ose
• Potongan media tersebut diletakkan di atas obyek glass
• Konidia atau spora dari biakan murni jamur diambil dengan jamur ose
• Inokulum jamur diletakkan di atas potongan media pada obyek glass
• Cover glass ditutup dan diletakkan secara perlahan-lahan
• Preparat tersebut diletakkan di atas tissue basah yang diletakkan di atas nampan
plastik dan di inkubasi selama 3-4 hari
• Morfologi jamur (bentuk dan ukuran hifa, konidia, spora) yang terbentuk
diamati dengan menggunakan mikroskop binokuler dengan perbesaran 400x
• Preparat jamur diidentifikasi dengan menggunakan buku identifikasi jamur.
3.4.6. Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba
a. Produktifitas Metabolit Antimikroba
Produksi metabolit antimikroba oleh jamur endofit dilakukan dengan cara
menumbuhkannya di dalam medium PDB. Koloni jamur endofit yang telah diinkubasi
pada medium PDASV selama 24 jam pada suhu 25
0
C, diambil satu sengkelit dengan
menggunakan jarum Ose dan diinokulasikan ke medium PDB dalam Erlenmeyer 50 ml.
Kemudian diinkubasi pada suhu 25
0
C dalam shaker incubator 130 rpm selama 48 jam.
Setelah selesai, masing-masing medium disentrifugasi dengan kecepatan 3800 rpm pada
suhu 4
0
C selama 20 menit. Supernatan diambil dan dipergunakan dalam pengujian
aktivitas antimikroba terhadap jamur C. albicans, bakteri E. coli dan bakteri S. aureus

b. Uji Antimikroba Terhadap Candida albicans
Medium yang digunakan untuk uji aktivitas antimikroba isolat jamur yaitu
medium PDASV. Uji aktivitas antijamur isolat jamur terhadap jamur C. albicans
dilakukan dengan metode uji Kirby-Bauer menggunakan kertas cakram. Kertas cakram
dibuat dari kertas saring Whatman dengan ukuran pori 0,22 um, dengan cara
mengguntingnya dengan alat pembolong kertas sehingga didapatkan kertas cakram
dengan diameter 6 mm.
Secara aseptik, kertas cakram yang sudah disterilkan direndam di dalam
supernatan kultur jamur endofit selama 30 menit. Kertas cakram diambil dengan
menggunakan pinset steril dan diletakkan di atas medium uji aktivitas antimikroba
(medium plat PDASV). Kemudian diinkubasi selama 18 – 24 jam pada suhu 37
0
C.
Setelah masa inkubasi selesai, dilakukan pengamatan terhadap zona jernih yang
terbentuk dan diukur diameternya. Sampel yang mempunyai potensi menghasilkan zat
antimikroba ditunjukkan dengan adanya zona jernih.
c. Uji Antimikroba Terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
Medium yang digunakan untuk uji aktivitas antimikroba isolat bakteri yaitu
medium NA. Uji aktivitas antimikroba isolat jamur terhadap bakteri E. coli dan S.
aureus dilakukan dengan metode uji Kirby-Bauer menggunakan kertas cakram. Kertas
cakram dibuat dari kertas saring Whatman dengan ukuran pori 0,22 um, dengan cara
mengguntingnya dengan alat pembolong kertas sehingga didapatkan kertas cakram
dengan diameter 6 mm.
Secara aseptik, kertas cakram yang sudah disterilkan direndam di dalam
supernatan kultur jamur endofit selama 30 menit. Kertas cakram diambil dengan
menggunakan pinset steril dan diletakkan di atas medium uji aktivitas antimikroba

(medium plat NA). Kemudian diinkubasi selama 18 – 24 jam pada suhu 37
0
C. Setelah
masa inkubasi selesai, dilakukan pengamatan terhadap zona jernih yang terbentuk dan
diukur diameternya. Sampel yang mempunyai potensi menghasilkan zat antimikroba
ditunjukkan dengan adanya zona jernih.















BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih (Piper battle L.)
Jamur endofit berhasil diisolasi dari potongan daun tanaman sirih (P. battle L.)
setelah inkubasi selama 20 hari dalam medium PDASV pada suhu kamar, dapat dilihat
pada Gambar 4.1. Sampel tanaman sirih yang digunakan pada penelitian ini diperoleh
dari dua tempat yang berbeda yaitu, Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten
Kediri dan Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang.

Gambar 4.1. Jamur Endofit dari Jaringan Daun Sirih (P. battle L.)
(ket: A : sampel dari Desa Banjaranyar; B : sampel dari Kelurahan Ketawanggede)

Dalam hal isolasi jamur endofit, dilakukan pemurnian pada permukaan sampel
dengan perendaman dalam alkohol 70% selama 5 menit dan NaOCl 1% selama 5 menit,
maka jamur yang tumbuh adalah yang berasal dari dalam jaringan tanaman. Radji
(2005) juga menyebutkan bahwa mikroba endofit adalah mikroba yang hidup dalam
jaringan tanaman pada periode tertentu dan mampu hidup dengan membentuk koloni
dalam jaringan tanaman tanpa membahayakan inangnya.
Setelah dilakukan pemurnian berdasarkan bentuk dan warna secara makroskopis
pada media PDASV yang baru, dihasilkan 5 macam isolat jamur endofit dari Desa
B A

Banjaranyar dan 4 macam isolat jamur endofit dari Kelurahan Ketawanggede. Masing-
masing koloni memperlihatkan penampakan fisik yang beranekaragam, dapat dilihat
pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1. Diskripsi Bentuk dan Warna Koloni Isolat Jamur Endofit
Kode
Isolat
Lokasi Ciri Makroskopis
B1 Banjaranyar Warna koloni mula-mula putih lama-kelamaan
menjadi ungu kecoklatan, miselium menyebar,
pertumbuhan koloni datar, tipis seperti serabut
B2 Banjaranyar Warna koloni mula-mula putih lama-lama menjadi
abu-abu kehitaman, miselium teratur, pertumbuhan
koloni datar, tebal, halus, melebar
B3 Banjaranyar Warna koloni putih bersih, miselium menyebar
teratur, pertumbuhan koloni tebal, datar, kasar dan
seperti berserat
B4 Banjaranyar Warna koloni putih lama kelamaan menjadi hijau di
bagian pusat, miselium menyebar teratur,
pertumbuhan koloni datar, tebal, seperti serabut
halus
B5 Banjaranyar Warna koloni mula-mula hijau keabu-abuan lama-
kelamaan menjadi hijau kehitaman, miselium
menyebar teratur, pertumbuhan koloni datar, tebal,
kasar, seperti serabut
K1 Ketawanggede Warna koloni putih bersih, miselium meyebar,
pertumbuhan koloni datar, tipis, seperti beludru
kasar
K2 Ketawanggede Warna koloni putih, miselium menyebar,
pertumbuhan koloni datar, tipis, kasar dan melebar
K3 Ketawanggede Warna koloni hijau tua, miselium teratur, terdapat
serbuk spora, pertumbuhan koloni keatas, tebal,
halus, seperti beludru
K4 Ketawanggede Warna koloni mula-mula putih lama-lama menjadi
abu-abu kehitaman, miselium teratur, pertumbuhan
koloni datar, tebal, halus, melebar


Dalam Al-Qur’an juga dijelaskan, Q.s. ar-Ra’d: 4
_¸·´¸ ¸_¯¸¸¦ _L¸· ,´¸¸¡.>.¯. ¸.. >´¸ _¸. ¸¸.´ .s¦ _¯¸¸´¸ _,¸>´´¸ ¿¦´¡.¸. ¸¯, s´¸ ¸¿¦´¡.¸.
_.`.¸ ¸,!.¸, ¸.¸>´¸ `_¸.±.´¸ !¸.- , _l s ¸_- , _¸· ¸_鸦 ¿¸| _¸· .¸l : ¸¸. ,¸ ¸,¯¡1¸l
_¡l¸1- , ¸_¸
“Dan di bumi Ini terdapat bagian-bagian yang berdampingan, dan kebun-kebun
anggur, tanaman-tanaman dan pohon korma yang bercabang dan yang tidak
bercabang, disirami dengan air yang sama. kami melebihkan sebahagian tanam-
tanaman itu atas sebahagian yang lain tentang rasanya. Sesungguhnya pada yang
demikian itu terdapat tanda-tanda (kebesaran Allah) bagi kaum yang berfikir.” (Q.s. ar-
Ra`d/13: 4)

Ayat di atas menjelaskan bahwa setiap tanaman mempunyai kelebihan tersendiri
dari tanaman yang lain. Begitu juga pada tanaman sirih, tanaman sirih dari tempat yang
berbeda menghasilkan jamur endofit yang berbeda pula. Disitulah bukti kekuasaan
Allah Swt. yang menciptakan alam semesta dengan beranekaragam jenis dan
manfaatnya.
Hasil pengamatan makroskopis terhadap penampakan koloni isolat jamur
endofit, dapat diketahui bahwa masing-masing isolat memperlihatkan penampakan yang
berbeda meskipun diambil dari sampel yang sama, akan tetapi daerahnya berbeda. Hal
ini sesuai dengan pernyataan Atmosukarto (2006) karena tumbuh didalam jaringan
tanaman, di mana tanaman yang satu tentunya berbeda dengan tanaman yang lainnya,
maka biotop tempat hidup mikroba sangat sangat unik sifatnya. Bahkan, fisiologi
tumbuhan tinggi termasuk yang berasal dari spesies yang sama akan beda di lingkungan
yang berbeda.




4.2. Identifikasi Isolat Jamur Endofit
Berdasarkan hasil pengamatan, jamur endofit yang telah berhasil diisolasi dari
daun sirih dapat diidentifikasi dengan melihat ciri makroskopis dan ciri mikroskopis,
dengan mengacu pada buku petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972).
1. Isolat B1
Miselium menyebar, pada media PDASV koloni jamur muda berwarna putih
tebal, lama-kelamaan pada bagian dasar koloni warna berubah menjadi ungu
kecoklatan. Pada hari keempat setelah inokulasi diameter koloni mencapai 3,6 cm dan
diameter koloni dapat mencapai 9 cm pada hari ke 8 setelah inokulasi. Pada hari kelima
setelah inokulasi, dibawah mikroskop binokuler konidia tampak hyalin, berbentuk
silinder, membengkok, tidak bersekat dan tampak gemuk. Konidiofor panjang, aseptat
dan hyalin. Hifa bersepta dan hyalin, miselium bercabang.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.2. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat B1 termasuk Famili Tuberculariaceae, genus
Fusarium sp.


Gambar 4.2. Isolat B1
A. Koloni Isolat B1, B. Foto mikroskopis Isolat B1 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Konidiofor, b. Konidia, c. Hifa)

b
a
A B
c

2. Isolat B2
Tumbuh cepat pada media PDASV, koloni jamur berwarna putih seperti kapas
kemudian lama-kelamaan berubah menjadi abu-abu kehijauan, bagian pinggir berwarna
hijau tua. Pada hari ketiga setelah inokulasi diameter koloni mencapai 4,5 cm.
Sedangkan dibawah mikroskop binokuler, pada hari kelima setelah inokulasi tampak
miselium bercabang. Hifa aseptat dan hyalin. Konidiofor pendek, hyalin, aseptat dan
ramping. Konidia berbentuk silinder, 1 sel, hyalin, berukuran 3,9 x 1,2 µm.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.3. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat B2 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Cephalosporium sp.


Gambar 4.3. Isolat B2
A. Koloni Isolat B2, B. Foto mikroskopis Isolat B2 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Hifa, b. Konidiofor, c. Konidia,)

3. Isolat B3
Koloni berwarna putih bersih pada media PDASV. Miselium menyebar teratur,
pertumbuhan koloni tebal, datar, kasar dan seperti berserat. Dalam waktu 4 hari
diameter koloni mencapai 4 cm. Pada pengamatan secara mikroskopis konidia biasanya
tersusun secara silindris dan pendek, hyalin, 1 sel dan terbentuk seperti untaian panjang.
Tidak terdapat konidiofor. Hifa aseptat dan hyalin.
b
c
A B
a

Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.4. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat B3 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Geotrichum sp.

Gambar 4.4. Isolat B3
A. Koloni Isolat B3, B. Foto mikroskopis Isolat B3 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Hifa, b. Konidia)
4. Isolat B4
Warna koloni pada awalnya putih lama kelamaan menjadi hijau di bagian pusat,
miselium menyebar teratur, pertumbuhan koloni datar, tebal, seperti serabut halus. Pada
pengamatan hari keempat diameter koloni mencapai 3,9 cm. Pada hari kelima setelah
inokulasi, dibawah mikroskop binokuler hifa tampak bersepta dan hyalin. Konidiofor
panjang, aseptat dan hyalin. Konidia hyalin, 2 sel, berbentuk silinder, sederhana dan
membengkok.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.5. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat B4 termasuk Famili Tuberculariaceae, genus
Fusarium sp.
b
a
B A


Gambar 4.5. Isolat B4
A. Koloni Isolat B4, B. Foto mikroskopis Isolat B4 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Konidiofor, b. Konidia)

5. Isolat B5
Koloni tumbuh cepat dan berwarna hijau kebu-abuan pada media PDASV. Pada
biakan yang sudah tua warna berubah menjadi hijau kehitaman, miselium tumbuh
menyebar dengan teratur, pertumbuhan koloni datar, tebal, kasar, seperti serabut. Pada
pengamatan secara mikroskopis konidia biasanya tersusun secara silindris dan pendek,
hyalin, 1 sel dan terbentuk seperti untaian panjang. Tidak terdapat konidiofor. Hifa
aseptat dan hyalin.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.6. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat B5 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Geotrichum sp.

Gambar 4.6. Isolat B5
A. Koloni Isolat B5, B. Foto mikroskopis Isolat B5 dengan perbesaran 400x
a
b
b
a
B A
A B

(Ket: a. Hifa, b. Konidia)

6. Isolat K1
Koloni jamur berwarna putih bersih, miselium meyebar, pertumbuhan koloni
datar, tipis, seperti beludru kasar. Dalam waktu 4 hari diameter koloni mencapai 3,2 cm.
Sedangkan dibawah mikroskop binokuler, pada hari keempat setelah inokulasi tampak
miselium bercabang. Hifa aseptat dan hyalin. Konidiofor pendek, hyalin, aseptat dan
ramping. Konidia berbentuk silinder, 1 sel, hyalin, berukuran 4-5 x 1,2 µm.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.7. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat K1 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Cephalosporium sp.


Gambar 4.7. Isolat K1
A. Koloni Isolat K1, B. Foto mikroskopis Isolat K1 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Konidiofor, b. Konidia, c. Hifa)

7. Isolat K2
Koloni berwarna putih, pertumbuhannya cepat dalam 4 hari diameter koloni
mencapai 4,5 cm. Koloni datar, tipis, dan penampakannya kasar, miselium melebar dan
menyebar pada seluruh permukaan media. Pada hari keenam setelah inokulasi, di bawah
mikroskop binokuler tampak hifa bersepta dan hyalin. Konidiofor pendek silindris pada
c
a
A B
b

ujungnya, hyalin, kadang bersekat, konidia 1 sel berbentuk silinder atau elips terbentuk
berantai dari ujung konidiofor, saling terkait dalam satu kelompok.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.8. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat K2 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Cylindrocephalum sp.


Gambar 4.8. Isolat K2
A. Koloni Isolat K2, B. Foto mikroskopis Isolat K2 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Hifa, b.Konidiofor, c. Konidia)

8. Isolat K3
Koloni berwarna hijau tua, merupakan kumpulan hifa dan di atasnya terdapat
serbuk spora. Pertumbuhan sangat lambat pada media PDASV. Pada hari ke 9 setelah
inokulasi diameter koloni baru mencapai 4 cm. Konidiofor panjang, hyaline dan aseptat.
Konidia bulat seperti bulat telur, hyalin dan tumbuh di atas phialid, konidia
mengeluarkan cahaya dari semua permukaan, satu konidiofor terdapat 2 atau 3 phialid,
dan setiap phialid terdiri dari 3-5 konidia. Konidia terdiri dari satu sel, bundar dan
tumbuh berantai.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.9. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
c
a
A B
b

(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat K3 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Penicillium sp.

Gambar 4.9. Isolat K3
A. Koloni Isolat K3, B. Foto mikroskopis Isolat K3 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Konidiofor, b. Konidia, c. Sterigma/Phialid)

9. Isolat K4
Isolat K4 bisa dikatakan sama dengan Isolat B2 karena ciri morfologi baik
secara makroskopis maupun mikroskopis menunjukkan panampakan yang sama yaitu,
tumbuh cepat pada media PDASV, koloni jamur berwarna putih seperti kapas kemudian
lama-kelamaan berubah menjadi abu-abu kehijauan, bagian pinggir berwarna hijau tua.
Pada hari ketiga setelah inokulasi diameter koloni mencapai 4,5 cm. Miselium
bercabang. Hifa aseptat dan hyalin. Konidiofor pendek, hyalin, aseptat dan ramping.
Konidia berbentuk silinder, 1 sel, hyalin, berukuran 3,9 x 1,2 µm.
Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada
Gambar 4.10. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet
(1972), maka dapat diketahui bahwa isolat K4 termasuk Famili Moniliaceae, genus
Cephalosporium sp.

c
b
a
A B


Gambar 4.10. Isolat K4
A. Koloni Isolat K4, B. Foto mikroskopis Isolat K4 dengan perbesaran 400x
(Ket: a. Konidiofor, b. Konidia)

Sembilan isolat jamur endofit yang ditemukan dari daun sirih (Piper betle L.)
tersebut setelah dilakukan identifikasi berdasarkan kunci identifikasi menurut Barnet
(1972) termasuk dalam Famili Moniliaceae. Famili Moniliaceae termasuk fungi
imperfecti atau Deuteromycotina. Hal ini sesuai dengan pernyataan Petrini et al. (1992)
dalam (Worang, 2003) yang menggolongkan fungi endofit dalam kelompok
Ascomycotina dan Deuteromycotina.

4. 3. Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba
Jamur endofit yang diisolasi dari daun sirih (P. batle L.) menunjukkan
kemampuan yang bervariasi dalam menghasilkan metabolit antimikroba. Seleksi
terhadap 9 isolat jamur endofit yang menghasilkan metabolit antimikroba,
menggunakan metode uji Kirby-Bauer menggunakan kertas cakram. Semua uji
kemampuan antimikroba menggunakan parameter terbentuknya zona hambat (zona
bening). Pengukuran dengan menggunakan jangka sorong, pengamatan dilakukan
setelah bakteri diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37
o
C.
Hasil uji aktivitas dari 9 isolat jamur endofit secara in vitro terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli memperlihatkan bahwa semua isolat dapat
A B
a
b

menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus dan E. coli dengan zona hambat yang
relative besar yaitu mencapai 31,76 mm pada S. aureus dan 23,44 mm pada E. coli
(Tabel 4.2.). Sedangkan pada jamur Candida albicans memperlihatkan zona hambat
yang relatif kecil yaitu mencapai 1,96 mm, bahkan dua dari isolat jamur endofit tidak
bisa menghambat pertumbuhan jamur C. albicans yaitu, isolat B1 dan isolat K1 (Tabel
4.2.).
Tebel 4.2. Rata-rata Diameter Zona Hambat Metabolit Jamur Endofit
Kode
Isolat
S. aureus E. coli C. albicans
B1 26,45 8,7 0
B2 24,50 15,68 1,26
B3 29,73 24,64 0,98
B4 27,09 23,44 1,96
B5 28,54 18,43 1,35
K1 22,04 13,77 0
K2 31,76 9,74 1,68
K3 26,16 17,11 0,87
K4 19,23 9,78 1,54
Keterangan: B= isolat jamur endofit dari Desa Banjaranyar;K= isolat jamur endofit dari
Kelurahan Ketawanggede.

Berdasarkan Tabel 4.2. di atas dapat diketahui bahwa isolat K2 mampu
menghambat pertumbuhan S. aureus dengan diameter zona hambat tertinggi. Pada E.
coli isolat B3 yang mampu menghambat paling tinggi, sedangkan pada C. albicans
diameter zona hambat paling tinggi ditunjukkan oleh isolat B4 (Gambar 4.11.).

Gambar 4.11. Zona hambat yang dihasilkan oleh Stapilococus aureus, Escerichia coli
dan Candida albicans setelah diinkubasi selama 24 jam (ket: A: S. aureus;
B: E. coli; C: C. albicans )

A B C

Ketidaksamaan isolat yang mempunyai diameter zona hambat terbaik pada
ketiga mikroba uji bisa disebabkan karena jenis metabolit antimikroba yang dihasilkan
pada masing-masing isolat juga berbeda. Hal ini sesuai dengan yang diungkapkan oleh
Siswandono (1995) bahwa antibiotik mempunyai spesikasi dalam efektifitasnya.
Antibiotik dapat dikelompokkan berdasarkan tempat kerja spektrum aktivitas dan
struktur kimianya.
Dijelaskan lebih lanjut oleh Siswandono (1995) bahwa metabolit antimikroba
dari daun sirih merupakan antibiotika dengan spektrum luas yaitu, efektif baik terhadap
Gram positif maupun Gram negatif. Sedangkan kecilnya diameter zona hambat yang
dihasilkan oleh metabolit jamur endofit pada C. albicans bisa disebabkan karena
metabolit yang dihasilkan merupakan antibiotika yang tidak aktif terhadap jamur
(antijamur). Untuk lebih jelasnya dapat dilakukan uji lanjutan terhadap karakteristik
metabolit yang dihasilkan jamur endofit dari daun sirih.
Bonang (1982) menyebutkan bahwa antibiotika Ampisilin pada batang Gram
negatif dinyatakan peka jika mempunyai diameter zona hambat sebesar 14 mm atau
lebih pada batang Gram negatif dan 29 mm atau lebih pada Stafilokokus, Pinisilin G
dengan diameter zona hambat 29 mm atau lebih, Streptomisin dengan diameter zona
hambat 15 mm atau lebih dan Vankomisin dengan diameter zona hambat 12 mm atau
lebih. Dari pernyataan di atas dapat disimpulkan bahwa antibiotik yang terdapat pada
metabolit jamur endofit kemungkinan merupakan antibiotik yang peka. Hal ini bisa
dijadikan sumber acuan baru dalam pencarian jenis antibiotik yang potensial.
Data hasil pengamatan pada Tabel 4.2. menunjukkan rata-rata bahwa
Staphylococcus aureus menghasilkan diameter zona hambat lebih besar dibandingkan
dengan Escherichia coli. Hal ini disebabkan karena adanya perbedaan struktur dinding

sel pada bakteri Gram positif (Stahylococcus aureus) dengan bakteri Gram negatif
(Escherichia coli).
Menurut Pelczar (1986) struktur dinding sel bakteri Gram negatif lebih
kompleks dibandingkan struktur dinding sel bakteri Gram positif. Bakteri Gram negatif
memiliki dinding sel yang terdiri dari 3 lapisan yaitu, lapisan luar, lapisan tengah dan
lapisan dalam. Sedangkan bakteri Gram positif hanya mempunyai lapisan tunggal pada
dinding selnya.
Lay (1992) menambahkan perbedaan utama antara bakteri Gram positif dan
bakteri Gram negatif ialah bahwa pada bakteri Gram negatif memiliki lapisan membran
luar yang meliputi peptidoglikan. Lapisan membran luar disebut ”outher wall layer”
yang mempunyai struktur sebagai unit membran. Perbedaanya adalah bahwa lapisan ini
tidak hanya terdiri dari fosfolipida saja seperti pada membran plasma tetapi juga
mengandung lipida lainnya, polisakarida dan protein. Lipida dan polisakarida ini
berhubungan erat dan membentuk struktur khas yang disebut lipopolisakarida.
Struktur dinding sel bakteri Gram negatif yang relatif kompleks tersebut
menyebabkan antibiotik lebih sukar masuk ke dalam sel dan menemukan sasaran untuk
bekerja. Untuk menunjukkan kerja antibiotik pada bakteri Gram negatif, antibiotik
pertama-tama harus menembus membran terluar selubung bakteri secara difusi pasif
melalui saluran yang terbentuk oleh pori protein. Sesudah menembus membran terluar,
antibiotik masuk melalui dinding sel melewati ruang periplasma dan mencapai sasaran,
yaitu enzim serin protease yang terdapat pada membran terdalam (sitoplasma). Enzim
inilah yang bertanggung jawab terhadap biosintesis dinding sel (Siswandono, 1995).
Berbeda dengan bakteri, jamur mempunyai struktur dinding sel yang sangat
kompleks dengan rangka dasar yang terdiri dari polisakarida kristalin, kitin, dan β-

glukan, dan suatu matrik yang terdiri dari polisakarida amorf dan kompleks protein-
sakarida. Kitin dan β-glukan bertanggung jawab terhadap mekanisme dinding sel jamur
(Siswandono, 1995).

Dalam Q.s. Al-Furqon ayat 2 dijelaskan
_¸.]¦ .«l ,l`. ¸,´¡..´.l¦ ¸_¯¸¸¦´ ¸ `¸l´¸ .¸>`. , ¦´.l´¸ ¯¡l´¸ _>, .`«] ,,¸¸. _¸· ¸,l.l¦
_l>´¸ _é ¸,`_: .:´¸´. 1· ¦¸,¸.1. ¸_¸

“ Yang kepunyaan-Nya-lah kerajaan langit dan bumi, dan dia tidak mempunyai anak,
dan tidak ada sekutu baginya dalam kekuasaan(Nya), dan dia Telah menciptakan
segala sesuatu, dan dia menetapkan ukuran-ukurannya dengan serapi-rapinya (Q.s. Al-
Furqon/25: 2)

Dimana segala sesuatu yang dijadikan Tuhan diberi-Nya perlengkapan-
perlengkapan dan persiapan-persiapan, sesuai dengan naluri, sifat-sifat dan fungsinya
masing-masing dalam hidup. Begitu pula dengan jamur endofit dimana di dalamnya
terdapat manfaat tertentu sesuai dengan kandungan senyawanya.
Radji (2005) mengungkapkan bahwa, jamur endofit dapat mengahasilkan
metabolit sekunder sesuai dengan tanaman inangnya. Sebagai contoh Taxol, yang
dihasilkan dari kulit batang Taxus brevifolia, ternyata dapat dihasilkan oleh kultur jamur
endofit Taximyces andreanae yang diisolasi dari Taxus brevifolia di Montana. Ergot
alkaloida ditemukan dalam kultur Neotyphodium, endofit yang dikarakterisasi dari
Ergot scerotia (Tan and Zou, 2001 dalam Sugijanto, 2004).
Pernyataan di atas memperkuat bahwa jamur endofit yang berhasil diisolasi dari
penelitian ini juga menghasilkan metabolit skunder sesuai dengan yang dihasilkan
inangnya dalam hal ini tanaman sirih (P. betle L). Menurut Kartasapoetra (1992)
komponen di dalam daun sirih meliputi minyak atsiri sampai 4,2 % yang didalamnya

terdapat fenol yang khas disebut betelfenol, khavikol, diastase, zat penyamak, gula dan
pati. Brooks dkk. (1996) juga menambahkan bahwa fenol merupakan zat anti kuman
yang kuat fenol dan derivatnya menyebabkan denaturasi protein pada kuman. Dengan
demikian kemungkinan besar jamur endofit dari daun sirih juga mengandung senyawa
aktif fenol.
Dalam kerjanya, pertama fenol merusak membran plasma sehingga enzim
menjadi inaktif yang menyebabkan denaturasi protein. Fenol lebih efektif pada bakteri
gram positif (Tim Mikrobiologi, 2003). Hidupnya suatu sel bergantung pada
terpeliharanya molekul-moekul protein dan asam nukleat dalam keadaan alamiahnya.
Denaturasi protein dan asam nukleat dapat merusak sel tanpa dapat diperbaiki kembali
(Pelczar, 1988).
Menurut Volk (1993) apabila digunakan dalam konsentrasi tinggi fenol bekerja
dengan merusak membran sitoplasma secara total dan mengendapkan protein sel. Akan
tetapi, dalam konsentrasi 0,1 hingga 2 persen, fenol merusak membran sitoplasma yang
menyebabkan bocornya metabolit penting, dan disamping itu, menginaktifkan sistem
enzim bakteri.
















BAB V
PENUTUP


5.1. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, diperoleh kesimpulan sebagai
berikut:
1. Jamur endofit berhasil diisolasi dari daun sirih (Piper betle L.), sebanyak 9 isolat
yaitu 5 isolat jamur dari Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten Kediri dan 4
isolat dari Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang.
2. Hasil uji 9 isolat jamur endofit, memperlihatkan bahwa semua isolat dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
dengan zona hambat 31,76 mm pada S. aureus dan 23,44 mm pada E. coli.
Sedangkan pada jamur Candida albicans memperlihatkan zona hambat sebesar 1,96
mm, dua dari isolat jamur endofit tidak bisa menghambat pertumbuhan jamur C.
albicans yaitu, isolat B1 dan isolat K1.

5.2. Saran

Berdasarkan dari hasil penelitian dapat dikemukakan beberapa saran sebagai
berikut:
1. Melakukan uji lanjutan tentang spesifikasi jenis antimikroba yang terdapat dalam
metabolit jamur endofit dari daun sirih.
2. Melakukan karakterisasi dari interaksi mikroba endofit dengan inang.

3. Melakukan pengujian terhadap konsentrasi mikroba uji dan konsentrasi metabolit
jamur endofit yang paling tepat untuk mendapatkan hasil yang maksimal di dalam
pengujian aktivitas antimikroba.









































DAFTAR PUSTAKA


Agusta, A. 2000. Minyak Atsiri Tumbuhan Tropik Indonesia. Bandung: ITB.
Agustin W, D. 2005. Perbedaan Khasiat Antibakteri Bahan Irigasi antara Hidrogen
Peroksida 3% dan Infusum Daun Sirih 20% Terhadap Bakteri Mix Majalah
Kedokteran Gigi (Dent. J.), Vol. 38. No. 1 Januari 2005: 45–47.
http://www.journal.unair.ac.id/login/jurnal/filer/DENTJ-38-1-12.pdf. Diakses
pada 12 November 2007.
Agustrini, S. 2006. Keputihan-Si Putih Yang Menganggu.
http://www.pom.go.id.medikaholistik.com/2006/journal/item. Diakses pada 4
November 2007.
Anonymous. 2007. Tanaman Obat Indonesai.
http://toiusd.multiply.com/journal/item/282. Diakses pada 12 November 2007.
Atmosukarto, I. dan Anggia P. 2006. Mikroba Endofit: Sumber Molekul Baru yang
Berpotensi. BioTrends Vol 1 Nomor 2.
Barnett, L. 1972. Illustrated Genera of Imperfect Fungi. Burgess Publishing Company.
Bonang, G dan Enggar S. K. 1982. Mikrobiologi Kedokteran untuk Laboratorium dan
Klinik. Jakarta: PT. Gramedia.
Brooks, G.F, Janet S. B., L. Nicholas O. 1996. Mikrobiologi Kedokteran. Terjemahan
Edi Nugroho dan RF Maulany. Jakarta: EGC.
Chasanah, N. 2001. Pengujian Daya Antimikroba Air Perasan Blimbing Wuluh
(Averhoa blimbi L.). Universitas Negeri Malang FMIPA. Skripsi Tidak
Diterbitkan.
Dasuki, U. A. 1991. Sistematik Tumbuhan Tinggi. Bandung: Pusat Antar Universitas
Ilmu Hayati ITB.
Dwidjoseputro. 1998. Dasar-dasar Mikrobiolog. Jakarta: Djambatan.
Gan, V.H.S dan Setiabudy, R. 1987. Farmakologi Dan Terapi. Edisi 3. Jakarta: Bagian
Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fotokimia. Bandung: ITB.
Indriana, H.H. 2005. Eksplorasi Jamur Endofit Antagonis Terhadap Phytophthora spp.
Penyebab Penyakit Busuk Pada Batang Jeruk. Skripsi. Jurusan Hama dan
Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya. Tidak
Diterbitkan.

Kartasapoetra, A.G. 1989. Teknologi Penanganan Pasca Panen. Jakarta: PT. Rineka
Cipta.
Kartasapoetra, A.G. 1992. Budidaya Tanaman Berkhasiat Obat. Jakarta: PT. Rineka
Cipta
Lay, B.W dan Sugyo H. 1992. Mikrobiologi. Jakarta: Rajawali Pers
Nurswida, I. 2002. Efektivitas Dekok Sirih Hijau dan Sirih Kuning Dalam Menghambat
Pertumbuhan Candida albicans (uji In Vitro). Universitas Brawijaya. Skripsi
Tidak Diterbitkan.
Pangarungan, E. 2003. Uji Aktivitas Antiseptik Ekstrak Air Daun Sirih [Piper betle L.]
dan Minyak Cengkeh [Syzygium Aromaticum (L.) MERR. & PERRY] Serta
Kombinasinya. Departemen Farmasi. http://fa.lib.itb.ac.id/go.php?id=jbptitbfa-
gdl-s1-2003-evapangaru-467&node=56&start=6. Diakses pada 8 November
2007.
Pelczar, M.J. dan E.S.C. Chan. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi I. Terjemahan Ratna
S.H, Teja I., S. Sutarmi dan Sri L.A. Jakarta: UI-Press.
Pelczar, M.J. dan E.S.C. Chan. 1988. Dasar-Dasar Mikrobiologi II. Terjemahan Ratna
S.H., Teja I., S. Sutarmi dan Sri L.A. Jakarta: UI-Press.
Prihatiningtias, W. 2006. Mikroba Endofit, Sumber Penghasil Antibiotik Yang
Potensial. Fakultas Farmasi UGM.
http://dianing.blogspot.com/2006_05_01_archive.html. Diakses pada 5
Oktober 2007
Radji, M. 2005. Peranan Bioteknologi dan Mikroba Endofit dalam Pengembangan
Obat Herbal. Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi. Vol. II.
Departemen Farmasi, FMIPA-UI, Majalah Ilmu Kefarmasian, ,No.3,
Desember.
Ristiati, N. P. 2000. Pengantar Mikrobiologi Umum. Proyek Pengembangan sekolah
menengah IBRD Loan Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi: Departemen
Pendidikan Nasional.
Shihab, M.Q. 1994. Membumikan Al-Qur’an: Fungsi dan Peran Wahyu dalam
Kehidupan Masyarakat. Bandung: Mizan.
Shihab, M.Q. 1996. Wawasan Al-Qur’an: Tafsir Maudhu’i atas Pelbagai Persoalan
umat. Bandung: Mizan.
Shinta. 2000. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Aktif Antimikroba dari Daun Tumbuhan
Piper sarmentosum Roxb. Ex. Hunter. Perpustakaan pusat universitas
gunadarma. http:\Antibiotik\metsekunder\jbptitbpp-gdl-s2-2002-shinta-1629-
mikroba%20-%20.

Siswandono dan Bambang S. 1995. Kimia Medisinal. Surabaya: Erlangga.
Shulman, T. S. dkk. 1994. Dasar Biologis dan Klinis Penyakit Infeksi. Edisi 4.
Penerjemah Prof. Dr. A. Samik Wahab dan Dr. Sutaryo, DSA. Yogyakarta:
UGM Press.
Sugijanto, N.E. dkk. 2004. Isolasi dan Determinasi Berbagai Jamur Endofit dari
Tanaman Aglaia elliptica, Aglaia eusideroxylon, Aglaia odorata dan Aglaia
odoratissima. Jurnal Penelitian Medika Eksakta vol. 5 no 2 Agustus.
Supardi, I. dan Sukamto. 1999. Mikrobiologi dalam Pengolahan dan Keamanan
Pangan. Bandung: Alumni
Suprihatin, S.D. 1982. Candida dan Kandidiasis pada Manusia. Jakarta: Fakultas
Kedokteran Universutas Indonesia.
Suriawiria, U. 2006. Daun Sirih,Obat Serbaguna Sepanjang Masa. Bandung: Pikiran
Rakyat.
Tjampakasari, C.R. 2006. Karakteristik Candida albicans. Cermin Dunia Kedokteran
No. 151, 200633.
http://www.kalbe.co.id/files/cdk/files/13_151_KarakteristikBiologikCandidaA
lbicans.pdf/13_151_KarakteristikBiologikCandidaAlbicans.html. Diakses pada
23 November 2007.
Triarsari, D. 2007. Manfaat Daun Sirih. Bulletin DWP PTRI Jenewa.
http://dwpptrijenewa.isuisse.com/bulletin/?p=1040. Diakses pada 12
November 2007.
Volk, W.A. dan Wheeler, M.F. 1993. Mikrobiologi Dasar 1. Terjemahan Soenarto A.
Jakarta: Erlangga.
Worang, R.L. 2003. Makalah Individu Pengantar Falsafah Sains (PPS702) Program
Pascasarjana / S3 Institut Pertanian Bogor Oktober 2003.

ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARI DAUN SIRIH (Piper betle L.) SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli, Staphylococcus aureus DAN Candida albicans

SKRIPSI

Diajukan kepada: Universitas Islam Negeri Malang Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Dalam Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)

Oleh: Miftachul Haniah NIM : 03520054

JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MALANG MALANG 2008

ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARIDAUN SIRIH (Piper betle L.) SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli, Staphylococcus aureus DAN Candida albicans

SKRIPSI

Oleh: MIFTACHUL HANIAH NIM : 03520054

Telah disetujui oleh :
Dosen Pembimbing I Dosen Pembimbing Agama

Dra. Ulfa Utami, M.Si NIP. 150 291 272

Ahmad Barizi. M.A NIP. 150 283 991

Tanggal 17 Maret 2008 Mengetahui, Ketua Jurusan Biologi

Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si NIP. 150 229 505

ISOLASI JAMUR ENDOFIT DARI DAUN SIRIH (Piper betle L.) SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Escherichia coli,

Staphylococcus aureus DAN Candida albicans SKRIPSI Oleh: MIFTACHUL HANIAH NIM : 03520054 Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi dan Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu Persyaratan Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S. Ketua 3. Lilik Harianie : Dwi Suherianto. M. Bayyinatul Muchtaromah. : Ahmad Barizi.A Tanda Tangan ( ( ( ( ) ) ) ) Mengetahui dan Mengesahkan Ketua Jurusan Biologi Dr.P : Dra.Si. 150 229 505 .Si) Tanggal : 31 Maret 2008 Susunan Dewan Penguji: 1. M. Ulfah Utami. Penguji Utama 2.Si NIP. M. M. Anggota : Ir. Sekretaris 4. drh.

dan dengan perumpamaan itu (pula) banyak orang yang diberi-Nya petunjuk." dengan perumpamaan itu banyak orang yang disesatkan Allah. tetapi mereka yang kafir mengatakan: "Apakah maksud Allah menjadikan Ini untuk perumpamaan?. adapun orang-orang yang beriman.s. tidak akan membuat kemajuan walaupun ia berada di jalan yang mulus’ (Thomas Carlyle) . dan tidak ada yang disesatkan Allah kecuali orangorang yang fasik.” (Q. Seseorang yang tanpa tujuan. Al-baqarah: 26). Maka mereka yakin bahwa perumpamaan itu benar dari Tuhan mereka. ‘Seseorang dengan tujuan yang jelas akan membuat kemajuan walaupun melewati jalan yang sulit.MOTTO ”Sesungguhnya Allah tiada segan membuat perumpamaan berupa nyamuk atau yang lebih rendah dari itu.

Sebuah Persembahan Kepada Orang Tuaku. Dan Orang Yang Selalu Ada Untukku . Adik Kecilku.

melimpahkan Rahmat-Nya kepada beliau dan keluarganya. Penulis menyadari banyak pihak yang telah berpartisipasi dan membantu dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini.A. . iringan doa dan ucapan terima kasih yang sebesarbesarnya penulis sampaikan. Dr. Prof. Dra. Dr.KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah Swt. Semoga Allah Swt. M. DSc selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi UIN Malang 3. 6.. drh. M. Segenap Dosen Universitas Islam Negeri Malang yang telah membimbing penulis selama menempuh studi di Universitas Islam Negeri Malang. terutama kepada: 1. selalu melimpahkan rahmat-Nya kepada beliau. Semoga Allah Swt. Drs. H. Ahmad Barizi. M.Si. Bayyinatul Muchtaromah.U.S.Si). Prof. selaku Dosen Pembimbing I yang telah meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan kepada penulis dengan tekun dan sabar. atas segala rahmat dan hidayah yang telah dilimpahkan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains (S. 4. 5. Ulfah Utami. Sutiman Bambang Sumitro. Imam Suprayogo selaku Rektor Universitas Islam Negeri (UIN) Malang 2. Untuk itu. Si selaku Ketua Jurusan Biologi Fakultas Sains Dan Teknologi UIN Malang. selaku Dosen Pembimbing Integrasi Sains dan Islam yang telah memberikan masukan dan meluangkan waktu untuk penulis.

Akhirnya penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis khususnya. Semoga berkah dan rahmat Allah Swt. Ayah dan Ibunda tersayang yang telah mendidik dan mencurahkan kasih sayang dengan ketulusan dan keikhlasan yang tidak akan mampu untuk membalasnya. 8. 11 Maret 2008 Penulis . Malang.7. selalu menaungi mereka. yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu. dan bagi para pembaca pada umumnya. Semoga Allah senantiasa melindungi dan melimpahkan rahmat dan ridho-Nya. Amin. Semua pihak yang telah membantu dan memberikan dukungan.

....2. Manfaat Penelitian .............................................................3.........................................3....................................................... Tujuan Penelitian ........................................................................ ABSTRAK .... PENDAHULUAN 1.... 2....................................................... Candida albicans . Sterilisasi Alat dan Bahan ....4............ 2.................4......................................2..2...................................................................................... 2...2............. 3............................. 2..................... Staphylococcus aureus.............. Prosedur Kerja ...........2............................................................. Bahan Antimikrobial ..................4................................................. 3.................................... Morfologi dan Karakteristik ......2.............. Bahan..................................... Mekanisme Kerja Bahan Antimikroba ............................................................................................ Pembuatan Media ............................. 3...... Escherichia coli .....2........................ 2.... DAFTAR ISI .1.......... 2....................................... 3.. 2... Latar Belakang ....................................DAFTAR ISI Halaman KATA PENGANTAR ...1..................... Klasifikasi ...........................................3...........................................1...............................................3........... Batasan Masalah ..................1...........................................................................1.......................................1....2............ i iii v vi vii viii 1 7 7 7 8 9 9 9 10 16 18 19 23 24 27 29 32 34 38 38 38 38 39 39 39 39 41 ....... 3.... Produksi Senyawa Antibiotika Oleh Fungi Endofit .... DAFTAR LAMPIRAN .......... Alat ..............................3........ 1..............2....... Rancangan Penelitian ................................................................................... METODE PENELITIAN 3............ Tinjauan Umum Tentang tanaman Sirih (Piper betle L.............2.. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih ........................5......... 1............... 2.........................................5...3.............. DAFTAR GAMBAR ....) ....1... 2..............1. 1... BAB I.... 3...........................4....................1........................... BAB III....................................................................... 2............................. Rumusan Masalah ............................4..... 3................ 3...................................................................1...4......... Tempat dan Waktu Penelitian ....................... BAB II...............3........... 1.......... 2.......... 2............... KAJIAN PUSTAKA 2.......3. Alat dan Bahan ............ DAFTAR TABEL ......................................................... Fungi Endofit ...................................................................1.................................3.. Manfaat dan Kandungan Kimia ........... Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Antimikroba............... Potensi Mikroba Endofit......6...

......6................................1..........4.............................. Produktifitas Metabolit Antimikroba.. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih .................................4..... 41 42 43 43 43 44 45 48 56 63 63 65 68 .................................... b.......... Identifikasi Isolat Jamur Endofit .......................2..... Identifikasi Isolat Jamur Endofit ........... Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba............... BAB V........ a....5........................................................... c....4................ LAMPIRAN .3............4....... 4............... 4..... 3............................ Uji Antimikroba Terhadap Candida albicans .............................. Kesimpulan ........ DAFTAR PUSTAKA ........... Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba....3......... BAB IV................................................................................................ Uji Antimikroba Terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .......2....... HASIL DAN PEMBAHASAN 4... Saran .......................................................................... KESIMPULAN DAN SARAN 5.. Pemurnian Jamur Endofit................. 5... 3.................................1...............

.....2.1.. Diskripsi Bentuk dan Warna Koloni Isolat Jamur Endofit......... Tebel 4.. Judul Halaman 46 57 Table 4. Rata-rata diameter zona hambat metabolit jamur endofit ...DAFTAR TABEL No. ....

. Gambar 4........... Isolat K1............ Gambar 4....................2..................... Isolat B5........................................................................................1...... Gambar 4............. Judul Halaman 45 49 50 50 51 52 53 54 55 56 Gambar 4................... Gambar 4........... 58 .....6..... Isolat K2.......................... Isolat K3.... Gambar 4...............3................................9...................... Zona hambat yang dihasilkan oleh Staphylococcus aureus.....DAFTAR GAMBAR No......................................................................................................... Gambar 4........................................................ Isolat B3....................................................................... Jamur Endofit dari Jaringan Daun Sirih (Piper battle L................ Isolat B4............................................................... Escherichia coli dan Candida albicans setelah diinkubasi selama 24 jam ..................... Gambar 4..........5......................................7............................ Gambar 4..........4.........................) ......................... Isolat B2.............. Gambar 4.................. Isolat K4.11.......10.. Gambar 4...................8.................. Isolat B1..........................

. Lampiran 3....................... Sampel Tanaman Piper betle L.................................................... Lampiran 4.... Diagram Alir Metode Kerja ........ ....... Surat Pernyataan Telah Melakukan Penelitian ........................................................... Lampiran 2.................................DAFTAR LAMPIRAN Judul Halaman 68 69 70 71 72 74 Lampiran 1........ Lampiran 5......... Lampiran 6... Data Hasil Pengukuran Zona Hambat pada Mikroba Uji ............................. Bukti Konsultasi.... Alat-alat yang Digunakan dalam Penelitian......

Metode yang digunakan adalah metode eksplorasi. aureus. Pembimbing II: Ahmad Barizi. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menyeleksi jamur endofit dari daun sirih yang mempunyai potensi sebagai penghasil antimikroba terhadap bakteri S. aureus dan E. Untuk itu diperlukan obat antimikroba yang efektif. Ketawanggede. Daun Sirih (Piper betle L. aureus. albicans yang merupakan flora normal tubuh manusia.76 mm pada S. Ulfah Utami. Ketawanggede Kec. karena tiada suatu penyakit yang diturunkan Allah. yaitu 5 isolat jamur endofit sampel dari Ds.44 mm pada E. Banyak mikroba penyebab penyakit berbahaya. Kras Kab. E. Pembimbing I: Dra. Miftachul.A. Lowokwaru Kota Malang. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sebanyak 9 isolat jamur endofit berhasil diisolasi dari daun Sirih (P. M.ABSTRAK Haniah. albicans. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium HPT Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya pada bulan Desember 2007 sampai Februari 2008. coli dan C. reproducible dalam skala industri. Penelitian dilakukan dengan cara mengisolasi jamur endofit dari daun sirih dan mengidentifikasinya. Banjaranyar Kec. Kuman uji yang digunakan diperoleh dari Lab. Antimikroba. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih (Piper betle L. Produksi metabolit sekunder jamur endofit didapat dengan metode fermentasi dan diuji aktivitasnya terhadap S. albicans yaitu. memperlihatkan bahwa semua isolat dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. E. dua dari isolat jamur endofit tidak bisa menghambat pertumbuhan jamur C. S. coli.). Beberapa penelitian menyebutkan bahwa senyawa aktif dari daun sirih memiliki aktivitas antimikroba. Sampel daun sirih diperoleh dari Ds. misalnya E. M. (HR. yaitu ketuaan”. aureus dan C. Dalam beberapa riwayat disebutkan: “Berobatlah. Jamur endofit hidup intraseluler di dalam jaringan tanaman yang sehat dan mampu memproduksi senyawa metabolit sekunder sesuai dengan tanaman inangnya. Banjaranyar dan 4 isolat jamur endofit sampel dari Kel.). 2008. isolat B1 dan isolat K1 . Namun penggunaan tanaman obat dari tanaman induknya secara terus-menerus dikhawatirkan akan menimbulkan kerusakan ekologis. Islam juga memberikan perhatian khusus dalam hal kesehatan.Si.) Sebagai Antimikroba Terhadap Escherichia coli.96 mm. albicans memperlihatkan zona hambat sebesar 1. selain dari satu penyakit. Hasil uji 9 isolat jamur endofit. Mikrobiologi Universitas Brawijaya. Jamur endofit dapat dijadikan solusi dalam penemuan antimikroba baru karena dapat diproduksi secara berkesinambungan. Abu Daud dan At-Tirmidzi dari sahabat Nabi Usamah bin Syuraik). dengan waktu yang relatif singkat. kecuali diturunkan pula obat penangkalnya. coli dengan zona hambat 31. Kata Kunci: Jamur Endofit. aureus dan 23. coli. coli dan C. betle L. Kediri dan Kel. Sedangkan pada jamur C. Staphylococcus aureus dan Candida albicans. albicans dengan metode difusi agar (Kirby-Bauer).

Allah menciptakan siang juga menciptakan malam. pernah berobat untuk dirinya sendiri.1. Dalam berbagai riwayat ditunjukkan bahwa Nabi Muhammad Saw. Latar Belakang Beberapa tahun terakhir ini.BAB I PENDAHULUAN 1. serta pernah menyuruh keluarga dan sahabatnya yang sakit agar berobat.. salah satu penyebabnya adalah mikroba. secara berpasang-pasangan misalnya.(adz-Dzariyaat/51:49) Ayat di atas menjelaskan bahwa segala sesuatu diciptakan oleh Allah Swt. Musibah berbagai penyakit tersebut merupakan cobaan dari Allah Swt. kepada hamba-Nya. begitupun penyakit juga diciptakan obatnya. ! "# % %& '( ) +. Hal ini tersirat dalam firman Allah “Dan segala sesuatu kami ciptakan berpasang-pasangan supaya kamu mengingat kebesaran Allah”. baik itu bakteri maupun jamur.'/ $ "* 01! 34 5 6 3/8 "9: "2 !7 . Golongan mikroba tersebut dapat menyebabkan penyakit yang cukup berbahaya misalnya Escherichia coli. Akan tetapi dengan segala rahmat-Nya Allah menurunkan penyakit sekaligus obatnya.. masyarakat di negara kita banyak ditimpa berbagai penyakit yang disebabkan oleh beberapa hal. Staphylococcus aureus dan Candida albicans yang dapat menyebabkan penyakit infeksi berbahaya pada manusia.

coli.. Bacillus subtilis dan Pseudomonas aerrighrosa. Pangarungan (2003) juga menyatakan bahwa telah diuji aktivitas antiseptik ekstrak daun sirih (P. Hasilnya menunjukkan bahwa ekstrak air daun sirih pada konsentrasi 8% b/v . Untuk P. Komponen utama tanaman obat yang mempunyai aktivitas antimikroba adalah bagian minyak atsiri. subtilis.) sebagai antiseptik sudah dilakukan Shinta (2000) yang menyatakan bahwa senyawa aktif dari daun sirih memiliki aktivitas antimikroba terhadap jamur Candida albicans. yaitu ketuaan”. karena tiada suatu penyakit yang diturunkan Allah. aerrighrosa. Indonesia kaya akan tumbuh-tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat berbagai penyakit. bakteri Escherichia coli. Penelitian tentang khasiat ekstrak daun sirih (Piper betle L. coli serta B.“Berobatlah. Beberapa penelitian juga menunjukkan bahwa sebagian besar komponen di dalam tanaman obat bersifat sebagai antimikroba. Pada konsentrasi 1250 gg/ml senyawa tersebut memberikan diameter daerah hambat sebesar 31 mm untuk C. dan S. termasuk penyakit infeksi yang disebabkan oleh mikroba. (HR. albicans. betle L. Abu Daud dan At-Tirmidzi dari sahabat Nabi Usamah bin Syuraik) (Shihab. kecuali diturunkan pula obat penangkalnya. Sehingga tidak mungkin Allah memberikan penyakit tanpa ada obatnya. misalnya minyak atsiri daun sirih yang bersifat antimikroba. selain dari satu penyakit. 1996). konsentrasi optimum ditemukan pada 1000 tig/ml dengan diameter daerah hambat 22 mm. albicans. aureus dengan metode koefisien fenol yang menggunakan natrium hipoklorit sebagai pengganti fenol. dan 23 mm untuk E. Piperaceae) terhadap C. Di sisi lain Allah juga memberikan anugrah berupa akal pikiran kepada manusia untuk berpikir agar dapat menemukan obat dari berbagai macam penyakit yang diturunkan oleh Allah Swt. E. Berdasarkan hadist di atas jelaslah bahwa Allah itu maha pengasih lagi maha penyayang.

tanin. karvacrok. seperti obat batuk. kavicol. Untuk mengambil senyawa bioaktif secara langsung dari tanamannya dibutuhkan sangat banyak biomassa atau bagian dari tanamannya. Mikroba endofit merupakan mikroba yang hidup dalam jaringan tumbuhan tanpa menimbulkan gejala penyakit pada tumbuhan inangnya. Mikroba endofit dapat memperoleh nutrisi untuk melengkapi siklus hidupnya dari tumbuhan . caryofelen. Karena kelengkapan kandungan zat atau senyawa kimia bermanfaat inilah. cineole. Menurut Suriawiria (2006) kandungan kimia yang terdapat pada daun sirih terdiri dari minyak atsiri. kavibetol. kadimen estragol. keputihan. terpenena. Selain sebagai antiseptik daun sirih masih mempunyai banyak manfaat lain untuk kesehatan. hidroksikavicol. Hubungan antara mikroba endofit dan tumbuhan inangnya merupakan suatu bentuk hubungan simbiosis mutualisma. p-cymene. allylprokatekol. daun sirih memiliki manfaat yang sangat luas sebagai bahan obat. yaitu sebuah bentuk hubungan yang saling menguntungkan. Untuk mengefisienkan cara memperoleh bioaktif tersebut. maka digunakan mikroba endofit spesifik yang diperoleh dari bagian dalam tanaman yang diharapkan mampu menghasilkan sejumlah senyawa bioaktif yang dibutuhkan tanpa harus mengekstrak dari tanamannya. obat sariawan. Hasil ini dapat dimanfaatkan sebagai dasar pemanfaatan daun sirih sebagai antimikroba Komponen aktif dalam daun sirih yang diduga memberikan khasiat antimikroba adalah fenol yang terkandung di dalam minyak atsiri daun sirih. dan sebagainya. menghentikan pendarahan dan sebagainya. eugenol. fenil propada. albicans.mampu menghambat pertumbuhan C. pencuci luka.

sehingga beberapa endofit terbukti menghasilkan senyawa alami yang karakteristik bagi inangnya (Tan and Zou. dapat diproduksi secara fermentasi senyawa metabolit yang berkhasiat obat secara berkesinambungan. 2001 dalam Sugijanto dkk.000 jenis tanaman yang tersebar di muka bumi ini. dengan waktu yang relatif singkat. Bila terjadi gangguan yang luar biasa terhadap salah satunya. Seluruh alam raya diciptakan untuk digunakan oleh manusia dalam melanjutkan evolusinya. Hipotesa ini memang kemudian banyak terbukti. (2004) menambahkan bahwa melalui jamur endofit yang diperoleh. Sugijanto dkk.inangnya. Jamur endofit hidup intraseluler di dalam jaringan tanaman yang sehat. Pada tanaman-tanaman obat yang sudah digunakan masyarakat tradisional secara turuntemurun ditemukan endofit yang mampu menghasilkan antibiotik kelas tinggi. reproducible dalam skala industri. Manusia sebagai . hingga mencapai tujuan penciptaan. Kemampuan mikroba endofit memproduksi senyawa metabolit sekunder sesuai dengan tanaman inangnya merupakan peluang yang sangat besar dan dapat diandalkan untuk memproduksi metabolit sekunder dari mikroba endofit yang diisolasi dari tanaman inangnya tersebut. 1994). maka makhluk yang berada dalam lingkungan hidup tersebut ikut terganggu pula (Shihab. Dari sekitar 300. Agama mengundang kita untuk membangun tanpa merusak. 2004). tidak merusak tanaman inangnya dan tidak menimbulkan kerusakan ekologis. masing-masing tanaman mengandung satu atau lebih mikroba endofit yang terdiri dari bakteri dan jamur (Radji. Kemungkinan terjadi rekombinasi genetik dengan inangnya.. sebaliknya tumbuhan inang memperoleh proteksi terhadap patogen tumbuhan dari senyawa yang dihasilkan mikroba endofit (Prihatiningtias. 2006). 2005). Kehidupan makhluk-makhluk Tuhan saling berkaitan.

khalifah dimuka bumi bertanggung jawab untuk memelihara kelestarian alam.s.”(Q. mengingat jamur endofit berdasarkan studi literatur potensial menghasilkan metabolit (Tan and Zou. E. maka peneliti tertarik untuk meneliti keberadaan mikroba endofit khususnya jamur endofit yang diisolasi dari jaringan daun Sirih (P.) yang mempunyai potensi sebagai antimikroba. S.. aureus dan jamur C. kepadamu. 2004). Penelitian ini difokuskan pada isolasi jamur endofit. aureus merupakan bakteri yang banyak digunakan dalam pengujian daya antimikroba karena merupakan bakteri yang memiliki . Darkuni (1997) dalam Chasanah (2001) menyatakan bahwa S. betle L.s. S. Sesungguhnya Allah tidak menyukai orang-orang yang berbuat kerusakan. Bakteri uji dibagi berdasarkan sifatnya terhadap pewarnaan Gram. Untuk mengetahui efektivitasnya sebagai antimikroba maka jamur endofit tersebut diujikan terhadap bakteri E. bakteri tersebut merupakan flora normal pada saluran pencernaan manusia akan tetapi menjadi patogen apabila mencapai jaringan diluar saluran pencernaan. aureus dipilih mewakili bakteri Gram positif. coli dipilih mewakili bakteri Gram negatif. Selain itu juga lebih sederhana kebutuhan medianya dan murah. Hal ini dijelaskan dalam firman Allah yang tersirat dalam Q. dan janganlah kamu melupakan bahagianmu dari (kenikmatan) duniawi dan berbuat baiklah (kepada orang lain) sebagaimana Allah telah berbuat baik. al-Qashash: 77 ! "" “ Dan carilah pada apa yang telah dianugerahkan Allah kepadamu (kebahagiaan) negeri akhirat. 2001 dalam Sugijanto dkk. coli. albicans. al-Qashash/28: 77) Berdasarkan uraian di atas. pertumbuhannya lebih mudah dikendalikan dari pada bakteri. dan janganlah kamu berbuat kerusakan di (muka) bumi.

2. Sebagai flora normal. jamur tersebut merupakan flora normal pada traktus gastrointestinal. coli. Apakah senyawa metabolit skunder yang dihasilkan jamur endofit dari jaringan daun sirih (Piper betle L. .ketahanan lebih tinggi terhadap bahan kimia yang berupa bahan antimikroba dibandingkan dengan bakteri lainnya. Candida tidak infeksius. betle L. E. dan Staphylococcus aureus? 1. Untuk mengetahui kemampuan metabolit skunder jamur endofit dari jaringan daun sirih (P. aureus. kulit. Untuk mengetahui keberadaan jamur endofit pada jaringan daun sirih (P.). Apakah jamur endofit dapat ditemukan dari jaringan daun sirih (Piper betle L. bila terjadi gangguan imunitas atau disfungsi imun.2. dan S.) sebagai antimikroba terhadap C. Jamur uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah C. Escherichia coli. Namun. infeksi Candida dapat terjadi. albicans.) mempunyai kemampuan sebagai antimikroba terhadap Candida albicans. betle L. Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang di atas maka dapat dirumuskan masalah sebagai berikut: 1. dan membran mukosa. 1. Tujuan Penelitian Berdasarkan rumusan masalah di atas maka penelitian ini bertujuan: 1.)? 2. albicans. baik yang berdiri sendiri maupun yang disebabkan oleh penyakit lain.3.

Memberikan informasi tentang adanya jamur endofit pada jaringan daun sirih (P. bakteri S. Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan untuk: 1. maka penelitian ini perlu dibatasi sebagai berikut: 1. 3.5. Senyawa antimikroba yang didapat. aureus dan jamur C.4. albicans. betle L. Jamur endofit yang digunakan dalam penelitian ini diisolasi dari jaringan daun tanaman sirih (P. Jamur C. coli dan bakteri S.1. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun sirih (P. 2. khususnya jamur endofit yang mempunyai potensi sebagai penghasil senyawa antimikroba. Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah diameter zona hambat dari berbagai isolat jamur endofit. albicans. coli. bakteri E. .).). Batasan Masalah Untuk mendapatkan penelitian yang lebih terarah. betle L. aureus yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. 2. 4. betle L. 1. 3. Memperbanyak pengetahuan di bidang mikrobiologi atau bidang lainnya. diharapkan nantinya dikembangkan lebih lanjut sehingga bermanfaat untuk menanggulangi penyakit yang disebabkan oleh bakteri E.) yang diperoleh dari Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang dan Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten Kediri.

5. . penelitian ini tidak memperhitungkan kadar kosentrasi dari zat antimokroba tersebut. Pada uji aktivitas antimikroba terhadap mikroba uji.

1. Namun. lahina atau tawuo (Nias). Daun sirih mempunyai bau yang khas aromatik.) adalah jenis tanaman merambat yang diakui banyak kegunaannya di hampir semua tempat di Indonesia dan memiliki nama yang beragam. Morfologi dan Karakteristik Sirih (Piper betle L. canbai (Lampung). belo (Batak Karo). pangkal daun berbentuk jantung yang kadang-kadang tidak . sirih (Palembang).BAB II KAJIAN PUSTAKA 2. adapula yang bulat telur memanjang. seureuh (Sunda). 2. suruh.) 2.1. rasanya agak pedas. nama yang paling umum adalah sirih (Suriawiria. Misalnya ranub (Aceh). Daunnya berupa helaian-helaian berbentuk bulat telur. 2006). sireh. Klasifikasi Menurut Dasuki (1991) kedudukan tanaman sirih dalam sistematika tumbuhan (taksonomi) diklasifikasikan sebagai berikut: Divisi Kelas Sub-kelas Ordo Famili Genus Species : Magnoliophyta : Magnoliopsida : Magnoliidae : Piperales : Piperaceae : Piper : Piper betle L.1. sirih (Minang).2. berujung runcing.1. demban (Batak Toba). Tinjauan Umum Tentang Tanaman Sirih (Piper betle L.

berfirman dalam Q. korma.1.3. 2.” (Q. Panjangnya sekitar 5 . baik jenisnya maupun manfaatnya. sedang pada bulir betina panjangnya sekitar 1. berbentuk bulat. hijau muda agak kekuning-kuningan.5 . Sesungguhnya pada yang demikian itu benarbenar ada tanda (kekuasaan Allah) bagi kaum yang memikirkan. Bunganya majemuk berbentuk bulir dan terdapat daun pelindung ± 1 mm berbentuk bulat panjang.5 . beruas dan merupakan tempat keluarnya akar.s. An-nahl/16: 11) Ayat di atas menjelaskan bahwa tumbuhan itu terdiri dari berbagai macam jenis.18 cm dan lebar 2 . Setiap jenis mempunyai manfaat tersendiri berdasarkan kandungan zat aktif yang terdapat di dalamnya. Batang sirih berwarna coklat kehijauan. 1992).setangkup.s.6 cm dimana terdapat kepala putik tiga sampai lima buah berwarna putih dan hijau kekuningan.& . Permukaan daun berwarna hijau tua. Allah Swt. zaitun. Manfaat dan Kandungan Kimia Allah menciptakan segala yang ada di langit dan di bumi dengan beranekaragam. anNahl: 11 $) % (## "# &' $! ! % *$ #$ )& .20 cm (Kartasapoetra. Manfaat-manfaat tersebut hanya bisa diketahui oleh . Pada bulir jantan panjangnya sekitar 1. $ +' “ Dia menumbuhkan bagi kamu dengan air hujan itu tanam-tanaman. Buahnya buah buni berbentuk bulat berwarna hijau keabu-abuan. anggur dan segala macam buah-buahan. Seperti tamanam sirih yang mengandung zat antiseptik yang bisa dimanfaatkan sebagai antibiotik.3 cm dan terdapat dua benang sari yang pendek. Akarnya tunggang. 2006). Tanaman sirih bisa mencapai tinggi 15 m. bulat dan berwarna coklat kekuningan (Suriawiria.

penelitian tentang tanaman ini masih terus dikembangkan. obat jantung. Khasiat daun sirih sudah banyak dikenal dan telah teruji secara klinis. Manfaat daun sirih untuk pengobatan jumlahnya sangat banyak. menghilangkan bau badan. mulai sebagai obat batuk. Sehingga bisa mempertebal keyakinan akan kebesaran Allah Swt. pelancar dahak. rematik. 2007). Tanaman ini mengandung zat antiseptik yang mampu membunuh kuman.5 % dapat menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans. gangguan lambung. Daun sirih telah berabad-abad dikenal oleh nenek moyang kita sebagai tanaman obat berkhasiat. dan menambah wawasan akan manfaat keanekaragaman tumbuhan untuk kemaslahatan umat manusia. Zat antiseptik di dalam sirih dapat digunakan sebagai obat kumur dan menjaga kesehatan alat kelamin wanita. Sirih juga umum digunakan untuk mengatasi bau badan dan mulut. gatal-gatal dan koreng. keputihan. serta mengobati keputihan pada wanita. Rebusan daun sirih juga sangat bermanfaat untuk obat sariawan. Nurswida (2002) membuktikan bahwa dekok sirih pada konsentrasi 7. Efek hambat dekok sirih terhadap pertumbuhan C. mimisan. . Daun sirih juga dapat memperbanyak keluarnya air susu ibu (ASI) untuk ibu yang baru melahirkan dengan banyak meminum air rebusan daun sirih (Anonymous. albicans disebabkan komponen derivat fenol. Hingga kini. obat gatal-gatal. menghentikan pendarahan (Suriawiria. bronchitis. 2007). pencuci luka.orang-orang yang mau memikirkan dan mengkaji secara mendalam tentang kandungannya. dan sebagainya. Kandungan fenol dalam sifat antiseptiknya lima kali lebih efektif dibandingkan dengan fenol biasa (Triarsari. 2006). sariawan. seperti eugenol. obat sakit perut yang melilit.

sineol 3.2%. anethole.2%.6–6.6–2. Dalam daun sirih 100 gram terdapat kandungan: air 85. 1987). Rosaceae dan Labiatae adalah famili tumbuhan yang sangat populer sebagai penghasil minyak atsiri (Agusta.26–0. 2000). karbohidrat 6.2%. gula dan pati.7–4. terpenoid umumnya larut dalam lemak dan terdapat di dalam sitoplasma sel tumbuhan. pirokatekin (Agustin.9%. Umbeliferae.0–1.8–15. cavibetol.1 mg.5%.3 mg. allypyrocathechol. Sifat fisik terpenting minyak atsiri adalah sangat mudah menguap pada suhu kamar dan larut dalam lemak. 2005).2% yang di dalamnya terdapat fenol yang khas disebut betelfenol. kanji 1. kalium nitrat 0.2%. safrole. Rutaceae.58%.1 mg.iseugenol. protein 3.2–4. serat 2. mineral 2.2– 11.4 mg.7 mg. Apocynaceae. riboflavin 30 mg.42 mg.2%. besi ion 3. kariofilen 6. carvacrol.8%. karoten (vitamin A) 9600 iu. diastase. Sedangkan minyak atsirinya terdiri dari: alilkatekol 2. Famili tumbuhan Lauraceae. Kadang-kadang minyak atsiri terdapat di dalam sel kelenjar khusus pada permukaan daun (Harborne. inaktivasi enzim dan denaturasi protein. khavikol. eugenol 26. kalsium 230 mg.8– 42. Sedangkan menurut Kartasapoetra (1992) komponen di dalam daun sirih meliputi minyak atsiri sampai 4. Minyak atsiri merupakan senyawa terpenoid. gula reduksi 1. betlefenol. Pinaceae. zat penyamak.4 mg. Myrtaceae. kavikol 5. Mekanisme kerja phenolic melalui perusakan membran plasma. Astereaceae. eugenol metil eter 26.4–3. tiamin 70 mg. yodium 3. kavibetol 0.1%.3 mg. kadinen 6. asam nikotinal 0. Fenol adalah denaturan protein yang poten. gula non reduksi 0. chavichol. fosfor 40 mg.0– 1.1–8. karvakol 2.5%. Secara kimia. Myristicaceae.6%. .7–9.5 mg. vitamin C 5 mg. Disini fenol Bl berkaitan dengan membran yang ergosterol akan merusak membran tersebut sehingga jamur akan mati.

Minyak atsiri daun sirih (P. 2000). b. Ada beberapa faktor yang mempengaruhi sifat/kadar bahan aktif pada tumbuhan. pemberi citra rasa pada makanan maupun produk rumah tangga lainnya (Agusta.Fungsi minyak atsiri yang paling luas dan paling umum diminati adalah sebagai pengharum. 2000). Klebsiella dan Pasteurella (Agusta. Kebanyakan minyak atsiri bersifat sebagai antibakteri dan antijamur yang kuat. Tanaman jenis unggul dapat memberikan produk lebih baik dan banyak dari jenis tanaman tidak unggul. pengharum sabun. Salmonella sp. bau. pasta gigi. komposisi kimiawi. Menurut Kartasapoetra (1989) faktor yang mempengaruhi sifat/kadar bahan aktif pada tumbuhan antara lain adalah sebagai berikut: a. Setiap tanaman memiliki senyawa aktif yang berbeda satu sama lain. Staphylococcus aureus. pengharum ruangan. seperti rasa. Faktor Genetik Faktor ini menyesuaikan sifat hasil tanaman yang mana sifat ini merupakan sifat bawaan dari induk tanamannya. Faktor lingkungan/faktor luar ini dapat dikatakan pula faktor lingkungan hidup seperti: . Faktor Lingkungan Faktor lingkungan merupakan faktor luar dari tanaman yang juga banyak berpengaruh terhadap sifat/kadar bahan aktif pada tumbuhan. betle L. baik itu sebagai parfum untuk tubuh. Minyak ini dapat menghambat pertumbuhan beberapa jenis bakteri merugikan seperti Escherichia coli. nilai gizi dan termasuk kemampuan produksinya. kosmetik.) merupakan salah satu minyak atsiri yang bersifat antibakteri.

• Sinar Matahari Sinar matahari banyak berpengaruh pada pembentukan zat makanan dalam jaringan tanaman. Mutu hasil tanaman yang tanamannya tumbuh di tempat/daerah yang mempunyai ketinggian tertentu yang tanahnya merupakan tanah . • Tempat/Daerah Pertumbuhan Tempat/daerah pertumbuhan merupakan faktor geografis yang kaitannya sangat erat dengan macam atau sifat tanahnya. temperatur lingkungan yang optimum merupakan faktor yang penting karena berpengaruh terhadap produksi hasil-hasil tanamannya (pembentukan zat-zat makanan dalam jaringan). Sebagai contoh misalnya pada buah yang tanamannya banyak menerima sinar matahari kandungan vitamin C-nya akan lebih tinggi dibanding dengan buah yang tanamannya kurang memperoleh sinar matahari. • Musim Musim juga sangat berpengaruh terhadap produksi hasil-hasil tanamannya (pembentukan zat-zat makanan dalam jaringan). Hasil tanaman yang tanamannya biasa tumbuh pada musim kering yang panas akan mengandung zat makanan lebih tinggi. • Temperatur Bagi tanaman. Hasil penelitian menyatakan bahwa banyak atau sedikitnya sinar matahari yang diterima tanaman akan mempengaruhi pembentukan zat-zat makanan dalam jaringan dan sifat hasil tanamannya. melalui fotosintesis misalnya pembentukan zat makanan dalam jaringan tanaman itu akan sangat terbantu. Hasil tanaman yang tumbuh baik pada kondisi temperatur yang cocok akan sangat berbeda dengan hasil tanaman yang tumbuh pada temperatur yang tidak cocok.

2. Pemupukan dengan dosis yang memadai dimaksudkan agar zat makanan cukup tersedia bagi pertumbuhan tanaman. berfirman dalam Q. / $ “Sesungguhnya Allah tiada segan membuat perumpamaan berupa nyamuk atau yang lebih rendah dari itu…….lempung akan berbeda dengan mutu hasil tanaman sejenis yang tumbuh pada ketinggian yang sama yang tanahnya merupakan tanah berkapur. • Zat Makanan Zat makanan atau pupuk juga merupakan faktor yang dapat meningkatkan hasil tanaman. al-Baqarah/2: 26). asparagus. Akan tetapi tidak semua tujuan tersebut diketahui oleh manusia sehingga harus dipelajari terlebih dahulu. Hasil penelitian menyatakan bahwa dengan makin masaknya hasil tanaman. al-Baqarah: 26 " 23' **' !1% '()0 .. apel dan sebagainya. sedangkan keadaan tersebut akan mengurangi sifat dan mutu hasil tanaman. Tanaman yang tumbuh pada lahan yang kurang kandungan zat makanan maka menyebabkan tanaman tersebut akan tumbuh kerdil. . Faktor Tingkat Kemasakan Perbedaan tingkat kemasakan sangat berpengaruh pada zat-zat penyusun yang terkandung. Allah Swt. mangga.s. zat gulanya makin meningkat pula. anggur. sedangkan kandungan vitamin C pada umumnya menurun kecuali pada buah/hasil tanaman seperti tomat.”(Q. maka kandungan zat tepung. Fungi Endofit Segala sesuatu yang ada di muka bumi diciptakan bukan tanpa tujuan.2. tekstur dan warna hasil tanaman.s. c.

Pada kelompok ini fungi endofit menginfeksi ovula (benih) inang. 1988 .Pada ayat di atas terdapat lafadz fama fauqohaa yang diartikan sebagai hewan yang lebih kecil dari nyamuk.. yang penyebarannya terjadi secara bebas melalui air dan udara. Fungi ini menginfeksi tumbuhan sehat pada jaringan tertentu dan mampu menghasilkan mikotoksin. 1988 dalam Worang. . dan penyebarannya melalui benih serta organ penyerbukan inang. Asosiasi fungi endofit dengan tumbuhan inangnya. oleh Carrol (1988) dalam Worang (2003) digolongkan dalam dua kelompok. Clay. (2001) dalam Radji (2005) menambahkan bahwa setiap tanaman tingkat tinggi dapat mengandung beberapa mikroba endofit yang mampu menghasilkan senyawa biologi atau metabolit sekunder yang diduga sebagai akibat koevolusi atau trasfer genetik (genetic recombination) dari tanaman inangnya ke dalam mikroba endofit. yaitu mutualisme konstitutif dan induktif. Walaupun keberadaanya tidak bisa dilihat secara kasat mata. Dapat diasumsikan bahwa hewan yang lebih kecil dari nyamuk tersebut termasuk mikroba. ranting ataupun akar tumbuhan. Jenis ini hanya menginfeksi bagian vegetatif inang dan seringkali berada dalam keadaan metabolisme inaktif pada periode yang cukup lama. seperti daun. 2003). Tan et al. salah satunya adalah mikroba endofit yang dapat menghasilkan zat antibiotik yang dapat dimanfaatkan sebagai obat. Fungi endofit adalah fungi yang terdapat di dalam sistem jaringan tumbuhan. enzim serta antibiotika (Carrol. Mutualisme induktif adalah asosiasi antara fungi dengan tumbuhan inang. mikroba tertentu ada yang bermanfaat bagi kehidupan manusia. Mutualisme konstitutif merupakan asosiasi yang erat antara fungi dengan tumbuhan terutama rumput-rumputan. bunga.

mengemukakan bahwa fungi endofit meliputi genus Pestalotia. (Bacon. Balansiopsis. 1992. Dalam simbiosis ini. Petrini et al.. Petrini et al. dan lain-lain.1. hewan dan tumbuhan. Balansiae. . bahwa fungi endofit dimasukkan dalam famili Balansiae yang terdiri dari 5 genus yaitu Atkinsonella. (1996) dalam Worang (2003). menunjukkan aktivitas yang tinggi dari penisilin N. Strobell et al.Ditinjau dari sisi taksonomi dan ekologi. Monochaetia. 2003). 1994 dalam Worang. Epichloe dan Myriogenospora. dan Pyrenomycetes.2. Clay (1988) dalam Worang (2003) melaporkan. sporiofungin A. Genus Balansiae umumnya dapat menginfeksi tumbuhan tahunan dan hidup secara simbiosis mutualistik dengan tumbuhan inangnya. Keragaman pada jasad ini cukup besar seperti pada Loculoascomycetes. (1986) dalam Worang (2003). Rao. terutama dari genus Coniothirum dan Microsphaeropsis (Petrini et al. 2003). B. yang diisolasi dari tumbuhan Cardamin heptaphylla Schulz. 1992 dalam Worang. 1991. fungi ini merupakan organisme yang sangat heterogen. 2. fungi dapat membantu proses penyerapan unsur hara yang dibutuhkan oleh tumbuhan untuk proses fotosintesis serta melindungi tumbuhan inang dari serangan penyakit.. Discomycetes. dan Cryptosporiopsis sp. serta C yang dihasilkan oleh isolat-isolat endofit Pleurophomopsis sp. Produksi Senyawa Antibiotika oleh Fungi Endofit Banyak kelompok fungi endofit yang mampu memproduksi senyawa antibiotika yang aktif melawan bakteri maupun fungi patogenik terhadap manusia. (1992) dalam Worang (2003) menggolongkan fungi endofit dalam kelompok Ascomycotina dan Deuteromycotina. Pestalotiopsis. dan hasil dari fotosintesis dapat digunakan oleh fungi untuk mempertahankan kelangsungan hidupnya. Penelitian Dreyfuss et al.

Diheterospora. 1976.. yang diisolasi dari buah strawberry (Moussaif et al. Pada suatu studi perbandingan yang dilakukan terhadap berbagai fungi. antioksidan dan sebagainya (Prihatiningtias.2. namun yang paling banyak ditemukan adalah golongan fungi dan aktinomisetes. Siklosporin dihasilkan oleh strain Acremonium luzulae (Fuckel) W. 2003). Scopulariopsis dan Spiroidium (Morin. suatu kelompok fungi yang berasosiasi dengan tumbuhan berkayu.2.Penelitian Brunner dan Petrini (1992) yang melakukan seleksi pada lebih dari 80 spora fungi endofit. Gams.. 1982 dalam Worang. Selanjutnya juga ditemukan pada fungi Anixiopsis. 1977 dalam Worang. Paecilomyces. 2. 1992 dalam Worang. antimalaria. anti HIV. Fungi endofit juga mampu menghasilkan siklosporin A. dan aktinomisetes. 2006). juga merupakan penghasil metabolit sekunder.. sedangkan fungi pembandingnya hanya 28 % (Petrini et al. fungi/jamur. . Senyawa antibiotika lainnya seperti sefalosporin mulanya dihasilkan oleh satu strain Cephalosporium dan Emericellopsis (Acremonium). Disamping mampu menghasilkan senyawa-senyawa antimikroba. 2003). 1992 dalam Worang 2003). Mikroba endofit ini mendapat perhatian besar karena dapat menghasilkan senyawa bioaktif yang berpotensi sebagai antibiotik disebabkan oleh aktivitasnya yang besar dalam membunuh mikrobamikroba patogen. mikroba endofit juga mampu menghasilkan senyawa-senyawa yang berpotensi sebagai antikanker. Arachnomyces. 2003). Fungi endofit Xylotropik. yang berpotensi sebagai antifungal dan bahan imunosupresif (Borel et al. hasilnya menunjukkan bahwa 75 % fungi endofit mampu menghasilkan antibiotika. Potensi Mikroba Endofit Mikroba endofit terdiri atas bakteri.. lebih dari 49 % isolat Xylotropik yang diuji menunjukkan aktivitas antibiotika. Petrini et al.

Jenis endofit lainnya yang juga menghasilkan antibiotika berspektrum luas adalah mikroba endofit yang diisolasi dari tanaman Grevillea pteridifolia. 2005). Dilihat dari segi efisiensi. 2006). dan jumlah senyawa yang diproduksi dapat dibuat dalam skala yang besar dengan menggunakan proses fermentasi. 2.. Demikian pula metabolit sekunder yang diproduksi oleh mikroba endofit tersebut telah berhasil diisolasi dan dimurnikan serta telah dielusidasi struktur molekulnya. yaitu menjaga kelestarian tumbuhan-tumbuhan obat. ada keuntungan lain yang diperoleh. dan berhasiat sebagai antijamur yang patogen terhadap manusia yaitu Candida albicans dan Trichopyton spp. Aktifitas antibakterinya sama . Di samping hal-hal yang sudah disebutkan di atas. Beberapa diantaranya adalah : 1. dan telah berhasil dibiakkan dalam media perbenihan yang sesuai. Endofit ini menghasilkan metabolit kakadumycin.Mikroba endofit yang diisolasi dari tumbuhan obat akan memiliki aktivitas yang lebih besar. sehingga dapat menghemat waktu yang dibutuhkan untuk mendapatkan senyawa tersebut. Mikroba endofit yang menghasilkan antibiotika Cryptocandin adalah anti-fungi yang dihasilkan oleh mikroba endofit Cryptosporiopsis quercina yang berhasil diisolasi dari tanaman obat Tripterigeum wilfordii. (Strobel et al. hal ini sangat menguntungkan. terutama yang termasuk jenis tumbuhan langka. Radji (2005) menyebutkan bahwa berbagai jenis endofit telah berhasil diisolasi dari tanaman inangnya. karena siklus hidup mikroba endofit lebih singkat dibandingkan siklus hidup tumbuhan inangnya. 1999 dalam Radji. bahkan dapat memiliki aktivitas yang lebih besar dibandingkan aktivitas tumbuhan inangnya. agar tidak dieksploitasi secara terus menerus yang akhirnya akan mengakibatkan kepunahan (Prihatiningtias.

Mikroba endofit yang menghasilkan metabolit sebagai antikanker Paclitaxel dan derivatnya merupakan zat yang berkhasiat sebagai antikanker yang pertama kali ditemukan yang diproduksi oleh mikroba endofit. 2002 dalam Radji. 2005). merupakan endofit yang diisolasi dari tanaman Artemisia annua.. 2005). et al. dapat menghasilkan metabolit cytonic acid A dan B. menghasilkan metabolit artemisinin yang sangat potensial sebagai anti malaria (Lu H... wallichiana. yang struktur malekulnya merupakan isomer p-tridepside.seperti munumbicin D. Mikroba endofit penghasil zat anti malaria Colletotrichumsp. 2003 dalam Radji. umumnya diproduksi oleh endofit Pestalotiopsis microspora. 2000 dalam Radji. 3.. 2005). 4. 5. Demikian pula upaya untuk sintesisnya telah berhasil dilakukan (Strobel et al. Senyawa yang dapat mempengaruhi molekul tubulin dalam proses pembelahan sel-sel kanker ini. brevifolia. T. berhasiat sebagai anti virus. Saat ini beberapa jenis endofit lainnya telah dapat diisolasi dari berbagai jenis Taxus dan didapatkan berbagai senyawa yang berhasiat sebagai anti tumor. juga mampu menghasilkan alkaloid cinchona yang dapat . yang diisolasi dari tanaman Taxus andreanae. (Guo et al. Cytonic acid A dan B ini merupakan protease inhibitor dan dapat menghambat pertumbuhan cytomegalovirus manusia. 2005). Di samping itu beberapa mikroba endofit yang diisolasi dari tanaman Cinchona spp. Paclitaxel merupakan senyawa diterpenoid yang didapatkan dalam tanaman Taxus. Mikroba endofit yang memproduksi antivirus Jamur endofit Cytonaema sp. 2000 dalam Radji. dan T. dan kakadumycin ini juga berkhasiat sebagai anti malaria (Castillo et al.

Gan (1987) menambahkan bahwa antibiotika adalah zat yang . 2002 dalam Radji.dan bila dimaksudkan untuk kelompok-kelompok organisme yang khusus. 6. 2. 2005). 7.. Baik pestacin ataupun isopestacin berhasiat sebagai antioksidan. Endofit yang menghasilkan metabolit yang berkhasiat sebagai antidiabetes Endofit Pseudomassaria sp yang diisolasi dari hutan lindung. 2005).3. 2002 dalam Radji. maka seringkali digunakan istilah-istilah seperti antibakterial atau antifungal (Pelczar.1999 dalam Radji. Menurut Brooks dkk. Dalam penggunaan umum.. Dalam uji praklinik terhadap binatang coba membuktikan bahwa aktivitasnya sangat baik dalam menurunkan glukosa darah tikus yang diabetes. Endofit yang memproduksi antioksidan Pestacin dan isopestacin merupakan metabolit sekunder yang dihasilkan oleh endofit P. (1996) zat antimikroba yang berasal dari mikroorganisme dinamakan antiboitika. 1988). senyawa ini tidak rusak jika diberikan peroral. Senyawa ini sangat menjanjikan karena tidak sebagaimana insulin. istilah ini menyatakan penghambatan pertumbuhan. microspora.dikembangkan sebagai sumber bahan baku obat anti malaria (Simanjuntak et al. yang tumbuh di Papua New Guinea. Endofit ini berhasil diisolasi dari tanaman Terminalia morobensis. Bahan Antimikrobial Bahan antimikroba adalah suatu bahan yang dapat menganggu pertumbuhan dan metabolisme mikroba.. menghasilkan metabolit sekunder yang bekerja seperti insulin. Hasil tersebut diperkirakan dapat menjadi awal dari era terapi baru untuk mengatasi diabetes di masa mendatang (Zhang et al. 2005). dimana aktivitas ini diduga karena struktur molekulnya mirip dengan flavonoid (Strobel et al.

h. Mudah larut dalam air dan stabil. dan bersifat dapat membasmi mikroba jenis lain. Tidak mengakibatkan resisten pada mikroba patogen. Suatu zat antimikroba yang ideal memiliki toksisitas selektif. Berspektrum luas. g. b. c. Konsentrasi antimikroba dalam jaringan atau darah harus dapat mencapai taraf cukup tinggi sehingga mampu menghambat atau mematikan. Tidak melenyapkan flora mikroba normal dalam tubuh inang. e.dihasilkan oleh suatu mikroba. Mencegah penyebaran penyakit dan infeksi. Dijelaskan lebih lanjut oleh Pelczar (1988) tujuan utama pengendalian mikroba adalah: a.. Membasmi mikroorganisme pada inang yang terinfeksi. c. Pelczar (1988) mengemukakan beberapa hal pokok yang harus dipenuhi oleh suatu bahan antimikroba yaitu: a. terutama fungi. f. b. d. 1996). Tidak menimbulkan efek samping pada inang dalam jangka waktu yang lama. Siswandono (1995) menambahkan bahwa antibiotika dapat dikelompokkan berdasarkan spektrum aktifitasnya: . Artinya bahwa suatu obat berbahaya bagi parasit tetapi tidak membahayakan inang (Brooks dkk. Harus mempunyai kemampuan untuk merusak atau menghambat mikroorganisme patogen spesifik. Mencegah pembusukan dan perusakan oleh mikroba. Tetap aktif dalam plasma darah.

a. Antibiotika dengan spektrum luas, efektif baik terhadap bakteri Gram positif maupun bakteri Gram negatif. b. Antibiotika yang aktifitasnya lebih dominan terhadap bakteri Gram positif. c. Antibiotika yang aktifitasnya lebih dominan terhadap bakteri Gram negatif. d. Antibiotika yang aktifitasnya lebih dominan terhadap Mycobacteriae. e. Antibiotika yang aktif terhadap jamur/antijamur. f. Antibiotika yang aktif terhadap neoplasma (antikanker)

2.3.1. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Antimikroba Banyak faktor dan keadaan yang dapat mempengaruhi kerja bahan atau zat mikroba. Faktor-faktor yang mempengaruhi kerja zat antimikroba harus diperhatikan guna keefektifan penggunaan zat antimikroba tersebut. Ada beberapa faktor yang dapat mempengaruhi kerja zat antimikroba, diantaranya adalah: umur bakteri, konsentrasi zat antimikroba, suhu, kandungan bahan antimikroba, dan sebagainya. Menurut Ristiati (2000) bahwa kecapatan populasi mikroba mengalami kematian erat hubungannya dengan umur mikroba. Pada umumnya mikroba yang lebih muda daya tahannya lebih rendah dibandingkan dengan bakteri yang lebih tua (fase stasioner). Kemampuan suatu bahan dalam menghambat atau membentuk mikroba tergantung pada tinggi rendahnya konsentrasi dan bahan antimikroba. Pada umumnya, kecepatan kematian mikroba berhubungan secara langsung dengan konsentrasi antimikroba. Ini berarti semakin tinggi konsentrasi antimikroba yang digunakan, semakin cepat mikroba terbunuh. Sedangkan menurut Darkuni (1997) dalam Chasanah (2001) menyatakan bahwa keefektifan suatu bahan antimikroba untuk menghambat atau membunuh

mikroorganisme ditentukan dari rendahnya konsentrasi bahan yang digunakan, tetapi mempunyai daya hambat atau daya bunuh besar. Beberapa hal yang dapat mempengaruhi kerja zat antimikroba menurut Pelczar (1988) adalah sebagai berikut: a. Konsentrasi atau intensitas zat antimikroba Semakin tinggi konsentrasi suatu zat antimikroba semakin tinggi zat antimikrobanya, artinya banyak bakteri akan terbunuh lebih cepat bila konsentrasi zat tersebut lebih tinggi. b. Jumlah mikroorganisme Semakin banyak jumlah organisme yang ada makin banyak pula waktu yang diperlukan untuk membunuhnya. c. Suhu Kenaikan suhu yang besar dapat menaikkan keefektifan suatu desinfektan atau bahan mikrobial lain. Hal ini disebabkan karena zat kimia merusak mikroorganisme melalui reaksi kimia. Dan reaksi kimia dipercepat dengan meningkatkan suhu. d. Spesies mikroorganisme Spesies mikroorganisme menunjukkan ketahanan yang berbeda-beda terhadap suatu bahan kimia tertentu. e. Adanya bahan organik Adanya bahan organik asing dapat menurunkan keefektifan zat kimia antimikrobial dengan cara menginaktifkan bahan kimia tersebut. Adanya bahan organik dalam campuran zat antimikrobial dapat mengakibatkan

1) Penggabungan zat antimikrobial dengan bahan organik membentuk produk yang tidak bersifat antimikrobial. 2) Penggabungan zat antimikrobial dengan bahan organik menghasilkan suatu endapan sehingga antimikrobial tidak mungkin lagi mengikat mikroorganisme 3) Akumulasi bahan organik pada permukaan sel mikroba menjadi suatu pelindung yang akan mengganggu kontak antara zat antimikrobial sengan sel. f. Keasaman atau kebasaan (pH) Mikroorganisme yang hidup pada pH asam dapat dibasmi pada suhu yang lebih rendah dan dalam waktu yang lebih singkat bila dibandingkan dengan mikroorganisme yang sama di dalam lingkungan yang basa. Kenaikan suhu dapat meningkatkan keefektifan suatu disinfektan atau bahan antimikroba. Hal ini disebabkan dengan meningkatnya suhu akan dapat mempercepat laju reaksi kimia, sehingga akan semakin cepat pula zat tersebut untuk merusak mikroba. Sedangkan adanya kandungan bahan organik akan dapat menghambat atau menurunkan keefektifan zat antimikroba, yang mengakibatkan kemampuan bahan antimikroba menjadi lemah. Disamping itu, pH dan spesies mikroba juga berpengaruh terhadap keefektifan kerja zat antimikroba.

2.3.2. Mekanisme Kerja Bahan Antimikroba Brooks dkk. (1996) menyatakan bahwa pada dasarnya mekanisme kerja zat antimikroba adalah penghambatan sintesis dinding sel, fungsi selaput sel, sintesis protein dan sintesis asam nukleat.

bahan antimikroba yang ampuh akan menghambat pembentukan ikatan glikosida sehingga pembentukan dinding sel baru tergangu. Keberadaan lapisan peptidoglikan ini menyebabkan dinding sel bersifat kaku dan kuat sehingga mampu menahan tekanan osmotik dalam sel yang kaku. Merusak dinding sel Pada umumnya bekteri memiliki suatu lapisan luar yang kaku disebut dinding sel. Dinding sel ini berfungsi untuk mempertahankan bentuk dan menahan sel. c.Menurut Pelczar (1988) cara kerja zat antimikroba dalam melakukan efeknya terhadap mikroorganisme adalah sebagai berikut : a. membran ini tersusun atas fosfolipid dan protein. dinding sel bakteri tersusun atas lapisan peptidoglikan yang merupakan polimer komplek yang terdiri atas rangkaian asam N-asetil glukosamin dan asam N-asetilmuramat yang tersusun secara bergantian. b. Struktur dinding sel dapat dirusak dengan cara menghambat pembentukannya atau dengan mengubahnya setalah selesai dibentuk. Hal ini berati bahwa gangguan apapun yang terjadi pada pembentukan atau fungsi zat-zat tersebut dapat mengakibatkan kerusakan total pada sel. Selanjutnya dijelaskan bahwa pada konsentrasi tinggi bahan antimikroba akan memyebabkan ikatan glikosida menjadi terganggu dan pembentukan dinding sel terhenti. Merubah permeabilitas sel Sitoplasma dibatasi oleh selaput yang disebut membran sel yang mempunyai permeabilitas selektif. Bahan antimikroba yang dapat mendenaturasi protein dan asam nukleat dapat merusak sel tanpa dapat diperbaiki lebih lanjut. Merubah molekul protein dan asam nukleat Kelangsungan hidup sel sangat tergantung pada molekul-molekul protein dan asam nukleat. Pada konsentrasi rendah. Membran .

maka permeabilitas sel bakteri akan mengalami perubahan. hal ini dapat menyebabkan sel bakteri hancur dan akan mati. . sehingga aktifitas sel bakteri akan terganggu. Dengan demikian kerja enzim yang terhambat akan menyebabkan proses metabolisme terganggu. beberapa bahan antimikroba dalam bentuk antibiotik dapat menghambat sintesis protein. air raksa dan senyawa logam berat lain. banyak zat kimia telah diketahui dapat mengganggu reaksi biokimia misalnya logam berat. RNA dan protein mengalami gangguan atau hambatan pada pembentukan atau fungsi zat tersebut dapat mengakibatkan kerusakan sel sehingga proses kehidupan sel terganggu. di dalam membran sitoplasma juga terdapat enzim protein untuk mensintesis peptidoglikan komponen membran luar. Menghambat sintesis asam nukleat dan protein DNA. Apabila fungsi membran sel terganggu oleh adanya bahan antimikroba. golongan tembaga. d. RNA. Menghambat kerja enzim Di dalam sel terdapat enzim protein yang membantu kelangsungan proses-proses metabolisme. e. dan protein memegang peranan penting dalam proses kehidupan normal sel. perak.sitoplasma berfungsi mengatur keluar masuknya bahan-bahan tertentu dalam sel. sehingga akan mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau kematian sel . umumnya efektif sebagai bahan antimikroba pada konsentrasi relatif rendah. Proses pengangkutan zat-zat yang lebih diperlukan baik kedalam maupun keluar sel kemungkinan karena didalam membran sel terdapat protein pembawa (carrier). Apabila keberadaan DNA.

4. tidak berkapsul. coli ada tiga macam yaitu: antigen O (somatik) yang terdiri dari polisakarida. Escherichia coli Bakteri Escherichia coli termasuk basil coliform. pH minimum pada 4. mempunyai ukuran panjang 2. ada struktur membran kedua. Bakteri Escherichia coli merupakan penghuni normal dalam saluran pencernaan manusia dan hewan. pH optimum untuk pertumbuhannya adalah pada 7. 1986). Kandungan lipid diding sel bakteri Gram negatif lebih tinggi (11-22 %) dari pada yang dikandung bakteri Gram positif. Volk (1993) menambahkan bahwa bakteri Gram negatif mengandung lebih sedikit peptidoglikan (10 sampai 20 persen bobot kering dinding sel). Di samping itu terdapat antigen fimbria yang ikut berperan dalam penentuan starin dari berbagai serotype E. Bakteri ini berbentuk batang.0 dan maksimum pada pH 9.2. merupakan bakteri Gram negatif.0. peptidoglikan ada di dalam lapisan kaku sebelah dalam (Pelczar. coli (Supardi.5.5 µm. yang tersusun dari protein. . berpasangan. tersusun tunggal.0–7. Escherichia coli tumbuh pada suhu antara 10-40o C. dengan flagella peritikus. dengan suhu optimum 37o C. umumnya mempunyai fimbria dan bersifat motile. Susunan antigen yang penting dalam penentuan serologi E. 1999). Concey dan EMB membentuk koloni merah muda sampai tua dengan kilat logam yang spesifik dan permukaan halus (Supardi.0–6. Bakteri ini sangat sensitif terhadap panas.1–1. Bakteri Gram negatif memiliki struktur dinding sel yang tipis (1015 nm) dan berlapis tiga (multi).0 µm dan lebar 1. H (flagellar) dan K (kapsul). Bakteri ini mampu meragi laktosa dengan cepat sehingga pada agar Mc. 1999). anaerobik fakultatif. fosfolipida dan lipopolisakarida (asam lemak yang dirangkai dengan polisakarida). tetapi di luar lapisan peptidoglikan.

Berdiameter sekitar 0. 1999). Pembelahan sel terjadi . coli adalah kemampuan untuk melakukan adesi pada sel-sel hewan dan manusia. Kemampuan untuk adesi ini diduga disebabkan oleh adanya fimbria atau pili yang dapat menyebabkan adesi dan kolonisasi strain ETEK pada hewan dan manusia (Supardi. 1999). katalase-negatif. Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus adalah suatu kokus tidak berfaglela. Strain yang termasuk grup II ini disebut Escherichia coli enterotoksigenik (EPET).5 µm. Serotype dari E.5. Grup I terdiri dari strain yang bersifat patogenik. coli yang dapat menyebabkan diare pada manusia disebut Escherichia coli enteropatogenik (EPEK). tidak bergerak.Sejak 1940 di Amerika Serikat telah ditemukan strain-strain E. sedangkan grup II terdiri dari strain yang memproduksi enterotoksin dan menyebabkan gejala enterotoksigenik. 1998) bakteri E. Salah satu faktor yang mempengaruhi sifat patogenik E. tetapi tidak dapat memproduksi toksin. starin enteropatogenik Escherichia coli (EPEK) dapat dibedakan menjadi dua grup. coli yang tidak merupakan flora normal saluran pencernaan. Gram positif. dan merupakan bakteri penyebab diare yang banyak menyerang bayi (Supardi.5-I. Berdasarkan sifat patogenik dan produksi toksinnya. Menurut Bergey’s manual of Determinative Bacteriology edisi ketujuh (Dwidjosaputro. coli diklasifikasikan sebagai berikut: Divisi Kelas Ordo Familia Genus Spesies : Protophyta : Schizomycetes : Eubacteriales : Enterobacteriaceae : Escherichia : Escherichia coli 2.

1999). (3) toksin F dan S.α yang sangat beracun. S. (2) toksin . Supardi (1999) menambahkan bahwa bakteri ini tidak dapat tumbuh pada media sintetik yang tidak mengandung asam amino atau protein. halus. Bakteri ini bersifat anaerobik sangat lambat. Bakteri S. aureus mudah tumbuh pada kebanyakan pembenihan bakteri dalam keadaan aerobic atau mikroaerofilik. tetapi membentuk pigmen paling baik pada suhu kamar (20-25oC). aureus biasanya berpigmen. menyebabkan infeksi berat pada individu yang terjadinya sehat. 1986). yaitu suatu enzim yang dapat menggumpalkan plasma. warna kuning muda sampai jingga tua atau kuning lemon oleh pigmen karotinoid yang dihasilkan mikoroorganisme (Shulman dkk. Koloni pada pembenihan padat berbentuk bundar. diantaranya: (1) eksotoksin . 1994).pada lebih dari satu bidang sehingga terbentuk masa tidak teratur menyerupai untaian anggur. S. Bakteri ini tumbuh paling cepat pada suhu 37o C.. aureus memproduksi koagulase dan dapat memfermentasikan glukosa dan mannitol dengan memproduksi asam dalam keadaan anaerobik. Lapisan peptidoglikan pada bakteri Gram positif ada sebagai lapisan tunggal dengan jumlah lebih dari 50 % berat kering (Pelczar. (4) . yaitu suatu komponen yang dapat menyebabkan lisis pada sel darah merah. Bakteri Gram positif mempunyai struktur dinding sel yang tebal yaitu 15–80 nm dan berlapis tunggal (mono). S. sedangkan kandungan lipidnya rendah yaitu 1–4 %. Bakteri ini sangat patogen. Koloni S.β yang terdiri dari hemolisin. Selain memproduksi koagulase. menonjol dan berkilau. aureus juga dapat memproduksi berbagai toksin. aureus akan tahan terhadap lisis yang disebabkan oleh enzim lysozim dan memproduksi enzim fosfatase dan deoksiribonuklease (Supardi.

1998) bakteri S. 1999). mulut dan tenggorokan dan dapat dikeluarkan pada waktu batuk atau bersin. Dijelaskan lebih lanjut oleh Supardi (1999) bahwa S. kelenjar keringat dan saluran usus. aureus diklasifikasikan sebagai berikut: Divisi Kelas Ordo Familia Genus Spesies : Protophyta : Schizomycetes : Eubacteriales : Micrococcaceae : Staphylococcus : Staphylococcus aureus 2. yaitu suatu enzim yang dapat memecah asam hyaluronat di dalam tenunan sehingga mempermudah penyebaran bakteri ke seluruh tubuh.hialuronidase. Menurut Bergey’s manual of Determinative Bacteriology edisi ketujuh (Dwidjosaputro.6. (5) suatu grup enteotoksin yang terdiri dari protein sederhana (Supardi. taksonomi Candida albicans adalah sebagai berikut: Divisi Famili Sub famili Genus : Deuteromycota : Cryptococcaceae : Candidoidea : Candida . aureus hidup sebagai saprofit di dalam saluran-saluran pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan hewan seperti hidung. Bakteri ini juga sering terdapat pada pori-pori dan permukaan kulit. Candida albicans Menurut Lodder (1970) dalam Suprihatin (1982).

Dinding sel C. bergantung pada umurnya. dengan ukuran 2 − 5µ × 3 − 6 µ hingga 2-5. 1982). Fungsi utama dinding sel tersebut adalah memberi bentuk pada sel dan melindungi sel ragi dari lingkungannya.Spesies : Candida albicans C. Pada tepi koloni dapat dilihat hifa semu sebagai benangbenang halus yang masuk ke dalam medium. berwarna putih kekuningan dan berbau ragi. C. licin atau berlipat-lipat. berbentuk bulat atau seperti botol. Hifa semu terbentuk dengan banyak kelompok blastospora berbentuk bulat atau lonjong di sekitar septum. halus.5 µ. Besar koloni bergantung pada umurnya. Komposisi primer . Pada medium cair jamur biasanya tumbuh pada dasar tabung (Suprihatin. Pada beberapa strain. umumnya berbentuk bulat dengan permukaan sedikit cembung. albicans tumbuh di dasar tabung (Tjampakasari. Sel jamur Candida berbentuk bulat. albicans berfungsi sebagai pelindung dan juga sebagai target dari beberapa antimikotik. lonjong atau bulat lonjong. extract pepton. Dalam medium cair seperti glucose yeast. C. Dinding sel berperan pula dalam proses penempelan dan kolonisasi serta bersifat antigenik. dengan permukaan halus. tebalnya 100 sampai 400 nm. Sel ini dapat berkembang menjadi klamidospora yang berdinding tebal dan bergaris tengah sekitar 8-12 µ. licin dan kadang-kadang sedikit berlipat-lipat terutama pada koloni yang telah tua. blastospora berukuran besar. albicans memperbanyak diri dengan membentuk tunas yang akan terus memanjang membentuk hifa semu. albicans pada medium padat agar Sabouraud Dekstrosa. Koloninya pada medium padat sedikit menimbul dari permukaan medium. Warna koloni putih kekuningan dan berbau asam seperti aroma tape. Umur biakan mempengaruhi besar kecil koloni.5µ × 5 − 28. 2006). albicans mempunyai struktur dinding sel yang kompleks. Morfologi koloni C. dalam jumlah sedikit.

kecambah dan miselium. Seperti halnya pada eukariot lain. jamur ini menunjukkan hasil terbentuknya gas dan asam pada glukosa dan maltosa. nukleus C. C. albicans dapat dibedakan dari spesies lain berdasarkan kemampuannya melakukan proses fermentasi dan asimilasi. Semua DNA kromosom disimpan dalam nukleus. terkemas dalam serat-serat kromatin. -1. Vakuola berperan dalam sistem pencernaan sel. khitin sekitar 0.terdiri dari glukan. Dinding sel C. Pada proses fermentasi. Pada proses asimilasi menunjukkan adanya pertumbuhan pada glukosa. Dalam bentuk ragi. maltosa dan sukrosa namun tidak menunjukkan pertumbuhan pada laktosa. Pada kedua proses ini dibutuhkan karbohidrat sebagai sumber karbon. Manan dan protein berjumlah sekitar 15. Isi nukleus berhubungan dengan sitosol melalui pori-pori nucleus. tetapi dapat tumbuh sebagai saproba pada berbagai alat tubuh manusia. Mikrotubul dan mikrofilamen . C. komponen-komponen ini menunjukkan proporsi yang serupa tetapi bentuk miselium memiliki khitin tiga kali lebih banyak dibandingkan dengan sel ragi. misalnya rongga usus. Jamur ini tidak terdapat di alam bebas.6-D-glukan sekitar 47-60 %. protein 6-25 % dan lipid 1-7%. manan dan khitin. sebagai tempat penyimpanan lipid dan granula polifosfat. Organ ini dipisahkan dari sitoplasma oleh membran yang terdiri dari 2 lapisan. terbentuknya asam pada sukrosa dan tidak terbentuknya asam dan gas pada laktosa. Usus merupakan sumber infeksi terpenting untuk manusia (Suprihatin. 2006). albicans merupakan organel paling menonjol dalam sel. albicans dianggap spesies terpatogen dan menjadi penyebab utama kandidias.6-9 %.2-30 % dari berat kering dinding sel.3-D-glukan dan 1. terutama yang mempunyai hubungan dengan dunia luar. 1982). albicans terdiri dari lima lapisan yang berbeda (Tjampakasari.

tapi tidak jelas perlekatan tunggal atau ganda yang bertanggung jawab. Potensi patogen dari C. 2002) . albicans dapat memperantai perlekatan pada banyak komponen di jaringan host (Sherris. Sebagaimana protein yang membentuk komponen matrik ekstraseluler host diketahui bersama-sama membentuk rangkaian spesifik. Hifa dari C. 1994 dalam Nurswida. Pada C. albicans mikrofilamen berperan penting dalam terbentuknya perpanjangan hifa (Tjampakasari. laminin. kolagen. albicans berkaitan erat dengan perubahan bentuk dari ragi menjadi hifa. Ini berdasarkan pada penampakan faktor virolensi dihubungkan dengan perlekatan dan invasi pada fase hifa dan pengamatan klinis bahwa terdapat hifa pada lesi invatif. albicans memiliki kapasitas berkaitan dengan sejumlah struktur molekul pada jaringan tubuh manusia. mungkin saja jika satu molekul C.berada dalam sitoplasma. Pendekatan ini diperantai oleh komponen mannoprotein dari permukaan luar fibril organisme. dan produk konversi komplemen C3. Termasuk komponen matrik ekstraseluler seperti fibronectin. 2006).

Eksplorasi dengan cara mengisolasi jamur endofit dari daun sirih (Piper betle L. timbangan analitik dan silet.BAB III METODE PENELITIAN 3. cover glass.2. erlenmeyer.3. kompor gas. Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksplorasi. jarum ose. pengaduk kaca. entkas. oven. gelas ukur.1. Alat dan Bahan Penelitian 3. mikroskop. kertas saring. kemudian menyeleksi isolat jamur endofit yang mempunyai kemampuan menghasilkan senyawa aktif sebagai antimikroba terhadap Escherichia coli. 3. Staphylococcus aureus dan Candida albicans. autoklaf. bunsen.) yang diperoleh dari Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang dan Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten Kediri. pinset. 3. jangka sorong. tabung reaksi.3. incubator. shaker incubator. cawan petri. pipet volume. . Alat Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah laminar flow cabinet. Fakultas Pertanian. sentrifugasi. aluminium foil. Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan. gelas obyek. Universitas Brawijaya dan dimulai pada bulan Desember 2007 sampai Februari 2008.1. botol media.

glukosa/sukrosa 20 gram.4.4. Bahan Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Media PDASV(Potato Dextrose Agar Streptomycin Vankomysin). Sterilisasi Alat dan Bahan Sterilisasi alat dan bahan dengan cara membungkus alat-alat dengan aluminium foil. • Kemudian memasukkanya ke dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121 0C dengan tekanan 15 psi. aquades steril.2. kemudian didiamkan sampai membeku. vancomycin 50 ug/ml dan aquades steril 1000 ml. kemudian memasukkannya ke dalam autoklaf pada suhu 121 0C dengan tekanan 15 psi (per square inchi) selama 15 menit. cara pembuatannya sebagai berikut: • Menyiapkan bahan yang terdiri dari kentang 0.1.3. 3. media PDB (Potato Dextrose Broth). aureus. daun sirih. Pembuatan Media a. kapas. • Menuangkan larutan PDASV tersebut ke dalam cawan petri dengan ketebalan media ± 5 ml dan ke dalam tabung reaksi masing-masing sebanyak 4 ml (untuk media miring) dan menutupnya dengan kapas. Prosedur Penelitian 3. • Memasukkan semua bahan tersebut ke dalam labu erlenmeyer kemudian dipanaskan dan diaduk sampai homogen. 3. media NA (Nutrient Agar).3.5 kg. E. larutan NaOCl 1 %. spirtus.2. coli dan S.4. . streptomycin sulfate 100 ug/ml. alkohol 70 %. biakan C. agar-agar 20 gram. kertas cakram dan tissue. albicans. Media PDASV.

• Membiarkan media tersebut selama 24 jam pada suhu kamar sebelum digunakan. . • Menuangkan larutan NA tersebut ke dalam cawan petri dengan ketebalan media ± 5 ml. • Menuangkan larutan PDB tersebut ke dalam tabung reaksi masing-masing sebanyak 4 ml dan menutupnya dengan kapas.5 kg. glukosa/sukrosa 20 gram dan aquades steril 1000 ml. bacto pepton 5 gram.• Membiarkan media tersebut selama 24 jam pada suhu kamar sebelum digunakan. b. agar padat 15 gram dan aquades 1000 ml. kemudian didiamkan sampai membeku. • Memasukkan semua bahan tersebut ke dalam labu erlenmeyer kemudian dipanaskan dan diaduk sampai homogen. cara pembuatannya sebagai berikut: • Menyiapkan bahan yang terdiri dari kentang 0. Media NA. • Kemudian memasukkanya ke dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121 0C dengan tekanan 15 psi. • Membiarkan media tersebut selama 24 jam pada suhu kamar sebelum digunakan. Media PDB. cara pembuatannya sebagai berikut: • Menyiapkan bahan yang terdiri dari beef ekstrak 3 gram. • Memasukkan semua bahan tersebut ke dalam labu erlenmeyer kemudian dipanaskan dan diaduk sampai homogen. • Media miring dan media lempeng disterilkan dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121 0C dengan tekanan 15 psi. c.

Sedangkan .5. 2005). 3.48 jam pada suhu 25 0C tadi diidentifikasi berdasarkan ciri-ciri makroskopis. Jamur endofit yang tumbuh pada medium PDASV. setelah inkubasi dilakukan pengamatan terhadap bentuk dan warna koloni pada medium PDASV.) sehat yang diambil dari daunnya. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih Jamur endofit diisolasi dari tanaman sirih (P. Pengamatan ciri-ciri makroskopis dengan cara langsung melihat bentuk dan warna koloni jamur endofit.4. Pemurnian Jamur Endofit Medium yang digunakan untuk permurnian jamur endofit yaitu medium PDASV. Kemudian potongan daun sirih dikeringkan di atas kertas tissue steril dan ditanam pada cawan petri yang berisi media PDASV. 3. Jamur endofit yang digunakan untuk penelitian adalah jamur yang tumbuh pada belahan daun bagian dalam (Indriana. Setelah pencucian. betle L. Bagian daun sirih tersebut dicuci dengan air mengalir selama 5 menit. dilakukan sterilisasi permukaan dengan memasukkannya ke dalam larutan alkohol 70 % selama 5 menit. Setelah itu dibilas dengan aquadest steril ± 1 menit diulang dua kali.4.3. Kemudian diinkubasi selama 24 48 jam pada suhu 25 0C. lalu ditempelkan di atas cawan petri yang berisi media PDASV. Kemudian jamur endofit tersebut diisolasi dan dimurnikan pada media PDASV baru. Setiap koloni yang berbeda bentuk maupun warnanya disubkultur lagi pada medium PDASV baru. Pengamatan dilakukan setiap hari sampai tampak jamur yang tumbuh.4. perlakuan ini berfungsi sebagai kontrol. Identifikasi Isolat Jamur Endofit Jamur endofit yang telah diinkubasi selama 24 .4.3. dilanjutkan kedalam larutan NaOCl 1 % selama 5 menit kemudian dikeringkan dengan tissue steril. dimurnikan masingmasing pada medium plat dan media miring PDASV.

4.6.pengamatan ciri-ciri mikroskopis dengan menggunakan mikroskop binokuler. Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba a. masing-masing medium disentrifugasi dengan kecepatan 3800 rpm pada suhu 4 0C selama 20 menit. spora) yang terbentuk diamati dengan menggunakan mikroskop binokuler dengan perbesaran 400x • Preparat jamur diidentifikasi dengan menggunakan buku identifikasi jamur. Pengamatan secara mikroskopis dilakukan setiap hari sampai tampak adanya konidia. konidia. Supernatan diambil dan dipergunakan dalam pengujian aktivitas antimikroba terhadap jamur C. coli dan bakteri S. aureus . Produktifitas Metabolit Antimikroba Produksi metabolit antimikroba oleh jamur endofit dilakukan dengan cara menumbuhkannya di dalam medium PDB. Pembuatan preparat untuk pengamatan yang menggunakan mikroskop binokuler adalah sebagai berikut: • • • • • • Media agar diambil dari cawan petri dengan jamur ose Potongan media tersebut diletakkan di atas obyek glass Konidia atau spora dari biakan murni jamur diambil dengan jamur ose Inokulum jamur diletakkan di atas potongan media pada obyek glass Cover glass ditutup dan diletakkan secara perlahan-lahan Preparat tersebut diletakkan di atas tissue basah yang diletakkan di atas nampan plastik dan di inkubasi selama 3-4 hari • Morfologi jamur (bentuk dan ukuran hifa. albicans. Setelah selesai. 3. bakteri E. Kemudian diinkubasi pada suhu 25 0C dalam shaker incubator 130 rpm selama 48 jam. Koloni jamur endofit yang telah diinkubasi pada medium PDASV selama 24 jam pada suhu 25 0C. diambil satu sengkelit dengan menggunakan jarum Ose dan diinokulasikan ke medium PDB dalam Erlenmeyer 50 ml.

Kertas cakram dibuat dari kertas saring Whatman dengan ukuran pori 0. Secara aseptik. Uji aktivitas antimikroba isolat jamur terhadap bakteri E. kertas cakram yang sudah disterilkan direndam di dalam supernatan kultur jamur endofit selama 30 menit. dengan cara mengguntingnya dengan alat pembolong kertas sehingga didapatkan kertas cakram dengan diameter 6 mm.b. Setelah masa inkubasi selesai. dilakukan pengamatan terhadap zona jernih yang terbentuk dan diukur diameternya.22 um.22 um. Uji Antimikroba Terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus Medium yang digunakan untuk uji aktivitas antimikroba isolat bakteri yaitu medium NA. coli dan S. Kertas cakram diambil dengan menggunakan pinset steril dan diletakkan di atas medium uji aktivitas antimikroba (medium plat PDASV). albicans dilakukan dengan metode uji Kirby-Bauer menggunakan kertas cakram. Secara aseptik. Sampel yang mempunyai potensi menghasilkan zat antimikroba ditunjukkan dengan adanya zona jernih. Uji aktivitas antijamur isolat jamur terhadap jamur C. kertas cakram yang sudah disterilkan direndam di dalam supernatan kultur jamur endofit selama 30 menit. Kemudian diinkubasi selama 18 – 24 jam pada suhu 370C. aureus dilakukan dengan metode uji Kirby-Bauer menggunakan kertas cakram. Uji Antimikroba Terhadap Candida albicans Medium yang digunakan untuk uji aktivitas antimikroba isolat jamur yaitu medium PDASV. Kertas cakram diambil dengan menggunakan pinset steril dan diletakkan di atas medium uji aktivitas antimikroba . Kertas cakram dibuat dari kertas saring Whatman dengan ukuran pori 0. c. dengan cara mengguntingnya dengan alat pembolong kertas sehingga didapatkan kertas cakram dengan diameter 6 mm.

Sampel yang mempunyai potensi menghasilkan zat antimikroba ditunjukkan dengan adanya zona jernih.(medium plat NA). . dilakukan pengamatan terhadap zona jernih yang terbentuk dan diukur diameternya. Kemudian diinkubasi selama 18 – 24 jam pada suhu 370C. Setelah masa inkubasi selesai.

battle L.1. battle L. A B Gambar 4. dapat dilihat pada Gambar 4. B : sampel dari Kelurahan Ketawanggede) Dalam hal isolasi jamur endofit. Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten Kediri dan Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang.1. Sampel tanaman sirih yang digunakan pada penelitian ini diperoleh dari dua tempat yang berbeda yaitu.) (ket: A : sampel dari Desa Banjaranyar. dihasilkan 5 macam isolat jamur endofit dari Desa .) setelah inkubasi selama 20 hari dalam medium PDASV pada suhu kamar.1.) Jamur endofit berhasil diisolasi dari potongan daun tanaman sirih (P. Jamur Endofit dari Jaringan Daun Sirih (P. Isolasi Jamur Endofit dari Daun Sirih (Piper battle L. Setelah dilakukan pemurnian berdasarkan bentuk dan warna secara makroskopis pada media PDASV yang baru. maka jamur yang tumbuh adalah yang berasal dari dalam jaringan tanaman. Radji (2005) juga menyebutkan bahwa mikroba endofit adalah mikroba yang hidup dalam jaringan tanaman pada periode tertentu dan mampu hidup dengan membentuk koloni dalam jaringan tanaman tanpa membahayakan inangnya. dilakukan pemurnian pada permukaan sampel dengan perendaman dalam alkohol 70% selama 5 menit dan NaOCl 1% selama 5 menit.BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.

kasar dan seperti berserat Warna koloni putih lama kelamaan menjadi hijau di bagian pusat. miselium menyebar. miselium menyebar teratur. tebal. miselium meyebar. pertumbuhan koloni datar. datar. Diskripsi Bentuk dan Warna Koloni Isolat Jamur Endofit Ciri Makroskopis Lokasi Banjaranyar Banjaranyar Banjaranyar Banjaranyar Warna koloni mula-mula putih lama-kelamaan menjadi ungu kecoklatan. pertumbuhan koloni datar.1. miselium teratur. miselium menyebar teratur. tipis. miselium teratur. tebal. halus. pertumbuhan koloni datar. melebar B5 Banjaranyar K1 K2 K3 K4 Ketawanggede Ketawanggede Ketawanggede Ketawanggede . miselium teratur. kasar. seperti serabut halus Warna koloni mula-mula hijau keabu-abuan lamakelamaan menjadi hijau kehitaman. miselium menyebar. pertumbuhan koloni datar. kasar dan melebar Warna koloni hijau tua. pertumbuhan koloni datar.1. tebal. pertumbuhan koloni datar. tebal. tipis. terdapat serbuk spora. Kode Isolat B1 B2 B3 B4 Tabel 4. seperti serabut Warna koloni putih bersih. pertumbuhan koloni keatas. pertumbuhan koloni datar. halus. melebar Warna koloni putih bersih. halus. miselium menyebar teratur. dapat dilihat pada Tabel 4. tipis seperti serabut Warna koloni mula-mula putih lama-lama menjadi abu-abu kehitaman. tebal. seperti beludru kasar Warna koloni putih.Banjaranyar dan 4 macam isolat jamur endofit dari Kelurahan Ketawanggede. seperti beludru Warna koloni mula-mula putih lama-lama menjadi abu-abu kehitaman. Masingmasing koloni memperlihatkan penampakan fisik yang beranekaragam. pertumbuhan koloni tebal.

. ar-Ra’d: 4 '#0 (51 & '#0 & /4 & +' + ($ )& " (## *5 ' & (#. akan tetapi daerahnya berbeda. Hal ini sesuai dengan pernyataan Atmosukarto (2006) karena tumbuh didalam jaringan tanaman. tanaman sirih dari tempat yang berbeda menghasilkan jamur endofit yang berbeda pula. yang menciptakan alam semesta dengan beranekaragam jenis dan manfaatnya.3 8# 74 3 ) 2) ( 6 0 &'. disirami dengan air yang sama.Dalam Al-Qur’an juga dijelaskan.$ “Dan di bumi Ini terdapat bagian-bagian yang berdampingan.s. arRa`d/13: 4) Ayat di atas menjelaskan bahwa setiap tanaman mempunyai kelebihan tersendiri dari tanaman yang lain. Q. fisiologi tumbuhan tinggi termasuk yang berasal dari spesies yang sama akan beda di lingkungan yang berbeda. . tanaman-tanaman dan pohon korma yang bercabang dan yang tidak bercabang. dan kebun-kebun anggur. maka biotop tempat hidup mikroba sangat sangat unik sifatnya. Begitu juga pada tanaman sirih. Bahkan. Sesungguhnya pada yang demikian itu terdapat tanda-tanda (kebesaran Allah) bagi kaum yang berfikir.” (Q. kami melebihkan sebahagian tanamtanaman itu atas sebahagian yang lain tentang rasanya.% #+. Disitulah bukti kekuasaan Allah Swt. $$) '(. Hasil pengamatan makroskopis terhadap penampakan koloni isolat jamur endofit.s. di mana tanaman yang satu tentunya berbeda dengan tanaman yang lainnya. dapat diketahui bahwa masing-masing isolat memperlihatkan penampakan yang berbeda meskipun diambil dari sampel yang sama.

Konidiofor. Identifikasi Isolat Jamur Endofit Berdasarkan hasil pengamatan.2.2. Konidia. Isolat B1 Miselium menyebar. Hifa) . 1. jamur endofit yang telah berhasil diisolasi dari daun sirih dapat diidentifikasi dengan melihat ciri makroskopis dan ciri mikroskopis. Pada hari kelima setelah inokulasi. Isolat B1 A. B. Konidiofor panjang. Pada hari keempat setelah inokulasi diameter koloni mencapai 3.2. dibawah mikroskop binokuler konidia tampak hyalin. Koloni Isolat B1. membengkok. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). berbentuk silinder. b. A B b a c Gambar 4. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. Foto mikroskopis Isolat B1 dengan perbesaran 400x (Ket: a.6 cm dan diameter koloni dapat mencapai 9 cm pada hari ke 8 setelah inokulasi. c. maka dapat diketahui bahwa isolat B1 termasuk Famili Tuberculariaceae.4. genus Fusarium sp. aseptat dan hyalin. lama-kelamaan pada bagian dasar koloni warna berubah menjadi ungu kecoklatan. Hifa bersepta dan hyalin. miselium bercabang. tidak bersekat dan tampak gemuk. pada media PDASV koloni jamur muda berwarna putih tebal. dengan mengacu pada buku petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972).

berukuran 3. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). hyalin. koloni jamur berwarna putih seperti kapas kemudian lama-kelamaan berubah menjadi abu-abu kehijauan. Miselium menyebar teratur. Pada pengamatan secara mikroskopis konidia biasanya tersusun secara silindris dan pendek.2 µm. Hifa. Dalam waktu 4 hari diameter koloni mencapai 4 cm. . 1 sel dan terbentuk seperti untaian panjang. kasar dan seperti berserat. Pada hari ketiga setelah inokulasi diameter koloni mencapai 4. maka dapat diketahui bahwa isolat B2 termasuk Famili Moniliaceae. pertumbuhan koloni tebal.2. A B c b a Gambar 4. Sedangkan dibawah mikroskop binokuler.5 cm. bagian pinggir berwarna hijau tua.) 3. Tidak terdapat konidiofor. Koloni Isolat B2.3. Hifa aseptat dan hyalin. Konidiofor. pada hari kelima setelah inokulasi tampak miselium bercabang. c. 1 sel. Foto mikroskopis Isolat B2 dengan perbesaran 400x (Ket: a. Konidia. Konidiofor pendek. B. Isolat B2 Tumbuh cepat pada media PDASV. Isolat B3 Koloni berwarna putih bersih pada media PDASV. Isolat B2 A.3. hyalin. genus Cephalosporium sp. hyalin. Hifa aseptat dan hyalin. aseptat dan ramping. datar.9 x 1. Konidia berbentuk silinder. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. b.

2 sel. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. Isolat B3 A.4. Hifa. aseptat dan hyalin. dibawah mikroskop binokuler hifa tampak bersepta dan hyalin. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). pertumbuhan koloni datar. . A B b a Gambar 4. b. maka dapat diketahui bahwa isolat B4 termasuk Famili Tuberculariaceae.5. Foto mikroskopis Isolat B3 dengan perbesaran 400x (Ket: a. sederhana dan membengkok. genus Fusarium sp. berbentuk silinder. Konidia) 4.Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4.4. Pada hari kelima setelah inokulasi. Koloni Isolat B3.9 cm. Konidia hyalin. seperti serabut halus. Konidiofor panjang. genus Geotrichum sp. miselium menyebar teratur. Pada pengamatan hari keempat diameter koloni mencapai 3. maka dapat diketahui bahwa isolat B3 termasuk Famili Moniliaceae. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). tebal. B. Isolat B4 Warna koloni pada awalnya putih lama kelamaan menjadi hijau di bagian pusat.

Isolat B4 A. hyalin. Koloni Isolat B4. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. miselium tumbuh menyebar dengan teratur. tebal. Koloni Isolat B5.6. Tidak terdapat konidiofor. Pada pengamatan secara mikroskopis konidia biasanya tersusun secara silindris dan pendek. pertumbuhan koloni datar.5. Konidiofor. Hifa aseptat dan hyalin. 1 sel dan terbentuk seperti untaian panjang. Isolat B5 A. A B b a Gambar 4. genus Geotrichum sp. Isolat B5 Koloni tumbuh cepat dan berwarna hijau kebu-abuan pada media PDASV. Foto mikroskopis Isolat B4 dengan perbesaran 400x (Ket: a. B. maka dapat diketahui bahwa isolat B5 termasuk Famili Moniliaceae.A B a b Gambar 4. kasar.6. b. Konidia) 5. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). seperti serabut. B. Pada biakan yang sudah tua warna berubah menjadi hijau kehitaman. Foto mikroskopis Isolat B5 dengan perbesaran 400x .

hyalin. b. Konidia) 6. tipis.2 cm. b. Hifa. Konidiofor pendek silindris pada . Koloni datar.2 µm. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972).7. Konidiofor pendek. Foto mikroskopis Isolat K1 dengan perbesaran 400x (Ket: a. miselium melebar dan menyebar pada seluruh permukaan media. 1 sel. berukuran 4-5 x 1. di bawah mikroskop binokuler tampak hifa bersepta dan hyalin. B. Hifa aseptat dan hyalin. Isolat K1 Koloni jamur berwarna putih bersih.5 cm. Konidiofor. Konidia. Konidia berbentuk silinder. pertumbuhannya cepat dalam 4 hari diameter koloni mencapai 4. pada hari keempat setelah inokulasi tampak miselium bercabang. maka dapat diketahui bahwa isolat K1 termasuk Famili Moniliaceae. dan penampakannya kasar. Isolat K1 A. A B b a c Gambar 4. genus Cephalosporium sp.7. c. Sedangkan dibawah mikroskop binokuler. miselium meyebar. aseptat dan ramping.(Ket: a. seperti beludru kasar. Dalam waktu 4 hari diameter koloni mencapai 3. hyalin. pertumbuhan koloni datar. Pada hari keenam setelah inokulasi. Isolat K2 Koloni berwarna putih. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. tipis. Hifa) 7. Koloni Isolat K1.

satu konidiofor terdapat 2 atau 3 phialid. saling terkait dalam satu kelompok. dan setiap phialid terdiri dari 3-5 konidia.9. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet . Konidia bulat seperti bulat telur. konidia 1 sel berbentuk silinder atau elips terbentuk berantai dari ujung konidiofor. A B a b c Gambar 4. Pertumbuhan sangat lambat pada media PDASV.Konidiofor. b. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. Isolat K2 A. Konidia terdiri dari satu sel. merupakan kumpulan hifa dan di atasnya terdapat serbuk spora. Pada hari ke 9 setelah inokulasi diameter koloni baru mencapai 4 cm.8. B. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. Foto mikroskopis Isolat K2 dengan perbesaran 400x (Ket: a. konidia mengeluarkan cahaya dari semua permukaan. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). c. Koloni Isolat K2. Konidiofor panjang. maka dapat diketahui bahwa isolat K2 termasuk Famili Moniliaceae. bundar dan tumbuh berantai. hyalin. hyalin dan tumbuh di atas phialid. genus Cylindrocephalum sp.8. Konidia) 8. Hifa. hyaline dan aseptat. Isolat K3 Koloni berwarna hijau tua. kadang bersekat.ujungnya.

Miselium bercabang. Konidia. Berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis seperti yang nampak pada Gambar 4. Pada hari ketiga setelah inokulasi diameter koloni mencapai 4. koloni jamur berwarna putih seperti kapas kemudian lama-kelamaan berubah menjadi abu-abu kehijauan. hyalin. genus Penicillium sp.5 cm.2 µm. berukuran 3. Koloni Isolat K3. maka dapat diketahui bahwa isolat K4 termasuk Famili Moniliaceae. A B b c a Gambar 4. genus Cephalosporium sp.9. maka dapat diketahui bahwa isolat K3 termasuk Famili Moniliaceae. Foto mikroskopis Isolat K3 dengan perbesaran 400x (Ket: a. Sterigma/Phialid) 9. hyalin. 1 sel.9 x 1.(1972). aseptat dan ramping. Konidia berbentuk silinder. Hifa aseptat dan hyalin. b. c.10. tumbuh cepat pada media PDASV. Isolat K4 Isolat K4 bisa dikatakan sama dengan Isolat B2 karena ciri morfologi baik secara makroskopis maupun mikroskopis menunjukkan panampakan yang sama yaitu. Konidiofor pendek. bagian pinggir berwarna hijau tua. . Isolat K3 A. dan setelah dibandingkan dengan petunjuk klasifikasi menurut Barnet (1972). Konidiofor. B.

4. Pengukuran dengan menggunakan jangka sorong. (1992) dalam (Worang. 2003) yang menggolongkan fungi endofit dalam kelompok Ascomycotina dan Deuteromycotina. pengamatan dilakukan setelah bakteri diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC. batle L. Hasil uji aktivitas dari 9 isolat jamur endofit secara in vitro terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli memperlihatkan bahwa semua isolat dapat . b. Seleksi terhadap 9 isolat jamur endofit yang menghasilkan metabolit antimikroba.) menunjukkan kemampuan yang bervariasi dalam menghasilkan metabolit antimikroba. Konidiofor. B. Foto mikroskopis Isolat K4 dengan perbesaran 400x (Ket: a. Isolat K4 A. Seleksi Jamur Endofit Penghasil Metabolit Antimikroba Jamur endofit yang diisolasi dari daun sirih (P. Famili Moniliaceae termasuk fungi imperfecti atau Deuteromycotina. Koloni Isolat K4.) tersebut setelah dilakukan identifikasi berdasarkan kunci identifikasi menurut Barnet (1972) termasuk dalam Famili Moniliaceae. Hal ini sesuai dengan pernyataan Petrini et al.10. Semua uji kemampuan antimikroba menggunakan parameter terbentuknya zona hambat (zona bening). Konidia) Sembilan isolat jamur endofit yang ditemukan dari daun sirih (Piper betle L. 3. menggunakan metode uji Kirby-Bauer menggunakan kertas cakram.A B a b Gambar 4.

96 mm.).78 1.7 0 B2 24. coli dengan zona hambat yang relative besar yaitu mencapai 31. albicans Isolat B1 26.2. di atas dapat diketahui bahwa isolat K2 mampu menghambat pertumbuhan S. C: C.74 1.87 K4 19.54 18.2.11. B: E.). bahkan dua dari isolat jamur endofit tidak bisa menghambat pertumbuhan jamur C. albicans yaitu.50 15.96 B5 28.77 0 K2 31. Pada E. coli.54 Keterangan: B= isolat jamur endofit dari Desa Banjaranyar.44 mm pada E.09 23.35 K1 22.2.04 13.2.68 K3 26. Rata-rata Diameter Zona Hambat Metabolit Jamur Endofit Kode S.menghambat pertumbuhan bakteri S. Berdasarkan Tabel 4.68 1. aureus dan E.64 0. isolat B1 dan isolat K1 (Tabel 4.76 mm pada S. sedangkan pada C.76 9.44 1. Sedangkan pada jamur Candida albicans memperlihatkan zona hambat yang relatif kecil yaitu mencapai 1. aureus.73 24.). coli (Tabel 4.45 8.26 B3 29. aureus E. coli isolat B3 yang mampu menghambat paling tinggi.98 B4 27. Tebel 4. A B C Gambar 4.43 1. aureus dan 23. albicans diameter zona hambat paling tinggi ditunjukkan oleh isolat B4 (Gambar 4.11.11 0. Zona hambat yang dihasilkan oleh Stapilococus aureus.K= isolat jamur endofit dari Kelurahan Ketawanggede. coli C.23 9.16 17. albicans ) . aureus dengan diameter zona hambat tertinggi. Escerichia coli dan Candida albicans setelah diinkubasi selama 24 jam (ket: A: S.

albicans bisa disebabkan karena metabolit yang dihasilkan merupakan antibiotika yang tidak aktif terhadap jamur (antijamur). Hal ini sesuai dengan yang diungkapkan oleh Siswandono (1995) bahwa antibiotik mempunyai spesikasi dalam efektifitasnya. Dijelaskan lebih lanjut oleh Siswandono (1995) bahwa metabolit antimikroba dari daun sirih merupakan antibiotika dengan spektrum luas yaitu. menunjukkan rata-rata bahwa Staphylococcus aureus menghasilkan diameter zona hambat lebih besar dibandingkan dengan Escherichia coli. Pinisilin G dengan diameter zona hambat 29 mm atau lebih.2. Sedangkan kecilnya diameter zona hambat yang dihasilkan oleh metabolit jamur endofit pada C. efektif baik terhadap Gram positif maupun Gram negatif. Bonang (1982) menyebutkan bahwa antibiotika Ampisilin pada batang Gram negatif dinyatakan peka jika mempunyai diameter zona hambat sebesar 14 mm atau lebih pada batang Gram negatif dan 29 mm atau lebih pada Stafilokokus. Streptomisin dengan diameter zona hambat 15 mm atau lebih dan Vankomisin dengan diameter zona hambat 12 mm atau lebih. Hal ini bisa dijadikan sumber acuan baru dalam pencarian jenis antibiotik yang potensial.Ketidaksamaan isolat yang mempunyai diameter zona hambat terbaik pada ketiga mikroba uji bisa disebabkan karena jenis metabolit antimikroba yang dihasilkan pada masing-masing isolat juga berbeda. Dari pernyataan di atas dapat disimpulkan bahwa antibiotik yang terdapat pada metabolit jamur endofit kemungkinan merupakan antibiotik yang peka. Data hasil pengamatan pada Tabel 4. Hal ini disebabkan karena adanya perbedaan struktur dinding . Untuk lebih jelasnya dapat dilakukan uji lanjutan terhadap karakteristik metabolit yang dihasilkan jamur endofit dari daun sirih. Antibiotik dapat dikelompokkan berdasarkan tempat kerja spektrum aktivitas dan struktur kimianya.

Sesudah menembus membran terluar. antibiotik masuk melalui dinding sel melewati ruang periplasma dan mencapai sasaran. Lapisan membran luar disebut ”outher wall layer” yang mempunyai struktur sebagai unit membran. lapisan luar. dan β- . jamur mempunyai struktur dinding sel yang sangat kompleks dengan rangka dasar yang terdiri dari polisakarida kristalin. antibiotik pertama-tama harus menembus membran terluar selubung bakteri secara difusi pasif melalui saluran yang terbentuk oleh pori protein.sel pada bakteri Gram positif (Stahylococcus aureus) dengan bakteri Gram negatif (Escherichia coli). Lipida dan polisakarida ini berhubungan erat dan membentuk struktur khas yang disebut lipopolisakarida. lapisan tengah dan lapisan dalam. kitin. yaitu enzim serin protease yang terdapat pada membran terdalam (sitoplasma). Bakteri Gram negatif memiliki dinding sel yang terdiri dari 3 lapisan yaitu. Enzim inilah yang bertanggung jawab terhadap biosintesis dinding sel (Siswandono. polisakarida dan protein. Menurut Pelczar (1986) struktur dinding sel bakteri Gram negatif lebih kompleks dibandingkan struktur dinding sel bakteri Gram positif. 1995). Perbedaanya adalah bahwa lapisan ini tidak hanya terdiri dari fosfolipida saja seperti pada membran plasma tetapi juga mengandung lipida lainnya. Lay (1992) menambahkan perbedaan utama antara bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif ialah bahwa pada bakteri Gram negatif memiliki lapisan membran luar yang meliputi peptidoglikan. Struktur dinding sel bakteri Gram negatif yang relatif kompleks tersebut menyebabkan antibiotik lebih sukar masuk ke dalam sel dan menemukan sasaran untuk bekerja. Sedangkan bakteri Gram positif hanya mempunyai lapisan tunggal pada dinding selnya. Berbeda dengan bakteri. Untuk menunjukkan kerja antibiotik pada bakteri Gram negatif.

Dalam Q. AlFurqon/25: 2) Dimana segala sesuatu yang dijadikan Tuhan diberi-Nya perlengkapanperlengkapan dan persiapan-persiapan.s. Begitu pula dengan jamur endofit dimana di dalamnya terdapat manfaat tertentu sesuai dengan kandungan senyawanya. 1995). dan tidak ada sekutu baginya dalam kekuasaan(Nya). sesuai dengan naluri. Kitin dan β-glukan bertanggung jawab terhadap mekanisme dinding sel jamur (Siswandono. 2001 dalam Sugijanto. :% 9 = “ Yang kepunyaan-Nya-lah kerajaan langit dan bumi. Menurut Kartasapoetra (1992) komponen di dalam daun sirih meliputi minyak atsiri sampai 4. yang dihasilkan dari kulit batang Taxus brevifolia. 2004). Radji (2005) mengungkapkan bahwa. dan suatu matrik yang terdiri dari polisakarida amorf dan kompleks proteinsakarida. $ $(6 : $< 2 0 "1 $ . sifat-sifat dan fungsinya masing-masing dalam hidup. dan dia Telah menciptakan segala sesuatu. Ergot alkaloida ditemukan dalam kultur Neotyphodium. ? 4$ $)'( / :> 3 ( . dan dia tidak mempunyai anak. jamur endofit dapat mengahasilkan metabolit sekunder sesuai dengan tanaman inangnya.glukan.s. Al-Furqon ayat 2 dijelaskan . betle L). ternyata dapat dihasilkan oleh kultur jamur endofit Taximyces andreanae yang diisolasi dari Taxus brevifolia di Montana.2 % yang didalamnya . Pernyataan di atas memperkuat bahwa jamur endofit yang berhasil diisolasi dari penelitian ini juga menghasilkan metabolit skunder sesuai dengan yang dihasilkan inangnya dalam hal ini tanaman sirih (P. dan dia menetapkan ukuran-ukurannya dengan serapi-rapinya (Q. endofit yang dikarakterisasi dari Ergot scerotia (Tan and Zou. Sebagai contoh Taxol.

2003). Akan tetapi. . Dalam kerjanya. Fenol lebih efektif pada bakteri gram positif (Tim Mikrobiologi. zat penyamak. 1988). khavikol. Dengan demikian kemungkinan besar jamur endofit dari daun sirih juga mengandung senyawa aktif fenol. pertama fenol merusak membran plasma sehingga enzim menjadi inaktif yang menyebabkan denaturasi protein. Menurut Volk (1993) apabila digunakan dalam konsentrasi tinggi fenol bekerja dengan merusak membran sitoplasma secara total dan mengendapkan protein sel. dan disamping itu. Hidupnya suatu sel bergantung pada terpeliharanya molekul-moekul protein dan asam nukleat dalam keadaan alamiahnya. diastase. gula dan pati.1 hingga 2 persen. dalam konsentrasi 0. menginaktifkan sistem enzim bakteri. Denaturasi protein dan asam nukleat dapat merusak sel tanpa dapat diperbaiki kembali (Pelczar.terdapat fenol yang khas disebut betelfenol. Brooks dkk. fenol merusak membran sitoplasma yang menyebabkan bocornya metabolit penting. (1996) juga menambahkan bahwa fenol merupakan zat anti kuman yang kuat fenol dan derivatnya menyebabkan denaturasi protein pada kuman.

2. Melakukan karakterisasi dari interaksi mikroba endofit dengan inang. dua dari isolat jamur endofit tidak bisa menghambat pertumbuhan jamur C.1. Jamur endofit berhasil diisolasi dari daun sirih (Piper betle L. Saran Berdasarkan dari hasil penelitian dapat dikemukakan beberapa saran sebagai berikut: 1.44 mm pada E.BAB V PENUTUP 5. albicans yaitu. Hasil uji 9 isolat jamur endofit. sebanyak 9 isolat yaitu 5 isolat jamur dari Desa Banjaranyar Kecamatan Kras Kabupaten Kediri dan 4 isolat dari Kelurahan Ketawanggede Kecamatan Lowokwaru Kota Malang. diperoleh kesimpulan sebagai berikut: 1. coli. memperlihatkan bahwa semua isolat dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan zona hambat 31.76 mm pada S.).96 mm. Sedangkan pada jamur Candida albicans memperlihatkan zona hambat sebesar 1. Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan. isolat B1 dan isolat K1. 2. aureus dan 23. Melakukan uji lanjutan tentang spesifikasi jenis antimikroba yang terdapat dalam metabolit jamur endofit dari daun sirih. 2. . 5.

Melakukan pengujian terhadap konsentrasi mikroba uji dan konsentrasi metabolit jamur endofit yang paling tepat untuk mendapatkan hasil yang maksimal di dalam pengujian aktivitas antimikroba. .3.

Atmosukarto. 1987. Skripsi Tidak Diterbitkan.medikaholistik. K.). Bandung: ITB. Chasanah. Brooks. J. Anonymous. 1996. 2007. L. Janet S. http://toiusd. Gan. Mikroba Endofit: Sumber Molekul Baru yang Berpotensi.go. 1972. Gramedia. A. A. Barnett.F. Pengujian Daya Antimikroba Air Perasan Blimbing Wuluh (Averhoa blimbi L. Bandung: ITB.B. No. http://www.com/2006/journal/item. Mikrobiologi Kedokteran.multiply. Dasuki. G. L. Diakses pada 4 November 2007. Penyebab Penyakit Busuk Pada Batang Jeruk.pom. S. Minyak Atsiri Tumbuhan Tropik Indonesia. Indriana.H. Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya. Terjemahan Edi Nugroho dan RF Maulany. 2005. Dasar-dasar Mikrobiolog. Farmakologi Dan Terapi. V. Metode Fotokimia. Agustin W. dan Anggia P.DAFTAR PUSTAKA Agusta. Bonang. Perbedaan Khasiat Antibakteri Bahan Irigasi antara Hidrogen Peroksida 3% dan Infusum Daun Sirih 20% Terhadap Bakteri Mix Majalah Kedokteran Gigi (Dent. Vol. Keputihan-Si Putih Yang Menganggu. 1987.id/login/jurnal/filer/DENTJ-38-1-12. 1 Januari 2005: 45–47. J. Nicholas O. Jakarta: Djambatan. Jakarta: Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Illustrated Genera of Imperfect Fungi. U. 2006. 2001. 2000. R. Bandung: Pusat Antar Universitas Ilmu Hayati ITB. H.). Tanaman Obat Indonesai. http://www. Skripsi.com/journal/item/282. N.ac.unair. 1982. Mikrobiologi Kedokteran untuk Laboratorium dan Klinik. Diakses pada 12 November 2007. Dwidjoseputro.id.S dan Setiabudy. Jakarta: PT. Eksplorasi Jamur Endofit Antagonis Terhadap Phytophthora spp. 2006. . B. Tidak Diterbitkan. 2005.journal. Sistematik Tumbuhan Tinggi. Harborne. Edisi 3. Burgess Publishing Company. D. Jakarta: EGC. BioTrends Vol 1 Nomor 2. G dan Enggar S. Diakses pada 12 November 2007. Universitas Negeri Malang FMIPA.H. 1998. Agustrini. 1991..pdf. I. 38.

Mikroba Endofit. http://fa.G..] dan Minyak Cengkeh [Syzygium Aromaticum (L. & PERRY] Serta Kombinasinya. dan E. Uji Aktivitas Antiseptik Ekstrak Air Daun Sirih [Piper betle L.A. 2002. 2003. Mikrobiologi. 1996. 1989.id/go. M. Departemen Farmasi.Q. 1992. P. A. Sutarmi dan Sri L. S.lib. A. Proyek Pengembangan sekolah menengah IBRD Loan Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi: Departemen Pendidikan Nasional. 1986. Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi. Terjemahan Ratna S.html. Efektivitas Dekok Sirih Hijau dan Sirih Kuning Dalam Menghambat Pertumbuhan Candida albicans (uji In Vitro).blogspot.J.A. Rineka Cipta Lay. Shihab. 1988. .. Budidaya Tanaman Berkhasiat Obat. FMIPA-UI.com/2006_05_01_archive.ac.S. Vol. Ristiati. dan E. Pangarungan. Prihatiningtias. Pengantar Mikrobiologi Umum. Dasar-Dasar Mikrobiologi I. S.H. Membumikan Al-Qur’an: Fungsi dan Peran Wahyu dalam Kehidupan Masyarakat. Jakarta: Rajawali Pers Nurswida.C. Bandung: Mizan. http:\Antibiotik\metsekunder\jbptitbpp-gdl-s2-2002-shinta-1629mikroba%20-%20. Universitas Brawijaya.3. Wawasan Al-Qur’an: Tafsir Maudhu’i atas Pelbagai Persoalan umat. Terjemahan Ratna S. Chan. Shinta. Rineka Cipta.S. Teja I.) MERR. 2000. M. 1994.J. W. Hunter.. Jakarta: PT. Shihab. Skripsi Tidak Diterbitkan.No.G. B. II. N. Ex. Bandung: Mizan. Fakultas Farmasi UGM. Chan.C. Kartasapoetra. Pelczar. Diakses pada 5 Oktober 2007 Radji. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Aktif Antimikroba dari Daun Tumbuhan Piper sarmentosum Roxb. Jakarta: PT.itb.Q. E. I.php?id=jbptitbfagdl-s1-2003-evapangaru-467&node=56&start=6. M. Teja I. Majalah Ilmu Kefarmasian. Perpustakaan pusat universitas gunadarma. Jakarta: UI-Press.Kartasapoetra. 2006. 2000. Sutarmi dan Sri L. 1992.H. Peranan Bioteknologi dan Mikroba Endofit dalam Pengembangan Obat Herbal. . http://dianing. Sumber Penghasil Antibiotik Yang Potensial. Pelczar. Jakarta: UI-Press. Teknologi Penanganan Pasca Panen. M. Dasar-Dasar Mikrobiologi II. 2005. M.W dan Sugyo H. Desember. Diakses pada 8 November 2007. Departemen Farmasi.

Terjemahan Soenarto A. R. Diakses pada 12 Volk. Mikrobiologi dalam Pengolahan dan Keamanan Pangan.co. Yogyakarta: UGM Press. A. Surabaya: Erlangga. 200633. dkk. T. Suriawiria. 151. Penerjemah Prof. Jakarta: Erlangga.kalbe. Bandung: Pikiran Rakyat. Samik Wahab dan Dr. http://www. Bulletin http://dwpptrijenewa. Dasar Biologis dan Klinis Penyakit Infeksi. D. Manfaat Daun Sirih. Worang. dkk. DWP PTRI Jenewa.E. Candida dan Kandidiasis pada Manusia. Sugijanto. Mikrobiologi Dasar 1. Isolasi dan Determinasi Berbagai Jamur Endofit dari Tanaman Aglaia elliptica. Karakteristik Candida albicans. Sutaryo. W. Triarsari. 2006.pdf/13_151_KarakteristikBiologikCandidaAlbicans.Obat Serbaguna Sepanjang Masa. Edisi 4. S. 2003. 5 no 2 Agustus. Supardi.com/bulletin/?p=1040.isuisse. U. 1995. Cermin Dunia Kedokteran No. C. 1993. I. Daun Sirih. Aglaia eusideroxylon. .R. 2007.A. 1994.L. N. 1982. 1999.F. Bandung: Alumni Suprihatin.html.Siswandono dan Bambang S. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universutas Indonesia. Makalah Individu Pengantar Falsafah Sains (PPS702) Program Pascasarjana / S3 Institut Pertanian Bogor Oktober 2003. Aglaia odorata dan Aglaia odoratissima. dan Sukamto. M. S. Shulman. Dr. Kimia Medisinal. dan Wheeler. Diakses pada 23 November 2007. 2004.id/files/cdk/files/13_151_KarakteristikBiologikCandidaA lbicans.D. November 2007. Tjampakasari. 2006. Jurnal Penelitian Medika Eksakta vol. DSA.

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->