PENGENDAPAN PROTEIN SERUM DARAH

A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM a. Tujuan : - Membuktikan sebagai makromolekul yang larut dalam bentuk larutan koloid, protein dapat dipisahkan dengan penambahan ammonium sulfat jenuh - Membuktikan sebagai makromolekul yang larut dalam bentuk larutan koloid, protein dapat dipisahkan dengan penambahan etanol absolut b. Hari / tanggal c. Tempat : Selasa / 25 Mei 2010 : laboratorium Kimia Fakultas MIPA Universitas Mataram.

B. LANDASAN TEORI. Protein merupakan komponen utama penyusun makhluk hidup. Protein juga berperan penting dalam metabolisme dalam bentuk enzim. Adapun sifat-sifat protein sendiri yaitu memiliki tingkat kelarutan berbeda dengan awalnya sebelum di tambahkan dengan larutan garam dengan kosentrasi tertentu. Proses penambahan gram dalam pengendapan protein disebut proses salting. Proses ini dibagi lagi menjadi 2 yaitu salting-in dan salting-out. Proses ini akan lebih maksimal jika menggunkan garam divalent yang artinya memiliki 2 ion negative atau positif. Selain pengendapan dengan menggunkan garam, protein juga dapat di endapkan dengan pengubahan pH yang nantinya akan berkaitan langsung dengan titik isolitrik suatu protein. Selain cara dia tas dengan menggunakan pelarut organic atau larutan logam juga dapat mengendapkan protein. Tetapi dalam hal ini proses pengendapan yang sering di pakai dalam isolasi protein adalah dengan menggunakan larutan garam, tetapi pengendapan ini tidak dapat dipakai dalam analisis secara kuanitatif (Wirahadikusumah, 2008). Serum merupakan bagian dari cairan tubuh yang bercampur dengan darah. Serum sendiri dapat diartiakan sebagai cairan tanda sel darah dan fator koagulasi atao fibrinogen. Serum merupakan juga sebuah plasma darah tanpa adanya fibrinogen. Serum ini terdari adri 4 jenis berdasarkan komponen yang terkandung didalamnya yaitu, serum albumin, serum globulin, serum lipoprotein dan serum wewenang. Masing-masing jenis serum memiliki fungsi yang berbeda meskipun dalam satu larutan plasma darah

(http://id.wikipedia.org/wiki/Serum_darah).

dan globulin.000. Protein-protein yang ada di dalam plasma antra lain protein fibrinogen.Dalam plasma darah proten merupakan bagian yang paling banyak terdapat di dalamnya yaitu sekitar 6 6-8%.000 17. Frinogen dan globulin memiliki sifat yang hampir Frinogen sama. a. Albumin sendiri selai terdapat dalam plasma drah juga terdapat didalam susu. 1994). 2009 2009). Albumin susu biasa disebut laktabumin. Albumin merupakan molekul makro yang memiliki bobot molekul sebesar 17. dan gandum. Tabung reaksi Rak tabung reaksi . albumin mengandung belerang.00070. albumin. sedangkan pada gandum biasa disebut leukosin (Soemardjo. Almumin dan globulin merupakan protein serum yang berfungsi sebagai penjaga besarnya tekanan osmosis pada darah (Poedjiadi. sedangkan pada globulin di butuhkan rutan sedangkan larutan jenuh ammonium sulfat agara dapat mengendapkan protein tersebut. tetapi miskin akan residu asam amino glisin. C. Tetapi fibrinogen lebihkan globulin memiliki mudah di endapkan dengan menggunakan larutan amoniasulfat setengah jenuh. Alat. ALAT DAN BAHAN.

Serum sapi + ammonium sulfat jenuh Terbentuk endapan Pisahkan (sentrifugasi) Endapan Uji Biuret Hasil 1 b. Serum sapi Larutan albumin telur Etanol absolut Amonium sulfat jenuh NaOH 10% CuSO4 0. Bahan. Pemisahan protein dengan etanol absolute. • Serum Sapi Serum sapi + Etanol Absolut Terbentuk endapan Pisahkan (sentrifugasi) Filtrat Uji biuret Hasil 2 Endapan Uji Biuret Hasil 1 Filtrat Uji biuret Hasil 2 .Pipet tetes Sentrifugasi b.1% D. Pengendapan protein dengan menggunakan garam kosentrasi tinggi. a. PROSEDUR KERJA.

• Albumin Telur. a. Penambahan Etanol Terbentuk larutan koloid dan larutan . Pemisahan protein dengan etanol absolute. Albumin telur + etanol absolut Terbentuk endapan Pisahkan (sentrifugasi) Endapan Uji Biuret Hasil 1 Filtrat Uji biuret Hasil 2 E. 2. 4. Perlakuan Serum ayam Pengamatan Serum berwarna coklat bening dan lebih pekat. 2. Penambahan (NH4)2SO4 jenuh. HASIL PENGAMATAN. Setelah disaring Uji Biuret Diperoleh endapan dan filrat Filtrat : terdapat 2 lapisan. Pengendapan prtein dengan larutan garam kosentrasi tinggi (salting-out) No 1. No 1. Terkoagulasi sehingga membentuk 2 lapisan Atas : bening Bawah : Keruh (ada endapan) 3. Atas : Terdapat bintik-bintik Bawah : lebih kental Endapan : warna menjadi biru keunguan dan terdapat bintik-bintik b. Perlakuan Serum ayam Pengamatan Serum berwarna coklat bening dan lebih pekat. Serum ayam.

Penambahan etanol absolut Terbentuk tiga lapisan. 3. 2. Perlakuan Putih telur Pengamatan Albumin telur berwarna coklat bening dan lebih pekat. Atas : Keruh Tengah : Putih Koloid Bawah : Bening Kekuningan. No 1. terdapat koloid Bawah : putih kental . terdapat koloid Endapan : Terbentuk 2 lapisan Atas : Berwarna hijau kebiruan. Uji Biuret Filtrat : Hijau Bening. Setelah disaring Diperoleh endapan dan filrat Filtrat : Hijau Endapan : Putih dan terdapat koloid 4. Atas : Terbentuk koloid berwarna kuning kehijauan Bawah : Kuning bening Endapan : terbentuk 2 lapisan Atas : warna agak kecoklatan Bawah : Krem ada endapannya Putih telur.absolut. 3. Setelah disaring berwrna krem Diperoleh endapan dan filrat Filtrat : berwarna kuning bening Endapan : berwarna krem 4. Uji Biuret Filtrat : terdapat 2 lapisan.

a. Reaksi Kimia Reaksi pengendapan.F. ANALISIS DATA. OH O R HN O O R HN O O NH2 R H3C SO4 OH + NH4 O CH3 2- HN O + (NH4)2SO4 + NH4O CH3 SO4 HN O + NH4 O 2- NH2 SO 24 OH O R HN O O R HN O O NH2 R + C2H5OH (l) Terdenaturasi (mengendap) .

dan serum wewenang. Salah satu zat yang terkandung di dalam serum adalah albumin yang merupakan protein globular (Podjiadi. Untuk memisahkan atara endapan dan larutan maka dilakukan sentrifugasi sehingga padatan atau endapan akan mengumpul pada dasar tabung. 1994). 1984).Reaksi Biuret OH O R HN O O R HN O O NH2 R H2N R Kompleks Biru R O O O NH2 NaOH R NH HN O R NH HN O O Cu 2+ HO O O OH R O O R + Cu 2+ G. Protein ini memiliki sifat-sifat yang khas. Setelah kita peroleh filtrate dan endapanya kita mengujinya dengan menggunakan uji biuret untuk menganalisis ada tidaknya protein di masing-masing fase. serum globulin. Mengapa kita menggukan garam ini ? karena jika menggunkan garam monovalen protein belum dapat di endapkan. atau dengan pemanasan (Arakawa dan Timashiff. ion logam. salah stunya dapat terdenaturasi atao terjadi perubahan struktur. hal ini dapat di tandai dengan terbentuknya endapan. yaitu garam yang memiliki ion positif atau negative yang lebih dari satu. Gram divalent ini akan meningkatkan kejenuhan dalam protein karena ion garam ini akan berdisosiasi dengan bagian protein yang bermuatan positif (NH4+) atau yang bermuatan negative (COO-) (Arakawa dan Timashiff. Hasil pengamatan yang kita peroleh pada serum ayam yang kita beri gram ammonium sulfat terjadi pengendapan tetapi dalam bentuk koagulasi. Terbentuknya endapan dapat di lakukan dengan penambahan asam. Gram yang di pakai dalam praktikum ini merupakan gram divalen. gram divalent. Plasma terdiri dari 4 jenis tergantung pada kandungan di dalamnya. Dalam praktikum ini kita membuktikan sifat protein yang dapat diendapkan dengan penambahan garam. adan zat organic. 4 serum itu adalah serum albumin. Serum merupakan bagian dari plasma darah yang telah dihilangkan fibrinogen terlebih dahulu. PEMBAHASAN. 1984). Dari hasil pengamatan terlihat bahwa yang mengendap merupakan .

Hasil yang diperoleh.org/wiki/Serum_darah). yang seharusnya di lakukan pada suhu rendah (Wirahadikumah. Tetapi jika kita melakukannya dengan suhu yang tinggi maka akan terjadi pengendapan yang disebabkan pemanasan. Sedangkan filtrate serum setelah diuji terbentuk larutan kuning kehijauan yang artinya ada protein di dalamnya. Dari hasil pengamatan yang diperoleh dapa dilihat protein di kedua sampel dapat di endapkan dengan penambahan etanol. Etanol yang kita gunakan berupa etanol absolute yang artinya etanol dengan kosentrasi 98%. jadi jika diinginkan protein tidak rusak mka sebaiknya menggunakan suhu yang rendah. 2009). . dan kosentrasi albumin yang rendah dan juga dilakukan pada suhu kamar.protein karena pada pengujian biuret terlihat larutan amenjadi berwarna biru keunguan yang artinya dalam endapan terdapat protein. Hasil pengamatan menunjukkan kedunya mengandung protein karena terbentuknya larutan berwarna hijau kebiruran yang artinya positif adanya protein. Setelah terpisah maka protein diuji secara kuantitatif dengan menggunakan metode uji biuret. Sedangkan pada filtrate terdapat bintikbintik biru yang merupakan protein yang masih tertinggal didalam filtrate. 2009). Hal ini dapat dipengaruhi karena terjadi denaturasi protein yang disebabkan penambahan etanol absolute. Untuk putih telur yang telah ditambahi dengan etanol absolute. Endapan dan filtrate diuji dengan uji biuret. terjadi pengandapan. Sampel yang kita uji berupa putih telur dan serum ayam. Hal ini disebabkan tidak semua protein terendapkan jadi dapat dikatakan masih ada sisa protein didalam filtrate serum. Padahal secara teori seharusnya masih terdapat protein tetapi bukan albumin yang sebelumnya telah diendapkan. albumin yang telah diendapkan kemudian dipisahkan dengan sentrifugasi. Dalam putih telur ini banyak terkandung protein albumin . Protein yang terdapat berupa protein globular yang tidak dapat mengendap dengan menggunakan larutan garam kosentrasi tinggi (http://id. endapan tidak mengandung protein hal ini dapat dilihat dari terbentuknya warna yang tidak ungu. Untuk serum ayam protein yang telah diendapkan selanjutnya dipisahkan dengan cara sentrifugasi. Zat organic dapat dipakai dalam mengendapkan protein hal dikarenakan zat organic dapat mengurangi kelarutan dari protein terdebut sehingga dapat disimpulkan protein akan mengendap (Wirahadikusumah.wikipedia. Untuk pengendapan protein selanjutnya kita menggunakan zat organik seperti etanol.

2. . Protein dalam serum adarah ayam dapat di endapkan dengan mengunakan penambahan garm ammonium sulfat dan pelarut organik (etanol absolute). 4. 5. Ada tidaknya protein dapat diuji secara kuatitatif dengan menggunkan uji biuret. analisis data. KESIMPULAN. Dari hasil pengamatan.H. Didalam serum terdapat protein berupa albumin dan protein globular. Putih telur komponen utamanya dalah protein albumin. Protein albumin dapat diendapkan dengan menggunakan pelarut organic (etanol absolute). 3. dan pembahasan maka dapat disimpulkan sebagai berikut : 1.