P. 1
sentrifus

sentrifus

|Views: 1,225|Likes:

More info:

Published by: Muhammad Hendri Januri on Mar 29, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

06/28/2014

pdf

text

original

BAB I PENDAHULUAN 1.

1 Latar Belakang Centrifuge adalah sebuah mesin yang berputar cepat, menempatkan gaya sentrifugal ke isinya, untuk memisahkan cairan kepadatan yang berbeda dari satu sama lain. Sentrifus bekerja pada prinsip sedimentasi, dan di gunakan secara luas di laboratorium untuk studi penelitian serta dalam ilmu kedokteran. Sentrifus biasanya bersifat kompak dan terbuat dari logam atau plastik. Alat tersebut digunakan oleh motor listrik. Di dalamnya sentrifus memiliki panel untuk menenmpatkan tabung kaca, jumlah tabung kaca dapat mengakomodasi pada suatu waktu. Sebuah tombol pada tubuh mesin sentrifuse, dapat diputar untuk menyesuaikan rotasi permenit, tergantung pada jenis cairan, komponen yang harus dipisahkan, kecepatan rotasi yang diatur. Sentrifus yang umum digunakan oleh praktisi medis, untuk mempelajari bahan kimia bio yang berbeda seperti protein, asam nukleat dan darah. Alat tersebut dapat memisahkan serum dan plasma dari darah atau bahkan padatan dari cairan, setelah ini sampel yang sangat murni dari serum darah sangat penting untuk prosedur pengujian dan analisis. Sentrifus medis berputar pada kecepatan yang sangat tinggi hingga 5000 putaran permenit. Rotasi tinggi permenit memungkinkan aktivitas pemisahan dalam waktu yang sangat rendah. Perbedaan dalam kepadatan dari unsur-unsur campuran dalam cairan adalah prinsip di balik kerja perangkat sentrifus. Pada praktikum kali ini praktikan akan melakukan pemisahan serum darah vena, untuk mendapatkan endapan yang akan di analisis. 1.2 Tujuan Percobaan - Mengetahui fungsi alat sentrifus - Mengetahui jenis alat sentrifus

Beberapa diantaranya. 1975). Pemutaran homogenat ini dalam sentrifugasi akan memisahkan dua fraksi. . organel dan molekul (Hendra. dan di dalamnya melibatkan penggunaan sentrifus.2 ml atau kurang sampai dengan ribuan liter. 1989) Gaya yang berperandalam sentrifus adalah gaya sentrifugal yang menyatakan bahwa setiap partikel yang berputar pada kecepatan sudut yang konstan memperoleh gaya keluar sebesar f. Sentrifugasi merupakan teknik yang di gunakan untuk fraksinasi subseluler. Sentrifuge bertujuan untuk memisahkan sel menjadi organel-organel utama sehingga fungsinya dapat diketahui (Miller. Penggunaan sentrifus cukup luas. Prinsip dasar sentrifugasi adalah pemisahan dua pertikel dalam suspensi (sel. 2000).substansi yang lebih berat akan berada di dasar. meliputi koleksi dari pemisahan sel. Organel yang berukuran besar dapat diperoleh dengan mempercepat kecepatan sentrifugasi. pengaturan kecepatan dan suhu tidak begitu teliti. besar gaya tergantung pada kecepatan sudut dan radius perputaran. bahkan terlempar keluar bila sentrifus tidak terkunci rapat karena timbulnya presisi (Robinson. Dalam bentuk yang sederhana sentrifus terdiri dari sebuah rotor dengan lubanglubang untuk meletakkan wadah/tabung yang berisi cairan dan sebuah motor atau alat lain yang dapat memutar rotor pada kecepatan yang dikehendaki. sedangkan kedua parameter ini di atur teliti dengan batas-batas ketidak telitian kurang dari 5%. sedangkan substansi yang lebih ringan akan terletak di atas (Miller. melalui sinokasi atau menempatkan sel tersebut pada tekanan tinggi (Bernas. atau molekul) yang memiliki massa dan densitas berbeda sehingga akan mengalami sedimentasi pada dasar tabung dengan laju yang berbeda ( Lodish. Supernatan terdiri dari bagian-bagian sel yang lebih kecil dan tersuspensi dalam cairan di atas pelet. semua bagian lain yang terdapat pada sentrifus modern saat ini hanyalah perlengkapan yang dimaksudkan untuk melakukan berbagai fungsi yang berguna dan mempertahankan kondisi lingkungan dimana rotor tersebut bekerja (Hendra. Langkah awal untuk melakukan fraksinasi sub seluler adalah dengan cara merusak membran plasma dan dinding sel. Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam penggunaan sentrifus antara lain mengenai masalah bobot tabung yang harus seimbang. 2000). Sentrifugasi diawali dengan homogenisasi untuk nmemecah sel tanpa merusak organelnya. 1975).BAB II TINJAUAN PUSTAKA Metode-metode fisika sangat penting perannya dalam penelitian dan peningkatan pengetahuan mengenai sel. Jika tidak seimbang maka kecepatan rotor menjadi tidak sama. artinya pemisahan sel melalui homogenisasi dan pemisahan organel-organel dari jenis satu ke jenis lainnya. Sentrifugasi adalah metode sedimentasi untuk memisahkan partikel-partikel dari suatu fluida berdasarkan jenisnya dengan memberikan gaya sentripetal (Robinson. 1975). dan relatif mudah penggunaannya. 2004). organel. Instrumen ini tersedia dalam berbagai kapasitas dari mulai 0. (Miller. Hal ini mengakibatkan bahan menjadi rusak.jika sel tersebut memilikinya. Untuk melakukan hal tersebut jaringan atau sel di suspensikan terlebih dahulu pada larutan sukrosa isotonis dan larutan buffer yang memiliki ph yang sesuai. Selanjutnya sel dipecah melalui homogenisasi dengan alat blender atau homogenizer. Hal ini agar sentrifugal pada sentrifus menjadi seimbang. pelet terdiri dari struktur-struktur yang lebih besar dan mengumpul di bagian bawah tabung. yaitu pelet dan supernatan . 1989). 2000).

000-25. Mesin ini dilengkapi dengan alat pendingin untuk mendinginkan ruang rotor.1. sedangkan lapisan adalah supernatannya.12 gram.47 gram. hal ini di lakukan untuk meminimalisasi degradasi enzim-enzim terhadap komponen sel ( Miller. sentrifus klinik merupakan sentrifus yang paling sederhana dan paling murah. sentrifus berkecepatan tinggi. Supernatan adalah hasil sentrifugasi yang berisi cairan yang tidak di perlukan.70 gram. Instrumen ini sering di gunakan untuk mengumpulkan sejumlah kecil partikel yang mudah/cepat mengendap. 1989). 5. Sentrifus berkecepatan tinggi bekerja dengan kecepatan 20.13 gram.000 rpm. 8.24 gram . Kemudian homogenisasi dan fraksinasi di lakukan pada suhu 40 c. 5.47 gram. Sentrifus ini digunakan untuk penggunaan preparatif. Pada ultra sentrifus memungkinkan dilakukannya fraksinasi organel-organel sub seluler yang sebelumnya hanya di amati melalui mikrograf elektron Sentrifus yang di gunakan pada percobaan ini adalah sentrifus berkecepatan tinggi yang sering di gunakan dalam laboratorium biokimia ( Hendra. tujuannya supaya tidak ada lagi gesekan dengan udara dan suhu tidak naik pada rotor yang berputar. Pelet adalah hasil endapan yang berisi organel-organel sel. dan ultra sentrifus . Hal tersebut membuktikan bahwa percobaan sentrifus yang digunakan berhasil. hasil percobaan menunjikkan tabung yang berisi pelet dan supernatan dari larutan kloroplas. 2000) Prinsip isolasi kloroplas adalah pemisahan pelet dengan sentrifugasi kecepatan diferensial. Pelet merupakan endapannya. 2. Jenis-jenis sentrifus diantaranya adalah sentrifus klinik. .Sebelum di jalankan sentrifus harus dalam keadaan fakum. Bobot pelet yang di hasilkan pada masing-masing meja adalah sebagai berikut : 3.

tempatkan secara seimbang dari tabung yang berisi darah tadi.1 Alat dan Bahan 3.1.1.2 Cara kerja -Disiapkan alat dan bahan -Dimasukkan tabung yang berisi darah vena ke dalam selongsong tabung sentrifus . .1 Alat -Sentrifus (fixed rotors) -Tabung reaksi 3. -Diatur kecepatan dan waktu perputaran sentrifus. untuk darah vena biasanya menggunakan kecepatan 3.500-4. dengan berat paling besar akan terlempar lebih dahulu.Dimasukkan tabung yang berisi aquades ke dalam selongsong tabung sentrifus.3 Prinsip Prinsip kerja sentrifus adalah melawan gaya tarik bumi (grafitasi) dengan kekuatan sentrifus sehingga partikel yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat putaran.BAB III METODOLOGI PERCOBAAN 3. Tenaga ini disebut relative centrifugal force (RCF) dalam satuan “G” yang menggambarkan daya pemisahan alat tersebut. 2. -Ditekan tombol on pada sentrifus dan tunggu sampai alat tersebut berhenti.2 Bahan -Darah vena -Aquades 3.000 rpm dalam waktu 5-10 menit.

maksimal ¾ bagian tabung saja. . Ultrasentrifus Sentrifus ini memiliki kecepatan tinggi dan umumnya memakai rotor jenis fixed. Kelebihannya yaitu kecepatan putaran lebih cepat karena gesekan udara lebih sedikit. Tabung yang di gunakan harus sesuai dengan ukuran selongsong agar kedudukannya pas dan tidak boleh terlalu keluar dari selongsongnya.2 Pembahasan Prinsip kerja sentrifus adalah melawan gaya tarik bumi (grafitasi) dengan kekuatan sentrifugal sehingga partikel yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat pusaran. Sentrifus fixed rotor Sentrifus ini memiliki selongsong tabung yang melekat secara tetap dengan sudut kemiringan 45 derajat. Kelemahannya yaitu sedimen yang terbentuk lebih mudah teruraidan tidak datar. sehingga apabila di putar. Tabung berukuran sama perlu didudukkan berhadapan dan untuk keseimbangan. Sentrifus swing out Sentrifus jenis ini memiliki selongsong tabung yang melekat secara bebas pada rotor sehingga apabila di putar. Hal ini terutama berlaku untuk jenis sentrifus khusus seperti mikro sentrifus dan sentrifus berukuran besar atau berkecepatan tinggi.BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4. Dan di lengkapi pendingin untuk mendinginkan suhu rotor yang suhunya meningkat akibat gesekan karena kecepatan putaran yang tinggi. Untuk kecepatan di atas 5000 rpm perlu di gunakan tabung polipropilen agar tidak pecah. 3. posisi selongsong dan tabung tetap pada kemiringan tersebut. Tenaga ini di sebut sebagai relative contrifugal force (RCF) Jenis-jenis sentrifus antara lain 1.1 Hasil Berdasarkan percobaan yang telah di lakukan. sentrifus tidak boleh di jalankan bila belum tertutup rapat atau dalam keadaan tabung belum seimbang. maka di dapat hasil sebagai berikut Jenis sampel = darah vena Kecepatan = 5. sebaiknya gunakan tabung yang sesuai dengan anjuran pabrik sentrifus. Untuk memperoleh hasil yang baik. dengan berat paling besar akan terlempar lebih dahulu. Kelemahannya yaitu kecepatan putaran lebih rendah. Jangan mengisi tabung sampai penuh. selongsong beserta tabung di dalamnya akan berada pada posisi datar atau horozontal. boleh menggunakan air untuk mengisi tabung penyeimbang.000 rpm Waktu = 5-10 menit Hasil = terdapat endapan pada bagian bawah tabung 4. 2.

Jenis-jenis sentrifus antara lain : .Ultrasentrifus 5. Fungsi alat sentrifus salah untuk memisahkan padatan dari cairan yang akan di sentrifus sehingga di hasilkan endapan yang dapat di analisis.BAB V PENUTUP 5.Sentrifus swing out .1 Kesimpulan Berda sarkan percobaan yang telah di lakukan. . 2. maka dapat di ambil kesimpulan sebagai berikut : 1.Sentrifus fixed rotor .2 Saran Untuk percobaan selanjutnya di harapkan agar praktikum menggunakan sampel selain sampel yang di gunakan pada praktikum kali ini.

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->