BAB I PENDAHULUAN 1.

1 Latar Belakang Centrifuge adalah sebuah mesin yang berputar cepat, menempatkan gaya sentrifugal ke isinya, untuk memisahkan cairan kepadatan yang berbeda dari satu sama lain. Sentrifus bekerja pada prinsip sedimentasi, dan di gunakan secara luas di laboratorium untuk studi penelitian serta dalam ilmu kedokteran. Sentrifus biasanya bersifat kompak dan terbuat dari logam atau plastik. Alat tersebut digunakan oleh motor listrik. Di dalamnya sentrifus memiliki panel untuk menenmpatkan tabung kaca, jumlah tabung kaca dapat mengakomodasi pada suatu waktu. Sebuah tombol pada tubuh mesin sentrifuse, dapat diputar untuk menyesuaikan rotasi permenit, tergantung pada jenis cairan, komponen yang harus dipisahkan, kecepatan rotasi yang diatur. Sentrifus yang umum digunakan oleh praktisi medis, untuk mempelajari bahan kimia bio yang berbeda seperti protein, asam nukleat dan darah. Alat tersebut dapat memisahkan serum dan plasma dari darah atau bahkan padatan dari cairan, setelah ini sampel yang sangat murni dari serum darah sangat penting untuk prosedur pengujian dan analisis. Sentrifus medis berputar pada kecepatan yang sangat tinggi hingga 5000 putaran permenit. Rotasi tinggi permenit memungkinkan aktivitas pemisahan dalam waktu yang sangat rendah. Perbedaan dalam kepadatan dari unsur-unsur campuran dalam cairan adalah prinsip di balik kerja perangkat sentrifus. Pada praktikum kali ini praktikan akan melakukan pemisahan serum darah vena, untuk mendapatkan endapan yang akan di analisis. 1.2 Tujuan Percobaan - Mengetahui fungsi alat sentrifus - Mengetahui jenis alat sentrifus

2 ml atau kurang sampai dengan ribuan liter.substansi yang lebih berat akan berada di dasar. Sentrifugasi diawali dengan homogenisasi untuk nmemecah sel tanpa merusak organelnya. Untuk melakukan hal tersebut jaringan atau sel di suspensikan terlebih dahulu pada larutan sukrosa isotonis dan larutan buffer yang memiliki ph yang sesuai. yaitu pelet dan supernatan . 1975). 2000). atau molekul) yang memiliki massa dan densitas berbeda sehingga akan mengalami sedimentasi pada dasar tabung dengan laju yang berbeda ( Lodish. Beberapa diantaranya. Sentrifugasi merupakan teknik yang di gunakan untuk fraksinasi subseluler. . 1989). Penggunaan sentrifus cukup luas. sedangkan substansi yang lebih ringan akan terletak di atas (Miller. dan di dalamnya melibatkan penggunaan sentrifus. bahkan terlempar keluar bila sentrifus tidak terkunci rapat karena timbulnya presisi (Robinson.BAB II TINJAUAN PUSTAKA Metode-metode fisika sangat penting perannya dalam penelitian dan peningkatan pengetahuan mengenai sel. Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam penggunaan sentrifus antara lain mengenai masalah bobot tabung yang harus seimbang. 1975). (Miller. pengaturan kecepatan dan suhu tidak begitu teliti. Pemutaran homogenat ini dalam sentrifugasi akan memisahkan dua fraksi. sedangkan kedua parameter ini di atur teliti dengan batas-batas ketidak telitian kurang dari 5%. Dalam bentuk yang sederhana sentrifus terdiri dari sebuah rotor dengan lubanglubang untuk meletakkan wadah/tabung yang berisi cairan dan sebuah motor atau alat lain yang dapat memutar rotor pada kecepatan yang dikehendaki. Selanjutnya sel dipecah melalui homogenisasi dengan alat blender atau homogenizer. artinya pemisahan sel melalui homogenisasi dan pemisahan organel-organel dari jenis satu ke jenis lainnya. besar gaya tergantung pada kecepatan sudut dan radius perputaran. pelet terdiri dari struktur-struktur yang lebih besar dan mengumpul di bagian bawah tabung. 2004). dan relatif mudah penggunaannya. Sentrifugasi adalah metode sedimentasi untuk memisahkan partikel-partikel dari suatu fluida berdasarkan jenisnya dengan memberikan gaya sentripetal (Robinson. organel dan molekul (Hendra. Prinsip dasar sentrifugasi adalah pemisahan dua pertikel dalam suspensi (sel. Langkah awal untuk melakukan fraksinasi sub seluler adalah dengan cara merusak membran plasma dan dinding sel. 1975). Organel yang berukuran besar dapat diperoleh dengan mempercepat kecepatan sentrifugasi. 2000). 1989) Gaya yang berperandalam sentrifus adalah gaya sentrifugal yang menyatakan bahwa setiap partikel yang berputar pada kecepatan sudut yang konstan memperoleh gaya keluar sebesar f. Instrumen ini tersedia dalam berbagai kapasitas dari mulai 0. Jika tidak seimbang maka kecepatan rotor menjadi tidak sama. meliputi koleksi dari pemisahan sel. semua bagian lain yang terdapat pada sentrifus modern saat ini hanyalah perlengkapan yang dimaksudkan untuk melakukan berbagai fungsi yang berguna dan mempertahankan kondisi lingkungan dimana rotor tersebut bekerja (Hendra. organel. Hal ini mengakibatkan bahan menjadi rusak. Sentrifuge bertujuan untuk memisahkan sel menjadi organel-organel utama sehingga fungsinya dapat diketahui (Miller. 2000). melalui sinokasi atau menempatkan sel tersebut pada tekanan tinggi (Bernas. Supernatan terdiri dari bagian-bagian sel yang lebih kecil dan tersuspensi dalam cairan di atas pelet. Hal ini agar sentrifugal pada sentrifus menjadi seimbang.jika sel tersebut memilikinya.

sentrifus klinik merupakan sentrifus yang paling sederhana dan paling murah.000 rpm. 5. hal ini di lakukan untuk meminimalisasi degradasi enzim-enzim terhadap komponen sel ( Miller. sentrifus berkecepatan tinggi. Jenis-jenis sentrifus diantaranya adalah sentrifus klinik. dan ultra sentrifus . Sentrifus berkecepatan tinggi bekerja dengan kecepatan 20.47 gram. Kemudian homogenisasi dan fraksinasi di lakukan pada suhu 40 c. 2.70 gram.13 gram. Hal tersebut membuktikan bahwa percobaan sentrifus yang digunakan berhasil. 8.Sebelum di jalankan sentrifus harus dalam keadaan fakum.000-25. sedangkan lapisan adalah supernatannya.47 gram.24 gram . 2000) Prinsip isolasi kloroplas adalah pemisahan pelet dengan sentrifugasi kecepatan diferensial. Bobot pelet yang di hasilkan pada masing-masing meja adalah sebagai berikut : 3. Pada ultra sentrifus memungkinkan dilakukannya fraksinasi organel-organel sub seluler yang sebelumnya hanya di amati melalui mikrograf elektron Sentrifus yang di gunakan pada percobaan ini adalah sentrifus berkecepatan tinggi yang sering di gunakan dalam laboratorium biokimia ( Hendra. Instrumen ini sering di gunakan untuk mengumpulkan sejumlah kecil partikel yang mudah/cepat mengendap. Mesin ini dilengkapi dengan alat pendingin untuk mendinginkan ruang rotor. Sentrifus ini digunakan untuk penggunaan preparatif. Pelet adalah hasil endapan yang berisi organel-organel sel. 5. . 1989).1. Supernatan adalah hasil sentrifugasi yang berisi cairan yang tidak di perlukan.12 gram. hasil percobaan menunjikkan tabung yang berisi pelet dan supernatan dari larutan kloroplas. Pelet merupakan endapannya. tujuannya supaya tidak ada lagi gesekan dengan udara dan suhu tidak naik pada rotor yang berputar.

. Tenaga ini disebut relative centrifugal force (RCF) dalam satuan “G” yang menggambarkan daya pemisahan alat tersebut. -Ditekan tombol on pada sentrifus dan tunggu sampai alat tersebut berhenti. tempatkan secara seimbang dari tabung yang berisi darah tadi.3 Prinsip Prinsip kerja sentrifus adalah melawan gaya tarik bumi (grafitasi) dengan kekuatan sentrifus sehingga partikel yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat putaran.1.1.2 Bahan -Darah vena -Aquades 3.500-4. -Diatur kecepatan dan waktu perputaran sentrifus. 2.2 Cara kerja -Disiapkan alat dan bahan -Dimasukkan tabung yang berisi darah vena ke dalam selongsong tabung sentrifus .Dimasukkan tabung yang berisi aquades ke dalam selongsong tabung sentrifus.BAB III METODOLOGI PERCOBAAN 3. dengan berat paling besar akan terlempar lebih dahulu. untuk darah vena biasanya menggunakan kecepatan 3.000 rpm dalam waktu 5-10 menit.1 Alat dan Bahan 3.1 Alat -Sentrifus (fixed rotors) -Tabung reaksi 3.

Hal ini terutama berlaku untuk jenis sentrifus khusus seperti mikro sentrifus dan sentrifus berukuran besar atau berkecepatan tinggi. sebaiknya gunakan tabung yang sesuai dengan anjuran pabrik sentrifus. Kelemahannya yaitu kecepatan putaran lebih rendah.2 Pembahasan Prinsip kerja sentrifus adalah melawan gaya tarik bumi (grafitasi) dengan kekuatan sentrifugal sehingga partikel yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat pusaran. Tabung berukuran sama perlu didudukkan berhadapan dan untuk keseimbangan.000 rpm Waktu = 5-10 menit Hasil = terdapat endapan pada bagian bawah tabung 4. Tenaga ini di sebut sebagai relative contrifugal force (RCF) Jenis-jenis sentrifus antara lain 1.BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4. . Tabung yang di gunakan harus sesuai dengan ukuran selongsong agar kedudukannya pas dan tidak boleh terlalu keluar dari selongsongnya. Kelemahannya yaitu sedimen yang terbentuk lebih mudah teruraidan tidak datar. posisi selongsong dan tabung tetap pada kemiringan tersebut. maksimal ¾ bagian tabung saja. boleh menggunakan air untuk mengisi tabung penyeimbang. sentrifus tidak boleh di jalankan bila belum tertutup rapat atau dalam keadaan tabung belum seimbang. 2. Untuk memperoleh hasil yang baik. Dan di lengkapi pendingin untuk mendinginkan suhu rotor yang suhunya meningkat akibat gesekan karena kecepatan putaran yang tinggi. Sentrifus swing out Sentrifus jenis ini memiliki selongsong tabung yang melekat secara bebas pada rotor sehingga apabila di putar. maka di dapat hasil sebagai berikut Jenis sampel = darah vena Kecepatan = 5. selongsong beserta tabung di dalamnya akan berada pada posisi datar atau horozontal. Jangan mengisi tabung sampai penuh. 3. dengan berat paling besar akan terlempar lebih dahulu. Ultrasentrifus Sentrifus ini memiliki kecepatan tinggi dan umumnya memakai rotor jenis fixed. Untuk kecepatan di atas 5000 rpm perlu di gunakan tabung polipropilen agar tidak pecah. sehingga apabila di putar.1 Hasil Berdasarkan percobaan yang telah di lakukan. Kelebihannya yaitu kecepatan putaran lebih cepat karena gesekan udara lebih sedikit. Sentrifus fixed rotor Sentrifus ini memiliki selongsong tabung yang melekat secara tetap dengan sudut kemiringan 45 derajat.

BAB V PENUTUP 5. . maka dapat di ambil kesimpulan sebagai berikut : 1. Fungsi alat sentrifus salah untuk memisahkan padatan dari cairan yang akan di sentrifus sehingga di hasilkan endapan yang dapat di analisis.2 Saran Untuk percobaan selanjutnya di harapkan agar praktikum menggunakan sampel selain sampel yang di gunakan pada praktikum kali ini.Sentrifus fixed rotor .1 Kesimpulan Berda sarkan percobaan yang telah di lakukan.Ultrasentrifus 5. 2. Jenis-jenis sentrifus antara lain : .Sentrifus swing out .

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful