You are on page 1of 6

BAB II DASAR TEORI

A. Coliform Coliform merupakan suatu grup bakteri yang digunakan sebagai indikator adanya polusi kotoran dan kondisi yang tidak baik terhadap air, makanan, susu dan produk lainnya. Coliform sebagai suatu kelompok dicirikan sebagai bakteri berbentuk batang, gram negatif, tidak membentuk spora, aerobik dan anaerobik fakultatif yang memfermentasi laktosa dengan menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35oC. Adanya bakteri Coliform di dalam makanan/minuman menunjukkan kemungkinan adanya mikroba yang bersifat enteropatogenik dan atau toksigenik yang berbahaya bagi kesehatan. Bakteri Coliform dapat dibedakan menjadi 2 grup, yaitu Coliform fekal (Escherichia coli) dan Coliform nonfekal (Enterobacter aerogenes). Escherichia coli merupakan bakteri yang berasal dari kotoran hewan atau manusia, sedangkan Enterobacter aerogenes biasanya ditemukan pada hewan atau tanam-tanaman yang telah mati (Fardiaz, 1993).

B. Medium Pertumbuhan Menurut Anonim, 1989 media pertumbuhan yang dapat digunakan untuk mengetahui adanya Bakteri Coliform, yaitu: a. Media LB (Lactose Broth) Media yang digunakan untuk mengetahui ada tidaknya kehadiran bakteri Coliform (bakteri gram negatif) berdasarkan terbentuknya asam dan gas yang disebabkan karena fermentasi laktosa oleh bakteri golongan coli. Terbentuknya asam dilihat dari kekeruhan pada media laktosa dan gas yang dihasilkan dapat dilihat dalam tabung Durham berupa gelembung udara. Tabung dinyatakan positif coliform jika terbentuk gas sebanyak 10% atau lebih dari volume di dalam tabung Durham (Fardias, 1989). b. Media BGLB (Brilliant Green Bile Broth) Media yang digunakan untuk mendeteksi bakteri Coliform (Gram negatif) di dalam air, makanan, dan produk lainnya. Media ini dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan menggiatkan pertumbuhan bakteri Coliform. Ada atau tidaknya bakteri Coliform ditandai dengan terbentuknya asam dan gas yang disebabkan karena fermentasi laktosa oleh bakteri golongan coli.

C. Most Probable Number (MPN) Cara pemeriksaan secara bakteriologi pada pemeriksaan air digunakan untuk menentukan kualitasnya. Cara ini untuk mengetahui derajat kontaminasi air oleh bahan buangan yang berasal dari manusia maupun hewan. Kuman golongan coli (Coliform group) sudah lama digunakan sebagai indikator untuk mengetahui adanya pengotoran air. Hasil pemeriksaan golongan coli dengan sistem tabung dinyatakan dengan indeks MPN (Most Probable Number) atau JPT (Jumlah Perkiraan Terdekat). Indeks ini merupakan indeks dari jumlah kuman golongan coli yang paling mungkin, dan bukan perhitungan yang sesungguhnya. Walaupun begitu, hasil ini memberikan angka yang dapat digunakan untuk menunjukkan kualitas air (Waluyo, 2007).

Menurut Anonim, 2010 indikator atau tanda bahwa air lingkungan telah tercemar adalah adanya perubahan atau tanda yang dapat diamati yang dapat digolongkan menjadi: 1. Pengamatan secara fisis, yaitu pengamatan pencemaran air berdasarkan tingkat kejernihan air (kekeruhan), perubahan suhu, warna dan adanya perubahan warna, bau, dan rasa. 2. Pengamatan secara kimiawi, yaitu pengamatan pencemaran air berdasarkan zat kimia yang terlarut, perubahan pH. 3. Pengamatan secara biologis, yaitu pengamatan pencemaran air berdasarkan

mikroorganisme yang ada dalam air, terutama ada tidaknya bakteri pathogen.

D. Uji Kualitatif Coliform Menurut Anonim, 2010 uji kualitatif Coliform secara lengkap terdiri dari 4 tahap, yaitu : 1. Uji penduga (presumptive test) Merupakan tes pendahuluan tentang ada tidaknya kehadiran bakteri Coliform berdasarkan terbentuknya asam dan gas, yang disebabkan karena fermentasi laktosa oleh bakteri golongan koli. Banyaknya kandungan bakteri Escherichia coli dapat dilihat dengan menghitung tabung yang menunjukkan reaksi positif terbentuk asam dan gas, dan dibandingkan dengan tabel MPN. Metode MPN dilakukan untuk menghitung jumlah mikroba di dalam contoh yang berbentuk cair. Bila inkubasi 1 x 24 jam hasilnya negatif, maka dilanjutkan dengan inkubasi 2 x 24 jam pada suhu 35oC. Jika dalam waktu 2 x 24 jam tidak terbentuk gas dalam tabung Durham, dihitung sebagai hasil negatif. Jumlah

tabung yang positif dihitung pada masing-masing seri. MPN penduga dapat dihitung dengan melihat tabel MPN. 2. Uji penguat (confirmed test) Hasil uji dugaan dilanjutkan dengan uji ketetapan. Dari tabung yang positif terbentuk asam dan gas terutama pada masa inkubasi 1 x 24 jam, suspensi ditanamkan pada media Eosin Methylen Biru Agar ( EMBA ) secara aseptik dengan menggunakan jarum inokulasi. Koloni bakteri Escherichia coli tumbuh berwarna merah kehijauan dengan kilat metalik atau koloni berwarna merah muda dengan lendir untuk kelompok koliform lainnya. 3. Uji pelengkap (completed test) Pengujian selanjutnya dilanjutkan dengan uji kelengkapan untuk menentukan bakteri Escherichia coli. Dari koloni yang berwarna pada uji ketetapan diinokulasikan ke dalam medium kaldu laktosa dan medium agar miring Nutrient Agar ( NA ), dengan jarum inokulasi secara aseptik. Diinkubasi pada suhu 370C selama 1 x 24 jam. Bila hasilnya positif terbentuk asam dan gas pada kaldu laktosa, maka sampel positif mengandung bakteri Escherichia coli. Bakteri golongan koli tidak dapat tumbuh dengan baik pada suhu 420C, sedangkan golongan koli fekal dapat tumbuh dengan baik pada suhu 420C. 4. Uji identifikasi Dengan melakukan reaksi IMVIC (Indole, Methyl red, Voges-Proskauer tes,dan penggunaan Citrat).

DAFTAR PUSTAKA Fardiaz. 1993. Kesehatan Lingkungan. Klaten: PT. Intan Pariwara. Waluyo. 2007. Mikroba. Yogyakarta: Gajah Mada University. Anonim, 2010. etd.eprints.ums.ac.id. Diakses pada tanggal 1 Desember 2010. Anonim, 2010. www. ekologi.litbang.depkes.go.id. Diakses pada tanggal 1 Desember 2010. Anonim, 1989. www. rudyct.com. Diakses pada tanggal 1 Desember 2010.

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Alat dan Bahan 1. Alat yang digunakan: a. Tabung reaksi b. Pipet ukur c. Pro pipet/ Ball pipet d. Erlenmeyer e. Bunsen f. Neraca analitik g. Inkubator h. Oven i. Autoclav j. Termometer k. Kertas pH l. Label m. Nitrate test n. Phosphate test

2. Bahan yang diperlukan: a. Medium LB b. Medium BGLB c. Aquadest A. Cara Kerja 1. Parameter fisik Suhu Diambil air dengan gayung Dimasukkan termometer ke dalam air Dicatat besarnya suhu air pH Diambil air dengan gayung Dicelupkan kertas pH ke dalam air Diangkat kertas pH dan dibiarkan beberapa saat Diamati perubahan warna pada kertas pH dan dicatat pH-nya

2. Parameter kimia Phosphate test Diambil 5 mL sampel air sumur dan PDAM Ditambahkan 5 tetes PO4-1 Ditambahkan 1 sendok PO4-2 Didiamkan selama 2 menit Diamati perubahan warna dan dicatat kadar phosphate-nya Nitrate test Diambil 5 mL sampel air sumur dan PDAM Ditambahkan 2 sendok NO3-1 Digoyang-goyangkan selama 1 menit Didiamkan selama 5 menit Diamati perubahan warna dan dicatat kadar nitrate-nya Pembuatan medium LB Ditimbang medium LB 11,7 gram Ditambahkan 900 mL aquadest Digojog dan dimasukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 5 mL dan 10 mL Disterilisasi selama 15 menit Didinginkan

Pembuatan medium BGLBB Ditimbang medium BGLB 32,4 gram Ditambahkan 810 mL aquadest Digojog dan dimasukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 10 mL Disterilisasi selama 15 menit Didinginkan Preparasi sampel Diambil sampel air sumur dan dimasukkan ke dalam medium LB
10 mL sampel 1 mL sampel 0,1 mL sampel

5 mL medium LB

10 mL medium LB

10 mL medium LB

Dimasukkan ke dalam inkubator selama 24 jam Dilihat hasilnya, jika terdapat gelembung maka hasilnya positif dan sebaliknya. Jika hasilnya negatif maka dipindahkan ke dalam medium BGLB Diambil 1 mL sampel yang hasilnya negatif Dimasukkan ke dalam medium BGLB Dimasukkan ke dalam inkubator selama 24 jam Dilihat hasilnya, jika terdapat gelembung maka hasilnya positif dan sebaliknya.

You might also like