LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA

Dosen Asistensi : Drs. Agus Supriyanto, M. Kes

Disusun oleh : 1. Nur Afidatul Maulidiyah 2. Ratih Kuspriyadani 3. Evi Kustiningtyas 4. Virna Dwi Risnawanti (080914016) (080914023) (080914031) (080914034)

DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS AIRLANGGA 2012

Berbeda dengan Salmonella. Kelompok bakteri ini dapat ditemukan pada usus manusia dan usus mamalia lain dan dikelompokkan dalam familia Enterobacteriaceae. dan memiliki flagel peritrikus. bakteri Salmonella. Berbeda dengan Salmonella. Bila masuk dalam tubuh akan menimbulkan gejala yang disebut Salmonellosis. masing-masing genus bakteri dari kelompok Enterobacteriaceae memiliki peran yang beranekaragam. bentuk batang. Genus-genus bakteri yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented yaitu Eschericia coli. DASAR TEORI Identifikasi bakteri enteric merupakan hal penting untuk mengontrol adanya infeksi usus yang disebabkan oleh adanya kontaminasi pada makanan dan minuman. Di alam. perbedaannya hanya karena Shigella bersifat non motil. - TUJUAN Mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactose dalam media selektif dan diferensial Mendeskripsikan karakteristik fisiologis bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactosa II. Misalnya. Shigella. Yersinia. Enterobacter. Citrobacter. dan Klebsiella.PRAKTIKUM 4 KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA I. gejala penyakit yang ditimbulkan oleh bakteri Shigella dikenal dengan nama Shigellosis atau disentri basiler. Bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dikelompokkan menjadi dua yaitu bakteri enteric yang dapat memfermentasi laktosa (fermented lactose) dan tidak dapat memfermentasi laktosa (non fermented lactose). Bakteri ini menyerupai Escherichia. Proteus. Shigella tidak menyebar ke tempat lainnya lagi (usus) dan penyakit yang ditimbulkan adanya pendarahan kecil menyebabkan tinja berdarah dan berlendir. merupakan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi pada saluran pencernaan. Bakteri dari genus Salmonella termasuk bakteri Gram negative. dan Erdwardsiella. anaerob fakultatif. . Sedangkan yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented lactose diantaranya yaitu Salmonella.

Tabung reaksi 3. Aluminium foil 5. Reagen KOH 10% 3. Bakteri Alcaligenes denitrificans 2. Media VP (Voges-Proskaeur) broth 6. Kapas 4. Media Simmons Citrat Agar 3. Bunsen 6. Reagen Naftol 4. Cawan petri 2. Reagen Kovac . Larutan H2O2 (Hydrogen Peroxida) 2. Jarum ose  Bahan Biakan bakteri : 1. Bakteri Pseudomonas aeruginosa 3. III.Pengamatan karakteristik dari masing-masing bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dilakukan dengan menumbuhkan bakteri pada berbagai media selektif dan diferensial serta menguji aktivitas biokimia dari masing-masing spesies. Media MR (Methyl Red) broth 5. Media SIM (Semi Solid Indol Motility) Agar Bahan Kimia : 1. Bakteri Aeromonas hydrophila Media : 1. ALAT DAN BAHAN  Alat 1. Media TSIA (Triple Sugar Iron Agar) 4. Mac Conkey agar 2.

Mendeskripsikan karakteristik koloni bakteri yang tumbuh. PROSEDUR KERJA 1. 7. Melakukan uji fisiologis dari masing-masing bakteri pada media uji yang sudah disiapkan di tabung reaksi dengan menumbuhkan bakteri menggunakan bantuan ose. Menumbuhkan bakteri yang digunakan untuk praktikum ini pada media SSA dan Mac Conkey Agar. Mencatat hasil uji fisiologis dari masing-masing genus bakteri dan memasukkan datanya pada tabel hasil pengamatan. Merangkum hasil pengamatan dengan baik untuk dapat menyimpulkan perbedaan yang jelas tentang karakteristik bakteri enteropatogenik non fermented lactosa. 4.IV. Mengamati karakteristik koloni masing-masing bakteri tersebut 3. HASIL PENGAMATAN Tabel 1. 5.1 Data Gambar Bakteri Non Fermented Lactose dengan berbagai Uji Fisiologis No 1 Alcaligenes denitrificans Pseudomonas aeruginosa Aeromonas hydrophila Media Mac Conkey 2 Media Mac Conkey Media Mac Conkey . V. Melakukan inokulasi secara aseptic dan menginkubasinya selama 24 jam 6. 2.

SIM Penambahan reagen Nafthol : (Kiri-kanan : Alcaligenes denitrificans. Citrat. SIM kiri-kanan : TSIA. Aeromonas hydrophila. Citrat. . No Media Karakteristik Pigmentasi 1 Mc Conkey 2 SSA Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Pigmentasi Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Alcaligenes Pseudomonas Aeromonas denitrificans aeruginosa hydrophila Merah Merah muda Coklat muda muda Serrate Lobate Rata Large Large Large Flat Flat Flat Circular Circular Circular Coklat muda Entire Moderate Flat Circular Keterangan : (-) : Bakteri tidak tumubuh dalam media selektif.Bakteri sebelum inkubasi 3 Bakteri sebelum inkubasi Bakteri sebelum inkubasi kiri-kanan : TSIA. SIM 4 kiri-kanan : TSIA.2 Data Karakteristik Makroskopis Bakteri Non Fermented Lacotose pada Media Mac Conkey dan SSA. Pseudomonas aeruginosa) Tabel 1. Citrat.

Proteus. Namun. PEMBAHASAN Pada praktikum kali ini bertujuan untuk mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan dan fisiologi bakteri non fermented lactose. Beberpa genus bakteri dari familia Enterobacteriaceae yaitu Salmonella. Ketiga bakteri yang digunakan adalah Alcaligenes denitrificans. Pseudomonas aeruginosa.3 Data Pengamatan Uji Fisiologis Bakteri Non Fermented Lactose No Uji Karakteristik Fisiologis Katalase Gelembung gas Deep Slant Gas Motilitas bakteri Motilitas Cincin Perubahan warna media Alcaligenes denitrificans ++ + + Coklat kehijauan + Bakteri Pseudomonas aeruginosa +++ + Coklat + Aeromonas hydrophila + + Coklat kehijauan + 1 2 TSIA 3 Motilitas 4 5 Indol Citrat Keterangan : (+++) : Gelembung gas yang dihasilkan lebih tinggi dibandingkan (++) dan (+) VI. bakteri ini akan mengubah peptode menjadi amoniak yang kemudian menaikkan pH pada Mac Conkey agar. Bakteri yang digunakan pada praktikum kali ini tidak bukan dari family Enterobacteriaceae namun bakteri dari kelompok lain. Pada landasan teori diketahui bahwa bakteri non fermented lactose merupakan kelompok bakteri yang tidak menggunakan laktosa sebagai sumber karbonnya. Shigella. Yersinia dan Edwardsiella merupakan bakteri yang tidak dapat memfermentesi laktosa atau disebut juga non fermented lactose bacteria.Tabel 1. juga terdapat genus laiinya seperti Pseudomonas. . Selain genus dari familia Enterobacteriaceae. Alcaligenes serta Aeromonas. dan Aeromonas hydrophila.

Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . gram negatif. berukuran large. Hal ini disebabkan bakteri Aeromonas hydrophila hanya dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar. dengan elevasi flat. dengan elevasi flat. namun hanya tumbuh subur pada Mac Conkey Agar. dengan elevasi flat. Dari hasil pengamatan diketahui karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan . Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . Sedangkan bakteri Aeromonas hydrophila merupakan suatu bakteri berbentuk batang. Pada praktikum kali ini juga dilakukan uji biokimia atau sering disebut dengan uji fisiologis bakteri. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. Pada uji katalase diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. dengan elevasi flat. Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda. Uji katalase digunakan untuk mengetahui aktivitas enzim katalase pada bakteri yang diuji. Dalam uji fisiologis bakteri ini dilihat dari interaksi metabolit-metabolit yang dihasilkan oleh sel bakteri dengan reagen-reagen kimia. berukuran large. Pseudomonas aeruginosa. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. yang pada umumnya terdapat pada perairan. berukuran large. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil positif yang ditunjukkan dengan terbentuknya gas ketika ditetesi dengan cairan H2O2 (hidrogen peroksida) . Kebanyakan bakteri memproduksi enzim katalase yang dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan . berukuran large.Bakteri Pseudomonas aeruginosa mempunyai karakteristik berbentuk batang. berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. gram negatif dan termasuk bakteri aerob. Bakteri Alcaligenes denitrificans adalah bakteri berbentuk batang gram negatif. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. motil. motil/bergerak dengan flagella polar. Selain itu juga dilihat kemampuan bakteri tersebut untuk menggunakan senyawa tertentu sebagai sumber karbon dan sumber energi. Hal ini disebabkan bakteri Alkaligenes denitrificans dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar dan SSA. dan termasuk bakteri aerob obligat.

Asam amino triptofan merupakan komponen asam amino yang lazim terdapat pada protein. dan mengandung glukosa dengan konsentrasi yang lebih rendah yaitu 0. . Pada uji TSIA diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. Warna media mula-mula adalah merah-orange yang kemudian berubah lebih kemerahan disebabkan karena media menjadi basa. Hal ini menandakan bahwa bakteri ini tidak memfermentasi laktosa dan sukrosa. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil negatif (lebih berwarna merah) pada daerah deep dan slant. Artinya bakteri ini membentuk indol dari tryptopan sebagai sumber carbon. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans. Untuk mengamati fermentasi karbohidrat. Pseudomonas aeruginosa. Indikator pH (Phenol Red) ditambahkan untuk menunjukkan adanya perubahan pH akibat fermentasi karbohidrat. Uji motilitas pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar. Motilitas bakteri adalah suatu gerakan bakteri yang disebabkan adanya gerak aktif dan pasif.1%. sedangkan negatif untuk bakteri Aeromonas hydrophila. Konsentrasi ini akan berpengaruh terhadap penggunaan karbohidrat dan keadaan asam yang terbentuk. yang bersifat gram negatif dan memfermentasikan glukosa membentuk asam sehingga dapat dibedakan dengan bakteri gram negatif intestinal lain. Enzim katalase diduga penting untuk pertumbuhan aerobik karena H2O2 yang dibentuk dengan pertolongan berbagai enzim pernafasan bersifat racun terhadap sel mikroba. TSIA adalah uji yang dirancang untuk membedakan beberapa jenis bakteri yang termasuk kelompok Enterobacteriaceae. sehingga asam amino ini dengan mudah dapat digunakan oleh mikroorganisme akibat penguraian protein. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans dan Pseudomonas aeruginosa. media TSIA mengandung laktosa dan sukrosa dengan konsentrasi 1%. Uji indol pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar yang kemudian ditetesi dengan reagen kovac setelah inkubasi. sedangkan gerak pasif disebabkan karena faktor dari luar. serta tidak terbentuk gas. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila. yang dapat diketahui dengan menambahkan larutan kovacs. Gerak aktif adalah gerakan bakteri yang disebabkan karena bakteri memiliki flagel. Indikasi positif diperoleh karena terbentuknya lapisan (cincin) berwarna merah pada permukaan biakan.O2.

berukuran large. dan tepian. berukuran large. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. VII.  Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda.Uji sitrat pada praktikum ini menggunakan media Simmons Citrat Agar.  Uji positif yang ditunjukkan pada karakteristik fisiologis bakteri non-fermented lactose adalah:  Katalase : terdapatnya gas . Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . dengan elevasi flat. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. dengan elevasi flat.Aeromonas hydrophila : + . elevasi.Alcaligenes denitrificans : + .Pseudomonas aeruginosa : + . berukuran large. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. dengan elevasi flat. Indikasi positif diperoleh karena terjadinya perubahan warna media yang semula hijau menjadi kebiruan. bentuk. dengan elevasi flat.  Karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan . berukuran large. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. Hasil uji menunjukkan indikasi positif ada bakteri Alcaligenes denitrificans. Artinya bakteri ini tersebut mempunyai enzim sitrat permiase yaitu suatu enzim spesifik yang membawa sitrat ke dalam sel.  Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . KESIMPULAN  Karakteristik pertumbuhan bakteri non-fermented lactose pada media selektif dan diferensial dapat dilihat berdasarkan ukuran. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. pigmentasi.

Aeromonas hydrophila : +  Uji Sitrat : terdapatnya sitrat ditandai dengan perubahan warna biru pada media .Alcaligenes denitrificans : + . terbentuknya gas. TSIA :perubahan warna media menjadi kuning.Aeromonas hydrophila : + .Alcaligenes denitrificans : .Pseudomonas aeruginosa : + .Alcaligenes denitrificans : + .Aeromonas hydrophila :  Indool : terbentuknya cincin di bagian lapisan atas biakan .Pseudomonas aeruginosa : .Aeromonas hydrophila :  Motilitas : adanya bakteri di sekitar tusukan .Pseudomonas aeruginosa : .Alcaligenes denitrificans : + .Pseudomonas aeruginosa : + . dan terbentuknya H2S .

Universitas Airlangga.DAFTAR PUSTAKA Allen. Fakultas sains dan Teknologi. 2006.microbelibrary. 2012. Petunjuk praktikum Bakteriologi.php/component/resource/laboratorytest/2855-macconkey-agar-plates-protocols. London: Chapmaan & hall University and Proffesional Dinsion Ni’matuzahroh. 2005. Mary. ttp://lordbroken.et. Introoductory Microbiology. Michael. Mikrobiologi Pangan 1. Gramedia Pustaka Utama: Jakarta Gross. Dasar-Dasar Mikrobiologi.. Media Uji Pemecahan Komponen Makanan oleh Mikroorganisme. Anonimous. MacConkey Agar Plates Protocols.E. 1995. 1992. Diakses 11 April 2011 pukul 11:57 Dwidjoseputro. J. 1986. 1978. Sumber : http://www.org/index. S. Diakses pada tanggal 11 April 2012 pukul 10:40. Trevor dkk.al.wordpress. Jakarta. Jakarta: Djambatan Fardiaz. . Dasar-Dasar Mikrobiologi.com/2010/07/27/media-uji-pemecahan-komponenmakanan-oleh-mikroorganisme/. Universitas Airlangga: Surabaya Pelczar.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful