LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA

Dosen Asistensi : Drs. Agus Supriyanto, M. Kes

Disusun oleh : 1. Nur Afidatul Maulidiyah 2. Ratih Kuspriyadani 3. Evi Kustiningtyas 4. Virna Dwi Risnawanti (080914016) (080914023) (080914031) (080914034)

DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS AIRLANGGA 2012

. dan Erdwardsiella. anaerob fakultatif. Di alam. Enterobacter. - TUJUAN Mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactose dalam media selektif dan diferensial Mendeskripsikan karakteristik fisiologis bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactosa II. Bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dikelompokkan menjadi dua yaitu bakteri enteric yang dapat memfermentasi laktosa (fermented lactose) dan tidak dapat memfermentasi laktosa (non fermented lactose). Proteus. bakteri Salmonella. Bakteri ini menyerupai Escherichia. gejala penyakit yang ditimbulkan oleh bakteri Shigella dikenal dengan nama Shigellosis atau disentri basiler. Misalnya. Kelompok bakteri ini dapat ditemukan pada usus manusia dan usus mamalia lain dan dikelompokkan dalam familia Enterobacteriaceae.PRAKTIKUM 4 KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA I. Sedangkan yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented lactose diantaranya yaitu Salmonella. Yersinia. Genus-genus bakteri yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented yaitu Eschericia coli. dan Klebsiella. bentuk batang. dan memiliki flagel peritrikus. Shigella tidak menyebar ke tempat lainnya lagi (usus) dan penyakit yang ditimbulkan adanya pendarahan kecil menyebabkan tinja berdarah dan berlendir. perbedaannya hanya karena Shigella bersifat non motil. DASAR TEORI Identifikasi bakteri enteric merupakan hal penting untuk mengontrol adanya infeksi usus yang disebabkan oleh adanya kontaminasi pada makanan dan minuman. merupakan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi pada saluran pencernaan. Citrobacter. Bila masuk dalam tubuh akan menimbulkan gejala yang disebut Salmonellosis. Berbeda dengan Salmonella. Berbeda dengan Salmonella. Bakteri dari genus Salmonella termasuk bakteri Gram negative. Shigella. masing-masing genus bakteri dari kelompok Enterobacteriaceae memiliki peran yang beranekaragam.

Kapas 4.Pengamatan karakteristik dari masing-masing bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dilakukan dengan menumbuhkan bakteri pada berbagai media selektif dan diferensial serta menguji aktivitas biokimia dari masing-masing spesies. Tabung reaksi 3. Mac Conkey agar 2. Reagen Kovac . Media VP (Voges-Proskaeur) broth 6. III. Reagen KOH 10% 3. Media Simmons Citrat Agar 3. Media TSIA (Triple Sugar Iron Agar) 4. Media MR (Methyl Red) broth 5. Reagen Naftol 4. Bakteri Pseudomonas aeruginosa 3. Bakteri Aeromonas hydrophila Media : 1. Bakteri Alcaligenes denitrificans 2. Larutan H2O2 (Hydrogen Peroxida) 2. Cawan petri 2. Jarum ose  Bahan Biakan bakteri : 1. ALAT DAN BAHAN  Alat 1. Media SIM (Semi Solid Indol Motility) Agar Bahan Kimia : 1. Bunsen 6. Aluminium foil 5.

2. Mengamati karakteristik koloni masing-masing bakteri tersebut 3. 7.IV. Melakukan inokulasi secara aseptic dan menginkubasinya selama 24 jam 6. V. 5. Mendeskripsikan karakteristik koloni bakteri yang tumbuh. PROSEDUR KERJA 1.1 Data Gambar Bakteri Non Fermented Lactose dengan berbagai Uji Fisiologis No 1 Alcaligenes denitrificans Pseudomonas aeruginosa Aeromonas hydrophila Media Mac Conkey 2 Media Mac Conkey Media Mac Conkey . Menumbuhkan bakteri yang digunakan untuk praktikum ini pada media SSA dan Mac Conkey Agar. Mencatat hasil uji fisiologis dari masing-masing genus bakteri dan memasukkan datanya pada tabel hasil pengamatan. Melakukan uji fisiologis dari masing-masing bakteri pada media uji yang sudah disiapkan di tabung reaksi dengan menumbuhkan bakteri menggunakan bantuan ose. 4. HASIL PENGAMATAN Tabel 1. Merangkum hasil pengamatan dengan baik untuk dapat menyimpulkan perbedaan yang jelas tentang karakteristik bakteri enteropatogenik non fermented lactosa.

2 Data Karakteristik Makroskopis Bakteri Non Fermented Lacotose pada Media Mac Conkey dan SSA. Aeromonas hydrophila. Citrat. SIM Penambahan reagen Nafthol : (Kiri-kanan : Alcaligenes denitrificans. Citrat. SIM kiri-kanan : TSIA. Citrat. Pseudomonas aeruginosa) Tabel 1. No Media Karakteristik Pigmentasi 1 Mc Conkey 2 SSA Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Pigmentasi Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Alcaligenes Pseudomonas Aeromonas denitrificans aeruginosa hydrophila Merah Merah muda Coklat muda muda Serrate Lobate Rata Large Large Large Flat Flat Flat Circular Circular Circular Coklat muda Entire Moderate Flat Circular Keterangan : (-) : Bakteri tidak tumubuh dalam media selektif.Bakteri sebelum inkubasi 3 Bakteri sebelum inkubasi Bakteri sebelum inkubasi kiri-kanan : TSIA. . SIM 4 kiri-kanan : TSIA.

Pseudomonas aeruginosa. Bakteri yang digunakan pada praktikum kali ini tidak bukan dari family Enterobacteriaceae namun bakteri dari kelompok lain. Ketiga bakteri yang digunakan adalah Alcaligenes denitrificans. juga terdapat genus laiinya seperti Pseudomonas. Beberpa genus bakteri dari familia Enterobacteriaceae yaitu Salmonella. Alcaligenes serta Aeromonas. Proteus. Pada landasan teori diketahui bahwa bakteri non fermented lactose merupakan kelompok bakteri yang tidak menggunakan laktosa sebagai sumber karbonnya.Tabel 1. PEMBAHASAN Pada praktikum kali ini bertujuan untuk mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan dan fisiologi bakteri non fermented lactose. Shigella. . dan Aeromonas hydrophila. Namun. Yersinia dan Edwardsiella merupakan bakteri yang tidak dapat memfermentesi laktosa atau disebut juga non fermented lactose bacteria. bakteri ini akan mengubah peptode menjadi amoniak yang kemudian menaikkan pH pada Mac Conkey agar. Selain genus dari familia Enterobacteriaceae.3 Data Pengamatan Uji Fisiologis Bakteri Non Fermented Lactose No Uji Karakteristik Fisiologis Katalase Gelembung gas Deep Slant Gas Motilitas bakteri Motilitas Cincin Perubahan warna media Alcaligenes denitrificans ++ + + Coklat kehijauan + Bakteri Pseudomonas aeruginosa +++ + Coklat + Aeromonas hydrophila + + Coklat kehijauan + 1 2 TSIA 3 Motilitas 4 5 Indol Citrat Keterangan : (+++) : Gelembung gas yang dihasilkan lebih tinggi dibandingkan (++) dan (+) VI.

berukuran large. dengan elevasi flat. Selain itu juga dilihat kemampuan bakteri tersebut untuk menggunakan senyawa tertentu sebagai sumber karbon dan sumber energi. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. namun hanya tumbuh subur pada Mac Conkey Agar. motil. Hal ini disebabkan bakteri Aeromonas hydrophila hanya dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar. Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda. Sedangkan bakteri Aeromonas hydrophila merupakan suatu bakteri berbentuk batang.Bakteri Pseudomonas aeruginosa mempunyai karakteristik berbentuk batang. Pada praktikum kali ini juga dilakukan uji biokimia atau sering disebut dengan uji fisiologis bakteri. dengan elevasi flat. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. berukuran large. Kebanyakan bakteri memproduksi enzim katalase yang dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan . Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. motil/bergerak dengan flagella polar. Dari hasil pengamatan diketahui karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan . dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil positif yang ditunjukkan dengan terbentuknya gas ketika ditetesi dengan cairan H2O2 (hidrogen peroksida) . dengan elevasi flat. Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . berukuran large. yang pada umumnya terdapat pada perairan. Uji katalase digunakan untuk mengetahui aktivitas enzim katalase pada bakteri yang diuji. Bakteri Alcaligenes denitrificans adalah bakteri berbentuk batang gram negatif. Dalam uji fisiologis bakteri ini dilihat dari interaksi metabolit-metabolit yang dihasilkan oleh sel bakteri dengan reagen-reagen kimia. Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. dengan elevasi flat. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. gram negatif dan termasuk bakteri aerob. dan termasuk bakteri aerob obligat. Pseudomonas aeruginosa. gram negatif. berukuran large. berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. Pada uji katalase diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. Hal ini disebabkan bakteri Alkaligenes denitrificans dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar dan SSA.

Uji motilitas pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar. Pseudomonas aeruginosa. Artinya bakteri ini membentuk indol dari tryptopan sebagai sumber carbon. yang bersifat gram negatif dan memfermentasikan glukosa membentuk asam sehingga dapat dibedakan dengan bakteri gram negatif intestinal lain. sedangkan negatif untuk bakteri Aeromonas hydrophila. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila. yang dapat diketahui dengan menambahkan larutan kovacs. Konsentrasi ini akan berpengaruh terhadap penggunaan karbohidrat dan keadaan asam yang terbentuk. sedangkan gerak pasif disebabkan karena faktor dari luar. Motilitas bakteri adalah suatu gerakan bakteri yang disebabkan adanya gerak aktif dan pasif. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil negatif (lebih berwarna merah) pada daerah deep dan slant. . media TSIA mengandung laktosa dan sukrosa dengan konsentrasi 1%. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans. Indikator pH (Phenol Red) ditambahkan untuk menunjukkan adanya perubahan pH akibat fermentasi karbohidrat. Gerak aktif adalah gerakan bakteri yang disebabkan karena bakteri memiliki flagel. Untuk mengamati fermentasi karbohidrat. Enzim katalase diduga penting untuk pertumbuhan aerobik karena H2O2 yang dibentuk dengan pertolongan berbagai enzim pernafasan bersifat racun terhadap sel mikroba. Pada uji TSIA diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans.1%.O2. dan mengandung glukosa dengan konsentrasi yang lebih rendah yaitu 0. Hal ini menandakan bahwa bakteri ini tidak memfermentasi laktosa dan sukrosa. sehingga asam amino ini dengan mudah dapat digunakan oleh mikroorganisme akibat penguraian protein. Asam amino triptofan merupakan komponen asam amino yang lazim terdapat pada protein. Warna media mula-mula adalah merah-orange yang kemudian berubah lebih kemerahan disebabkan karena media menjadi basa. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans dan Pseudomonas aeruginosa. serta tidak terbentuk gas. Indikasi positif diperoleh karena terbentuknya lapisan (cincin) berwarna merah pada permukaan biakan. TSIA adalah uji yang dirancang untuk membedakan beberapa jenis bakteri yang termasuk kelompok Enterobacteriaceae. Uji indol pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar yang kemudian ditetesi dengan reagen kovac setelah inkubasi.

VII. dengan elevasi flat.  Karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan . berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. berukuran large.Aeromonas hydrophila : + . dengan elevasi flat. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. Hasil uji menunjukkan indikasi positif ada bakteri Alcaligenes denitrificans. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. Artinya bakteri ini tersebut mempunyai enzim sitrat permiase yaitu suatu enzim spesifik yang membawa sitrat ke dalam sel. elevasi. berukuran large. berukuran large.  Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda.Alcaligenes denitrificans : + . dengan elevasi flat. berukuran large.  Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . Indikasi positif diperoleh karena terjadinya perubahan warna media yang semula hijau menjadi kebiruan. dengan elevasi flat. dan tepian. pigmentasi. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila.Pseudomonas aeruginosa : + .  Uji positif yang ditunjukkan pada karakteristik fisiologis bakteri non-fermented lactose adalah:  Katalase : terdapatnya gas . KESIMPULAN  Karakteristik pertumbuhan bakteri non-fermented lactose pada media selektif dan diferensial dapat dilihat berdasarkan ukuran. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila.Uji sitrat pada praktikum ini menggunakan media Simmons Citrat Agar. bentuk.

 TSIA :perubahan warna media menjadi kuning.Alcaligenes denitrificans : + .Alcaligenes denitrificans : .Aeromonas hydrophila :  Motilitas : adanya bakteri di sekitar tusukan . terbentuknya gas.Pseudomonas aeruginosa : .Pseudomonas aeruginosa : + .Alcaligenes denitrificans : + . dan terbentuknya H2S .Alcaligenes denitrificans : + .Aeromonas hydrophila :  Indool : terbentuknya cincin di bagian lapisan atas biakan .Aeromonas hydrophila : +  Uji Sitrat : terdapatnya sitrat ditandai dengan perubahan warna biru pada media .Aeromonas hydrophila : + .Pseudomonas aeruginosa : + .Pseudomonas aeruginosa : .

Dasar-Dasar Mikrobiologi.E. 1992.DAFTAR PUSTAKA Allen. 2012. Jakarta. Anonimous. Fakultas sains dan Teknologi. 1986. Universitas Airlangga.com/2010/07/27/media-uji-pemecahan-komponenmakanan-oleh-mikroorganisme/. 1995.et. 1978. Petunjuk praktikum Bakteriologi. J. Diakses pada tanggal 11 April 2012 pukul 10:40. London: Chapmaan & hall University and Proffesional Dinsion Ni’matuzahroh. Diakses 11 April 2011 pukul 11:57 Dwidjoseputro. Mikrobiologi Pangan 1. Media Uji Pemecahan Komponen Makanan oleh Mikroorganisme. Trevor dkk.php/component/resource/laboratorytest/2855-macconkey-agar-plates-protocols. Gramedia Pustaka Utama: Jakarta Gross.. ttp://lordbroken.microbelibrary.al. Dasar-Dasar Mikrobiologi. MacConkey Agar Plates Protocols. . Universitas Airlangga: Surabaya Pelczar. 2005. Mary. Michael. Sumber : http://www.wordpress. Jakarta: Djambatan Fardiaz. 2006. S.org/index. Introoductory Microbiology.