LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA

Dosen Asistensi : Drs. Agus Supriyanto, M. Kes

Disusun oleh : 1. Nur Afidatul Maulidiyah 2. Ratih Kuspriyadani 3. Evi Kustiningtyas 4. Virna Dwi Risnawanti (080914016) (080914023) (080914031) (080914034)

DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS AIRLANGGA 2012

dan memiliki flagel peritrikus. gejala penyakit yang ditimbulkan oleh bakteri Shigella dikenal dengan nama Shigellosis atau disentri basiler. Shigella. Di alam. Yersinia. Berbeda dengan Salmonella. Enterobacter. Citrobacter. dan Klebsiella. perbedaannya hanya karena Shigella bersifat non motil. Bakteri ini menyerupai Escherichia. Berbeda dengan Salmonella. Proteus. bentuk batang. Misalnya.PRAKTIKUM 4 KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA I. DASAR TEORI Identifikasi bakteri enteric merupakan hal penting untuk mengontrol adanya infeksi usus yang disebabkan oleh adanya kontaminasi pada makanan dan minuman. Sedangkan yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented lactose diantaranya yaitu Salmonella. - TUJUAN Mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactose dalam media selektif dan diferensial Mendeskripsikan karakteristik fisiologis bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactosa II. masing-masing genus bakteri dari kelompok Enterobacteriaceae memiliki peran yang beranekaragam. Bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dikelompokkan menjadi dua yaitu bakteri enteric yang dapat memfermentasi laktosa (fermented lactose) dan tidak dapat memfermentasi laktosa (non fermented lactose). dan Erdwardsiella. anaerob fakultatif. bakteri Salmonella. Shigella tidak menyebar ke tempat lainnya lagi (usus) dan penyakit yang ditimbulkan adanya pendarahan kecil menyebabkan tinja berdarah dan berlendir. . Kelompok bakteri ini dapat ditemukan pada usus manusia dan usus mamalia lain dan dikelompokkan dalam familia Enterobacteriaceae. Bakteri dari genus Salmonella termasuk bakteri Gram negative. merupakan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi pada saluran pencernaan. Bila masuk dalam tubuh akan menimbulkan gejala yang disebut Salmonellosis. Genus-genus bakteri yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented yaitu Eschericia coli.

III. Bakteri Alcaligenes denitrificans 2. Kapas 4. Aluminium foil 5. Reagen Kovac . Cawan petri 2. Bakteri Pseudomonas aeruginosa 3. Bunsen 6. Bakteri Aeromonas hydrophila Media : 1. Media VP (Voges-Proskaeur) broth 6. Media TSIA (Triple Sugar Iron Agar) 4. Mac Conkey agar 2. Tabung reaksi 3. Media Simmons Citrat Agar 3. Media MR (Methyl Red) broth 5. Media SIM (Semi Solid Indol Motility) Agar Bahan Kimia : 1. Larutan H2O2 (Hydrogen Peroxida) 2. Reagen KOH 10% 3.Pengamatan karakteristik dari masing-masing bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dilakukan dengan menumbuhkan bakteri pada berbagai media selektif dan diferensial serta menguji aktivitas biokimia dari masing-masing spesies. ALAT DAN BAHAN  Alat 1. Jarum ose  Bahan Biakan bakteri : 1. Reagen Naftol 4.

PROSEDUR KERJA 1. 2.IV. Mencatat hasil uji fisiologis dari masing-masing genus bakteri dan memasukkan datanya pada tabel hasil pengamatan. Melakukan inokulasi secara aseptic dan menginkubasinya selama 24 jam 6. 4. Merangkum hasil pengamatan dengan baik untuk dapat menyimpulkan perbedaan yang jelas tentang karakteristik bakteri enteropatogenik non fermented lactosa. Menumbuhkan bakteri yang digunakan untuk praktikum ini pada media SSA dan Mac Conkey Agar. 7. Mendeskripsikan karakteristik koloni bakteri yang tumbuh.1 Data Gambar Bakteri Non Fermented Lactose dengan berbagai Uji Fisiologis No 1 Alcaligenes denitrificans Pseudomonas aeruginosa Aeromonas hydrophila Media Mac Conkey 2 Media Mac Conkey Media Mac Conkey . HASIL PENGAMATAN Tabel 1. 5. Melakukan uji fisiologis dari masing-masing bakteri pada media uji yang sudah disiapkan di tabung reaksi dengan menumbuhkan bakteri menggunakan bantuan ose. V. Mengamati karakteristik koloni masing-masing bakteri tersebut 3.

SIM Penambahan reagen Nafthol : (Kiri-kanan : Alcaligenes denitrificans. Pseudomonas aeruginosa) Tabel 1. SIM kiri-kanan : TSIA. Citrat. Citrat.2 Data Karakteristik Makroskopis Bakteri Non Fermented Lacotose pada Media Mac Conkey dan SSA. No Media Karakteristik Pigmentasi 1 Mc Conkey 2 SSA Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Pigmentasi Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Alcaligenes Pseudomonas Aeromonas denitrificans aeruginosa hydrophila Merah Merah muda Coklat muda muda Serrate Lobate Rata Large Large Large Flat Flat Flat Circular Circular Circular Coklat muda Entire Moderate Flat Circular Keterangan : (-) : Bakteri tidak tumubuh dalam media selektif. .Bakteri sebelum inkubasi 3 Bakteri sebelum inkubasi Bakteri sebelum inkubasi kiri-kanan : TSIA. SIM 4 kiri-kanan : TSIA. Aeromonas hydrophila. Citrat.

juga terdapat genus laiinya seperti Pseudomonas.3 Data Pengamatan Uji Fisiologis Bakteri Non Fermented Lactose No Uji Karakteristik Fisiologis Katalase Gelembung gas Deep Slant Gas Motilitas bakteri Motilitas Cincin Perubahan warna media Alcaligenes denitrificans ++ + + Coklat kehijauan + Bakteri Pseudomonas aeruginosa +++ + Coklat + Aeromonas hydrophila + + Coklat kehijauan + 1 2 TSIA 3 Motilitas 4 5 Indol Citrat Keterangan : (+++) : Gelembung gas yang dihasilkan lebih tinggi dibandingkan (++) dan (+) VI. PEMBAHASAN Pada praktikum kali ini bertujuan untuk mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan dan fisiologi bakteri non fermented lactose. Namun. Proteus. bakteri ini akan mengubah peptode menjadi amoniak yang kemudian menaikkan pH pada Mac Conkey agar. Alcaligenes serta Aeromonas.Tabel 1. Beberpa genus bakteri dari familia Enterobacteriaceae yaitu Salmonella. Yersinia dan Edwardsiella merupakan bakteri yang tidak dapat memfermentesi laktosa atau disebut juga non fermented lactose bacteria. Pseudomonas aeruginosa. . Pada landasan teori diketahui bahwa bakteri non fermented lactose merupakan kelompok bakteri yang tidak menggunakan laktosa sebagai sumber karbonnya. dan Aeromonas hydrophila. Ketiga bakteri yang digunakan adalah Alcaligenes denitrificans. Bakteri yang digunakan pada praktikum kali ini tidak bukan dari family Enterobacteriaceae namun bakteri dari kelompok lain. Shigella. Selain genus dari familia Enterobacteriaceae.

Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . dengan elevasi flat. Uji katalase digunakan untuk mengetahui aktivitas enzim katalase pada bakteri yang diuji. gram negatif. Pseudomonas aeruginosa. dengan elevasi flat. Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . dan termasuk bakteri aerob obligat. Hal ini disebabkan bakteri Aeromonas hydrophila hanya dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar. Dalam uji fisiologis bakteri ini dilihat dari interaksi metabolit-metabolit yang dihasilkan oleh sel bakteri dengan reagen-reagen kimia. dengan elevasi flat. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. berukuran large. Pada praktikum kali ini juga dilakukan uji biokimia atau sering disebut dengan uji fisiologis bakteri. berukuran large. Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda. dengan elevasi flat. Pada uji katalase diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil positif yang ditunjukkan dengan terbentuknya gas ketika ditetesi dengan cairan H2O2 (hidrogen peroksida) . gram negatif dan termasuk bakteri aerob. Sedangkan bakteri Aeromonas hydrophila merupakan suatu bakteri berbentuk batang. yang pada umumnya terdapat pada perairan. Bakteri Alcaligenes denitrificans adalah bakteri berbentuk batang gram negatif.Bakteri Pseudomonas aeruginosa mempunyai karakteristik berbentuk batang. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. motil/bergerak dengan flagella polar. berukuran large. Hal ini disebabkan bakteri Alkaligenes denitrificans dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar dan SSA. Kebanyakan bakteri memproduksi enzim katalase yang dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan . Selain itu juga dilihat kemampuan bakteri tersebut untuk menggunakan senyawa tertentu sebagai sumber karbon dan sumber energi. motil. berukuran large. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. namun hanya tumbuh subur pada Mac Conkey Agar. berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. Dari hasil pengamatan diketahui karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan . berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate.

1%. Motilitas bakteri adalah suatu gerakan bakteri yang disebabkan adanya gerak aktif dan pasif. . Artinya bakteri ini membentuk indol dari tryptopan sebagai sumber carbon. Pseudomonas aeruginosa. Konsentrasi ini akan berpengaruh terhadap penggunaan karbohidrat dan keadaan asam yang terbentuk. sedangkan gerak pasif disebabkan karena faktor dari luar. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans. Enzim katalase diduga penting untuk pertumbuhan aerobik karena H2O2 yang dibentuk dengan pertolongan berbagai enzim pernafasan bersifat racun terhadap sel mikroba. sehingga asam amino ini dengan mudah dapat digunakan oleh mikroorganisme akibat penguraian protein. TSIA adalah uji yang dirancang untuk membedakan beberapa jenis bakteri yang termasuk kelompok Enterobacteriaceae. dan mengandung glukosa dengan konsentrasi yang lebih rendah yaitu 0. Uji motilitas pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans dan Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila.O2. yang bersifat gram negatif dan memfermentasikan glukosa membentuk asam sehingga dapat dibedakan dengan bakteri gram negatif intestinal lain. Gerak aktif adalah gerakan bakteri yang disebabkan karena bakteri memiliki flagel. sedangkan negatif untuk bakteri Aeromonas hydrophila. Indikator pH (Phenol Red) ditambahkan untuk menunjukkan adanya perubahan pH akibat fermentasi karbohidrat. Indikasi positif diperoleh karena terbentuknya lapisan (cincin) berwarna merah pada permukaan biakan. serta tidak terbentuk gas. Hal ini menandakan bahwa bakteri ini tidak memfermentasi laktosa dan sukrosa. Untuk mengamati fermentasi karbohidrat. Warna media mula-mula adalah merah-orange yang kemudian berubah lebih kemerahan disebabkan karena media menjadi basa. yang dapat diketahui dengan menambahkan larutan kovacs. Asam amino triptofan merupakan komponen asam amino yang lazim terdapat pada protein. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil negatif (lebih berwarna merah) pada daerah deep dan slant. Pada uji TSIA diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. media TSIA mengandung laktosa dan sukrosa dengan konsentrasi 1%. Uji indol pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar yang kemudian ditetesi dengan reagen kovac setelah inkubasi.

berukuran large. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. dengan elevasi flat. Artinya bakteri ini tersebut mempunyai enzim sitrat permiase yaitu suatu enzim spesifik yang membawa sitrat ke dalam sel. pigmentasi. berukuran large.  Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda. bentuk. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. dengan elevasi flat. berukuran large. elevasi. VII.Aeromonas hydrophila : + .  Karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan .  Uji positif yang ditunjukkan pada karakteristik fisiologis bakteri non-fermented lactose adalah:  Katalase : terdapatnya gas . Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. berukuran large. berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. Hasil uji menunjukkan indikasi positif ada bakteri Alcaligenes denitrificans. dengan elevasi flat. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate.Uji sitrat pada praktikum ini menggunakan media Simmons Citrat Agar. Indikasi positif diperoleh karena terjadinya perubahan warna media yang semula hijau menjadi kebiruan. dengan elevasi flat. KESIMPULAN  Karakteristik pertumbuhan bakteri non-fermented lactose pada media selektif dan diferensial dapat dilihat berdasarkan ukuran.Alcaligenes denitrificans : + .Pseudomonas aeruginosa : + .  Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . dan tepian. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila.

Aeromonas hydrophila :  Indool : terbentuknya cincin di bagian lapisan atas biakan .Pseudomonas aeruginosa : .Alcaligenes denitrificans : .Pseudomonas aeruginosa : + .Aeromonas hydrophila : +  Uji Sitrat : terdapatnya sitrat ditandai dengan perubahan warna biru pada media .Aeromonas hydrophila : + .Alcaligenes denitrificans : + .Aeromonas hydrophila :  Motilitas : adanya bakteri di sekitar tusukan . dan terbentuknya H2S .Pseudomonas aeruginosa : + .Alcaligenes denitrificans : + . TSIA :perubahan warna media menjadi kuning.Alcaligenes denitrificans : + . terbentuknya gas.Pseudomonas aeruginosa : .

J.DAFTAR PUSTAKA Allen. Gramedia Pustaka Utama: Jakarta Gross. Jakarta: Djambatan Fardiaz. 1995. S.. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. 1992. Fakultas sains dan Teknologi. Introoductory Microbiology. Diakses 11 April 2011 pukul 11:57 Dwidjoseputro.microbelibrary. Mary.com/2010/07/27/media-uji-pemecahan-komponenmakanan-oleh-mikroorganisme/. Mikrobiologi Pangan 1. Media Uji Pemecahan Komponen Makanan oleh Mikroorganisme.wordpress. London: Chapmaan & hall University and Proffesional Dinsion Ni’matuzahroh. 1978. 2012. 2006. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Sumber : http://www. Diakses pada tanggal 11 April 2012 pukul 10:40. Jakarta.org/index.php/component/resource/laboratorytest/2855-macconkey-agar-plates-protocols. Universitas Airlangga. MacConkey Agar Plates Protocols. Trevor dkk.al. Petunjuk praktikum Bakteriologi. . Anonimous. Universitas Airlangga: Surabaya Pelczar.E. Michael. ttp://lordbroken.et.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful