LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA

Dosen Asistensi : Drs. Agus Supriyanto, M. Kes

Disusun oleh : 1. Nur Afidatul Maulidiyah 2. Ratih Kuspriyadani 3. Evi Kustiningtyas 4. Virna Dwi Risnawanti (080914016) (080914023) (080914031) (080914034)

DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS AIRLANGGA 2012

Berbeda dengan Salmonella. Bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dikelompokkan menjadi dua yaitu bakteri enteric yang dapat memfermentasi laktosa (fermented lactose) dan tidak dapat memfermentasi laktosa (non fermented lactose). dan Erdwardsiella. bentuk batang. masing-masing genus bakteri dari kelompok Enterobacteriaceae memiliki peran yang beranekaragam. Misalnya. Di alam. dan Klebsiella. Shigella tidak menyebar ke tempat lainnya lagi (usus) dan penyakit yang ditimbulkan adanya pendarahan kecil menyebabkan tinja berdarah dan berlendir. Enterobacter. Bila masuk dalam tubuh akan menimbulkan gejala yang disebut Salmonellosis. Citrobacter.PRAKTIKUM 4 KARAKTERISASI BAKTERI NON FERMENTED LACTOSA I. perbedaannya hanya karena Shigella bersifat non motil. - TUJUAN Mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactose dalam media selektif dan diferensial Mendeskripsikan karakteristik fisiologis bakteri dari family Enterobacteriaceae non fermented lactosa II. Genus-genus bakteri yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented yaitu Eschericia coli. Berbeda dengan Salmonella. Bakteri dari genus Salmonella termasuk bakteri Gram negative. bakteri Salmonella. Sedangkan yang tergolong dalam kelompok Enterobacteriaceae non fermented lactose diantaranya yaitu Salmonella. Yersinia. . DASAR TEORI Identifikasi bakteri enteric merupakan hal penting untuk mengontrol adanya infeksi usus yang disebabkan oleh adanya kontaminasi pada makanan dan minuman. Bakteri ini menyerupai Escherichia. Shigella. anaerob fakultatif. merupakan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi pada saluran pencernaan. Proteus. Kelompok bakteri ini dapat ditemukan pada usus manusia dan usus mamalia lain dan dikelompokkan dalam familia Enterobacteriaceae. gejala penyakit yang ditimbulkan oleh bakteri Shigella dikenal dengan nama Shigellosis atau disentri basiler. dan memiliki flagel peritrikus.

Reagen Kovac . Tabung reaksi 3. Mac Conkey agar 2. Bunsen 6. Cawan petri 2. Media SIM (Semi Solid Indol Motility) Agar Bahan Kimia : 1. Aluminium foil 5. Media Simmons Citrat Agar 3. Reagen KOH 10% 3. ALAT DAN BAHAN  Alat 1. III. Media VP (Voges-Proskaeur) broth 6. Bakteri Pseudomonas aeruginosa 3. Jarum ose  Bahan Biakan bakteri : 1. Media MR (Methyl Red) broth 5. Bakteri Alcaligenes denitrificans 2. Kapas 4.Pengamatan karakteristik dari masing-masing bakteri dari kelompok Enterobakteriaceae dapat dilakukan dengan menumbuhkan bakteri pada berbagai media selektif dan diferensial serta menguji aktivitas biokimia dari masing-masing spesies. Reagen Naftol 4. Media TSIA (Triple Sugar Iron Agar) 4. Bakteri Aeromonas hydrophila Media : 1. Larutan H2O2 (Hydrogen Peroxida) 2.

1 Data Gambar Bakteri Non Fermented Lactose dengan berbagai Uji Fisiologis No 1 Alcaligenes denitrificans Pseudomonas aeruginosa Aeromonas hydrophila Media Mac Conkey 2 Media Mac Conkey Media Mac Conkey . V. Mencatat hasil uji fisiologis dari masing-masing genus bakteri dan memasukkan datanya pada tabel hasil pengamatan. Mendeskripsikan karakteristik koloni bakteri yang tumbuh. Menumbuhkan bakteri yang digunakan untuk praktikum ini pada media SSA dan Mac Conkey Agar. 4. Melakukan inokulasi secara aseptic dan menginkubasinya selama 24 jam 6. 2. Mengamati karakteristik koloni masing-masing bakteri tersebut 3. 5. Melakukan uji fisiologis dari masing-masing bakteri pada media uji yang sudah disiapkan di tabung reaksi dengan menumbuhkan bakteri menggunakan bantuan ose. PROSEDUR KERJA 1. Merangkum hasil pengamatan dengan baik untuk dapat menyimpulkan perbedaan yang jelas tentang karakteristik bakteri enteropatogenik non fermented lactosa. HASIL PENGAMATAN Tabel 1. 7.IV.

Citrat. Citrat. Aeromonas hydrophila.2 Data Karakteristik Makroskopis Bakteri Non Fermented Lacotose pada Media Mac Conkey dan SSA. Citrat. Pseudomonas aeruginosa) Tabel 1. SIM Penambahan reagen Nafthol : (Kiri-kanan : Alcaligenes denitrificans. .Bakteri sebelum inkubasi 3 Bakteri sebelum inkubasi Bakteri sebelum inkubasi kiri-kanan : TSIA. No Media Karakteristik Pigmentasi 1 Mc Conkey 2 SSA Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Pigmentasi Tepi Ukuran Elevasi Bentuk Alcaligenes Pseudomonas Aeromonas denitrificans aeruginosa hydrophila Merah Merah muda Coklat muda muda Serrate Lobate Rata Large Large Large Flat Flat Flat Circular Circular Circular Coklat muda Entire Moderate Flat Circular Keterangan : (-) : Bakteri tidak tumubuh dalam media selektif. SIM kiri-kanan : TSIA. SIM 4 kiri-kanan : TSIA.

Tabel 1. Yersinia dan Edwardsiella merupakan bakteri yang tidak dapat memfermentesi laktosa atau disebut juga non fermented lactose bacteria. Beberpa genus bakteri dari familia Enterobacteriaceae yaitu Salmonella. Namun. dan Aeromonas hydrophila. Bakteri yang digunakan pada praktikum kali ini tidak bukan dari family Enterobacteriaceae namun bakteri dari kelompok lain. Shigella. . Selain genus dari familia Enterobacteriaceae. Proteus. PEMBAHASAN Pada praktikum kali ini bertujuan untuk mendeskripsikan karakteristik pertumbuhan dan fisiologi bakteri non fermented lactose. Ketiga bakteri yang digunakan adalah Alcaligenes denitrificans. juga terdapat genus laiinya seperti Pseudomonas. Pseudomonas aeruginosa. bakteri ini akan mengubah peptode menjadi amoniak yang kemudian menaikkan pH pada Mac Conkey agar. Pada landasan teori diketahui bahwa bakteri non fermented lactose merupakan kelompok bakteri yang tidak menggunakan laktosa sebagai sumber karbonnya. Alcaligenes serta Aeromonas.3 Data Pengamatan Uji Fisiologis Bakteri Non Fermented Lactose No Uji Karakteristik Fisiologis Katalase Gelembung gas Deep Slant Gas Motilitas bakteri Motilitas Cincin Perubahan warna media Alcaligenes denitrificans ++ + + Coklat kehijauan + Bakteri Pseudomonas aeruginosa +++ + Coklat + Aeromonas hydrophila + + Coklat kehijauan + 1 2 TSIA 3 Motilitas 4 5 Indol Citrat Keterangan : (+++) : Gelembung gas yang dihasilkan lebih tinggi dibandingkan (++) dan (+) VI.

berukuran large. Dari hasil pengamatan diketahui karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan . dengan elevasi flat. Bakteri Alcaligenes denitrificans adalah bakteri berbentuk batang gram negatif. berukuran large. berukuran large. Hal ini disebabkan bakteri Alkaligenes denitrificans dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar dan SSA. Hal ini disebabkan bakteri Aeromonas hydrophila hanya dapat tumbuh pada media Mac Conkey Agar. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil positif yang ditunjukkan dengan terbentuknya gas ketika ditetesi dengan cairan H2O2 (hidrogen peroksida) . Uji katalase digunakan untuk mengetahui aktivitas enzim katalase pada bakteri yang diuji. yang pada umumnya terdapat pada perairan. motil. motil/bergerak dengan flagella polar. Sedangkan bakteri Aeromonas hydrophila merupakan suatu bakteri berbentuk batang. dan termasuk bakteri aerob obligat. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. Pseudomonas aeruginosa. Pada praktikum kali ini juga dilakukan uji biokimia atau sering disebut dengan uji fisiologis bakteri. berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. Pada uji katalase diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink . berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. dengan elevasi flat. Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . Selain itu juga dilihat kemampuan bakteri tersebut untuk menggunakan senyawa tertentu sebagai sumber karbon dan sumber energi. dengan elevasi flat. namun hanya tumbuh subur pada Mac Conkey Agar. Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda. gram negatif dan termasuk bakteri aerob. dengan elevasi flat.Bakteri Pseudomonas aeruginosa mempunyai karakteristik berbentuk batang. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. gram negatif. berukuran large. Kebanyakan bakteri memproduksi enzim katalase yang dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan . Dalam uji fisiologis bakteri ini dilihat dari interaksi metabolit-metabolit yang dihasilkan oleh sel bakteri dengan reagen-reagen kimia.

. Uji indol pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar yang kemudian ditetesi dengan reagen kovac setelah inkubasi.O2. Uji motilitas pada praktikum ini menggunakan media SIM Agar atau semi solid indol motility agar. Hal ini menandakan bahwa bakteri ini tidak memfermentasi laktosa dan sukrosa. Enzim katalase diduga penting untuk pertumbuhan aerobik karena H2O2 yang dibentuk dengan pertolongan berbagai enzim pernafasan bersifat racun terhadap sel mikroba. Konsentrasi ini akan berpengaruh terhadap penggunaan karbohidrat dan keadaan asam yang terbentuk. yang bersifat gram negatif dan memfermentasikan glukosa membentuk asam sehingga dapat dibedakan dengan bakteri gram negatif intestinal lain. Pseudomonas aeruginosa. Untuk mengamati fermentasi karbohidrat. serta tidak terbentuk gas. Motilitas bakteri adalah suatu gerakan bakteri yang disebabkan adanya gerak aktif dan pasif. Asam amino triptofan merupakan komponen asam amino yang lazim terdapat pada protein. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans dan Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila. sedangkan gerak pasif disebabkan karena faktor dari luar. dan mengandung glukosa dengan konsentrasi yang lebih rendah yaitu 0. sedangkan negatif untuk bakteri Aeromonas hydrophila. dan Aeromonas hydrophila menunjukkan hasil negatif (lebih berwarna merah) pada daerah deep dan slant. yang dapat diketahui dengan menambahkan larutan kovacs. Gerak aktif adalah gerakan bakteri yang disebabkan karena bakteri memiliki flagel. Hasil uji menunjukkan indikasi positif pada bakteri Alcaligenes denitrificans. Indikasi positif diperoleh karena terbentuknya lapisan (cincin) berwarna merah pada permukaan biakan. Pada uji TSIA diketahui bahwa ketiga bakteri yaitu Alcaligenes denitrificans. sehingga asam amino ini dengan mudah dapat digunakan oleh mikroorganisme akibat penguraian protein. TSIA adalah uji yang dirancang untuk membedakan beberapa jenis bakteri yang termasuk kelompok Enterobacteriaceae.1%. Warna media mula-mula adalah merah-orange yang kemudian berubah lebih kemerahan disebabkan karena media menjadi basa. Artinya bakteri ini membentuk indol dari tryptopan sebagai sumber carbon. Indikator pH (Phenol Red) ditambahkan untuk menunjukkan adanya perubahan pH akibat fermentasi karbohidrat. media TSIA mengandung laktosa dan sukrosa dengan konsentrasi 1%.

Hasil uji menunjukkan indikasi positif ada bakteri Alcaligenes denitrificans. pigmentasi. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Alkaligenes denitrificans. Artinya bakteri ini tersebut mempunyai enzim sitrat permiase yaitu suatu enzim spesifik yang membawa sitrat ke dalam sel.Alcaligenes denitrificans : + . berbentuk circular dengan tepian bergerigi atau serrate. berbentuk circular dengan tepian rata atau entire. dengan elevasi flat. dengan elevasi flat. berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. berukuran large.  Karakteristik cultural bakteri Aeromonas hydrophila pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna pink .Uji sitrat pada praktikum ini menggunakan media Simmons Citrat Agar. VII.Aeromonas hydrophila : + . dengan elevasi flat. berukuran large.  Karakteristik cultural bakteri Alkaligenes denitrificans pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna krem agak kemerahan .  Uji positif yang ditunjukkan pada karakteristik fisiologis bakteri non-fermented lactose adalah:  Katalase : terdapatnya gas .Pseudomonas aeruginosa : + .  Karakteristik cultural bakteri Pseudomonas aeruginosa pada media Mac Conkey Agar adalah koloni berwarna coklat muda. dengan elevasi flat. elevasi. dan tepian. Pseudomonas aeruginosa dan Aeromonas hydrophila. bentuk. Sedangkan pada media SSA koloni berwarna coklat . berbentuk circular dengan tepian bergelombang atau lobate. berukuran large. berukuran large. KESIMPULAN  Karakteristik pertumbuhan bakteri non-fermented lactose pada media selektif dan diferensial dapat dilihat berdasarkan ukuran. Sedangkan pada media SSA tidak terdapat indikasi pertumbuhan dari koloni bakteri Aeromonas hydrophila. Indikasi positif diperoleh karena terjadinya perubahan warna media yang semula hijau menjadi kebiruan.

dan terbentuknya H2S .Pseudomonas aeruginosa : .Alcaligenes denitrificans : + . TSIA :perubahan warna media menjadi kuning.Alcaligenes denitrificans : + .Aeromonas hydrophila :  Indool : terbentuknya cincin di bagian lapisan atas biakan .Pseudomonas aeruginosa : + .Alcaligenes denitrificans : .Pseudomonas aeruginosa : + . terbentuknya gas.Alcaligenes denitrificans : + .Pseudomonas aeruginosa : .Aeromonas hydrophila :  Motilitas : adanya bakteri di sekitar tusukan .Aeromonas hydrophila : +  Uji Sitrat : terdapatnya sitrat ditandai dengan perubahan warna biru pada media .Aeromonas hydrophila : + .

com/2010/07/27/media-uji-pemecahan-komponenmakanan-oleh-mikroorganisme/. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Diakses 11 April 2011 pukul 11:57 Dwidjoseputro. . Mary. 2005. 2012. 1986. Petunjuk praktikum Bakteriologi.E. 1992. 1995. J. Jakarta: Djambatan Fardiaz. Sumber : http://www. S.php/component/resource/laboratorytest/2855-macconkey-agar-plates-protocols. Jakarta.. Anonimous.et. Media Uji Pemecahan Komponen Makanan oleh Mikroorganisme. ttp://lordbroken. Mikrobiologi Pangan 1. Universitas Airlangga: Surabaya Pelczar. Dasar-Dasar Mikrobiologi. MacConkey Agar Plates Protocols.wordpress. Introoductory Microbiology.org/index. 1978. London: Chapmaan & hall University and Proffesional Dinsion Ni’matuzahroh.DAFTAR PUSTAKA Allen. Michael. Universitas Airlangga.al.microbelibrary. Gramedia Pustaka Utama: Jakarta Gross. Fakultas sains dan Teknologi. Diakses pada tanggal 11 April 2012 pukul 10:40. Trevor dkk. 2006.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful